微生物检验技术知识点

微生物检验主要知识点总结一、微生物检验的概念微生物检验是指利用现代生物学技术手段检验和鉴定食品、饮用水、药品、环境等物品中微生物的种类和数量的一种实验室检验方法。

微生物检验的主要目的是为了评估物品中微生物的数量及种类是否达到卫生标准，以保障人们的健康和安全。

二、微生物检验的重要性1. 保障公共卫生：微生物检验可以及时发现食品、饮用水、药品等物品中存在的微生物污染，有针对性地采取相应的措施，从而保障公共卫生。

2. 保障产品质量：微生物检验可以帮助企业检测产品是否受到微生物污染，保障产品的质量和安全。

3. 疾病预防：微生物检验可以检测出病原微生物，为疾病的预防和控制提供科学依据。

三、微生物检验的主要流程1. 采样：根据不同的检验对象，选择合适的采样方法和设备进行样品采集。

2. 样品处理：将采集的样品进行处理，以提取出微生物进行检测。

3. 细菌培养：将样品中的微生物分离培养，以获取单一的微生物种类。

4. 微生物鉴定：通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法对微生物进行鉴定。

5. 微生物计数：对样品中的微生物进行计数或定量。

6. 结果分析：根据检验结果，评估样品是否符合相关的卫生标准。

四、微生物检验中的常用方法1. 培养法：将样品涂在含有营养物质的培养基上，利用条件恰当的培养环境，使样品中的微生物进行生长。

2. 影像法：通过显微镜观察培养好的微生物，观察其形态特征，进行鉴定。

3. 生化鉴定法：根据微生物的代谢过程，通过一系列的生化反应，鉴别微生物属种。

4. 分子生物学方法：利用PCR、DNA测序等技术，对微生物进行鉴定。

五、微生物检验中的常见问题1. 选择合适的检验方法：不同的微生物污染可能需要不同的检测方法，需根据具体情况选择合适的方法。

2. 样品的处理和保存：样品的处理和保存条件对检验结果有着重要的影响，需要严格按照标准操作。

3. 检验结果的分析和判断：检验结果可能存在假阳性、假阴性等情况，需要结合其他信息进行分析和判断。

检验师微生物检验知识点集锦微生物检验是现代医学中的重要检验项目之一，主要用于检测病原微生物的存在和种类，以及对药敏试验进行评估。

作为初级检验师，你需要掌握以下几个方面的知识点：1.微生物基础知识-微生物的分类和命名规则：包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等分类。

-微生物的形态和结构：掌握不同类别微生物的形态特征和结构组成，如细菌的形状、胞壁和胞质等。

-微生物的生长条件：了解微生物的生长条件，包括温度、湿度、pH值和营养物质等。

2.微生物检验方法-样品采集及处理：理解不同样品（如血液、尿液、分泌物等）的采集方法和处理步骤，以确保样品的准确性和可靠性。

-培养方法：熟悉不同微生物的培养方法，包括琼脂培养基的配制、接种方法和培养条件等。

-鉴定方法：了解常见微生物的鉴定方法，包括形态学鉴定、生化试验和分子生物学方法等。

-药敏试验：掌握药敏试验的原理和操作步骤，用于评估微生物对不同抗生素的敏感性，并为临床治疗提供参考。

3.常见病原微生物-常见病原菌：学习常见病原菌的分类、形态和致病特点，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。

-常见病毒和真菌：了解一些常见的病毒和真菌的致病性和检测方法，例如流感病毒、念珠菌等。

-传染病的检测：学习不同传染病的检测方法，包括艾滋病、结核病和流行性感冒等。

4.质控和质量管理-质量控制：了解微生物检验中的质量控制措施，如内外质控、质量标准和质量评估等，确保结果的准确性和可靠性。

-安全措施：掌握微生物检验过程中的安全措施，如个人防护、试剂的正确使用和实验室的卫生管理等。

除了以上的基础知识，你还需要掌握实验中的仪器操作、数据分析和结果解读等技能。

微生物检验是一个综合性较强的检验项目，需要不断学习和实践，提高自己的技术水平和判断能力。

微生物检验技术知识点1.培养方法：培养是微生物检验的基础，通过将样品接种到培养基上，使微生物在合适的环境中繁殖生长。

培养方法包括常规培养和不同培养手段。

常见的培养手段有液体培养、固体培养和胶体培养等。

2.鉴定方法：微生物的鉴定是判断其种属、属或是菌株的过程。

传统的鉴定方法包括形态学、生理生化特性和生物学特性等，而现代鉴定方法则应用了分子生物学等技术。

常用的鉴定技术有酶联免疫吸附试验（ELISA）、脱氧核糖核酸（DNA）杂交和聚合酶链反应（PCR）等。

3.纯化和分离方法：对于复杂的微生物种群，需要进行纯化和分离，以便对特定的微生物进行进一步的研究。

纯化和分离方法包括传统的分光技术、平板法和筛选法，以及最新的流式细胞术、脉冲场凝胶电泳（PFGE）和DNA测序技术等。

4.对微生物的抗生素敏感性检测：抗生素敏感性是指微生物对抗生素的反应情况。

抗生素敏感性检测可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗细菌感染疾病。

目前常用的抗生素敏感性检测方法包括纸片扩散法、E测试和微量稀释法等。

5.流行病学监测：微生物检验技术在流行病学监测中发挥着重要作用。

通过对微生物种群的监测和分析，可以及时发现并控制传染病的传播。

流行病学监测常用的技术包括病原体分子鉴定、序列分析和生物信息学分析等。

6.污染控制技术：微生物检验技术也在环境和食品安全方面发挥着重要作用。

通过对环境和食品中微生物的检验，可以评估污染程度，并采取相应的控制措施。

常用的污染控制技术包括灭菌消毒、高温杀菌和辐照等。

7.微生物基因工程：微生物基因工程是指利用基因工程技术对微生物进行改造，以生产有用的产物或者改善微生物的特性。

微生物基因工程的应用广泛，可以用于制药、农业、环境工程等领域。

常见的微生物基因工程技术包括基因克隆、基因敲除和基因转导等。

总之，微生物检验技术是一门广泛应用于医学、生物学、环境工程等领域的技术。

通过不断地研究和创新，微生物检验技术将为疾病诊断、污染控制和资源利用等问题提供更好的解决方法。

微生物检验基础知识点总结微生物检验是临床诊断中的重要技术手段，通过对患者样本中的微生物进行分离、鉴定和药敏试验，可以确定感染性疾病的病原体及其对药物的敏感性，为临床治疗提供重要依据。

微生物检验涉及到许多基础知识点，下面将分别从微生物分类、微生物培养、微生物鉴定和药敏试验等方面来总结微生物检验的基础知识点。

一、微生物分类微生物是一种广泛分布于自然界中的生物体，包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。

而在临床微生物检验中，最常见的微生物主要是细菌和真菌。

下面将分别介绍细菌和真菌的分类。

1. 细菌的分类细菌是一类单细胞生物，其形态多样，包括球菌、杆菌、螺旋菌等。

从生物学特性上可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

（1）革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌直接在植物或培养基上形成蓝、紫色颗粒。

细胞壁是由聚糖和一种特殊的脂质组成。

革兰氏阳性菌包括葡萄球菌、链球菌等。

这类细菌能在治疗性的延续性用药下适度存活。

（2）革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌则是指革兰氏润湿的时候是红色的细菌，单层数细胞壁，比革兰氏阳性菌的致病能力更强，但是也更容易受到抗菌素或药物的影响。

