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巴豆生物碱对肺腺癌细胞凋亡的影响及机制研究

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巴豆的化学成分和药理活性研究进展

巴豆的化学成分和药理活性研究进展

巴豆的化学成分和药理活性研究进展金锋;张振凌;任玉珍;陈彦琳;杜杰;梁焕;周林;白宗利【摘要】巴豆为常用川产中药,主要含有巴豆油、蛋白质、二萜及其酯类、生物碱等成分,具有泻下、抗肿瘤、抗病原微生物、镇痛等多种药理作用.综述近年来巴豆化学成分和药理的研究概况,为更好地利用和开发巴豆提供依据.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2013(015)005【总页数】4页(P372-375)【关键词】巴豆;化学成分;药理作用【作者】金锋;张振凌;任玉珍;陈彦琳;杜杰;梁焕;周林;白宗利【作者单位】河南中医学院,河南郑州 450008;河南中医学院,河南郑州 450008;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京102600;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京 102600【正文语种】中文巴豆始载于神农本草经，为木部下品，又称猛子仁，刚子，巴菽、双眼龙等。

为大戟科植物巴豆Croton tiglium L.的干燥成熟果实。

主产于西南及福建、湖北、湖南、广东、广西等地,为较常用川产道地中药材，在四川从梁代开始由野生变家种，产量居全国之首，其中又以宜宾的产量最高，占全国产量的90%。

生巴豆味辛，性热；有大毒，归胃、大肠经。

内服泻下寒积，逐水消肿，祛痰利咽，外用蚀疮，可用于恶疮疥癣[1]。

因其毒性较大，多制成霜使用。

作者对国内外有关巴豆的化学成分和药理作用等方面进行了较为系统的综述，为更好地研究巴豆提供了科学依据。

综合文献报道，巴豆的化学成分研究主要集中在种仁上，种仁含脂肪油34%～57%，蛋白质约18%。

主要含二萜及其酯类、生物碱类及植物毒蛋白类[1]。

1.1 脂肪油类巴豆脂肪油为棕榈酸、硬脂酸、油酸、巴豆油酸、巴豆酸等组成的甘油酯。

油中含巴豆醇及16种巴豆醇双酯化合物，其中巴豆醇-12,13-二酯的含量约占巴豆油的4%；巴豆醇三酯的含量约占巴豆油的4%。

异甾体类生物碱的研究进展

异甾体类生物碱的研究进展

异甾体类生物碱的研究进展摘要:异甾体类生物碱是一类具有生理活性的物质，是许多药用植物的有效成分之一。

综述了近年来研究较多的百合科贝母属和藜芦属植物中异甾体类生物碱的研究进展，重点介绍了异甾体类生物碱化学结构特点及其药理作用，为异甾体类生物碱的深入研究提供参考。

关键词：西藜芦碱类；介藜芦碱类；药理作用异甾体类生物碱是甾体类生物碱按甾核的骨架分类的一种，有光学活性和显著的生理效应，如抗肿瘤、免疫调节、抗病毒、止咳等。

其母核是由1，2苯芴和一个含氮杂环骈合而成的，主要分布在百合科贝母属和藜芦属植物中。

异甾体类生物碱由于具有一定的生理活性，在国内外已经引起了广泛的关注。

本文就近年来人们对异甾体类生物碱的研究概况作一综述。

1 异甾体类生物碱的结构分类异甾体类生物碱按化学结构特点可以分为西藜芦碱类(Cevine group)和介藜芦碱类(Jervine group)。

西藜芦碱类是由异甾核与喹喏里西啶骈合而成的六元环骨架，已发现的此类生物碱的A／B、B／C环均为反式，C／D环均为顺式，但D／E和E／F环的键合方式多有不同。

已分离出许多D／E和E／F键合方式不同的立体异构体，此类生物碱常以游离氨基醇的形式存在，环上羟基多为2~3个，其母核结构见 图1。

介藜芦碱类骨架与西藜芦碱类骨架的差别在于C18与氮原子之间无价键相连。

此类化合物大多数具有△5(6)、△12(13)结构，可分为有C17、C23氧桥者和无C17、C23氧桥者两型，前者在酸作用下可断裂形成异构化物。

其母核结构见图2。

1.1 西藜芦碱类西藜芦碱类生物碱主要分布于百合科贝母属植物和藜芦属植物中。

近年来，有人对其做了大量的研究，分离及鉴定了多种西藜芦碱类生物碱。

目前已经在贝母属植物中发现，贝母生物碱绝大部分属于异甾体类生物碱，约占86％［1］。

张建兴［2］等从浙贝母(FritiUaria thunbergiiMiq)中分离出7种西藜芦碱类生物碱。

徐东铭［3］等从平贝母(suriensis Maxim)中分离出3种西藜芦类生物碱。

巴豆苷药理作用及其机制的研究

巴豆苷药理作用及其机制的研究

WANG An-qi et al(College of Life Scicnce&Tchnology, Hcilongiang Bayi Agriculhual University, Daqing, Heilongjiang 163319)
Abstract Isoguanosine is an important alkaloid component in croton, which has the effects of cooling down, removing swelling, expelling phlegm and throat. It has been found that Isoguanosine can play a variety of pharmacological effects such as anti-cancer, anti-inflammatory, anti-arrhythmia, antiacute myeloid leukemia through a variety of ways. This paper reviews the pharmacological effects and mechanism of Isoguanosine. Key words Isoguanosine; Anticancer; Anti-inflammatory; Anti-arrhythmic; Antiacute myeloid leukemia
3 巴豆苷的抗心律失常作用 心 律 失 常（Cardiac dysrhythmia）
是由于窦房结激动异常、心脏冲动的起 源部位、频率节律、传导速度或激动次 序发生异常所导致的疾病。巴豆苷对抗 心律失常具有显著抑制心室肌细胞增 殖分化作用。Zhang H 等 [9] 通过检测巴 豆苷对家兔心室肌细胞的动作电位发 现，用 10、100、200 μmol/L 的 巴 豆 苷 对 心 室 肌 细 胞 进 行 干 预，不 同 浓 度 的 巴豆苷对心室肌细胞 INa.L（晚钠电流） 呈浓度依赖性抑制增长。Ren Z 等 [10] 通 过应用 Hill 方程研究发现，拟合形成巴 豆苷对 ICa.L（L—型钙电流）抑制百分 比的剂量—反应关系曲线，心室肌细胞 ICa.L 的 IC50 值 为 158.99 μmol/L。同 样复灌后的 ICa.L 基本恢复到原来的幅 度，实验结果表明，巴豆苷对 ICa.L 的 抑制增殖作用是可恢复的。Cao Z Z 等 [11] 研究发现，巴豆苷对 IKr（钾电流）有 显著的抑制增殖作用。以上实验证明巴 豆苷具有显著抑制心室肌细胞增殖分 化作用。

