(完整word版)动物细胞工程试题及详解
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动物细胞工程1动物细胞工程1一、单选题1.下列关于细胞工程的叙述,正确的是()A.骨髓瘤细胞经免疫处理,可以直接获得单克隆抗体B.灭活的病毒为促细胞融合剂,可诱导原生质体的融合C.用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂D.核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体2.下列关于动物的细胞融合技术及其应用的叙述,错误的是A.细胞杂交时因染色体容易丢失,可用于基因定位B.杂交瘤技术制备的单抗,可解决抗血清的异质性问题C.细胞杂交时可采用电融合技术,合适的电场中质膜的脂双层被击穿D.制备单抗时,经细胞融合、克隆可获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞3.用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是A.都需用培养箱B.都须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D.都可体现细胞的全能性4.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不相符的是A.植物组织培养和单克隆抗体——细胞的全能性B.纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性C.原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖5.图为科研人员培育克隆猴“中中”的流程图。
下列有关叙述正确的是()A.e的性状表现不受来源于b中的基因控制B.图中涉及的技术有动物细胞培养、核移植、胚胎移植等C.d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件D.e诞生实验体现了a细胞的全能性二、多选题6.下列有关细胞工程技术在生产实践中应用的叙述,正确的是A.愈伤组织细胞分裂能力强,可作为体细胞诱变育种的材料B.植物花粉粒细胞容易获取,可作为培养单倍体植株的理想材料C.动物胚胎细胞分化程度低、易恢复全能性,可优先作为核移植的受体细胞D.自体皮肤生发层细胞分裂能力强且不会排斥,可作为烧伤患者皮肤移植母细胞7.动物细胞培养是动物细胞工程的基础,如右图所示,a、b、c表示现代工程技术,①②③表示通过相应技术经胚胎移植得到的个体,请据图回答,下列说法错误的是A.若a是核移植技术,①中个体的获得反映了动物细胞具有全能性B.若b是体外授精技术,则该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能C.若c是胚胎分割技术,③中个体的基因型和表现型一定相同D.a、b、c三项技术获得的胚胎,其将要植入的受体必须是珍稀的、存量少的雌性动物8.下图表示核移植与克隆动物的相关图解,有关叙述正确的是A.用于核移植的供体细胞①一般都选用传代10代以内的细胞B.图示过程说明高度分化的动物细胞仍具有发育的全能性C.采集的卵母细胞培养到的②时期表示减数第二次分裂中期D.动物细胞培养过程中添加5%C02的目的是维持培养液的pH三、实验题9.人感染埃博拉病毒(EV)会引起致命的出血热。
检测案41动物细胞工程[基础巩固练]考点一动物细胞培养与体细胞克隆1.下列关于动物细胞工程的叙述,正确的是()A.用胰蛋白酶处理动物组织后,可用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液B.少数细胞在连续培养50代后可获得不死性,是某些基因选择性表达的结果C.根据在高倍镜下观察到基因突变的比例可推知某化学药品的毒性D.PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞,经动物细胞培养能得到优良动物个体2.[2024·九省联考·贵州]利用动物体细胞核移植技术可培育高产奶牛,流程如图所示。
下列叙述错误的是()A.犊牛W有母牛X细胞中的线粒体DNAB.犊牛W的遗传性状与母牛X相似度更高C.重构胚的形成可采用电融合的方法D.细胞培养时需添加氨基酸等营养物质3.如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图,下列叙述不正确的是()A.甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B.丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养C.丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象D.丁过程是传代培养的细胞,该过程体现了动物细胞的全能性4.我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中,培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪(如图所示),这项研究的最终目的是在动物体内培养人体器官用于器官移植。
