甘露糖抗肿瘤作用的研究进展

冬虫夏草抗肿瘤作用研究进展StudyProgressinResistingTumourWithAweto吴庆光,赵珍东,王宗伟(广州中医药大学中药学院,广东　广州　510405)[摘要]　文章从化学成分、实验研究、临床应用及作用机理等方面总结了国内外冬虫夏草抗肿瘤方面研究的最新进展。[关键词]　冬虫夏草;抗肿瘤;研究进展[Abstract]　Fromtheseaspectsofchemicalcomponents,experimentalresearch,clinicalapplicationandeffectivemechanism,thearticlesummarizedtherecentprogressinresistingtumourwithawetodomesticandoverseas[Keywords]　Aweto;Resistingtumour;Summarization[中图分类号]R282.71　[文献标识码]A　[文章编号]1672-951(2005)06-080-03 冬虫夏草[Cordycepssinensis(Berk.)Sacc.]简称虫草,为麦角菌科真菌冬虫夏草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体,是我国传统的滋补强壮药,始载于《本草从新》,本品味甘性平,有益肾壮阳、补肺、止血化痰之效。冬虫夏草有多种药理作用,笔者仅对冬虫夏草在抗肿瘤方面的研究进展作一总结,以供参考。1　冬虫夏草化学成分与抗肿瘤研究研究表明:冬虫夏草含有多种化学成分如虫草多糖类、核苷类、糖醇及甾醇类、氨基酸、肽类、维生素类、无机元素及多胺类等。冬虫夏草抗肿瘤的活性成分研究,主要集中于虫草多糖类和甾醇类。虫草多糖均为半乳甘露聚糖,系由D-半乳糖与半乳甘露糖按1:1摩尔比组成,具有高度的分支结构,其主链均有(1-2)甘露糖基存在,其支链上亦有(1-5)呋喃半乳糖基。KihoT等[1]从人工培养的虫草菌丝体中分得一种多糖CS-F10,它由半乳糖、葡萄糖和甘露糖按摩尔比43:33:24构成,分子量约为15000。又有报道,从人工培养的冬虫夏草IY909(KFCC-10708)得到的蛋白多糖C909具有抗癌和免疫促进活性[2]。我国学者最近亦从冬虫夏草中获得一种多糖EPSF,具有抗肿瘤活性。BokJW等[3]从冬虫夏草甲醇提取物中分离得到两个甾体化合物,KuoYC等[4]分离出有别于虫草素和虫草多糖的成分如CS-36-39和CS-48-51,均具有抗肿瘤作用。2　冬虫夏草抗肿瘤实验研究较早实验证明,虫草多糖(PSCS)与虫草水煎剂抗癌作用相似,对肉瘤S180、Lewis肺癌、乳腺癌(MA-737)等离体培养瘤株均有显著的抑制作用;PSCS能抑制小鼠肉瘤S180生长,增加外周血淋巴细胞酸性非特异性酯酶阳性细胞百分率,增强迟发性变态反应及M 吞噬活性,能使带有S180腹水瘤的昆明小鼠生命延长率提达6.60%～31.74%。ChenYJ等[5]报道,PSCS10μg/ml刺激的血液单核细胞培养基(PSCS-MNC-CM),能有效地抑制U937细胞的增殖,抑制率达78%～83%,能诱发U937细胞分化成单核细胞/巨噬细胞,分化的U937细胞也有吞噬和产生超氧化物的功能。PSCS能明显提高MNC-CM中干扰素、肿瘤坏死因子、白介素-1的水平,抗体中和实验进一步显示:PSCS-MNC-CM抗肿瘤与分化作用源于细胞因子,尤其是干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α,两者协同抑制U937细胞的增殖和分化。我国学者ZhangW等[6]研究了从人工培养的冬虫夏草中提取的多糖EPSF对移植黑素瘤B16细胞小鼠的影响,结果表明,EPSF60mg/kg能显著地增强该小鼠腹膜巨噬细胞的吞噬能力,促进脾淋巴细胞的增殖,能显著地抑制B16细胞向肝肺转移,并能抑制肝肺bcl-2蛋白的表达,具有免疫调节和抗肿瘤活性。YoshidaJ等[7]较早报道,虫草水提液(WECS)皮下注射治疗接种艾氏腹水癌和Meth-A纤维肉瘤细胞BALB/c小鼠,结果WECS能显著延长该小鼠的存活期,中位生存期延长到60天和50天,而对照组分别为19天和16天。Nakamu-raK[8]研究表明,WECS在100mg/kg体重剂量下能对Lewis肺癌和B16结肠癌细胞产生强烈的细胞毒性,对黑素瘤B16细胞、人白血病HL-60细胞有较好的抗肿瘤疗效。最近NakamuraK[9]研究了WECS联合甲氨蝶呤治疗接种黑素瘤B16细胞小鼠,结果发现,WECS可对抗化疗药甲氨蝶呤引起的小鼠体重下降,能显著延长小鼠平均存活时间,并认为WECS是癌症化疗极其有用的辅助药。YoshikawaN等[10]从WECS中得到虫草素,研究了其对接种黑素瘤B16-BL6细胞小鼠的影响,结果发现,虫草素15mg/kg灌胃能抑制瘤块80第11卷第6期 中　医　药　导　报 2005年6月Vol.11　No.6 GuidingJournalofTCM June.2005的生长,抑制率达36%,且未引起体重下降和全身毒性,提示虫草素防治肿瘤时非常安全。有学者采用体外细胞培养人喉癌细胞株HEp-2,通过观察WECS治疗后喉癌细胞的生长曲线和克隆形成试验,证实了冬虫夏草有抗喉癌的作用,且与药物浓度密切相关。冬虫夏草醇提物对小鼠艾氏腹水癌、S180肉瘤、Lewis肺癌、K526、Vero、Wish、Calu-1和Raji肿瘤细胞具有抑制作用[4,7]。BokJW[3]报道,冬虫夏草菌丝体提取物在10mg/l剂量下能有效抑制K562,Jurkat,WMl341,HL-60和RPMI-8226肿瘤细胞株系。