总胆汁酸检测ppt课件

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《肝功能检查》PPT课件_OK

血浆蛋白质
☆白蛋白是肝脏制造的主要蛋白质，半寿期长。低白蛋白血症是慢性进行性肝脏疾病的特征。（重症急性肝损伤）
☆凝血酶原反映肝脏合成功能。（半寿期短，严重肝损伤的最早指标）
☆总球蛋白作为肝脏疾病严重性的粗略估计。 ☆AFP作为肝癌指标及胚层细胞癌的标记。 ☆α1-抗胰蛋白酶及铜蓝蛋白作为肝脏专门疾病
45
ห้องสมุดไป่ตู้
天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)
【概述】非特异性细胞内功能酶，在心脏活性第
一位，肝为第二位。有线粒体AST和胞液AST两种
同工酶, 催化的反应：
天门冬氨酸
α-酮戊二酸
AST
草酰乙酸
谷氨酸
【参考值】 <45U/L (连续监测法 37℃)
【临床意义】
1．急性病毒性肝炎在发病之前AST、ALT升高，
17
【异常结果分析】 ★肝癌患者有时在白蛋白和α1球蛋白之间出现一条新区带即甲胎蛋白区带。 ★多发性骨髓瘤患者在β、γ之间或γ区可见M蛋白区带。
18
19
血氨（Blood ammonia；BA）
采静脉血2ml，肝素抗凝，隔绝空气，立即送检
正常人蛋白质代谢过程中产生的氨，90％在肝脏通过鸟
氨酸循环形成尿素从尿中排出。肝功能严重受损时，肝脏清除氨的能力下降，血氨升高，达到一定程度，可引起肝性脑病，因此肝昏迷时测定血氨有助于诊断和疗效观察。
14
前白蛋白( Prealbumin ，PA) 前白蛋白是一种肝合成载体蛋白，分子量为六万，电泳时处在白蛋白前方，半衰期为1.9天。【参考值】
0.1～0.4g/L (透射比浊法)
15
【临床意义】 1. 是一种急性时相蛋白。 2. 反映营养状态的指标。 3. 肝脏疾病时均降低，且往往早于其它

肝脏疾病常用检查PPT课件

（七）肝功能实验检查项目的选择与应用
检验肝功能的目的在于探测肝脏有无损害、查明原因、判断预后以及鉴别黄疸等。因此，肝功能试验的临床应用对于诊断、治疗、预后等方面具有重要价值。肝功能试验种类繁多，不下数百种，但是一种试验只能探查肝脏的某一种功能，没有一种试验能全面反映肝脏的一切功能。因此，为了得到比较正确的结论，应做若干种试验，必要时要反复复查。同时对肝功能试验的评价，必须结合临床表现全面考虑，避免片面性及主观性。此外，也要注意节约人为物力及财力，有的放矢地选择性做必要的肝功能试验是重要的。
尿中胆素原
增多
不定或升高
减少或消失
粪中胆素原
增多
减少
减少或消失
血清蛋白
电泳谱脂蛋白X
正常阴性
Alb减少，γ-球蛋白
升高一般阴性
球蛋白明显升高明显增高
血
谷丙转氨酶
正常，稍高
清酶
碱性磷酸酶
正常
类
γ-谷氨酰转肽酶
正常
肝炎急性期增高正常或轻度增高可增高
正常或增高明显增高明显增高
其
凝血酶原时间
参考值：
成人
40-110u/L（金-阿氏法）。
儿童
<250u/L
（五）血清酶及同工酶检查
临床意义： A）ALP分布肝、骨、肠等，主要在肝 B）ALP分布在肝细胞血窦侧和毛细胆管侧的微绒毛上，经胆汁排入小肠，当胆汁排出不畅，毛细胆管压力增加时，可诱发产生大量ALP，故胆汁淤滞时，ALP升高。 C）骨骼疾病时，骨瘤、骨折恢复期ALP也可升高
肝病预后。（2）活化部分凝血活酶时间测定（APTT）延长见于严重肝病、维生素K缺乏。
4、血氨测定