这类细菌包括大肠杆菌、沙门氏菌等。

2. 真菌的分类真菌是一种含有真核细胞核的微生物，包括酵母菌和菌丝菌两类。

（1）酵母菌酵母菌是一种单细胞真菌，能在酵母天然的酵母营养生长，大部分为革兰氏染色阳性，不表现形成孢子的原始生长特性。

酵母菌包括念珠菌、假丝酵母等。

（2）菌丝菌菌丝菌是一类多细胞真菌，其细胞由菌丝组成，通常由菌落分离。

它们通常是真菌，因为它们在呼吸和生长条件下形成的真菌菌丝。

菌丝菌包括白色念珠菌、曲霉菌等。

二、微生物培养微生物培养是微生物检验中的重要环节，通过在适当的培养基上提供适当的温度、湿度、氧气和营养物质，使微生物在含有以上条件的环境中进行繁殖和生长。

1. 培养基的分类与特点培养基是一种含有适量营养成分的物质，用于微生物的生长和繁殖。

根据不同的需求和用途，培养基可分为富营养基、简单基、选择基和不同温度适应基等。

【微生物学检验】知识点整理（第一部分）简述致病菌引起全身感染后，常见的几种类型？答：①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症试述构成细菌侵袭力的物质基础。

答：①荚膜②黏附素③侵袭性物质简述病原菌感染机体后，机体如何发挥抗菌免疫功能？答：首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构，血脑屏障，胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。

7-10天后，机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌简述细菌耐药性产生的主要机制。

答：①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力，在这种压力的作用下，原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来，并不断扩大。

举例说明细菌命名的原则。

答：细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。

一个细菌种的学名由两个拉丁字组成，属名在前，用名词，首字母大写；种名在后，用形容词，首字母小写；两者均用斜体字。

中文译名种名在前，属名在后。

如Mycobaterium tuberculosis （结核分枝杆菌）。

属名亦可不将全文写出，只用第一个大写字母代表，如M. tuberculosis 如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。

答：①直接镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报告疑为葡萄球菌，需进一步分离培养鉴定。

②分离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需连续观察7天，并以血平板确定有无细菌的生长。

脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37℃过夜，可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。

金葡菌菌落周围有透明溶血环。

③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定，SPA检测。

致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性，甘露醇发酵试验阳性，耐热核酸酶试验阳性，SPA检测有A蛋白的存在。

微⽣物检验技术知识点1微⽣物：是⼀群形体细⼩、结构简单、⼈⾁眼看不见，必须借助于光学显微镜、电⼦显微镜放⼤⼏百倍、⼏千倍甚⾄⼏万倍才能看到的⽣物。

2 微⽣物的种类：原核细胞型：细菌、放线菌、螺旋体、⽴克次⽒体、⽀原体、⾐原体；真核细胞型：酵母菌、霉菌、微藻类等；⾮细胞型：病毒、亚病毒（类病毒、拟病毒、朊病毒）。

3 病源微⽣物：感染⼈、动植物，导致疾病发⽣的有害微⽣物，称之为病原微⽣物。

4、微⽣物对产品的污染：对产品造成污染的微⽣物来源：⼟壤、空⽓、⽔、⼈和动植物、⽣产原料、⽣产器械及包装材料等5 微⽣物检验的意义：1）是衡量动植物性产品卫⽣质量的重要指标之⼀，也是判定被检产品能否⾷⽤的科学依据之⼀。

2）通过微⽣物检验，可以判断产品加⼯环境及产品卫⽣环境，能够对产品被微⽣物污染的程度作出正确的评价，为各项卫⽣管理⼯作提供科学依据，提供传染病和⼈类、动物和⾷物中毒的防治措施。

3）微⽣物检验是以贯彻“预防为主”的卫⽣⽅针，可以有效地防⽌或者减少⾷物中毒、⼈畜共患病的发⽣，保障⼈民的⾝体健康；同时，它对提⾼产品质量，避免经济损失，保证出⼝等⽅⾯具有政治上和经济上的重要意义。

6微⽣物检验的范围与对象：微⽣物检验<>范围1.⽣产环境的检验：车间⽤⽔、空⽓、地⾯、墙壁等。

2.各种产品的原、辅料检验：包括⾷⽤动物、⾕物、添加剂等⼀切原辅材料。

3.各类产品加⼯、储藏、销售诸环节的检验：包括⾷品从业⼈员的卫⽣状况检验、加⼯⼯具、运输车辆、包装材料的检验等。

4.产品的检验：重要的是对出⼚产品、可疑产品及⾷物中有毒⾷品的检验.微⽣物检验<>对象7类(1)⾷品(2)化妆品(3)药品(4)⼀次性⽤品及其他⽣活⽤品(5)应施检疫的出⼝动物产品(6)环境(7)有关国际条约或其他法律、法规规定的强制性卫⽣检验的进出⼝商品我国卫⽣部颁布的⾷品微⽣物指标有菌落总数、⼤肠菌群和致病菌三项⼤肠菌群是指⽰⽔质受粪便污染的指⽰菌，细菌总数指⽰⽔体受污染物污染的情况。

