透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞Cyclin D1 mRNA表达的影响
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透骨消痛胶囊对兔骨性关节炎软骨细胞MAPK信号通路表达的影响洪昆达;万甜【期刊名称】《福建中医药》【年(卷),期】2015(046)005【摘要】目的研究透骨消痛胶囊对兔骨性关节炎软骨细胞MAPK信号通路表达的作用机制.方法成年健康6月龄新西兰兔40只,采用抽签法随机分为正常组、造模组,造模组用4%木瓜蛋白酶双膝关节腔注射建立骨性关节炎模型;造模成功后造模组采用抽签法随机分为模型组、对照组、实验组,实验组用透骨消痛胶囊水溶液100mL/d灌胃,对照组用壮骨关节胶囊水溶液100mL/d灌胃,Western Blot检测MAPK信号通路p-ERK1/2、p-JNK的蛋白表达.结果实验组治疗后,关节软骨中p-ERK1/2蛋白表达高于模型组、对照组(P<0.05),p-JNK蛋白表达低于模型组、对照组(P<0.05).结论透骨消痛胶囊可通过上调兔骨性关节炎软骨细胞p-ERK1/2蛋白的表达,下调p-JNK蛋白的表达,促进软骨细胞增殖、分化,抑制其凋亡.【总页数】2页(P43-44)【作者】洪昆达;万甜【作者单位】福建中医药大学附属康复医院,福建福州350003;福建中医药大学康复学报编辑部,福建福州350122【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.透骨消痛胶囊对体外关节软骨细胞Caspase-9和Caspase-3表达的影响 [J], 叶锦霞;吴广文;李西海;郑春松;许惠凤;叶蕻芝;刘献祥2.透骨消痛胶囊含药血清对退变软骨细胞表达caveolin-1、p38MAPK的影响 [J], 吴广文;沈寿康;范怀玲;叶锦霞;刘献祥;叶蕻芝3.透骨消痛胶囊含药血清对退变软骨细胞表达caveolin-1、p38MAPK的影响 [J], 吴广文;沈寿康;范怀玲;叶锦霞;刘献祥;叶蕻芝;4.透骨消痛胶囊对凋亡软骨细胞Rac1和Cdc42表达的影响 [J], 叶锦霞;吴广文;李西海;郑春松;许惠凤;叶蕻芝;刘献祥;5.透骨消痛胶囊对凋亡软骨细胞Rac1和Cdc42表达的影响 [J], 叶锦霞;吴广文;李西海;郑春松;许惠凤;叶蕻芝;刘献祥因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
•实验研究•透骨消痛胶囊抑制脂多糖诱导软骨细胞炎症反应的机制研究邵翔陈后煌陈达马玉环郑文伟叶蕻芝李西海【摘要】目的探讨透骨消痛胶囊抑制脂多糖(LPS)诱导的软骨细胞炎症反应作用机制。
方法对4周龄雄性SD大鼠 采用机械-n型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞并进行体外培养,将软骨细胞分为空白组、模型组以及透骨消痛胶囊组,空白组加人含10%胎牛血清(FBS)的低糖型Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM/LOW)2 mL,模型组加人含10 ng/mL LPS、10%FBS的DMEM/LOW培养基2 mL,透骨消痛胶囊组加人含10 ng/mL LPS、透骨消痛胶囊(300 ^g/mL)、10%FBS的DMEM/LOW培养基2 mL。
干预8 h后,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测各组微小RNA(miRNA)-140表达变 化,免疫荧光观察各组带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS)4、基质金属蛋白酶(MMP)-3 表达变化,Image J分析各组平均光密度。
结果与空白组相比,模型组MMP-3表达升高(_P<0.05)、ADAMTS4表达明显升 高(P<0. 01);与模型组相比,透骨消痛胶囊组MMP-3表达下降(_P<0. 05)、ADAMTS4表达明显下降(_P<0. 01)。
与空白组 相比,模型组软骨细胞mRNA-140表达明显降低(_P<0.05)与模型组相比,透骨消痛胶囊组软骨细胞mRNA表达明显升高 (P<0.05)。
结论透骨消痛胶囊能促进miRNA-140表达,降低ADAMTS4、MMP-3分泌,抑制炎症反应介导的软骨基质降 解,从而延缓骨关节炎软骨退变。
