促甲状腺素化学发光免疫定量检测试剂盒的研制(精)

ft4-化学发光法
FT4（Free Thyroxine）是衡量甲状腺功能的生化指标之一，化学发光法是常用的测定FT4浓度的方法之一。

以下是关于FT4的化学发光法的基本介绍：
化学发光法是一种基于光学原理的分析方法，通过测量光的发射或吸收来定量分析物质的浓度。

在测量FT4浓度时，常用的化学发光法是通过测量甲状腺素（包括游离型和结合型甲状腺素）与特异性抗体间的结合反应来间接测定FT4浓度。

具体步骤如下：
1. 准备试剂：准备化学发光试剂盒，其中包括含有特异性抗体的试剂、底物和共反应试剂等。

2. 准备样本：样本通常是血液或血清。

3. 加入抗体：将样本与化学发光试剂盒中的含有特异性抗体的试剂混合，使抗体与甲状腺素结合。

4. 反应：抗体与甲状腺素结合形成复合物，抑制了发光底物的化学反应。

5. 检测：通过光学分析仪器测量未被消耗的发光底物或被消耗的发光底物的减少来计算FT4浓度。

化学发光法具有灵敏度高、特异性好和操作简便等优点，因此在测定FT4等生化指标时被广泛应用。

需要指出的是，具体的实验步骤和试剂种类可能因具体试剂盒的不同而有所差异。

因此，在具体实验操作过程中，应当遵循所使用试剂盒的说明书，并按照实验室的标准操作程序进行。

总甲状腺素（TT4）测定试剂盒（化学发光免疫分析
法）
2.1外观和性状
试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；包装标签应清晰，准确、牢固；R1 组分应为棕色含固体微粒的液体，无板结、无絮状物。

R2 和R3 组分应为清澈透明的液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。

2.2装量
应不少于试剂瓶的标示装量值。

其中R1≥5.6mL，R2≥6.0mL，R3≥6.0mL。

2.3准确性
用T4 国家标准品配制成与试剂盒对应校准品定标曲线中相应的5 个浓度点进行分析测定，用双对数或其他适当的数学模型拟合，要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行（t 检验）；以T4 国家标准曲线为对照，试剂盒定标曲线校准品的实测值与标示值的效价比在0.900~1.100 之间。

2.4最低检出限
最低检出限应不大于0.5 μg/dL。

2.5线性
试剂盒在0.5-24 μg/dL 区间内，其相关系数（r）应不低于0.9900。

2.6重复性
变异系数CV 应≤ 8%。

2.7批间差
变异系数CV 应≤ 15%。

2.8特异性
浓度不低于500ng/mL 的TT3，检测结果应不高于15.0ng/mL。

浓度不低于50ng/mL 的rT3，检测结果应不高于最低检出限。

促甲状腺激素（TSH）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）1.性能指标1.1试剂条性能指标1.1.1外观试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏，包装标签应清晰、准确、牢固；试剂条中第7孔内组分应为棕色含固体微粒的液体或含棕色固体沉淀的透明液体；第12孔内化学发光底物应为无色或淡绿色液体；其余皆应为无色透明液体，无悬浮物、无沉淀、无絮状物。

1.1.2空白限应不大于0.005μIU/mL。

1.1.3准确度1.1.3.1在试剂盒规定的线性区间内，检测促甲状腺素国家标准品，测定结果的相对偏差应在±10%范围内。

1.1.3.2对具有溯源性的两个浓度水平的正确度控制品进行检测，检测结果与标定浓度的相对偏差应在±10%范围内。

1.1.4线性区间试剂盒在0.02μIU/mL~100μIU/mL区间内，其线性相关系数（r）应不小于0.9900。

1.1.5分析内精密度变异系数（CV）应不大于8.0%。

1.1.6批间精密度变异系数（CV）应不大于15.0%。

1.1.7特异性a)含浓度不低于200 mIU/mL的FSH的零浓度TSH样本，检测结果应不高于0.005μIU/mL；b)含浓度不低于200 mIU/mL的LH的零浓度TSH样本，检测结果应不高于0.005μIU/mL；c)含浓度不低于1000mIU/m L的HCG的零浓度TSH样本，检测结果应不高于0.005μIU/mL。

1.2校准品性能指标1.2.1外观校准品应为无色或浅黄色透明液体。

1.2.2装量装量偏差应在±10%之内。

1.2.3准确度Cal 1、Cal 2实测值与标示值的偏差应在±10%以内。

1.2.4均一性对同一瓶校准品1、校准品2分别重复10次检测，对同一批次10瓶校准品1、校准品2进行检测，检测校准品1、校准品2瓶内差CV应≤10%，批内瓶间差CV应≤10%。