最近我国学者ZhangQ等[11]研究表明:人工培养冬虫夏草菌丝体乙酸乙酯提取物在25mg/ml时对人白血病HL-60细胞即有极强的细胞毒性,能抑制其增殖;在200mg/ml时作用HL-60细胞6～8h后,能引起HL-60细胞染色质浓缩,DNA裂解,具有典型的细胞凋亡表现,由此推测,该提取物抑制癌细胞的增殖主要是诱导癌细胞凋亡所致。3　冬虫夏草抗肿瘤临床研究有人采用IudR释放法,研究了虫草水提液对缓解期和活动期白血病人NK细胞和LAK细胞活性的影响,结果表明:虫草能显著增强活动期白血病人NK细胞杀伤K562肿瘤细胞的能力,认为虫草抗肿瘤的机理是增强活动期白血病人NK细胞活性。由此可见,冬虫夏草水提浓液增强NK细胞活性在其抗肿瘤免疫中有着极其重要的作用。彭海鹰[12]将40例失去手术机会的老年肺癌患者随机分为虫草实验组和常规化疗组,观察了冬虫夏草在老年肺癌化疗过程中的扶正减毒作用,发现冬虫夏草有提高人体免疫功能,保护呼吸系统,并有辅助升高白细胞及血小板功能,能缓解化疗后的乏力症状、减少化疗后因免疫功能低下而引起的呼吸道感染,具有保护呼吸系统的作用。有人通过对人工培养冬虫夏草(Q80)配合化疗中、晚期恶性瘤的临床观察,结果表明:Q80能减轻放疗所引起的骨髓抑制作用,使患者外周白细胞和血小板较快地回升并稳定在正常范围,能提高化疗的耐受性,并能增强肿瘤患者的免疫功能,抑制肿瘤生长[13]。杨峻峰等[14]报道:冬虫夏草能促进恶性肿瘤患者CD4+细胞的增殖,改善患者的免疫功能,其机理可能与冬虫夏草的有效成份的合成刺激机体免疫活性细胞有关,患者对化疗毒性反应也明显下降。4　冬虫夏草抗肿瘤代用品研究由于天然虫草药源短缺,价格昂贵,其代用品及人工培养虫草菌丝已成为研究热点。自20世纪50年代从蛹虫草人工培养液的菌丝中就分离出虫草素,化学结构为3'-脱氧腺苷,其抗肿瘤活性日益受到重视。研究表明:蚕蛹虫草水煎剂给小白鼠灌胃,能明显抑制小鼠S180瘤块生长,延长荷瘤小鼠寿命,降低小鼠荷瘤率;明显抑制小鼠Lewis肺癌原发灶生长和自发肺部转移,促进小鼠脾淋巴细胞转化率,激活腹腔巨噬细胞吞噬活性。体外实验表明:具有直接抑制喉癌细胞生长及集落形成作用。ShinKH等[15]报道,虫草无性世代日本拟青霉(PJ)醇提物50mg/kg腹腔注射接种S180肿瘤细胞小鼠,能明显延长其生存时间,并减小瘤块的重量和面积。体外实验表明:PJ能明显增强磷酸酯酶和溶菌酶活性,提高巨噬细胞的吞噬能力,因此认为其抗肿瘤作用与促进免疫功能有关。有人研究了人工蛹虫草胞外多糖(CC-MEP)对治疗剂量卡铂(CBP)抗小鼠的实验性肿瘤作用的影响以及对毒性剂量卡铂骨髓抑制作用的影响,结果表明:CC-MEP呈剂量依赖性地增强CBP对H22实体瘤的抑制作用,并延长H22腹水瘤小鼠的存活时间,能对抗CBP引起的血小板数量的减少,可呈剂量依赖性地对抗CBP引起的骨髓细胞GSH-Px活性降低和MDA生成增加。YooHS等[16]用脐静脉内皮细胞(HUVECs),HT1080和黑素瘤B16-F10细胞作为靶细胞,体外研究了蛹虫草对血管生成相关基因(MMPs、bFGF)表达、毛细管形成、伤口康复,在体对黑素瘤生长的影响。结果表明:蛹虫草能抑制HUVECs和HT1080的生长,100或200mg/L能抑制MMP-2基因在HT1080细胞的表达,亦能抑制bFGF基因在HUVECs的表达,对小鼠接种黑素瘤B16-F10细胞的生长也具有抑制作用。总之,体内体外实验均证实了其能抑制血管形成和肿瘤生长的作用,表明蛹虫草能抑制瘤块血管生成,阻断瘤块血供,可能是其抗癌的作用机理。5　冬虫夏草抗肿瘤作用机理研究冬虫夏草的抗肿瘤机制还不十分清楚,可能与其增强免疫功能,促进非特异性免疫有关。据报道,冬虫夏草粗多糖能促进腹腔巨噬细胞的吞噬功能和产生肿瘤坏死因子的作用,而巨噬细胞对瘤细胞的吞噬,杀伤以及对肿瘤生成、转移的调节作用密切相关[17]。据报道,蛹虫草子实体可显著增强能直接杀伤肿瘤细胞的NK细胞活性,提高淋巴因子IL-2的产生,而IL-2又能诱导原始NK细胞的增强分化和前体NK细胞分化成熟表现活性,激活的NK细胞增强其裂解靶细胞的能力。这表明其抗癌作用除直接杀伤肿瘤细胞外,还可通过激活机体免疫系统使宿主特异性免疫功能增强而获得明显的免疫保护效应,是其机理之一[18]。Jagger认为虫草素抗癌的机理是:其含有一个游离的醇基,该醇基可掺入癌细胞作用于DNA,从而抑制癌细胞的核酸合成。亦有研究表明:虫草素是RNA合成抑制剂,可选择性的抑制RNA的合成,继而影响蛋白质的合成,具有抗肿瘤作用。至于虫草诱导肿瘤细胞凋亡的作用,有学者认为虫草菌丝体乙酸乙酯提取物可以诱导人白血病细胞的凋亡,但其机制尚未阐明。此外,冬虫夏草对小鼠前胃鳞状上皮癌变有阻断作用,其作81第11卷第6期 中　医　药　导　报 2005年6月Vol.11　No.6 GuidingJournalofTCM June.2005用可能与其硒含量有关。6　冬虫夏草抗肿瘤前景展望恶性肿瘤已是威胁人类生存的主要疾病之一,放疗和化疗除直接杀伤肿瘤细胞外,对宿主的免疫系统也造成损害。因此,临床实践经验启发人们对肿瘤的免疫治疗寄予厚望。近年来,临床上采用中药用于肿瘤化疗的辅助治疗,以此增强机体的免疫力。研究表明:菌类多糖的抗肿瘤作用与化学抗癌剂不同,它是通过提高机体的特异性或非特异性免疫功能,增强寄主本身免疫力,没有或甚少毒副作用。冬虫夏草能减轻化疗药所造成的机体免疫功能的损害,其作用已被证实。冬虫夏草是我国三大名贵(人参、鹿茸)滋补防病保健中药材之一,在国内外享有很高的声誉。随着社会的发展,研究的深入,人们对其抗肿瘤药效的认识逐渐加深。近几年来,冬虫夏草在抗肿瘤、增强免疫力和抗老防衰等方面研究取得重大进展,是药中珍品,有巨大的药食两用价值。因此天然冬虫夏草供不应求,市场价格已高达每公斤数万元人民币。