【关键词】软骨细胞;微小R N A-140;骨关节炎;基质金属蛋白酶-3;炎症反应D O I:10.3969/j. is s n.1673-7083.2016.06.014Mechanism of Tougu Xiaotong capsule inhibits lipopolysaccharide-induced inflammation in chondrocytes S H A O X ia n g1,C H E N H ou-hu a n g1,C H E N犇犪,M A Y u-hu a n2,Z H E N G W en-w e i2,Y E H on g-z h i3,L I.X i-h a i1.A ca d em y o f In teg ra tive M edicine ,F u jia n U niversity o f T ra d itio n a l Chinese M ed icin e1 ,F uzhou 350122,C h in a;C ollege o fP h a rm a c y,F u jia n U niversity o f T ra d itio n a l Chinese M ed icin e2,F uzhou350122,C h in a;F u jia n K e y L aboratory o fIn teg ra tive M edicine on G eria trics,F u jia n U niversity o f T ra d itio n a l Chinese M ed icin e2 ,F uzho u 350122,C hinaC orresponding author:L I X i-h a i E-m ail:lix ih a i79d a h a i@【Absract】Objective To explore the mechanism of Tougu Xiaotong capsule (TXC) inhibiting lipopolysaccharide (LPS)-stim ulated inflammation in chondrocytes. Methods The chondrocytes harvested from the knee joints of 4-week-old SD rats were cultured in vitro and divided into 3 groups: the sham group,model group and TXC group. The sham group was cultured rn 2 mL low-glucose Dulbecco Modified Eagle Medium (DM EM/LOW) containing 10% fetal bovine serum (FBS);the model group was cultured m 2 mL DMEM/LOW containing 10% FBS and 10 ng/m L LPS;the TXC group was cultured m 2 mL DMEM/LOW containing 10% FBS, 10 ng/m L LPS and 300 ^.g/mL TXC. After chondrocytes being treated for 8 h, the microRNA (m iRNA)-140 expression was detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (q P C R),and the expressions of a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs (A D A M T S) 4 and matrix metalloproteinase (M M P)-3 were observed by immunofluorescence staining, the average optical density of each group was analyzed by Image J. Results Compared with the sham group,the expression of MMP-3 (P〈0. 05) and ADAM TS4 (P〈0. 01) in the model group were significantly increased. Compared with the model group, the expression of MMP-3 (P〈0. 05)and ADAMTS4 (P<0. were significantly decreased. The expression of miRNA-140 in the model group was lower than that in the control group (P<0. 01) and the 基金项目:国家自然科学基金面上项目(81573998)、福建省自然科学基金(2016J01395)、福建省中青年教师教育科研项目(科技A类)优秀人才(JA14150)作者单位:350122,福建中医药大学中西医结合研究院(邵翔、陈后煌、陈达、李西海);350122,福建中医药大学药学院(马玉环、郑文伟);350122,福建省中西医结合老年性疾病重点实验室(叶蕻芝)通信作者:李西海E-mail: llxihai79dahai@TXCgroup (犘<0. 