基于反向分子对接和网络药理学预测木兰花碱抗肿瘤的潜在作用机制

基于反向分子对接和网络药理学预测木兰花碱抗肿瘤的潜在作用机制
明末李中梓是中医大家、教 育 家 ，其著作《医宗必
读 》对 后 世 影 响 深 远 ，最早提出治疗肿瘤当分早中晚 三 期 ，治疗肿瘤有新制阴阳攻积丸、息贲丸等名方，在 这 些 治 疗 肿 瘤的方剂中都共同使用到巴 -0 2 -1 2
修 回 日 期 ：2 0 2 1 -0 3 -0 6
202丨 第 二 十 三 卷 第 四 期 * Vol.2 3 N o .4
基于反向分子对接和网洛药理学预测
木兰花碱抗肿4 的潜在作用机喇*
s 唐 晓 龙 、 金 庆 江 '， 王 瑞 平 2， 王 鑫
滕 钰 浩 2， 汤 海 林 、
周 逸 群 '， 尹 浩 、 金 庆 雷
(1.苏 州 市 中 西 医 结 合 医 院 苏 州 215000; 2 . 江 苏 省 中 医 院 南 京 210009)
pathway、 Ras signaling pathway、 Metabolic pathways、 PPAR signaling pathway 等 信 号 通 路 参 与 抗 肿 瘤 的 作 用 。
结 论 通 过 对 木 兰 花 碱 治 疗 肿 瘤 潜 在 靶 点 的 挖 掘 ，我 们 推 测 ，其 可 用 于 治 疗 胰 腺 癌 、前 列 腺 癌 等 多 种 肿 瘤 ，
然而目前针对木兰花碱的研究大多局限于某一 作 用 靶 点 或 者 单 一 信 号 通 路 ，研 究 比 较 局 限 ，并且缺 乏 理 论 依 据 。 网 络 药 理 学 是 通 过 生 物 信 息 数 据 库 ，结 合了生物信息学、药 理 学 分 析 、计算生物学等多学科， 进 行 虚 拟 筛 选 药 物 作 用 疾 病 的 潜 在 靶 点 及 通 路 ，从整 体性和系统性角度初步预测药物作用疾病的可能作 用 机 制 的 学 科 ，目 前 网 络 药 理 学 参 与 了 很 多 中 医 药 研 究 项 目 的 前 期 预 测 ，被 广 泛 应 用 于 中 药 领 域 中 ，包括 中 药 新 药 研 发 、中 药 药 理 学 作 用 机 制 研 究 、中药质量 控 制 、组方配伍等|13—'反 向 分 子 技 术 是 以 小 分 子 化 合 物 作 为 研 究 对 象 ，在 与 蛋 白 质 数 据 库 中 的 已 知 蛋 白 自动对接，寻 找 小 分 子 化 合 物 潜 在 作 用 耙 点 ，除预测 潜 在 机 制 ，还可预测不良反应的蛋白靶点"91。本次为 了探索木兰花碱在人体抗肿瘤的作用靶点及潜在机 制 ，首次采用反向分子对接和网络药理学联合运用研 究木兰花碱抗肿瘤的潜在机制。

中药巴豆的功效与作用

中药巴豆的功效与作用

中药巴豆的功效与作用中药巴豆的功效与作用中药巴豆，学名乌头，属于毛茛科植物，是一种常见的中药材。

巴豆的种子富含乌头碱等活性成分，具有很多功效与作用。

在中医药领域，巴豆被广泛应用于治疗眩晕、偏头痛、癫痫等病症，具有较好的疗效。

本文将从巴豆的药理成分、药理作用、用途与应用等方面详细介绍巴豆的功效与作用。

一、巴豆的药理成分巴豆的主要活性成分是乌头碱。

乌头碱是一种刺激性有机碱，也是巴豆的主要毒性成分。

除了乌头碱之外，巴豆还含有皂甙、萜类化合物、多酚类成分等。

这些化合物共同作用，形成了巴豆的药理活性。

二、巴豆的药理作用1. 镇痛作用：巴豆可通过中枢神经系统的作用，发挥镇痛作用。

乌头碱能够通过抑制脑干的抑制性神经元来减少痛觉传入，从而起到镇痛的作用。

2. 抗癫痫作用：癫痫是一种在中枢神经系统中发生的干扰神经元兴奋和抑制平衡的疾病。

巴豆中的乌头碱能够通过调节神经递质的释放和抑制神经元兴奋来发挥抗癫痫作用。

3. 抗缺血作用：巴豆中的乌头碱能够扩张脑血管，增加脑血流量，改善脑缺血情况，从而发挥抗缺血作用。

4. 解痉作用：巴豆中的乌头碱能够通过抑制神经传导，减轻平滑肌的收缩，从而缓解痉挛症状。

5. 抗肿瘤作用：巴豆中的乌头碱具有抗肿瘤作用。

研究表明，乌头碱可以抑制肿瘤细胞的增殖和分化，从而发挥抗肿瘤作用。

三、巴豆的用途与应用1. 用于治疗头痛、眩晕等症状：巴豆的镇痛作用能够缓解头痛、偏头痛等症状。

巴豆中的乌头碱还可以改善脑缺血引起的眩晕症状。

2. 用于治疗癫痫：巴豆中的乌头碱能够抑制神经元的兴奋，发挥治疗癫痫的作用。

临床研究表明，巴豆具有较好的抗癫痫效果。

3. 用于治疗风湿病、痛风等关节炎性疾病：巴豆中的乌头碱能够缓解关节炎性疾病带来的关节炎疼痛和炎症。

4. 用于治疗神经症、抑郁症等精神疾病：巴豆的镇静作用能够缓解神经症、抑郁症等精神疾病症状。

5. 用于治疗肿瘤：巴豆中的乌头碱具有抑制肿瘤细胞增殖和分化的作用，可以作为辅助治疗肿瘤的药物。

小檗碱及其衍生物的抗癌机制研究进展

小檗碱及其衍生物的抗癌机制研究进展

小檗碱及其衍生物的抗癌机制研究进展朱学君;王译伟;张孝琴;王钦;张春;郭建敏【摘要】小檗碱又称黄连素,是一种异喹啉类季铵生物碱,具有抗菌抗炎、止泻、抗高血压、降血脂等作用.近年来研究发现小檗碱还有抗肿瘤的作用,而且毒副作用小,使得小檗碱在抗肿瘤研究方面前景更加广阔.但是小檗碱在肠道吸收较差,药理作用也还需要经临床研究进一步证实.近年来也有很多研究者对小檗碱的不同位点进行了结构修饰,期望得到水溶性更好,抗肿瘤活性更高的衍生物.本文就小檗碱及其衍生物的抗肿瘤机制的研究进展进行综述.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)017【总页数】4页(P3-6)【关键词】小檗碱;小檗碱衍生物;抗肿瘤机制;结构修饰【作者】朱学君;王译伟;张孝琴;王钦;张春;郭建敏【作者单位】西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000;西南医科大学, 四川泸州 646000【正文语种】中文【中图分类】R914.5小檗碱来源于中国草本植物黄连和其他植物中，是一种异喹啉类季铵生物碱，分子式为[C20H18NO4]+，结构如图1，相对分子质量为336.37。

小檗碱为黄色针状结晶，游离的小檗碱可以溶于水，难溶于乙醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度也较小。

长期以来小檗碱被用作抗生素和抗菌剂，它有很多生物和药理活性，例如抗菌、免疫等活性[1]。

最近越来越多的研究表明，小檗碱的抗癌作用主要是因为它可以阻止并杀死癌细胞的扩散[2]。

小檗碱在体内均有一定程度的抗肿瘤活性，其抗肿瘤机制与直接的细胞毒作用，抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤转移等方面因素[3]。

在临床上，低剂量的小檗碱也被认为是无毒的[4]，但由于小檗碱的脂溶性差，难以透过细菌的细胞膜，口服较难吸收，抗肿瘤活性无法完全发挥，限制了其临床应用范围。

巴豆的药理作用研究进展

巴豆的药理作用研究进展

巴豆的药理作用研究进展阎紫菲;朱彦霏【摘要】巴豆是我国传统的中药材,其分布和用途都很广泛,是一种颇具发展前景的药材.本文综合阐述了巴豆的多种药理功效,如抗菌抗炎、治疗精神病、抗癌作用与抑癌作用等多种药理功能,以期为巴豆的开发研究及生产应用提供理论参考.【期刊名称】《农技服务》【年(卷),期】2017(034)013【总页数】2页(P16,15)【关键词】巴豆;药理活性;药用植物【作者】阎紫菲;朱彦霏【作者单位】内江师范学院信息化建设与服务中心,四川内江 641100;内江师范学院生命科学学院,四川内江 641100【正文语种】中文抗生素是目前抗菌方面的主要药物，在传染病治疗方面也取得显著的效果。