《总胆汁酸检测》课件

总胆汁酸检测的临床应用
1
肝功能损害的评估
通过总胆汁酸检测，可以评估肝脏功能是否受到损害。
2
肝胆疾病的鉴别诊断
总胆汁酸检测可以帮助医生鉴别不同的肝胆疾病，以进行准确的诊断。
3
胎儿畸形的筛查
总胆汁酸检测在孕妇中的应用，可用于筛查胎儿畸形的风险。
总胆汁酸检测的注意事项
1 检测前的准备工作
在进行总胆汁酸检测之前，需要做好相关的准备工作，以确保准确性。
2 操作中的注意事项
在进行总胆汁酸检测时，需要注意操作的细节，以避免错误。
3 检测后的处理
对于检测后的结果，需要进行妥善处理，以提供准确的诊断和治疗。
总结
总胆汁酸检测在临床中的重要性
通过总胆汁酸检测，可以对肝功能和肝胆疾病进行评估和诊断，对胎儿畸形进行筛查，起到重要的临床作用。
继续研究总胆汁酸检测的优化方法
针对总胆汁酸检测的不足，我们应该继续研究和改进检测方法，以提高准确性和临床应用价值。
《总胆汁酸检测》PPT课件
了解世界上最常见的检测之一——总胆汁酸检测。我们将带您了解总胆汁酸的基本知识、检测方法和临床应用，以及注意事项。让我们一起深入探索这一重要的诊断手段。
总胆汁酸检测简介
什么是总胆汁酸
总胆汁酸是胆汁的成分之一，在汁酸的意义
通过检测总胆汁酸水平，可以评估肝功能，鉴别诊断肝胆疾病，并进行胎儿畸形筛查。
总胆汁酸检测方法
血清总胆汁酸测定法
通过血液样本中总胆汁酸的测定，可以得出准确的检测结果。
经验法
一些经验丰富的医生可以通过观察病人的症状和体征来判断总胆汁酸的水平。
检测结果的解读
正常值范围
了解正常的总胆汁酸水平是解读检测结果的关键。

生化检验(肝功)PPT课件

ALT <42U/L(37℃) (酶速率法) AST/ALT 1.15左右
.
9
.
10
.
11
谷丙转氨酶(ALT)
检测原理 ALT+L-丙氨酸+α-酮戊二酸
丙酮酸+L-谷氨酸
丙酮酸+NADH
L-乳酸+NAD+
LDH
在340nm处检测NADH的吸收峰来推算血清中ALT的浓度
.
12
谷草转氨酶（AST）
并伴有高脂血症
.
15
3、肝硬化
取决于肝细胞坏死和肝纤维化程度
肝硬化病变累及线粒体时，多数AST升高程度可超过ALT（肝细胞中，AST80%存在于线粒体中）
4、原发性肝癌
ALT可轻度升高或正常，提示可能并发肝坏死，预后严重
5、其他疾病
AST升高如急性心肌梗死、右心
功能不全、肌营养不良、溃疡性结
.
25
附注：
应空腹采血，避免脂血引起反应液浑浊，轻度溶血对本法无影响，但是明显溶血可使测定结果偏低。血液标本和标准液应避免阳光直照，防止胆红素的光氧化。胆红素对光的敏感度与温度有关，血标本应避光置冰箱保存。标本保存冰箱可稳定3天， -70℃暗处保存可稳定3个月。
.
26
总蛋白（TP）测定
检测原理 AST +天门冬氨酸 + α-酮戊二酸
草酰乙酸+ L-谷氨酸草酰乙酸+NADH MDH L-苹果酸+ NAD+
在340nm处检测NADH的吸收峰来推算血清中AST的浓度
.
13
临床意义
1、急性病毒性肝炎 ALT、AST均升高，急性肝炎早期，AST/ALT<1 重症肝炎临终期会出现“酶胆分离”

