温度对果蝇的影响
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《动物遗传学》实验报告
实验题目不同温度对果蝇子代数量性状
和雌雄比例的影响
实验时间2013年10月20日—— 12月2日
成员姓名王枭学号：20110284
王进学号：20110287
颜俊学号：20110290
黄强学号：20110288
郭辉学号：20110298
向阿敏学号：20110314
马向阳学号：20110280
班级2011级水教1班
指导教师蒋岸岸
等级:
一、实验目的
实验通过对亲代野生型红眼黑腹扩大培养，将子代果蝇按雌雄比例为4:4装入9个培养瓶中每一个温度3个瓶子，并置于17℃、25℃、30℃的恒温箱中培养，观察并记录子代果蝇的数目、性别比，通过比较确定最适温度，探讨温度对果蝇数量性状和雌雄比例的影响。
二、实验原理
果蝇作为一种良好的动物实验材料，具有生长迅速，繁殖力强；后代数量大，便于统计分析；个体小，外饲养管理方便；变异类型多，易于观察和杂交组合；染色体巨大，且数量较少，便于观察研究等优点。
1、培养基的配制（2瓶培养基的配方）
②取60ml水于大烧杯中，加入琼脂1.0g，煮沸溶解后再加入葡萄糖9g，
期间要不断搅拌，防止糊底；
③将二者混合，继续加热，待煮沸后冷却到60℃，加入一团酵母膏（当
培养基开始变色即可）和4滴丙酸，搅拌均匀后即可分装到两个培养瓶中。
注：①玉米粉一定要先用凉水拌匀后再加热，不能直接倒入加热的培养基中，否则容易聚集成团，不易溶解。
配制的培养基容易出现块状，不易于果蝇的利用。
②酵母为活性物质，高温易失活。
因此应当在培养基冷却到60℃左右时
加入到培养基中，切勿将酵母粉加入到培养基中直接煮沸。
2、果蝇的麻醉
因为果蝇对乙醚很敏感，易麻醉，可以对作种的果蝇轻度麻醉（果蝇翅膀外展45℃角表示已死亡）。
将培养瓶口与麻醉瓶口对接，使麻醉瓶位于上方，由于果蝇具有趋光性，所以会往上面的瓶子爬。
待果蝇全部进入麻醉瓶后，在麻醉瓶的棉塞上滴2滴乙醚，并迅速用棉塞将麻醉瓶塞住。
半分钟左右，果蝇被麻醉，活动缓慢。
若麻醉过度，果蝇两翅展开且肢体僵硬，说明已致死；若麻醉过轻，则果蝇会马上醒过来，对实验造成影响。
因此，必须抓紧时间将果蝇移人培养瓶中。
可将培养瓶横卧，用干净毛笔把果蝇挑人，待果蝇清醒后，再竖立加塞，防止果蝇粘在培养基上。
3、果蝇雌雄的分辨
培养果蝇，关键是要准确分辨雌雄。
如果按性梳和腹背板上的条纹数来分辨，往往效果不佳，一则由于果蝇的姿态不同，观察的角度不同。
雄性的性梳不易观察到。
另外，在分辨处女蝇雌雄时，由于果蝇刚刚羽化，腹背条纹不清，性梳也不易分辨。
雄性果蝇在腹部下部有突起的交尾器，上有粗黑刚毛，借助光学显微镜一眼就能看出，而凭肉眼只能看见腹部下部有一小黑点；雌性在腹部末端有管状产卵管，没有黑点。
三、实验材料
野生型红眼黑腹果蝇，果蝇培养方法采用玉米一琼脂培养基：水100ml，琼脂1.0g，葡萄糖9g，玉米粉12g，酵母膏一团，丙酸4滴。
四、实验步骤
1、培养基的制作
将3个干净的培养瓶和棉塞于高压锅内灭菌30min，待冷却至室温，倒入约2cm 厚的未完全冷却的培养基，待培养基冷却凝固后如有水分，用酒精棉球将水分擦去，即可将果蝇转入培养。
2、果蝇的扩大培养
将麻醉好的15对果蝇分别平均放入3培养瓶中，置于25℃的恒温箱中培养9天，使果蝇的数目增加至100只左右，培养过程中应每隔三天观察一次，在第7天左右当观察有蛹出现时把亲本果蝇处理掉，观察培养基是否发霉、果蝇是否死亡等。
若培养基发霉，应及时更换新培养基，以便实验顺利进行；
若果蝇有死亡，应及时将尸体清除，防止尸体腐烂污染培养基。
3、收集子一代果蝇
当第7天将亲本处理掉后，看见有蛹出现，每天早上9:00，晚上7:00收集F1代。
做2个新的培养基，将收集的F1代果蝇雌雄分开单独暂养。
收集到所需数量即可开展下一步实验。
4、果蝇的分瓶培养
当收集到雌雄分别达到40只时，即可开展实验。
灭菌9个培养瓶待用，在配置9个培养瓶所需要的培养基（见实验原理中培养基的制作，可多做一个培养瓶用以装剩下的亲本，以防实验失败备用）将雌雄果蝇麻醉好（见实验原理中果蝇的麻醉），在9个已经准备好的培养瓶上添上标签（实验类型，班级，时间等信息），在9个瓶中每瓶放入雌雄各4只果蝇，动作一定要迅速，防止麻醉后的果蝇苏醒后飞走。
然后将9个培养瓶分别置于17℃、25℃和30℃的培养箱中培养七天左右，当看到有蛹和大量三龄幼虫，放飞亲代果蝇，继续培养子一代幼虫七天，每天晚上7:00数一次果蝇，将子一代果蝇麻醉并记录其数目。
3、实验结果及分析
1实验结果
1、子一代果蝇数目记录表
2、不同梯度的温度F1带数量及雌雄比例。
温度雌雄1号瓶2号瓶3号瓶
17℃雌性0 0 0 雄性0 0 0
17-25℃雌性21 27 24 雄性18 22 20
25℃雌性59 60 70 雄性62 55 60
30℃雌性55 47 45 雄性49 42 44
温度
数目
性别
雌果蝇♀雄果蝇♂总和
17℃0 0 0 17℃提升25℃24 20 44 25℃63 59 122 30℃49 45 94
3、果蝇生活周期与温度的关系
2结果分析
①在三个温度中，25℃最适合果蝇的生长，子一代数目最多。
低于或高
于25℃，果蝇的生活周期都要变长，导致子一代数目减少，尤其17℃一组最明显。
处于17℃的培养箱中的亲代果蝇，在培养时间为一个星期时，产生的幼虫极少。
由于17℃的培养条件下卵到幼虫、幼虫到成虫的时间特别长，所以把亲代果蝇放飞后继续培养一个星期，只有21只蛹，没有成蝇的出现。
见实验结果，我们可以看出17℃两周后还没出结果，而加温到25℃2天后即可出果蝇。
②温度为17℃一组的培养基，在多次培养过程中都不同程度的长霉。
查
询相关资料后得知,当环境温度不适应果蝇生长时（温度低于18℃），培养基接种后的7天内特别容易长霉。
而实验时所用的培养箱的温度大多数时间为17℃，所以多次出现长霉现象。
且该培养箱中的多数培养瓶都长霉，对于实验结果存在一定影响。
③子一代果蝇中，雌果蝇数目略多于雄果蝇，但幅度不是太大，雌雄性
别比基本符合1:1，符合孟德尔比数，说明性别和其他性状一样受遗传物质的控制。
④通过上述2个图可以看出，同一温度不同号数的瓶中的数量相差不大，
差异不显著。
