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Agilent1100series安捷伦⾼效液相⾊谱仪操作规程Agilent1100⾼效液相⾊谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100⾼效液相⾊谱系统主要由⼯作站、在线脱⽓机、柱温箱、输液泵、⾃动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及⼯作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进⼊待机状态，指⽰灯为黄⾊或⽆⾊。
1.2.2打开HP ChemStations,进⼊Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进⼊⼯作站的操作页⾯。
该页⾯主要由以下⼏部分组成：最上⽅为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下⽅为快捷操作图标，由多个样品连续进⾏分析、单个样品进样分析、调⽤⽂件、保存⽂件等；左边为样品信息栏；中部为⼯作站各部件的⼯作流程⽰意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为⾊谱⼯作参数：进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等。
2.⾊谱条件的设定(⾊谱条件的设定可以通过下列⼏种⽅法实现2.1直接设定在操作页⾯的右下部⼀⾊谱⼯作参数中设定。
将⿏标移移⾄要设定的参数如进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等，单击⼀下，即可显⽰该参数的设置页⾯，键⼊设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调⽤已设置好的⽂件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定⽂件名，单击“OK”，此时，⼯作站即调⽤所选⽤⽂件中设定的参数。
如欲进⾏修改，则可同2.1项下，在⾊谱⼯作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新⽂件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新⽂件命名，单击“OK”。
1 操作规程1.1开机1.1.1 启动计算机，完成后系统自动运行Bootp Server程序。
打开色谱仪各组件电源，待Bootp Server里显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后，双击【Instrument Online】图标启动化学工作站，工作站自动与仪器建立通讯。
1.1.2 打开10％异丙醇溶液控制阀，用针筒抽吸至管路中有液体流出。
调节控制阀松紧，控制流量至流出量约为每分钟5～15滴。
1.1.3 将流动相放入溶剂瓶中，打开Purge 阀，单击【Pump】→【control】，选中on，单击【OK】，启动泵。
再单击【Pump】→【Set up Pump】，设Flow为5ml/min，流动相A调节为100%，其它流路关闭，单击【OK】，则系统开始Purge流动相A。
3min后依次切换管路至B、C、D，确保所需管路均无气泡。
1.1.4 建立新方法时执行“1.2方法的编辑”的操作。
仪器配置无更改，运行已建立的方法则直接进入“1.3方法运行”操作。
1.2 编辑分析方法1.2.1 点击【Method】→【Edit entire method】或【New method】选项，进入方法编缉界面。
在Method Comments 中加入方法的信息如色谱条件、方法的用途等点击【OK】进入下一界面。
1.2.2 泵参数设定：设定流速、流动相比例、梯度/运行时间表、平衡时间等参数。
点击Ok进入下一界面。
1.2.3 柱温箱参数设定：在Temperature下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击【more>>】键,选中Same as left使柱温箱的温度左右一致。
点击【OK】进入下一界面。