1.3质控品性能指标1.3.1外观质控品应为无色或浅黄色透明液体。

河南省药品监督管理局关于批准注册104个第二类医疗器械产品的公告（2024年9月）
文章属性
•【制定机关】河南省药品监督管理局
•【公布日期】2024.10.11
•【字号】2024年第89号
•【施行日期】2024.10.11
•【效力等级】地方规范性文件
•【时效性】现行有效
•【主题分类】药政管理
正文
河南省药品监督管理局关于批准注册104个第二类医疗器械
产品的公告（2024年9月）
2024年第89号
2024年9月，河南省药品监督管理局共批准注册第二类医疗器械产品104个，具体产品详见附件。

特此公告。

附件：2024年9月批准注册医疗器械产品目录
2024年10月11日
2024年9月批准注册医疗器械产品目录。

TSH促甲状腺素化学发光免疫定量检测的探究【摘要】目的：研制人血清中促甲状腺素（tsh）的化学发光免疫检测试剂盒。

方法：采用辣根过氧化物酶标记的抗tshβ亚单位特异性单克隆抗体（mab），与固相包被的抗tshα亚单位的另一mab配对，以鲁米诺作为底物，采用两步法建立了双位点夹心法人血清tsh的化学发光免疫定量分析法。

结果：该方法灵敏度为0.0788 miu/l，批内cv平均为4.7%，批间cv平均为8.4%，平均回收率为93.05%。

该检测与lh、 fsh和hcg无交叉反应。

【关键词】促甲状腺激素（tsh）；化学发光免疫分析法；试剂盒甲状腺功能改变时， tsh的波动较甲状腺激素更迅速且明显，是反映下丘脑、垂体、甲状腺轴功能的敏感指标，因此采用灵敏度高的tsh免疫分析法具有重要的意义。

化学发光免疫分析（chemiluminescent immunoassay， clia）是一种灵敏的免疫分析方法，在免疫诊断试剂研制中已得到了广泛的应用[3]。

本研究根据化学发光免疫分析法的原理研制了血清tsh的检测试剂盒，与国内外同类产品相比具有简便、快捷、成本低等优点。

1 材料和方法1.1 材料 tsh单克隆抗体（mab）、 tsh标准品抗原和辣根过氧化物酶（hrp）为sigma公司产品，光免板为thermo electron公司产品，化学发光底物为biorad公司产品。

1.2 方法1.2.1 标准品的配制将tsh抗原标定后溶于小牛血清中，配制成含0.1， 1， 5， 20， 100 miu/l的标准溶液。

1.2.2 抗体包被板的制备将100μl含tsh mab（0.5mg/l）的ph9.6碳酸盐缓冲液加至包被板中， 37℃包被2 h，再用含10 mg/l bsa的0.01 mol/l ph7.4磷酸盐缓冲液于37℃封闭2 h后晾干备用。

1.2.3 酶标记物的制备 tsh的酶标记物采用过碘酸钠法制备，然后经0.01 mol/l ph7.4磷酸盐缓冲液透析过夜后，加入等量的甘油于-20℃保存备用。

化学发光免疫类体外诊断试剂（盒）产品技术审评规范（2017版）本规范旨在指导注册申请人对化学发光免疫类体外诊断试剂(盒)产品注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。

本规范是对化学发光免疫类体外诊断试剂(盒)产品的一般要求，申请人应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化，并依据产品特性确定其中的具体内容是否适用。

本规范是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细的研究资料和验证资料。

应在遵循相关法规的前提下使用本规范。

本规范是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本规范相关内容也将进行适时调整。

一、适用范围本规范适用于利用化学发光免疫分析技术对被测物质进行定量检测的第二类体外诊断试剂（包括以微孔板、管、磁颗粒、微珠和塑料珠等为载体的酶促及非酶促化学发光免疫分析测定试剂）的注册技术审查。

依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号，以下简称《办法》）、《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242号）化学发光免疫类体外诊断试剂(盒)产品分类代号为6840。

二、注册申报资料要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、临床意义、产品描述、有关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《办法》和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号）的相关要求。

（二）主要原材料研究资料（如需提供）主要原材料（例如各种天然抗原、重组抗原、单克隆抗体、多克隆抗体以及多肽类、激素类等生物原科，辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等标记用酶、磁微粒及其他主要原料）的选择、制备、质量标准及实验验证研究资料；校准品、质控品的原料选择、制备、赋值过程及试验资料；校准品的溯源性文件，包括具体溯源链、实验方法、数据及统计分析等详细资料。