目前国内已经有部分冬虫夏草制剂用于临床,如金水宝等,而且有一部分含有冬虫夏草的中药复方用于肿瘤的放化疗辅助治疗,如由人参、冬虫夏草和蚕蛹组成的三味补肾消渴口服液在提高患者免疫功能、提高生存质量等方面均有显著疗效。以后还应进一步加强临床研究,使这些冬虫夏草制剂更广泛地造福人类。可以预计,虫草在未来发掘抗肿瘤和抗衰老的新药研究中将倍受青睐,将会用于癌症、早衰、免疫缺陷等多种疾病的预防和治疗。参考文献:[1]KihoT,OokuboK,UsuiS,etal.Structuralfeathersandhypoglycemicactivityofapolysaccharide(CS-10)fromtheculturedmyceliumofCordycepssinensis.BiolPharmBull,1999,22(9):966[2]刘湘.从冬虫夏草得到的蛋白多糖C909具有抗肿瘤和免疫促进活性[J].国外医药·植物药分册,1995,10(2):91[3]BokJW,LermerL,ChiltonJ,etal.AntitumorsterolsfromthemyceliaofCordycepssinensis.Phytochemistry,1999,51(7):891～898[4]KuoYC,LinCY,TsaiWJ,etal.GrowthinhibitorsagainsttumorcellsinCordycepssinensisotherthancordycepinandpolysaccharides.Cancerinvest,1994;12(6):611～615[5]ChenYJ,ShiaoMS,LeeSS,etal.EffectofCordycepssinensisontheproliferationanddifferentiationofhumanleu-kemicU937cells.LifeSci,1997,60(25):2349～2359[6]ZhangW,YangJ,ChenJ,etal.Immunomodulatoryandantitumoreffectsofexopolysaccharidefraction(EPSF)fromacultivatedCordycepssinensisfungusontumor-bearingmice.BiotechnolApplBiochem,2004,15(12):256[7]YoshidaJ,TakamuraS,YamaguchiN,etal.Antitumorac-tivityofanextractofCordycepssinensis(Berk.)Sacc.a-gainstmurinetumorcelllines.JpnJExpMed,1989,59(4):157～161[8]NakamuraK,YamaguchiY,KagotaS,etalInhibilitoryeffectofspontaneouslivermetastasisofLewislungcarcino-maandB16melanomacellssyngeneicmice.JpnJPhama-col,1999,79(3):335～341[9]NakamuraK,KonohaK,YamaguchiY,binedeffectsofCordycepssinensisandmethotrexatemethotrexateonhematogeniclungmetastasisinmice.ReceptorsChan-nels,2003,9(5):329～334[10]YoshikawaN,NakamuraK,YamaguchiY,etal.Antitu-mouractivityofcordycepininmice.ClinExpPharmacolPhysiol,2004,31(S:S):51～53[11]ZhangQ,WuJ,HuZ,etal.InductionofHL-60apop-tosisbyethylacetateextractofCordycepssinensisfungalmycelium.LifeSci,2004,75(24):2911～2919[12]彭海鹰.冬虫夏草在老年肺癌化疗中的扶正减毒作用[J].天津中医,1999,16(5):～2[13]许建中,沈小衍.人工培养冬虫夏草配台化疗中、晚期恶性瘤的临床观察[J].中国药师,2002,5(12):746～747[14]杨峻峰,袁爱军,李平军,等.冬虫夏草口服液对晚期直肠癌化疗后T细胞亚群变化及副作用的影响[J].实用临床医药杂志,2004,8(2):69～70[15]ShinKH,LimSS,LeeS,etal.Anti-tumourandimmu-no-stimulatingactivitiesofthefruitingbodiesofPaecilo-mycesjaponicaanewtypeofCordycepsspp.PhytotherRes,2003,17(7):830～833[16]YooHS,ShinJW,ChoJH,etal.EffectsofCordycepsmilitarisextractonangiogenesisandtumorgrowth.ActaPharmacolSin,2004,25(5):657～665[17]林新坚,郑永标,陈济琛.冬虫夏草粗多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α的作用[J].微生物学杂志,2004,24(3):22～23[18]孙艳,官杰,王琪.人工蛹虫草子实体对荷肝癌小鼠的抑瘤作用及提高NK,IL-2活性的实验研究[J].中国药业,2002,11(2):39～40(收稿日期:2005-04-21　编辑:朱民)82第11卷第6期 中　医　药　导　报 2005年6月Vol.11　No.6 GuidingJournalofTCM June.2005