下列相关叙述错误的是()A.胚胎干细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂,需用胰蛋白酶处理后继续培养B.采集的卵母细胞需培养至减数分裂Ⅰ后期才能与获能精子受精,进而获得猪胚胎C.从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取的胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能D.该技术有望将人的胚胎干细胞注入猪早期胚胎内,培育出完全由人体细胞组成的器官考点二细胞融合与单克隆抗体5.如图为单克隆抗体制备过程示意图,图中X、Y细胞分别是()A.T淋巴细胞、骨髓瘤细胞B.T淋巴细胞、杂交瘤细胞C.B淋巴细胞、骨髓瘤细胞D.B淋巴细胞、杂交瘤细胞6.单克隆抗体在多种疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用,下图为利用小鼠制备单克隆抗体的过程,下列有关叙述正确的是()A.提取脾B淋巴细胞有多种,是因为一种抗原可诱导产生多种B细胞B.诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法完全相同C.在具有杂交瘤细胞的培养板上滴加相应抗体,出现阳性反应的即为目标细胞D.筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外条件或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养7.[2024·九省联考·安徽]单克隆抗体在疾病诊断治疗和病原体鉴定中发挥重要作用。
细胞工程一、基础小题针对练1.下列过程中,需要采用植物组织培养技术的是()①利用花药离体培养得到单倍体植株②利用秋水仙素处理单倍体试管苗,获得正常纯合植株③利用基因工程培育抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培育“白菜—甘蓝”杂种植株⑤马铃薯的脱毒A.①②③B.③④⑤C.①②④⑤D.①③④⑤选D2.下列有关动物细胞培养的叙述,正确的是()A.动物细胞培养过程中,可用胃蛋白酶处理使细胞分散开B.通过动物细胞培养获得大量细胞,可证明动物细胞具有全能性C.动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础D.动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵选C3.下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程,据图分析错误的是()A.①过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理B.②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变C.③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能D.④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理选B4.(2016·东营质检)对于下面制备单克隆抗体过程示意图,不.正确的叙述是()A.①表示已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导C .④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的D .⑤可以无限增殖选A二、高考题型仿真练5.为培育出含β胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案。
请分析回答下列问题:甲方案:玉米体细胞――→① β胡萝卜素基因――→② 水稻体细胞――→③“黄金大米” 乙方案:(1)甲方案中,β胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是_______________________________。
若研究人员已知β胡萝卜素基因序列,可采用__________方法获得β胡萝卜素基因。
②过程中可用______________技术检测水稻体细胞DNA 上是否插入了β胡萝卜素基因。
2.2 动物细胞工程第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物一、单选题1.随着生物科学技术的发展,动物的生殖方式变得越来越多样化。
如图表示胚胎工程技术研究及应用的相关情况,供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是健康的黄牛,下列相关叙述错误的是()A. 应用1中获得的良种小牛,遗传物质来源于供体1和供体2个体B. 应用2、3、4所用的受精卵只能来源于体外受精,且精子必需进行获能处理C. 应用3过程中对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割D. 应用4中细胞进行定向诱导,可分化形成各种组织和器官,用于器官移植研究2.下列关于动物体细胞克隆和胚胎工程的叙述,正确的是()A. 克隆羊“多莉”的培育过程中不需要进行胚胎移植操作B. ES 细胞在饲养层细胞上会向不同类型的组织细胞分化C. 排异反应是胚胎工程需要重点克服的难题之一D. 同期发情处理可以使受体的生理状态更适宜来自供体的胚胎着床3.2009年山东省干细胞技术研究中心宣布,成功克隆出5枚人类囊胚。
其中4枚囊胚的供体细胞来源于正常人皮肤纤维细胞,1枚来源于帕金森患者的淋巴细胞,卵细胞通过健康志愿捐献者促排卵获得。
下列相关叙述正确的是()A. 可以通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核,通过核移植后获得囊胚B. 囊胚阶段的细胞处于未分化状态,可从囊胚中获得胚胎干细胞C. 获得的胚胎干细胞可在饲养层细胞上分化成所需要的器官D. 通过该技术可以达到科学家培养克隆人的目的4.下列有关动物细胞工程和胚胎工程的叙述,正确的是()A. 培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质B. 细胞培养所需气体CO2的主要作用是维持培养液的pHC. 胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化D. 体细胞核移植获得克隆动物的难度低于胚胎细胞核移植5.下列有关哺乳动物胚胎工程的叙述,正确的是()A. 囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞功能上的差异是基因选择性表达的结果B. 胰蛋白酶处理卵裂球获得的细胞可直接移植到同期发情受体的子宫中继续发育C. 胚胎干细胞核移植可得到一群性状完全相同的个体D. 从卵巢中取出的卵母细胞与获能后的精子完成受精作用6.以下技术与应用匹配不正确...的是()A. 核移植技术——培养鲤鲫核质杂交鱼B. 干细胞技术——提供用于移植的细胞或器官C. 细胞融合技术——培育单倍体植物D. 酶的固定化技术——固定α淀粉酶连续水解废水中的淀粉7.进行生物工程设计时,下表各组所选择的实验材料与实验目的配置,不正确的是()组别实验目的实验材料材料特点1 动物细胞核移植卵母细胞细胞大,细胞质能有效调控核发育2 体细胞诱变育种愈伤组织细胞分裂能力强,易诱发突变3 植物体细胞杂交培育新品种花粉粒易于获取,易于培养4 烧伤患者皮肤细胞移植自体皮肤生发层细胞分裂能力强,且不会引起免疫排斥A. 1组B. 2组C. 3组D. 4组8.中国科学家应用体细胞核移植方法培育了克隆猴“中中”和“华华”。