海峡药学2691年 第33卷第(期表6稳定性试验结果6 h 2h 4h 峰面积6h 8h 14 h 18 h 24hRSD ( % )494635462067494832496625 4968264456149606548627 6. 86表7含量测定结果批号樟脑含量( %)平均( % )RSD ( % )261595148724485246862454 354615961685.268525885229 6. 79261598428.4128. 55108.476. 23.2田静4〕测定樟脑时采用流动相为三氯甲烷-甲醇-水(4 ：52：30)，该流动相采用了毒性较大的三氯甲烷。

与文献4〕方 法比较，本方法的流动相更经济、环保。

作者简介:单景庆，男(268 -)，毕业于天津医科大学，本科，职称:副 主任技师,研究方向：临床生物化学。

参考文献〔4田静,许亚玲，杨迪.反相高效液相色谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中樟脑的含量〔J 〕.中国药房9525,2(12) ：944W45.〔2〕陈念祖，王东蕾,黄滔敏■ RP-HPLC 法测定薄荷脑樟脑滴鼻液中樟脑的含量中国药房S069 96(6)：453W55.4〕谢军,彭贤东，龙凤，等.复方薄荷脑滴鼻液的质量控制〔〕.中国药业 9612,44) ：47T8.〔〕王慧•紫外-可见分光光度法测定复方薄荷脑滴鼻液中樟脑的含量4〕海峡药学,62,6(4 ： 85 96.4〕王爱武,刘帅S 长鉴，等•复方薄荷脑滴鼻液质量控制方法的改进〔〕•中国医院用药评价与分析,2513,4(7) ：628W39•J 6〕邱财荣，殷萌，孔爱英，等•气相色谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中薄荷脑和樟脑的含量〔〕•西北国防医学杂志,64 96(9):584- 5852〔7〕姚鑫,程宗琦，姜玮，等•气相色谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中樟脑和薄荷脑的含量4〕西北药学杂志,62 04(5 )：594999.4〕马海平，王曼，朱军，等•气相色谱法检测复方薄荷脑滴鼻剂薄荷脑和樟脑的含量4〕湖北医药学院学报961908(6) ：561965.•临床药学•两种化学发光分析仪检测促甲状腺激素(TSH)结果的比对分析单景庆(天津市宝坻区宝平医院，天津391876)摘要：目的 通过比较两台不同化学发光免疫分析仪(Ruhc hUas c411全自动化学发光分析仪和雅培U906SR 全自动化学发光分析仪)的促甲状腺激素(TSH)检测结果，验证两种不同分析仪检测促甲状腺激素(TSH)的准确性。

2. 性能指标2.1 装量试剂盒各溶液最大允许负偏差为 6.0％。

2.2 外观试剂盒中校准品为无色或者淡黄色液体，其它液体组份试剂均为澄清透明；微孔反应板应封口良好，无破损。

2.3 灵敏度试剂盒的灵敏度应不高于0.25μIU/ml。

2.4 特异性用黄体生成素（hLH）250U/L 进行检测，测得表观hTSH 浓度不高于0.25μIU/ml。

用促卵泡激素（hFSH）250U/L 进行检测，测得表观hTSH 浓度不高于0.25μIU/ml。

用绒毛膜促性腺激素（hCG）10000U/L 进行检测，测得表观hTSH 浓度不高于0.25 μIU/ml。

2.5 线性相关系数试剂（盒）的线性范围（0.25 μIU/ml～324 μIU/ml）内的线性应符合如下要求：a)线性相关系数r≥0.990；b)检测浓度＜100μIU/ml 的hTSH 时，线性的绝对偏差应在±10μIU/ml 范围内；检测浓度≥100μIU/ml 的hTSH 时，线性相对偏差不超过±20%。

2.6 测量准确度测定浓度为50μIU/ml（允许偏差为±20%）的hTSH 国家标准品，测定结果的相对偏差应在±10%范围内。

2.7 测量精密度2.7.1 批内不精密度试剂盒的批内不精密度（CV）应不超过15.0%；2.7.2 批间不精密度试剂盒的批间不精密度（CV）应不超过20.0%。

2.8 质控品测定值用三种不同浓度的质控品进行测定，测定结果应在允许范围内。

2.9 HOOK 效应检测浓度为2000μIU/ml 的hTSH 时，其荧光值仍高于324μIU/ml 校准品的荧光值。