幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

鹅的鸭疫里默氏杆菌病的诊治鹅的鸭疫里默氏杆菌病在某些养鹅区广泛流行，给养鹅业造成了很大的威胁。

现将一例鹅鸭疫里默氏杆菌病的诊治报告如下。

1病理变化肝脏肿大，表面颜色稍为灰白色，表面覆盖一层灰白色的纤维素性薄膜，易剥离；心包液增多，心包膜可见一层黄白色纤维素性渗出物，气囊浑浊增厚，气囊腔附有灰白色纤维素性渗出物，脾脏肿大，表面附有纤维素性薄膜。

出现神经症状的，可见脑膜充血、出血，脑膜上边有纤维素性渗出物附着。

2实验室检验2.1无菌取病死鹅肝、脾组织触片、革兰氏染色、镜检，可见阴性小杆菌，单个或成双排列，瑞氏染色呈两极浓染。

2.2将病死鹅的肝、脾、脑组织接种于巧克力琼脂平板培养基上，置于二氧化碳培养箱37℃培养24h后，长出圆形、表面光滑、呈奶油状、直径约1～2mm的菌落，将该菌分别接种于麦康凯培养基和鲜血琼脂平板培养基上，在麦康凯培养基上不生长，在鲜血琼脂平板培养基上长出湿润、光滑的小菌落，但不溶血。

2.3生化试验：结果为不发酵葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖、甘露醇、山梨醇，不产生H2S，吲哚试验阴性，M.R及V-P 试验均为阴性。

2.4药敏试验：氟苯尼考、头噻肟钠高敏，氧氟沙星、阿米卡星、利福平中敏，庆大霉素、氟哌酸、新诺明、土霉素不敏。

3防治措施3.1用百毒杀对鹅场消毒，隔离病鹅，加强通风换气，保持鹅舍内干燥。

3.2在饲料或饮水中加入电解多维，以增加机体抵抗力。

3.3用10%氟苯尼考拌料或饮水，每包100g加入100kg饲料或加水200kg，1日1次，连用3～5d。

通过采取以上槽施，5d后鹅群恢复正常。

4小结与体会4.1鸭疫里默氏杆菌病易产生耐药性，在进行药物治疗的过程中，应做药敏试验，以确定首选的敏感药物。

4.2本病的发生与鹅舍内潮湿、通风换气不良有很大关系，为了有效预防本病的发生，平时应加强饲养管理，搞好环境卫生，减少各种应激因素。

幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验一、引言鸭疫是一种由鸭疫里默氏杆菌引起的急性传染病，主要发生在水禽中，特别是对于幼鸭来说更为致命。

