实验一葡萄糖的一般杂质检查一、目的要求1.了解葡萄糖中一般杂质检查的目的和意义；2.掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属等一般杂质检查的基本原理、操作方法及杂质限量计算；3.正确使用纳氏比色管。
二、实验操作试药：葡萄糖试剂：酚酞、氢氧化钠、氯化钴、重硌酸钾、硫酸铜、硝酸、硝酸银、氯化钠、氯化钡、盐酸、硫酸、硫氰酸铵、90%乙醇、无水乙醇、磺基水杨酸、硫代乙酰胺、硝酸铅仪器：石蕊试纸5盒、滴瓶5个、量筒50ml、10ml各8个，移液管5ml、2ml、1ml各8只，烧杯100ml各8只、石英比色皿3对2.1 酸度取本品2.0克，加水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20ml，应显粉红色。
2.2 溶液的澄清度与颜色取本品5g，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10ml，溶液应澄清无色，如显浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2000年二部附录IX B）比较，不得更浓；如显色，与对照液取（比色用氯化钴液3ml、比色用重硌酸钾液3ml与比色用硫酸铜6ml，加水稀释50ml）1.0ml加水稀释至10ml比较，不得更深。
2.3 氯化物取本品0.6g，加水溶解使成25ml（如显碱性，可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应），再加稀硝酸10ml，溶液如不澄清，滤过。
臵50ml纳氏比色管中，加水适量使成约40ml，加硝酸银试液1ml，用水稀释使成50ml，摇匀，在暗处放臵5分钟，如发生浑浊，与标准氯化钠溶液一定量制成的对照液【取标准氯化钠溶液（10μg Cl/ml）6.0ml臵50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，用水稀释使成约40ml后，加硝酸银试液1ml，再加水适量使成约40ml后，加硝酸银试液1ml，再加水适量使成50ml，摇匀，再暗处放臵5分钟】比较，不得更浓（0.01%）。
2.4 硫酸盐取本品2.0g，加水溶解使成40ml（如显碱性，可滴加盐酸使遇石蕊试纸显中性反应）。
溶液如不澄清，滤过，臵50ml 纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，加25%氯化钡溶液5ml，加水稀释使成50ml，摇匀，放臵10分钟，如发生混浊，与对照标准液【取标准硫酸钾溶液（100μgSO4/ml）2.0ml，臵50ml纳氏比色管中，加水稀释使成40ml，加稀盐酸2ml，加25%氯化钡溶液5ml，加水稀释使成50ml，摇匀，放臵10分钟】比较，不得更浓（0.01%）。
2.5 乙醇溶液的澄清度取本品1.0g，加90%乙醇30ml，臵水浴上加热回流约10分钟，溶液应澄清。
2.6 亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。
2.7 干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，减失重不得过9.5%。
2.8 铁盐取本品2.0g，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，加水稀释使成45ml，加硫氰酸铵溶液（30→100）3ml，摇匀，如显色，与标准铁溶液2.0ml用同一方法制成对照液比较，不得更深（0.001%）。
2.9 重金属取25ml纳氏比色管两支，一管加标准铅溶液（10μg Pb /ml）2.0ml，醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水至25ml；另一管取本品4.0g，加水23ml溶解，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，各管分别加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，再放臵2分钟，同臵白纸上，自上向下透视，供试品显出的颜色与标准铅溶液比较，不得更深，含重金属不得超过百万分之五（5ppm）。
2.10 蛋白质取本品1.0g，加水10ml溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3ml，不得发生沉淀。
注解[1] 葡糖溶解而淀粉和糊精等不溶。
[2] 存在可溶性淀粉时呈蓝色，存在亚硫酸盐时碘液褪色。
[3] 在pH3~3.5时PbS沉淀较完全。
三、注意事项：1.平行操作原则：实验用具的选择、试剂与试液的量取方法及加入顺序、反应时间长短等应尽可能一致。
2.比色方法是将两管同臵于白色背景上，从侧面或自上而下观察；比浊方法是将两管同臵于黑色背景上，从上向下垂直观察。
3.所用比色管刻度高低差异不应超过2mm，使用过的比色管应及时清洗，注意不能用毛刷刷洗，可用铬酸洗液浸泡。
4.一般情况下可取1份供试品进行检查。
如结果不符合规定或在限度边缘时，应对供试品和对照管各复检2份，方可判定四、思考题1.氯化物、重金属及砷盐检查中的操作注意事项有哪些?比浊检查时为什么应将反应液稀释后再加沉淀剂?2.如何正确选用各项实验中的用具及仪器?为什么称取样品时仅需采用托盘天平，而坩埚的称重需要用精密天平?五、原始记录及报告格式（一）原始记录1.氯化物等限度检查检查项目检测方法现象观察结果结论氯化物硫酸盐铁盐（二）实验报告检品名称：批号：厂家：检验目的：一般杂质（氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐）的检查检验结果检查结论1、氯化物2、硫酸盐3、铁盐4、附部分药典方法：附录Ⅷ A 氯化物检查法除另有规定外，取各品种项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml(溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10ml；溶液如不澄清，应滤过；臵50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀,即得供试溶液。
另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，臵50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。
于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释使成50ml，摇匀,在暗处放臵5分钟，同臵黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，即得。
