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免疫球蛋白亚类检测及意义PPT

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免疫球蛋白检测及应用PPT课件

免疫球蛋白检测及应用PPT课件

（三）注意事项 1. 部分单克隆冷球蛋白可在低于 10 ℃时 发生沉淀，故取标本时要保温 2. 部分冷球蛋白在冷的条件下可迅速沉淀， 但有的需要数天，故此应放置一周 3. 正常人血清也可含有冷球蛋白，但属多 克隆冷球蛋白的性质，且含量低 4. 冷纤维蛋白原、 C 反应蛋白 - 蛋白复 合物和肝素沉淀蛋白等也具有冷沉淀特性， 实验时应加以区别
思考题： 1．IgG、IgA、IgM的测定技术 2．体液中IgG、IgA、IgM测定的临床应用 3．IgE、IgD、的测定技术 4．异常免疫球蛋白的检测技术来自THANKYOU
SUCCESS
2019/4/14
（一）定性分析 分离血清作二支分装，一支置 4℃， 一支置37℃，直立，一般于24～72小时， 4℃一管可出现沉淀 （二）定量分析 将沉淀用冷 pH7.0 ， 0.05mol/L 磷酸 盐缓冲液洗涤，然后将沉淀再溶解于 10 倍体积的 pH8.6 的 0.05mol 巴比妥 / 巴 比妥钠缓冲液中，置 37 ℃ 30min，进行 免疫电泳或免疫固定电泳进行型别鉴定
THANK
YOU
SUCCESS
2019/4/14
第四节 异常免疫球蛋白的检测
一、 M 蛋白的检测与鉴定 M 蛋白是一种异常单克隆免疫球蛋白，多 见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋 巴瘤。
（一）血清蛋白区带电泳 IgG 型多位于 α 区与慢 γ 区 IgA 型多位于慢 γ 区与 β 区 IgM 型多位于 β 2 区或 γ 区 IgD 型多位于 β 区或 γ 区 但最终鉴定需用特异性抗体，在轻链病 时 M 蛋白呈淡染区带常在 β 或 γ 区， 需与尿中本周蛋白检测或尿蛋白电泳同时 观察。
第三节 IgE 和 IgD 的测定
一、 IgE 的测定方法 1 、放射免疫法：固相抗 -IgE+IgE+ 125 I 标记抗人 IgE 2 、化学发光免疫分析法：固相抗 IgE+IgE+ 酶标抗 IgE+ 底物 3 、乳胶颗粒免疫浊度法 4 、酶免疫试验

免疫球蛋白的作用PPT

免疫球蛋白的作用PPT

02
免疫力对流感的影响
免疫力强，病毒就不得其门而入；免疫力弱，流感病毒就能轻松突破防线。
03
免疫球蛋白在抵御流感中的作用
青壮年身体机能活跃，免疫功能强，当流感病毒入侵时，能够产生大量免疫细胞和免疫 球蛋白杀死或降低病毒的活性，预防感冒。
免疫系统抵抗
免疫球蛋白与免疫功能
测定免疫球蛋白IgA、IgG、IgM可以 了解人体的免疫功能。
免疫球蛋白与疾病关系
免疫球蛋白升高常见于各种慢性感染 和癌症，减低则常见于先天性和获得 性免疫缺陷病。
免疫球蛋白在抵抗流感中的作用
青壮年身体机能活跃，免疫功能强， 能产生大量免疫细胞和免疫球蛋白杀 死或降低病毒的活性，预防感冒。
01
02
03
免疫球蛋白对健康的影响
免疫力和癌症
01
02
03
免疫球蛋白与癌症的关系
免疫球蛋白与疾病的关系
免疫球蛋白多克隆性升高常见于慢性感染、肝病等，单克隆性增高见于骨髓瘤 等；免疫球蛋白减低常见于免疫缺陷病等。
了解抵抗力
免疫球蛋白与免疫功能
免疫球蛋白测定可以帮助了解人体对各 种病毒、细菌的抵抗力和抗原入侵的识 别能力。
免疫球蛋白与疾病关系
免疫球蛋白多克隆性升高常见于慢性感染 、肝病等，单克隆性增高则可能与淋巴瘤 、类风湿性关节炎等有关。
IgG在人体中的作用
IgG是免疫球蛋白的一种，广泛分布在体内，对抗病毒、细菌等病原体的感 染起到重要作用。参考值为7.0～17.0g/L。
IgM在免疫系统中的重要性
IgM是免疫球蛋白的一种，通常在初次感染时产生，能识别并消灭病毒、细 菌等病原体。参考值为0.6～2.5g/L。
多克隆性升高
多克隆性升高原因