临床微生物检验知识点1.微生物学基础知识：了解细菌、真菌、病毒、寄生虫等病原微生物的基本特征，包括形态、生长要求、代谢特性等。

2.微生物的分离和培养：熟悉常规培养基的选择和制备，掌握不同微生物的适宜培养条件，如温度、pH值、氧气需求等。

3.微生物鉴定：根据微生物的形态和特性进行初步鉴定，如形态学特征、革兰氏染色、厌氧性检测等。

此外，还可以使用生物化学试纸、血清学试验、分子生物学等方法进行鉴定。

4.耐药性检测：对微生物进行药敏试验，了解其对各类抗生素、抗真菌药物、抗病毒药物的敏感性和耐药性。

这有助于临床医生选择合适的药物治疗感染。

6.检验流程和规范：了解微生物检验的标本采集、处理和保存的基本要求，掌握各类检验方法的操作步骤，遵守无菌操作规范，以保证检验结果的准确性和可靠性。

7.抗生素治疗和微生物学监测：了解抗生素的分类、作用机制和临床应用，以及微生物的产生耐药性的机制和监测方法。

合理应用抗生素，避免滥用和不当使用，是临床微生物检验的重要目标之一8.感染控制：了解医院感染控制的基本原则和措施，包括手卫生、环境清洁、消毒灭菌、隔离措施等。

临床微生物检验在感染控制中发挥着重要作用，通过对患者、环境和医务人员的监测，提供科学依据进行感染防控。

9.病原微生物的定量检测：对一些病原微生物，如HIV、肺结核菌等，需要进行定量检测。

这有助于预测疾病进展、评估治疗效果和制定治疗方案。

10.新技术和新方法的应用：随着科技的进步，临床微生物检验也不断发展，新的方法和技术被广泛应用，如实时荧光PCR、质谱技术、核酸杂交等。

了解这些新技术的原理和应用，可以提高检验的灵敏度和特异性。

总结起来，临床微生物检验的知识点涉及微生物学基础、分离培养、鉴定、药敏试验、诊断、标本采集处理、抗生素治疗和感染控制等方面。

掌握这些知识，可以提高临床微生物检验的准确性和可靠性，为临床医生提供更科学的诊断和治疗建议。

微生物实验知识点微生物实验是指对微生物进行观察、培养、检测及相关实验操作的科学研究方法。

下面是一些关于微生物实验的知识点：1.实验室安全：进行微生物实验时，必须遵守实验室的安全规范，包括佩戴实验手套、口罩和实验服。

同时，实验室的环境要定期消毒，以防止微生物的交叉污染。

2.微生物培养基：微生物实验常用的培养基有固体培养基和液体培养基。

固体培养基可以用于分离纯培养和观察菌落形态，而液体培养基常用于大规模培养微生物。

3.纯培养与混合培养：纯培养是指从一种微生物中分离出单一的菌株进行培养，得到纯净的培养物；混合培养是指将两种或多种微生物一起培养，观察它们之间的相互作用。

纯培养和混合培养的选择取决于实验的目的和研究内容。

4.微生物的分离与鉴定：微生物实验常用的分离方法包括涂布法、稀释法和过筛方法。

通过形态特征观察、生理生化测试、分子生物学技术等方法，可以鉴定微生物的种属和菌株。

5.微生物生长曲线：微生物生长曲线是研究微生物生长动力学的重要实验方法，通过连续测量微生物的生物量、代谢产物或生长速率，可以得到微生物在一定条件下的生长曲线，以了解微生物的生长特性。

6.抗菌药物敏感性试验：抗菌药物敏感性试验是评价微生物对不同抗菌药物的敏感性和抗性的实验方法。

通过测定微生物对抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC）或抑菌圈直径，可以判断微生物对抗菌药物的敏感程度。

7.酶活性检测：微生物实验中常用酶活性检测来评估微生物酶的产生与活性。

通过观察酶的底物转化情况、染色反应、电泳分析等方法，可以确定微生物是否具有特定酶的活性。

8.微生物的遗传转化：遗传转化是指微生物通过吸收外源性的遗传物质，如质粒DNA或线性DNA片段，加入到自身的遗传物质中。

通过转化实验可以在微生物中引入外源基因、观察基因的表达和相关功能的变化，进一步研究微生物基因的功能。

这些知识点涵盖了微生物实验的基本概念、常用实验方法和技术应用，希望对你有帮助！。

最新微生物检验技术知识点
微生物检验技术是一种重要的微生物学实验技术，用于检测和鉴定病
原体，以及检测水质、食品、微生物活性及药物有效性等等。

其主要包括
培养方法、显微镜观察、荧光电镜检测、抗原检测、PCR技术（聚合酶链
反应）、单克隆技术、DNA杂交、PFGE（凝胶电泳）、微生物统计分析等。

一、培养方法
培养方法是最常用的微生物检验技术之一，它可以检测和鉴定潜在的
病原体，例如细菌、真菌、病毒和衣原体等。

它包括简单培养、麦氏体培养、选择性培养、厌氧培养、杂质培养、耐热培养等。

它可以显示被检测
的微生物在培养基上的增生情况，以及微生物特异现象，如色泽、形态和
细胞大小等，从而可以鉴别微生物。

二、显微镜观察
显微镜观察是一种检测微生物的重要技术，它可以清晰的观察到微生
物的形态结构。

它主要分为普通显微镜观察（细胞膜）、冰冻电镜观察
（细胞质）、核磁共振观察（细胞核）和荧光显微镜观察（荧光成分）等。

它可以观察微生物细胞材料的形状、大小和分子结构，从而帮助确定微生
物的身份和鉴定。

三、荧光电镜检测
荧光电镜是一种高灵敏度的显微技术，其原理主要是将荧光标记的抗
原或抗体与样品交叉结合。

临床微生物检验知识点临床微生物检验是通过对临床样本进行微生物学检验，利用各种实验方法和技术手段，对病原微生物进行鉴定、分离、培养和药敏试验，从而帮助医生进行准确诊断和合理治疗的一项重要检测技术。