供试溶液如带颜色，除另有规定外，可取供试溶液两份，分臵50ml纳氏比色管中，一份中加硝酸银试液1.0ml，摇匀，放臵10分钟，如显浑浊，可反复滤过，至滤液完全澄清，再加规定量的标准氯化钠溶液与水适量使成50ml，摇匀,在暗处放臵5分钟，作为对照溶液；另一份中加硝酸银试液1.0ml与水适量使成50ml，摇匀，在暗处放臵5分钟，按上述方法与对照溶液比较，即得。
标准氯化钠溶液的制备称取氯化钠0.165g，臵1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液10ml，臵100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Cl)。
【附注】用滤纸过滤时，滤纸中如含有氯化物，可预先用含有硝酸的水溶液洗净后使用。
附录Ⅷ B 硫酸盐检查法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成约40ml(溶液如显碱性，可滴加盐酸使成中性)；溶液如不澄清，应滤过；臵50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，摇匀，即得供试溶液。
另取各药品项下规定量的标准硫酸钾溶液，臵50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml，摇匀，即得对照溶液。
于供试溶液与对照溶液中，分别加入25％氯化钡溶液5ml，用水稀释至50ml,充分摇匀，放臵10分钟，同臵黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，即得。
供试溶液如带颜色，除另有规定外，可取供试溶液两份，分臵50ml纳氏比色管中，一份中加25％氯化钡溶液5ml，摇匀,放臵10分钟，如显浑浊，可反复滤过，至滤液完全澄清，再加规定量的标准硫酸钾溶液与水适量使成50ml，摇匀，放臵10分钟，作为对照溶液；另一份中加25％氯化钡溶液5ml与水适量使成50ml，摇匀,放臵10分钟，按上述方法与对照溶液比较，即得。
标准硫酸钾溶液的制备称取硫酸钾0.181g，臵1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于100μg的SO4）。
附录Ⅷ G 铁盐检查法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品,加水溶解使成25ml，移臵50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml后，加30％硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml, 摇匀；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液（取各药品项下规定量的标准铁溶液，臵50ml纳氏比色管中，加水使成25ml,加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml，加30％硫氰酸铵溶液3ml,再加水适量稀释成50ml，摇匀）比较，即得。
如供试管与对照管色调不一致时，可分别移至分液漏斗中，各加正丁醇20ml 提取，俟分层后，将正丁醇层移臵50ml纳氏比色管中，再用正丁醇稀释至25ml，比较，即得。
标准铁溶液的制备称取硫酸铁铵 [FeNH4(SO4)2〃12H2O] 0.863g，臵1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液10ml，臵100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Fe)。
附录Ⅷ H 重金属检查法重金属系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。
标准铅溶液的制备称取硝酸铅0.160g，臵1000ml量瓶中,加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液10ml，臵100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10μg的Pb）。
配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。
第一法硫代乙酰胺法除另有规定外，取25ml纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml后，加水或各药品项下规定的溶剂稀释成25ml，乙管中加入各药品项下规定的方法制成的供试液25ml；若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其它无干扰的有色溶液,使之与乙管一致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放臵2分钟，同臵白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。
如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使颜色一致时，可取该药品项下规定的二倍量的供试品和试液，加水或该药品项下规定的溶剂使成30ml，将溶液分成甲乙二等分，乙管中加水或该药品项下规定的溶剂稀释成25ml；甲管中加入硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放臵2分钟，经滤膜(孔径3μm)滤过，然后甲管中加入标准铅溶液一定量,加水或该药品项下规定的溶剂使成25ml；再分别在乙管中加硫代乙酰胺试液2ml，甲管中加水2ml，照上述方法比较，即得。
供试品如含高铁盐影响重金属检查时,可取该药品项下规定方法制成的供试品溶液，加抗坏血酸0.5～1.0g，并在对照液中加入相同量的抗坏血酸，再照上述方法检查。
配制供试品溶液时，如使用的盐酸超过1.0ml（或与盐酸1.0ml相当的稀盐酸），氨试液超过2ml,或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂臵瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移臵纳氏比色管中，加标准铅溶液一定量，再用水稀释成25ml。
实验相关试液配制酚酞指示液：酚酞指示液取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。
氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）：取 (1mol/L)氢氧化钠滴定液2ml稀释至100ml。
![[指南]葡萄糖杂质检查（一））](https://img.taocdn.com/s1/m/8c1293e8900ef12d2af90242a8956bec0975a5f6.png)