免疫球蛋白PPT优秀课件

免疫球蛋白PPT优秀课件
免疫球蛋白PPT优秀课件
概述
概念
抗体（antibody，Ab）— 是介导体液免疫的重要效应分子,
是B细胞接受抗原刺激后增值分化为浆细胞所产生的球蛋白 （蛋白质），存在于血清等体液中通过与相应抗原特异性结 合发挥体液免疫功能。
免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）— 指具有抗体活性
或化学结构与抗体相似的球蛋白。可分为分泌型（sIg）和 膜型（mIg）。前者存在于体液中，即抗体，后者存在于B 细胞膜上， 即BCR。
同种型
同种异型
独特型抗原表位
（一）同种型 (isotype)
是存在于同种抗体分子中的抗原表位， 是同一种属所有个体Ig分子共有的抗原特异 性标志，为种属型标志，存在于Ig的C区。
据H链C区的不同又分为五个大类，每一类 又分若干亚类；按L链C区的不同分为两型， 每型又分为若干亚型。
（二）同种异型 (Allotype)
二、外源因素所致的异质性
物质基础： 多样性抗原的存在
三、内源因素所致的异质性 免疫球蛋白的血清型
将Ig作为抗原在异种、同种异体或自身体内 进行免疫，均能诱导机体发生免疫应答，产 生相应的抗体，这些抗体可用血清学方法进 行检测，因此称为Ig的血清型。
免疫球蛋白可激发机体产生特异性免疫应答。 其结构基础是在免疫球蛋白分子中包含有多种不 同的抗原表位，呈现出不同的免疫原性。免疫球 蛋白分子中有三类不同的抗原表位，分别为:
chain，H) 和两条相同的轻链2.5×104(light chain，L）
，借链间二硫键而彼此连接在一起的四肽链结构分子。
功能区
借助免疫球蛋白的两 条H、L链内二硫键的 相互作用，又将肽链 折叠成几个具有特殊 生物学功能的球形结 构 ， 叫 Ig 的 功 能 区 （结构域）。

免疫球蛋白的检测及临床应用PPT幻灯片

免疫球蛋白的检测及临床应用PPT幻灯片

2020/4/1
15
（一）测定方法
1.总IgE的测定方法 有化学发光免疫分析法、放射免疫分析法、乳胶颗粒免疫比
浊法及酶联免疫吸附试验等。在临床上用化学发光免疫分析 法和酶联免疫吸附试验测定总IgE较为常见。 2.特异性IgE的检测方法 主要有免疫斑点法和酶联免疫吸附试验。商品化的试剂盒提 供了多种特异性的变应原，包括食物、吸入物以及药物过敏 原，利用这些特异性变应原就可以检测血清中特异性IgE。
分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、鼻 和支气管分泌液、胃肠液、尿液、汗液等。机体粘膜局 部抗感染免疫的主要抗体。故又称粘膜局部抗体。
16岁以上成年人IgA临床参考范围为：0.76~3.9g/L
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7
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8
IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，是机 体抗感染的先头部队，血清中检出IgM，提示新近 发生感染，可用于感染的早期诊断。
分泌型IgM为五聚体，是分子量最大的Ig，沉降系 数为19S，称为巨球蛋白，一般不能通过血管壁， 主要存在于血液中。
16岁以上成年人IgG临床参考范围为： 0.4~3.45g/L
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10
。
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11
慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎，原发性胆汁性肝 硬化，隐匿性肝硬化患者血清中可见三种免疫球蛋 白均升高。慢性细菌感染如慢性支气管炎，肺结核， 血 IgG可升高，宫内感染时脐血或出生的新生儿血 清中IgM含量可增高。
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正常人血清中IgD含量很低，仅占血清免疫球蛋白总量 的0.2%。IgD可在个体发育的任何时间产生，半衰期 2.8天。血清IgD的生物学功能尚不清楚，膜结合型IgD （mIgD）构成BCR，是B细胞分化发育成熟的标志， 未成熟的B细胞仅表达mIgM，成熟B细胞可同时表达 mIgM和mIgD，称为初始B细胞（native B cell）；活 化的B细胞或记忆B细胞其表面的mIgD逐渐消失。IgE 是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下 淋巴组织中的浆细胞分泌。其重要特征为糖含量高达 12%。IgE为亲细胞抗体，可引起I型超敏反应。此外， IgE可能与机体抗寄生虫免疫有关。

