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高效液相色谱法测定大鼠血浆中木樨草素和牡荆素的含量

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高效液相色谱法测定大鼠血浆中木樨草素和牡荆素的含量才志阳1,赵楠2,郭伟英3(1.锦州医科大学附属第一医院药品管理科;2.锦州医科大学附属第一医院转化医学研究院;3.锦州医科大学药学院药物分析教研室,辽宁锦州121000) 摘要:目的　同时测定大鼠血浆中木樨草素和牡荆素的含量,考察同时测定木犀草素和牡荆素的高效液相色谱方法㊂方法　采用高效液相色谱法,色谱柱Diamonsil ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-20mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(58:42,pH=4.0),检测波长350nm,流速为1.0mL/min,柱温30℃㊂结果　分别在38.5~4350ng/mL和16.5~1860ng/mL范围内,木樨草素和牡荆素的校准曲线呈线性相关,相关性系数r为0.9996和0.9994,方法回收率分别为102.3%~104.7%和93.82%~101.4%,日内和日间精密度(RSD)小于7.9%和5.4%㊂结论　建立的高效相色谱方法稳定,结果可靠,可用于血浆中木樨草素和牡荆素浓度的检测㊂关键词:高效液相色谱法;木樨草素;牡荆素中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:2096-305X(2018)04-0015-04Determination of Luteolin and Vitexin in Rat Plasma by HPLCCai Zhiyang1,Zhao Nan2,Guo Weiying3(1.Medicine Management Section,the First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University;2.Institute of Translational Medicine,the First Affiliated Hospital of Jinzhou Medical University;3.Department of Pharmaceutical Analysis,School of Pharmacy,Jinzhou Medical University,Jinzhou121000China)Abstract:Objective　To determine the contents of luteolin and vitexin in rat plasma,and measure the HPLC method of luteolin and vitexin simultaneously.Methods　HPLC method was used.Diamonsil ODS C18column was(250mm×4.6mm,5μm),the mobile phase was methanol-20mmol/L potassium dihydrogen phosphate buffer solution(58∶42,pH4.0),the detection wavelength was350nm,the flow rate was1.0mL㊃min,and the column temperature was30℃.Results　The standard curve for luteolin and Vitexin in plasma were linear over the range of38.5~4350ng/mL and16.5~1860ng/mL.The calibration curves of luteolin and Vitex showed linear correlation,with the correlation coefficients being0.9996and0.9999respectively.The assay recoveries for lute⁃olin and Vitexin ranged from102.3%to104.7%and from93.82%to101.4%respectively.The intra-and inter-day precisions (RSD)for