10 第十章 蛋白质的生物合成及基因调控 华中农业大学微生物考研生物化学

第一章 蛋白质化学蛋白质是最重要的生物大分子，同时蛋白质化学在生物化学中也是第一重要的部分。

要学好生物化学就一定要首先学好蛋白质化学。

蛋白质化学这一章内容很多，重点是蛋白质的结构和功能，其难点是掌握蛋白质或氨基酸的两性解离。

为使读者更好地掌握两性解离，本章以氨基酸的两性解离为例进行较详细的解释。

当可解离基团HA 或A-发生解离时：其中Ka 与Kb 分别为酸式解离常与碱式解离常数：Ka=[H +]×[A -]/[HA]Kb=[HA]×[OH -]/([A -]×[H 2O])由于[H 2O]可近似看作为1，而[OH -)×[H +]=10-14；[OH -]=10-14/[H +]Kb=[HA]×[OH-]/[A -]=([HA]/[A -]×（10-14/[H +]）=[[HA]/([A -]×[H +])]10-14=10-14 × 1/KaKa ×Kb=10-14为了使用上的方便，我们把X 的负对数用pX 表示，把上式两边取负对数：pKa+pKb=14这样我们就可以清楚地看到对于同一对解离基团的pKa 与pKb 之间的关系。

一般情况下我们都使用pKa ，而pKb 使用则较少。

在处理pH 值与某一可解离基团解离程度之间的关系时，我们就要使用Henderson-Hasselbalch 方程，此方程是怎样来的呢，请看：各成分的摩尔浓度为[HA] [H +][A -]Ka=（[H +]×[A -]/[HA]=[H +]×（[A -]/[HA]）两边取负对数：pKa=pH-Ig （[A -]/[HA]）Ph=pKa+1g （[A -]/[HA]）=pKa+1g （[碱]/[碱]）上式即为Hendreson-Hasselbalch 方程。

在这里，可以接受H +的A -被看作是广义碱，而能释放H +的HA 被看作是广义的酸。

某大学生物工程学院《生物化学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（100分，每题5分）1. 植物体内淀粉合成都是在淀粉合成酶催化下进行的。

（）答案：错误解析：2. tRNA的3′端所具有的CCA序列都是通过转录后加工才加上的。

（）答案：错误解析：原核生物tRNA基因的3′端编码链上就含有CCA序列，它不需要通过后加工的方式产生。

真核生物tRNA基因的3′端编码链上没有CCA序列，需要在转录后加工过程中添加CCA序列。

3. 人体细胞中的核苷酸部分从食物消化吸收而来，部分是体内自行合成。

（）解析：4. DNA复制的忠实性主要是由DNA聚合酶的3′→5′外切酶的校对来维持。

（）答案：错误解析：DNA复制的忠实性主要是由DNA聚合酶的高度选择性决定的，DNA聚合酶所具有的3′→5′外切核酸酶活性只是进一步提高复制的忠实性。

5. DNA的半不连续复制是指复制时一条链的复制方向是3′→5′，另一条链为5′→3′。

（）答案：错误解析：6. 大肠杆菌参与DNA错配修复的DNA聚合酶是DNA聚合酶Ⅰ。

（）答案：错误解析：参与大肠杆菌DNA错配修复的DNA聚合酶为DNA聚合酶Ⅲ。

7. dTMP合成的直接前体物质是TDP。

（）解析：dTMP合成的直接前体是dUMP。

细胞内脱氧核苷酸的合成是在核苷二磷酸的水平上进行的。

8. 原核生物RNA聚合酶和真核生物细胞核RNA聚合酶属于多亚基RNA聚合酶家族，真核生物细胞器RNA聚合酶和噬菌体RNA聚合酶属于单亚基RNA聚合酶家族。

（）答案：错误解析：原核生物RNA聚合酶、真核生物细胞核RNA聚合酶和叶绿体RNA聚合酶属于多亚基RNA聚合酶家族，线粒体RNA聚合酶和噬菌体RNA聚合酶属于单亚基RNA聚合酶家族。

9. 真核细胞中的RNA聚合酶仅在细胞核中有活性。

华中农业大学2021年《动物生化》考研真题一.判断是非题1.蛋白质生物合成中核糖体沿mRNA的3'→5'端移动2.核糖体的活性中心"A"位和"P"位都主要在大亚基上。