免疫球蛋白测定方法与影响因素课件

免疫球蛋白测定方法与影响因素课件

1、标准液对测定结果的影响
• • • 1.1 标准液中Ig类型的不均一性： 1.2 标准液中Ig分子大小的不均一性 那么要求Ig标准液能代表健康人群平均水 平的Ig类型和分子大小，基质效应要小。
• • • •
1.3 Ig的国际标准： 1.3.1 WHO 67/97 定义：每瓶含100IU的血浆蛋白冻干品 WHO 67/97的明显缺限:
见表1
方
法
原
理
标本类型 血清 血清
简 要 评 价 慢，非特异性，不能 分类Ig，方法过时 慢，不能分类Ig，是 检测单克隆Ig的筛选 方法 较准确，慢
盐沉淀（金沉淀） Ig在某些盐（金化合物）溶液中形成沉淀，再用总 蛋白测定法测定Ig含量 电泳 蛋白分离成Alb和各种球蛋白;Ig在γ带
免疫扩散（ （彩扩法） ） 免疫荧光
BN II的抗原过剩检测
预反应检测抗原过量 抗原过量
特殊项目的预反应- 避免抗原过量，增加结果的可靠性
IgM为例说明BN II的抗原过量检测原理
• 因此BN II在检测IgA和IgM时，能将抗原过 剩的风险降到最低！ • 但是， BN II的抗原过量不能完全消除， 在极少数情况下，非常高的免疫球蛋白浓 度可能会产生错误的低结果。尤其是单克 隆免疫球蛋白可能会显示与多克隆标准品 不同的反应，在个别情况下，这可能会导 致结果降低的假象或导致非线性结果。
决定定抗原抗体复合物光学性质的因素; 光线透射与散射的数量及特性取决于 复合物的直径(d), 发射光的波长()， 检测器与发射光的角度， 介质的折射系数有关。
•
•
•
①大多数蛋白质分子比光的波长要小得多( 510nm), 只产生Rayleigh 散射。 ②在直接抗原抗体反应期间，最初形成的小复 合物会通过交联而增大，到达大约3 x 10 E6 Da 大小的限度，产生Rayleign-Debye 散射。 ③在另一些反应中，抗体附着于大的颗粒上 (IgE)，再和抗原形成的不可溶复合物，其大小 较光的波长要大得多。在这些情况下出现的是 Mie 散射

免疫球蛋白PPT课件

免疫球蛋白PPT课件

3）骨架区 VH和VL各有4个FR。
2. 恒定区（constant region,C区)： Ig 分子的C端，在轻链1/2和重
链3/4处，氨基酸的组成和排列比较恒 定。
Ig的类别
1）类：根据CH氨基酸组成排列不同分为五大类
γμαδ
ε
IgG IgM IgA IgD IgE
亚类：IgG1~4；IgM1~2; IgA1~2
2）型：根据CL氨基酸组成排列不同分为两型
κ型和λ型
2、铰链区（Hinge region）
特点：位于CH1和CH2之间，富含 脯氨酸，极富弹性。
功能： 1.有利于Ab与Ag的结合； 2.有利于Ig补体功能区的暴露。
3、连接链（J链）和分泌片段
J链：由浆细胞合成的富含半胱氨酸的 多肽链。起连接及稳定多聚体结构的 作用。
分泌片（SP）：由黏膜上皮细胞合成 和分泌的含糖肽链。起保护sIgA及介 导其主动运输的作用。
二、免疫球蛋白的结构
（一）基本结构（以IgG为例） （二）功能区 （三）水解片段
（二）免疫球蛋白的功能区
1、定义：Ig的多肽链分子可折叠成若干个链
内由二硫键连接的球形结构。每个球形结构约由 110个氨基酸组成，具有一定的功能，故称功能区。
IgA的特征和功能
1、特征 产生—部位：MALT； 时间：出生后3-6月始合成； 存在—形式：单体血清型和二聚体分泌型； 部位：唾液、泪液、乳汁及呼吸道、
消化道、泌尿道的分泌液中和粘膜表面； 时间：半衰期，6天左右； 浓度：血清中Ig含量 10%-20%
2、功能
1）血清型：同IgG，但不重要
2）分泌型：粘膜局部抗感染免 疫的重要因素（又称局部免疫抗 体）。
(一) 识别并特异性结合抗原 （二）激活补体 （三）通过Fc段结合具有FcR的细胞