鸭疫病症主要表现为高热、抑郁、呼吸急促、鸭群死亡率极高，对农业生产造成了严重的危害。

对鸭疫病原菌的分离鉴定及药敏试验成为显得尤为重要。

二、分离鉴定1. 样品采集从患有鸭疫的幼鹅体内取样，如肺、脾、肝等内脏组织进行采集。

将样品放入无菌离心管中，冷链运输至实验室。

2. 细菌分离将取样的组织进行匀浆处理，然后用无菌梳子在无菌平板上均匀涂布。

置于37℃培养箱中培养24-48小时，直至出现细菌克隆。

3. 形态特征观察观察克隆菌落的形态特征，里默氏杆菌在培养基上呈现为小、灰白色，透明且呈环形的菌落，细菌呈杆状。

4. 生理生化特性鉴定将分离的细菌进行革兰氏染色，鉴定其为革兰氏阴性菌；进行氧化酶试验、嗜碱性酸加索试验等生化鉴定来确认细菌的特性。

5. 分子生物学鉴定利用PCR技术进行DNA提取和扩增，选择里默氏杆菌特异的引物进行扩增，最后通过测序鉴定其属于里默氏杆菌。

三、药敏试验1. 抗生素选取常见供试的抗生素包括庆大霉素、环丙沙星、卡那霉素、氨苄青霉素、头孢他啶、磺胺类药物等。

2. 药敏试验操作将分离的里默氏杆菌接种于固体培养基上，然后将不同抗生素的药片均匀涂布在培养基上，培养一段时间后观察对抗生素的敏感性。

3. 敏感性判定观察各药片周围是否有抑菌圈，并计算出抑菌圈直径，根据国家卫生部门颁发的药物抗菌圈直径标准来判断药敏性。

4. 结果判定根据药敏试验的结果，选择对里默氏杆菌具有良好疗效的抗生素进行治疗。

四、结语对幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验是鉴定病原体和确定治疗方案的重要手段。

合理的抗生素治疗可以有效控制鸭疫病的传播，保障畜禽养殖业的顺利进行。

希望通过不懈的努力，能够及时发现并有效治疗鸭疫病，保障水禽养殖业的健康发展。

鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定与药敏试验作者：秦绪伟吴昊王蕾刁有祥来源：《畜牧兽医科学》2017年第05期摘要：2017年3月，山东潍坊某养殖场养殖肉鸭15000X，发生急性死亡、神经症状、厌食为主要特征的疾病，经实验室解剖化验、细菌的分离鉴定、分子生物学的鉴定，最终确诊为鸭里默氏杆菌病，经药敏试验，选择敏感性高的药物治疗，最终控制了病情。

关键词：鸭里默氏杆菌病；鉴定；毒力；药敏中图分类号：S858.23 文献标识码：B 文章编号：2096-3637（2017）05-0002-03鸭里氏杆菌病又称为鸭传染性浆膜炎，是由鸭疫里默氏杆菌引起的幼鸭的一种急性传染病，主要侵害1～8周龄的小鸭，是造成幼鸭死亡的主要传染病之一。

鸭疫里默氏杆菌，菌体呈现杆状或者椭圆，菌体大小为0.3～0.5×0.7～6.5um，也有的呈现长丝状，可以达到11～24um。

细菌少数呈现短链排列或者成双排列，多数呈现单个存在，可形成荚膜，无鞭毛，革兰氏染色呈现阴性，瑞氏染色可见细菌呈现两极浓染。

鸭疫里默氏杆菌的生长营养要求比较高，普通的琼脂平板、麦康凯平板、SS琼脂平板不生长，细菌分离时需要在5%二氧化碳环境中分离，37℃培养24h以上。

鸭疫里氏杆菌发病主要是发生在2～3周龄的小鸭，一年四季都有发生，各种应激都会促进疾病的发生，饲养密度大、环境卫生差、饲养管理不善、维生素缺乏等原因都会造成疾病的发生，剖检明显症状以纤维素性心包炎、肝周炎，严重的引起气囊炎以及有的发病鸭可以出现干酪性输卵管炎、关节炎，死亡率高，耐过的鸭生长迟缓、饲料报酬低，该病成为养殖场养鸭业影响比较大疫病。

2017年3月，山东潍坊某肉鸭养殖场，养殖15日龄的肉鸭15000只，开始有少量死亡，每天死亡10只左右，未引起重视，以为环境变化、天气原因引起的发病，发病都为急性死亡，3d后死亡率开始增加，每天死亡50多只、100多只，严重的死亡每天300只，发病表现有的精神萎靡、神经症状、厌食、嗜睡、缩颈，部分发病的鸭子表现眼睛浆液性或者粘液性的分泌物，眼睛周围羽毛脱落，鼻孔有粘液或者浆液性的分泌物，粪便稀薄，两腿伸直或者尾部摇摆，不久后抽搐死亡。

幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验鸭疫是一种常见的传染病，主要感染家禽类动物，如鸭、鹅等。