3.构成密码子和反密码子的碱基都只是A、U、C、G。

4.复制和转录起始均需RNA引物。

5.基因的内含子没有任何功能。

6.原核生物mRNA一般不需要转录后加工。

7.脂肪酸的合成在胞浆进行，而β-氧化作用在线粒体中进行，两类反应所需的酶系完全不同。

8.TCA循环中，底物水平磷酸化生成的高能化合物是ATP。

9.ATP和柠檬酸是己糖激酶的变构抑制剂。

10.长期饥饿，维持血糖稳定主要靠肝糖原的分解。

二.选择题1.糖类最主要的生理功能是∶A.细胞膜组分B.提供能量C.免疫功能D.信息传递功能E.软骨的基质2.糖酵解最重要的关键酶是∶A.葡萄糖激酶B.已糖激酶C.丙酮酸激酶D.磷酸果糖激酶E.磷酸甘油酸激酶3.葡糖糖有氧氧化时生成的丙酮酸必须进入线粒体内氧化的原因是∶A.乳酸不能进入线粒体内B.为了保持胞质的电荷中性C.丙酮酸脱氢酶系在线粒体内D.丙酮酸堆积能引起酸中毒E.胞浆中生成的丙酮酸别无其他去路4.TCA循环中底物水平磷酸化的反应是∶A.琥珀酸→延胡索酸B.异柠檬酸→α-酮戊二酸C.延胡索酸→草酰乙酸D.q-酮戊二酸→琥珀酸E.柠檬酸→异柠檬酸5.下列酶促反应中与CO2无关的是∶A.丙酮酸羧化酶反应B.6-磷酸葡萄糖脱氢酶反应C.琥珀酸脱氢酶反应D.异柠檬酸脱氢酶反应E.α-酮戊二酸脱氢酶反应6.关于肽键叙述错误的是∶A.肽键属于一级结构范畴B.参与肽键形成的六个原子位于同一平面C.肽键具有部分双键性质D.肽键旋转而形成β-折叠E.肽键中的C-N键长度比N-Ca单键短7.谷氨酸有3个解离常数，pK1=2.19，pK2=4.25，pK3=9.67。

谷氨酸的等电点pI=A.(pK1+pK3)/2B.(pK1+pK2+pK3)/3C.(pK1+pK2)/2D.(pK2+pK3)/2E.上面都可以8.蛋白质在280nm处有最大的吸收峰，主要是由下列哪组氨基酸引起的A.组氨酸和酪氨酸B.酪氨酸和色氨酸C.酪氨酸和苯丙氨酸D.色氨酸和苯丙氨酸E.苯丙氨酸和组氨酸9.下列氨基酸不含极性侧链的是A.亮氨酸B.苏氨酸C.丝氨酸D.半胱氨酸E.酪氨酸10.蛋白质在电场中移动的方向取决于A.蛋白质的分子量和它的等电点B.所在溶液的pH值和离子强度C.蛋白质的等电点和所在溶液的pH值D.蛋白质的分子量和所在溶液的pH值E.蛋白质的等电点和所在溶液的离子强度11.有关乳酸脱氢酶同工酶的叙述，正确的是A.乳酸脱氢酶含有M亚基和H亚基两种，故有两种同工酶B.M亚基和H亚基都来自同一染色体的某一基因位点C.它们在人体各组织器官的分布无显著差别D.它们的电泳行为相同E.它们对同一底物有不同的Km值12.酶的活性中心是指A.结合抑制剂使酶活性降低或丧失的部位B.结合底物并催化其转变成产物的部位C.结合别构剂并调节酶活性的部位D.结合激活剂使酶活性增高的部位E.酶的活性中心由催化基团和辅酶组成13.胰凝乳蛋白酶水解肽健时，进行亲核攻击是A.Ser195的-OHB.His57咪唑基C.Asp102的-CO0HD.上面都参与了亲核攻击E.上面的答案都不对14.核酸的最大紫外光吸收值一般在A.280nmB.260nmC.240nmD.200nmE.300nm15.DNA的解链温度是A.A260达到最大值时的温度B.A260达到最大值50时的温度C.A280达到最大值50时的温度D.DNA开始解链时所需的温度E.DNA完全解链时所需的温度16.胆固醇在体内不能转化成A.胆汁酸B.肾上腺皮质激素C.胆色素D.性激素E.维生素D317.脂肪酸β-氧化过程中不出现的反应是A.加水反应B.脱氢反应C.脱氧反应D.硫解反应E.再脱氢反应18.脂酰CoA在线粒体进行β一氧化顺序的正确是A.加水、脱氢、硫解、再脱氢B.脱氢、再脱氢、加水、硫解C.脱氢、加水、再脱氢、硫解D.脱氢、脱水、再脱氢、硫解E.硫解、脱氢、加水、再脱氢19.为胸腺嘧啶核苷酸的合成提供一碳单位的是A.N5-甲基四氢叶酸B.N5，N10-甲烯四氢叶酸C.N5，N10-甲炔四氢叶酸D.N5-亚氨甲基四氢叶酸E.N10-甲酰四氢叶酸20.脑中氨的主要去路是A.扩散入血B.合成谷氨酰胺C.合成谷氨酸D.合成尿素E.合成嘌呤21.原核生物催化DNA复制的主要酶是A.DNA-polIB.DNA-polIIC.DNA-polIIID.以上都是E.以上都不是22.冈崎片段产生的原因是A.DNA复制速度太快B.复制方向与解链方向不同C.双向复制D.因有RNA引物E.因DNA链太长23.p因子的功能是A.参与转录的启动过程B.参与转录的全过程C.加速RNA的合成D.参与转录的终止过程E.可改变RNA聚合酶的活性24.下列关于转录因子（TF）的叙述正确的是A.是真核生物RNA聚合酶的组分B.参与真核生物转录的起始、延长和终止阶段C.是转录调控中的反式作用因子D.是真核生物的启动子E.是原核生物RNA聚合酶的组分25.蛋白质合成中，有关肽链延长叙述正确的是A.核糖体向mRNA5'端移动三个核苷酸距离B.肽酰-tRNA转位到核糖体的A位C.GTP水解成GDP和H3PO4以提供能量D.空载的tRNA从P位进入A位E.ATP直接供能26.常出现于肽链转角结构中的氨基酸是A.丙氨酸B.甲硫氨酸C.谷氨酸D.半胱氨酸E.脯氨酸27.含有两个羧基的氨基酸是A.赖氨酸B.丝氨酸C.苏氨酸D.谷氨酸E.亮氨酸28.关于谷胱甘肽的叙述，下列正确的是A.含有胱氨酸B.是体内重要的氧化剂C.其中谷氨酸a-羧基是游离的D.C端羧基是主要的功能基团E.所含肽键均为α一肽键29.蛋白质分子中一个氨基酸发生改变，则该蛋白质A.功能不一定改变B.功能一定改变C.二级结构一定改变D.三级结构一定改变E.二级结构一定不变30.关于蛋白质功能的叙述，错误的是A.催化作用B.运输作用C.机械支持作用D.遗传信息的载体E.免疫作用31.下列叙述正确的是A.沉淀的蛋白质一定变性B.变性的蛋白质一定沉淀C.沉淀的蛋白质就不再有生物活性D。

