滇牡丹的多样性和现状评估

滇牡丹内生真菌的分离鉴定及两株抗菌活性菌株代谢产物的研究的开题报告一、选题背景滇牡丹（Paeonia ludlowii）是我国特有的多年生药用植物，其具有抗炎、抗肿瘤、抗菌等多种药理活性。

近年来，对滇牡丹的研究逐渐深入，发现其中还潜藏着许多具有生物活性的微生物资源，如内生真菌。

内生真菌是指在植物组织内生长、与植物形成共生关系的真菌，具有生物多样性和生物活性代谢产物，是新药物研发的重要资源。

因此，对滇牡丹内生真菌进行研究，有助于挖掘生物多样性资源，发现新的药物研发方向。

二、研究内容本研究旨在对滇牡丹内生真菌进行分离鉴定，并对其中两株抗菌活性菌株的代谢产物进行研究。

具体研究内容如下：1.对滇牡丹的根、茎、叶及花部位的内生真菌进行分离，筛选出优良的菌株。

2.利用形态学和分子生物学技术对所分离的菌株进行鉴定，并构建菌株的系统发育树。

3.对所分离的菌株进行筛选，筛选出具有抗菌活性的两株菌株。

4.利用色谱技术分离和纯化两株菌株的代谢产物，并对其结构进行解析。

5.对两株菌株的代谢产物进行生物活性评价，探讨其抗菌机制。

三、研究意义1.本研究有助于扩大生物多样性资源，挖掘滇牡丹内生真菌的生物活性代谢产物，为新药物研发提供新的资源。

2.通过对滇牡丹内生真菌的分离鉴定，可以更好地了解其在滇牡丹生长过程中所扮演的生态作用，为滇牡丹的保护提供理论基础。

3.通过对两株菌株的代谢产物进行生物活性评价，可以研究和探究其抗菌机制，为研发新型抗菌药物提供新的思路和途径。

四、研究方法1.内生真菌的分离和筛选。

用无菌锥形瓶培养滇牡丹的根、茎、叶及花等不同部位的样品，用平板法分离内生真菌，筛选出优良菌株。

2.菌株的鉴定和系统发育分析。

利用形态学和分子生物学技术对所分离的菌株进行鉴定，并构建菌株的系统发育树。

3.代谢产物的分离、纯化和结构解析。

利用色谱技术分离和纯化两株菌株的代谢产物，并对其结构进行解析。

4.生物活性评价。

对两株菌株的代谢产物进行抗菌活性测试和细胞毒性评价，探讨其生物活性和抗菌机制。

滇牡丹的多样性和现状评估作者：高雪松鲁红林唐金武来源：《农村科学实验》2016年第04期摘要：滇牡丹是中国西南地区的特有植物，在中国植物红皮书当中把滇牡丹定为渐危物种并将其列入我国保护植物名录。

本文将在以下从滇牡丹的生长地理环境、遗传的多样性以及其各方面特性来对其当前的生存现状展开评估分析。

牡丹从药用到观赏栽培，再到今天色彩斑斓的园艺品种，经历了漫长的历史过程。

当你游走于牡丹花丛，品味着牡丹的别样清香和眼前的姹紫嫣红，是否也会想起她们那些居于山野之中的远亲近邻？关键词：滇牡丹；多样性；现状；评估1.对滇牡丹生长的简介滇牡丹大多都生长在我国的西南地区，也是西南地区一种独特的植物，分布极其广泛，而且在对于生长环境方面也有特殊的要求，对于其各方面的研究无论是从我国植物欣赏价值来讲还是从学术研究角度来讲，都有这极大的现实意义。

在芍药中属当中也只有大花黄牡丹以及滇牡丹具有比较独特的黄花基因序列，所以，杂交方面有着很大的价值。

2.滇牡丹多样性的具体表现2.1滇牡丹的地域分布滇牡丹通常分布于我国的西南地域，也是该地区内比较独特的植物，在云南地区、四川地区以及西藏地区均有一些存在，其生长的区域平均海拔一般都在1900-3600m范围内。

而在分布形式方面也较为独特——以星散状分布。

2.2滇牡丹的生态环境滇牡丹通常分布的区域均在东南部的边缘区域，尤其是横断山地区的地理环境是滇牡丹生长的最佳环境区域，因此，在此区域中其呈现比较明显的多样性。

另外，从海拔方面来分布，滇牡丹在分布方面区域的东部边缘海拔至少是1900m，经过丽江、大理、中甸在到西藏察隅的最高海拔3600m，海拔相差1700m，也是比较大。