以下是一些临床微生物检验的知识点。

1.微生物的鉴定：通过观察病原微生物的形态特征、生理生化指标、生物学特征等，进行鉴定。

常用的方法包括显微镜观察、革兰染色、培养特性观察等。

2.微生物的分离：将样本中的微生物分离出来，使其能够单独生长并进行后续的检验和鉴定。

常用的方法包括涂布法、稀释涂布法、过滤法等。

3.微生物的培养：将分离后的微生物进行培养，使其能够增殖形成纯种，并提供足够的数量用于进一步检验。

常用的培养基包括富养基、选择性富养基、增菌富养基等。

4.微生物的药敏试验：通过对分离的病原微生物进行不同抗菌药物的敏感性试验，确定该微生物对抗菌药物的敏感性和抗药性。

常用的方法有纸片法、扩散法、微量稀释法等。

5.微生物的快速检测方法：为了达到更快速、准确的临床微生物检测结果，目前发展了许多快速检测方法，如PCR技术、基因测序技术、质谱技术等。

6.微生物的标本采集和保存：正确的标本采集对于临床微生物检验结果的准确性和可靠性至关重要。

常见的标本有血液、尿液、痰液、脑脊液、伤口分泌物等。

标本采集后应存放在适当的条件下，以避免微生物的生长和变质。

7.常见病原微生物的检验：临床微生物检验主要涉及到常见的病原微生物，如细菌、真菌、病毒和寄生虫等。

对于每种病原微生物的检验方法和操作要点有所不同。

8.质量控制：临床微生物检验对质量控制要求较高，包括内、外质控。

内质控主要通过引入质控菌株进行培养和药敏试验等操作，确保检测结果的准确性和可靠性。

外质控则是通过参加各种质量评估项目来衡量实验室的检测质量。

在临床微生物检验过程中，需要严格遵守相关的操作规范和质量控制要求，以确保检验结果的准确性和可靠性。

临床医生在接到微生物检测结果后，应结合临床病情和患者的病史等信息，合理解读检验结果，并进行科学的诊断和治疗。

绪论1. 微生物的定义与特点一，微生物的概念与特点; 微生物的分类；1. 微生物（microorganism ）是一群个体微小，结构简洁，肉眼不能直接观察，必需借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观看到的微小生物的总称；2. 微生物的特点个体微小，结构简洁比表面积大，吸取多，转化快繁衍快，代谢强适应强，易变异种类多，分布广1. 微生物类型依据微生物大小，结构和组成不同分为三类型2. 病原微生物的定义病原微生物：是指能引起动物，植物或人类产生疾病的微生物；3. 医学微生物学的进展简史；.微生物的发觉与讨论（1）列文虎克创造显微镜，最早观看到微生物；微生物学讨论的创始人：巴斯德，科赫，李斯特第一章第一节细菌的基本性状细菌的形状与结构1.细菌细胞壁的结构和功能，肽聚糖结构及其化学组成；革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区分（一）细胞壁化学组成与结构，革兰染色共有组分：肽聚糖特别组分：G+ 菌，G- 菌不同革兰阳性菌细胞壁特别组分：磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特别组分：外膜革兰阴性菌细胞壁肽聚糖2.细胞壁的功能：:聚糖骨架，四肽侧链（1）维护细菌固有形状和抗击低渗作用；（2）物质交换作用；（3）屏障作用；（4）免疫作用；（5）致病作用；（6）与细菌药物敏锐性有关；G+ 菌与G- 菌细胞壁结构比较. 细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同，. 细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称2.细菌荚膜，鞭毛和菌毛的功能；荚膜：功能：由磷脂和多种蛋白质组成，中介体；但不含胆固醇；有抗吞噬和抗击杀菌物质的杀菌作用，增强细菌的侵袭力，构成细菌致病力的重要因素之一；②具有免疫原性；③鉴别细菌和血清学分型鞭毛：功能：细菌的运动器官菌毛一般菌毛：具有黏附性，与细菌致病性有关；性菌毛：与细菌的遗传变异相关3.芽胞结构特点，意义，与消毒灭菌的关系；细菌L 型的形状特点，检验要点；芽胞：某些细菌（主要为革兰阳性杆菌）在肯定条件下，细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强，具有多层膜状结构，通透性很低的圆形或卵圆形的小体；L 型细菌：细胞壁缺陷的细菌；常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中；依据细胞壁缺陷程度分：原生质体（完全失去细胞壁，见于原生质球（细胞壁部分缺损，见于G+菌，仅在高渗环境中存活)G-菌，在高渗或非高渗环境中均能存活）4.G+ 菌和G- 菌细胞壁结构的差异及其意义；其次节细菌的生理细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC 试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义；细菌的生长繁衍（一）细菌生长繁衍的条件1. 充分的养分物质2. 相宜的酸碱度3. 合适的温度4. 必要的气体环境包括：水，碳源，氮源，生长因子等；多为～；多数病原菌为35℃～37℃；O2 和CO 2；主要是按细菌对O2 的需要与否，将细菌分为：细菌生长繁衍的规律细菌的繁衍方式：无性二分裂；细菌的繁衍速度：大多数细菌20～30 分钟即可分裂一次；2.细菌的养分类型和养分机制，自氧菌与异氧菌的概念；3.细菌的生长曲线及其特点；（一）能量代谢细菌猎取能量的途径——生物氧化；细菌能量代谢的主要类型：（二）分解代谢检测细菌糖分解产物的常用试验：糖发酵试验，甲基红试验，VP 试验等；检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验：吲哚（靛基质）试验，硫化氢试验，苯丙氨酸脱氨酶试验等；其他检测细菌分解产物的常用试验：尿素分解试验，枸橼酸盐利用试验等；第三节细菌与环境1 正常菌群的概念和生理功能；条件致病菌的概念2.正常菌群的生理功能；条件致病菌的概念3.消毒，灭菌，无菌，无菌操作等概念；高温消毒灭菌法及其应用；二，细菌的掌握（一）基本概念：消毒杀死物体或介质中病原微生物的方法；灭菌杀灭物体或介质中所有微生物的方法；无菌无活菌存在的状态；无菌操作防止微生物进入机体或物体的操作技术；防腐防止或抑制细菌生长繁衍的方法；4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用；噬菌体与宿主的相互关系；其次章真菌的基本性状真菌的概念真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的区分第三章病毒的基本性状病毒的大小病毒的结构病毒的增殖病毒的复制周期第四章微生物与感染细菌致病三大因素细菌内外毒素的区分毒血症，菌血症，败血症，脓毒血症的概念全身感染的类型其次篇第五章第一节微生物检验的基本技术细菌的检验技术细菌形状检验技术细菌染色的一般程序染色标本检查的一般程序革兰氏染色法，抗酸染色法的原理，方法； 2.革兰染色法【方法】其次节细菌的接种与培育技术调配—溶化—调Ph—过滤澄清—分装—灭菌—检定—储存细菌在各种培育基上的生长现象及观看要点；培育基的概念培育基的分类第三节细菌的生化鉴定技术糖( 醇,苷)类发酵试验，O/F 试验，MR 试验，VP 试验的原理，操作，结果判定要点及其应用；I 试验，C 试验，氧化酶，触酶，血浆凝固酶氢氧化钾拉丝试验及理，操作要领，观看结果要点及其应用；一，碳水化合物的代谢试验1，糖（醇，苷）类发酵试验KIA 和TSI 的试验原原理：多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物→pH ↓ →呈酸性变色(或显现气泡2，O/F 试验(或产气)原理：依据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同，将细菌分为氧化，发酵和产碱型三类3，甲基红试验原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，进一步分解生成大量混合酸，使培育pH 下降至以下，加入甲基红后，出现红色反应；为甲基红试验阳性；4，V-P 试验原理：细菌分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中，乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与胍基化合物结合，生成红色化合物，是为V-P 试验阳性；5，β-半乳糖苷酶试验（ONPG ）原理：有的细菌可产生β -半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D 半乳糖苷(ONPG) 而生成黄色的邻硝基苯酚，该试验也称为ONPG 