第15章蛋白质的合成一、教学大纲基本要求蛋白质合成的一般过程以及参与蛋白质合成的各种大分子（包括翻译因子）的结构与功能，蛋白质合成后的加工形式与转运机制，主要内容包括，1.遗传密码，遗传密码的破译策略，遗传密码的特点，2.蛋白质生物合成中的生物大分子结构及其作用，mRNA，rRNA，核糖体，辅助因子。

3.蛋白质生物合成的一般过程，原核生物与真核生物蛋白质合成的异同，常用的原核型与真核型蛋白质合成抑制剂，4.多肽合成后的定向输送与加工，信号肽及信号肽的识别，内质网上多肽的糖基化修饰，高尔基体中多肽的糖基化修饰及多肽的分捡（sorting），线粒体、叶绿体蛋白质的来源。

二、本章知识要点（一）遗传密码1、遗传密码的破译主要利用无细胞体外翻译体系，在外加不同的RNA模板、20种标记的氨基酸后，分析多肽产物的氨基酸序列。

美国科学家M.W.Nirenberg等由于在该领域的开创性工作于1968年获诺贝尔生理医学奖。

2、遗传密码的特点在64个密码子中有61个编码氨基酸，3个不编码任何氨基酸而起肽链合成的终止作用，称为终止密码子，它们是UAG、UAA、UGA，密码子AUG（编码Met）又称起始密码子。

（1）方向性：由mRNA的5’向到3’编码（2）连读性：编码一个肽链的所有密码子是一个接着一个地线形排列，密码子之间既不重叠也不间隔，从起始密码子到终止密码子（包括终止子）构成一个完整的读码框架，又称开放阅读框架（ORF）。

如果在阅读框中插入或删除一个碱基就会使其后的读码发生移位性错误（称为移码）。

两个基因之间或两个ORF 之间可能会互相部分重叠（共用部分碱基序列）。

（3）简并性：几种密码子编码一种氨基酸的现象称为密码子的简并性。

如GGN（GGA、GGU、GGG、GGC）都编码Gly，那么这4种密码子就称为Gly的简并密码。

只有Met和Trp没有简并密码。

一般情况下密码子的简并性只涉及第三位碱基。

（4）变偶性：密码子中第三位碱基与反密码子第一位碱基的配对有时不一定完全遵循A-U、G-C的原则，Crick把这种情况称为摇摆性（变偶性），也称摆动配对或不稳定配对。