但由于应用的不恰当，使得耐药菌株的不断出现，抗菌难度不断增加，也出现一些抗生素不良反应，而降低了抗生素的治疗效果。

严重地威胁着人类的健康。

随着化学药品的毒副作用不断出现，科学家们都正努力研制作用更强、更广、更安全的抗生素，但新抗生素的产生却跟不上耐药菌株的形成速度，且生化药品研制成本昂贵。

因此减少耐药菌株的生成和研制新的抗菌药物成了21世纪医学界的重要课题。

随之，人们的视线逐渐转到药用植物上来。

几千年以来，通过实践与不断地认识，药用植物在预防治疗感染性疾病方面有着悠久的历史。

并且，在现代的感染性疾病治疗方面发挥着积极的作用。

相对而言，药用植物的副作用小，极少产生抗耐药性。

在此情况下，药用植物抗菌药物的深入研究为防止感染提供了一定的启示。

因此研究药用植物抗菌活性对解决抗生素耐药方面有着重要意义。

从而药用植物提炼抗菌药物也逐渐受到国内外学者的重视。

巴豆始载于《神农本草经》，为木部下品。

主要产自西南、福建、湖北、云南、广东、广西等地。

为较常用川产道地中药材。

中医药上以果实为药，性热，味辛，功能破积、逐水、涌吐痰啖，有助于治寒结便秘，腹水肿胀，喉风喉痹，痈疽、恶疮疥癣，对结核、肝硬化腹水等起重要作用。

巴豆因其具较强的理化活性[1]，通过GC-MS法测定了巴豆中的成分，主要有亚油酸、油酸、花生酸、棕榈酸、硬脂酸和亚麻油酸等。

大黄素对人肺肿瘤细胞(H522)增殖与凋亡的效应及作用机制

大黄素对人肺肿瘤细胞(H522)增殖与凋亡的效应及作用机制
用不同浓度（０、５、２０、１００μｍｏｌ／Ｌ）的大黄素作 用 Ｈ５２２细胞 ４８ｈ，观察细胞的形态变化。收集细 胞，将细胞按照密度为 ４．０×１０５ 接种于 ９６孔板中， 于 ３７℃ ＣＯ２培养箱中培养 ２４ｈ，进行细胞爬片，１Ｘ ＰＢＳ清洗，用 ４％的多聚甲醛固定 １０ｍｉｎ后，避光条 件下，加入 Ｔｕｎｅｌ溶液于 ３７℃孵育 ６０ｍｉｎ，最后加 入 ＤＡＰＩ溶 液 封 片。荧 光 显 微 镜 下 观 察 细 胞 形 态 变化。 １．２．５ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验
用不同浓度（０、５、２０、１００μｍｏｌ／Ｌ）的大黄素作 用 Ｈ５２２细胞 ２４ｈ、４８ｈ与 ７２ｈ。收集生长状态良 好的细胞，消化、清洗、离心，在 ９６孔板的每孔加入 ２．５×１０３浓度的细胞，于 ３７℃ ＣＯ２培养箱中培养。 每个孔中加入 １０μｌＣＣＫ－８溶液，在培养箱中孵育 ２ｈ，使用酶标仪测量 ４５０ｎｍ处的吸光度（ＯＤ），计 算比较不同浓度大黄素的细胞抑制率：抑制率 ＝［１ －ＯＤ大黄浓度组 ／ＯＤ空白对照组］×１００％。
采用 ＳＰＳＳ１３．０软件进行统计分析，实验数据 用均数 ±标准差（ｘ±ｓ）表示，采用单因素方差分析 （ＡＮＯＶＡ）方法对多组间实验数据进行分析比较，均 继以 ＬＳＤ进行两两比较。Ｐ＜０．０５为差异有统计 学意义。
２ 结 果
２．１ 大黄素对 Ｈ５２２细胞增殖的影响 ＣＣＫ８实验结果发现：不同浓度（５、２０、１００μｍｏｌ／
１．２．３ 流式细胞实验 用不同浓度（０、５、２０、１００μｍｏｌ／Ｌ）的大黄素作
用 Ｈ５２２细胞 ２４ｈ、４８ｈ与 ７２ｈ。收集生长状态良 好的细胞，弃去原培养基，消化、清洗、离心，制成细 胞悬液，经 ９５％乙醇固定过夜，清洗，加入适量 Ａｎ ｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ溶液与 ＰＩ染色液孵育 ２０ｍｉｎ左右， 轻轻混匀，转 移 至 上 样 管 中，通 过 流 式 细 胞 仪 检 测 细胞的凋亡与细胞周期的变化。 １．２．４ Ｔｕｎｅｌ免疫荧光实验

小叶大戟的功效与作用

小叶大戟的功效与作用

小叶大戟的功效与作用小叶大戟，又称之为巴豆树，是我国一种常见的常绿小乔木，广泛分布于南方的山区和亚热带地区。

小叶大戟具有许多药用功效和健康作用，被用于中医药和现代医学领域。

本文将介绍小叶大戟的功效与作用，并以科学角度探讨其药理学机制和主要活性成分。

小叶大戟的主要功效之一是抗肿瘤作用。

研究发现，小叶大戟中的有效成分主要包括萜类、生物碱、黄酮类、多糖类等，这些化合物具有抗肿瘤活性，能够抑制肿瘤细胞的增殖和扩散，诱导肿瘤细胞凋亡，甚至逆转多药耐药性。

一些研究还表明，小叶大戟中的生物碱成分能够诱导肿瘤细胞产生细胞周期阻滞和基因突变，从而抑制肿瘤生长和扩散。

除了抗肿瘤作用，小叶大戟还具有抗炎、抗菌、抗病毒等作用。

研究表明，小叶大戟中的黄酮类化合物具有明显的抗炎和抗菌活性，能够抑制炎症反应和细菌感染，减轻炎性疾病的症状。

此外，小叶大戟中的生物碱成分也具有抗病毒作用，能够抑制病毒的复制和传播，对病毒性感染有一定的防治效果。

小叶大戟还具有一定的免疫调节活性。

研究发现，小叶大戟中的多糖类成分能够增强机体的免疫功能，促进巨噬细胞的吞噬活性，增强淋巴细胞的活化和增殖，提高机体的抗病能力。

此外，小叶大戟中的萜类化合物也具有一定的免疫调节活性，能够调节免疫细胞的分泌及功能，并增强机体的抗病毒和抗肿瘤免疫。

小叶大戟还具有调节心血管功能的作用。

研究发现，小叶大戟中的黄酮类化合物具有抗氧化和抗血小板活性，能够减少心血管疾病的发生和发展。

此外，小叶大戟中的生物碱成分还具有扩张血管的作用，能够改善血液循环，降低血压，预防心血管疾病的发生。

除了上述功效，小叶大戟还具有抗氧化、降血糖、降血脂、促进消化等健康作用。

研究表明，小叶大戟中的黄酮类化合物具有良好的抗氧化活性，能够清除自由基，延缓细胞衰老和疾病的发生。

此外，小叶大戟中的生物碱成分能够抑制糖原合成酶和脂肪酸合成酶的活性，降低血糖和血脂水平，预防糖尿病和高血脂的发生。

此外，小叶大戟中的多糖类成分还具有促进消化和增加食欲的作用，可以提高食欲和消化能力，改善食欲不振和消化不良。

中草药初提物对肺癌细胞 A549的生长抑制及诱导调亡作用

中草药初提物对肺癌细胞 A549的生长抑制及诱导调亡作用

中草药初提物对肺癌细胞 A549的生长抑制及诱导调亡作用李秋萍;刘丛;唐祖明;陈沁;李炯【摘要】目的：肿瘤是因细胞增殖、凋亡等调控机制异常而引起的疾病，目前依然严重危害着人类健康。