第41讲动物细胞工程1.(2023·全国)克隆猴“中中”和“华华”登上学术期刊《细胞》封面,表明我国的克隆技术再次走在世界前列。
“中中”和“华华”的诞生成功证明了()A.动物细胞的全能性B.动物细胞的再生能力C.动物细胞核的全能性D.动物细胞的分化能力【答案】C【分析】全能性是指个体某个器官或组织已经分化的细胞在适宜的条件下再生成完整个体(或分化为各种细胞)的潜力。
全能性原因:已分化的细胞都含有该物种所特有的全套的遗传信息,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。
【详解】高度分化的动物细胞,从整个细胞来说,它的全能性受到限制,但它的细胞核仍保持着全能性,因为细胞核内含有保持物种遗传性状所需要的全套遗传物质。
“中中”和“华华”就是用乳腺细胞的细胞核与去核卵细胞重组形成的一个细胞发育而成的,这证明动物细胞的细胞核具有全能性。
故选C。
2.(2023秋·湖北·高三荆州中学校联考阶段练习)小鼠作为一种与人类基因组序列相似度较高的哺乳动物,常用于人类某些疾病的研究。
小鼠胚胎干细胞的培养过程如图所示,下列叙述错误的是()A.胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一种类型细胞的潜能B.体外培养胚胎干细胞需提供的气体环境是95%的CO2和5%的空气C.图中胚胎干细胞分化后的组织移入小鼠替代病变器官属于治疗性克隆D.图中重组细胞重编程、分裂、分化最终产生的小鼠与患病鼠性状相似【答案】B【分析】胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于早期胚胎或原始性腺(即囊胚期的内细胞团)。
特点:具有胚胎细胞的特性,体积较小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物任何一种组织细胞。
另一方面,在体外培养条件下,ES细胞可不断增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可以进行某些遗传改造。
【详解】A、胚胎干细胞有全能性,具有分化为成年动物体内的任何一种类型细胞的潜能,A正确;B、体外培养胚胎干细胞需提供的气体环境是95%的空气和5%的CO2,B错误;C、图中胚胎干细胞分化后的组织移入小鼠替代病变器官属于治疗性克隆,C正确;D、图中重组细胞重编程、分裂、分化最终产生的小鼠与患病鼠性状相似,因为细胞核来自患病鼠,D正确。
一、单选题(本大题共12小题,共60分)1.一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件( )①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血清④温度与动物体温相近⑤需要O2,不需要CO2A. ①②③④⑤B. ①②③④C. ①③④⑤D. ①②④⑤2.下列技术或方法与原理相符的是()A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养--细胞增殖B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备--细胞的全能性C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合--细胞膜的流动性D. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育--基因重组3.下列关于动物细胞工程的说法错误的是()A. 动物细胞培养瓶内表面要光滑、无毒、易于贴附B. 胚胎细胞核的移植成功率远高于体细胞核移植C. 动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现D. 单克隆抗体的最主要优点是特异性强,灵敏度高,能够大量制备4.某生物兴趣小组的同学测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对小鼠的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养.下列说法正确的是()A. 利用胃蛋白酶处理两种肝组织块后可得到肝细胞悬液B. 细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞的呼吸C. 甲、乙细胞在持续的原代培养过程中,乙会出现停止增殖的现象D. 该试验中用到的培养液也能用来培养乙肝病毒5.下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图,错误的是()A. 图甲和图乙所示的过程中,都必须用到的动物细胞工程技术手段是动物细胞培养B. ②③过程中至少涉及两次筛选,,第一次筛选只是利用了选择性培养基进行筛选,第二次筛选只经过专一抗体检测就能筛选出足量的既能大量增殖,又能产生单一性抗体的杂交瘤细胞C. 单克隆抗体结合上抗癌药物能定向攻击癌细胞,这一应用主要体现了单抗在运载药物治疗疾病方面可以发挥功能D. 图乙过程的技术可以有选择地繁殖某一性别的家畜也可以用于保存物种,但是不能改变动物的核基因6.