第16章蛋白质的合成单元自测题（一）、名词解释1、无细胞翻译系统2、密码子(codon)3、摆动配对(wobblepairing)4、核糖体循环(ribosomecycle)5、多核糖体(polyribosome)6、操纵子(operon)7、顺式作用元件(cis element)8、反式作用因子(trans factor)9、锌指(zincfinger)10、亮氨酸拉链(1eudnezipper)11、螺旋—环—螺旋(helix-loop-helix)12、跳跃翻译(jump translation)13、蛋白质内含子（二）填空题1、在64个密码子中，终止密码子是、、，编码Met兼作翻译起始信号的密码子是，编码Trp 的密码子是。

2、反密码子第位碱基和密码子第碱基的配对允许有一定的摆动，称为变偶3、在原核细胞翻译起始时，小亚基16SrRNA的3’端与mRNA5’端的之间互补配对，确定读码框架，fMet-tRNA f 占据核糖体的位置，4、在肽链延伸时，由核糖体大亚基的酶催化核糖体P位置的与A位置的形成肽键。

5、每一次延伸循环掺入一个氨基酸的同时，消耗分子的GTP，核糖体沿的方向解读mRNA的编码序列，肽链从延伸，直到A位置出现终止密码子时，结合到核糖体上，新生的肽链被释放。

6、在真核细胞中，已合成的蛋白质通过内质网膜运输时有、、和等参与了识别和运送作用。

7、内质网膜表面附着的大量核糖体是的场所，内质网膜腔内是的场所。

高尔基体的重要功能是和。

8、蛋白质磷酸化是可逆的。

蛋白质磷酸化时，需要酶，而蛋白质去磷酸化需要酶。

9、在蛋白质的生物合成中，需要起始tRNA，在原核中为，在真核中为，最后合成的蛋白质N端不含有甲硫氨酸，因为。

10、肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是。

11、氨酰ｔＲＮＡ合成酶在ＡＴＰ和Mg２+存在下选择正确的氨基酸加到tRNA的3'末端，使之氨酰化的过程，取决于。

12、蛋白质生物合成过程中，核糖体内需能步骤都与水解为和无机磷有关。

蛋白质的合成与调控例题和知识点总结蛋白质是生命活动的主要承担者，其合成与调控过程十分复杂且精密。

以下将通过一些例题来帮助大家更好地理解蛋白质的合成与调控相关的知识点。

一、蛋白质合成的过程蛋白质的合成可以分为转录和翻译两个阶段。

转录是指以 DNA 的一条链为模板，合成 RNA 的过程。

在细胞核中，DNA 双螺旋解开，RNA 聚合酶结合到 DNA 上，按照碱基互补配对原则，合成 RNA 分子。

例如：如果一段 DNA 序列为“ATGCGGCTTA”，那么其转录得到的mRNA 序列应为“UACGCCGAAT”。

翻译是指以 mRNA 为模板，在核糖体中合成具有一定氨基酸顺序的多肽链的过程。

mRNA 上的每三个相邻碱基称为一个密码子，决定一个氨基酸。

例题 1：已知一段 mRNA 序列为“AUGGGCUUA”，问翻译得到的多肽链中氨基酸的排列顺序。

解答：根据密码子表，AUG 对应的氨基酸是甲硫氨酸，GGC 对应的是甘氨酸，UUA 对应的是亮氨酸，所以多肽链中氨基酸的排列顺序为甲硫氨酸甘氨酸亮氨酸。

二、蛋白质合成的调控（一）转录水平的调控DNA 上的某些区域，称为启动子和增强子，能够影响 RNA 聚合酶与 DNA 的结合，从而调控基因的转录。

例题 2：若一个基因的启动子区域发生突变，可能会对该基因的表达产生什么影响？解答：启动子区域突变可能导致 RNA 聚合酶无法有效结合，从而使基因的转录受到抑制，蛋白质合成减少或无法合成。