肝功能检查ppt课件

4．球蛋白降低
主要是合成减少： ①生理性减少：小于3岁的婴幼儿 ②免疫功能抑制：长期应用肾上腺皮质激素或免疫抑制剂 ③先天性低γ球蛋白血症。
5．A／G倒置
可以是白蛋白降低或球蛋白增高。见于严重肝功能损伤及M蛋白血症，如慢性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。
①肝细胞损害：常见肝脏疾病有亚急性重症肝炎，慢性中度以上持续性肝炎、肝硬化、肝癌等。白蛋白减少常伴有γ球蛋白增加，白蛋白含量与有功能的肝细胞数量呈正比，持续下降，提示肝细胞坏死进行性加重，预后不良，治疗后白蛋白上升，提示肝细胞再生，治疗有效。
2．总蛋白及白蛋白降低 ①肝细胞损害：总蛋白<60g或白蛋白<25g／ L称为低蛋白血症。临床上常出现严重浮肿及胸、腹水。
2.血清总蛋白及白蛋白降低
②营养不良：摄入不足或消化吸收不良。 ③蛋白丢失过多：如肾病综合征，蛋白丢失性肠病，严重烧伤，急性大失血等。 ④消耗增加：结核、甲亢、恶肿瘤等。 ⑤血清水分增加：水钠潴留或静脉补充过多的晶体溶液。较少见有先天性低白蛋白血症。
3．总蛋白及球蛋白增高
总蛋白>80g／L或球蛋白>35g／L 称为高蛋白血症或高球蛋白血症。总蛋白增高主要是球蛋白增高，其中又以γ球蛋白增高为主。
第一节肝脏的基本功能
肝脏是人体内的最大腺体，基本功能有物质代谢功能，分泌、排泄、生物转化及胆红素有以下一些功能：
制造胆汁
解毒
合成凝血因子
储存糖分
合成蛋白质
维持生命
一、代谢功能
蛋白代谢：90％以上的蛋白质及全部白蛋白、多种凝血因子都是由肝细胞合成，部分球蛋白也由肝脏合成。糖代谢：肝脏能使血糖浓度保持恒定。脂类代谢：参与脂类的消化、吸收、分解、合成及运输等代谢过程。维生素及激素代谢：脂溶性维生素的吸收，激素的灭活；胆红素、铁、铜及其他金属的代谢等。

医学类课件胆汁酸类成分.pptx

豁痰、开窍、凉肝、息风、解毒之功效。许多著名中成药如安宫牛黄丸、牛黄解毒丸、牛黄清心丸、珠黄散等均含有牛黄。
2、主要化学成分牛黄含有胆红素（72％－75％）、胆汁酸（8％，主要为胆酸、去氧胆酸、石胆酸等）、胆固醇、SMC（smooth muscle contractor，肽类物质）及多种氨基酸和无机盐。其中，去氧胆酸具有松弛平滑肌的作用，是牛黄镇痉的有效成分。
2、显色剂 10％磷钼酸乙醇液、15％磷酸乙醇
液、10％硫酸乙醇液、间二硝基苯乙醇液、三氯化锌的氯仿溶液等。
（二）薄层色谱硅胶薄层色谱广泛用于动物胆汁中的胆汁酸分离和鉴定。 1、分离游离胆汁酸的展开剂有异辛烷-异戊醚冰乙酸-正丁醇-水（10:5:5:3:1）、异辛烷-乙酸乙酯-冰乙酸（17:7:5）等。
（四）高效液相色谱胆汁酸类的检识常采用反相高效液相色谱法测定。由于胆汁酸结构中缺乏共轭体系，无近紫外吸收特征，因此，用HPLC分析这类药物时，必须将胆汁酸经化学衍生，使其具有紫外吸收基团或荧光生色团，才能使用高灵敏度的紫外检测器或荧光检测器。胆汁酸可制成苯甲酰甲基酯、对氯苯甲酰甲基酯和对溴苯甲酰甲基酯等，254nm紫外光检测。近年来有研究报道，采用蒸发光散射检测器，可测定非衍生化的胆汁酸类。
不同种属的动物，其胆汁酸的组成也不同，例如牛羊胆汁中主要含有胆酸，而猪胆汁中则不含胆酸，主要是α－猪去氧胆酸和β－猪去氧胆酸。
H HH H
COOH
粪甾烷酸
三、化学性质（重点）胆汁酸的化学性质主要是指其结构中官能团的反应，主要有以下几个方面。 1．酸性游离或结合型胆汁酸均呈酸性，难溶于水，易溶于有机溶剂，与碱成盐后则可溶于水。利用此性质可以精制各种胆汁酸。 2．酯化反应将胆汁酸的末端羧基酯化后，易得到胆汁酸酯结晶，胆汁酸酯类在酸水中回流数小时，即可得到游离的胆汁酸。此性质也可用于精制各种胆汁酸。