文中主要探究中草药初提物诱导肺癌细胞凋亡和抑制增殖的作用。

方法以肺癌细胞A549为对象，实验设空白对照（0 ng／mL）、中草药初提物设不同剂量（170、340、680 ng／mL）组，培养箱中24、48 h培养。

采用CCK8法和LDH法检测中草药初提物对肺癌细胞的生长抑制作用；利用荧光显微镜、流式细胞仪检测细胞调亡；以实时定量PCR和蛋白免疫印迹法检测中草药初提物对hTERT mRNA、Cleaved caspase-3和Cleaved PARP蛋白的相对表达量。

结果随着初提物浓度（170、340、680 ng／mL）和处理时间（24、48 h）的增加，A549细胞存活率也随之降低，损伤率提高（P＜0．05），IC50为510 ng／mL。

空白对照（未用药处理）无DNA损伤的细胞表现为一圆形荧光细胞核，680 ng／mL A549细胞DNA呈典型的凋亡彗星尾形状。

680 ng／mL初提物作用后A549尾部DNA含量较空白对照增加（P＜0．01）。

流式细胞分析仪检测表明，随着初提物浓度的升高和处理时间的延长，A549细胞凋亡率逐步升高。

340 ng／mL提取物处理A549细胞24 h后hTERT mRNA表达量较0 h下调[0．25（0．23～0．28） vs 1．00（0．91～1．09）]，差异有统计学意义（P＜0．01）。

随初提物浓度增加，A549 Cleaved caspase3和Cleaved PARP表达量增多。

结论初提物通过下调hTERT mRNA表达，促进Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白的表达来诱导细胞凋亡。

%Objective Cancer, a disease induced by abnormally regulated cell growth and apoptosis, is imposing a global threat to human health.This study was to explore the effects of Chinese herbal extracts ( CHE) in inducing the apoptosis and inhibiting theproliferation of human lung cancer cells. Methods Human lung cancerA549 cells were divided into a negative control, a high-dose CHE (680ng/mL), a medium-dose CHE (340 ng/mL), and a low-dose CHE (170ng/mL) group.The inhibitory effect of CHE on the proliferation of the lung cancer cells was detected by CCK8 and LDH assays, the apoptosis of the cells was assessed by fluorescence microscopy and flow cytometry, and the expressions of hTERT mRNA, cleaved caspase-3 and cleaved PARP were deter-mined by RT-PCR and Western blot. Results CHE inhibited the proliferation of the A549 cells with an IC50 value of 510 ng/mL. Treatment with high-dose CHE for 48 hours significantly suppressed the proliferation of the cells, induced the release of LDH, and promo-ted the apoptosis of the cells by 72.3%.RT-PCR and Western blot showed that 24-hour treatment with medium-dose CHE reduced the expression of hTERT mRNA by 4 times that of the negative control and up-regulated the expressions of cleaved caspase-3 and cleaved <br> PARP. Conclusion Chinese herbal extracts can induce cell apoptosis by decreasing the expression of hTERT mRNA and increasing those of the cleaved caspase 3 and cleaved PARP proteins.【期刊名称】《医学研究生学报》【年(卷),期】2016(029)003【总页数】5页(P240-244)【关键词】初提物;细胞凋亡;彗星实验;hTERT;caspase 3;PARP【作者】李秋萍;刘丛;唐祖明;陈沁;李炯【作者单位】200444 上海，上海大学生命科学学院;710049 西安，西安交通大学苏州研究生院;210000 南京，东南大学生物科学与医学工程学院;200444 上海，上海大学生命科学学院;215123 苏州，中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所【正文语种】中文【中图分类】R285论著肺癌严重威胁人类的健康[1-3]。

有毒中药现代药理研究之巴豆

有毒中药现代药理研究之巴豆

有毒中药现代药理研究之巴豆
巴豆，又称“马钱子”，是一种常见的有毒中药。

其主要有
效成分为马钱子毒碱，是一种生物碱类化合物。

在传统中药中，巴豆被用于治疗风湿、痢疾、肠痉挛等疾病。

但同时，由于其毒性较大，误食或过量使用会对人体健康造成极大危害。

因此，对巴豆的现代药理研究非常重要。

首先，巴豆的毒性机制主要表现在其主要成分——马钱子
毒碱，它能够升高肌肉组织内钙离子浓度，导致细胞内部钙离子过度积累，从而引起细胞膜的破坏和一系列有害生理反应。

这是巴豆对于人体的神经和肌肉系统所产生的影响。

其次，现代药理研究证实了巴豆具有很强的镇痛作用。

马钱子毒碱在体内作用于神经系统的一些细胞，能够调节神经递质的释放，从而改善疼痛的感觉。

此外，研究人员还发现，巴豆中还含有一些天然物质，比如巴豆酸和巴豆植物酚等，它们也具有一定的镇痛作用。

因此，巴豆可以用于制备一些镇痛药物。

第三，巴豆还具有一定的心血管保健作用。

研究表明，巴豆中的马钱子毒碱可以降低心脏的负荷，增加心肌管腔的容积，促进心肌的血液循环。

另外，巴豆中的巴豆酸具有明显的抗菌和抗病毒作用，可用于预防和治疗某些病原菌和病毒感染的疾病。

最后，需要说明的是，巴豆在使用过程中仍存在较大的风险。

除了上述的毒性作用外，还存在多种不同的药物相互作用，可能会引起不良反应。

因此，在使用巴豆前应当咨询专业医生，遵照医嘱使用。

综上所述，巴豆作为一种含有毒素的中药，其现代药理研究对于解释其作用机制非常重要，并为制备相关药物提供了指导。

但巴豆所具有的毒性和副作用仍需引起人们的高度重视，加强对其研究和使用的规范。

绿豆胰蛋白酶抑制剂BBI诱导肺腺癌A549细胞凋亡

绿豆胰蛋白酶抑制剂BBI诱导肺腺癌A549细胞凋亡

绿豆胰蛋白酶抑制剂BBI诱导肺腺癌A549细胞凋亡王莎莎;马岳;李玉银;罗深恒;刁爱坡;龙民慧【期刊名称】《华南师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(045)003【摘要】研究了绿豆胰蛋白酶抑制剂BBI对人肺腺癌A549细胞增殖抑制作用和对肺腺癌A549细胞凋亡的影响.结果显示:绿豆BBI对人肺腺癌A549细胞的增殖有明显抑制作用,绿豆BBI可以促使人肺腺癌A549细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡.说明绿豆BBI能抑制人肺腺癌A549细胞增殖、诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,为绿豆BBI抗肿瘤效应提供了依据.【总页数】4页(P91-94)【作者】王莎莎;马岳;李玉银;罗深恒;刁爱坡;龙民慧【作者单位】天津科技大学生物工程学院,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457;天津科技大学生物工程学院,天津300457【正文语种】中文【中图分类】R915【相关文献】1.HDAC抑制剂MS-275诱导人肺腺癌细胞系A549基因表达谱分析 [J], 何宝坤;潘德思;马增春;王宇光;高月2.亚硒酸钠通过Keap1/Nrf2/ARE信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡 [J], 田崇梅;夏道宗;邢梦雨;郭璐;张晓熙;赵鑫钰3.苦荞茶多糖诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的线粒体机制 [J], 杨二万;张敏;杨兴斌;杨红燕4.亚砷酸诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对MAP K/ERK信号通路的影响 [J], 梁颖;程钢;黄邓高5.蟛蜞菊内酯通过抑制JAK2/STAT3信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡 [J], 姜姗;刘淼;张黎;干银弟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