（二）翻译水平的调控1、 mRNA 的稳定性：mRNA 分子在细胞中的存在时间长短会影响蛋白质的合成量。

2、核糖体的活性：核糖体的数量和活性会影响翻译的速度。

例如，如果细胞中某种 mRNA 被快速降解，那么由其翻译的蛋白质产量也会相应减少。

（三）蛋白质的修饰与加工合成后的多肽链往往需要经过一系列的修饰和加工，才能成为具有生物活性的蛋白质。

例如，胰岛素原需要经过蛋白酶的切割，去掉一部分肽段，才能形成有活性的胰岛素。

2021年华中农业大学微生物学专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、借周生鞭毛进行运动的细菌有______和______等，借端生鞭毛运动的细菌有______和______等，而借侧生鞭毛运动的细菌则有______等。

2、亚病毒包括______、______、______和______。

3、合成代谢的功能与分解代谢相反，是指在有关酶系的催化下，由______、______和______一起合成______的过程。

4、半固体培养基可用于______、______、______、______、______、______和______。

5、真菌的孢子数量极大，给人类带来不利之处是______、______和______等；有利之处则是利于______、______、______、______和______等。

6、现代微生物学发展有以下几个特点：______，______，______，______，______，______。

7、一条典型的生长曲线至少可分为______、______、______和______4个生长时期。

8、______是微生物的“天然培养基”，也是它们的“大本营”，对人类来说，则是最丰富的菌种资源库。

9、当前对原核受体细胞来说，在遗传工程中的最合适外源基因载体是 ______和______，对真核细胞受体来说，在动物方面主要有______，植物方面则主要是______。

10、外毒素的种类很多，常见的如______、______、______和______ 等。

二、判断题11、玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。

（）12、用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。

（）13、参与呼吸链的泛醌（CoQ），是一类存在于细菌细胞膜上的水溶性氢载体。

（）14、病毒具有感染性，且核酸是病毒的遗传物质，故所有病毒的基因组核酸都是感染性核酸。

（）15、白假丝酵母（Candida albicans）可产生无性的厚垣孢子。

第16章蛋白质的合成单元自测题（一）、名词解释1、无细胞翻译系统2、密码子(codon)3、摆动配对(wobblepairing)4、核糖体循环(ribosomecycle)5、多核糖体(polyribosome)6、操纵子(operon)7、顺式作用元件(cis element)8、反式作用因子(trans factor)9、锌指(zincfinger)10、亮氨酸拉链(1eudnezipper)11、螺旋—环—螺旋(helix-loop-helix)12、跳跃翻译(jump translation)13、蛋白质内含子（二）填空题1、在64个密码子中，终止密码子是、、，编码Met兼作翻译起始信号的密码子是，编码Trp 的密码子是。

2、反密码子第位碱基和密码子第碱基的配对允许有一定的摆动，称为变偶3、在原核细胞翻译起始时，小亚基16SrRNA的3’端与mRNA5’端的之间互补配对，确定读码框架，fMet-tRNA f 占据核糖体的位置，4、在肽链延伸时，由核糖体大亚基的酶催化核糖体P位置的与A位置的形成肽键。

5、每一次延伸循环掺入一个氨基酸的同时，消耗分子的GTP，核糖体沿的方向解读mRNA的编码序列，肽链从延伸，直到A位置出现终止密码子时，结合到核糖体上，新生的肽链被释放。

6、在真核细胞中，已合成的蛋白质通过内质网膜运输时有、、和等参与了识别和运送作用。

7、内质网膜表面附着的大量核糖体是的场所，内质网膜腔内是的场所。

高尔基体的重要功能是和。

8、蛋白质磷酸化是可逆的。

蛋白质磷酸化时，需要酶，而蛋白质去磷酸化需要酶。

9、在蛋白质的生物合成中，需要起始tRNA，在原核中为，在真核中为，最后合成的蛋白质N端不含有甲硫氨酸，因为。

10、肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是。

11、氨酰ｔＲＮＡ合成酶在ＡＴＰ和Mg２+存在下选择正确的氨基酸加到tRNA的3'末端，使之氨酰化的过程，取决于。

12、蛋白质生物合成过程中，核糖体内需能步骤都与水解为和无机磷有关。

华中农业大学生物化学生物化学1、三羧酸循环中的六种辅助因子TPP焦磷酸硫胺素由维生素B1在体内（如脑、肝等组织内）转变而成，是重要的酮酸如α-酮戊二酸氧化脱羧酶系的辅酶。

NAD+烟酰胺腺嘌呤二核苷酸曾称为二磷酸吡啶核苷酸（DPN）或辅脱氢酶Ⅰ或辅酶Ⅰ。

是一种转递电子(更准确来说是：氢离子)的辅酶，它出现在细胞很多新陈代谢反应中CoA辅酶AMg2+、硫辛酸FAD黄素腺嘌呤二核苷酸，又称活性型维生素B2、核黄素-5'-腺苷二磷酸，是糖代谢三羧酸循环中的一种重要黄素辅酶，一些脱氢酶以它为辅基，维生素B2是它的活性基团。