微生物学与免疫学课件——免疫球蛋白(共38张PPT)


（二） 激活补体
IgG1-3和IgM与相应抗原结合后，可因构型改变而使其 CH2/CH3功能区内的补体结合点暴露，从而激活补体经典途径。 IgG4、IgA和IgE的凝聚物可激活补体旁路途径。
免疫球蛋白
免
疫
分 子
（三） 结合细胞表面的 Fc 受体
1.调理作用 ( IgG)：IgG与细菌等颗粒性抗原结合后，可通过其Fc 段与巨 噬细胞和中性粒细胞表面相应IgG Fc受体结合，促进吞噬 细胞对细菌等颗粒抗原的吞噬，此即抗体的调理吞噬作用。
n 铰链区能改变两个Y形臂之 间的距离，有利于两臂同 时结合两个不同的抗原表 位。IgD、IgG、IgA有铰 链区，IgM和IgE则无。
免疫球蛋白
免
疫 分
二、免疫球蛋白的其他结构
子
● 连接链(joining chain，J链) 是一条富含半胱氨酸的多肽链,由浆
细胞合成。
作用: 连接Ig分子形成二聚体和五 聚体。
n 意义: • 用于研究免疫球蛋白的结构和
功能;
• 构建基因工程抗体。 • 避免超敏反应。
可变区
免疫球蛋白
抗原结合部位
VH
CH1
N端
VH
VL
VL
CL
Fab段
CL
FC 段
铰
链
区
CH2 补体结合
恒定区
C端
CH3
Fc受体结合
免疫球蛋白
免
疫 分
第二节 免疫球蛋白的血清型
子
n （一）同种型：同种型（isotype）是指同一种属所有个 体的Ig分子共有的抗原特异性标志，为种属型标志。同 种型抗原决定基存在于Ig C区，表现在全部Ig的类、亚类、

免疫球蛋白细胞免疫检测肿瘤标志物ppt课件


编辑版ppt
39
二、B细胞分化抗原检测
参考值： CD19 11.74 ± 3.37％ 临床意义：
①升高：ALL、CLL ②降低：无丙种球蛋白血症、
使用化疗或免疫抑制剂后。
编辑版ppt
40
第四节 肿瘤标记物检测
编辑版ppt
41
概述
肿瘤标志物（tumor marker）是由 肿瘤细胞本身合成、释放或者是由 机体对肿瘤细胞反应而产生的一类 物质。
如呼吸道、消化道、泌尿生殖道的 感染、炎症、肿瘤
编辑版ppt
8
二、免疫球蛋白A检测
参考值：
血清IgA：0.7~3.5g/L SIgA： 唾液平均为 0.3 g/L 泪液 30～80 g/L 初乳平均为 5.06 g/L 粪便平均为 1.3 g/L
编辑版ppt
9
二、免疫球蛋白A检测
临床意义：
1、IgA增高：IgA型MM、SLE、肝硬 化、肾脏疾病
原，存在卵巢肿瘤的上皮细胞内。
参考值：<3.5万u/L
编辑版ppt
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二、糖脂肿瘤标志物检测
临床意义： 1、对诊断卵巢癌（阳性率60～90％）
有较大临床意义。 2、宫颈癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、
胃癌、肺癌等。 3、良性卵巢瘤、子宫肌瘤、肝硬化
编辑版ppt
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三、酶类肿瘤标志物检测
（一）前列腺酸性磷酸酶测定 PAP是一种前列腺外分泌物中能
编辑版ppt
51
二、糖脂肿瘤标志物检测
（三）糖链抗原19-9（CA19-9） CA19-9是一种糖蛋白，在成人的
胰、胆部位少量存在。
参考值： 健康人血清CA19-9<3.7万u/L
编辑版ppt

