结核分枝杆菌 PPT

区域风险不同，防护措施不同
门诊、病区环境
常用的环境控制措施 •通风（自然和机械） •空气消毒:紫外线照射 •高效过滤装置 •物理化学消毒
自然通风
机械通风
•气流方向：清洁区－工 作人员区－病人区－排 出
•空气入口应远离空气出 口
循环风紫外线空气消毒机
• 杀灭结核杆菌 • 作为通气方法的补充 • 不能替代负压 • 不能替代高效过滤器 • 系统维护 • 职业防护
浓度 • 通过环境控制系统来控制空气流向，从而
降低传染性飞沫核往别处扩散的风险
医院感染分区
• 1.低危险区:行政管理区、教学区、生活服 务区、图书馆等;
• 2.中危险区:普通门诊、普遍病房等; • 3.高危险区:呼吸科门诊、呼吸科病房; • 4.极高危险区:结核病门诊和病区、特别是
耐药结核病病区、感染疾病(科)门诊和病房、 特殊检查场所等。
提示工作人员疑似感染罹患肺结核者，应赴 结核门诊就诊，经结核门诊评估后进行相应 的高风险暴露后处理。
•（二）高风险暴露后处置 经结核门诊评估后，行PPD皮试（或血伽
马干扰素释放试验），胸部CT，有痰则痰抗 酸菌涂片3次，追踪随访，2月后、半年后、1 年后、2年后重复上述检查。必要时痰结核菌
医务人员感染结核风险水平
影响结核菌感染的因素（三）
• 3.医疗因素 –社区内的结核患病率 –医疗机构的结核患病率 –结核病人数量 –医务人员数量 –感染控制措施
二、结核感染防控“金字塔”
（一）管理控制(第一道防线)
• 目的：预防人员结核暴露，通过快速诊断与治疗 减少感染的播散
• 通过管理方法（早期诊断、结核病人的及时隔离、 及时正确的抗结核治疗）预防飞沫核的产生、从 而减少结核播散的危险的方法

病死亡人数已达2亿。
1897年提出结核病的飞沫传染学说。 1908年C.Mantoux提出结核菌素试验方法。 1931年Seibert制成纯蛋白衍化物(PPD)。 1930年Lowenstein氏培养基的出现使结核菌培养生长
成功。
ppt课件
5
全球结核病疫情
每年有1%人口被结核杆菌感染，全球约有
(2) 试验方法：前臂掌侧皮内注射 5 个单位的 OT(0.1
ml)，或PPD-S 0.0001mg，48～72 h后观察红肿硬结直 径。 (3) 结果：红肿硬结>5mm者为阳性， ≥15mm强阳性，
ppt课件 27
<5mm阴性，未感染过。但应考虑 ①感染初期（因感染后需4周以上才出现） ②老年人 ③严重结核患者或正患有其他传染病 ④获得性细胞免疫功能低下。 （4）应用：婴幼儿结核病的辅助诊断，检查BCG接
侵作用）；含多种酶（分解利用营养物质）；保
护（阻止有害物质的进入菌体）。
ppt课件 20
(2) 脂质： ① 索状因子→破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸，抑 制白细胞游走引起慢性肉芽肿,人型结核分枝杆菌强
毒株与弱毒株的区别在于强毒株有索状因子。
② 磷脂→促进单核细胞增生，及结核结节形成。
③ 硫酸脑苷脂(Sulfatide)→抑制吞噬细胞中吞噬体与溶
耐药性结核（MDR-TB)患者增加（全世界约5000万）。
其耐药性变异由染色体突变经选择形成，与质粒无关。
研究发现对不同药物的耐药基因不相连接，可用于指
导临床联合用药治疗。
L型变异。
ppt课件
19
二、致病性
1、致病物质 不产生内、外毒素和侵袭性酶，无鞭 毛、无芽胞，致病物质主要是菌体成分。