FAD是一种比NAD和NADP更强的氧化剂，能参与两个连续的电子传递或同时发生的两个电子的传递。

F指黄素，A指腺嘌呤，D是指二核苷酸2、丙酮酸脱氢酶系:多酶复合体该复合体共含12个E1二聚体、24个E2和6个E3二聚合体，以非共价键维系。

丙酮酸脱氢酶E1二氢硫辛酸乙酰转移酶E2二氢硫辛酸脱氢酶E33、三羧酸循环中的八种酶“一只黑猫两只虎，两个柠檬一只狐，一个苹果一桶醋”按照反应依次是柠檬酸合成酶、顺乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、α－酮戊二酸脱氢酶、琥珀酸硫激酶、琥珀酸脱氢酶、延胡索酸酶、苹果酸脱氢酶三羧酸循环又叫“柠檬酸循环””TCA循环”嘿嘿不是有个牌字的电视机叫TCL么！！4、网上找的一些总结性的东西可以去看看有助于记忆三羧酸循环产物：领一桶壶壶锁果仙（柠檬酸，异柠檬酸，α－酮戊二酸，琥珀酰基辅酶A，琥珀酸，延胡索酸，苹果酸，草先乙酸）特点：4.2.1.12四次脱氢，2次脱羧，1次底物水平磷酸化，产生12个ATP循环的第一步是乙酰CoA（2C）与草酰乙酸（4C）缩合成柠檬酸（6C），柠檬酸经一系列反应重新生成草酰乙酸，完成一轮循环。

主要事件顺序为：（1）乙酰CoA与草酰乙酸结合，生成六碳的柠檬酸，放出CoA。

柠檬酸合成酶。

（2）柠檬酸先失去一个H2O而成顺乌头酸，再结合一个H2O转化为异柠檬酸。

第18章基因工程基础一、教学大纲基本要求用工具酶、克隆载体与表达系统；基因克隆的一般原理与过程，目的基因的分离，目的基因的克隆；克隆基因的表达；因表达的控制元件，外源基因在原核系统中的表达；外源基因在真核系统中的表达。

二、本章知识要点（一）基因工程概念基因工程是对携带遗传信息的分子进行设计和施工的分子工程，包括基因重组、克隆和表达。

基因工程的核心技术是DNA重组。

蛋白质工程是在基因工程基础上发展起来的，它是指通过对蛋白质已知结构与功能的认识，借助计算机辅助设计，利用基因定位诱变等技术改造蛋白质，以达到改进其某些性能的目的。

基因工程开辟了生物学研究的新纪元。

借助基因工程，分子生物学的发展达到空前的速度和规模，新的研究领域不断被开拓。

“人类基因组计划”是生物学历史上最巨大的科学工程；后基因组的时代已经到来。

基因工程带动了生物技术产业的兴起。

制药、化工、食品、农业和医疗保健业无不得益于基因工程。

基因工程帮助人类认识和改造生命世界，也帮助人类认识自己。

设计和创建新的基因、新的蛋白质和生物新的性状的时代。

（二）分子克隆的基本原理克隆(clone)意为无性繁殖系。

DNA克隆即将DNA的限制酶切片段插入克隆载体，导入宿主细胞，经无性繁殖，以获得相同的DNA扩增分子。

故DNA克隆为分子克隆。

1、ＤＮＡ限制酶与连接酶DNA分子克隆，即将DNA的限制片段插入克隆载体，导入宿主细胞，经无性繁殖，获得相同的DNA 扩增分子。

切割DNA分子需要用限制性核酸内切酶。

生物来源不同但识别序列与切割序列相同的限制酶，称为同裂酶(isoschizomers)；切割产生单链末端相同的限制酶，称为同尾酶(isocaudamers)。

相容（compatible ende）的限制片段可用DNA连接酶(DNA ligase)相连接。

平末端连接效率较低，利用接头(linker)、衔接物（adaptor）或在平末端加上互补均聚物可以帮助平末端连接。

第4章酶一、教学大纲基本要求酶的化学本质，酶催化反应的特点，酶的活性中心，酶在细胞内的分布特点；酶的习惯命名，酶的国际系统命名，酶的系统分类及编号，按酶蛋白分子的组成分类，同工酶、诱导酶；酶催化反应高效性的机理，酶催化反应专一性的机理，酶作用机理举例；底物浓度对酶促反应速度的影响，pH值对酶促反应速度的影响，温度对酶促反应速度的影响，酶的浓度对酶促反应速度的影响，激活剂对酶促反应速度的影响，抑制剂对酶促反应速度的影响，有机介质中的酶促反应；别构效应调节，共价调节，酶原的激活，多酶体系调节。

