本微生物学实验考核细则

考试说明：
1.本考试为2018-2019下《食品微生物及其检验技术》期末考试以实验操作形式的项目化考试尝试，本次考试只适用于17分析1班，为此类考试初探。

2、标准及检测项目：参照GB 4789-2016系食品微生物学检验标准，完成样品中菌落总数、大肠杆菌数、霉菌和酵母菌计数）的检验工作。

3、考试准备：按检测标准及项目要求，自选检测材料，设计完整实验。

4、考试过程包括：采样、培养及配置、灭菌、检验操作、培养、记录统计、数据处理、结果分析、报告。

5、考试形式：2-3人为一组进行
6、评分细则：根据项目及微生物实验要求，模拟食品检测过程分项进行记分。

班级：姓名：得分：
一、题目
食品中菌落总数、大肠杆菌数、霉菌和酵母菌的检验
二、标准
GB4789. 2 — 2016菌落总数、GB4789. 3 — 2016大肠杆菌数、GB4789.15 — 2016霉菌和酵母菌计数
培养基的制备与灭菌
结果观察
检验操作过程评分标准（时间15分钟）。

《医学微生物学》实验目的和要求及实验室规则及注意事项医学微生物学是医学专业的基础课程之一，主要研究微生物在人体中的生理和病理过程。

实验是医学微生物学学习的重要环节，通过实验可以加深对理论知识的理解和应用，提高学生的实际操作能力。

本文将详细介绍医学微生物学实验的目的和要求，以及实验室规则和注意事项。

一、实验目的和要求1.实验目的(1)了解微生物的基本概念和分类特征，掌握基本的病原微生物检测技术；(2)学习常见病原微生物的培养和鉴定方法，掌握微生物的培养技术和实验操作；(3)培养学生的实际动手能力、数据分析能力和科学研究思维。

2.实验要求(2)精确记录实验数据，准确并规范地填写实验报告；(3)遵守实验室规则，严格遵循实验安全操作规程。

二、实验室规则1.实验室开放时间实验室开放时间为每周一至周五的08:30-17:30，周六至周日不开放。

2.实验室装备使用(1)学生在使用实验室设备前，必须接受相关培训并取得资质证书；(2)使用实验室设备时要注意操作规程，禁止随意调试和拆卸实验室设备；(3)实验后要及时清洗和归位实验器材，保持实验室的整洁和环境卫生。

3.实验室安全(1)实验室进入前必须穿戴实验斗篷、手套、口罩等个人防护用品；(2)实验结束后必须洗手，并做好实验台面和器材的清洁工作；(3)对于具有较高危险性的实验，需要两人互相检查和确认实验装置和操作步骤。

三、注意事项1.实验前的准备工作(1)查看实验指南，了解实验目的和要求，熟悉实验步骤；(2)检查实验器材和试剂的完整性和可用性；(3)清洁实验台面，并准备所需的清洁消毒用品；(4)穿戴合适的实验服装和个人防护用品。

2.实验中的注意事项(1)操作时要细心、耐心，并注意实验安全；(2)严禁饮食、吸烟或涂抹口红等行为；(3)注意实验器材和实验台面的清洁和整理；(4)在实验中遵循实验步骤，严禁修改或省略步骤。

3.实验后的工作(1)清洗和归位实验器材，保持实验室整洁；(2)保存和整理好实验数据，并根据要求填写实验报告；(3)关闭实验设备和实验室电源，确保实验室安全。

单染色1、涂片：用接种环沾取细菌培养液，在玻片上涂成直径约为1.0cm 的菌膜。

（Tip:菌量不宜过多，以免标本过厚，影响染色结果）2、干燥：最好在室温中自然干燥，也可在远离火焰上方微微烘干，但切勿靠近火焰以免烤焦标本。

（注意：如烘干，以玻片不烫手为宜。

）3、固定：火焰固定。

将标本涂片在火焰外层内来回通过3次。

固定的作用一是杀死细菌，同时可改变对染料的通透性（因为活的细菌一般不让各种染料进入细胞内）。

再者使细菌与玻片粘附牢固，三是使细菌蛋白凝固后保持其固有的外形。

4、染色：滴加结晶紫、稀释复红或碱性美兰液1～2滴，使染液盖满涂膜，1～2分钟后，用细小流水洗去多余的染液，在空气中自然干燥或用吸水纸轻轻吸干（切忌拖、拉）。

5、镜检结果：用结晶紫染色的细菌葡萄球菌、大肠杆菌呈紫色；用复红染色者均为红色；用碱性美兰染色者均为蔚蓝色。

复染革兰染色法过程：初染：结晶紫1分钟媒染：碘液1分钟脱色：95%酒精半分钟复染：稀释复红半分钟每步染色完后均需水洗。

葡萄球菌的革兰染色变形杆菌的革兰染色链球菌的革兰染色紫碘酒红一一半半球阳杆阴阳紫阴红注：脑淋卡白抗孢除外过程1、涂片：用棉签或接种环沾取细菌培养液，在玻片上涂成直径约为1.0cm 的菌膜。