随着海拔的变化，气候、土壤与植被等呈现着十分明显的垂直分布。

2.3滇牡丹形态的多样性滇牡丹在叶子的外形、花苞的片数以及花的颜色呈现出多样化。

这些多样化不仅仅存在于居群之间而且还存在于居群之内。

2.3.1叶形的多样性滇牡丹在叶形方面都是二回三出的羽状叶，通常每小叶均为3-5裂。

大田培育滇牡丹实生苗分级标准及不同种源苗期生长评价研究普甜１，宋静２，张志华２，陈婉东１，王娟３∗㊀（１．西南林业大学林学院，云南昆明６５０２２４；２．西南林业大学园林园艺学院，云南昆明６５０２２４；３．西南林业大学绿色发展研究院，云南昆明６５０２２４）摘要㊀［目的］开展３年生滇牡丹（Ｐａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉ）实生苗的分级研究，为人工规模化壮苗培育和确定合理的滇牡丹种苗质量分级标准提供科学依据㊂［方法］对滇牡丹５个地理种源３年生的实生苗进行随机取样，测量苗木的地径㊁株高㊁主根长和一级侧根数等７个形态指标，采用平均值ʃ１／２标准差法㊁逐步聚类法和Ｋ－均值聚类法对其进行分级研究㊂［结果］主成分分析显示，滇牡丹实生苗的地径（Ｄ）和一级侧根数（Ｂ）２项指标的主成分贡献率分别为６３．４８％和１１．６３％，累计贡献率达７５．１１％，因此Ｄ和Ｂ可作为３年生滇牡丹种苗等级划分的主要指标，不同等级的苗木存在显著差异㊂３种不同聚类方法中，各级苗木分级范围无显著区别，３年生滇牡丹实生苗分级指标为：Ⅰ级苗：Ｄȡ７．２４ｍｍ，Ｂȡ６；Ⅱ级苗：４．１６ｍｍɤＤ＜７．２４ｍｍ，３ɤＢ＜６；Ⅲ级苗：Ｄ＜４．１６ｍｍ，Ｂ＜３㊂［结论］不同地理种源间的实生苗生长性状具有显著区别，ＤＮＬ种源株高生长发育最快；ＤＹＲ种源地径生长最快；ＤＹＲ种源苗期质量等级最好，Ⅰ级和Ⅱ级苗出圃率最好，可达７０％；ＤＤＣ种源苗期质量最差，Ⅰ级和Ⅱ级苗出圃率仅为３５．９５％㊂关键词㊀滇牡丹；地理种源；平均值ʃ１／２标准差法；逐步聚类法；Ｋ－均值聚类法；生长差异中图分类号㊀Ｓ６８５．１１㊀㊀文献标识码㊀Ａ㊀㊀文章编号㊀０５１７－６６１１（２０２２）２４－００９８－０５ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０５１７－６６１１．２０２２．２４．０２４㊀㊀㊀㊀㊀开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＧｒａｄｉｎｇＳｔａｎｄａｒｄｓｏｆＳｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉａｎｄＳｅｅｄｌｉｎｇＧｒｏｗｔｈＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＤｉｆｆｅｒｅｎｔＰｒｏｖｅｎａｎｃｅｓＰＵＴｉａｎ１，ＳＯＮＧＪｉｎｇ２，ＺＨＡＮＧＺｈｉ⁃ｈｕａ２ｅｔａｌ㊀（１．ＦｏｒｅｓｔｒｙＣｏｌｌｅｇｅ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ６５０２２４；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬａｎｄｓｃａｐｅａｎｄＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ６５０２２４）Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｃａｒｒｙｏｕｔ３ｙｅａｒｓｏｆｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉｓｅｅｄｌｉｎｇｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅｔｅｃｈｎｉｃａｌｓｕｐｐｏｒｔｆｏｒｔｈｅｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｓｔｒｏｎｇｓｅｅｄｌｉｎｇｓａｎｄａｒｔｉｆｉｃｉａｌｓｃａｌｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＰｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｓｅｅｄｌｉｎｇｇｒａｄｉｎｇｉｎｄｅｘｏｆＰａｅ⁃ｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉ．［Ｍｅｔｈｏｄ］Ｔｈｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆ５ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓｏｆｐｅｏｎｙｉｎＹｕｎｎａｎｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｓａｍｐｌｅｄｆｏｒ３ｙｅａｒｓ，ａｎｄ７ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉ⁃ｃａｌｉｎｄｉｃａｔｏｒｓｓｕｃｈａｓｇｒｏｕｎｄｄｉａｍｅｔｅｒ，ｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔ，ｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈａｎｄｐｒｉｍａｒｙｌａｔｅｒａｌｒｏｏｔｓｏｆｔｈｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ，ａｎｄｔｈｅｒａｔｉｏａｎｄｓｔａｎｄａｒｄｏｆｅａｃｈｇｒａｄｅｏｆｓｅｅｄｌｉｎｇｓｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄａｎｄａｎａｌｙｚｅｄｂｙｍｅａｎｓｏｆʃ１／２ｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ，ｓｔｅｐｗｉｓｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇｍｅｔｈｏｄａｎｄＫ⁃ｍｅａｎｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｒｅａｓｏｎａｂｌｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｐｅｏｎｙｓｅｅｄｌｉｎｇｓｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｔａｎｄａｒｄｓ．［Ｒｅｓｕｌｔ］Ｔｈｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｔｈｅｇｒｏｕｎｄｄｉａｍｅｔｅｒ（Ｄ）ａｎｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｆｉｒｓｔ⁃ｌｅｖｅｌｌａｔｅｒａｌｒｏｏｔｓ（Ｂ）２ｔｒａｉｔｓｗｅｒｅ６３．４８％ａｎｄ１１．６３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄｔｈｅｃｕｍｕｌａｔｉｖｅｖａｒｉａｎｃｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓ７５．１１％．ＤａｎｄＢｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｍａｉｎｉｎｄｅｘｅｓｆｏｒｇｒａｄｉｎｇ３⁃ｙｅａｒ⁃ｏｌｄＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉ．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｓｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆｖａｒｉｏｕｓｇｒａｄｅｓ．ＴｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｓｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆｅａｃｈｇｒａｄｅａｎｄｔｈｅｒａｎｇｅｏｆｇｒａｄｅｓｏｆＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｒｅｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｔｈｏｄｓ．Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｓｅｅｄ⁃ｌｉｎｇｒａｔｉｏｏｆｅａｃｈｇｒａｄｅ，ｔｈｅｒａｎｇｅｏｆｇｒａｄｅｖａｌｕｅｓａｎｄｔｈｅａｃｔｕａｌｓｅｅｄｌｉｎｇｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ，ｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｇｒａｄｉｎｇｏｆ３⁃ｙｅａｒ⁃ｏｌｄＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉｓｅｅｄｌｉｎｇｓｓｈｏｕｌｄａｄｏｐｔｔｈｅａｖｅｒａｇｅʃ１／２ｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｇｒａｄｉｎｇｓｔａｎｄａｒｄｗａｓ：ＧｒａｄｅＩｓｅｅｄｌｉｎｇｓ，Ｄȡ７．２４ｍｍ，Ｂȡ６；ＧｒａｄｅⅡｓｅｅｄｌｉｎｇ：４．１６ｍｍɤＤ＜７．２４ｍｍ，３ɤＢ＜６；ＧｒａｄｅⅢｓｅｅｄｌｉｎｇ：Ｄ＜４．１６ｍｍ，Ｂ＜３．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｏｂｖｉｏｕｓｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅｔｒａｉｔｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓ．ＴｈｅＤＮＬｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｇｒｅｗｔｈｅｆａｓｔｅｓｔｉｎｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔ，ａｎｄｔｈｅＤＹＲｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｇｒｅｗｔｈｅｆａｓｔｅｓｔｉｎｇｒｏｕｎｄｄｉａｍｅｔｅｒ；ＤＹＲｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｈａｄｔｈｅｂｅｓｔｓｅｅｄｌｉｎｇｑｕａｌｉｔｙｇｒａｄｅ，ＩａｎｄＩＩｓｅｅｄｌｉｎｇｓｈａｄｔｈｅｂｅｓｔｒａｔｅｏｆｎｕｒｓｅｒｙｅｍｅｒｇｅｎｃｅ，ｕｐｔｏ７０％；ＤＤＣｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｈａｄｔｈｅｗｏｒｓｔｓｅｅｄｌｉｎｇｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｈｅｌｅａｖｉｎｇｎｕｒｓｅｒｙｒａｔｅＩａｎｄＩＩｓｅｅｄｌｉｎｇｓｗａｓｏｎｌｙ３５．９５％．