luteolin and vitexin were all less than7.9%and5.4%.Conclusion　The HPLC method is stable and reliable,which can be used for the determination of luteolin and vitexin in plasma.Key words:high-performance liquid chromatographic method;luteolin;vitexin 葎草(humulus scandens)为桑科植物葎草的全草,又名勒草㊁老虎藤㊂最早见于‘唐本草“㊂植株分布于除新疆㊁青海以外的大部分地区㊂传统医学认为其具有清热解毒,退热除蒸,利尿通淋等方面的功效[1-2]㊂药用成分主要是葎草总黄酮,包含木樨草素㊁牡荆素等成分㊂经过药理学研究[3-5],发现葎草总黄酮对于溃疡性结肠炎具有明显的抑制作用㊂本实验以前期药理学实验[6]为基础,进一步探讨葎草总黄酮在体内的代谢情况,建立葎草总黄酮体内检测的高效液相色谱方法,为下一步研究其分子生物学相关机制提供可靠的方法㊂1　仪器与材料1.1　仪器赛里多斯pH仪(北京赛利多斯);Agi⁃lent1100(G1314A)高效液相色谱系统(美国Agi⁃lent公司);RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣); Milli-Q Synthesis制水系统(美国Millipore公司); AL204电子天平(上海梅特勒-托利多仪器);TGL51锦州医科大学学报J Jinzhou Medical University2018Aug.39(4)　作者简介:才志阳(1985),男,辽宁铁岭人,药师,在读硕士研究生,主要研究方向为中药活性成分分析㊂　通讯作者:郭伟英(1958),男,辽宁铁岭人,教授,硕士学位,主要研究方向为药品质量标准及新型给药技术㊂-16台式高速离心机(江苏金坛市医疗仪器厂)㊂1.2　试药葎草总黄酮结肠定位胶囊(锦州医科大学药物分析教研室制备,经HPLC法测定含有木樨草素1.52mg/g,牡荆素0.32mg/g),木樨草素(sig⁃ma,批号62696)牡荆素(111K1520),甲醇(天津富宇化工),水为超纯水,其余试剂均为分析纯㊂1.3　实验动物锦州医科大学SD大鼠(动物生产合格证号: SCXK(辽)-2003007),体重(245±15)g,雌雄各半㊂试验前禁食12h自由饮水㊂2　方法与结果2.1　色谱条件Diamonsil ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm)进行分析㊂VWD型检测器,流动相:甲醇-20mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(58∶42,pH= 4.0),流速为1.0mL/min㊂进样量:20μL,检测波长在350nm,柱温30℃㊂水为超纯水㊂2.2　标准溶液的配置2.2.1　标准储备液的制备　分别精密称取60℃减压干燥8h的木樨草素与牡荆素对照品适量,置于同一25mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释制成浓度为232.0㊁99.2μg/mL的标准储备液㊂分别取标准储备液(见表1)适量并加入流动相,将标准储备液稀释2㊁3㊁5㊁10㊁50㊁150倍,用于线性范围㊁回收率㊁准确度㊁精密度和稳定性的考察㊂表1　标准储备液浓度(μg/mL)样品号木樨草素浓度牡荆素浓度11.550.6624.631.98323.169.90446.3119.80577.3333.076116.0049.60 2.2.2　含药血浆样品的配制　取标准储备液分别加入流动相适量,将标准储备液稀释6000㊁2000㊁400㊁200㊁120㊁80㊁53倍,各取5μL分别溶于用0.2mL空白血浆中㊂用于校准曲线的建立㊂血浆标准工作溶液(见表2)每天临用前现配制㊂表2　血浆标准工作溶液浓度样品号木樨草素浓度(ng/mL)牡荆素浓度(ng/mL)138.516.52115.849.53578.8247.541158.0495.051933.0826.862900.01240.074350.01860.0 2.2.3　血浆样品的处理[7]　将0.2mL6.0%的高氯酸缓慢加入到0.2mL空白血浆中,将样品中的血浆蛋白充分沉淀㊂用3.0mL乙酸乙酯涡旋提取木樨草素和牡荆素5min㊂3500r/min离心10 