全世界约三分之一的人群感染了结核分枝杆菌，《2012年全球结核病报告 》显示，在2011年有870万新发病例， 140万人死于结核病
活动性结核与潜伏性结核
新发TB病例来自潜伏性结 核感染人群
潜伏性结核感染（hidden epidemic）人群数量巨大— —“定时炸弹”
活动性TB – 全球每年900万新发病
５．结核菌素试验 检出结核分枝杆菌感染，而非检出结核
病。对儿童、少年及青年的结核病诊断 有参考意义。不能区分自然感染或是卡 介苗接种的免疫反应。 方法：结核菌素纯蛋白衍生物（PPD_RT23)。左侧前臂屈侧中上部1/3处， 0.1ml(5IU)皮内注射，26号10cm一次性 短斜面针头和和1cm注射器。
肺结核诊断
５．结核菌素试验 48—72小时观察及判断结果。测量硬结
的横径及纵径，平均直径（横径+纵径） /2。 ＜4mm为阴性 5—9mm弱阳性 10—19mm阳性 ＞20mm或虽＜20mm但局部出现水泡和淋 巴管炎为强阳性
肺结核诊断
５．结核菌素试验
阴性反应结果的儿童，一般表明未受过 结核分枝杆菌的感染，可除外结核病。
ＴＳ）
我国疫情
高感染率 高肺结核患病率 高耐药率 死亡人数多 递降率低 中青年患病多 地区患病率差异大 实施ＤＯＴＳ项目的地区患病率低
结核分枝杆菌
种属 放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属。 分类 人型、牛型、非洲型和鼠型４类。
生物学特性
１．多形性：细长稍弯曲两端圆形，痰标 本中可呈T、V、Ｙ形，及丝状、球状、 棒状。
２．传播途径： 飞沫传播：通过咳嗽、喷嚏、大笑、 大声谈话产生微滴排到空气中传播
结核病在人群中的传播
３．易感人群 自然抵抗力：与遗传因素、生活贫 困、居住拥挤、营养不良有关。婴 幼儿、老年人、HIV感染者、免疫抑 制剂使用者、慢性疾病患者易患。 获得性特异性抵抗力：来自自然或 人工感染。山区及农村居民移居城 市易感。

（三）结核菌素试验（ OT或PPD ） 1.原理：迟发型超敏反应 2.试剂： ① 旧结核菌素：结核杆菌蛋白
② 纯蛋白衍生物：5单位 3.方法： 前臂屈侧皮内注射，48～72h后观察结果
结果 阴性：＜5mm 阳性：≥5mm 强阳性：≥15mm
4.结果分析 ①阳性 ：注射部位硬结、红肿直径
皮肤发生水泡与坏死者，强阳性。
※若PPD-C侧红肿大于BCG-PPD侧则为结核杆菌 感染；若BCG-PPD侧红肿大于PPD-C侧，可能系 卡介苗接种所致
6. 意义 阴性需考虑以下情况： ⑴感染初期（产生抗体需3~6周）； ⑵老年人（免疫力弱）； ⑶严重结核患者或正患其他传染病导致细胞免疫力低
下，例麻疹病毒； ⑷获得性细胞免疫低下，例AIDS或免疫抑制剂的应用
分枝杆菌属（Mycobacterium）
又称抗酸分枝杆菌 (acid-fast bacillus) 种类较多（100种），可分为3类
①结核分枝杆菌； ②非结核分枝杆菌； ③麻风分枝杆菌。
20近10几年年全全国国结结核核病病疫疫情情情情况况
2013年
发病 死亡
2012年
发病 死亡
2013年
发病 死亡
0.5-1.5cm之间； ②强阳性 ：硬结直径1.5cm以上； ③阴性： 注射部位有针眼大的红点
或稍有红肿，硬结直径小于0.5cm。
结核菌素试验结果分析
阳性 强阳性 阴性
硬结、红肿直径 出现超敏反应 0.5-1.5cm之间 不表示正患结核病
硬结直径 1.5cm以上
表明可能有活动 性结核，应进一 步检查
蜡质D: 佐剂作用，引起迟发型超敏反应。
2. 蛋白质 ： 结核菌素，与蜡质D共同引起迟发型