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀Ｐａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉ；Ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃｐｒｏｖｅｎａｎｃｅ；Ｍｅａｎʃ１／２ｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ；Ｓｔｅｐｗｉｓｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇｍｅｔｈｏｄ；Ｋ⁃ｍｅａｎｓｃｌｕｓｔｅ⁃ｒｉｎｇｍｅｔｈｏｄ；Ｇｒｏｗｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ基金项目㊀云南省重大基础专项 生物资源数字化开发应用 （２０２００２⁃ＡＡ１０００７）；云南省万人计划 云岭产业技术领军人才 专项（云发改 ２０１８ ２１２号）；云南省科技计划－国际合作项目（２０１５ＩＡ００５）㊂作者简介㊀普甜（１９９５ ），女，云南建水人，硕士，从事植物多样性保护与利用研究㊂∗通信作者，教授，博士，从事植物学㊁生物多样性保护和生态学等研究㊂收稿日期㊀２０２２－０７－１２㊀㊀芍药科（Ｐａｅｏｎｉａｃｅａ）芍药属（Ｐａｅｏｎｉａ）牡丹组（Ｓｅｃｔ．Ｍｏｕ⁃ｔａｎ）植物均产自中国，是中国特有植物［１］，其中肉质花盘亚组的滇牡丹（Ｐａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉ）是该组植物中分布最南的物种，分布于西藏东南部㊁云南中部至北部和四川西部省份，海拔１９００ ４０００ｍ的稀疏草坡㊁灌木丛㊁疏林地或森林环境中［２］，显示其对环境的适应性强，生态幅较广［３］，具备异地引种的遗传物质基础㊂牡丹不仅因其美丽而被誉为 花中之王 ，还具有作为大宗药材利用的药用价值和高价值的油料植物资源［４－６］，同时因牡丹耐寒性强可作为温凉气候条件下退耕还林工程林可选择的重要经济物种和绿化造林先锋物种㊂然而，有关牡丹组植物组织培养的研究至今鲜见规模化的苗木生产，通过种子培育实生苗仍是牡丹规模化种植种苗的来源之一㊂目前，实生苗培育也是滇牡丹苗木来源之一，但滇牡丹规模化育苗及其质量分级研究至今鲜见报道㊂苗木是植物丰产栽培的基础，其品质优劣直接关系到栽培的成败［７－８］；同时由于实生苗生长参差不齐，使栽培及其管理成本投入和不确定性增加，影响栽培效益㊂因此，深入研究苗木质量评价指标是苗木分级的重要基础和依据，对滇牡丹种苗繁育和丰产栽培具有重要的指导意义和应用价值㊂苗木质量是影响栽培效果的主要因素之一，移植优质的实生苗，更有利于提高栽培成活率及其植株的正常生长［９］㊂通常情况下，用于苗木质量分级的技术指标越多，其分级结果越准确㊂但在实际生产实践中，由于苗木质量指标要求不同，部分指标的测定方法烦琐，测定工作量巨大，苗木各性状指标均是反映苗木质量的重要指标，它们之间往往存在很大的相关性，其信息往往是重叠的［１０］㊂因此，通过主成分分析㊀㊀㊀安徽农业科学，Ｊ．ＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃ．Ｓｃｉ．２０２２，５０（２４）：９８－１０２研究选择贡献率最大的指标，作为苗木聚类分级和研究的依据，其结果既能准确划分苗木的级别，又能简化实践工作中苗木的筛选㊂查询全国标本馆滇牡丹标本采集记录以及文献报道和近年的野外调查显示，滇牡丹分布于２４ʎ２３ᶄ ３２ʎ５６ᶄＮ㊁９４ʎ１１ᶄ １０４ʎ４ᶄＥ，但采集记录频次最高，近７０％的采集记录集中在云南中部昆明地区至滇西北的丽江和迪庆地区㊂因此，笔者选择分布于滇中地区的东川汤丹㊁滇西北地区的丽江２个种源和迪庆地区的２个种源采集种子，进行５个种源地种子的实生苗大田育苗研究，旨在为规范化滇牡丹种苗栽培的种源选择及其管理提供参考依据㊂１㊀材料与方法１．１㊀试验地概况㊀试验地位于云南省曲靖市马龙区小龙井村（１０３ʎ３１ᶄ０８ᵡＥ，２５ʎ２２ᶄ２１ᵡＮ），马龙区属低纬高原季风型气候，年平均温度１３．８ħ，最热月５月平均气温为２３．５ħ，最冷月１月平均气温为７．２ħ㊂全年无霜期近年均在２４１ｄ，全年平均日照时数１９８５ｈ以上，全年平均降水量为９７９．５ｍｍ㊂试验区域土壤类型为黄棕壤，土壤ｐＨ平均为６．０６，有机质含量为４１．０８ｇ／ｋｇ㊂１．２㊀研究方法１．２．１㊀种子采集与催芽㊂２０１６年９月在不同纬度和海拔区域的滇牡丹分布区（表１），收集不同种源的成熟种子，以种源为单位，对种子进行水选净种并标记㊂用０．３％ＫＭｎＯ４溶液浸种消毒３０ｍｉｎ和３００ｍｇ／Ｌ赤霉素溶液浸泡４８ｈ，播种至已消毒的沙床上沙藏催芽６０ｄ㊂１．２．２㊀种子播种㊂催芽６０ｄ，待７０％种子露白后播种至经深挖翻晒起垄的苗床上，苗床宽１００ｃｍ，长度依地形而定，床间步道宽３０ｃｍ㊂苗床上播种沟间距３０ｃｍ，沟长１００ｃｍˑ宽２０ｃｍˑ深１０ｃｍ，播种沟喷适量多菌灵溶液消毒并加入少许辛硫磷防虫，沟底在播种前施适量腐熟有机肥，将催芽后种子按间隔约５ｃｍ均匀播入沟内，覆盖厚４ ６ｃｍ的细土，轻轻镇压后用松针覆盖并浇透水，播种后保持育苗床湿润，并进行及时除草等常规育苗管理㊂表１㊀滇牡丹地理种源地概况Ｔａｂｌｅ１㊀ＢａｓｉｃｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓ编号Ｎｏ．种源及试验地Ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓｏｕｒｃｅａｎｄｔｅｓｔｓｉｔｅ种源编号Ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｎｕｍｂｅｒ纬度Ｌａｔｉｔｕｄｅ（Ｎ）经度Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ（Ｅ）海拔Ａｌｔｉｔｕｄｅｍ年均温Ａｖｅｒａｇｅａｎｎｕａｌｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅʊħ年降雨量Ａｎｎｕａｌｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｍｍ１德钦叶日ＤＹＲ２８ʎ２４ᶄ９９ʎ０８ᶄ２８００６．