1.2.4 UV检测器参数设定：在Wavelength下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在Peakwidth (Response time)下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)，在Timetable 中可以Insert 一行输入随时间切换的波长。
Agilent 1100型HPLC操作指南一、实验准备1、样品和流动相过滤（通常过0.2μm滤膜）、超声脱气5min。
2、更换四元泵流动相，泵头清洗溶剂（10％的异丙醇）。
二、启动液相色谱仪1、自上而下依次打开真空脱气机、四元泵、柱温箱（根据需要）、检测器电源，等待系统自检通过，黄灯表示闲置、绿灯表示运行、红灯表示出错。
2、打开电脑，双击电脑桌面的“仪器联机”打开操作安捷伦化学工作站，软件会自动检测到开启的所有硬件设备。
3、更换流动相存储瓶，旋松“排气阀（purge阀）”，将所换的溶剂瓶的流量设至高流速5mL/min，进行清洗和排放气泡，至管线中无气泡时关闭排气阀。
4、使用的流动相中含有缓冲盐时，需打开泵头清洗溶剂，使其逐滴流出，防止缓冲盐在柱子和泵头结晶析出，影响系统压力。
5、安装色谱柱：依次安装在线过滤器、预柱、色谱柱（注意方向，箭头指向检测器）。
设置溶剂比例，1mL/min流速，平衡色谱柱。
三、样品测试及数据分析1、编辑方法。
选择编辑完整方法，依次设定流动相比例和流速、柱温箱温度、检测器扫描波长等参数，保存方法。
2、运行方法，监测基线至稳定走平。
3、手动单针进样：设定样品名、数据文件存储位置，点击运行方法；将手动进样器扳至“Load”上样，上样完扳至“Inject”，工作站开始记录信号。
4、测试完毕，点击桌面的“仪器脱机”打开工作站，进行数据处理，积分，定量分析方法建立、报告输出等。
四、实验结束、关机。
1、实验结束，冲洗系统、色谱柱。
冲洗原则（以反相C18为例）：先用90％水，10％乙腈（或其它有机相）冲洗水溶性物质；30min后改为50％水，50％乙腈；再过30min 后，改为100％乙腈，再冲洗30min后结束。
2、实验结束，停止泵，关闭化学工作站，关闭电脑，关闭仪器的四部分电源。
3、卸下色谱柱，清理流动相，将各个抽滤头浸泡在有机相中，整理桌面、地面杂物。
注意事项：1、挥发性有毒有机相（甲醇、乙腈、正己烷等）需尽量包严实。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”。
Agilent 1100 型高效液相色谱仪 [美国Agilent公司]一．仪器原理及结构高效液相色谱（简称HPLC）是色谱法中最重要的一个分支。
与气相色谱相比，HPLC的分离模式更为多样化，适用样品范围更广。
它不仅能分离高沸点、强极性和热不稳定的化合物，而且适合于离子性、大分子及具有生物活性的化合物的分离。
据估计，自然界20%的已知化合物能用气相色谱直接分析，而70%以上都可用HPLC分析。
另外，经HPLC 分离后的样品组分很容易收集，故能用于制备分离。
HPLC有多种分离模式，但其仪器结构都基本相同，仪器流程如下：流动相置于储液瓶，由四元泵输入系统，样品用自动进样器从进样阀引入，经色谱柱分离后进入检测器进流动池，吸光度信号经放大后由记录仪记录。
检测器则主要有UV-VIS、二极管阵列、示差折光、荧光、电化学及质谱等。
图3-4为Agilent 1100 HPLC仪器的结构示意图，它主要由下面几部分组成：（1）真空脱气机：高性能脱气，避免了烦琐的操作，可提高仪器的稳定性。
（2）四元输液泵：Agilent 1100泵是采用新的单向结构的活塞泵。
流量设定范围从0.2至10mL·min-1，精度0.1mL·min-1。
该泵可自动监测压缩性补偿值，保持高压条件下的流量准确度。
其压力上限可在0-4×104kPa(0-6000psi)的范围内调节。
（3）自动进样器：样品盘容量100×2mL，样品进样体积为0.1-1500µL。
具有操作简便，准确度高，重现性好的特点。
（4）柱温箱：控温范围：低于室温10℃-80℃，可容纳30cm长的色谱柱，样品在此分离。
根据样品类型和分离模式，可选用各种不同的液相色谱柱。
1. 溶剂柜2. 真空脱气机3. 排液阀4. 四元泵5.自动进样器6. 柱温箱7. 检测器图3-4 Agilent 1100 HPLC仪器结构示意图（5）DAD检测器：波长范围190-950nm，可变狭缝，可进行自动峰检索，利用紫外谱图进行峰确认。