min,转移上清液2.0mL小心转移至干净的尖底离心管中,室温下在真空干燥器中挥干乙酸乙酯㊂向残留物中加入250μL流动相,12000r/min离心10min,取上清液进样㊂2.2.4　血浆样品的采集　大鼠禁食12h后给予自制结肠定位胶囊,分别在0㊁0.5㊁1.0㊁2.0㊁3.0㊁4.0㊁5.0㊁6.0㊁8.0㊁10.0㊁12.0㊁24.0h 后采集血液样本1.0mL,分别放于含有肝素的5 mL管中,于3000r/min分离血浆㊂以0h的取样作为空白血浆,所有血浆样品的处理方法同2.2.3㊂2.3　方法学考察2.3.1　专属性　实验色谱条件下,木樨草素和牡荆素分离度良好,理论塔板数按木樨草素计算不低于4000,血浆内源性杂质对于分离木樨草素和牡荆素没有干扰㊂木樨草素和牡荆素的保留时间约为11.0min和17.0min,见图1㊂2.3.2　线性关系　以木樨草素㊁牡荆素的峰面积作为纵坐标,以木樨草素㊁牡荆素的浓度为横坐标,进行线性回归分析(见表3和4)㊂结果表明,鼠血浆中木樨草素和牡荆素校准曲线在38.50~ 4350ng/mL和16.50~1860ng/mL范围内呈线性关系,相应的木樨草素和牡荆素回归方程分别为y1=0.1337x+0.5419(r=0.9996,n=7),y2= 0.1103x+0.5125(r=0.9994,n=7)㊂61锦州医科大学学报　2018年8月,39(4)A:空白血浆色谱图;B空白血浆中加入1158ng/mL木樨草素和495ng/mL牡荆素的色谱图;C:给予结肠定位胶囊4h后的血浆色谱图(1为木樨草素,2为牡荆素)图1　不同条件下的色谱图表3　木樨草素标准曲线相关数据浓度(ng/mL)38.5115.8578.81158193329004350峰面积5.6816.077.9155.3258388582表4　牡荆素标准曲线相关数据浓度(ng/mL)16.549.5247.5495826.812401860峰面积2.335.9727.855.191.7137206 2.3.3　方法与绝对回收率考察　取大鼠空白血浆,分别加入木樨草素和牡荆素标准溶液,配制成低,中,高3种浓度(表5)的标准血浆各5批(n= 5),按2.2.3的方法进行处理,进行回收率考察㊂2.3.4　重复性与精密度　精确配制高㊁中㊁低3个浓度(见表6)的血样,同日内测定5批,计算日内相对标准差;隔天测定1批,连续测定5批,计算日间相对标准差㊂从结果可知日内精密度< 7.9%,日间精密度(RSD)<5.4%,见表6㊂表5　回收率考察(n=5)标准品理论浓度(ng/mL)绝对回收率方法回收率平均值(%)RSD(%)平均值(%)RSD(%)木樨草素38.591.087.8104.78.7193388.360.7102.30.7435090.590.83103.11牡荆素16.596.498.193.8211826.889.860.53101.40.53186091.221.2101.31.2表6　木樨草素和牡荆素精密度考察(n=5)标准品理论浓度(ng/mL)精密度RSD(%)日内日间木樨草素38.57.95.419332.43.443500.831.6牡荆素16.57.53.9826.82.33.618601.31.9 2.3.5　稳定性　精确配制低㊁高两种浓度(38.5/ 16.5ng/mL,4350/1860ng/mL)的血浆样品,一式3份,放置于3种不同环境下进行稳定性试验㊂在短期稳定性试验中,血浆样品放置于冰箱中(4℃),分别于0㊁2㊁4㊁8㊁12㊁24h测定;在长期稳定性实验中,血浆样品放置于冰柜中(-20℃),分别于1㊁3㊁7㊁15㊁30d进行测定㊂结果表明,短期试验中回收率变化为94%~105.1% (低浓度),95.2%~103.2%(高浓度);长期实验中回收率变化为97.6%~107.5%(低), 95.2%~103.2%(高)㊂稳定性实验表明:木樨草素和牡荆素血浆样本在上述情况下稳定性良好㊂2.3.6　检测限及定量限　方法的最低检测浓度,当信噪比S/N=3时,木樨草素和牡荆素的最低检测限为1.82和1.94ng/mL㊂定量限,样品中被测物能被定量测定的最低量㊂大鼠血浆中木犀草素和牡荆素的定量限分别为7.84ng/mL和6.29ng/mL,RSD分别为6.2%和5.9%㊂3　样品测定给予大鼠口服结肠定位胶囊,按照2.2.4进行血样采集,测定血浆中木樨草素和牡荆素的浓度(见图2)㊂但由于血浆中牡荆素的浓度低于检测限,只检测出木樨草素㊂71才志阳,等:高效液相色谱法测定大鼠血浆中木樨草素和牡荆素的含量图2　不同时间点血浆中木樨草素浓度4　讨 