３６４０．０２香格里拉普达措ＤＰＤ２７ʎ５４ᶄ９９ʎ５４ᶄ３７７０６．３６５０．８３丽江玉龙雪山ＤＹＬ２７ʎ１０ᶄ１００ʎ０９ᶄ３０００１２．９９３５．０４丽江宁蒗ＤＮＬ２７ʎ１７ᶄ１００ʎ５１ᶄ２２８０１２．９９２０．０５东川汤丹ＤＤＣ２６ʎ１０ᶄ１０３ʎ０３ᶄ３０８９１７．８７４１．３６马龙种源试验地２５ʎ２１ᶄ１０３ʎ３１ᶄ２１００１３．８９７９．５㊀注：各地数据来源于中国气象网及中国天气网㊀Ｎｏｔｅ：ＴｈｅｄａｔａｏｆｖａｒｉｏｕｓｐｌａｃｅｓａｒｅｆｒｏｍｔｈｅｈｉｓｔｏｒｉｃａｌｄａｔａｏｆＣｈｉｎａＭｅｔｅｏｒｏｌｏｇｉｃａｌＮｅｔｗｏｒｋａｎｄＣｈｉｎａＷｅａｔｈｅｒＮｅｔｗｏｒｋ１．２．３㊀不同种源苗木取样调查㊂２０１９年１０月，将５个种源苗床的播种沟进行顺序编号，利用在线随机数分别在５个种源中取播种沟的全部苗木（每个播种沟２０ ３０株苗木）进行处理，每个种源３次重复取样，取样后的苗木按种源不同标记分装带回实验室，测定株高㊁地径㊁根粗㊁侧根数等７个指标㊂１．２．４㊀评价指标确定与分级㊂对３年生滇牡丹实生苗的地径㊁株高㊁分枝数㊁主根长㊁主根粗㊁一级侧根数（侧根长大于５ｃｍ）㊁全株鲜重７个指标进行统计描述㊁主成分分析㊂最后根据逐步聚类法㊁平均值ʃ１／２标准差法和Ｋ－均值聚类分析方法比较分析结果和生产实际，按照最低订级原则制订不同种源滇牡丹种苗的分级标椎，同一等级种苗的任意指标若达不到标椎则下降一级㊂１．２．５㊀苗木分级方法㊂（１）平均值ʃ１／２标准差法㊂在计算幼苗种群的均值和标准差时，分别以平均值＋１／２标准差为Ⅰ级苗与Ⅱ级苗的界线，平均值－１／２标准差为Ⅱ级苗与Ⅲ级苗的界线［１１］㊂（２）逐步聚类法㊂为了提高观测结果的可比性和统计的精确度，使用４５３株苗的最大值和最小值进行标准化计算㊂使用Ｅｘｃｅｌ２０１０和ＳＰＳＳ２５．０统计分析软件对地径及一级侧根数的标准值进行初始３级聚类㊂首先，统计各级样苗地径和一级侧根数标准化值的平均数，以平均数作为各级苗的凝聚中心，再计算各株苗与各凝聚中心的距离，最后再按照最短距离原则确定种苗所属等级［１２］㊂（３）Ｋ－均值聚类法㊂采用相关性分析和Ｋ均值聚类分析（Ｋ⁃ｍｅａｎｓｃｌｕｓｔｅｒ）对种苗的地径㊁株高㊁主根长㊁一级侧根数等指标进行统计分析㊂最后，根据聚类分析结果，并结合生产实践，按照最低分级原则，将不符合标准的同一级的分级指数降至下一级［１３］㊂１．３㊀数据处理㊀对所有苗木的７个生长特征数据进行统计分析，并筛选分级指标，将原始数据进行标准化（Ｚ－ｓｃｏｒｅ法）处理后获得最新的数据，然后通过ＫＭＯ检验和Ｂａｒｔｌｅｔｔ球体检验来检验影响因子分析结果的适用性㊂应用平均值ʃ１／２标准差法和逐步聚类法进行苗木分级，并制订划分准则；主成分分析㊁逐步聚类分析等方法均采用Ｅｘｃｅｌ２０１０和ＳＰＳＳ２５．０软件完成，采用Ｐｅａｒｓｏｎ系数进行相关性分析㊂２㊀结果与分析２．１㊀苗木分级指标的确定㊀数据分析显示，滇牡丹种苗７个９９５０卷２４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀普甜等㊀大田培育滇牡丹实生苗分级标准及不同种源苗期生长评价研究生长发育指标基本符合正态分布，ＫＭＯ值等于０．８５６，说明指标间存在相关性㊂Ｂａｒｔｌｅｔｔ球体检验结果为２０４５．３３９，显著性检验为０．０００，表明各指标相关，该数据适用主成分分析㊂为明确影响反映滇牡丹幼苗质量的主要因素，主成分分析方法对株高㊁地径㊁主根长等７个特征的分析结果见表２㊂由表２可知，地径累计贡献率为６３．４８％，一级侧根数的贡献率为１１．６３％，累计贡献率为７５．１１％，能够很好地表达３年生滇牡丹实生苗的质量㊂因此，地径和一级侧根数将作为３年生滇牡丹苗木分级的指标㊂表２㊀滇牡丹苗木不同性状的主成分特征值㊁贡献率及累计贡献率Ｔａｂｌｅ２㊀Ｐｒｉｎｃｉｐａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｖａｌｕｅ，ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｒａｔｅａｎｄｃｕｍｕｌａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒａｉｔｓｏｆＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉｓｅｅｄｌｉｎｇｓ指标Ｉｎｄｅｘ地径Ｇｒｏｕｎｄｄｉａｍｅｔｅｒｍｍ一级侧根数Ｎｕｍｂｅｒｏｆｐｒｉｍａｒｙｓｉｄｅｒｏｏｔｓʊ个主根长Ｔａｐｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈʊｃｍ主根粗Ｔａｐｒｏｏｔｔｈｉｃｋｍｍ分枝数Ｎｕｍｂｅｒｏｆｂｒａｎｃｈｅｓʊｇ株高Ｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔｃｍ全株鲜重Ｗｈｏｌｅｐｌａｎｔｆｒｅｓｈｗｅｉｇｈｔʊｇ特征值Ｅｉｇｅｎｖａｌｕｅｓ４．４４０．８１０．５９０．４５０．３２０．２３０．１５贡献率Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｒａｔｅʊ％６３．４８１１．６３８．４８６．４１４．６３３．２８２．０９累计贡献率Ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｒａｔｅʊ％６３．４８７５．１１８３．５９９０．００９４．６３９７．９１１００２．２㊀苗木分级２．２．１㊀平均值ʃ１／２标准差法的苗木分级㊂运用平均值ʃ１／２标准差法进行苗木分级，合格苗（Ⅰ和Ⅱ级苗）的比例达到６２．