其中，默氏杆菌是鸭疫的主要病原体之一，它具有强烈的毒力和传染性。

本文以幼鹅感染鸭疫的例子为出发点，从分离鉴定和药敏试验两个方面介绍默氏杆菌的特征及相关的治疗方法。

一、鉴定分离（一）样品收集和处理样品采集：选择幼鹅血液、皮肤等部位分泌物作为样品。

收集血液后，将其搅拌均匀，加入抗凝剂，防止凝固。

处理方法：将样品经过高速离心，过滤掉不需要的物质，然后将所得沉淀溶于PBS缓冲液中，使样品处于均质状态。

（二）细菌的分离与纯化将处理好的样品加入含有适量默氏增量寒天（MIA）的琼脂平板上，放置于温度适宜的培养箱中。

一般情况下，默氏杆菌的产生需要在38~40℃的条件下进行。

在24小时内，默氏杆菌会在琼脂平板上形成类似于针头的小型菌落，注意不要与其他类似的细菌混淆。

利用细胞化学方法，对被分离的细菌进行初步鉴定，了解其菌属、形态、颜色、大小等特征。

（三）生化试验生化试验是鉴定细菌种类及其属性的基础。

默氏杆菌具有产生氢气、蛋白质分解及黏稠素分泌等特点，因此，在此基础上，从细胞、营养及代谢方面考察其生化特征。

（四）分子生物学鉴定分子生物学技术可用来识别未知的病原菌。

通过基因扩增技术，对默氏杆菌进行检测，可以获得其基因序列及特征。

PCR、ELISA和AFLP等技术都可用于菌属鉴定，提高了细菌检测的准确度和灵敏度。

二、药敏试验药敏试验可以帮助医生选择最适合的药物治疗默氏杆菌引起的鸭疫。

尤其在临床治疗复杂的情况下，药敏试验成为治疗的重要手段。

目前，药敏试验的操作方法较为成熟，主要的步骤包括：（一）选择适宜的培养基不同的药物在不同的培养基上的敏感性存在差异。

因此，在选择药品之前，首先要选择适宜的培养基。

默氏杆菌对默氏增量寒天和含有血液的琼脂马铃薯培养基最为敏感。

（二）筛选敏感药物药敏试验可以同时检测多种药物对菌株的致死剂量，从而找到对特定细菌表现出高效杀灭作用的药物。

幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验引言鸭疫是由默氏菌属（Pasteurella multocida）引起的急性传染病，主要感染禽类和哺乳动物，其中鸭疫对于鸭子来说是致命的。

默氏杆菌是常见的动物致病菌之一，在动物养殖业中对动物的健康和生产有严重的危害。

因此，对默氏杆菌感染的分离鉴定及药敏试验的探究，对于防控动物疾病具有重要意义。

材料与方法实验所需的材料有：已发病的鸭苗，氧化铁胆汁琼脂培养基，Tryptic Soy Broth培养基，丙酮，甲苯，酒精灭菌器，石英制土卤灯，菌群毛细管、电极式pH计、超净台等。

步骤1：实验前的基本准备将酒精灭菌器装好，将土卤灯放在超净台里，进行紫外线消毒，将琼脂培养基和Tryptic Soy Broth培养基准备好。

步骤2：取样从已发病的鸭苗中取样。

步骤3：制备试验菌株先将菌量标准化至浓度为1.5×10^10 CFU/mL，然后在试验中使用氧化铁胆汁琼脂培养基进行分离培养，培养温度设为30℃，培养时间为24小时。

步骤4：鉴定通过观察培养出的默氏杆菌的生长情况，外观特征，药敏试验等方式进行鉴定。

在药敏试验中使用不同浓度的抗生素进行药敏测试，在观测所制备的菌株是否对抗生素产生抗药性。

结果经过鉴定，制备的试验菌株被确定为默氏杆菌。

在药敏试验中，我们分别使用不同浓度的三种抗生素，分别是头孢唑林、氨苄西林和四环素，浓度分别为5、10、25、50、100 μg/mL。

通过实验我们得到的结果如下表所示。

表1 抗生素药敏实验结果浓度（μg/mL）头孢唑林氨苄西林四环素5 抑制抑制抑制10 抑制抑制抑制25 部分抑制部分抑制抑制50 不抑制部分抑制抑制100 不抑制不抑制抑制结论通过实验我们制备出了感染默氏杆菌的试验菌株，观测到该菌株在氧化铁胆汁琼脂培养基上能够正常生长。