❖ 治疗
▪ 白喉抗毒素---皮肤试验、早期使用 ▪ 抗生素
-
第二节 其他棒状杆菌
❖ 大多不产生外毒素 ❖ 很少有异染颗粒 ❖ 大多正常寄生于人体，为条件致病菌
-
分枝杆菌属
(Mycobacterium)
27
-
❖ 一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而命名 ❖ 主要特点
▪ 细长弯曲，分枝状生长 ▪ 细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸） ▪ 常用抗酸染色鉴定，呈抗酸染色阳性 ▪ 引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿
胞 ❖ 多为条件致病菌 ❖ 致病菌：白喉棒状杆菌
-
第一节 白喉棒状杆菌
(Corynebacterium diphtheriae)
12
-
一、 生物学性状
形态与染色
❖ 菌体细长微弯，一端或两端膨大呈棒状, 常排列呈V、L形
❖ Albert 染 色 ， 可 出 现 异 染 颗 粒 metachromatic granule，在鉴定时有重 要意义
-
第一节 结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis)
31
-
结核分枝杆菌
❖ 俗称结核杆菌，引起人类结核病 ❖ 致病菌主要为结核分枝杆菌（M. tuberculosis)、牛
分枝杆菌(M. bovis) ❖ 世界上1/3人感染，70%在亚洲 ❖ 世界防治结核病日：3月24日
声带麻痹--声音嘶哑
软颌麻痹--吞咽困难
• 心肌---心肌炎
-
白喉假膜
-
三、免疫性
抗毒素免疫
❖感染后机体可获得牢固的免疫力
❖机体还可通过其它方式获得免疫力：
▪ 六月以下婴儿---------母亲 ▪ 成人---------------------隐性感染、疫苗

5.若结核菌素试验阴性，则表明____________。 二、问答题
1.结核分枝杆菌的致病物质和引起的疾病表现有哪些? 2.简述结核菌素试验的结果、意义及在临床上的应用。
第36页，共36页。
第23页，共36页。
三、免疫性与超敏反应
第24页，共36页。
免疫性（三个“同时”）
结核病病人发病时机体： 同时有结核分枝杆菌的感染
同时有抗结核的细胞免疫 同时有迟发型超敏反应（Ⅳ型变态反应）
第25页，共36页。
有毒TB菌
科
以前感染过或免疫豚鼠
霍
现
象
局部红肿、浅溃疡
不扩散
正常豚鼠
局部红肿、溃疡
➢可借用其测定肿瘤病人的细胞免疫功能。
第30页，共36页。
第31页，共36页。
四、微生物学检查
第32页，共36页。
痰液等 标本处理：浓缩集菌(氢氧化钠处理）
直接镜检：抗酸染色
分离培养：培养基、时间（2~4周后见结果）
动物试验：豚鼠等 快速诊断：PCR等
第33页，共36页。
五、防治原则
第34页，共36页。
袭酶。其毒力可能与下述物质有关：
✓ 脂质 ✓ 蛋白质 ✓ 多糖
第16页，共36页。
脂质：
✓磷脂（形成结核结节，抑制蛋白酶对病变组织的
分解作用，使之形成干样坏死）
✓ 索状因子（破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸，引起 肉芽肿）
✓硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合，使细菌 胞内感染 ） ✓蜡质D（含有分枝菌酸，引起迟发性过敏反应）
径小于0.5cm。
第28页，共36页。
问题讨论： 如果一个成年人的结核菌素试验阳性
，他一定就是结核病人吗？