０３％（表３），各等级滇牡丹的地径和一级侧根数均差异显著㊂表３㊀３年生滇牡丹分级标准与不同苗木等级级别间的生长表现Ｔａｂｌｅ３㊀Ｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎ３ａｇｒａｄｉｎｇｓｔａｎｄａｒｄｓｏｆＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｅｅｄｌｉｎｇｇｒａｄｅｓ分级方法Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ种苗等级Ｓｅｅｄｌｉｎｇｇｒａｄｅ分级标准Ｇｒａｄｉｎｇｓｔａｎｄａｒｄｓ种苗数Ｎｕｍｂｅｒｏｆｓｅｅｄｌｉｎｇｓ占比Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ％地径（Ｄ）Ｇｒｏｕｎｄｄｉａｍｅｔｅｒｍｍ一级侧根数（Ｂ）Ｎｕｍｂｅｒｏｆｐｒｉｍａｒｙｓｉｄｅｒｏｏｔｓ／ｐｉｅｃｅʊ个逐步聚类法ＳｔｅｐｗｉｓｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇⅠＤȡ８．７２ｍｍ，Ｂȡ８５８１２．８０１１．２０ʃ６．５５ａ９．９４ʃ６．５０ａⅡ４．６６ｍｍɤＤ＜８．７２ｍｍ，４ɤＢ＜８１９９４３．９３６．０２ʃ５．０５ｂ４．９１ʃ４．００ｂⅢＤ＜４．６６ｍｍ，Ｂ＜４１９６４３．２７３．３４ʃ２．８５ｃ１．４５ʃ１．４５ｃ平均值ʃ１／２标准差法ⅠＤȡ７．２４ｍｍ，Ｂȡ６７６１６．７８１０．７１ʃ６．５５ａ９．３６ʃ７．００ａＭｅａｎʃ１／２ｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄⅡ４．１６ｍｍɤＤ＜７．２４ｍｍ，３ɤＢ＜６２０５４５．２５５．８３ʃ４．６５ｂ４．７４ʃ４．００ｂⅢＤ＜４．１６ｍｍ，Ｂ＜３１７２３７．９７３．２７ʃ２．８５ｃ１．３８ʃ１．３８ｃＫ－均值聚类法ⅠＤȡ９．１６ｍｍ，Ｂȡ７７３１６．１１１１．４３ʃ６．５５ａ１０．３２ʃ６．５０ａＫ⁃ｍｅａｎｓｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇｍｅｔｈｏｄⅡ６．６３ｍｍɤＤ＜９．１６ｍｍ，５ɤＢ＜７１４３３１．５７７．４２ʃ４．５０ｂ６．２７ʃ４．００ｂⅢＤ＜６．６３ｍｍ，Ｂ＜５２３７５２．３２４．１８ʃ４．１０ｃ２．６０ʃ２．６０ｃ㊀注：同列不同小写字母表示不同分级方法各种苗等级生长性状间差异显著（Ｐ＜０．０５）㊀Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｇｒｏｗｔｈｔｒａｉｔｓａｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｅｅｄｌｉｎｇｇｒａｄｅｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒａｄｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓ２．２．２㊀逐步聚类法的苗木分级㊂经多次聚类和修正后，苗木的分类结构基本维持不变，可以得到各级苗的聚集中心依次为（０．５８３，０．６１４）㊁（０．３０１，０．２９９）㊁（０．１４４，０．０９４），以样苗地径和一级侧根数标准方差之和的平方根为半径，在Ｅｘｃｅｌ软件中根据最终凝聚中心，按照半径的计算公式，计算出Ⅰ级苗和Ⅱ级苗的临界值，即可得到滇牡丹３年生苗木生长分级标准㊂合格苗（Ⅰ和Ⅱ级苗）比例达到５６．７３％，且各等级苗木的生长性状间差异显著（表３）㊂２．２．３㊀Ｋ－均值聚类法的苗木分级㊂通过主成分分析，苗木地径㊁一级侧根数㊁主根长㊁主根粗㊁分枝数㊁株高以及全株鲜重的主要质量指标性状中，前２个特征的累计贡献率达到７５．１１％，而主成分相应的累计贡献越高，苗木质量指标信息量越大，因此，选择地径㊁一级侧根数作为滇牡丹Ｋ－均值聚类种苗分级的主要指标，并利用ＳＰＳＳ２５．０软件对滇牡丹苗木的各项参数聚为３类㊂结果表明，Ⅰ级种苗质量最好，共涉及４５３个样品，其中Ⅰ㊁Ⅱ等级的种苗数占总数的４７．６８％㊂分级标准的建立必须遵循最低级原则，即任何一项不符合规定标准，均不能定位为相应等级的种苗，即降为下一级㊂２．２．４㊀苗木分级标准确定㊂采用平均值ʃ１／２标准差法与逐步聚类法对种苗分别进行等级划分，得到的等级标准相近，结合实际生产情况中平均值ʃ１／２标准差法更易于运用，故确定滇牡丹３年生苗木的等级划分标准为平均值ʃ１／２标准差法，其分级标准为：Ⅰ级苗，Ｄȡ７．２４ｍｍ，Ｂȡ６；Ⅱ级苗：４．１６ｍｍɤＤ＜７．２４ｍｍ，３ɤＢ＜６；Ⅲ级苗：Ｄ＜４．１６ｍｍ，Ｂ＜３㊂Ⅰ级苗的平均地径１０．７１ｍｍ，一级侧根数９．３６个；Ⅱ级苗的平均地径５．８３ｍｍ，一级侧根数４．７４个；Ⅲ级苗的平均地径３．２７ｍｍ，一级侧根数１．３８个㊂２．３㊀滇牡丹不同种源评价２．３．１㊀不同种源苗株高生长的差异㊂由表４可知，滇牡丹不同种源３年生株高的变异系数为７２．８６％，种源遗传力为０．８４，说明遗传对株高生长有较大的控制作用㊂总平均株高为１０．６６ｃｍ，最高的ＤＮＬ种源，株高达到１３．２６ｃｍ，为总平均值的１２４．３９％，最矮种源为ＤＤＣ种源，仅８．２４ｃｍ，仅达到均值的７７．