肝胆疾病的生物化学检验-(3)PPT课件

----血浆尿素水平呈低值。 ----血氨增高。 ----支链氨基酸和芳香族氨基酸的比值下降。
.
4
（二）糖代谢异常
磷酸戊糖途径和糖酵解途径相对增强，血中丙酮酸含量可显著上升
严重肝病时糖有氧氧化及三羧酸循环运转失常血糖浓度难以维持正常水平糖耐糖曲线异常，可呈低平型、高峰型、高坡
型等异常曲线血清半乳糖浓度增高
延长，VitK不能纠正降低，尤其CHE明显降低
﹤1
.
延长，VitK可以纠正增高 ﹥1
35
（四）胆汁酸代谢及其异常
1.胆汁酸的类型
按结构分按来源分
游离胆汁酸(free bile acid)--CA,CDCA,DCA,LCA
结合胆汁酸(conjugated bile acid)--与甘氨酸或牛磺酸结合初级胆汁酸(primary bile acid)--CA,CDCA
.
6
（四）胆红素代谢紊乱
1.胆红素(bilirubin)来源与生成体内的铁卟啉化合物——血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素、过氧化氢酶及过氧化物酶。
胆红素来源
1）衰老的RBC破坏、降解
2）无效红细胞生成
3）非血红蛋白的血红素蛋白质（细胞色素、过氧化物酶、肌红蛋白等）分解
.
主流胆红素（80%）
分流胆红素（20%）
指标
正常
溶血性黄疸
血清胆红素总量结合胆红素游离胆红素
尿三胆尿胆红素尿胆素原尿胆素
粪便颜色
1mg/dl 00.8mg/dl 1mg/dl
– 少量少量正常
1mg/dl
– 深
肝细胞性黄疸阻塞性黄疸
1mg/dl
1mg/dl

检验科讲课生化ppt课件

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血脂的检测
胆固醇（TC）甘油三脂（TG）高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）低密度脂蛋白胆固醇（LDL -c）载脂蛋白ApoA I 载脂蛋白ApoB 100 脂蛋白(a) LP (a)
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多谢大家
30
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27
血糖及糖尿病诊断标准
糖尿病的诊断标准： 1.空腹血浆葡萄糖测定》7.0mmol/L。 2.任意时间血浆葡萄糖测定》11.1 mmol/L 3.口服葡萄糖耐量实验（OGTT）》11.1 mmol/L 正常人空腹血浆葡萄糖浓度的参考范围： 3.89~6.11 mmol/L 。若空腹大于8 .0mmol/L，且有临床症状可诊断为糖尿病，若小于6.0 mmol/L，则可排除糖尿病，若在6.0~7.0之间应再做检查
12
胆红素代谢的检验
胆红素来源绝大部分来自衰老死亡的红细胞，当肝细胞损伤、胆管阻塞、红细胞破坏增加或寿命缩短时，胆红素代谢发生异常，临床出现黄疸。血清胆红素分为结合与非结合胆红素，二者合称总胆红素。TBIL=DBIL+IBIL TBIL:<34为隐性黄疸， <170为轻度黄疸， <340为中度黄疸，>340为高度黄疸，完全阻塞性黄疸为340~510；不完全阻塞者为170~265，肝细胞性黄疸17~200；溶血性黄疸<85
13
三种黄疸的胆红素变化比较
正常人溶血性黄疸
DBIL 0~6.8 轻度增高
肝细胞性黄疸中度增高
阻塞性黄疸明显增高
IBIL 1.7~10.2 明显增高
中度增高
轻度增高
DBIL/TBIL >35% <20%

总胆汁酸

总胆汁酸（TBA）项目介绍：总胆汁酸(TBA)是在肝脏内合成与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸，然后被肝细胞分泌入胆汁，随胆汁至肠道后，在肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸，有97%被肠道重新吸收后回到肝脏。