小檗碱抗肿瘤作用机制的研究进展

小檗碱抗肿瘤作用机制的研究进展
(1. 福建医科大学 附属协和医院 , 福建 福州 350001; 2. 福建医科大学 , 福建 福州 350004)
[摘要 ] 对近年来小檗碱抗肿瘤机制研究的最新进展进行总结 ,表明小檗碱可通过影响肿瘤细胞生长周期 , 抑制 DNA和蛋白质的合成和影响拓扑异构酶活性来抑制肿瘤细胞增殖 ;通过调节凋亡相关基因的表达 、诱导线粒 体跨膜电位 ( △Φm )下降促进肿瘤细胞凋亡 ;通过抑制肿瘤血管形成 、阻断肿瘤转移相关的信号传导通路 、抗恶液 质病等途径抑制肿瘤转移 ,另外小檗碱可通过诱导肿瘤细胞分化发挥抗肿瘤作用 。
细胞凋亡 ( apop tosis)又称编程性细胞死亡 ,是一个主动
·881·
第 32卷第 10期 中 国 中 药 杂 志
Vol. 32, Issue 10
2007年 5月
Ch ina Journa l of Ch inese M a ter ia M ed ica
2诱导线粒体跨膜电位m下降细胞m是构成线粒体电化学梯度的主要部分常态的m是维持线粒体正常功能必不可少的研究表明小檗碱能诱导m下降从而导致线粒体释放的凋亡活性物质cytc进入胞质cytc可激活caspase级联反应最终导致细胞凋亡其中caspase3是caspase联级反应中重要的效应酶负责对凋亡途径最后执行阶段的全部或部分关键性蛋白的酶切小檗碱能通过诱导细胞m下降激活caspase3使细胞选择坏死1617
在细胞凋亡调控相关基因中 , bcl22 是研究的最为深入 和广泛的的凋亡调控基因之一 , bcl22 是对细胞的凋亡有明 显的抑制作用的原癌基因 ,但是 bcl22要抑制凋亡必须与 bax 形成异二聚体 ,因此 bcl22的表达水平以及 bax与 bcl22种蛋 白的比值直接影响着细胞受到刺激后发生凋亡的比率 , 研 究发现小檗碱可显著 ( P < 0105～01001)促进前列腺癌细胞 DU145和 LNCaP细胞凋亡 ,伴随 bax与 bcl22比值的上调 ,推 测小檗碱诱导肿瘤细胞凋亡的作用与 bax与 bcl22比值的上 调有关 [15 ] 。 3. 2 诱导线粒体跨膜电位 ( △Φm )下降 细胞 △Φm 是构 成线粒体电化学梯度的主要部分 ,常态的 △Φm 是维持线粒 体正常功能必不可少的 ,研究表明 ,小檗碱能诱导 △Φm 下 降 ,从而导致线粒体释放的凋亡活性物质 Cyt C进入胞质 , Cyt C可激活 Caspase级联反应 ,最终导致细胞凋亡 ,其中 , Caspase3是 Caspase联级反应中重要的效应酶 ,负责对凋亡 途径最后执行阶段的全部或部分关键性蛋白的酶切 ,小檗碱 能通过诱导细胞 △Φm 下降激活 Caspase3,使细胞选择坏死 通路 [ 16, 17 ] 。

MLN4924通过抑制类泛素化通路上调人肺腺癌A549细胞中PD-L1的表达演示稿件

MLN4924通过抑制类泛素化通路上调人肺腺癌A549细胞中PD-L1的表达演示稿件

03
MLN4924对A549细胞中 PD-L1表达的影响
MLN4924对A549细胞中PD-L1表达的抑制作用
实验结果显示，MLN4924能够显著抑制A549细胞中PD-L1的表达，表明MLN4924对类泛素化通路 具有抑制作用。
MLN4924对A549细胞中PD-L1表达的抑制作用可能是通过抑制类泛素化通路实现的，这为研究PDL1的表达调控提供了新的思路。
效。
MLN4924的局限性
要点一
耐药性问题
长期使用MLN4924可能导致肿瘤细胞出现耐药性，影响治 疗效果。
要点二
临床试验阶段
MLN4924目前仍处于临床试验阶段，尚未获得广泛用于 肺腺癌治疗的批准。
未来研究方向
探索与其他药物的联合应用
进一步研究MLN4924与其他抗癌药物的联合应用，以提 高治疗效果。
MLN4924的特性
MLN4924是一种小分子抑制剂，能 够通过抑制类泛素化通路上调人肺腺 癌A549细胞中PD-L1的表达。
MLN4924具有高选择性，能够特异 性的抑制NEDD8-activating enzyme (NAE)的活性，从而影响类 泛素化通路。
MLN4924的作用机制
01
MLN4924通过抑制NAE的活 性，导致NEDD8-conjugated 蛋白质无法正常降解，从而上 调PD-L1的表达。
VS
MLN4924对A549细胞迁移和侵袭的 影响可能是通过抑制类泛素化通路实 现的，这为研究肺癌细胞的转移提供 了新的思路。
04
MLN4924在肺腺癌治疗中 的潜在应用
MLN4924的抗癌机制
抑制类泛素化通路
MLN4924通过抑制类泛素化通路，干扰癌 细胞的信号转导和基因表达，从而抑制肿瘤 细胞的增殖和扩散。

阿托伐他汀对人肺腺癌细胞的凋亡作用及其调控机制研究

阿托伐他汀对人肺腺癌细胞的凋亡作用及其调控机制研究

阿托伐他汀对人肺腺癌细胞的凋亡作用及其调控机制研究黄娜;王贝;魏明莉;张春露;李万成【摘要】目的研究阿托伐他汀对人肺腺癌(A549)细胞的抑制作用,并探讨可能的作用机制.方法采用CCK-8法检测不同浓度(0、10、20、40μmol/L)阿托伐他汀对A549细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染后流式细胞术检测不同浓度阿托伐他汀(0、10、20、40μmol/L)对A549细胞凋亡的影响;分光光度法检测不同浓度阿托伐他汀(0、10、20、40μmol/L)对A549细胞caspase-3活性的影响.结果阿托伐他汀抑制A549细胞的增殖,随着浓度的增加,时间的延长,其抑制作用逐渐增强(P<0.01).阿托伐他汀能有效地诱导A549细胞的凋亡,随着浓度的增加,凋亡率增加.阿托伐他汀显著增加A549细胞的caspase-3酶的活性,且呈剂量相关性.结论阿托伐他汀抑制人肺癌A549细胞增殖,促进其凋亡,并且呈明显的时间和剂量依赖,阿托伐他汀通过增加细胞Caspase-3的活性诱导A549细胞凋亡.【期刊名称】《临床肺科杂志》【年(卷),期】2019(024)006【总页数】4页(P1079-1082)【关键词】阿托伐他汀;凋亡;肿瘤【作者】黄娜;王贝;魏明莉;张春露;李万成【作者单位】610500 四川成都,成都医学院第一附属医院呼吸内科;610500 四川成都,成都医学院第一附属医院呼吸内科;610500 四川成都,成都医学院第一附属医院呼吸内科;610500 四川成都,成都医学院第一附属医院呼吸内科;610500 四川成都,成都医学院第一附属医院呼吸内科【正文语种】中文肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，也是恶性肿瘤死亡的重要原因之一，严重威胁人的健康及生命[1]，但其发病机制仍不清楚。

越来越多的研究发现，他汀类药物在抑制胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌及肝癌等的发生、发展中起到重要作用[2-3]。

中医药在癌症治疗方面的研究及应用

中医药在癌症治疗方面的研究及应用

中医药在癌症治疗方面的研究及应用【摘要】分析中医药在抗癌治疗中的作用和抗癌植物类中药的研究进展,提出临床证明中医药中有很多成分具有抗癌、治癌活性。

中医药治疗癌症具有较强的整体观念,能从患者全身考虑,副作用少,经济方便,固本康复。

【关键词】癌症;中医;中药癌症是严重危害人类健康及生命的常见疾病,其发病率和死亡率逐年增加。

据国家卫生部统计,二十世纪七十年代,我国每年死于癌症的人数为70万,九十年代为117万,二十一世纪初则上升为150万[1]。

而治疗水平大致可概括为:仅有部分患者能够治愈,大多数患者为症状缓解,而全部患者均需要关怀和照顾。

目前,癌症的治疗方法主要有手术治疗、放疗、化疗、传统中药和生物治疗等,二十世纪现代医学所形成的三大常规疗法(即手术、放疗、化疗),使癌症的治疗获得了长足的发展,临床治愈率有了明显的提高,但其存在的问题亦不容忽视。