如图为动物体细胞核移植过程流程图,下列相关叙述不正确的是()A. 该过程中用到的动物细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合等B. 去掉受体卵母细胞的核的目的是使核移植动物的遗传物质几乎全部来自有利用价值的动物提供的细胞C. 核移植的供体细胞一般都选传代10代~50代左右的细胞D. 该技术下生出的犊牛并不是供体动物100%的复制7.下列关于克隆技术的叙述,正确的是()A. 植物组织培养过程中,需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁B. 植物体细胞杂交和动物细胞融合都可以克服生殖隔离得到新个体C. 植物体细胞融合成功的标志是细胞膜的融合D. 植物组织培养可用于单倍体育种,动物体细胞核移植可以培育克隆动物8.肌肉萎缩性侧索硬化症,即“渐冻症”,该病由于突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白,从而阻碍了轴突内营养物质的流动。
高二生物选修3 专题2 细胞工程2.2 动物细胞工程执笔人:侍东升一、知识与技能目标1、掌握动物细胞培养的过程和条件、动物体细胞核移植的过程,并了解它们的前景及存在的问题。
2、知道动物细胞融合的概念、方法及单克隆抗体的制备与应用,并正确理解动物细胞融合的原理。
二、过程与方法目标1、运用细胞的基础知识,深刻理解这两项技术的原理,并理解这些技术的新进展。
2、结合免疫原理、融合原理以及动物细胞培养,全面理解单克隆抗体的制备过程,利用动物细胞培养技术对杂交瘤细胞进行体外培养和体内培养可生产出专一性强,灵敏性高的抗体。
三、情感与价值观目标1、收集相关报道,在同学中开展应用前景及存在问题的讨论,来加强对科技的认识,形成正确的价值观念。
2、通过对动物细胞培养技术发展史及单克隆抗体具体应用的学习,体验现代生物科技日新月异的发展及与现代医学的联系,坚定自己投入到自然科学发展中的信心。
四、教学过程1、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的,将它分散成,然后放在中,让这些细胞。
2、动物细胞培养的过程可表示为_____ ________________________ _________________________ __ ___________________________ 。
其中原代培养是指,传代培养是指。
3、动物细胞培养所需的条件有。
4、动物核移植是将动物的一个细胞的移入一个卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的。
这个新的最终发育为动物个体。
核移植移到的动物称。
5、核移植动物的应用前景有。
五、例题分析:例1、动物细胞工程技术的基础是()A、动物细胞融合B、胚胎移植C、动物细胞培养D、核移植例2、下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是()A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株例3、表现型不同的母牛生育出基因型完全相同的小牛,产生这一结果最可能的原因是()A、试管动物培养B、胚胎移植子C、胚胎分割移植D、受精卵移植例4、世界上第一只克隆绵羊“多利”的培育程序如图所示,请据图回答:(1)写出图中a、b所指的细胞工程名称:a ;b(2)实施细胞工程a时,所需的受体细胞大多采用动物卵母细胞的原因是(3)“多利”面部的毛色是。
专题41 动物细胞工程一、动物细胞工程(一)动物细胞培养1.动物细胞培养的条件2.3.动物细胞培养过程中细胞生长特点(1)细胞贴壁:将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内,置于适宜环境中培养,悬液中分散的细胞很快就贴附在培养瓶的瓶壁上,称为细胞贴壁。
(2)接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象。
4.原代培养和传代培养5.干细胞培养及其应用(二)动物细胞融合技术与单克隆抗体1.动物细胞融合技术2.单克隆抗体及其应用(1)制备原理:每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体,B淋巴细胞在体外不能无限增殖;骨髓瘤细胞能在体外大量增殖;B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞,既能迅速大量增殖,又能产生抗体。
(2)制备过程(3)优点:特异性强、灵敏度高,可大量制备。
(4)用途:作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物。
(三)动物体细胞核移植技术和克隆动物1.动物细胞核移植技术的概念和类型2.3.应用前景和存在的问题一、单选题1.下列有关动物细胞工程的叙述,错误的是()A.体外培养哺乳动物细胞时,培养温度大多需要保持在36.5℃左右B.动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等是动物细胞工程常用的技术C.动物细胞培养时,培养基中需要含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质D.PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞,经动物细胞培养能得到优良动物个体2.下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是()A.培养至细胞发生接触抑制时,瓶壁上的细胞呈单层分布B.癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制现象C.传代培养时需要用胃蛋白酶处理贴壁生长的细胞D.在细胞培养过程中,有部分细胞的基因型会发生改变3.研究小组发现,将四个特定基因通过一定方法导入处于分化终端的体细胞(如成纤维细胞等)中,可诱导其形成具有胚胎干细胞样分化潜能的诱导性多能干细胞(iPS细胞),再诱导可分化出人体特定细胞和组织。