agilent安捷伦液相色谱仪 1100技术参数安捷伦（Agilent）液相色谱仪1100是一种高性能液相色谱仪（HPLC），广泛应用于各种分析和研究领域。
本文将详细介绍该仪器的技术参数。
1.型号和配置Agilent 1100液相色谱仪系列包括多个型号和配置，以满足不同用户的需求。
典型配置通常包括进样器、泵浦模块、色谱箱、检测器和数据处理系统。
2.进样器该液相色谱仪配备了自动进样器，可实现自动化样品进样，提高工作效率。
进样器具有样品冷却功能，可以保持样品的稳定性。
3.泵浦模块Agilent 1100使用的泵浦模块具有高压稳定性和流量控制精度，可以实现高效的溶剂输送。
该泵浦模块可实现梯度洗脱，以满足复杂样品分离的需求。
4.色谱箱色谱箱是液相色谱仪的核心部件之一。
Agilent 1100色谱箱具有温度控制功能，可以在恒温环境下进行色谱分离。
该色谱箱具有多个色谱柱位，可支持多种柱剂的使用。
5.检测器该液相色谱仪配备了多种检测器，包括紫外-可见（UV-Vis）检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
这些检测器具有高灵敏度和高选择性，可用于定量和定性分析。
6.数据处理系统Agilent 1100液相色谱仪配备了先进的数据处理系统，可实现数据采集、处理和分析。
该系统提供友好的用户界面，便于用户操作和结果解释。
7.技术指标该液相色谱仪具有以下技术指标：-最高工作压力：可达到400 bar，保证高效的溶剂输送。
-流量范围：0.001-10 mL/min，可满足不同分析需求。
-温度范围：可设置在4-80摄氏度之间，保持色谱分离的稳定性。
-波长范围：紫外-可见检测器的波长范围为190-700 nm，适用于不同波长下的分析。
-分辨率：高分辨率，可实现复杂样品的高效分离。
-柱温控制：色谱箱具有柱温控制装置，可提高分离效率和重复性。
-低噪声级：检测器具有低噪声设计，提供准确的检测信号。
总之，Agilent 1100液相色谱仪是一款功能强大、性能稳定的高性能液相色谱仪，适用于各种分析和研究领域。
本细则根据高效液相色谱仪方法通则（JY∕T 024－1996）、有机质谱分析方法通则（JY∕T 003－1996）和美国Agilent 公司液相色谱质谱联用仪操作说明书制定。
1．适用范围本方法适用于有机样品定性及定量分析。
样品要求：待测样品必须能溶解于水或其它有机溶剂中。
若样品或配制的样品溶液发生沉淀，挥发，变质等异常现象时，应重新取样或重新配制溶液。
分子量范围：（100 ～2300）amu（单电荷）分析前要求：在液相色谱仪上确定分离条件，使待测组分能完全分离，且该色谱条件中流动相不应含有不挥发性盐。
2．引用标准有机质谱分析方法通则（JJG003－1996）3．术语、符号、代号详见《有机质谱分析方法通则》（JJG003－1996）4．方法、原理详见《有机质谱分析方法通则》（JJG003－1996）5．试剂和材料所有的溶剂均选用色谱级试剂，所用水的电导率应大于18KΩ，其余试剂为分析纯。
6．仪器设备仪器：Agilent 1100 LC/MSD SL（液相色谱-质联用仪），配有ESI及APCI离子源分子量范围：（100 ～2300）amu（单电荷）扫描分辨率：半峰宽小于1；检测灵敏度：SIM S∕N ≥10∶1；1 pg Reserpine；SCAN S∕N ≥10∶1；50 pg Reserpine。
7．分析步骤7. 1 环境：10℃～30℃，相对湿度小于70％。
7. 2 仪器校正：按仪器操作说明书进行调整，使得到的标准谱图在允许误差之内关注质量轴精度，质量轴稳定度，扫描分辨率，灵敏度。
7. 3 测定过程7. 3. 1 开机：（1）开空气泵、液相色谱和质谱仪电源开关,开PC机后使其联机成功，之后打开真空泵阀门。
（2）真空度达到2╳10-5Pa后，通过调谐系统检查质谱运行情况。
7. 3. 2 设定液相色谱和质谱参数:选择合适的色谱柱、流动相，设置梯度程序及柱温。
选择离子源模式，设置质谱参数。
数据采集的范围及条件设置。