３０％㊂方差分析Ｆ值显示出种源间株高差异显著㊂００１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀２０２２年表４㊀不同种源３年生滇牡丹苗木生长差异Ｔａｂｌｅ４㊀Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｇｒｏｗｔｈｏｆ３ａｓｅｅｄｌｉｎｇｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｅｏｇｒａｐｈｉｃｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓｏｆＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉ种源Ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅ株高Ｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔ均值Ｍｅａｎｃｍ占均值比Ｒａｔｉｏｔｏｔｈｅｍｅａｎʊ％地径Ｇｒｏｕｎｄｐａｔｈ均值Ｍｅａｎｍｍ占均值比Ｒａｔｉｏｔｏｔｈｅｍｅａｎʊ％分枝数Ｎｕｍｂｅｒｏｆｂｒａｎｃｈｅｓ均值Ｍｅａｎ个占均值比Ｒａｔｉｏｔｏｔｈｅｍｅａｎʊ％全株鲜重Ｗｈｏｌｅｐｌａｎｔｆｒｅｓｈｗｅｉｇｈｔ均值Ｍｅａｎｇ占均值比Ｒａｔｉｏｔｏｔｈｅｍｅａｎʊ％主根长Ｔａｐｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈ均值Ｍｅａｎｃｍ占均值比Ｒａｔｉｏｔｏｔｈｅｍｅａｎʊ％一级侧根数Ｎｕｍｂｅｒｏｆｆｉｒｓｔ⁃ｏｒｄｅｒｌａｔｅｒａｌｒｏｏｔｓ均值Ｍｅａｎ个占均值比Ｒａｔｉｏｔｏｔｈｅｍｅａｎʊ％主根粗Ｔａｐｒｏｏｔｔｈｉｃｋ均值Ｍｅａｎｍｍ占均值比Ｒａｔｉｏｔｏｔｈｅｍｅａｎʊ％ＤＤＣ８．２４７７．３０５．５０１０１．４８２．２９６７．９５２６．３６７１．２０１７．７９８３．４０３．１７８３．２０１４．５５１１３．１４ＤＮＬ１３．２６１２４．３９５．３５９８．７１４．５５１３５．０１３７．４６１０１．１９２６．０９１２２．３２３．５５９３．１８１３．７１１０６．６１ＤＰＤ１１．２７１０５．７２４．９５９１．３３２．８７８５．１６３４．１７９２．３０１９．７７９２．６８３．４６９０．８１１１．７７９１．５２ＤＹＬ１１．２９１０５．９１３．９４７２．６９２．５１７４．４８３６．８６９９．５７１８．２７８５．６５３．５２９２．３９９．３６７２．７８ＤＹＲ９．２６８６．８７７．３７１３５．９８４．６４１３７．６８５０．２７１３５．７９２４．７３１１５．９４５．３３１３９．９０１４．９１１１５．９４总均值Ｔｏｔａｌｍｅａｎ１０．６６５．４２３．３７３７．０２２１．３３３．８１１２．８６变异系数Ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆｖａｒｉａｔｉｏｎʊ％７２．８６５３．３６６２．３６１３８．５７４７．８８８６．９９３５．４８种源遗传力Ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｈｅｒｉｔａｂｉｌｉｔｙ０．８４０．９３０．７５０．９３０．８１０．８７０．８７Ｆ值Ｆｖａｌｕｅ６．０９１４．６０４．００１６．６３５．２４８．５２７．７０２．３．２㊀不同种源苗地径生长的差异㊂由表４可知，滇牡丹不同种源３年生苗地径的变异系数为５３．３６％，种源遗传力为０．９３，说明地径的生长差异极大部分是由遗传因素决定的㊂地径生长的总平均值为５．４２ｍｍ，其中最优的种源是ＤＹＲ，为７．３７ｍｍ，达到总平均值的１３５．９８％；其次依次为ＤＤＣ㊁ＤＮＬ种源，均值分别为５．５０和５．３５ｍｍ，生长最差的种源为ＤＹＬ，仅３．９４ｍｍ，仅为均值的７２．６９％㊂方差分析Ｆ值也反映种源间地径差异显著㊂２．３．３㊀不同种源苗分枝数的差异㊂由表４可知，滇牡丹不同种源３年生苗分枝数变异系数为６２．３６％，种源遗传力为０．７５，相比较其他性状，受遗传因素的影响程度较低㊂总平均分枝数为３．３７个，分枝数最多的也是ＤＹＲ种源，达到４．６４个，占平均值的１３７．６８％，其次为ＤＮＬ种源为４．５５个，分枝数最少的种源为ＤＤＣ，为２．２９个，占均值的６７．９５％，仅为ＤＹＲ种源的５０％左右㊂方差分析Ｆ值也反映种源间分枝数差异显著㊂２．３．４㊀不同种源苗木鲜重的差异㊂由表４可知，滇牡丹不同种源３年生苗全株鲜重变异系数为１３８．５７％，种源遗传力为０．９３，说明苗木鲜重及其干物质量的积累差异极大部分也是由遗传因素决定的㊂总平均全株鲜重为３７．０２ｇ，最重的种源是ＤＹＲ，达到５０．２７ｇ，占总平均值的１３５．７９％；其次依次为ＤＮＬ和ＤＹＬ种源，分别为３７．４６和３６．８６ｇ；最轻的种源为ＤＤＣ，为２６．３６ｇ，仅为均值的７１．２０％㊂方差分析Ｆ值反映种源间全株鲜重差异显著㊂２．３．５㊀不同种源苗木主根长㊁主根粗的差异㊂由表４可知，滇牡丹不同种源３年生苗主根长和主根粗的变异系数分别为４７．８８％和３５．４８％，种源遗传力分别为０．８１和０．８７，说明遗传对滇牡丹的根系生长有较大的控制作用㊂５个种源中以ＤＮＬ主根长最长，达２６．０９ｃｍ，为均值的１２２．３２％；其次为ＤＹＲ种源，为２４．７３ｃｍ；主根最短的为ＤＤＣ种源，为１７．７９ｃｍ，仅均值的８３．４０％㊂５个种源的总平均主根粗为１２．８６ｍｍ，最粗的为ＤＹＲ种源，达到１４．９１ｍｍ，其次依次为ＤＤＣ㊁ＤＮＬ㊁ＤＰＤ种源，最小种源为ＤＹＬ，仅９．３６ｍｍ，为均值的７２．７８％㊂经方差分析Ｆ值得出种源间主根长㊁主根粗差异显著㊂２．３．６㊀不同种源苗木一级侧根数的差异㊂由表４可知，滇牡丹不同种源３年生苗一级侧根数变异系数为８６．９９％，种源遗传力为０．８７，说明苗木一级侧根数也与遗传因素有关㊂总平均一级侧根数为３．８１个，一级侧根数最多种源是ＤＹＲ，达到５．３３个，占总平均值的１３９．９０％；其次依次为ＤＮＬ㊁ＤＹＬ种源；最少的种源为ＤＤＣ，仅３．１７个，为均值的８３．２０％㊂方差分析Ｆ值反映了各种源间一级侧根数差异显著㊂２．３．７㊀不同种源苗木质量分级结果所占比例㊂依据平均值ʃ１／２标准差法，３年生滇牡丹苗木分级标准为：Ⅰ级苗，Ｄȡ７．２４ｍｍ，Ｂȡ６；Ⅱ级苗，４．１６ｍｍɤＤ＜７．２４ｍｍ，３ɤＢ＜６；Ⅲ级苗，Ｄ＜４．１６ｍｍ，Ｂ＜３㊂依此对不同种源的苗木分级得出（表５），ＤＤＣ种源Ⅰ级苗占总种苗６．６７％，ＤＮＬ种源Ⅰ级苗占总种苗１１．１１％，ＤＰＤ种源Ⅰ级苗占总种苗８．８９％，ＤＹＬ种源Ⅰ级苗占总种苗８．９７％，ＤＹＲ种源Ⅰ级苗占总种苗２６．６７％；ＤＤＣ种源Ⅱ级苗占总种苗２９．２８％，ＤＮＬ种源Ⅱ级苗占总种苗３２．２２％，ＤＰＤ种源Ⅱ级苗占总种苗３５．