手术治疗对早期及部分中期患者确实可以起到“手到病除”的作用,但那些全身转移患者或癌症晚期患者就不能进行手术。

此外,对于高龄癌症患者来说,手术风险增加。

放疗主要适用于癌细胞全身扩散前、相对局限、对射线敏感的肿瘤,但癌细胞一旦扩散或局部广泛浸润,放疗就达不到治疗效果,且放疗本身也会带来一些近期或远期副作用[2]。

化疗多用于某些癌症的中、晚期治疗,但该疗法同放疗一样,会对人体正常细胞和内脏器官造成极大的损伤。

近几年来,在应用中医中药抗癌方面取得了很大的进展,特别是对术后或接受放、化疗的癌症患者,能有效地抑制残留癌细胞增殖,改善生存质量,延长生存期[3]。

1 中医药在抗癌治疗中的作用中医药在治疗癌症方面较为肯定的临床作用有:减轻癌症患者的各种症状和体征,减轻化疗和放疗造成的副作用;提高放疗或化疗的治疗效果,抑制或延缓肿瘤的生长;促进手术治疗、放疗及化疗后患者的恢复,改善患者的机体机能状况如免疫功能;从而提高癌症患者的生活质量和延长癌症患者的生存期[4-5]。

1.1 增强机体免疫力:中医学从整体观出发,认为恶性肿瘤的发生、发展,主要是由于正气虚损、阴阳失衡,脏腑功能失调,留滞客邪(致病因子),致使气滞血瘀、痰凝毒聚,相互胶结,蕴郁而成肿瘤。

巴豆生物碱抑制卵巢癌细胞增殖和诱导其凋亡的实验研究

巴豆生物碱抑制卵巢癌细胞增殖和诱导其凋亡的实验研究
ｔｃｉ ｎ ｏ ｒ ｔｎ ａｋａｏｄｓｏ ｕ ｎ ｏ ａ ａ ａ ｃ ｒＨＯ 一８９１ ｅ ｌｐ ｏｉｅ ａｉ ｎａ ｎ ｃ ｄ ａ ｏ ｔ ｓｓ； ｕ ｉ ｇ ｉｖ ｒｅ ｃｏ ｃ ｐ ｅ ｔｏ ｆｃ ｏｏ ｌ ｌｉ ｎ ｈ ｍａ ｖ ｒ ｎ ｃ ｎ ｅ ｉ ０ ｃ ｌ ｒ ｌｆｒ ｔｏ ｎｄ ｉｄｕ ｅ ｐ ｐ ｏ ｉ ｓｎ ｎ ｅｔ ｄ ｍｉ ｒｓ ｏ ｙ ａｄｉ ｎ ｍｍｕｎ ｈ ｓｏ ｈ ｍｉ ａ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ｏ ｐｏ ｔ ｉ ｅ ｕ ａｉ ｅ ｅ ＰＣＮＡ ｗｅ ｅ ｄｅｅ ｔｄ． ｓ ｔ ｒ ｌ ｆｃ ｏｏ ｌａ ｏｄ ｈ， ｏ ｉｔｃ ｅ ｃ ｌｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆ ａ ｐｏｓｓ ｒ ｇ ｌｔｎｇ ｇ ｎ ｒ ｔｃｅ Ｒｅ ｕｌｓ ｏｅ ｏ ｒ ｔｎ ａｋ ｌ ｉｓ ４８ ｃ ｌ ｓ ｒｎｋ ｇ ｓｓ ｅ ｎｄ ｒｉ ｖ ｒｅ ｉｒ ｓ ｏ ｅ， ａ ｓ ｌ ｍｏ ｎｔｏ ｐｒｕｔｎ ｎ ｈ ｏ ｍａｉｎ ｏ ｐｏ ｔｔｃ ｂ ｄｉｓ Ａｐｐｉ ａｉｎ ｅｌ ｈ ｉ ａ ｅｗａ ｅ ｎ ｕ ｅ ｎ ｅ ｔｄ ｍ ｃ ｏ ｃ ｐ ｍａ ｌａ ｕ ｆｓ ｏ ｉ ｇ ａ ｄ ｔ ｅｆ ｒ ｔｏ ｆａ ｐｏ ｉ ｏ ｅ ． ｌｃ ｔｏ
率 逐 渐 降低 。
【 关键词 】 巴豆生物碱 ；细胞 凋亡；细胞周期 ；卵巢肿 瘤；增殖 细胞核抗原 【 中图分类号 】Ｒ７ ７３ 【 ３． １ 文献标识码 】Ａ 【 文章编号】１０ ９ ７ （０ ０ ７— ３ ５— ４ ０ ７— ５ ２ ２ １ ）０ ２４ ０
Ｅｆｅｃ ｆ Ｃｒ ｔ ｎ ｋ ｏ ｄ ｏ Ｃｅ ｌＣｙｃｅ， Ａｐｏ ｏ ｉ ｆ ｔｏ ｏ ｏ Ａｌ ａｌｉ ｎ ｌ ｌ ｐｔ ｓｓａｎｄ ＰＣＮＡ ｎｅ Ｅｘ ｅ ｓｏ ｎ ｕｍ ａ Ｏ ｖ ｉｎ ｌ ＺＨＡＯ ａｏ— Ｇｅ ｐｒ ｓ ｉ ｎ ｉ Ｈ ｎ ａｒａ Ｃｅ ｌ Ｘｉ

有毒中药现代药理研究之巴豆

有毒中药现代药理研究之巴豆

巴豆[基原]本品为大朗科笆物巴豆Cro‘。

M 265ji Mm L的干燥成熟果实堆雹2—3天，捞开，干燥。

[化学成分1一、有机酸及曾油圈种子含巴豆油(croton。

i1)34％一57％，其中台巴豆油酸(cr财onic scid)，巴豆酸4ti81ic acN)，以及由棕搁酸(Palm帕c acid)、硬脂酸(s屿aric acN)、油酸(。

1eic acN)、巴豆油酸(crotonic 9cid)、巴豆酸(ti81ic 8cN)、亚麻酸(1inolenic acN)、肉豆蔻酸(myri碘icacid)、花生酸(arachNic acid)、月桂酸(1auric acN)等组成的甘油酯；巴豆醉—12，13—二酯(其含量约占巴豆油的4％)，巴豆醇三酯(含量约占巴豆油的4％)。

巴豆油中的巴豆醉二酯(ph。

rbol dies论r)有十多种，都有不同程度的促致碗作用。

从巴豆油中曾分离出佛波醉(Phorb01，即巴豆醉)。

二、生物碱巴豆种子中含有生物碱，其中有巴豆苦(crot。

nosNe)昔。

三、植物蛋白类种子中含有巴豆毒家(crodn)，为一种毒性球蛋白，结构类似蓖麻子毒蛋白外源凝集京(1ectlns)，分子量为230000和88000。

四、其他类p—谷图酵(卜itoster01)、氨基酸及酶“i。

[台星测定]一、巴豆油的测定重量法：巴豆霜中的脂肪油和肥儿九中的巴豆油都可用重量法gU定，样品用乙醚提取，将提取液低温荔干，在100℃干燥1h，精密林定，根据重量计舞含量。

二、巴豆油酸的惠定络合滴定法：将约含有8．6mB巴豆油酸的样品液置于饶杯中，挠杯中密口塞上装有一个小盘，盎中放有o．5一l”8氮化亚汞，将2咖1儿硫酸溶液2mI与o．1mo[儿浪水5m1 加到样品中。

密塞，混匀放旦10min后将小盘中的氯化亚汞倾入镕液中，混句，4min后滤过除去残酒(氯化亚汞加浪的衍生物)，水洗，滤液中的H8”在六亚甲基四胺存在下用o．02m01儿EDTA溶液滴定，二甲酚橙为指示剂，滴定前加入o．1m01儿硝酸银溶液以沉淀卤化物，随行空白。