安捷伦及液相色谱仪的基本知识集团标准化工作小组 [Q8QX9QT-X8QQB8Q8-NQ8QJ8-M8QMN]安捷伦1100液相色谱仪各项性能指标悬赏分：5|解决时间：2010-10-16 22:13|提问者：最佳答案朋友，直接致电agilent的800-820-3278免费电话就可以得到Agilent的满意答复了系列Agilent 1100泵系统● 电子流控阀(EFC)控制的毛细液相泵系统，精度高、流速范围广柱流速范围：1-20ul/min;10-100ul/min（可选件）-2.5mmin(EFC关闭状态)● 高压制备泵系统，单元或双元高压制备泵流速范围:min● 分析型泵系统流速范围：单元泵：min二元泵：min四元泵：min品种齐全的Agilent 1100系列进样系统● 标准手动进样器（分析型或制备型）● 标准自动进样器样品瓶容量：可达100个(2mlx100)进样量：可选件● 微盘式自动进样器样品瓶容量：2x96(孔板)，2x386(孔板)或100x2ml进样量：(标准件)可选件● 微量标准自动进样器/微盘式自动进样器进样量：（标准）;（可选）● 恒温标准自动进样器/微盘式自动进样器温度范围：4-40℃可设定步进1℃● 220型微孔板式自动进样器－组合化学样品管理系统样品瓶容量：各种规格试管多达12个微孔板（96孔板,384孔板）进样量：;Agilent 1100系列检测器● 可变波长扫描紫外检测器（VWD)波长范围：190600nm● 多波长检测器(MWD)波长范围：190950nm（双灯源）● 二极管阵列检测器(DAD)波长范围：190950nm（双灯源）● 荧光检测器(FID)激发波长：200-700nm;发射波长:280-900nm光谱存储：全光谱● 示差折光检测器(RID)温控：室温+5℃至55℃内置自动吹扫阀和自动溶剂循环阀● 电化学检测器(ECD)● LC/MS四极杆质量检测器(MSD)● LC/MS离子阱质量检测器(Trap MSD)柱温箱和脱气机组件● 柱温箱温度范围：室温下10℃至80℃可选件：柱切换阀● 真空在线脱气机安捷伦1120液相色谱仪技术参数泵：流速精度：≤% RSD流速范围：，以min的增量自动进样器：进样量范围：，以的增量进样精度：<% RSD(5-100ul)，<1% RSD(1-5ul)样品容量：100个2ml样品瓶；或者2个半托盘，每个40个2ml样品瓶或15个6ml 样品瓶柱温箱：温控范围：室温上10℃到60℃温控稳定性：±0.15℃VWD：噪音：±×10 -5AU波长范围：190-600nm主要特点仪器介绍特点介绍可选5种配置系统，工厂测试，开箱即用和各种检测器兼容：示差折光检测器（RID），荧光检测器（FLD），蒸发光散色检测器（ELSD）易于使用的EZChrom Elite Compact软件，提供英中日界面LMD软件在故障发生前就可以实时通报新的最佳性能色谱柱提供可靠重现的结果附加服务：1120 液相色谱仪有五种集成的一体化配置可供选择：1.等度泵手动进样 VWD2.梯度泵手动进样 VWD3.梯度泵手动进样柱温箱 VWD4.梯度泵 ALS 柱温箱 VWD5.等度泵 ALS 柱温箱 VWD＊其中包括了硬件、软件、色谱柱和LMD分析方法此仪器尚未上传分析方法相关资料1.安捷伦1120液相色谱仪详细技术参数与资料！！相关仪器液相色谱仪(1200)2.液相色谱仪LC2100(LC2100)相关耗材1.安捷伦C8、C18液相色谱柱(规格：C8、C18)2.安捷伦氘灯(规格：Agilent 1100)3.顶空进样瓶、自动进样瓶(规格：20ml)4.色谱微量进样器、液体进样器、气体进样器(规格：ul)5.安捷伦液相色谱住(规格：C8,C18)ZORBAX StableBond SB-C18液相色谱柱(规格：Agilent SB-C18)7.真空泵、无油真空抽滤泵(规格：QP-01)8.液相色谱柱温箱(规格：JK-LCagilent1200安捷伦液相色谱仪技术参数方便地利用四种溶剂进行等梯度或梯度分析，适用于方法快速开发和快速配备流动相，以及冲洗 HPLC 系统流量范围宽，最高流速 10 mL/min ，延迟体积 800-1100 L，适用于微径柱、标准柱和半制备应用通过 Instant Pilot 组件或安捷伦化学工作站或 EZChrom 软件，可以容易地进行编程和控制包含微量真空脱气机，脱气效率高，实现了操作无障碍和最高性能，完全不需要通氦气直接从前面板快速更换维护部件通过自我诊断、内置日志和预编程的测试方法，快速判断问题早期维护反馈（EMF）长期不间断地监测仪器使用和用户预设的限度，一旦超出限度，将提供反馈信息在所有安捷伦 1200 系列 HPLC 组件范围内可升级和扩展主要特点agilent1200安捷伦液相色谱仪特点介绍同时安捷伦1200系列快速高分离液相色谱系统同样和常规高效液相色谱仪一样耐用，也保留了常规液相色谱仪的方法和工作原理。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程一、引言Agilent 1100高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