论去除血浆样品中的蛋白质是保证药物释出与样品干净的重要前提㊂血浆中的蛋白质沉淀一般采用沉淀剂或利用酶消化法实现㊂而蛋白质的沉淀效率与介质的pH值和沉淀剂体积有关㊂在实验中,分别对乙腈和甲醇的除蛋白效果进行了考察㊂结果显示,两者蛋白沉淀效果不佳,内源性物质对物质的分离干扰较为严重㊂最后采用6%的高氯酸,沉淀效果显著,干扰分离的内源性物质较少㊂从血浆中萃取分离物质,多采用不同比例的丙酮与醚类,提取的回收率一般在55%㊁40%[8]㊂我们通过对木樨草素和牡荆素两种物质的结构进行分析并结合相似相溶的原理,采用乙酸乙酯进行萃取㊂回收率有了明显的提升,分别达到了88%和90%㊂流动相的pH对物质的出峰时间和峰形有着巨大影响㊂当pH>6.0时,出峰时间在17min以后,峰宽变宽,出现拖尾现象㊂pH过低,药物出峰时间前移,但峰形出现分裂,分析认为是药物形态影响了峰形㊂即在一定pH条件下,药物以分子和盐的形式存在于流动相中㊂经过摸索,最终选择了甲醇20mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(58∶42,pH= 4.0)作为流动相,谱图显示峰形良好㊂实验过程中发现,木樨草素和牡荆素的代谢情况表现出了极大的差异性㊂经查阅有关文献[9]得知,牡荆素的体内代谢过程中,体内酚的含量会发生变化,可能是体内某些酚类成份参与了牡荆素的代谢过程㊂考虑到血浆中木樨草素和牡荆素浓度的差异,推断两者具有不同的代谢途径,参与代谢酶系的活性也有较大的差距㊂参考文献:[1]　陈伟光,盛静,林霞.正交设计研究葎草中总黄酮提取工艺[J].时珍国医国药,2007,10(3):551-552. [2]　龚丽霞,丁卓平.葎草及黄酮类化合物的研究进展[J].安徽农业科学,2009,4:1618-1620.[3]　Duan K,Yuan Z,Guo W,et al.LC–MS/MS determinationand pharmacokinetic study of five flavone components after sol⁃vent extraction/acid hydrolysis in rat plasma after oral administra⁃tion of Verbena officinalis L.extract[J].Journal of Ethnophar⁃macology,2011,135(2):201-208.[4]　Mukinda JT,Syce JA,Fisher D,et al.Effect of the Plant Ma⁃trix on the Uptake of Luteolin Derivatives-containing Artemisiaafra Aqueous-extract in Caco-2cells[J].Journal of Ethno⁃pharmacology,2010,130(3):439-449.[5]　Lee HJ,Kim KA,Kang KD,et al.The compound isolatedfrom the leaves of Phyllostachys nigra protects oxidative stress-in⁃duced retinal ganglion cells death[J].Food and Chemical Toxi⁃cology,2010,48(6):1721-1727.[6]　才志阳,郭伟英.葎草总黄酮对溃疡性结肠炎模型大鼠保护作用的研究[J].中国药房,2012,23(3):209-211.[7]　Tsai MF,Chiang YL,Wang LF,et al.Oral sustained deliveryof diclofenac sodium using calcium chondroitin sulfate matrix[J].J Biomater Sci Polym Ed,2005,16(10):1319-1331.[8]　Zimova L,Vetchy D,Muselik J,et al.The development andin vivo evaluation of a colon drug delivery system using humanvolunteers[J].Drug Deliv,2012,19(2):81-89.[9]　Zhao P,Wang L,Sun C,et al.Uniform mesoporous carbon asa carrier for poorly water soluble drug and its cytotoxicity study[J].Eur J Pharm Biopharm,2012,80(3):535-543.收稿日期:2018-04-0381锦州医科大学学报　2018年8月,39(4)。