牡蛎多糖作用的研究进展

1. 引言

1.1 牡蛎多糖的定义

牡蛎多糖是一种来源于牡蛎的天然生物活性物质，具有多种生物活性和药理作用。牡蛎多糖是一种复杂的多糖类化合物，包括多种单糖单元组成的聚糖，如葡萄糖、甘露糖、半乳糖等。牡蛎多糖具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节、抗菌等多种生物活性，在医学、食品、生态环境等领域具有广泛的应用价值。

牡蛎多糖的结构特点决定了其具有多种生物活性，如极性基团和各种官能团的存在增强了其与生物体内相互作用的能力。牡蛎多糖可作为免疫调节剂，通过调节免疫系统功能，增强机体的抗病能力。牡蛎多糖还可用于抗氧化防腐、促进伤口愈合、调节血糖血脂等方面。在食品工业中，牡蛎多糖可用于增强食品的营养价值和口感，延长食品的保质期。牡蛎多糖对水质净化、土壤改良等环境保护工作也有一定的应用潜力。

1.2 研究背景

牡蛎多糖是一种来源于牡蛎的天然生物活性物质，具有多种生物活性和药用价值。随着人们对功能性食品和保健品的需求不断增加，牡蛎多糖因其独特的生物活性而备受关注。在过去的研究中，牡蛎多糖已被证实具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性，具有极大的潜力用于医学和食品工业。对于牡蛎多糖的起源、结构和生物活性机制仍有待深入研究。

2. 正文

2.1 牡蛎多糖的生物活性

牡蛎多糖是一种具有多种生物活性的生物大分子，在生物学和医学领域具有重要的研究和应用价值。牡蛎多糖具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性。

牡蛎多糖还具有显著的抗炎作用。实验研究发现，牡蛎多糖可以抑制炎症介质的释放，减轻炎症反应，有助于缓解炎症性疾病的症状。

牡蛎多糖还表现出抗肿瘤活性。研究发现，牡蛎多糖可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散，诱导肿瘤细胞凋亡，具有潜在的抗肿瘤治疗作用。