如此循环不息。

这样能使总胆汁酸发挥最大生理效应。

更可防止总胆汁酸大量进入循环中对其它组织细胞的毒害（总胆汁酸的PH值非常低）。

健康人的周围血液中血清胆汁酸含量极微，当肝细胞损害或肝内、外阻塞时，胆汁酸代谢就会出现异常，总胆汁酸就会升高。

因此，总胆汁酸测定是一项比较敏感和有效的肝功能试验之一。

正常人肝脏合成的胆汁酸有胆酸（CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和代谢中产生的脱氧胆酸（DCA)还有少量石胆酸（LCA）和微量熊脱氧胆酸(UDCA)，合称总胆汁酸(TBA)。

临床意义：1、急性肝炎：急性肝炎时血清TBA显著增高，可达正常人水平的10～100倍，甚至更高，急性肝炎初愈患者血清TBA由最初的高值几乎与AST在同一时间降至正常水平，若持续不降或反而上升者则有发展为慢性的可能。

2、急性肝炎：急性肝炎时血清TBA显著增高，可达正常人水平的10～100倍，甚至更高，急性肝炎初愈患者血清TBA由最初的高值几乎与AST在同一时间降至正常水平，若持续不降或反而上升者则有发展为慢性的可能。

3、肝硬化：肝硬化时，肝脏对胆汁酸的代谢能力减低，血清TBA在肝硬化的不同阶段均增高，增高幅度一般高于慢性活动性肝炎。

即使在肝硬化晚期亦如此。

当肝病活动降至最低时，胆红素、转氨酶及碱性磷酸酶等指标转为正常，血清TBA仍维持在较高水平。

4、乙醇性肝病：乙醇性肝病血清TBA可增高，当乙醇性肝病(包括肝硬化)发生严重的肝损伤时，血清TBA明显增高，而轻、中度损伤增高不明显。

5、中毒性肝病：血清TBA测定对中毒性肝病的诊断优于常规肝功能试验。

6、胆汁淤积：血清TBA测定对胆汁淤积的诊断有较高灵敏度和特异性。

肝外胆管阻塞及肝内胆汁淤积包括急性肝炎、初期胆管性肝硬化、新生儿胆汁淤积、妊娠性胆汁淤积等均可引起TBA增高。

实验室检查肝功能PPT课件

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7、γ-谷氨酰转移酶（GGT）
【参考值】 <50U/L 血清中的GGT主要来自肝胆系统，在肝脏内广泛分布于肝细胞的毛细胆管侧和
整个胆管系统。 ① 肝内、外胆汁淤积：GGT与STB、ALP平行增高。 ② 病毒性肝炎、肝硬化：急性肝炎时GGT中等度增高；慢性肝炎、肝硬化的非
活动期GGT正常；若GGT活性持续增高，提示病变活动或病情恶化。 ③ 酒精性肝炎、药物性肝炎：GGT可呈明显增高。 ④ 脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤、前列腺肿瘤等GGT亦可轻度增高
疸进行性加深出现“胆酶分离”现象，提示肝细胞严重坏死。
② 慢性病毒性肝炎：ALT、AST轻度增高或正常，ALT/AST>1，如AST增高较ALT显著，提示慢性肝炎进入活动
期可能。பைடு நூலகம்
③ 酒精性肝病、药物性肝炎、脂肪肝、肝癌等非病毒性肝病：ALT、AST轻度增高或正常，且ALT/AST<1；酒
精性肝病AST显著增高，ALT基本正常。
表2 黄疸的鉴别诊断
黄疸类型
血清胆红素
转氨酶
ALP
胆汁淤积性黄疸
↑↑↑
肝细胞性黄疸
↑↑
肝内局限性胆道阻塞﹡
多正常
注：↑轻度增高；↑↑中度增高；↑↑↑显著增高。
↑
↑↑↑
↑↑↑
正常或↑
正常或↑
↑↑↑
﹡如原发性肝癌、转移性肝癌、肝脓肿等。
③ 骨骼疾病：如纤维性骨炎、佝偻病、骨软化症、成骨细胞瘤及骨折愈合期，ALP增高。 ④ 生长发育的儿童、妊娠中晚期血清ALP可有生理性增高。
肝癌、胆汁淤积性黄疸）。
9
11、血浆凝血因子
【参考值】凝血酶原时间（PT） 11～14秒活化部分凝血活酶时间（APTT） 30～42秒凝血酶时间（TT） 16～18秒