金复康有效成分抑制肺癌循环肿瘤细

金复康有效成分抑制肺癌循环肿瘤细

◇基础研究◇中国临床药理学与治疗学中国药理学会主办!"#$ %&'()*，+,,"%''- &.'%/0012))3334565104578&'&#9:;<&=>%?2% -&'&& %& '.收稿　&'&& %& %$修回国家自然科学基金资助项目（=%-@#.%@，=&%@$&$.）；上海市炎癌转化病症生物学前沿研究基地（&'&%科技'# %&）；上海市中医医院未来计划项目（AB CD*! &'&%''%E ，AB F9*G &'&%''&E ）刘佳君，女，博士，博士后，研究方向：中医药防治恶性肿瘤的基础研究。

H 8:IJ2J664K5L%(#4578田建辉，通信作者，男，博士，主任医师，研究方向：中医药防治恶性肿瘤的临床与基础研究。

H 8:IJ206//:3ML N/O0584PQO45;金复康有效成分抑制肺癌循环肿瘤细胞募集中性粒细胞能力的比较研究刘佳君%，阙祖俊%，田建辉%R&%上海中医药大学附属市中医医院肿瘤研究所，上海&'''@%；&上海中医药大学附属市中医医院肿瘤临床医学中心，上海&'''@%摘要　目的：观察肺癌循环肿瘤细胞（!S!N ）对中性粒细胞的募集作用，筛选到金复康中可抑制!S!N 募集中性粒细胞的有效成分。

方法：采用流式细胞术检测人肺腺癌循环肿瘤细胞（!S! S9C'%）从全血白细胞中募集中性粒细胞的能力，观察金复康及其六种有效成分对!S!N 募集中性粒细胞的影响；采用!!E =实验观察细胞活力确定药物作用浓度；采用0T:;N3PJJ 趋化实验检测六种有效成分影响!S! S9C '%细胞对中性粒细胞的趋化作用。

细胞凋亡过程

细胞凋亡过程

细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段：接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→进入连续反应过程细胞凋亡的启动是细胞在感受到相应的信号刺激后胞内一系列控制开关的开启或关闭，不同的外界因素启动凋亡的方式不同，所引起的信号转导也不相同，客观上说对细胞凋亡过程中信号传递系统的认识还是不全面的，比较清楚的通路主要有：1）细胞凋亡的膜受体通路：各种外界因素是细胞凋亡的启动剂，它们可以通过不同的信号传递系统传递凋亡信号，引起细胞凋亡，我们以Fas -FasL为例：Fas是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，它与FasL结合可以启动凋亡信号的转导引起细胞凋亡。

它的活化包括一系列步骤：首先配体诱导受体三聚体化，然后在细胞膜上形成凋亡诱导复合物，这个复合物中包括带有死亡结构域的Fas相关蛋白FADD。

Fas又称CD95，是由325个氨基酸组成的受体分子，Fas一旦和配体FasL结合，可通过Fas分子启动致死性信号转导，最终引起细胞一系列特征性变化，使细胞死亡。

Fas作为一种普遍表达的受体分子，可出现于多种细胞表面，但FasL的表达却有其特点，通常只出现于活化的T细胞和NK细胞，因而已被活化的杀伤性免疫细胞，往往能够最有效地以凋亡途径置靶细胞于死地。

Fas分子胞内段带有特殊的死亡结构域（DD,death domain）。

三聚化的Fas和FasL结合后，使三个Fas分子的死亡结构域相聚成簇，吸引了胞浆中另一种带有相同死亡结构域的蛋白FADD。

FADD是死亡信号转录中的一个连接蛋白，它由两部分组成：C端（DD结构域）和N端（DED）部分。

DD结构域负责和Fas分子胞内段上的DD结构域结合，该蛋白再以DED连接另一个带有DED的后续成分，由此引起N段DED随即与无活性的半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）酶原发生同嗜性交联，聚合多个caspase8的分子，caspase8分子遂由单链酶原转成有活性的双链蛋白，进而引起随后的级联反应，即Caspases，后者作为酶原而被激活，引起下面的级联反应。

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巴豆生物碱对肺腺癌细胞凋亡的影响及机制研究武晓;刘凤娟;王鹏飞;张春玲【摘要】目的研究巴豆生物碱(CA)对肺腺癌细胞(A549)增殖和凋亡的影响,推测其抗肺癌作用机制.方法体外培养肺腺癌细胞(A549).用终浓度分别为0(对照组)、10、50、100 μg/mL的CA组处理A549细胞24h后,于相差显微镜下观察细胞的一般形态结构、脱落情况等;MTT法检测细胞的生长活性;流式细胞仪检测细胞凋亡率;酶联免疫法(ELISA)和RT-PCR法检测凋亡相关蛋白及基因Bcl-2、Bax的表达.结果 10、50、100 μg/mL的CA均能抑制A549细胞增殖,其抑制率与作用剂量相关.流式细胞术检测显示不同剂量CA作用于A549细胞24 h后,100μg/mL 的CA可引起细胞凋亡,其余剂量未见凋亡;100 μg/mL的CA组细胞凋亡率为(45.940±0.031)％,对照组细胞凋亡率为(3.450±0.012)％,差异有统计学意义(P＜0.05).ELISA提示不同剂量CA作用于A549细胞24h后,100 μg/mL的CA组促凋亡蛋白Bax为8.940±0.211,较对照组(4.450±0.131)表达增加;抑凋亡蛋白Bcl-2为4.860±0.132,较对照组(7.390±0.181)表达减少,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR显示100μg/mL的CA组Bax mRNA为6.881±0.611,较对照组(3.417±0.461)表达增加;Bcl-2 mRNA为2.812±0.342,较对照组(4.243±0.731)表达减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CA能抑制A549细胞的生长并促进其凋亡,其发生与Bax蛋白及基因的表达上调和Bcl-2蛋白及基因的表达下调有关.CA 抗肺癌的作用机制可能通过Bax/Bcl-2途径促进肿瘤细胞凋亡,从而为临床治疗肺癌提供新的思路和途径.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2016(013)001【总页数】4页(P17-20)【关键词】巴豆生物碱;肺腺癌;凋亡;作用机制【作者】武晓;刘凤娟;王鹏飞;张春玲【作者单位】青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042;青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042;青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042;青岛大学医学院第二附属医院呼吸科,山东青岛266042【正文语种】中文【中图分类】R734.2近年来，大家开始对巴豆及其提取物的抗肿瘤作用进行研究。

巴豆生物碱（crotonic alkaloids，CA）具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

巴豆是一种流传于民间，用于抗癌的中草药偏方，为大戟科植物巴豆的干燥成熟种子，可生用、炒焦用或制霜用。

民间早已应用巴豆的提取物治疗恶性肿瘤，其提取物对胃癌、肝癌及甲状腺癌等多种肿瘤均具有治疗作用，其能缓解晚期胃癌患者的症状，减慢病程的进展，减少转移。

相关文献资料关于CA抗癌作用机制的研究甚少，鲜有报道。

查阅国内外文献，CA对于胃癌、卵巢癌、肠癌等均有抗癌作用，但尚未见有关抗肺癌作用的报道。

本实验采用体外肺癌细胞培养，研究CA对肺癌细胞（A549）增殖和凋亡的影响，初探CA对肺癌的治疗作用及有效作用机制。

1.1 试剂与耗材肺腺癌细胞株（A549细胞）取自青岛市中心医院肿瘤生物治疗中心。

DMEM培养液（美国Hyclone公司）；胎牛血清（美国Hyclone公司）；0.25%胰蛋白酶（美国Hyclone公司）；DMSO（美国Hyclone公司）；流式细胞术所需材料（中国森雄公司）；RNAiso Reagent（购自Takara公司）；琼脂糖、DNA Marker 2000、氯仿、异丙醇（上海生物工程有限公司）；Loading Buffer （大连宝生物工程有限公司）；内参GAPDH cDNA引物序列；Bax、Bcl-2引物序列（上海生物工程有限公司合成）；逆转录试剂盒及PCR试剂盒（购自Fermentas中国公司）；巴豆生物碱。

