紫外检测仪说明书
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1、原理 紫外吸收检测器简称紫外检测器（ultraviolet detector，UVD），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器，其工作原理是Lambert-Beer定律，即当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比。物理上测得物质的透光率，然后取负对数得到吸收度。 大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团，因而有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UVD既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围，是液相色谱中应用最广泛的检测器。 紫外检测器的波长范围是根据连续光源（氘灯）发出的光，通过狭缝、透镜、光栅、反射镜等光路组件形成单一波长的平行光束。通过光栅的调节可得到不同波长。波长范围应该是根据光源来确定的，不同光源波长范围也不一样。 光波根据光的传播频率不一样而划分的。紫外的测量范围一般为0.0003---5.12（AUFS)，常用为0.005---2.0（AUFS)。紫外光的范围一般指200-400 nm。吸收度单位AU (absorbance unit) 是相当于多少伏的电压，范围的大小应该适中较好，实际工作中一般就需要1AU左右。
核酸蛋白检测仪*工作原理 所有紫外吸收检测器工作原理都是基于光的吸收定律---朗伯-比耳定律。光源经220nm、
254nm、280nm、340nm等干涉滤色片提供单色光作为检测核酸、蛋白、酶、多肽的光源。具
体工作原理正如该定律指出，当一束单色光(λ)辐射通过稀浓度物质溶液时，如果溶剂不吸
收光，则液体的吸光度与吸光物质的浓度和光经过溶液的距离成正比。其关系式为：
A(λ)=a(λ)bc
A=-LgT=Lg1/T
核酸蛋白检测仪*操作步骤
⑴、在仪器使用前，首先连接好所需配套仪器：层析柱、恒流泵、自动部分收集器、记
录仪(色谱工作站)。将各类插头与插座接妥(220V电源)。
⑵、按下检测仪ON电源开关，电源指示灯亮，说明整台仪器电源开始工作，然后观察
光源指示灯，如果亮了，表示光源已开始工作，整台仪器可进入工作状态，将检测仪波长旋
钮旋到所需波长刻度上，把量程旋钮拨到100%T档(仪器预热20分钟，待基线平直后可加样
测试)。 ⑶、接通记录仪电源开关，使电源开关拨到“通”指示灯亮。可根据记录仪说明书调换不同的纸速度，用户根据需要自行掌握，测量用10mV档。此时记录仪指针从零点开始向右
移动某一刻度，调节检测仪“光量”旋钮使指针停留在记录仪大约中间位置5mV左右数字显
示为50左右。。
⑷、把检测仪进样口聚乙烯塑料管接到恒流泵上，使凝胶层析柱中缓冲液流过检测仪(恒
流泵流量视凝胶层析柱大小选1-3ml/min)。用“调零”调整吸光度A值为0(量程开关拨到
100%T调节光量旋钮，使记录仪指针在10mV数字显示为100，即透光率为100%。把量程开关
拨到“0.05A”档，缓慢调节A调零旋钮，使记录仪指示在“O”位，检测仪显示为“O”)。
⑸、以上步骤结束，析系统平衡后即可用洗脱液开始洗脱样品，洗脱前再调一次吸光度
0点。洗脱过程结束前不可再调节“调零”旋钮。当洗脱液流过检测仪时，吸光度显示大于
零的数值，吸光度数值大小随样品的浓度而变化。洗脱完毕后吸光度显示为稍大于零的数值。
⑹、数字显示吸光度和记录仪自动绘制吸光度图谱是两个互相独立的检测系统，数字显
示吸光度与记录仪所绘峰值大小没有直接关系，不可互相换算。
⑺、测试完毕后，必须切断电源，并用蒸馏水清洗样品池和聚乙烯塑料管。
注1：记录仪光吸收A读数
当采用10mV量程记录仪时，记录仪的满量程读数对应于A量程开关所对应的A读数范
围。如A量程开关选定在0—0.5A时，则记录仪满量程光吸收A读数为0.5，当记录笔指示
在记录纸一半(50%刻度)位置时即为0.25A。
注2：数字显示光吸收A读数(可变量程读数模式)
当A量程开关选定在0—1.0A档时，此时数显板上显示和读数即为光吸收A的实际读数，
如显示为080即表示为0.80A。