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HPLC法测定牡荆中牡荆素的含量

HPLC法测定牡荆中牡荆素的含量

摘 要: 建立了牡荆中牡荆素含量的高效液相色谱测定方法, 对牡荆资源进行评价, 为牡荆的质量标准的建 立提供参考。样品采用超声波提取法提取, 色谱柱为菲罗门柱( 5 m , 250 mm 4. 6 mm ) , 流动相为甲醇 水溶 液( 4 6) , 流速为 1. 0 mL min 1 , 检测波长为 340 nm, 进样量为 5 L, 在柱温 30 时对牡荆中牡荆素的含量 进行检测。结果表明, 待测组分与其他组分分离度良好, 牡荆素在 0. 04520~ 0. 4068 g 范围内呈良好的线性 关系, r= 0. 9998; 平均回收率为 100. 4% , RSD 为 1. 63% 。该方法简便、准确、重现性好, 适用于牡荆中牡荆素 的含量测定及药材质量控制。 关键词: 超声提取; 高效液相色谱; 牡荆; 含量测定 中图分类号: Q 946 文献标识码: A 文章编号: 1000 3142( 2011) 03 0418 04
3期
罗娅君等: H PL C 法测定牡荆中牡荆素的含量
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许多植物提取厂家都在生产牡荆素类植物提取 物, 但多以山楂( 陈钟等, 2009; 朱思遥等, 2006) 、小 叶榕( 陈化等, 2008) 、乌韭( 任冰如等, 2007) 、蔓荆子 ( 田振坤等, 2005) 、千针万线草( 谭瑞璞等, 2009) 等 为研究对象, 而牡荆叶和牡荆子都为富含黄酮类牡 荆素天然化合物, 但牡荆目前还处于野生状态, 在北 方地区和南方山区分布广、生长零散, 大规模种植的 牡荆几乎没有。使用高效液相色谱法测定牡荆中牡 荆素的含量未见报道。本论文采用高效液相色谱法 测定牡荆中牡荆素的含量, 以期为牡荆的药用价值 的进一步 开发 利 用提 供 科学 依 据和 良 好 的理 论 指导。
取同一供试品溶液, 按 2. 1 所述色谱条件, 分 别在 0, 2, 4, 6, 8 h 平行进样分析, 比较 5 次平行进 样的峰面积积分值( 表 1) , 牡荆素的平均峰面积为 107 838, RSD 为 2. 75% 。结果表明, 供试品溶液的
高压液相色谱法测定中药米口袋中木犀草素和芹菜素的含量

高压液相色谱法测定中药米口袋中木犀草素和芹菜素的含量

高压液相色谱法测定中药米口袋中木犀草素和芹菜素的含量黄海芹【期刊名称】《临床合理用药杂志》【年(卷),期】2012(5)26【摘要】目的建立一种可用于评价米口袋药材质量的含量的高压液相色谱(HPLC)测定方法。

方法采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.2%醋酸水溶液和甲醇为流动相,流速:1.0ml/min;检测波长:254nm;柱温:30℃。

用梯度洗脱法同时测定米口袋药材甲醇提取物中木犀草素和芹菜素的含量。

结果测得木犀草素和芹菜素的线性范围分别为0.01044～0.35g/L(r2=0.9997)和0.00391～0.125g/L(r2=0.9994);加样回收率分别为95.96%和98.41%。

结论该法能快速、准确地测定米口袋中2个黄酮类成分的含量,为米口袋的质量控制提供了1种较好的检测方法。

【总页数】2页(P37-38)【关键词】米口袋;木犀草素;芹菜素;高效液相色谱法【作者】黄海芹【作者单位】江苏省姜堰市中医院【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.反相高效液相色谱法同时测定车前草中槲皮素、木犀草素、山奈酚、芹菜素的含量 [J], 王锦军;张秀梅;王宏林2.高效液相色谱法测定桔梗中木犀草素与芹菜素的含量 [J], 周秀娟;储晓琴;桂双英;王举涛;彭代银;金传山3.高效液相色谱法测定北刘寄奴药材中木犀草素和芹菜素的含量 [J], 汪凤山;赵旭伟;方舟;方洪壮4.高效液相色谱法测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量 [J], 杨海英;王雪梅;杜刚;王建平;李光军;高云涛5.反相高效液相色谱法测定亳菊提取物中木犀草素及芹菜素的含量 [J], 潘见;汪翔;杨毅;金日生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

牡荆素血浆蛋白结合率的测定

牡荆素血浆蛋白结合率的测定

牡荆素血浆蛋白结合率的测定［摘要］目的：建立血浆中牡荆素浓度的分析方法，测定牡荆素血浆蛋白结合率。

方法：采用平衡透析法透析，利用HPLC测定血浆中牡荆素浓度，计算牡荆素与人血浆蛋白结合率，并比较大鼠和人血浆中牡荆素的血浆蛋白结合率。

结果：在2～16mg·L-1，药物浓度对血浆蛋白结合率无显著影响，但牡荆素在大鼠和人的血浆蛋白结合率存在显著性差异，牡荆素与人的血浆蛋白结合率高于与大鼠血浆蛋白结合率。