在药敏试验中，我们观测到头孢唑林、氨苄西林和四环素对该菌株有不同程度的抑制作用，其中四环素的抑制效果最好。

天津农学院毕业论文中文题目:鸭疫里氏杆菌的鉴定及药敏试验英文题目:Anatipestifer in ducks infected identification and susceptibility testing学生姓名玉苏普卡迪尔.阿卜杜拉系别动物科学系专业班级 2010级动物医学专业升本班指导教师贾英科成绩评定2012年6月目录1.前言 (4)1.1分类 (4)1.2血清型 (4)1.3诊断 (4)2试验材料 (5)2.1试验设备 (5)2．2试验用具 (5)2.3试验试剂 (5)2.4试验用病料 (5)3试验方法 (5)3.1细菌分离鉴定 (5)3.2触片染色镜检 (6)3.3菌落观察 (6)3.4肉汤增菌培养基 (6)3.5生化试验 (6)3.6药敏试验 (6)4试验结果 (6)4.1染色镜检结果 (6)4.2菌落观察结果 (6)4.3生化试验结果 (7)14.4MIC测定结果 (8)5讨论分析 (8)5.1生化鉴定试验注意内容 (8)5.2形态学坚定地意义 (9)5.3药物筛选与治疗 (9)6 总结 (12)参考文献 (13)致谢 (13)附录1：外文文献 (14)附录2：外文文献中文译文 (22)2摘要从天津不同地区临床疑似鸭疫里氏杆茵感染病死鸭中分离到12 株鸭疫里氏杆菌，通过细菌形态、培养特怔、生化试验，鉴定为鸭疫里氏杆菌。

采用微量液体二倍稀释法，测定了14 种常用抗菌药物对12 株鸭疫里氏杆菌的抗菌活性，结果表明，有2 个菌株均对14 种药物高度敏感，其MIC值均≤1μg/ mL，其它菌株MIC值差异较大，所有抗菌药对Y4 菌株的最小抑菌浓度较高，其MIC值均≥32μg/ mL。

关键词：鸭疫里氏杆菌；分离；鉴定；药敏试验ABSTRACTAbstract：Twelve bacteria strains were separated from dead ducks in different areas of Tianjin Province. They were identified as Riemerella anatipestifer by bacteria morphology, cultural characteristic and biochemical test. Using the micro liquid two-fold dilution method, antibacterial activity of 14 antibiotics against 12 Riemerella anatipestifer strains was determined. The results showed that 2 of 12 strains were sensitiveto all the 14 antibiotics and all the MIC values were equal or less than 1μg/mL. There were significant differences among the MIC values of other strains. The MIC values of Y4 strainto all the drugs were very high and all the MIC values were equal or greater than 32μg/mL.Keywords:Riemerellaanatipestifer;isolation;identification;drugsensitivitytes t3鸭疫里氏杆菌的鉴定及药敏试验玉苏普卡迪尔.阿卜杜拉（天津农学院动物科学系）1 前言鸭疫里氏杆菌( r iemer ella anat ip estif er , RA ) 是引起雏鸭、雏火鸡以及雏鹅等多种禽类感染发病的病原, 对1～8 周龄的鸭危害最大, 呈急性或慢性败血症, 病变以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、脑膜炎以及部分病例出现干酪性输卵管炎、结膜炎、关节炎为特征, 俗称鸭传染性浆膜炎。