下列叙述错误的是()A.iPS细胞培养时培养液中通常需要添加血清等物质B.体细胞与iPS细胞的功能有差异,形态没有差异C.将特定基因导入体细胞中可能会中断原有基因的表达D.iPS细胞分化为人体特定细胞的过程遗传信息基本不变4.动物细胞培养是动物细胞工程的基础,科研人员将数量相等的动物肝脏肿瘤细胞和肝脏正常细胞分别置于相同培养液中培养。
三、非选题:22.下图为细胞融合旳简略过程(只考虑两个细胞旳融合), 请据图回答:I.若A、B是基因型分别为rrHH、RRhh两个烟草品种细胞旳花粉, 且这两对基因位于非同源染色体上, 由于一对隐性纯合基因(rr或hh) 旳作用, 在光照强度不小于800勒克斯时, 都不能生长。
(1)试验开始时必须用除去不利于原生质体融合旳物质。
(2)试验中除获得杂种细胞外, 尚有基因型为旳融合细胞。
(3)设计一措施(不考虑机械措施), 从培养液中分离出杂种细胞, 措施:(4)将杂种细胞培养成杂种植株根据旳理论基础是。
II. 若该过程是制备治疗“SARS”病毒旳单克隆抗体, A为人B淋巴细胞(染色体构成为2A+XX=46), B为鼠骨髓瘤细胞(染色体构成为2A+XX=40)(5)用单克隆抗体制成“生物导弹”重要运用了抗体旳特性。
(6)A细胞来自于, 杂种细胞C共有个染色体组。
(7)杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养旳重要区别是培养基要用培养基。
(物理状态), 培养基中除了添加必要旳营养物质为还需加入。
23、肺癌在全国旳发病率居肿瘤之首, 小细胞肺癌是恶性程度最高旳一种, 上海肺癌研究所细胞与分子免疫研究室在国内率先研制出一种名叫“2F7”旳靶向生物导弹。
这种生物导弹是一种专门对小细胞肺癌产生特定靶向性旳特异性单克隆抗体。
注入静脉后, 会“直扑”小细胞肺癌病灶, 使其携带旳肿瘤化疗药物能“集中火力”克制、杀灭肿瘤细胞。
这预示着化疗药物有望弥补“良莠不分”、损害全身免疫力旳缺陷。
(1)制备单克隆抗体旳原理是。
(2)制备单克隆抗体用到旳动物细胞工程技术手段有。
(3)单克隆抗体是由细胞产生旳。
(4)静脉注入而不是口服单克隆抗体旳原因是。
(5)单克隆抗体与肿瘤细胞结合并发挥作用旳过程属于免疫旳阶段。
24. 为某同学根据右图杂交瘤技术旳措施, 设计旳生产破伤风杆菌抗体旳试验方案, 据图回答:1)该方案能到达预期效果吗? _________原因是______________________________。
考点47 动物细胞工程一、动物细胞培养1.概念:从动物体中相关的,将它,然后在下,让这些细胞和的技术。
2.原理:3.地位:4.培养条件(1)营养①已知成分:将细胞所需的(糖类、氨基酸、无机盐、维生素等)按其和严格配制而成的培养基,称为。
①未知成分:使用合成培养基时,通常需加入等一些天然成分。
①物理性质:培养动物细胞一般使用,也称为。
(2)无菌、无毒的环境①对培养液和所有培养用具进行处理;①在下进行操作;①还需要,以便清除代谢产物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
(3)温度、pH和渗透压①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以为宜。
①适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为。
①适宜的渗透压:维持适宜渗透压的目的。
(4)气体环境①组成:动物细胞培养所需气体主要有和。
①气体作用:a.O2:;b.CO2:。
5.过程①原代培养:将的细胞培养,即动物组织经处理后的称为原代培养。
①传代培养:原代培养的细胞生长、增殖一定时间后,由于空间不足或密度过大导致营养枯竭,影响细胞的生长,因此需要重新用胰蛋白酶等处理,进行扩大培养,称为传代培养;①细胞贴壁:体外培养的细胞需要才能生长增殖,这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上,这种现象称为细胞贴壁;①接触抑制:当贴壁细胞生长到时,细胞通常会。
6.干细胞培养及其应用(1)分布:干细胞存在于、和等多种组织和器官中。
(2)分类:干细胞包括和等①胚胎干细胞(简称)a.分布:存在于中b.特点:具有分化为成年动物体内的一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。
①成体干细胞a.分布:存在于中b.类别:包括骨髓中的、神经系统中的、睾丸中的等。
c.特点:一般认为,成体干细胞具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力。
(3)干细胞的应用①原理:干细胞有着能力及潜能的干细胞,与组织、器官的等密切相关。
①应用:a.造血干细胞:治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病。
动物细胞工程试题1用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是(C)A都须用液体培养基B都需用培养箱C都要在无菌条件下进行D都可体现细胞的全能性解析:动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物,植物体细胞离体培养体现的是全能性。
植物体细胞是固体培养基。
动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。
动物细胞培养:1、动物细胞的培养:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。
2、动物细胞培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
3、动物细胞培养液的特点:液体培养基含动物血清。
4、动物细胞培养需要满足以下条件(1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