当A量程开关切换在其他量程位置时，则数显光吸收A读数为：
①、A量程选定在0—2.0档时，数显读数×2=实际光吸收读数A
②、A量程选定在0—1.0档时，数显读数×1=实际光吸收读数A(即直接读数)
③、A量程选定在0—0.5档时，数显读数×1/2=实际光吸收读数A
④、A量程选定在0—0.2档时，数显读数×1/5=实际光吸收读数A
⑤、A量程选定在0—0.1档时，数显读数×1/10=实际光吸收读数A
⑥、A量程选定在0—0.05档时，数显读数×1/20=实际光吸收读数A
⑦、A量程选定在0—0.02档时，数显读数×1/50=实际光吸收读数A
注3：当显示模式开关选定固定量程读数时，数字显示板上的读数为实际光吸收A读数，
该读数将不随A量程开关的切换而改变。(此时切换A量程开关，只改变记录仪输出的灵敏
度，而不影响读数和积分仪信号输出，该功能指HD-21C-B型)
注4：HD-21C-B型紫外检测仪可同时进行记录仪和积分仪信号输出。积分信号输出为0.1A/mV,测定灵敏度可由计算机软件设定。
核酸蛋白检测仪*使用说明 一、直接观察数显窗口检测柱层析分离分析过程
1)置电源开关在“ON”位置，仪器预热 30 分钟。
2)选定所需波长(254mm 或 280mm)的干涉滤光片。从有机玻璃盒中取出干 涉滤波片，
插入仪器背后“滤光片”下面小长方孔内，并使其插入到底部位 置。 插入时应注意使干涉
滤光片侧面有一直径为 3mm 的半球形凹槽朝上。 随 ( 机安装的是 280nm 滤光片)
3)选定检测样品吸光度或透过率
a. 透过率：按下按键开关“T”键， “透过率 T”指示灯亮。调节“调 T”旋钮， 顺
时针调节透过率增大。 观察数值变化至 “100” (此时透过率 T 为 100%) 。 当洗脱样品
流过检测仪(样品池下端为进口)时数显窗口将直接显示样品 的透过率 T。
b.吸光度：按下按键开关“T”键，调节“调 T”旋钮，使透过率 T 为 100%， 然后按
下“2A～0.05A”任何一键， “吸光度 A”指示灯亮，吸光度 A 应 为零，如果显示不为零，
可调节“A 调零”旋钮。当洗脱样品流过检测仪 时数显窗口将直接显示样品的吸光度 A。
2. 与记录仪配套绘制样品分离图谱。
1)选择系统最佳工作状态
a. 记录仪“记录纸速度”选择(2～6)cm/h 档。
b.记录仪输入“量程”选择 10mv 档。
c. 恒流泵流速视层析柱大小选择(1～10)mL/min。
2)连接检测仪与记录仪：用随机配套的输出线连接检测仪背后“接记录仪”的 插口(此
插口输出信号可同时输出给部分收集器作为控制信号)与记录仪输 入插座。输出线
“黑”“红”两个接线叉分别接在记录仪“L”“H”两个输 、 、 出插座上。
3)绘制“T—h”图谱(透过峰) ：调节“调 T”旋钮，使记录仪记录笔在满量程 位置(即
T=100%),当洗脱样品流过检测仪时，记录仪即可自动绘制出透过 率 T 随时间 h 变化的图
谱。
4)绘制“A—h”图谱(吸收峰) ：按下“A 调零”旋钮，使吸光度 A 为零作为 基线。
当洗脱样品流过检测仪时，记录仪即可绘制出吸光度 A 随时间 h 变化 的图谱。
5)按键开关 2A 至 0.05A 每一档均表示记录仪满量程读数。选取吸光度量程视 样品浓
度和吸收峰大小而定，通常选取“1A”档，此档既便于读数，也能满 足一般实验需要。
注意事项：
1. 开机前先检查滤光片是否安装到位， 严禁在没有安装滤光片的情况下开机!! ! 以免损坏仪器。 2. 层析系统平衡后(一般装柱后须平衡数小时) ，即开始加样前再校对一次 100%T 或
吸光度基线，加样后不可再调节仪器所有旋钮。
3. 实验结束后，在样品池进口串入恒流泵，用蒸馏水清洗 10 分钟以上，直到检 测仪
显示： “T”大于 100%， “A”小于 0。这样不会因样品池有污垢而影响 仪器检测灵敏度
和精度。
4. 实验结束后取出干涉滤光片置于有机玻璃盒中，并保持盒中干燥，防止接触 有害气
体，禁止用水或有机溶剂擦拭滤光片表面。
5. 仪器应避免在强光下工作。在仪器通电情况下不得取出样品池，以免仪器内 光电器
件受损。
6. 环境温度过低，仪器背面“光源”灯不亮时，按“光源辅助启动”即可。
7. “A 显示选择”键，按下时吸光度数值随量程改变而改变;放开时吸光度数 值不随
量程改变而改变。此键为辅助键，一般情况下不使用。