2.2 牡蛎多糖在医学上的应用

牡蛎多糖在医学上的应用主要体现在其在抗肿瘤、抗病毒、免疫调节、抗氧化等方面的作用。研究表明，牡蛎多糖具有明显的抗肿瘤活性，可以通过抑制肿瘤细胞的生长和扩散，促进肿瘤细胞凋亡。牡蛎多糖还能够增强机体免疫功能，提高机体抵抗力，对于提高免疫力、预防感冒等疾病具有一定的作用。 在抗病毒方面，牡蛎多糖能够抑制病毒的复制和传播，对于预防和治疗病毒感染有一定的效果。牡蛎多糖还能够调节人体内的氧化还原平衡，减少自由基对细胞的损伤，具有抗氧化的作用，有助于延缓衰老、提高皮肤光泽等功效。

doi:10.3969/j.issn.1000鄄484X.2019.09.023C型凝集素受体在肿瘤免疫作用中的研究进展淤杨芸宁摇徐媛媛摇龙摇珊摇李晓松于摇(中国人民解放军总医院第四医学中心,北京100048)摇摇中图分类号摇R392摇摇文献标志码摇A摇摇文章编号摇1000鄄484X(2019)09鄄1139鄄04

淤本文受国家自然科学基金(81572953)资助。于中国人民解放军总医院第四医学中心,北京100048。作者简介:杨芸宁,女,在读硕士,主要从事肿瘤免疫治疗方面的研究,E鄄mail:abyssnamechanging@163郾com。通讯作者及指导教师:李晓松,男,博士,副主任,硕士生导师,主要从事肿瘤激光治疗、肿瘤免疫方面的研究,E鄄mail:doctor301@sohu郾com。[摘摇要]摇C型凝集素受体(CLRs)是一种高表达于树突状细胞(DCs)的模式识别受体(PRRs),它参与了由DCs介导的针对肿瘤的非特异性免疫和特异性免疫。激活表达于DCs上的CLRs可显著提升机体免疫系统对肿瘤细胞的杀伤作用。本文将以CLRs中的Dectin鄄1和Dectin鄄2受体为例,对其在肿瘤免疫中发挥的作用及参与此过程的相关信号通路进行综述,并据此初步探讨CLRs未来在肿瘤免疫治疗中可能的应用。[关键词]摇C型凝集素受体;癌症;肿瘤转移;Dectin鄄1;Dectin鄄2;肿瘤免疫ResearchprogressonroleofC鄄typelectinreceptorsintumorimmunotherapyYANGYun鄄Ning,XUYuan鄄Yuan,LONGShan,LIXiao鄄Song郾TheFourthMedicalCenterofPLAGeneralHospital,Beijing100048,China[Abstract]摇Asoneofpatternrecognitionreceptors,C鄄typelectinreceptors(CLTs)werefoundtobehighlyexpressedbydendriticcells(DCs)andplayanimportantroleinthenon鄄specificimmunityandspecificimmunitymediatedbyDCstowardscanc鄄er郾StimulatingCLTsexpressedonDCswillsignificantlyimprovetheimmunitytowardtumorcells郾InthisreviewwediscusstheroleCLTsplayinginimmunotherapyfortumorsandrelativesignalingpathways,thendescribehowCLTscanbeusedinfutureimmunothera鄄py郾[Keywords]摇C鄄typelectinreceptors;Cancer;Tumormetastasis;Dectin鄄1;Dectin鄄2;Tumorimmunotherapy摇摇C型凝集素受体(C鄄typelectinreceptors,CLRs)主要在髓样细胞上表达,为一类内含至少一个C型凝集素样结构域(C鄄typelectinlikedomain,CTLD)的蛋白超家族。其最主要的功能是作为模式识别受体(Patternrecognitionreceptors,PRRs)通过识别来自于病原相关分子模式(Pathogen鄄associatedmolecularpatterns,PAMPs)、损坏相关分子模式(Damage鄄associatedmolecularpatterns,DAMPs)、肿瘤相关分子模式(Tumor鄄associatedmolecularpatterns,TAMPs)上的配体激活并调节宿主体内的免疫功能。根据蛋白在细胞膜上的定位,CLRs被分为跨膜型受体和游离型受体,这两种受体都具有一个或多个碳水化合物识别中心,并依赖此中心识别病原体或自身蛋白上的葡聚糖、甘露糖等多种配体。经典CLRs的特征是依赖协同Ca+识别配体,然而,也有很多CLRs在缺乏协同Ca+的情况下依然可辨认出多种配体,这种CLRs又被称为类C型凝集素样受体[1]。树突状细胞(Dendriticcell,DCs)作为目前所知功能最强的抗原呈递细胞(Antigen鄄presentingcell,APC),同肿瘤的发生、发展及在此过程中涉及的相关免疫反应有着密切联系,其上的PRRs包含了CLRs[2]。针对于CLRs在肿瘤免疫过程中所起到的作用,目前相关研究主要集中在树突状细胞相关的C型凝集素鄄1(DC鄄associatedC鄄typelectin鄄1,Dectin鄄1)受体、Dectin鄄2受体之上,而对其他的受体研究较少,所以本文选取以上两种受体为典型对CLRs进行探讨。