二、本章知识要点1．酶的基本概念酶是一类具有高催化效率、高度专一性、活性可以调节的高分子生物催化剂。

除了一些具有催化功能的RNA以外，绝大部分的酶都是蛋白质或带有辅助因子的蛋白质。

在生物体内，种类繁多的酶使得各种代谢反应迅速而有序的进行。

2．酶催化的特点（1）催化效率高，酶催化反应速度是相应的无催化反应速度的108-1020倍，并且至少高出非酶催化反应速度几个数量级。

（2）专一性高，酶对反应的底物和产物都有极高的专一性，几乎没有副反应发生。

（3）反应条件温和，温度低于100℃，正常大气压，接近中性pH环境。

（4）酶的催化活性可以调节，根据生物体的需要，酶的活性受到多种调节机制的灵活调节。

主要有反馈抑制调节、抑制剂和激活剂对酶活性的调节、别构调节、酶的共价修饰调节、酶的合成和酶的活化与降解等。

（5）容易失活，高温、高压、强酸、强碱和重金属盐等因素都可能使3．酶与非酶催化剂相比的几点共性（1）催化效率高，含量低。

（2）只改变化学反应速度，不改变化学反应平衡点。

（3）降低反应的活化能。

（4）反应前后自身的结构不变。

催化剂改变了化学反应的途径，使得反应通过一条活化能比原来途径低的途径进行。

催化剂的作用只反映在动力学上，即加快反应速度，但不影响反应的热力学，即不能改变化学平衡。

4．酶的化学本质（1）组成酶的主要成分是蛋白质。

华中农业大学一九九六年硕士研究生入学考试试题纸课程名称：生物化学第页，共页注意：所有答案必须写在答题纸上，不得写在试题纸上。

一、 名词解释：（20%）1、能荷2、基因工程3、固相酶4肉碱穿梭5、不对称转录6、反馈抑制7、操纵子8、同义密码子9、核酸内切酶10、底物水平磷酸化二、符号解释（10%）1、ACP2、SOD3、dNTP4、SDS5、PAGE6、poly（A）7、m7G8、PAL9、BCCP 10、Tm三、写出下列化合物的结构式（10%）1、油酸2、脑磷酯3、纤维二糖4、ADP5、谷胱甘肽四、填空题（10%）1、EMP途径中有三个不可逆的酶，分别是、、。

2、丙二酸是酶的性抑制剂。

3、自然界中有三种双糖即、、是以游离态存在。

4、Tm值与DNA分子中含量成正相关，核酸在波长nm处有明显的吸收区。

5、细胞中的RNA主要存在于中，RNA中分子量最小的是，含量最多的是，寿命最短的是。

6、蛋白质生物合成中，起始密码是，终止密码是、、。

7、合成RNA时，RNA聚合酶沿着DNA链的方向移动，而所生成的RNA链沿方向延伸。

五、问答题（50%）1、哪些酶参与淀粉的降解作用？这些酶的特性有何区别？（7分）2、何谓转氨基作用？生物体内有哪些类型？写出其反应式（7分）3、简要说明DNA复制的基本规律？（7分）4、蛋白质生物合成中，氨基酸是怎样被活化的？写出其反应式（7分）5、何谓电子传递链？各成员的排列顺序是怎样的？氧化磷酸化部位在何处？为什么？（7分）6、简述聚丙烯酰胺凝胶电泳测同工酶的原理和主要操作步骤？（7分）7、绘简图表示EMP、TCA、PPP、乙醇、乳酸、GAC等各途径的相互关系（8分）华中农业大学一九九七年硕士研究生入学考试试题纸课程名称：生物化学第页，共页注意：所有答案必须写在答题纸上，不得写在试题纸上。

一、 名词解释（20%）1．酶的比活力2．固定化酶3．不对称转录4．蛋白质的盐析作用5．遗传信息6．粘性末端7．解偶联作用8．糖的异生作用9．同义密码子二、符号解释（10%）1．PRPP 2．RNP 3．Bis 4．PAL 5．Trp6．ssDNA 7．hnRNA 8．DHU 8．G-S-S-G 10．UDPG三、填空题（15%）乙醛酸通过转氨基作用可生成，3-羟基丙酮酸通过转氨基作用可生成；色氨酸脱氨基后生成，并可以转变为植物激素中的；磷酯酶C水解卵磷脂生成和；中心法则是由于1958年提出的；酶是限制脂肪酸生物合成速度的酶；操纵子假说由于1961年提出的；含一个以上双键的不饱和脂肪酸的氧化，可按β-氧化途径进行，但还要二种酶，即和；氧化还原反应自由能ΔG0的变化与电量、电势之间的关系式为；在磷酸戊糖途径的氧化阶段，两种脱氢酶是和，它们的辅酶都是。