2、干燥：最好在室温中自然干燥，也可在远离火焰上方微微烘干。

但切勿靠近火焰以免烤焦标本。

3、固定：火焰固定。

4、革兰染色过程：初染：结晶紫1分钟媒染：碘液1分钟脱色：95%酒精半分钟复染：稀释复红半分钟5、镜检：球阳杆阴阳紫阴红化脓性球菌分离鉴定化脓性球菌主要有葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。

触酶实验原理：产生过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢生成水和氧分子-出现气泡。

操作步骤：在洁净玻片上滴一滴生理盐水，用接种环取少许细菌培养物与生理盐水中乳磨均匀，然后加3％过氧化氢数滴；或直接滴加3％过氧化氢于不含血液的细菌培养物中，立即观察结果。

结果观察：有大量气泡产生者为阳性。

微生物学理论课考核及评分办法1．考核方式：考核方式分两部份：（1）测验理论知识：平时学生在空余时间自己应用“微生物学导师系统”上机分章节复习测验，熟悉概念，理清关系，掌握规律；教师通过服务器了解学生的掌握情况。

期末应用“微生物学导师系统”的测试功能测验学生掌握基本理论知识的情况或从试题库中抽提出卷。

（2）测验综合能力：学期中旬给学生布置课题：让学生通过查阅资料，应用所学知识，积极发挥创新思维能力，设计一个对人类社会有用的微生物新产品，学期下旬以项目可行性报告形式写出研制该产品的社会意义、经济意义、国内外的研究开发情况、研究路线、生产工艺、产品形式、产品质量标准等，期末以答辩形式开展课堂讨论，进行项目的论证。

2．成绩评定：成绩分布分4部份：(1) 平时成绩（10％）包括：上课纪律、上课发言、平时上机复习等。

(2) 项目报告书（40-20％）包括：查阅资料的全面性，设计思路的条理性，项目内容的新颖性，实验方案的科学性。

(3) 答辩情况（10％）包括：介绍项目的条理性，回答问题的准确性，应用知识的灵活性以及PPT质量。

成绩由各班级学生推荐5位同学组成评分小组进行评分，评分标准：学生参加答辩的态度6-1分；PPT质量2-1分，介绍及回答问题2-1分。

(4) 期末闭卷考试成绩（40-60％）：以学生掌握知识为原则，允许学生多次测验，以最高得分记入成绩。

微生物学实验考核及评分办法本课程为考查课，考核方法：平时实验考核和期末总考试相结合。

（一）平时考核（占总成绩60%）平时根据学生预习、操作、实验结果、实验态度和实验报告情况，以5分制给每位学生打一个成绩，待全部实验结束时，给出一个平时成绩，占总成绩60%。

其中实验报告占50%，其它考核内容占50%。

具体考核办法如下：（1）课堂提问：在讲解实验原理、操作重点和注意事项时，教师对学生进行适当的提问，以了解学生的预习情况和对已学知识技能的掌握情况，不能正确回答者记分降一级。

微生物学检验实验指导2009．7一、《微生物学检验》实验目的要求1．通过实验验证理论知识，并掌握比较全面的微生物学基本操作技术。

2．在微生物学实验过程中建立无菌观念，掌握无菌操作技术。

3．通过实验进一步掌握临床常见病原微生物的生物学性状、分离培养和鉴定的方法、各种临床标本的微生物学检验程序和方法。

4．在实验过程中逐渐培养独立思考问题、分析问题和解决问题的能力。

二、微生物学实验室规则及实验室意外处理方法1．微生物学实验室规则由于微生物学实验是以病原微生物为研究对象，在实验过程中任何疏忽大意都有可能引起实验人员的自身感染或实验室和周围环境的污染。

因此，实验中应严格遵守实验规则，建立无菌观念，严格无菌操作，防止实验过程中出现意外情况，并确保实验结果的准确。

（1）试验前须预习实验内容，了解实验目的、方法和注意事项，做到心中有数，避免发生错误，提高实验效率。

（2）进入实验室必须穿工作服，必要时还须戴口罩、帽子和手套，并做好实验前的各项准备工作。

（3）非必需物品禁止带入实验室，带入实验室的物品应远离操作区，放在指定的区域。

（4）实验室内不准大声喧哗、嬉戏，应保持实验室的安静、整洁和有序。

不准在实验室内吸烟、饮水和进食，尽量避免用手触摸头、面部，防止感染，尽量减少室内活动，以免引起风动。

（5）实验中注意节约试剂，爱护仪器，避免有菌材料的污染，如有传染性材料污染桌面、地面、手、衣服或发生其他意外情况，应立即报告老师及时作适当处理。

（6）用过的污染物品应放到指定的地点，经专人消毒灭菌之后再进行清洗，切勿乱丢或冲入水池中。

禁止将本实验室的物品带出实验室外。

需送温箱培养的物品，应标记清楚后送到指定地点。

（7）实验完毕后应将桌面整理清洁，试剂、仪器放回原处，并用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，打扫卫生，关好水、电、门窗。