1摇Dectin鄄1受体的基本结构及其在肿瘤免疫中的作用机制1郾1摇Dectin鄄1受体的结构及其分布摇Dectin鄄1受体作为CLRs超家族中的一员,具有域型跨膜结构[3]。由于其最早在DCs中被发现,故被命名为DC相关的C型凝聚素鄄1。曾有报道认为人类Dectin鄄1受体仅在髓样细胞·9311·杨芸宁等摇C型凝集素受体在肿瘤免疫作用中的研究进展摇第9期上表达[4],后来随着研究的逐步深入,研究人员发现Dectin鄄1受体同样也在单核细胞、巨噬细胞、B细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞上表达。近期,又有研究证明健康人体血液中的浆系DCs亚群也同样存在Dectin鄄1受体[5]。1郾2摇Dectin鄄1受体通过非特异性免疫发挥肿瘤免疫作用摇CLRs作为一种PRRs,其中Dectin鄄1受体高表达于DCs和巨噬细胞等APC上[6]。其中,DCs可通过细胞鄄细胞接触上调NK细胞分泌的细胞因子发挥抗癌作用,并通过细胞毒性作用阻止肿瘤生长[7,8]。此作用对于针对癌症的非特异性免疫意义重大,因而在此过程中涉及的Dectin鄄1受体也备受关注。APC在利用PRRs识别肿瘤相关抗原的过程中需要干扰素调节因子(Interferonregulatoryfactors,IRFs)参与相关信号通路并对肿瘤免疫进行调节。已有研究证明在先天缺乏IRF5的小鼠体内,黑色素瘤(B16F1)的肺转移非常明显。而Dectin鄄1受体在抗真菌的非特异性免疫过程中,其信号通路也涉及到IRF5[9]。因此,人们推测Dectin鄄1受体极有可能参与肿瘤免疫的非特异性免疫过程。在肿瘤免疫过程中,激活IRF5即可引起相对应的核内易位。Chiba等[10]经研究发现相对于野生型小鼠,在缺乏能编码Dectin鄄1受体的Clec7a基因小鼠体内,黑色素瘤细胞无法引起能代表IRF5活性的核内易位,这说明Dectin鄄1受体在IRF5的激活中起到了不可或缺的作用,同时相对于野生型小鼠,先天缺乏Dectin鄄1受体的小鼠黑色素瘤肺转移数量更多、程度也更严重。此后,研究人员又对比观察了野生型和Dectin鄄1受体缺陷型DCs暴露在黑色素瘤细胞中时的基因表达特性,发现其中干扰素调节因子3依赖性NK细胞激活分子(IFNregulatoryfactor3鄄dependentNK鄄activatingmolecular,INAM)基因的表达存在差异。已知INAM可通过它的嗜同种受体反应激活NK细胞[11],因此Dectin鄄1鄄IRF5鄄INAM信号通路至少部分参与了DCs激活NK细胞的过程。1郾3摇Dectin鄄1受体通过特异性免疫发挥肿瘤免疫作用摇部分Th细胞可发挥针对肿瘤的特异性免疫,而DCs在这类Th细胞的生成过程中不可或缺[12]。有研究证明表达于DCs上的Dectin鄄1受体在抗真菌免疫过程中参与诱导幼稚CD4+T细胞分化为Th17和Th1的过程[13],而这两种Th细胞也同样在抗癌过程中发挥其独特作用[14,15]。同时,近年来不断有报道证明在使用过继转移方法治疗黑色素瘤的过程中,Th9细胞所发挥的免疫治疗功能要优于其他Th细胞[16,17]。因此人们推测该受体可能同样参与诱导幼稚CD4+T细胞分化为Th9的过程,并与肿瘤免疫密切相关。针对以上推测,Zhao等[18]使用Dectin鄄1受体的兴奋剂凝胶多糖对小鼠骨髓来源的DCs进行处理,随后将其与幼稚CD4+T细胞共培养。结果显示,Dectin鄄1受体升高后的DCs相对于未经处理的DCs能够显著提高幼稚CD4+T细胞分化为Th9的数量。进一步研究发现,在此过程中,Dectin鄄1受体通过脾酪氨酸激酶和Raf1下游信号分子通路激活经典和非经典NF鄄资B信号通路掌控Th细胞的分化[19],除了参与相应的信号通路,研究表明Dectin鄄1受体在接受凝胶多糖刺激后可促使DCs过表达Th细胞分化所需的肿瘤坏死因子超家族成员15和OX40L分子,并由此促进CD4+T细胞分化为Th9细胞,其后Th9细胞分泌的IL鄄9可促使CD8+细胞毒性T细胞发挥肿瘤免疫功能[20]。然而,在最近的一项报道中,Daley等[21]发现表达于不同细胞上的Dectin鄄1受体功能存在差异。首先,研究人员通过Westernblot检测了胰腺导管腺癌小鼠和野生型小鼠中Dectin鄄1配体的含量,结果显示Dectin鄄1配体在前者中的表达要显著高于后者,同时接受了Dectin鄄1激动剂处理的小鼠胰腺导管腺癌的恶化程度要比未经处理的小鼠更加显著,以上结果似乎说明Dectin鄄1受体能够促进肿瘤的生长,这显然同之前的研究结果互相矛盾,然而,胰腺导管腺癌在被敲除Dectin鄄1受体基因的小鼠体内生长情况与野生型小鼠相比并未产生任何显著改变。进一步研究发现,Dectin鄄1受体主要在肿瘤细胞的上皮外间质中发挥促进肿瘤生长的作用。与野生型小鼠不同,缺乏Dectin鄄1受体的小鼠仅能诱导CD4+T淋巴细胞产生少量的IL鄄10,并不能减弱CD8+T淋巴细胞的细胞毒性作用。2摇Dectin鄄2受体的基本结构及其在肿瘤免疫中的作用机制2郾1摇Dectin鄄2受体的结构及分布摇Dectin鄄2的结构同Dectin鄄1相似,都为域型跨膜受体并具有一个保守糖类识别中心(Conservedcarbohydrate鄄recognitiondomain,CRD)[22]。CRD位于Dectin鄄2受体的碳末端,同时它还拥有一个短小的氮末端细胞质中心。Dectin鄄2受体最初在单核细胞和巨噬细胞上被发现,此后又不断有报道表明在Kupffer细胞、Langerhans细胞和一些DCs上也发现了它的存在[23]。