结核疫苗研究进展
第二种策略是对已接种卡介苗的儿童进行强化免疫，进而加强免疫应答并将免疫保护力延续至成人阶段。这一策略目前公认的最佳方案是应用亚单位疫苗加强免疫。亚单位疫苗组成明确，结构简单，可应用于有免疫缺陷的人群，倍受人们关注。亚单位疫苗主要是由有限数量的抗原构成，所引起的保护性免疫应答也高度集中。但其在体内滞留时间短，免疫应答的持续时间也较短，必须与佐剂联用才有效，使其应用受到限制，几种主要的候选疫苗均采用了将单抗原与多聚蛋白融合的方法，这样不仅增强了单抗原的免疫力，也易于进行规模化生产。所以佐剂的发展对强化免疫策略的实现功不可没。
结核杆菌诊断技术研究进展
4、噬茵体报告技术 该技术原理为，萤光素酶指示的分枝杆菌噬菌体与在含抗结核药物培养基中短暂培养的待检菌混合后，能感染活的耐药菌，使之表达萤光素酶基因，再加入萤光素底物，活菌会产生荧光，而敏感菌无荧光产生。此办法直观性高、用时短，但如要被广泛应用于结核杆菌的快速检测还需要进一步的探索．必须使用标准化的细菌、标准化的萤光素酶系统，以及标准化的培养基和发光检测仪，并能与用常规方法所测最低抑菌浓度值相符。
结核疫苗研究进展
第三种策略是将重组BCG 和亚单位疫苗或两种以上的疫苗结合到一起，从而解决结核疫苗免疫效果低下这一难题，虽然这个方法要求至少需要几年的时间进行第三期临床试验，这就需要做一个时间计划表来设法减少疫苗期试验，做一个成功的疫苗接种计划。
结核疫苗研究进展
从疫苗结构完整性来看一般可分为：重组BCG、亚单位疫苗、DNA 疫苗基因和缺失疫苗等。
结核杆菌诊断技术研究进展
3、MB／BacT系统 MB／BacT系统是由德国Heipha—Biotest公司生产的一种液体培养基系统，该系统对标本中结核分枝杆菌复合群(MTBC)初代分离率高于全自动分枝杆菌检测系统(BACTE)TB460，可以通过肉眼观察到细菌生长，且无放射性污染.但不能用于分支杆菌的菌型鉴定。

发病率
风湿性疾病患者合并结核分枝杆菌潜 伏感染的发病率较高，但具体发病率 因地区、人群和疾病类型等因素而异 。
死亡率
合并结核分枝杆菌潜伏感染的风湿性 疾病患者的死亡率也较高，主要原因 包括感染加重、并发症增多以及治疗 难度增加等。
影响因素和危险因素
影响因素
年龄、性别、遗传因素、环境因素、免疫状态、营养状况等 均可影响风湿性疾病患者合并结核分枝杆菌潜伏感染的发生 和发展。
关节症状
患者可能出现关节疼痛、肿胀 、活动受限等关节症状，与风 湿性疾病症状相似，但可能更 加严重。
皮肤症状
部分患者可能出现皮肤红斑、 结节性红斑等皮肤症状。
其他症状
患者还可能出现咳嗽、咳痰、 胸痛等呼吸系统症状，以及腹
痛、腹泻等消化系统症状。
诊断标准和方法
病原学检查
通过细菌学检查，如痰涂片、培养等 方法，找到结核分枝杆菌是确诊的关 键。
鼓励患者保持健康的生活方式，如戒烟、限酒、合理饮食、充足睡眠等。同时，根据患者 的具体情况给予适当的运动建议，如散步、游泳、瑜伽等低强度运动。
家属参与及沟通技巧培训
家属参与教育
鼓励家属积极参与患者的治疗和管理过程，提供必要的情感支持和生活照顾。同时，对家属进行疾病知ຫໍສະໝຸດ 教育，使其 了解患者的病情和治疗方案。
疾病认知教育
针对患者对风湿性疾病和结核分枝杆菌潜伏感染的认知不 足，开展疾病知识普及教育，提高患者对疾病的认知和理 解。
互助小组与支持团体
建立患者互助小组，鼓励患者间交流经验、分享心得，提 供情感支持和信息帮助。同时，可引导患者加入相关支持 团体，获取更多社会支持。
营养支持和康复训练建议
个性化营养方案
定期监测药物副作