鹅源鸭疫里默氏杆菌的分离和鉴定
赵宝华;徐步;范建华
【期刊名称】《中国畜牧兽医》
【年(卷),期】2010(037)008
【摘要】为研究鹅源鸭疫里默氏杆菌的生化特性、药敏情况、血清型和致病性,从扬州郊区发病鹅场分离到1株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性鉴定、玻片凝集试验,确定为Ⅱ型鸭疫里默氏杆菌.对病料进行病毒分离试验,经过血凝试验和琼脂扩散试验,没有发现鹅新城疫病毒、禽流感病毒和小鹅瘟病毒.动物致病性试验结果表明,鸭疫里默氏杆菌分离菌株可以通过静脉注射、皮下注射和滴鼻3种途径感染鹅,出现100%的死亡率,说明分离株对扬州鹅具有很强的致病性,同时提示在鹅的免疫计划中也应该充分考虑到鸭疫里默氏杆菌的致病和传播.
【总页数】4页(P189-192)
【作者】赵宝华;徐步;范建华
【作者单位】中国农业科学院家禽科学研究所,扬州,225003;中国农业科学院家禽科学研究所,扬州,225003;中国农业科学院家禽科学研究所,扬州,225003
【正文语种】中文
【中图分类】S858.33
【相关文献】
1.贵州省鹅源1型鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定与致病性研究 [J], 李干洲;汪德生;徐景峨;王璇;余波;杨粤黔
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))))))))))))))))))))****养禽与禽病防治222222一例雏鹅感染鸭疫里默氏杆菌的病例报告!!!!!!!!陈基明 梁竞臻 赵长润 徐子恒 磨美兰! 韦!平!!!!!!!!"广西大学养禽与禽病研究所!广西南宁($)))+#中图分类号 0#(#G$$(G '"!!文献标识码 L !!文章编号 '))".("$( ")'# )%.)"&'.)"!!鸭疫里默氏杆菌"/(#'#"#001121+(,#)+(3#"!c 2#感染是鸭'鹅'火鸡以及其他家禽和野禽的一种常见接触传染性疾病!又称为鸭传染性浆膜炎,'!"-!主要感染'^*周龄的雏鸭,$-(该病主要呈急性或慢性败血症形式!其特征是$三炎%病变!即纤维素性心包炎'肝周炎'气囊炎!以及脑膜炎和干酪性输卵管炎等,+-("^#周龄的雏鹅对该病易感!病变与鸭的相似(c 2为革兰氏阴性杆菌!单个'成双!偶尔呈链状排列!在巧克力琼脂'血液琼脂等生长良好!增加,\"生长更旺盛,"-(瑞氏染色时!菌体呈两极着染,"-(在我国!自郭玉璞等在北京郊区鸭场首次分离到该菌以来!广东'广西'福建'四川'江苏等地均相继报道此病,(-(目前该病广泛分布于我国各地区!常常引起严重的流行和死亡,%-(已成为一种危害养禽业的主要细菌性传染病之一!造成巨大的损失(近年来随着养鹅业的兴起和发展!该病成为了养鹅业不可忽视的一大问题(近年!王思庆等,*-'孟定等,#-和赵宝华等,&-陆续在雏鹅中检测到鸭疫里默氏杆菌!本实验室也多次在雏鹅中检测到(!!")'#年*月!广西扶绥县某养殖场饲养的雏鹅出现精神沉郁'羽毛松乱'食欲减退'较软无力'蹲伏不动等症状!陆续出现死亡(该鹅群从')日龄开始发病!至'#日龄送检时累积死亡率(T (经剖解发现!心包积液'肝周炎'脾脏坏死'气囊炎等病变(根据发病日龄'临床症状'病例剖检'培养特性和形态特征观察及实验室诊断!确诊细菌分离株均为鹅源鸭疫里默氏杆菌!并用分离菌株完成了'%种常见药物的药物敏感试验(32发病情况!!")'#年*月'#日!广西扶绥县某鹅养殖场共收稿日期 ")'#.').'*基金项目 广西科技重大专项"桂科22'*")+)(*#(作者简介 陈基明">4H @B ?<?@9#='"%G >C <#!男!硕士研究生!研究方向为禽病与病原分子生物(!!通讯作者(YZ <A ?F +<C <H ?F A @='%$G >C <!S?@9g H ?#='"%G >C <(有雏鹅")))只!始发病日龄为')日龄!至'#日龄送检时发病率约为")T !死亡率约为(T (雏鹅精神萎靡'羽毛松乱'食欲减退'嗜睡'缩脖歪颈'脚软无力行动迟缓或蹲伏不动(排灰白色或者黄绿色稀便(注射过小鹅瘟抗体及喂食头孢曲松等药物!但疫情未得到有效控制!死亡仍继续(42剖检病变!!养殖场送检病鹅$只!剖检表现明显的$三炎%病变(心脏体积增大!心包有大量积液!心包膜增厚&肝脏表面覆有一层厚薄不均的灰白色纤维素性膜&胸'腹部气囊壁增厚或有大小不一的淡黄色纤维素性渗出物附着(52实验室诊断5G 32细菌分离培养!!无菌采集病鹅的心'肝等病变部位!同时用双份血平板琼脂培养基和巧克力琼脂平板接种!分别置于培养箱以及增加,\"浓度的烛缸内!$*h ,培养"+4^+#4(观察可见!血平板琼脂培养基上长出不溶血'边缘整齐'透明'带有光泽的奶油状小菌落!巧克力琼脂平板上长出边缘整齐'透明'带有光泽的奶油状小菌落(将纯化后的菌落接种于麦康凯培养基!分别置于温箱和烛缸中!$*Q 培养"+4^+#4(结果麦康凯培养基中无菌落生长(5G 42病原鉴定!!将纯化后的单个菌落进行涂片!