免疫球蛋白PPT课件

Ig 轻链（L链）：两条，214个aa的肽链
二硫键：连接两条重链之间及重链与轻链之间
18
19
2、Ig的分区 （1）可变区 （2）恒定区 （3）铰链区
20
（1）可变区（variable region，V区）
① 位置： VL＋VH （近N端）1/2 L链+ 1/4 H
链
② 结构特点：氨基酸序列可 变，和抗原决定簇在空间 上高度互补。
(2)存在： IgM（五聚体） sIgA（双体）
(3)作用： 连接单体，稳定多聚体
39
2、分泌片（Secretory Piece，SC)
(1)化学本质： 黏膜上皮细胞合成分泌的多肽链
(2)存在： sIgA（双体）
(3)作用：
a.帮助IgA穿越黏膜
b.保护sIgA抵抗蛋白酶的水解作
用
40
三、水解片段
有抗体活性的血清蛋白都是γ球蛋白，但不是所 有的丙种球蛋白都是抗体。
12
免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）： 将抗体或化学结构与抗体相似的球蛋白统
称为免疫球蛋白。 免疫球蛋白是化学结构的概念
13
Ig与Ab的关系
Ab
Ig
Ab都是Ig，而Ig并不都是Ab。
14
免疫球蛋白可分为膜型和分泌型 分泌型（secreted immunoglobulin，sIg）：
存在于体液（血清、组织液、 外分泌液）中。 膜型（membrane immunoglobulin,mIg) :
存在于B细胞膜表面, 即BCR。比sIg多一个跨膜 区和一个胞浆区。
15
第一节 免疫球蛋白的分子结构
16
17
一、免疫球蛋白的基本结构单体