试验；6，七叶苷水解试验原理：某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素，七叶素与培育基中的Fe2+结合后，形成黑色的化合物，使培育基变黑；二，蛋白质和氨基酸的代谢2，硫化氢试验硫化氢与培育基中的亚铁盐或铅盐结合生原理：细菌产生酶，分解含硫氨基酸生成硫化氢，成黑色化合物；3，尿素酶试验原理：细菌产生脲酶，水解尿素生成氨和二氧化碳，培育基呈碱性反应4，苯丙氨酸脱氨酶试验使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸，苯丙酮酸与三氯化铁作用，原理：细菌产生苯丙氨酸脱氨酶，形成绿色化合物三，碳源利用试验枸橼酸盐利用试验细菌在生长过程中分解枸橼酸原理：有的细菌能利用培育基中的枸橼酸盐作为唯独的碳源，盐产生碳酸盐，使培育基呈碱性反应四，酶类试验1，氧化酶（细胞色素氧化酶）试验，能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧原理：某些细菌具有氧化酶（细胞色素氧化酶）化生成红色的醌类化合物2，触酶试验继而形成氧分子显现原理：细菌产生的触酶（过氧化氢酶）能催化过氧化氢放出初生态氧，气泡；3，凝固酶试验（试管法）原理：金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白；4，凝固酶试验（玻片法）原理：金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白5，硝酸盐仍原试验原理：某些细菌能仍原培育基中的硝酸盐为亚硝酸盐，亚硝酸盐与醋酸作用，生成亚硝酸，亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸，再与α-萘胺结合，生成N- α-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物第六章真菌检验技术真菌感染性疾病的微生物学检查原就第七章病毒检验技术病毒标本的采集和运输留意事项；第八章细菌对抗菌药物敏锐试验药物敏锐试验的基本概念，常用方法抗菌药物敏锐试验方法纸片扩散法稀释法E-test 法需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏锐试验告）；（K-B 法和稀释法的原理，方法，结果判定及正确发报第三篇第十章常见微生物鉴定技术需氧和兼性厌氧球菌葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌，淋病奈瑟菌的主要形状特点，培育特性，分类依据及分类；病原性球菌标本采集种类，检验鉴定程序，鉴定要点，检验鉴定依据及报告要点；第十一章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌第一节肠杆菌科概述肠杆菌科细菌：杆菌，多数有鞭毛，菌毛2.发酵葡萄糖，兼性厌氧3.氧化酶阴性4.仍原硝酸盐为亚硝酸盐5.触酶（＋）肠道挑选性培育基：麦康凯琼脂，伊红美蓝琼脂，SS琼脂等肠杆菌科抗原：O抗原（菌体抗原），K 抗原（荚膜抗原），H抗原（鞭毛抗原）等肠杆菌科鉴定依据： 1.革兰染色2. 触媒，氧化酶，硝酸盐仍原3.KIA ，MIU ，IMViC , 其他生化反应4.血清玻片凝集（鉴定到种，型或血清型）IMViC 试验：吲哚（I ），甲基红（M），VP（V），枸橼酸盐利用（C）四种试验，常用于鉴定肠道杆菌；二，埃希菌属形状染色： 1. 短杆菌2. 革兰染色阴性3. 有鞭毛4. 有菌毛培育特性：符合肠杆菌特点EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落S-S ——桃红色乳糖发酵菌落生化反应：IMViC（++-- ）大肠杆菌KIA：A A ＋－血清型表示法：O：K：HETEC肠毒素：耐热肠毒素（ST）o不耐热肠毒素（L T），65 C30min 被破坏引起腹泻的大肠埃希菌：肠产毒性大肠埃希菌ETEC肠致病性大肠埃希菌EPEC肠侵袭性大肠埃希菌EIEC肠出血性大肠埃希菌EHEC肠凝结性大肠埃希菌EAECEIEC 毒力测定试验：豚鼠眼结膜试验卫生学标准：每ml 饮水中细菌总数≤100 个，每1000ml 水中大肠杆菌菌群数≤ 3 个，每100 ml 瓶装汽水，果汁中，大肠杆菌菌群数≤三，沙门菌属5 个；对人类有致病性：肠热症；食物中毒；败血症-形状染色：G杆菌；周身鞭毛培育和生化反应：不分解乳糖分解葡萄糖；分解蛋白质，产生H2S伤寒沙门菌菌落特点（EMB，MA C）：无色透亮菌落伤寒沙门菌菌落特点（SS）：无色透亮或半透亮，中心黑色菌落伤寒沙门菌KIA：K A－＋标本实行：第1-2W，血，骨髓；第2-3W，粪便，尿；全程取骨髓肥达反应: 用已知伤寒沙门菌O，H 和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H 抗原与病人血清做定量凝集试验，用以帮助诊断肠热症；TO≥1：80，TH≥1：160；PA，PB 均≥1：80 才有意义；动态观看：双份血清抗体四倍上升有诊断意义四，志贺菌属形状染色：符合肠杆菌特点，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区分点培育特性：肠道鉴别培育基上的无色透亮，乳糖不发酵菌落抗原分类：依据O抗原分4 群，40 余型，我国常见 B 群A 群——痢疾志贺菌群——福氏志贺菌BC群——鲍氏志贺菌群——宋氏志贺菌D培育和生化反应：不分解乳糖分解葡萄糖菌落特点（EMB，MA C）：无色透亮菌落KIA：K A－－MIU：－－－外毒素： A 群（Ⅰ，Ⅱ型）产生志贺毒素（ST）有3 种生物活性1. 肠毒素：类似ETEC毒素，霍乱肠毒素作用——水样泻2. 细胞毒性：对人肝细胞，肠黏膜细胞有毒性，引起变性坏死3. 神经毒性：损耗动物神经系统（麻痹，死亡）快速诊断：荧光菌球试验；协同凝集试验六，变形杆菌属形状染色：有周鞭毛培育特性：扩散生长，有迁徙生长现象；在培育基中（含5％琼脂）加入％石炭酸就形成单个菌落；肠道挑选性培育基上形成无色透亮菌落变形杆菌KIA：K A+ +MIU：+ +/- +八，耶尔森菌属历史：三次世界性大流行，是我国重点监控的自然疫源性传染病；—形状染色：G 球杆菌，两极浓染培育特性：一般培育基，生长缓慢，24-48h ，R 型“破草帽”状菌落菌落特点（EMB，MA C）：无色透亮菌落甲类烈性传染病：鼠疫（黑死病）常见临床类型：腺鼠疫，败血型鼠疫，肺鼠疫标本采集：临床标本（淋巴结穿刺液，血液或痰标本）；非临床标本（尸检取病变组织，鼠标本应严格消毒体表，再进行采集）其次节弧菌科一群菌体短小，弯曲成弧形或直杆状的革兰阴性细菌；具有一端单一鞭毛，运动快速；弧菌科细菌广泛分布于自然界，以水中最为多见弧菌属（一）霍乱弧菌霍乱弧菌的疫源地：印度恒河三角洲（O1群，古典生物型）；印尼苏拉威西岛（O1群，埃托生物型）；孟加拉湾（O139 群）已发生七次世界性的霍乱大流行：均由霍乱弧菌的O1群引起，前六次为霍乱弧菌的古典生物型，第七次为埃尔托生物型形状：新从患者标本中分别出的细菌革兰染色阴性，弧形或逗点状；在患者“米泔水”样便中，可呈头尾相接的“鱼群”样排列；菌体一端有鞭毛，悬滴观看时呈“穿梭”样运动培育特性：养分要求不高，故用Ph8.4-9.2 碱性培育基；分别（挑选）能在无盐培育基中生长（区分其它弧菌）；在的碱性胨水中经35℃4~6h 增菌后可在液体表面大量繁衍形成菌膜抗击力：较弱；水源性传播，水性爆发；怕酸，正常胃酸4min霍乱肠毒素（C T）：最猛烈的致泻毒素吐泻期：猛烈吐泻，米泔样免疫力：病人愈后可获得坚固免疫O1 群霍乱弧菌的O 抗原：由A，B，C 三种抗缘由子组成；通过不同组合可形成三个型别：由AB组成小川型，AC组成稻叶型，ABC组成彦岛型常用的挑选性培育基：1. 硫代硫酸盐- 枸橼酸盐- 胆盐- 蔗糖(TCBS) 琼脂平板：霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色2.4 号琼脂，庆大霉素琼脂：生长并将培育基中的碲离子仍原成元素碲, 形成灰褐色菌落中心3. 能在无盐培育基上生长古典生物型和埃尔托生物型的区分试验：羊红细胞溶血；鸡红细胞凝集；V-P 试验；多粘菌素 B 敏锐试验；Ⅳ组噬菌体裂解；Ⅴ组噬菌体裂解标本采集和运输：在发病早期，尽量在使用抗菌药物之前采集标本；取患者“米泔水”样便，亦可实行呕吐物或尸体肠内容物，或实行肛门拭子；标本应防止接触消毒液；实行的标本最好就地接种碱性胨水增菌；不能准时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子直接插入卡－布运输培育基中动力和制动试验：直接取“米泔水”样便，制成悬滴( 或压滴) 标本后，在暗视野或相差显微镜下直接观看呈穿梭样运动的细菌；同法重新制备另一标本涂片，在悬液中加入 1 滴不含防腐剂的霍乱多价诊断血清( 效价≥1：64) ，可见最初呈穿梭状运动的细菌停止运动并发生凝集，就为制动试验阳性快速诊断：将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中，经37℃4～6h，如有霍乱弧菌，在荧光显微镜下可见发荧光的菌球；本法适用于做大量标本的初筛SPA协同凝集试验：以霍乱弧菌IgG 型抗体与SPA阳性葡萄球菌结合作为试剂，与米泔水样便或增菌液作玻片凝集，立刻显现明显凝集者（＋＋＋）为阳性粘丝试验：将％去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成深厚菌液，1min 内悬液由混变清，并变得粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝来（二）副溶血性弧菌具有嗜盐性形状：革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛）培育特性：在无盐培育基上不能生长，最适合生长的氯化钠浓度为 3.5%，超过8%不能生长TCBS琼脂平板: 蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落第三节非发酵革兰阴性杆菌非发酵革兰阴性杆菌：一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧，无芽胞的革兰阴性杆菌一，假单胞菌属铜绿假单胞菌所致疾病：条件致病菌；医院感染的重要病原菌；大面积烧伤创面感染的重要病原菌生物学特性：革兰阴性，长短不一，单鞭毛，氧化酶阳性生长温度：25～42℃分别培育与鉴定： 1. 