本文将详细介绍Agilent 1100高效液相色谱仪的操作规程，以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
二、仪器准备1. 检查仪器是否处于正常工作状态，包括电源是否连接、仪器是否通电等。
2. 检查仪器各部件的完整性，如进样器、泵、柱箱、检测器等。
3. 检查进样器的进样针是否干净，如有污染应及时清洗。
4. 检查溶剂瓶是否充足，必要时更换。
三、样品准备1. 根据实验要求准备样品，并确保样品的纯度和浓度符合要求。
2. 准备样品溶液，注意溶解度和稳定性。
3. 如需稀释样品，请使用纯净溶剂，并按照一定比例稀释样品。
四、仪器操作1. 打开Agilent 1100高效液相色谱仪的电源，确保仪器处于正常工作状态。
2. 打开色谱软件，并进行系统初始化。
3. 在色谱软件中设置实验方法，包括进样量、流速、梯度程序等。
4. 打开进样器盖，将样品注射器插入样品瓶中，吸取适量的样品溶液。
5. 关闭进样器盖，将样品注射器插入进样器，并按下进样按钮进行进样。
6. 打开泵的开关，调节流速至所需数值。
7. 检查柱箱的温度设置，根据实验要求进行调节。
8. 打开检测器，并设置检测器的参数，如波长、灵敏度等。
9. 开始实验运行，观察色谱图的变化并记录实验数据。
10. 实验结束后，关闭泵、检测器等设备。
11. 关闭色谱软件，并保存实验数据。
五、日常维护1. 每次使用后，及时清洗进样器和柱箱，避免样品残留。
2. 定期检查泵的密封件，如有磨损应及时更换。
3. 定期校准检测器，确保准确性和稳定性。
4. 定期更换柱子，避免柱子老化影响实验结果。
5. 清洗仪器外壳，保持仪器的整洁。
六、故障排除1. 若发现仪器无法正常启动，检查电源和连接线是否正常。
2. 若发现进样器无法正常工作，检查进样针是否堵塞或损坏。
Agile nt高效液相色谱仪校验方案（二）目录1. 校验目的-------------------------------------------------------------------------- 32. 本公司高效液相色谱仪类型及相关参数------------------------------------------------ 33. 校验结果处理及校验周期------------------------------------------------------------ 34. 校验依据及参考资料---------------------------------------------------------------- 45. 仪器基本信息---------------------------------------------------------------------- 46. 校验项目及技术指标---------------------------------------------------------------- 47. 校验条件、使用试剂及设备---------------------------------------------------------- 58. 校验内容及结果-------------------------------------------------------------------- 59. 评价与结论---------------------------------------------------------------------------------- 141. 校验目的本方案适用于本公司高效液相色谱仪有下列情况后的校验，以确定仪器性能完好，满足工作需要。
□投入使用前；□维护修理后；（维护修理：）□使用中发现仪器异常时；（异常情况：）□正常校验周期时。