免疫球蛋白(Ig)PPT课件


调理吞噬
免疫球蛋白与抗原结合后， 能被吞噬细胞吞噬，从而 清除外来抗原。
免疫调节
调节免疫细胞的活性
免疫球蛋白可以调节T细胞、B细胞等 免疫细胞的活性，影响免疫应答的强 度和持续时间。
调节细胞因子的产生
调节免疫记忆
免疫球蛋白可以调节免疫记忆细胞的 增殖和分化，影响二次免疫应答的效 果。
免疫球蛋白可以调节细胞因子的产生， 影响免疫细胞的分化、增殖和功能。
免疫球蛋白治疗的效果取决于多种因素，包括免疫球蛋白的来源、纯度、剂量以及患者的个 体差异等。目前，免疫球蛋白治疗已经取得了一定的疗效，但仍存在一些问题需要解决。
免疫球蛋白治疗展望
1. 新型免疫球蛋白分子的研发
通过基因工程技术，可以设计和生产具有特定功能的免疫球蛋白分子，提高免疫球蛋白 治疗的疗效和安全性。
利用电泳技术将Ig分离，再通过抗原抗体反 应进行检测。
酶联免疫吸附法(ELISA)
荧光免疫分析法
通过酶标记的抗体与抗原的特异性结合， 再利用底物显色反应，对Ig进行定量检测。
利用荧光物质标记抗体，通过荧光信号的 强度检测Ig的含量。
临床应用
感染性疾病的诊断
通过检测Ig水平，有助于诊断 感染性疾病，如细菌性感染、 病毒性感染等。
功能
识别并清除外来抗原，如细菌、 病毒等，维持机体的内环境平衡 和免疫稳定。
分类与结构
分类
根据重链类型的不同，免疫球蛋白分 为五类，分别为IgG、IgA、IgM、 IgD和IgE。
结构
免疫球蛋白由两条相同的重链和两条 相同的轻链通过二硫键连接而成，具 有Y字形的结构。
分布与来源
分布
免疫球蛋白广泛分布于体液中，如血清、唾液、眼泪、肠道 分泌液等。
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First published articles aboutAIPin 1995 by Japanese
IgG4相关疾病（IgG4-RD）
近年来新认识的一种 由免疫介导的慢性炎 症伴纤维化的疾病。
•The birthday of a new syndrome: IgG4-related diseases constitute a clinical entity. Autoimmun Rev.
ug/ml
非常小 非常小 完全
非常短(15分 钟)
较小
ELISA ng/ml
中等
中等
部分
短(数小时) 较高
MeulenbroekAJ, ZeijlemakerWP. Human IgG subclasses: Useful diagnosticmarkers for immunocompetence, 2nd edition, CLB, Amsterdam,The Netherlands 2000.
血清IgG4对Ig4RD诊断价值
Ann Rheum Dis. 2014 Mar 20. doi: 10.1136/annrheumdis-2013-204907
血清IgG4升高的特异性？
淋巴瘤，结节病，系统性血管炎：EGPA、GPA，
过敏性疾病，CTD：RA、SSc、SLE、PBC、pSS：2-10%， 慢性肝炎和肝硬化，免疫缺陷等也可有血清IgG4的升高 约30%IgG4RD的病人血清IgG4水平并不升高：检测阈值， 检测方法，前带效应等
IgG亚类缺陷
继发性免疫缺陷 HIV感染 (III和IV期) 放疗,化疗(骨髓移植)
IgG亚类缺陷
IgG2及IgG4的下降, 然而IgG1 和 IgG3可能上升
IgG2及IgG4的下降
Ann. Rev. Med. 1987. 38: 325-40 Ann Clin Biochem 2002; 39: 374- 377
质量管理
质量管理 CAP NEQAS
每年2次
J ALLERGY CLIN IMMUNOL APRIL 2005
质量管理
•测量方法差异 •健康对照人群的基线差异 •统计分析方法差异
It is recommended that each laboratory establish its own normal control values with proper statistical analysis.
The history of IgG4-related disease
Autoimmunity Reviewsห้องสมุดไป่ตู้13 (2014) 451 –458
In 2001, Japanese researchers found high serum IgG4 and cutoff value 1350mg/l
IgG亚类缺陷小结
The finding of a decreased level of one of the IgG subclasses can never provide a definite diagnosis, but should rather be considered as an indication of a disturbance of the immune system, requiring further diagnostic investigation
正常参考值范围
正常参考值范围
免疫球蛋白亚类临床意义
IgG4RD等
原发性、继发 性免疫缺陷等
IgG亚类缺陷
N Engl J Med 1970; 283:631-634
最早1970年研 究者对3例化
脓性肺炎患者 的报道
IgG亚类缺陷
儿童亚类缺陷
IgG亚类缺陷
原发性免疫缺陷 IgG亚类缺陷
IgA缺乏症
用 药 初 期 患者IgG4 水平会急剧下 降，相应 的 临 床 症 状 好转。部分患 者使用维持药 物 剂量 IgG4会出现高于临界上限值的现象