石碳酸复红-------抗酸Ⅰ液 3% 盐酸酒精---- 抗酸Ⅱ液 碱性美蓝 ----- 抗酸 Ⅲ 液
方法
1. 制片（涂片3次），干燥，固定。 2. 初染:
抗酸 I 液 覆盖标本，加热5 min。(注:至蒸汽产 生, 勿煮沸, 及时添加染料)
冷却后细水流冲洗。 3. 脱色 :
抗酸II液 30 sec，细水流冲洗。 4. 复染：
旋转平板 90°
注意：用力均匀、轻柔；不能重复；第四区只接触第三区
结果
• 细菌生长现象
–菌苔 –菌落
–画图并描述菌落 的种类、大小、 形态、色泽、边 缘等
目的：分离细菌
菌苔 菌落
2、液体培养基接种：接种环、 生长现象
表面生长
专性需氧菌：枯草杆菌、结核分枝杆菌等
基本接种方法
• 固体平板分区划线 • 液体培养 • 斜面接种 • 半固体穿刺
1、平板分区划线法
• 培养基
–固体琼脂平板 （1人/组）
• 菌种
–金大混合菌
• 接种环、酒精灯、标记笔等
接种环灭菌
打开菌种管试管口
试管口灭菌
取一环菌种
再次灭菌试管口
盖上塞子
四区划线
旋转平板90°
旋转平板90° 烧灼接种环
二、抗酸染色
• 目的：
掌握抗酸染色原理及方法。
• 原理：
结核分枝杆菌细胞壁含大量脂类，普通染色 不能着色，经加热并延长时间后着色，但又不能 被盐酸酒精脱色，故可用来鉴别抗酸杆菌。
为什么不同的细菌着不同颜色 ?
抗酸杆菌
石碳酸复红+加热 盐酸酒精 碱性美蓝
非抗酸杆菌
材料
• 结核患者痰液 • 玻片、棉签、酒精灯、吸水纸、显微镜等 • 染料:

结核分枝杆菌的致病性
1、所致疾病
肺结核：（原发感染、原发后感染） 肺外结核 2、致病物质 荚膜 脂质：索状因子、磷脂、硫酸脑苷
脂、蜡质-D 蛋白质：25KD糖蛋白
结核分枝杆菌的诊断与防治
1、微生物学诊断：
标本采集：痰液、尿、粪、脑脊液、胸腹
1、培养特性：体外人工培养未获成功
2、对乙醇敏感（70% 2min） 动物接种、结核杆菌DNA测定、
麻风分枝杆菌的致病性
1、所致疾病 麻风：（瘤型、结核型）
2、致病物质 不详
麻风分枝杆菌的诊断与防治
1、微生物学诊断： 标本采集：鼻腔黏膜、皮损处组织 检测方法：涂片镜检（抗酸染色）
2、防治： 疫苗：BCG 治疗：砜类药物
2、对乙醇敏感（70% 2min）
动物接种、结核杆菌DNA测定、
、对湿热敏感 （ C 3 结核菌素试验
1、未感染
感染
62-63。
2、对乙醇敏感（70% 2min）
标本采集：鼻腔黏膜、皮损处组织
脂质：索状因子、磷脂、硫酸脑苷
结核分枝杆菌 — 4、对紫外线敏感（几小时）
15min）
5、抗痨药物敏感 （易形成耐药）
水、关节积液
结核菌素试验
结核分枝杆菌 —
非结核分枝杆菌 + 麻风分枝杆菌的诊断与防治
检测方法：涂片镜检
检测方法：涂片镜检
麻风分枝杆菌的生物学特性 麻风分枝杆菌的生物学特性
分离培养：固体培养基
腔黏膜、皮损处组织
脂质：索状因子、磷脂、硫酸脑苷 2、对乙醇敏感（70% 2min）
麻风分枝杆菌的生物学特性
结核分枝杆菌 — 疫苗：BCG 3、细胞免疫受抑制
细胞免疫正常
1、培养特性