血平板上毛玻璃样，金属光泽，生姜味2. 可产生多种色素：荧光素与绿脓素血琼脂平板：透亮溶血环O/F 试验：氧化型第四节其他革兰阴性苛氧菌一，嗜血杆菌属流感嗜血杆菌所致疾病：原发化脓性感染及继发性感染，包括脑膜炎，鼻咽炎，关节炎，心包炎，鼻窦炎及中耳炎等生物学特性：革兰阴性短小球杆菌分别培育：需要X，V 因子；养分要求高，血琼脂平板培育基，巧克力琼脂培育基菌落特点：巧克力琼脂培育基, 小，无色透亮菌落卫星现象：当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培育时，靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大，远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较小四，布鲁菌属传染源：病兽，以羊，牛，猪多见传播途径：病兽的组织，尿，乳液等通过人体的皮肤，呼吸道，消化道进入人体易感人群：发病以青壮年为主，从事兽医，皮毛加工，屠宰的工人发病率较高临床表现：长期发热，多汗；关节疼痛及全身乏力，疼痛微生物特性：革兰阴性短小球杆菌培育特性：需氧菌，养分要求较高；生长缓慢（5~7 天）第十二章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌革兰阳性无芽胞杆菌白喉棒状杆菌+形状与染色: G瘦长微弯的杆菌；一端或两端膨大呈棒状；常排列呈V，L，X 等文字形；异染颗粒——形状上的鉴别特点培育特性：养分要求高，吕氏血清斜面或鸡蛋斜面亚碲酸钾BAP：挑选鉴别培育基，黑色菌落——鉴别依据毒力试验： 1. 体外法：琼脂平板毒力试验（Elek 平板毒力测定）；SPA协同凝集试验；对流电泳2. 体内法：用豚鼠作毒素革兰阳性需氧芽胞杆菌属- 抗毒素中和试验其次节炭疽芽胞杆菌临床意义：炭疽是人兽共患的急性传染病，皮肤炭疽，肠炭疽，肺炭疽等炭疽毒素：爱护性抗原，致死因子，水肿因子传染源：患病食草动物及其制品或被污染物传播途径： 1. 接触——皮肤炭疽食用——肠炭疽2.吸入——肺炭疽3.+形状染色: 致病菌中最大的G杆菌；两端平切，竹节状；有毒株可有明显荚膜芽胞： 1. 椭圆形，小于菌体，位于菌体中心2. 多在有氧条件下形成，25～30℃，在培育基中，土壤内，动物尸体解剖后暴露在空气中，都易形成芽胞3. 在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸体严禁解剖培育特性： 1. 一般培育基上卷发状菌落：12～15h 不溶血，18～24h 稍微溶血3. 肉汤：絮状沉淀生长4. 明胶：37℃18～24h 表面液化成漏斗状，由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状；5.NaHC O3BAP：有毒株-- 黏液型菌落，挑取时呈粘丝状( 鉴别要点)无毒株—粗糙型菌落抗原构造： 1. 菌体多糖抗原：与毒力无关，耐热，耐腐败，长时间煮沸仍能与特异性抗体发生环状沉淀反应（Ascoli 热沉淀反应），特异性不高，可作追溯性诊断2. 荚膜多肽抗原：荚膜肿胀试验，对本菌鉴定有意义标本的采集与处理: 死于败血症的动物，严禁宰杀和解剖，可消毒皮肤后割取耳朵，舌尖采集少量血液串珠试验: 炭疽芽胞杆菌在每毫升含有0.05-0.5U 青霉素的培育基中，可发生形状变异，形成大而匀称的圆球状并相连如串珠状第十三章分枝杆菌属分枝杆菌是一类瘦长略带弯曲的杆菌，含有分枝菌酸，有分枝生长的趋势而得名；具有抗酸性，故又称抗酸杆菌；结核分枝杆菌所致疾病：通过呼吸道，消化道和损耗的皮肤等多途径感染机体，引起多种脏器的结核病，其中以肺结核为多见致病物质：荚膜，脂质和蛋白质等菌体成分免疫性：有菌免疫或称传染性免疫，细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用微生物特性： 1. 分枝状，略带弯曲的抗酸杆菌，抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色2. 专性需氧，养分要求较高，最适生长温度为35℃，生长缓慢, 2 ~5w 才显现肉眼可见的如菜花样粗糙型菌落；结核菌素试验：纯蛋白衍生物(PPD)，注入皮内后如受试者已感染结核，就结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，形成迟发型超敏反应性炎症机体抗结核免疫特点：传染，免疫，超敏反应共存第十四章厌氧性细菌破伤风梭菌，产气荚膜梭菌，肉毒梭菌的形状特点，培育特性；厌氧性细菌的检验鉴定要点和报告方式；第十五章螺旋体，支原体，衣原体，立克次体第一节螺旋体螺旋体：是一种瘦长，松软，螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物钩端螺旋体所致疾病：钩端螺旋体病传染源与储存宿主: 自然疫源性疾病，鼠类和猪为主要储存宿主传播途径：间接接触传播（接触被含菌尿液污染的水源），血液传播，垂直传播生物学特性： 1. 螺旋一端或两端呈钩状2. 有两根周浆鞭毛，运动活泼-3. G，但不易着色，镀银染色成棕褐色梅毒螺旋体所致疾病：梅毒1. 先天性：母体通过胎盘传给胎儿2. 获得性：性传播获得性梅毒临床分期：分为三期1. Ⅰ期（初期）梅毒：感染后 3 周左右局部显现无痛性硬下疳，感染性极强；2. Ⅱ期梅毒：发生于硬下疳显现后2~8 周，全身皮肤，粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大3. Ⅲ期（晚期）梅毒：发生感染 2 年后，病变可波及全身组织和器官；基本损害为慢性肉芽肿；病损内螺旋体少但破坏性大-生物学特性：G，但不易着色，镀银染色呈棕褐色；对青霉素，四环素，红霉素等抗生素敏感微生物学检查：标本：Ⅰ，Ⅱ期梅毒取下疳渗出液，梅毒疹渗液或淋巴结穿刺液；先天性梅毒取脐血其次节支原体支原体：是一类没有细胞壁，形状上呈多样性，可通过细菌滤器，能在无生命培育基中生长-的最小的原核细胞型微生物；因其生长后能形成分枝长丝，故命名为支原体；G，但不易着色，Giemsa 染色呈淡紫色；油煎蛋样的菌落所致疾病：支原体肺炎冷凝集试验: 肺炎支原体感染后，患者血清中显现冷凝集素，能在0-4 ℃条件下凝集人红细胞（37℃时却无此效应）；此凝集试验为非特异性的，是肺炎支原体感染的帮助诊断试验衣原体：是一类专性活细胞内寄生，具有特殊发育周期，且能通过细菌滤器的，介于立克次体与病毒之间的原核细胞型微生物第一胜利分别鉴定出沙眼衣原体：我国学者汤飞凡于1956 年能引起人类疾病的衣原体：主要有沙眼衣原体和肺炎衣原体-立克次体：是一类专性活细胞内寄生的G原核细胞型微生物，是引起斑疹伤寒，恙虫Q病，热等传染病的病原体；与节肢动物关系亲密，大多是人畜共患病的病原体反应（外斐反应）：大部分立克次体与一般变形杆菌某些菌株（X19，X k，X2）的Weil-Felix菌体抗原有共同的抗原成分，故可用这些变形杆菌的菌体抗原与不同稀释度的患者血清做凝集反应，诊断立克次体病；第十六章常见真菌1.真菌的概念，生物学性状；真菌感染性疾病的微生物学检查原就；皮肤癣真菌，白假丝酵母菌，新生隐球菌的形状特点及微生物学检验；2.真菌感染性疾病的微生物学检查原就；皮肤癣真菌，白假丝酵母菌，新生隐球菌的形状特征及微生物学检验；第十七章常见病毒第一节呼吸道病毒1.正粘病毒(流感病毒)的结构，型别，抗原变异与流行的关系；微生物学检验；2.正粘病毒(流感病毒)的型别，抗原变异与流行的关系；其次节肝炎病毒1. HAV ，HBV ，HCV ，HDV ，HEV 五型肝炎病毒的生物学特性，微生物学检验；2.乙肝五项的结果分析及临床意义第三节逆转录病毒HIV 的微生物学检验；1. HIV 的生物学特性，致病性，免疫性与防治原就；2.HIV 的生物学特性；第四节其他病毒1.流行性乙型脑炎病毒，出血热病毒，狂犬病毒，疱疹病毒，人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性；以上病毒的微生物学检验；2.流行性乙型脑炎病毒，出血热病毒，狂犬病毒，疱疹病毒，人乳头瘤病毒的生物学特性及致病性；第五节肠道病毒1.肠道病毒的共性，种类；2.脊髓灰质炎病毒的生物学特性，致病性与微生物学检验；第十八章临床常见标本的细菌学检验1.临床常见标本采集及运输，检验程序，报告方式，血液标本的细菌学检验，痰液标本的细菌学检验，脑脊液标本的细菌学检验；2.粪便标本的细菌学检验，尿液标本的细菌学检验，脓标本的细菌学检验；。