·0411·中国免疫学杂志2019年第35卷2郾2摇Dectin鄄2受体通过Kupffer细胞发挥吞噬和清除肿瘤细胞的功能摇通过上文我们已经了解Dectin鄄1受体作为一种CLRs可通过激活NK细胞发挥抑制肿瘤生长和转移的重要作用[10],因此同为CLRs、与Dectin鄄1的序列同源性较高并同样接受FcR酌调节的Dectin鄄2受体也开始备受关注[22,24]。为验证Dectin鄄2受体是否也具有肿瘤免疫功能,Kimura等[25]将结肠癌细胞株(SL4)、肺癌细胞株(3LL)、黑色素瘤细胞(B16F1、B16F10)分别注入野生型小鼠和Dectin鄄2缺陷型小鼠,结果显示注入SL4、B16F1、B16F10的Dectin鄄2缺陷型小鼠肿瘤肝转移的机率都高于同样注入这些细胞的野生型小鼠,然而,注入3LL的Dectin鄄2缺陷型小鼠却没有发生这种现象。与Dectin鄄1受体不同的是,Dectin鄄2受体并非高表达于DCs,而于CD11b+F4/80+Kupffer细胞上。此后,经细胞流式仪测定,NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD45-T细胞同样不表达该受体。Dectin鄄2通过Kupffer细胞发挥吞噬和清除肿瘤细胞的功能,但此功能并不适用于全部的肿瘤细胞,例如它就不适用于3LL,而与此相反,Dectin鄄1却可通过激活NK细胞抑制3LL转移[10]。此外,有研究表明依赖Dectin鄄2受体激活的Nlrp3炎症小体可通过增强NK细胞功能抑制肿瘤肝转移[26]。这些都说明尽管Dectin鄄2受体和Dectin鄄1受体在基本结构和信号通路上有部分相似之处,但是其功能作用却不尽相同。随后为了探索Dectin鄄2抑制的肿瘤转移阶段,研究人员又将表达绿色荧光蛋白的SL4细胞注入小鼠体内,并通过检测不同时间段人GDNF家族受体mRNA的表达证明Dectin鄄2受体在肿瘤肝转移早期发挥作用。综上,高表达于Kupffer细胞的Dectin鄄2受体可在早期抑制部分肿瘤细胞的肝转移。但是Dectin鄄2在肿瘤免疫过程中涉及到的信号通路依然尚未明确。除了备受关注的Dectin鄄1和Dectin鄄2受体,人们也对其他CLRs在肿瘤免疫方面产生的作用做了初步研究[27],例如骨髓抑制性C型凝集素样受体和树突状细胞NK凝集素受体鄄1等。其中,MICL也被称为CLEC12A,在人体所有的DCs亚群中都广泛表达[28]。此前已有研究证明在小鼠模型中同鸡卵白蛋白结合的琢CLEC12A抗体可诱导鸡卵白蛋白特异性的CD4+和CD8+T细胞反应[29],同时,近几年又发现CLEC12A可通过NDCA鄄1+mDCs和pDCs高效介导组织相容性抗原鄄1长肽的提呈以及交叉呈递,继而引发接受造血干细胞移植后的患者体内大量CD8+T细胞被激活[30],这些都侧面验证了CLEC12A能在肿瘤免疫过程中发挥一定作用。人类DNGR鄄1是一种仅在血液DCs亚群中表达的CLRs,同时它还具有胞吞作用,这都说明它可能具有帮助DCs递呈抗原的能力。在体外,DNGR鄄1的特异性抗体可同抗原决定簇共价结合,最终被CD8琢+DCs交叉递呈,在此过程中若给予相应佐剂,可诱发大量的细胞毒性反应。同时也有研究证明在体内使用DNGR鄄1相关抗体和相应佐剂可抑制黑色素瘤的肺转移[31]。3摇总结与展望CLRs的抗原提呈和免疫自稳功能使其在肿瘤免疫方面拥有巨大潜力[32]。根据文献报道,Dectin鄄1受体激动剂茁鄄葡聚糖可以激发强烈的肿瘤免疫反应,应用于多种癌症的治疗[33]。同时,应用DNGR鄄1特异性抗体和佐剂结合则可抑制黑色素瘤肺转移[31]。但是通过整理近几年的文献我们发现,针对CLRs的研究主要集中在Dectin鄄1受体之上,而对其他受体缺乏更加深入的研究,且关于CLRs在肿瘤免疫过程中涉及到的信号通路的研究也缺乏整体性和系统性。需要引起注意的是,不同细胞上表达的CLRs在免疫功能中的作用可能并不统一,甚至是互相矛盾的[34]。因此若想利用CLRs的肿瘤抗原递呈功能增强人体的肿瘤免疫能力,不能单纯地通过注射佐剂激发宿主体内所有CLRs活性,而需精确至不同类型的细胞。例如,我们可使用激动剂在体外处理DCs疫苗,增强其对于肿瘤抗原的递呈能力。综上,CLRs在肿瘤抗原递呈方面的巨大潜力给肿瘤免疫治疗提供了新思路,但是其具体作用原理及作用过程中所涉及到的相关信号通路仍需我们进一步探索。参考文献:[1]摇DambuzaIM,BrownGD郾C鄄typelectinsinimmunity:recentdevelopments[J].CurrOpinImmunol,2015,32(32):21鄄27郾[2]摇AkiraS,UematsuS,TakeuchiO郾Pathogenrecognitionandinnateimmunity[J].Cell,2006,124(4):783鄄801郾[3]摇AriizumiK,ShenGL,ShikanoS,etal.Identificationofanovel,dendriticcell鄄associatedmolecule,dectin鄄1,bysubtractiveCDNAcloning[J].JBiolChem,2000,275(26):20157鄄20167郾[4]摇Meyer鄄WentrupF,Benitez鄄RibasD,TackenPJ,etal.Targeting·1411·杨芸宁等摇C型凝集素受体在肿瘤免疫作用中的研究进展摇第9期