（8）离室前脱下工作服，反折放在指定的地方；双手在2％来苏液中浸泡5min左右，再用肥皂、清水洗净，方可离开实验室。

微⽣物学检查⽅法验证与评价要求微⽣物学检查⽅法验证与评价要求审评三部霍秀敏宁黎丽成海平魏农农摘要：本⽂系统阐述了微⽣物限度和⽆菌检查法验证的内容和技术评价要求，⽬的是规范微⽣物限度和⽆菌检查⽅法验证⼯作，供注册申请⼈在进⾏微⽣物限度和⽆菌检查研究时参考，微⽣物限度和⽆菌检查的评价要求，可⽤于具体的审评⼯作。

关键词：微⽣物学检查；⽅法验证；评价要求。

⼀、概述本⽂中的微⽣物学检查⽅法包括微⽣物限度检查法和⽆菌检查法。

微⽣物限度检查法系检查⾮规定灭菌制剂及其原料药、辅料受微⽣物污染程度的⽅法；包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。

⽆菌检查法系⽤于检查药典要求的⽆菌药品、原料药、辅料等是否⽆菌的⽅法；若检查结果符合规定，表明在该检验条件下未发现微⽣物污染。

中国药典2000年版及以前的版本虽然收载了微⽣物限度检查法和⽆菌检查法，但在如何保证检验⽅法的科学性及检验结果的准确性⽅⾯存在⼀些问题，与国外药典的相关要求⽐较有⼀定差距，关键是未明确对检验⽅法进⾏必要的⽅法学验证。

以前品种的申报资料中⼀般仅提供微⽣物限度检查或⽆菌检查的检查结果，⽆⽅法学验证内容。

但从保证药品安全性的实际出发，不同品种需要选择建⽴各⾃适当的检查⽅法，即使是仿制药，由于不同⽣产企业采⽤的⼯艺、辅料等的不同，其产品可能表现出不同的抑菌特性，进⾏微⽣物限度检查或⽆菌检查时，具体的检查⽅法也不能简单地照搬，需要通过试验验证核实已有的试验⽅法和检测系统是否适⽤，因此，也需要进⾏必要的⽅法验证。

中国药典2005年版对微⽣物限度检查法和⽆菌检查法进⾏了修订完善，明确规定进⾏药品微⽣物限度检查或⽆菌检查时应进⾏⽅法验证，⽬的是确认试验中应选择药典收载的何种供试液制备⽅法、何种测定⽅法，以及验证确定的检测系统是否适⽤于该药品的检验。

如果供试品有抑菌性，影响测定结果，则应采⽤适当的⽅法消除供试液的抑菌活性后再进⾏检查。

也就是说，只有通过⽅法验证，才能确定针对具体品种的具体的检验⽅法，保证采⽤的⽅法的科学性和检验结果的准确性。

初中生物实验考核方案
初中生物实验考核方案如下：
一、实验考核目的
通过实验考核，全面评价学生的实验操作技能和实验探究能力，促进学生科学素养的发展。

实验考核也是对学校生物实验室建设及实验教学实施效果的检查。

二、实验考核内容
实验考核内容可以包括基本实验操作和探究实验的设计及实施。

具体可以包括：显微镜的使用、临时装片的制作、观察和记录实验现象、实验数据的处理和分析等。

三、实验考核方式
可以采用笔试和操作相结合的方式进行考核。

其中，基本实验操作用于检查学生的动手能力，而探究实验则考查学生的探究思维和实践能力。

可以根据实验的重要性和难度，设置不同的权重。

四、实验考核评分标准
可以根据实验操作步骤和要求，制定详细的评分标准，以便对学生的操作进行准确评估。

评分标准应该包括操作过程和实验结果两部分。

操作过程可以从学生的动手能力、操作规范性等方面进行评价；实验结果可以从观察的准确性、记录的完整性等方面进行评价。

五、实验考核组织
学校可以成立专门的生物实验考核小组，负责制定考核方案、组织实施考核工作以及评价考核结果。

可以邀请外校教师或专家参与考核工作，以保证考核的公正性和专业性。

六、实验考核时间安排
可以在每个学期末进行一次实验考核，以便及时了解学生的实验掌握情况。

也可以在生物课程结束后进行全面考核，以评价学生的整体学习效果。

具体时间安排可以根据学校实际情况进行合理安排。