肝功能图文精PPT课件

3．总蛋白及球蛋白增高
常见原因
③自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮、风湿热
④慢性炎症与慢性感染：如结核病、疟疾、黑热病、麻风病及慢性血吸虫病等。
4．球蛋白降低
主要是合成减少： ①生理性减少：小于3岁的婴幼
儿 ②免疫功能抑制：长期应用肾
上腺皮质激素或免疫抑制剂 ③先天性低γ球蛋白血症。
5．A／G倒置
[原理]
非结合胆红素不能透过肾小球屏障，因此不能在尿中出现，而结合胆红素为水溶性能够透过肾小球基底膜在尿中出现。正常成年人尿中含有微量胆红素，大约为3.4μmol／L ，通常的检验方法不能被发现，当血中结合胆红素浓度超过肾阈(>34 μmol／L )时，结合胆红素可自尿中排出。
[参考值] 正常为阴性反应。
肝细胞性黄疸胆红素代谢特点
• 结合胆红素可由肾小球滤过，尿中出现胆红素。
• 结合胆红素在肝内生成减少，粪便颜色变浅。
• 尿中胆素原含量变化不定。一方面是从肠吸收的胆素原不能有效地随胆汁排出，使血中胆素原增加，尿中胆素原增加；另一方面是肝实质性损伤及炎症、肿胀等造成肝、胆管阻塞，结合胆红素不能排入肠道，尿中胆素原减少。
4．碱中毒时胆红素分泌增加，可出现尿胆红素试验阳性。
★四、血清酶学检查
★1、血清转氨酶测定
1）ALT、AST转氨酶是将α氨基酸的氨基转移到α-酮酸
的酮基上的一种酶用于肝功能检查者主要是：
谷氨基丙酮酸转移酶（GPT）现名丙氨酸氨基转移酶(ALT)
谷氨酸草酰乙酸转移酶（GOT）现名天门冬氨酸氨基转移酶（AST）
合成及运输等代谢过程。维生素及激素代谢：脂溶性维生素的吸收，
激素的灭活；胆红素、铁、铜及其他金属的代谢等。

课件胆汁酸代谢及其异常.ppt

游离型胆汁酸结合型胆汁酸
第四节肝病的生物化学代谢紊乱
一、肝硬化的临床生物化学 Clinical biochemistry of hepatocirrhosis
概念（concept)
肝硬化是一种以肝组织弥漫性纤维化、假小叶和再生结节形成为特征的慢性肝病。是许多肝脏疾病晚期的共同病变。临床上有多系统受累，以肝功能减损、门脉高压两大症侯群为主要表现，晚期常出现上消化道出血，肝性脑病，继发感染等严重的并发症。 Cirrhosis is a pathological diagnosis.It is characterized by widespread fibrosis with nodular regeneration. Its presence implies previous or continuing hepatic cell damage.
这种稳定交联的形成使胶原纤维结构稳定，故血清中的MAO活性增高，常提示胶原纤维增生活跃。
β-脯氨酸羟化酶测定（ β-proline hydroxylase， β-PH）
β-PH催化胶原中脯氨酸变为羟脯氨酸，在胶原合成中起关键作用。肝纤维化： β-PH含量及活性
其他生物化学检查
透明质酸（ hyaluronic acid， HA）由间质细胞合成，大部分在肝内被代谢。肝病患者，肝间质细胞增生,合成明显增多，肝细胞受损，对血中的HA摄取及降解障碍
层黏连蛋白（LN）细胞外间质中基底膜的主要成分，肝纤维化倾向时，LN合成和沉积增加
Ⅲ型胶原前肽（ procollagen III peptide，PIIIP）血清中含量反映肝纤维化的程度和活动性
IV型胶原是血管基底膜的主要成分，肝纤维化倾向时增高穿刺肝组织活检 Liver needle biopsy