疾病 治疗
疾病 定期对血清IgG4水平进行检测对于确定 监测 早期的复发患者是非常必要的
IgG4相关性疾病不是常见病，应先排除 注意 其它疾病后再考虑
IgG亚类临床应用小结
➢ 亚类单一或联合水平变化以及比例失调与 多种系统疾病相关
➢ 亚类相关疾病已有国际诊断标准 ➢ 血清学检测作为更为客观，准确和易于随
访的手段，与影像学，病理学证据为临床 提供更多更有价值的信息 ➢ 但血清亚类检测缺乏室间质控品，尚未建 立中国人群的正常参考值范围
PUMCH 标本量
60% 肾内和普内
2010;9:591.
IgG4相关疾病（IgG4-RD）
Mod Rheumatol (2012) 22:1–14
血清IgG4对Ig4RD诊断价值
血清IgG4对Ig4RD诊断价值
Ann Rheum Dis. 2014 Mar 20
➢cut-off值设为1350mg/l 时，诊断的特异性为60% ， 敏感性为90% ➢cut-off值设为2700mg/l 时，诊断的特异性为91%， 敏感性为35%
其他方法—免疫微珠
IgG4 检 出 范 围 0.02ng/ml —0.2mg/l 灵敏度很高，最低可 达到0.02ng/ml 可 一 次检测免疫蛋白 IgG、 IgM、 IgA、 IgE、 IgG亚类
其他方法--液相色谱串联质谱法
CAP回报实验室使用方法学
质量管理
特种蛋白参考血清： ✓WHO 1967年研发了批号：67/86的首批特种蛋白标 准品，随后衍生出67/95,67/97,67/99等 ✓CAP 与欧洲共同体标准局研发 ：CRM470/ERM DA-470
免疫球蛋白亚类检测及意义
免疫球蛋白亚类概述
免疫球蛋白亚类概述
J.Exp.Med. 120,253 (1964). 1964年最早的关于免疫球蛋白亚类报导的文献，使用来自兔的多抗，针对人的骨 髓瘤蛋白IgG抗体，发现IgG有四个亚型的存在
免疫球蛋白亚类概述
60-70%
15-20%
5-10%
<5%
IgG2和IgG4的下降 ，也可有IgG3的下降
常见变异型免疫 缺 陷病(CVID)
IgG1, IgG2和IgG4的下降
Wiskott-Aldrich Syndrome (WAS)
IgG3和IgG4的下降
J Clin Immunol (2012) 32:961–966 Clin. exp. Immunol. (1979) 36, 112-116
血清IgG4升高的特异性？
血清IgG4升高与疾病的严重程度
血清IgG4水平与受累器官数正相关 系统性受累的患者IgG4水平较高
Am J Surg Pathol.2010;34:1812 –1819
糖皮质激素治疗后IgG4水平下降程度
注：以治疗3个月为观察终点
治疗后IgG4水平明显下降
降至正常： 24.2% 下降>50% ：62.6% 下降<50%：13.2%
年龄的影响
Immunologic Disorders in Infants and Children (5th Ed), Ochs HD, Stiehm ER, Winkelstein JA (Eds), Elsevier Sanders, Philadelphia 2004. p.394.
正常参考值范围
Data from PUMCH by Wen Zhang et al. Published in Eur J Nucl Med Mol Imaging. 2014 Aug;41(8):1624-34.
IgG4检测对IgG4-RD意义
疾病 诊断
IgG4血清学检测对 于IgG4相 关性疾病的诊 断非 常 重 要 ， IgG4越 高 ，患者发 生其它器官受 累 的 可 能 性 越 高，只有少数 IgG4升高 的患者都 可符 合此疾病诊断
放射免疫扩散法
放射免疫扩散法
Commercial kits from the binding site
酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法
➢定性或半定量的检测方法
➢灵敏度高（ng/ml），无需复杂仪器 ➢重 复性差：样本高度稀释，大量样本难以 标 准化；单抗来源及特异性，标准品，参考 范围等
IgG亚类特点
免疫球蛋白亚类检测方法
放射免疫扩散法 酶联免疫吸附法 免疫散射(透射)比浊法
免疫球蛋白亚类的检测与临床应用
BN prospect BN II 等自动化
首 次 I gG亚类及多 抗 应 用于放射免疫 扩 散 法检测IgG亚 类(1964)
1960’s
单抗用ELISA 及免疫比浊法 检测亚类
免疫散射(透射)比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
免疫散射比浊法
缺点：标本乳糜 血、脂血等干扰。 抗原过量引起钩 状效应，造成实 验误差
方法学比较
方法
检测限
批间变异 批内变异 自动化
分析时间 工作量
RID ug/ml
小
小
否
长(>48 小时) 中等
Nephelo metry
2000’s
1990’s IgG4RD正式诞生
(2010)
1980’s
AIP报道(1995)
1970’s
IgG亚类缺 陷报道(1975)
放射免疫扩散法
最早用于IgG亚类的检测方法 反应时间长（2-4d），耗费血清量大 灵敏度低(20mg/L), 尤其检测血清中含量较 低的IgG3, IgG4 时
IgG亚 类 的 表 达 水 平 的下调并不能 成为某一临床 诊断的确切 证 据，但是其可提示机体可能处于免疫失衡的状态，需要进 一 步的临床和实验室的随访观察