01). Conclusion TXC may delay the cartilage degeneration in osteoarthritis (O A) -140 to reduce the secretion of inflammatory cytokines such as ADAM TS4 and MMP-3 and thus inhibit the inflammation-mediated cartilage matrix degradation.【Keywords】Chondrocyte; microRNA-140 ; Osteoarthritis; Matrix metalloproteinase-3 ; Inlammation骨关节炎(OA)是一种以软骨退变、软骨下骨重建异常、骨质增生为主要特征的慢性进行性关节疾病1,好发于老年且发病年龄呈低龄化趋势[2],随着病程的进展,患者可出现功能障碍。
中国组织工程研究 第20卷 第24期 2016–06–10出版Chinese Journal of Tissue Engineering Research June 10, 2016 Vol.20, No.24·研究原著·www.CRTER .org吴追乐,男,1982年生,汉族,福建省石狮市人,2011年福建中医药大学毕业,博士,讲师,主要从事中西医结合骨伤科研究。
通讯作者:庄志强,主任医师,硕士生导师,福建中医药大学附属漳州市中医院,福建省漳州市,363000中图分类号:R318 文献标识码:B 文章编号:2095-4344 (2016)24-03568-06 稿件接受:2016-03-25透骨消痛胶囊及其拆方对退变软骨细胞Wnt/β-catenin 信号通路的影响吴追乐1,陈星强1,陈春蓉1,于 超1,朱晓勤1,庄志强2(1福建中医药大学,福建省福州市 350122;2福建中医药大学附属漳州市中医院,福建省漳州市 363000)引用本文:吴追乐,陈星强,陈春蓉,于超,朱晓勤,庄志强. 透骨消痛胶囊及其拆方对退变软骨细胞Wnt/β-catenin 信号通路的影响[J].中国组织工程研究,2016,20(24):3568-3573.DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.24.011 ORCID: 0000-0001-7816-9453(吴追乐)文章快速阅读:文题释义:Wnt 信号通路:1982年在小鼠乳腺癌发现了Wnt 基因,由于此基因激活依赖小鼠乳腺癌相关病毒基因的插入,因此,当时被命名为Int1基因,之后的研究表明,Int1基因在小鼠正常胚胎发育中起重要作用,相当于果蝇的无翅(Wingless)基因,可控制胚胎的轴向发育。
此后大量研究提示了Int1基因在神经系统胚胎发育中的重要性,因此将Wingless 与Int1结合,称为Wnt 基因。
透骨消痛颗粒诱导BMSCs向软骨细胞分化的实验研究1刘献祥,吴追乐,李西海,李明波,李民,林久茂福建中医学院,福州 (350108)E-mail:liuxianxiang@摘要:目的:探讨透骨消痛颗粒含药血清促进BMSCs增殖和诱导BMSCs向软骨细胞分化的影响。
方法:取72只4周龄SD大鼠随机分为5组即:透骨消痛颗粒的水提物高剂量组、水提物中剂量组、水提物低剂量组、醇提物组和空白对照组,分别以含14g/kg.d﹑7g/kg.d﹑3.5g/kg.d药量的水溶液2ml灌胃,对照组以等量生理盐水2ml灌胃,2次/日,连续给药3天后,腹主动脉采血制备血清。
从8只4周龄SD大鼠骨髓中分离出BMSCs,体外传代培养,取第2代BMSCs分为空白对照组﹑软骨诱导剂组及透骨消痛颗粒组,通过透骨消痛颗粒含药血清诱导BMSCs向软骨细胞分化。
采用MTT法检测BMSCs增殖和免疫组化检测Ⅱ型胶原在细胞分化过程中的表达。
结果:透骨消痛颗粒含药血清各组均能促进BMSCs增殖,与空白对照组相比均有非常显著性差异(P<0.01),中剂量药物浓度时达到最大效应(P<0.01),中剂量1小时组与2小时组相比无显著性差异(P>0.05)。
透骨消痛颗粒含药血清能增强Ⅱ型胶原在细胞分化过程中的表达,与空白对照组相比有非常显著性差异(P<0.01),与软骨诱导剂组相比有显著性差异(P<0.05)。
结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进BMSCs增殖和诱导BMSCs向软骨细胞分化。
关键词:骨髓间充质干细胞,软骨分化,膝骨性关节炎,血清药理学中图分类号:R3361. 引言透骨消痛颗粒长期运用于临床,是防治骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)行之有效的组方[1],研究表明透骨消痛颗粒通过有效抑制细胞因子、MMP-3、氧自由基的生物效应来延缓关节宏观形态、软骨基质及软骨细胞退变的作用[2-3]。
为了探讨其作用机制,本实验对透骨消痛颗粒含药血清促进BMSCs增殖和诱导BMSCs向软骨细胞分化的影响作一探讨。