【微生物学检验】知识点整理（第二部分）室内质量控制的内容包括哪些？答：室内质量控制的内容包括：⑴人员与组织管理⑵操作手册⑶培养基的质量控制⑷试剂、抗血清和染色液的质量控制⑸抗生素与抗生素纸片⑹仪器⑺标本检验过程的质量控制⑻室内全面质量控制⑼标准菌株的来源和保存。

对于不同种类的培养基，应如何进行无菌试验？⑴对分装后灭菌的培养基：随机5%～10%的量，35℃，培养24h；⑵无菌操作分装的培养基对全部培养基35℃，培养24h；⑶选择培养基部分加入10～20倍无抑制性肉汤35℃，培养24h；以上情况证明无菌生长为合格。

K-B法质控结果出现错误，试分析其原因？⑴质控结果记录错误⑵量取抑菌环直径时读数错误⑶标准菌株被污染或其他改变⑷接种的菌悬液太浓或过淡⑸ 0.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效⑹孵育温度或气体环境不正确⑺MH培养基质量有无问题⑻含药纸片失效。

细菌耐药机制？主要有四种①产生一种或多种水解酶钝化酶和修饰酶。

②抗生素作用的靶位改变，包括青霉素结合蛋白位点和DNA解旋酶的改变。

③细菌膜的通透性下降，包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失。

④细菌主动外排系统的过度表达。

超广谱β内酰胺酶检测分为纸片检测和液体稀释法检测，检测对象为肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯菌，大肠埃希菌和奇异变形杆菌。

结果判读：肺炎克雷伯菌，头孢泊肟抑菌环直径≦17mm;头孢他啶抑菌环直径≦22mm;氨曲南抑菌环直径≦27mm;头孢噻肟抑菌环直径≦27mm;头孢曲松抑菌环直径≦25mm.K-B法（纸片扩散法）检测原理及影响因素？原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。

纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。

在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。

抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC愈小。

临床微生物检验1、微生物的分类：（三型八大类)**全部是重点**2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起源性感染。

3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素）4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白）5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。

结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。

是溶菌酶、青霉素作用部位）6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质）*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。

②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。

高渗环境生长。

（环丙沙星）9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。

10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。

11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。

13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。

15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。

16、透射电子显微镜适于观察细菌部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构与附件的观察。

17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体着色）。

细菌学检验知识点总结细菌学检验是临床微生物学中非常重要的一部分，它涉及到细菌的病原性、药敏试验等方面。

细菌学检验的结果对临床医生的诊断和治疗都有着非常重要的指导意义。

本文将对细菌学检验的相关知识点进行总结，以供参考。

一、病原细菌检测方法1. 细菌培养和鉴定细菌培养是检验的第一步，通过在适当的培养基上进行培养，可以让细菌生长，然后进行鉴定。

而鉴定通常包括对菌落形态、涂片染色、生理生化特性等进行分析。

2. 分子生物学方法PCR技术、16S rRNA测序等分子生物学方法可以快速准确地对病原细菌进行检测和鉴定，是细菌学检验中的一种重要手段。

3. 快速检测方法利用免疫学技术，如ELISA、免疫荧光等，可以对病原细菌进行快速检测，缩短检验时间，有利于早期诊断和治疗。

4. 药敏试验药敏试验是通过在不同培养基上进行不同抗生素的敏感性试验，来确定病原细菌对抗生素的敏感性，从而为临床治疗提供依据。

二、常见病原细菌及其特点1. 革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌包括金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、链球菌等，它们的特点是在革兰氏染色中呈紫色，具有厚壁和无外膜。

2. 革兰氏阴性菌革兰氏阴性菌包括大肠杆菌、沙门氏菌、变形杆菌等，它们的特点是在革兰氏染色中呈红色，具有薄壁和外膜。

3. 厌氧菌厌氧菌是一种在无氧环境中生长的细菌，如产气荚膜梭菌、肠道球菌等，它们的特点是无氧代谢，对氧敏感。

4. 耐酸菌耐酸菌是一种对酸性环境具有很强适应性的细菌，如结核菌等，它们的特点是能在酸性环境下生长。

5. 其他特殊细菌还有一些特殊的细菌，如立克次体、支原体等，它们的生长环境、生物学特性都与一般的细菌有所不同，需要采用特殊的检测方法。

三、细菌学检验质量控制1. 培养基的质量控制培养基是进行细菌培养的最基本的物质，其质量直接关系到检验结果的准确性，因此要定期对培养基的成分、质量进行检验和评价。

2. 设备的质量控制细菌学检验所需的设备如显微镜、高压灭菌器、生化培养柜等都要定期进行维护和校验，确保其稳定可靠。

微生物检验重点知识点总结微生物检验是临床生物化学检验中的一个重要分支，其主要目的是检测病原微生物的存在和种类，以帮助临床诊断和治疗。

微生物检验涉及到多种技术和方法，包括细菌培养、抗生素敏感性测试、真菌检测等。

在本文中，我们将对微生物检验的重点知识点进行总结，包括微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面。