2022年华中农业大学微生物学专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、微生物是一切______生物的总称，其特点是______、______和______。

2、细菌的鞭毛具有______功能，菌毛具有______功能，性菌毛具有______功能。

3、微生物菌种保藏的原理是在______、______、______、______和______等环境条件下，使其处于代谢不活泼状态。

4、按照微生物与氧的关系，可把微生物分为五类：______、______、______、______和______。

5、真菌无性孢子主要包括______、______、______、______、______、______和______，有性孢子主要包括______、______、______ 和______。

6、亚病毒包括______、______、______和______。

7、硝化作用需要在严格的______条件下进行，而反硝化作用则需要在______条件下进行。

8、化能异养菌以______获得能量，以______作为碳源，并将其还原为新的有机物。

9、微生物生物氧化的过程可以分为______、______和______三个阶段。

10、免疫球蛋白分为______、______、______、______、______5类，按照其存在形式又分为______和______两种。

二、判断题11、固氮微生物在固氮过程中，需要的阳离子是K＋。

（）12、细菌形成菌落的必要条件应该是：一个固体培养基平板，一个单细胞，以及培养基表面细胞的分布不能拥挤。

（）13、硫细菌、铁细菌和硝化细菌等化能自养菌不能通过Calvin循环进行CO2的固定。

（）14、迄今为止利用细胞壁的成分作为鉴定主要指标的微生物是酵母菌类。

（）15、支原体是已知的可以自由生活的最小的原核微生物。

（）16、一个酵母菌细胞上，只可能有一个蒂痕，但芽痕则可以有多个。

华中农业大学生物化学考研笔记第一章糖概论一、糖的概念糖类物质是多羟基的醛类(aldehyde)或酮类(Ketone)化合物，以及它们的衍生物或聚合物。

二糖的元素组成与分类据此可分为醛糖(aldose)和酮糖(ketose)。

还可根据碳原子数分为丙糖(triose)，丁糖(terose)，戊糖(pentose)、己糖(hexose)。

最简单的糖类就是丙糖(甘油醛和二羟丙酮)由于绝大多数的糖类化合物都可以用通式Cn (H2O)n表示，所以过去人们一直认为糖类是碳与水的化合物，称为碳水化合物三、糖的种类根据糖的结构单元数目多少分为：（1）单糖：不能被水解称更小分子的糖。

（2）寡糖：2-6个单糖分子脱水缩合而成，以双糖最为普遍，意义也较大。

（3）多糖：均一性多糖：淀粉、糖原、纤维素、半纤维素、几丁质(壳多糖) 不均一性多糖：糖胺多糖类(透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素等)（4）结合糖(复合糖，糖缀合物，glycoconjugate)：糖脂、糖蛋白(蛋白聚糖)、糖-核苷酸等（5）糖的衍生物：糖醇、糖酸、糖胺、糖苷四、糖类的生物学功能(1) 生物体内的主要能源物质植物的淀粉和动物的糖原都是能量的储存形式。

(2) 在生物体内转变成其它物质物质代谢的碳骨架，为蛋白质、核酸、脂类的合成提供碳骨架。

(3) 生物体的结构成分。

纤维素、半纤维素、木质素是植物细胞壁的主要成分，肽聚糖是细胞壁的主要成分。

(4) 作为细胞识别的信息分子细胞膜表面糖蛋白的寡糖链参与细胞间的识别。

一些细胞的细胞膜表面含有糖分子或寡糖链，构成细胞的天线，参与细胞通信。

红细胞表面ABO血型决定簇就含有岩藻糖。

第一节单糖一、单糖的结构1、单糖的链状结构确定链状结构的方法（葡萄糖）：a. 与Fehling试剂或其它醛试剂反应，含有醛基。

b. 与乙酸酐反应，产生具有五个乙酰基的衍生物。

c. 用钠、汞剂作用，生成山梨醇。

最简单的单糖之一是甘油醛(glyceraldehydes)，它有两种立体异构形式(Stereoismeric form)，这两种立体异构体在旋光性上刚好相反，一种异构体使平面偏振光(Plane polarized liyot)的偏振面沿顺时针方向偏转，称为右旋型异构体(dextrorotary)，或D型异构体。