广东医学２０１５年５月第３６卷第１０期　Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　Ｍａｙ．２０１５，Ｖｏ１．３６，Ｎｏ．１０　

氯硝柳胺抗肿瘤作用的研究进展术　

向梅，徐祖敏，余忠华　

广东医学院附属医院肿瘤科（广东湛江５２４００３）　

氯硝柳胺，化学名：Ｎ一（２　一氯一４　一硝基苯）一５一氟　

水杨酰胺，是目前美国食品药品监督管理局唯一推荐使用的　

灭螺药和治疗蠕虫的药物，已经有５０多年的应用历史。研　

究认为氯硝柳胺主要通过降低钉螺体内细胞色素ｃ氧化酶、　

乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、胆碱酯酶和一氧化氮合酶等酶　

的活性影响钉螺体内糖原合成，导致其能量代谢障碍，从而　

引起钉螺死亡。氯硝柳胺对寄生虫的的杀灭机制主要表现　

在使线粒体的氧化磷酸化解偶联，阻断ＮＡＤＨ—ＮＡＤＰ　的电　子传递，抑制ＡＴＰ的产生。有研究发现氯硝柳胺通过ＮＦ—　

ＫＢ、Ｗｎｔ、ＳＴＡＴ３、ｍＴＯＲＣ１、Ｎｏｔｃｈ等信号通路抑制多种肿瘤细　

胞及移植瘤的生长，发挥抗肿瘤的作用．还可以与抗肿瘤药　物具有协同效应或逆转放化疗过程中抗拒细胞的抗拒性，从　

而具有增敏作用。因而，对氯硝柳胺抗肿瘤作用的研究可能　

为其用于肿瘤的治疗提供依据。本文拟对氯硝柳胺抗肿瘤　

作用的研究进展作一综述。　

１　氯硝柳胺对肿瘤细胞的作用　

２００９年，ＷＡＮＧ等”　首次报道氯硝柳胺可以抑制白血　

病细胞Ｉ（５６２中Ｎｏｔｃｈ信号通路靶基因蛋白ＨＥＳ一１、Ｃｙｃｌｉｎ　

Ｄ１和ｃ—Ｍｙｃ的表达，从而掀起了氯硝柳胺抗肿瘤作用及其　

机制的研究热潮。在其他多种肿瘤，如乳腺癌、肺癌、结肠　

癌、卵巢癌、前列腺癌、喉癌中也证实氯硝柳胺具有抗肿瘤作　用。研究表明，氯硝柳胺可通过不同的信号通路如Ｗｎｔ、　

ｍＴＯＲＣ１、ＮＦ—ＫＢ、ＳＴＡＴ３、Ｎｏｔｃｈ、ＲＯＳ等抑制不同肿瘤细胞　

的增殖、迁移、侵袭能力，并能促进细胞的凋亡。　

１．１　氯硝柳胺与Ｗｎｔ信号通路的关系　Ｗｎｔ信号通路在肿　

瘤的发生发展中起着重要的作用，Ｗｎｔ蛋白与受体结合后，