186.3胆汁酸代谢检查

门体分流：
肠道中的胆汁酸经分流的门脉系统直接进入体循环
生理性增高：
进食后可出现一过性升高
总胆汁酸胆酸脱氧胆酸甘氨胆酸
参考值
0～10
μmol/L
0.08～0.91 μmol/L
0.23～0.89 μmol/L
0.05～1.0 μmol/L
胆汁酸检测的临床意义
胆汁酸增高见于
肝细胞损害：
急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌等。
胆道梗阻：
肝内外胆管梗阻，胆汁酸不能正常排胆汁酸结合型胆汁酸
按来源分为两类
初级胆汁酸次级胆汁酸
胆汁酸的代谢
图1胆汁酸的肠肝循环
胆汁酸肠肝循环的生理意义：使有限的胆汁酸重复利用，
促进脂类食物的消化与吸收得以正常进行。
胆汁酸是能同时反映肝合成代谢、分泌状态及肝细胞损伤三个方面的血清学指标。

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酶比色法测定总胆汁酸
【操作步骤】
1．手工法按表
加入物(ml) 血清标准液试剂Ⅰ
测.1
0.3
标准
0.1 0.3
标准对照 a
0.1 b 0.3 c
试剂Ⅱ
0.1
0.1
d
去离子水
0.1
0.1 e
混匀，37℃水浴10min，加终止液0.1ml，摇匀，
500nm波长，以水校零，读取各管A值。
血清总胆汁酸的检测
酶比色法测定总胆汁酸循环法测定胆汁酸
酶比色法测定总胆汁酸
【原理】
在3α -羟类固醇脱氢酶(3α -HSD)作用下，各种
胆汁酸C3上α 位的烃基(3α -OH)脱氢形成碳基
(3α =O)。同时NAD还原成NADH。随后，
NADH上的氢由黄递酶催化转移给碘化硝基四
氮唑(INT)，产生红色的甲臢。甲臢的产量与
酶比色法测定总胆汁酸
-----注意事项
由于血清中TBA含量低，样品中存在干扰物质的影响相对就大，乳酸脱氢酶(LD)是主要的干扰物质，由LD反应中生成的NADH往往比TBA反应中生成的量要大得多，因此测定前去除血清中LD的影响至关重要，方法有：血清67℃加温30min；加草氨酸作为LD的封闭剂；碱或酸处理；用丙酮酸钠抑制LD活性。上述5种方法中丙酮酸钠法最好，可免去前处理步骤，直接加入反应体系，不影响体系的pH，且对反应无干扰。血清中还存在其它脱氢酶(有相应底物存在时)和还原性物质，如不除去，测定结果会偏高。据无选择的40例肝功能标本的测定结果来看，平均干扰相当于TBA 18μmol/L，范围在5.5～45μmol/L之间。因此自动分析设计成双试剂二步法，样品先和不加3α -HSD的体系孵育，使样品中的干扰物质先反应，然后再加入3α -HSD，启动TBA反应。
试剂中加适量表面活性剂可防止甲臢沉淀。
酶比色法测定总胆汁酸（H)
【方法学评价】 1．手工法测定TBA需做标本、标准的对照管，样品和试剂用量大，试剂价格高，费用昂贵。分析仪测定能避免以上缺点，但去干扰能力不如手工法分析。血清TBA、尤其是正常血清TBA浓度低，因而检测灵敏度至为关键，本法测定 TBA50μmol/L(标本/试剂比为1：10)的标准液，A500nm(1cm)为0.1左右。所以低浓度时重复性较差，对31μmol/L和 157μmol/L的样品各1份，用手工法每天上下午双份测定，测10天，结果总CV分别为 5.46%和2.79%。。本法线性上限为 300μmol/L。
【参考范围】 60名健康成人的空腹TBA为 4.9±2.38μmol/L,
中餐后2h TBA为8.22±2.91μmol/L。
酶比色法测定总胆汁酸