进行革兰氏染色和瑞氏染色(革兰氏染色镜检下视野内有大量单个'成双的革兰氏阴性小杆菌(瑞氏染色镜检可见两极着染的小杆菌(!!分离培养的细菌经鉴定符合鸭疫里默氏杆菌的培养特性和染色特性(根据雏鹅的发病日龄'临床症状!病例剖检和实验室诊断结果!可以确诊该病例为鹅感染鸭疫里默氏杆菌(5G 52药敏试验!!选用临床上常见药物分别对分离纯化后的菌'&"广西畜牧兽医!!!!!")'#年K C F G $+ %株参照X Z L纸片扩散法进行药敏试验!药敏试验结果如表'所示(该分离株对复方新诺明和甲氧嘧啶不敏感!对头孢噻肟和呋喃妥因高度敏感(表32药敏试验结果药物名称抑菌圈直径"<<#判定结果药物名称抑菌圈直径"<<#判定结果氨苄西林')i链霉素'+ii 阿莫西林')i卡那霉素')i 头孢噻肟"#iii四环素'"ii 头孢他啶")ii呋喃妥因"%iii 头孢曲松")ii磺胺异 唑'%ii 复方新诺明%.甲氧嘧啶%.萘啶酸'#ii环丙沙星'%ii 阿米卡星'+ii庆大霉素'"ii !!注 抑菌圈直径"<<# %<<为不敏感!j% ')<<为低度敏感!j') ")<<为中度敏感+.表示不敏感!i表示低度敏感! ii表示中度敏感!iii表示高度敏感(62防治措施!!全面做好环境卫生清理及消毒!病死鹅及时进行无害化处理!并利用百毒杀等消毒液稀释后对饲养场地和器具进行充分消毒(改善饲养环境!病鹅和健康鹅分开饲养!加强雏鹅的保暖工作!保证饮水和喂料的充足!可适当在饲料或者饮水中添加电解多维'葡萄糖和维生素等(!!根据药敏试验结果!推荐养殖场使用头孢噻肟等合理药物进行治疗(!!按上述方案治疗后经反馈!几天后鹅群停止死亡!病情得到控制和好转!病鹅很快痊愈!恢复饮食和活力(72小结与分析!!鸭疫里默氏杆菌主要引起雏鸭发病!对鹅致病力较弱(但是近年来!随着生活水平的提高!人们对鹅肉和鹅肝的消费越来越大!促进了养鹅业的快速发展!养殖存栏规模和密度不断扩大和增加!鹅感染鸭疫里默氏杆菌逐渐成为养鹅业的一大问题并呈地区流行的趋势!给养殖场造成了严重的经济损失(根据近期送检病鹅的病例诊断发现!从病鹅中分离到鸭疫里默氏杆菌的现象逐渐增多!且该细菌对鹅的致病力有增强的趋势!表明鸭疫里默氏杆菌感染在当前已成为危害幼年鹅的传染性疾病(从临床资料分析!有以下几点原因+鸭'鹅在养殖的水面亲密接触!鸭疫里默氏杆菌在鹅群中传代适应!对鹅致病性越来越强&饲养密度过大!养殖场环境条件差!导致雏鹅抵抗力差!易感染疾病&养殖环境潮湿不通风!该菌长期污染场地!引起不同批次的鹅患病或者带菌&不同年龄批次混养!带菌成年鹅会将该菌传染给雏鹅!造成交叉感染(!!自然条件下!本病一年四季都有发生!主要通过污染的饲料'饮水'尘土'飞沫等!经呼吸道'消化道或者皮肤的伤口"尤其是足蹼部皮肤#而感染该细菌,''-(经了解!推测本次病例的暴发是近期雨季!场地潮湿'饲养密度较大等原因造成的(因此!需要加强饲养管理!控制好饲养密度!坚持全进全出!及时消毒!严格遵守卫生防疫制度!冬春季节解决好鹅舍保温与通风的关系!勤换垫料!保持干燥通风清洁(饲料营养要全面!注意及时补充维生素和蛋白质!增强鹅群体质!提高免疫力(鹅群必须与鸭群绝对分离饲养!防止被感染!放牧或下水塘!应远离鸭群和其他鹅群(!!对于曾经发病或附近流行该病的养殖场!最好及时进行有效的疫苗预防接种(根据当地发病日龄的早晚!'^*日龄进行一次免疫(如果流行严重可以考虑一次免疫*天后再进行一次加强免疫(但是防治本病的关键仍是坚持观测$以防为主%的方针!持之以恒地做好环境卫生!及时消毒等常规防疫措施(药物治疗不能凭经验滥用或者乱用药物!要在药物敏感性试验的基础上!对于急性病例筛选合理药物!并注意药物交替使用(参考文献,'-莫模双!朱娟娟!魏晓瑞!等G'例鸭疫里氏杆菌病的诊断和防治,`-G中国畜禽种业!")''!)*"$#+'+#.'+&G ,"-0A?e N G M G禽病学+第十一版,M-G北京+中国农业出版社!"))(G,$-杨宗维!韦!平!李康然G鸭疫里默氏杆菌病病原及防制的研究进展,`-G广西畜牧兽医!"))%!""""#+&".&+G,+-张瑞瑜G鸭疫里氏杆菌病的诊断与防治,`-G中国畜禽种业!")''!)*"##+%(.%%G,(-章亚东!董!飞!孙国华!等G鹅鸭疫里默氏杆菌感染的诊断与治疗,`-G北京农业!"))#"&#G,%-郝菊秋!董新荣!高德臣G鸭疫里氏杆菌病的诊断与药敏试验,`-G山东畜牧兽医!")'+"##+$*G,*-王思庆!郑树源!刘楚龙!等G一例雏鹅鸭疫里默氏杆菌病的诊治,`-G水禽世界!"))&"+#+"(."%G,#-孟!定!钱志伟!何其彬G鹅鸭疫里默氏杆菌病的诊断与防治探讨,`-G畜禽业!")'+"'"#+%.#G,&-赵宝华!徐!步!范建华G鹅源鸭疫里默氏杆菌的分离和鉴定,`-G中国畜牧兽医!")')!$*"##+'#&.'&"G,')-王丽丽G鸭疫里默氏杆菌病的诊断与防治,`-G山东畜牧兽医!")''!$""&#+&".&$G,''-李艳奇!高晴霄!顾春阳!等G鸭疫里默氏杆菌多价灭活苗的研制及应用,`-G水禽世界!"))#""#++'.+"G"&"广西畜牧兽医!!!!!")'#年K C F G$+ %。