一、微生物培养1. 细菌培养条件：细菌培养需要适宜的温度、pH值和营养物质。

一般来说，大多数细菌在37摄氏度下生长最适宜，pH值维持在7左右，而营养物质主要包括碳源、氮源和无机盐等。

2. 培养基的选择：根据不同的细菌种类和要求，可以选择不同种类的培养基。

常用的培养基包括营养琼脂、大肠杆菌培养基、葡萄球菌培养基等。

3. 培养方法：常用的细菌培养方法包括平板法、液体培养法和混悬液培养法。

其中，平板法是将含有琼脂的培养基均匀涂抹在培养皿上，使其凝固后可以在上面观察细菌的生长情况。

4. 培养时间：一般来说，细菌培养需要一定的时间来观察其生长情况。

常见的培养时间包括24小时、48小时和72小时等。

二、菌种鉴定1. 形态学鉴定：观察细菌的形态特征，包括细胞形状、大小、颜色等。

常用的方法包括显微镜下观察和染色法。

2. 生理生化鉴定：通过细菌的生理和生化特性来鉴定其种类，包括对碳水化合物的利用、氧气需求、氧化酶活性等。

3. 分子生物学鉴定：采用PCR技术和分子生物学方法对细菌的基因进行检测和分析，以确定其种属和亲缘关系。

三、抗生素敏感性测试1. 纸片扩散法：将含有不同抗生素的纸片放置在琼脂培养基表面，观察其抑菌圈的形成情况，以确定细菌的抗生素敏感性。

2. 微量稀释法：将一定浓度的抗生素溶液与不同浓度的细菌混合，通过改变抗生素浓度来确定最小抑菌浓度，从而确定其抗生素敏感性。

3. 自动化敏感性测试：通过自动化设备和方法对大量细菌菌株进行抗生素敏感性测试，提高测试效率和准确度。

以上是微生物检验的一些重点知识点总结，通过对微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面的了解，可以更好地开展微生物检验工作，为临床诊断和治疗提供有力的支持。

预防疾控微生物检验技术：细菌及细菌检验综合题必看题库知识点1、单选有关“菌毛”的叙述，哪一项是正确的（）A.多见于革兰阳性菌B.不能直接用光学显微镜观察C.性菌毛与细菌的致病性有关D.普通菌毛与细菌（江南博哥）的接合有关E.是细菌的运动器官正确答案：B参考解析：菌毛是许多革兰阴性菌、少数革兰阳性菌菌体表面存在的比鞭毛纤细、短而直的丝状物，须用电子显微镜观察才能看见。

按其功能，菌毛可分普通菌毛与性菌毛两种。

普通菌毛具有粘附宿主细胞的作用，细菌借此可牢固粘附在人体粘膜上皮细胞表面定居，进而侵入细胞内。

无菌毛的细菌则易被排出体外。

因此普通菌毛与细菌致病力有关。

性菌毛由F因子编码产生，供体菌能通过性菌毛，将遗传物质传递给受体菌，故与细菌接合和某些遗传性状的传递有关。

性菌毛也是某些噬菌体吸附的受体部位。

菌毛与细菌的运动无关。

2、单选胞外菌能通过不同机制来逃避机体的免疫杀伤，其中不包括（）A.肺炎链球菌形成荚膜B.淋球菌的菌毛抗原发生变异C.流感嗜血杆菌产生IgA酶D.福氏志贺菌能诱导巨噬细胞凋亡E.鼠伤寒沙门菌产生Vi抗原正确答案：E3、多选具有性菌毛的有（）A.F＋菌B.Hfr菌C.F’菌D.带有R质粒的细菌E.F－菌正确答案：A, B, D4、单选在细菌生物学特性中，与芽孢有关的是（）A.抗吞噬B.产生毒素C.耐热D.粘附于感染部位E.侵袭力正确答案：C5、单选不符合莫拉菌属特点的是（）A.氧化酶试验阳性B.不分解糖类C.不产生吲哚D.在6.5％NaCl肉汤中不生长E.氧化酶试验阴性正确答案：E6、单选研究抗菌药物的杀菌效果，最好是选用细菌生长的（）A.迟缓期B.对数生长期C.稳定期D.衰亡期E.对数生长期和稳定期正确答案：B7、多选与性传播疾病相关的细菌是（）A.淋球菌B.杜克嗜血杆菌C.耻垢杆菌D.结核分枝杆菌E.布氏杆菌正确答案：A, B8、多选人工被动免疫的特点包括（）A.免疫物质为类毒素B.免疫物质是丙种球蛋白C.免疫物质是抗毒素D.可用于紧急预防E.主要用于治疗正确答案：B, C, D, E9、单选溶菌酶杀菌的作用机理是（）A.裂解聚糖骨架的β-1，4糖苷键B.竞争肽聚糖合成中所需的转肽酶C.与核蛋白体的小亚基结合D.竞争性抑制叶酸的合成代谢E.破坏细胞膜正确答案：A10、多选与细菌侵袭力无关的是（）A.毒素B.荚膜C.芽胞D.菌毛E.M蛋白正确答案：A, C11、单选与空肠弯曲菌感染有关的疾病是（）A.胃细胞癌B.重症肌无力C.席汉综合征D.系统性红斑狼疮E.吉兰－巴雷综合征正确答案：E12、单选温和噬菌体与毒性噬菌体的相同点是（）A.能以多种形式存在B.有溶菌性周期C.能使人或动物致病D.有溶原性周期E.可作为基因的载体正确答案：B参考解析：噬菌体感染的宿主细胞是细菌等微生物，故不能使人或动物致病。

知识点：果汁中酵母菌、霉菌测定情境：微生物检测技术任务：酵母菌、霉菌测定课程：食品微生物技术酵母菌、霉菌测定原理一、霉菌、酵母菌什么叫霉菌、酵母菌？❞霉菌：为丝状真菌的统称。

凡是在营养基质上能形成绒毛状、网状或絮状菌丝体的真菌（除少数外），统称为霉菌。

❞酵母菌：一些单细胞真菌。

一种肉眼看不见的微小单细胞微生物，能将糖发酵成酒精和二氧化碳，分布于整个自然界，是一种典型的兼性厌氧微生物，在有氧和无氧条件下都能够存活，是一种天然发酵剂。

二、霉菌、酵母菌测定原理❞霉菌和酵母菌菌数的测定是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中所含的霉菌和酵母菌菌落数（粮食样品是指1g粮食表面的霉菌总数）。

❞霉菌和酵母数主要作为判定食品被污染程度的标志，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。

本方法适用于所有食品。

酵母菌、霉菌测定原理与菌落总数测定类似，选用平板菌落计数法。

平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。

统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。

酵母菌、霉菌测定步骤1.液体样品稀释以无菌吸管吸取25 mL样品至盛有225mL无菌稀释液（蒸馏水或生理盐水或磷酸盐缓冲液）的适宜容器内（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）或其他无菌均质袋中，充分振摇或用拍击式均质器拍打1 min～2min，制成1:10 的样品匀液。

2.梯度稀释❞取1 mL 1:10 样品匀液注入含有9 mL 无菌稀释液的试管中，另换一支1 mL 无菌吸管反复吹吸，或在漩涡混合器上混匀，此液为1:100 的样品匀液。

❞按上述操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。

每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。

四、倒平板❞根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释时，吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。