(2)适宜的温度:36.5℃±0.5℃;适宜的pH:7.2~7.4。
(3)无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。
通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。
此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
(4)气体环境:95%空气+5%CO2。
O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。
5、动物细胞培养的过程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
2下列关于细胞工程的叙述,错误的是(D)A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同解析:A正确诱导原生质体融合的方法有物理法(离心振动电刺激)化学法(聚乙二醇PEG)生物方法(灭活的病毒). B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶,将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。
C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖,又可产生特异性抗体。
D错误,假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M,甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M;而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。
3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括(A)①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植A.①②B.①③C.②③D.③④解析:单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞,经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。
4利用细胞工程方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。
下列相关叙述正确的是(D)A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C. 将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者解析:A错误一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差;B错误单克隆抗体是杂交瘤细胞合成并分泌的,杂交瘤细胞是由浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成的;C错误制备单克隆抗体过程中的筛选:筛选是将未融合的B 淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出B瘤融合的细胞。
筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。
因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。
5用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是()A. 将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞B. 用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C. 用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D. 筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体解析:动物细胞没有细胞壁,所以不需要纤维素酶去除细胞壁6某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。
供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。
请回答下列有关动物细胞培养的问题:(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。
一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量_多___。
(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是血清可以补充合成培养基中缺乏的物质____。
细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是_维持培养液pH _______。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长__停止___。
药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更___多___。
若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用_胰蛋白酶____消化处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的__抗生素_______。