高效液相色谱仿真实验一、实验概述：以液体做流动相的色谱称为液相色谱。
人们把已经比较成熟的气相色谱理论应用于液相色谱，使液相色谱得到了迅速的发展。
随着其他科学技术的发展，出现了新型的高压输液泵、高效的固定相和柱填充技术、高灵敏度的检测器，加上计算机的应用，使得液相色谱实现了高效率和高速度。
这种分离效率高、分析速度快的液相色谱称为高效液相色谱（High performance liquid chromatography, HPLC）。
二、实验装置：Agilent(安捷伦)1100系列液相色谱系统简介：Agilent1100系列HPLC组件和系统，将Agilent长期的化学分析经验与领先的计算机技术结合，把网络技术引入了实验室。
从1996年以来，在全球已经安装了超过130,000台1100组件和55,000多套化学工作站数据处理系统，成为目前单一型号市场占有率最高的液相色谱系统。
本仿真软件是模拟用Agilent化学工作站的数据处理系统进行样品分析和数据采集（色谱图）的过程。
注：本软件只是模拟分析的过程和内容，并不涉及其原理，所以实验中的参数调节对结果并没有影响，而真实实验结果是随参数的变化而变化的，这一点需要特别注意！实验主界面：化学工作站界面：三、实验操作：第一步：选取实验点击主菜单上的“实验选取”，会出现如下的对话框：用鼠标左键点中你要做的实验，此文件名会出现在对话框的“文件名”一栏的文本框中，在此实验文件上面双击左键或者点击“打开”按钮打开实验文件。
第二步：确认操作条件点击主菜单上的“操作条件”，会出现如下的操作条件列表：在实验调节过程中，请以此列表内的条件为准进行调节，否则不能正确输出色谱峰。
第三步：加入试剂点击仪器上的自动进样器部分（当鼠标移到仪器的各部分时会出现相应的说明），出现如下画面：点击下面的试剂小瓶，会自动放置到自动进样器的托盘中。
完成后，点击主界面上的电脑启动化学工作站。
第四步：编辑方法击主界面上的电脑启动化学工作站开始编辑方法。
HPLC测定大黄素含量的总结一、仪器和试药Agilent 1100型高效液相色谱仪、Agilent化学工作站、HT-230A 柱温箱、大黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为：110756-200110）、大黄素样品（****生化有限公司生产）、甲醇（分析纯和色谱纯两种）、磷酸（分析纯）、蒸馏水（自制二次蒸馏水）二、方法与结果2.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱：Agilent TC-C18柱（150mm×4.6 mm，5μm）流动相：甲醇：0.6%磷酸溶液（75：25）流速：1ml/min柱温：35℃进样量：10μl检测波长：254nm在此色谱条件下，大黄素对照品、供试品溶液、阴性对照品的色谱图如下：2.2方法考察阴性对照品试验：按制备方法制备不含大黄素的对照品依法测定，其他成分不干扰大黄素的含量测定。
线性关系试验：精密称取大黄素对照品用甲醇制成0.1mg/ml的对照品贮备液，分别精密量取该溶液1.0ml；2.0 ml；3.0 ml；4.0 ml；5.0 ml置10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别吸10 μl 注入液相色谱仪，记录峰面积，以峰面积为纵坐标、进样量为横坐标绘制标准曲线，回归方程为：Y=8.7797×10e5－12.9303r=0.9997Res=0.48%线性范围：0.05~0.2μg/ml (n=5) 精密度试验：同一浓度对照品溶液重复进样5次，其结果为98.44%；99.03%；98.18%；99.23%；98.0%；Ksv=0.54%,表明精密度良好。
稳定性试验：取同一供试品溶液，在室温下分别放置0h；2 h；8 h；16 h；24 h 后进样，测定大黄素峰面积值无明显变化，RSD=0.65% (n=5)重现性试验：取同一样品，精密称定，按照样品含量测定方法重复测定5次，求得含量的RSD=0.75% (n=5)加样回收率试验：精密量取大黄素已测知含量的样品溶液，精密加入大黄素对照品溶液，混匀进样，记录色谱图，计算回收率，结果见表1：表1：大黄素加样回收率试验结果三、讨论比较了不同比例的甲醇：0.6%磷酸溶液及乙腈：0.1%磷酸等流动相，即如果采用文中的流动相时大黄素的峰形、保留时间相当理想，且无干扰峰出现。