-----临床意义
5．中毒性肝病：在中毒性肝病时血清TBA 也将异常。 6．胆汁淤积：血清TBA测定对胆汁淤积的诊断有较高灵敏度和特异性。肝外胆管阻塞及肝内胆汁淤积包括急性肝炎、初期胆管性肝硬化、新生儿胆汁淤积、妊娠性胆汁淤积等均可引起TBA增高。在胆管阻塞的初期，胆汁分泌减少，使血清中的TBA显著增高，且在阻塞的不同阶段几乎保持不变；而血清胆红素水平则随不同阶段而变化。胆汁淤积患者肝组织中的胆汁酸含量明显高于正常人。肝外阻塞经引流缓解后，血清TBA水平迅速下降，而其它指标则缓慢恢复。
循环法测定胆汁酸
【试剂】 1．试剂Ⅰ 硫代-NAD 2mmol/L，Good’s缓冲液
200mmol/L，pH7.0。 2．试剂Ⅱ 3α-HSD 15kU/L，NADH
3mmol/L,Good’s缓冲液200mmol/L,pH8.0。 3．标准液同比色法。【操作步骤】自动化分析法。 • 反应类型：速率法； • 反应温度：37℃； • 波长：405nm(主)/660nm(次) • 样品3μl； • RⅠ200μl；3～5min后加RⅡ50μl, • 延迟时间1min • 读数时间4min。
循环法测定胆汁酸
【原理】
胆汁酸被3α -羟基类固醇脱氢酶及ThioNAD+（二核苷酸氧化型）特异性地氧化，生成3-酮类固醇及Thio-NADH（二核苷酸还原型），此外，生成的3-酮类固醇在3α -羟基类固醇脱氢酶及还原性辅酶Ⅰ（NADH）存在下，生成胆汁酸和NAD+。如此循环往复从而放大微量的胆汁酸量，在405nm处测定生成的 Thio-NADH的吸光度变化，求得胆汁酸量。
总胆汁酸(TBA)成正比，在500nm波长比色。
反应式如下：
3α-羟基胆酸 + NAD+
3-氧代胆酸 + NADH + H+
NADH + H+ + INT
NAD+ + 甲臢 (红色)
酶比色法测定总胆汁酸
【试剂】
1．试剂Ⅰ 黄递酶 1 000U，NAD+ 1 mmol，碘化硝基四氮唑(INT)0.5 mmol, 丙酮酸50 mmol溶于0.1mol pH 7.5 的磷酸缓冲液1 L中，加表面活性剂适量。 2．试剂Ⅱ 3α- 羟类固醇脱氢酶(3α-HSD) 2 000U溶于0.1mol pH 7.5的磷酸缓冲液中1 L中。 3．终止液 1 mol/L HCl。 4．标准液(50μmol/L) 24.38 mg甘氨胆酸溶于1 L经透析的混合血清中。
酶比色法测定总胆汁酸
-----注意事项
脂肪酶、胆固醇(包括HDL-C、LDLC)和甘油三酯测定试剂中均加有胆酸盐，自动分析时会引起携带污染，必须引起注意。某些先进的仪器可以设定试剂针、样品针和反应杯的补充清洗程序，亦可将TBA编排在上述有污染的项目前测定。对某些不具备上述功能的仪器，最好将TBA单批测定。
酶比色法测定总胆汁酸
-----临床意义
所有肝病中，餐后血清TBA水平及异常率均比空腹时测定更灵敏，有人甚至认为餐后测定TBA对各种肝病的诊断灵敏度和特异性高达100%，而同时测定空腹血清胆汁酸有40%的患者在正常范围。急性肝炎是否转为慢性，连续监测餐后血清TBA可以观察慢性过程，慢性活动性肝炎是否发生纤维化改变，连续监测餐后血清TBA可以了解纤维化过程，不做肝活检即可获得肝损伤的程度。
2．自动分析法一般无法做对照管，而是设置两点终点法，读取前后两个吸光度A1和A2。具体按说明书要求。
酶比色法测定总胆汁酸
【计算】手工法：
TBA(μmol/L) =A测定-A测定对照/A标准-A标准对照×C标准
自动分析法：
TBA(μmol/L) =A测定2-A测定1/A标准2-A标准1×C标准