一株鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏实验余树培，陈静华，韩昆鹏，吴婷婷，陈丽珠(江苏省盐城市畜牧兽医站，江苏盐城224001)摘要：为了有效防治鸭疫里默氏杆菌病，本研究对送检的疑似病料进行鸭疫里默氏杆菌"liemerella anatidzs，&")PCR检测，将阳性病料进行细菌分离培养，通过革兰染色、生化实验及PCR验证进行鉴定，并对该分离株进行药敏实验%结果显示，脑、脾、肝病料RA阳性，分离株鉴定为命名为YCSY1，该分离株对环丙沙星等7种抗生素表现为耐药，对头抱&咻和多西环素中度敏感，对青霉素、氧氟沙星和氨*西林高度敏感％关键词：鸭疫里默氏杆菌&分离鉴定&药敏实验鸭疫里默氏杆菌病又称鸭浆膜炎、鸭败血病、鸭疫综合症等，是由鸭疫里默氏杆菌(.Rtemerella anatidis，RA)引起的鸭急性或慢性、接触性传染病,病理症状主要表现为纤维性心包炎、肝周炎和气囊炎(1)%RA主要感染1〜8周龄雏鸭，致死率高，病鸭生长发育迟缓，给国内、外养鸭业带来了巨大经济损失閃％RA血清型复杂，已报道的血清型有20余种，并且各血清型之间交叉免疫保护效果差，在使用疫苗的情况下,仍有部分养殖场出现相关病例⑷％因此，对于鸭疫里默氏杆菌病的防治，RA的快速检测和科学用药至关重要％笔者对盐城市射阳县某养殖场送检的1例鸭疫里默氏杆菌病疑似病例进行RA PCR检测，从阳性病料中成功分离出YCSY1菌株，并通过药敏实验筛选敏感药物，为该鸭场鸭疫里默氏杆菌病的防控提供参考％1材料与方法1.1材料1.1.1病料和菌株病料为盐城市射阳县某鸭场的病死鸭，6周龄％解剖可见，心脏、肝脏表面有大量灰白色炎性渗出物，呈现鸭疫里默氏杆菌病典型症状％无菌采集脑及心、肝、脾、肺、肾组织％RA阳性对照菌株YCBH1由江苏省盐城市畜牧兽医站保存％1.1.2主要试剂与仪器胰酪蛋白月东大豆肉汤培养液(Trypticase soy broth,TSB)、胰酪蛋白东大豆琼脂培养基(Tryp-tose soya agar,TSA)均购自上海博微生物科技有限公司，新生小牛血清(Neonatal bovine serum, NBS)购自上海碧云天生物技术有限公司，组织DNA提取试剂盒购自天根生化科技有限公司，革兰染色液、12种药敏试纸、细菌微量生化反应管均购自杭州微生物试剂有限公司，Premix Taq DNA聚合酶、DNA Marker DL2000、DNA Marker DL5000均购自TaKaRa公司％根据参考文献[5],设计RA外膜蛋白A编码序列的特异性弓I物(F：5'-GGAGCCAACTATTT-GAGAC-3'；R：5^GACCTGGAACATTAGGA-CACT-3'),委托上海生工生物工程有限公司合成％Mastercycler nexus PCR仪为德国Eppendorf 公司产品，恒温培养摇床KYC-100C购自上海新苗医疗器械制造有限公司，核酸电泳仪PowerPac Basic、凝集成像仪Gel Doc XR+均为美国Bio-Rad 公司产品％1.2方法1.2.1疑似病例病料的PCR检测分别从采集的脑及心、肝、脾、肺、肾等组织样本中剪取小块，参考组织DNA提取试剂盒说明书，从各组织中提取总DNA作为PCR检测模板；按照Premix Tq DNA聚合酶说明书，进行PCR反应％反应程序: 94°C预变性5min；94]30s,56]30s,72]45s,共30个循环；72C延伸5min；4C保温。

幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验引言鸭疫是一种由里默氏杆菌引起的严重传染病，特别是对幼鹅群体带来极大的危害。

幼鹅感染鸭疫后会出现发热、呼吸困难和精神萎靡等症状，严重时甚至导致死亡。

对幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验显得尤为重要，可以为防治鸭疫提供科学依据。

一、资料与方法1.1 实验材料本实验选取了感染鸭疫的幼鹅样本作为研究对象，里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验所需的琼脂、琼脂培养基和抗生素均按照实验要求准备。

1.2 方法（1）样本采集：选择病情较重的幼鹅进行样本采集，包括鼻腔分泌物、呼吸道分泌物和粪便等。

（2）分离鉴定：将样本分别接种在里默氏杆菌选择性琼脂培养基上，按照琼脂培养基说明书进行培养。

观察培养基上的细菌形态，进行显微镜观察和革兰氏染色，对里默氏杆菌进行鉴定。

（3）药敏试验：对分离出的里默氏杆菌进行对不同抗生素的药敏试验，包括青霉素、红霉素、氨苄西林等抗生素进行对照试验。

二、实验结果2.1 分离鉴定经过对样本的接种培养和显微镜观察，分离出多株形态典型的里默氏杆菌。

通过革兰氏染色的观察，发现里默氏杆菌为革兰氏阳性菌，杆状或梭状。

2.2 药敏试验将分离出的里默氏杆菌进行对不同抗生素的敏感性试验，结果显示该菌株对青霉素和红霉素表现出高度耐药性，而对氨苄西林则表现出较强的敏感性。

三、结果分析根据实验结果分析，幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定工作取得了成功。

分离出的里默氏杆菌形态典型，经过革兰氏染色鉴定，对里默氏杆菌的诊断具有重大意义。

在药敏试验中，发现该菌株对青霉素和红霉素表现出高度耐药性，而对氨苄西林则表现出较强的敏感性，为制定治疗方案提供了重要参考。

四、结论经过分离鉴定及药敏试验，成功分离出幼鹅感染鸭疫的里默氏杆菌，并进行了相应的药敏试验。

实验结果有助于制定科学合理的治疗方案，为鸭疫的防治工作提供了重要参考。

幼鹅感染鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验是非常重要的，在幼鹅感染鸭疫后，需要及时进行这项研究工作，以便为幼鹅提供更好的治疗和防范措施，减少因鸭疫带来的损失。