结论：牡荆素与血浆蛋白具有较强的结合。

［关键词］牡荆素；血浆蛋白结合率；平衡透析法牡荆素（vitexin）是从山楂叶中分离提取出来的一种活性单体成分[1]。

经研究[2]牡荆素对缺血性心肌损伤具有良好的保护作用。

药物血浆蛋白结合率是药物体内重要参数之一，不仅影响药物代谢动力学，还密切关系到药物的药理作用强度、作用机制等。

作者曾首次报道[3]牡荆素在大鼠体内中血浆蛋白结合的情况，本研究继续采用平衡透析法测定了牡荆素的人血浆蛋白结合率，并与大鼠血浆蛋白结合率进行比较，为其进一步研究提供依据。

1材料牡荆素原料、牡荆素对照品（合肥七星医科科技有限公司，纯度分别为98.7%，99.5%）；柚皮苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号110722200309）；病毒灭活血浆[合肥市红十字会中心血站，批号20100719，A型，Rh（D）阴性（）]；纯化水；甲醇、乙腈为色谱纯；其余试剂均为分析纯。

戴安ULTIMATE3000全自动高效液相色谱仪及变色龙色谱工作站；戴安C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；HC2062高速离心机（安徽中科中佳科学仪器有限公司）；MULTIV AP118氮吹仪（美国Organomation公司）；透析袋（截留相对分子质量12000～14000，上海源聚生物科技有限公司）。

2方法与结果2.1溶液的配制空白透析液的配制：磷酸氢二钾14.11g，磷酸二氢钾2.59g，氯化钠1.99 g，加水溶解至1L，即得。

高效液相色谱测定大鼠血浆中雷公藤甲素含量的方法改进

高效液相色谱测定大鼠血浆中雷公藤甲素含量的方法改进

雷公藤甲素（ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ）是从雷公藤中分离得到的环氧二萜内酯化合物，是雷公藤的主要活性成分之一，药理实验证实具有抗肿瘤和免疫抑制等活性［１，２］，临床已用于治疗白血病、类风湿性关节炎、肾炎等疾病。

但雷公藤甲素又有较大的毒性，易引起脏器的器质性损害和严重的功能障碍，甚至死亡。

为了研究此药在体内的动力学过程、临床监测及其毒副作用，需要进行体内药物分析。

但由于雷公藤甲素的血药浓度低，内源性干扰大，测定较为困难，以高效液相色谱法测定的文献不多。

文献报道［３～６］用气相色谱法、液相色谱－质谱联用法测定雷公藤甲素的检测限分别为０．５、１ｎｇ／ｍｌ。

但这些方法存在仪器昂贵或需要进行衍生化等复杂的样品预处理等问题，难以满足一般单位的需求。

近年来，很多单位配备了高效液相色谱仪，以ＨＰＬＣ测定更有实际意义。

我们通过优化提取和色谱分离条件，建立了高效液相色谱法测定大鼠血浆中雷公藤甲素含量的分析方法，方法定量限达到１０ｎｇ／ｍｌ，可用于该药的临床前药代动力学和生物利用度研究。

１仪器与试药１．１仪器安捷伦１１００型高效液相色谱仪：Ｇ１３２２Ａ脱气机，Ｇ１３１２Ａ二元泵，Ｇ１３１３Ａ自动进样器，Ｇ１３１６Ａ柱温箱，Ｇ１３１５ＢＤＡＤ检测器，Ｇ２１７１ＢＡ化学工作站（Ｂ０１．０３版本），Ｇ２１８０ＡＡ光谱分析软件。

ＦＡ１１０４Ａ电子分析天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）；ＨＧＣ－２４Ａ型氮气吹干仪（天津市恒奥科技发展有限公司）；ＱＬ－９０１型旋涡混合器（江苏海门市麒麟医用仪器厂）。

１．２试药雷公藤甲素对照品（含量９９．５％，福建省医学科学研究所）；乙腈为色谱纯（Ｍｅｒｃｋ公司）；乙酸乙酯（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；色谱用水为市售的厦门娃哈哈食品有限公司生产的５９６ｍｌ瓶装纯净水；其余试剂均为分析纯。

大鼠空白血浆取自本校动物实验中心的健康ＳＤ大鼠。

２方法与结果２．１色谱条件色谱柱ＡｇｉｌｅｎｔＨＣ－Ｃ１８柱（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：乙腈－水（２３∶７７）；流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ；柱温３０℃；检测波长２２１ｎｍ；进样量２０．０μｌ。