(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入__Y_____,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的__mRNA____或____蛋白质___合成水平的差异,确定Y的药效。
7回答下列有关细胞培养的问题(1)在动物细胞培养过程中。
当贴壁细胞分裂生长到细胞表面__相互接触____时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的__接触抑制______。
此时,瓶壁上形成的细胞层数是__单层_ ______。
要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是___胰蛋白酶______ _______。
(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现_衰老甚至死亡____现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成__不死性______细胞,该种细胞的黏着性__降低______,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量___减少_________。
(3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是_由于死细胞膜丧失了选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色_____。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到_中____期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中,通常在__超低温______条件下保存细胞。
因为在这种条件下,细胞中__酶_____的活性降低,细胞_新陈代谢_________的速率降低。
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作__抗原______进行攻击。
8如图所示为单克隆抗体制备过程示意图。
(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞,两种细胞膜也能“融合”在一起,说明细胞膜___具有一定的流动性_______。
此过程,常用_聚乙二醇____作为诱导剂,杂交瘤细胞繁殖进行的是有丝分裂。
该细胞的特点(遗传性状)是___既能大量增殖又能产生特异性抗体__。
(2)筛选出杂交瘤细胞的方法是__培养液中加入氨基蝶呤,收集增殖的细胞______________。
(3)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同?_液体培养基含有葡萄糖和动物血清___。
(4)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合,而绝不攻击任何正常细胞,故称为“生物导弹”,这是利用了___抗原与抗体之间结合的高度特异性__。
(5)在单克隆抗体制备过程中,还应用了细胞工程中的_动物细胞融合________和__动物细胞培养______两大技术。
9现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。
请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列有关问题:(1)实验原理:__有毒物质能诱导细胞产生染色体变异_______。
根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
(2)材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
(3)实验步骤:Ⅰ.制备细胞悬浮液。
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
Ⅱ.进行细胞培养。
①.取A、B、C3个洁净的培养瓶,_消毒灭菌加入等量的细胞悬浮液_____________;②.向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;③.把3个培养瓶放在37℃的恒温箱中培养。
Ⅲ.制作临时装片。
①.当细胞增殖到大约8代左右时,同时从恒温箱中取出3个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相;②.静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,_用适宜浓度龙胆紫进行染色___,3~5min后,盖上盖玻片。
Ⅳ.镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于_有丝分裂中_____期的细胞,并与__C_______进行对比,统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
(4)结果分析与结论:①.经研究人员实验得知,A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:Q A=1.3%,Q B=12.5%,Q C=0.1%,由此可知该实验的结论是____甲乙都是有毒性的且乙的毒性大于甲______。
②.在实验中,C培养瓶起___对照_____作用,C瓶的Q值说明_动物细胞在正常培养状态下染色体变异频率非常低__。
10下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:(1)图甲和图乙所示的过程中,都必须用到的动物细胞工程技术手段是__动物细胞培养________。
(2)图甲中①注射病原入小鼠体内后,要经过___吞噬细胞_______细胞处理后,才能被免疫细胞识别。
②过程常在___灭火的病毒________诱导下完成,④过程与体外培养相比,其优点是__不需特定的培养基,不需严格的外界环境条件___________。