Bax：GAGGAACTGGACAGTAACATGGAGCT；CGGCCCCAGTTGAAGTTGC。

Bcl-2：GCCGGTTCAGGTACTCAGTCATC；GTCACCTTCACCGTTCCA。

GAPDH：GCACCGTCAAGGCTGAGAAC；ATGGTGGTGAAGACGCCAGT。

1.2 试验方法体外培养肺腺癌细胞（A549）。

用终浓度分别为0（对照组）、10、50、100μg/mL的CA组处理A549细胞24 h后，于相差显微镜下观察细胞的一般形态结构、脱落情况等；MTT法检测细胞的生长活性；流式细胞仪（AnnexinV-PI染色）检测细胞凋亡率；酶联免疫法（ELISA）和RT-PCR法检测凋亡相关蛋白及基因Bcl-2、Bax的表达。

1.3 统计学方法采用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 MTT法检测不同剂量CA对A549细胞活性的影响不同剂量CA作用于A549细胞24 h后，对细胞活性均具有显著抑制作用，随着药物浓度增加，细胞活性受抑制逐渐增加，表现为剂量依赖关系。

见表1。

2.2 倒置相差显微镜下A549细胞形态学观察对照组A549细胞生长状态良好，漂浮细胞较少，胞浆丰富，胞核清晰可见，呈多角形，细胞排列不紧密，细胞间可见相互连接（图1A）。

CA组：10μg/mL的CA干预A549细胞24 h后，大部分贴壁细胞有完整的胞核和胞浆，小部分细胞皱缩成球（图1B）；50μg/mL的CA干预A549细胞24 h后，可见许多漂浮细胞，贴壁细胞少见有完整的胞核和胞浆，大部分细胞呈齿轮形状，并且部分细胞皱缩成球（图1C）；100μg/mL的CA干预A549细胞24 h后，可见大量漂浮细胞，贴壁细胞几乎无完整的胞核和胞浆，大部分细胞皱缩成球，已无正常细胞形态（图1D）。

2.3 AnnexinV-PI染色检测不同剂量CA对细胞凋亡的影响100 μg/mL的CA作用于A549细胞后24 h细胞凋亡率与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

见表2。

表2 不同剂量CA对A 5 4 9凋亡率的影响（%，±s） 2.4 ELISA检测不同剂量CA对A549细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响与对照组比较，100μg/mL的CA组抑凋亡蛋白Bcl-2表达减少，促凋亡蛋白Bax 表达增加，差异有统计学意义（P＜0.05）；其余剂量CA组差异无统计学意义（P＞0.05）。

见表3。

2.5 RT-PCR法检测不同剂量CA对A549细胞Bcl-2、BaxmRNA表达的影响与对照组比较，100μg/mL的CA组Bcl-2mRNA表达减少，Bax mRNA表达增加，差异有统计学意义（P＜0.05）；其余剂量CA组差异无统计学意义（P＞0.05）。

见表4。

肺癌在中医古代文献中属于肺疾、肺痈。

肺癌的主要发病机制是正气不足和邪气入侵，其次为痰瘀。

若正气不足和阴阳失衡将会引起病原体火癌症毒素入人的肺部[1]。

肺功能差将会导致肺气阻塞、弥散损伤和弥散功能下降，血流停滞，干扰液体分布。

体液累积导致的痰液凝固，从而导致气血停滞和血瘀。

气滞血瘀和痰液、毒素积累逐渐导致肺功能损伤[2]。

肺癌是一种全身性疾病。

肺虚通常表现为气虚、阴虚和气血不足。

当西医治疗不能提供任何其他的治疗方案时，中医药常作为缓解终末期肿瘤症状辅助治疗手段[3]。

然而，中医药能在肿瘤的整个过程中发挥重要的预防和治疗作用。

众多研究资料表明，天然植物中存在具有治疗价值的抗癌成分[4]，中药复方阿胶浆可显著提高小鼠在化疗和放疗后的造血功能[5]。

八珍汤能降低恶性卵巢瘤患者接受化疗后的胃肠道反应、白细胞减少、腹膜炎等和肝肾功能的发生率[6]。

四种中草药植物（白花蛇舌草、党参、地黄、黄芪）影响CYP3A4的活性和表达，其能够有助于抗癌药物的代谢[7]。

临床上，中药可以提高放疗患者的生存率并改善生活质量，并能减少放疗的毒性，如放射性炎症、白细胞缺陷和免疫功能紊乱。

近年来，中医药一直是一个公认有效的生物反应调节剂，可以调节肿瘤患者的非特异性免疫功能，缓解化疗或放疗不良反应[8]。

一些中药制剂，如华蟾素注射液、艾迪注射液及参芪扶正胶囊早已被证明作为辅助支持治疗肿瘤具有良好的作用，其可以减弱放化疗带来的毒副作用，同时提高疗效[9]。

因此，中医与现代相结合药物化疗和放疗等每一个阶段的治疗可以明显减轻临床症状，改善生活质量，延长预期寿命[10]。

这种治疗模式不仅较单独使用现代医学有显著优势，也是多学科综合疗法的趋势[11]。

最近的研究基于中医基础理论，应用中西医综合治疗放化疗引起的毒副作用。

如何从天然植物中特别是传统中药中寻找和筛选出具有预防和治疗肿瘤的活性药物，已成为医学界关注的焦点。

巴豆是一种流传于民间，用于抗癌的中草药偏方，为大戟科植物巴豆的干燥成熟种子。

可生用、炒焦用或制霜用。

主产于南方地区如四川、广东、云南等地。

全世界共有800多种，广泛分布于热带及亚热带等地区。

其性味辛、热，有大毒。

入胃、大肠、肺经。

具有逐水退肿、泻下寒积、祛痰、蚀疮等多种功效。

临床常用于便秘腹痛，体质壮实的水肿以及气急喘促、痰壅咽喉和疮脓熟而未破等证。

该属植物的主要成分包括巴豆油、巴豆树脂、生物碱、毒性蛋白、巴豆苷等，民间早已应用巴豆的提取物治疗恶性肿瘤，其提取物对胃癌、肝癌及甲状腺癌等多种肿瘤均具有治疗作用[12-14]，其能缓解晚期胃癌患者的症状，减慢病程的进展，减少转移。

CA抗癌机制如下：①CA对膜系统分子动力学影响；②诱导肿瘤细胞凋亡[15-16]；③诱导肿瘤细胞分化、逆转[17]；④改变细胞胞浆结构，破坏癌细胞微管[18-20]。

本研究结果显示，10、50、100μg/mL的CA均能抑制A549细胞增殖，其抑制率与作用浓度相关；流式细胞术检测结果显示，不同剂量CA作用A549细胞24h后，只有100μg/mL的CA可引起细胞凋亡，其余剂量未见凋亡，多为坏死细胞；100μg/mL的CA组的细胞凋亡率与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；ELISA结果提示，不同剂量（0、10、100μg/mL）CA作用A549细胞24 h后，与对照组比较，100μg/mL 的CA组促凋亡蛋白Bax表达增加，抑凋亡蛋白Bcl-2表达减少，差异有统计学意义（P＜0.05），其余剂量CA组差异无统计学意义（P＞0.05）；RT-PCR结果显示，100μg/mL的CA组BaxmRNA表达增加，Bcl-2mRNA表达减少，差异有统计学意义（P＜0.05），其余剂量CA组差异无统计学意义（P＞0.05）；由结果推测CA能抑制A549细胞的生长并促进其凋亡，其发生与Bax蛋白及基因的表达上调和Bcl-2蛋白及基因的表达下调有关。