５６％，ＤＹＬ种源Ⅱ级苗占总种苗３３．３４％，ＤＹＲ种源Ⅱ级苗占总种苗４３．３３％，其中Ⅰ㊁Ⅱ级为合格苗，可用于生产，由此可以看出Ⅰ级苗占比ＤＹＲ＞ＤＮＬ＞ＤＹＬ＞ＤＰＤ＞ＤＤＣ，ＤＹＲ和ＤＮＬ种源３年生Ⅰ级苗占比较大，在马龙地区生长趋势最好，这与苗木生长性状差异比较结果一致㊂３㊀讨论与结论苗木质量的优劣一般以综合控制要求和形态指标判定，不符合综合控制要求的为不合格苗木，符合一定要求者则以形态指数来划分，无明显的病虫害和检疫对象，种苗外形整１０１５０卷２４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀普甜等㊀大田培育滇牡丹实生苗分级标准及不同种源苗期生长评价研究齐均匀，苗干新鲜充实，顶芽饱满强壮，植株根系完整且发育完善，苗体基本无损伤［１４］㊂在实际生产中，难以对每株苗木的诸多指标进行全面的测定（尤其是与根系有关技术指标）㊂由于生长特征之间的相关性，几个主要指标的信息常常是相互交叉的，可以考虑分析２ ３个主要指标［１５］㊂在制订苗木质量标准时，应考虑选择直接反映苗木质量且易于测量的特性，并将其作为生产苗木质量指标［１６］㊂该研究通过主成分分析并结合实际生产，确定地径㊁一级侧根数作为３年生滇牡丹栽培和苗木质量分级的重要指标㊂表５㊀不同种源３年生种苗所占苗木质量分级比例Ｔａｂｌｅ５㊀３ａｓｅｅｄｌｉｎｇｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒｓｅｅｄｌｉｎｇｑｕａｌｉｔｙｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｒａｔｉｏ种源Ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅ种苗等级所占比例Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｏｆｓｅｅｄｌｉｎｇｇｒａｄｅʊ％Ⅰ级ＬｅｖｅｌⅠⅡ级ＬｅｖｅｌⅡⅢ级ＬｅｖｅｌⅢＤＤＣ６．６７２９．２８６４．０５ＤＮＬ１１．１１３２．２２５６．６７ＤＰＤ８．８９３５．５６５５．５５ＤＹＬ８．９７３３．３４５７．６９ＤＹＲ２６．６７４３．３３３０．００㊀㊀当前，苗木质量分级研究方法主要有平均值ʃ１／２标准差法和逐步聚类法等，但不同分级方法分级效果不同［１７］㊂造林效应适应性试验可以更好地将苗木分级与造林生产联系起来，使得分级标准更加明确和科学［１８］㊂该试验所用的分级标准，其分级效果差异不大，平均值ʃ１／２标准差法分级的合格苗（Ⅰ和Ⅱ级苗）所占比例略高于逐步聚类法，前者不合格苗（Ⅲ级苗）占比为３７．９７％，而后者不合格苗占比则是４３．２７％［１８］，因此关于３年生滇牡丹实生苗培育仍有待于进一步加强㊂此外，平均值ʃ１／２标准差法的数值统计分析方法较为简便，易于在生产中使用㊂不同种源植株在生长发育过程中存在特定差异性，这可能与植物特殊的遗传特性有关，同时，它们长期受同一地区特定的地理条件和气候因素的影响，特别是纬度㊁温度和降雨等［１９］，进而影响了植物的生长发育［２０］㊂苗木的生长趋势随着苗龄的增加而增加，但由于土壤特性和种子性状的变化，对植物早期生长发育的影响效果也不相同［２１］㊂因繁育滇牡丹的种子采自不同区域，即使在相同的外部环境条件下，其材料在形态构成过程中仍存在着较大的表型差异；在相同的环境条件下，２年生滇牡丹实生苗的表型变异仍以不同地理种群间的变异为主，但群体间表型变异的分化不是很明显［２２－２３］，这一结果与该研究３年生滇牡丹生长性状生长是一致的㊂根据地径㊁一级侧根数的特征，采用平均值ʃ１／２标准差法对３年生滇牡丹苗木进行等级划分，其分级标准为：Ⅰ级苗，Ｄȡ７．２４ｍｍ，Ｂȡ６；Ⅱ级苗，４．１６ｍｍɤＤ＜７．２４ｍｍ，３ɤＢ＜６；Ⅲ级苗，Ｄ＜４．１６ｍｍ，Ｂ＜３㊂如果地径㊁一级侧根数２个指标中有１个低于一级标准，则等级将降低１级㊂在滇牡丹种苗生产不仅要按苗地径㊁一级侧根数进行分级，还应选择种苗壮实㊁无病虫害㊁根系发达㊁树形端正的苗木㊂此外，还应充分考虑立地环境及育苗技术的区域差异，因根据苗木的具体条件和繁殖条件对苗木等级进行划分，上述等级划分的标准仅为各地进行３年生滇牡丹苗木栽培管理提供参考㊂ＤＹＲ种源和ＤＮＬ种源在地径生长和鲜重的积累上有明显优势，株高㊁主根长和根粗㊁一级侧根数等性状指标上也处于较优水平，属于苗木质量最优的２个种源；株高㊁主根长和根粗㊁一级侧根数的种源遗传力均大于０．８０，说明这４个性状受遗传控制的程度也较高，遗传因素是其性状表现的主导因素㊂通过对５个滇牡丹种源在相同立地条件下育苗的３年苗木早期生长情况进行初步评价，可知３年生滇牡丹实生苗分级结果与不同种源滇牡丹苗期生长性状变异研究结果一致㊂参考文献［１］潘开玉．芍药科分布格局及其形成的分析［Ｊ］．植物分类学报，１９９５，３３（４）：３４０－３４９．［２］ＺＨＡＯＹＪ，ＹＩＮＧＳ，ＰＡＮＹＺ，ｅｔａｌ．Ｃｌｉｍａｔｉｃｒｅｆｕｇｉａａｎｄｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌｉｓｏ⁃ｌａｔｉｏｎｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｔｈｅｓｐｅｃｉａｔｉｏｎａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅｉｎＨｉｍａｌａｙａｎ－Ｈｅｎｇｄｕａｎｔｒｅｅｐｅｏｎｉｅｓ（ＰａｅｏｎｉａｄｅｌａｖａｙｉａｎｄＰａｅｏｎｉａｌｕｄｌｏｗｉｉ）［Ｊ］．Ｆｒｏｎ⁃ｔｉｅｒｓｉｎｇｅｎｅｔｉｃｓ，２０２１，１１：１－１２．［３］龚洵，潘跃芝，杨志云．滇牡丹的多样性和现状评估［Ｊ］．西北植物学报，２００３，２３（２）：２１８－２２３．［４］周琳，王雁．我国油用牡丹开发利用现状及产业化发展对策［Ｊ］．世界林业研究，２０１４，２７（１）：６８－７１．［５］肖丰坤，施蕊，耿菲菲，等．滇牡丹籽油的超临界ＣＯ２萃取工艺优化及其脂肪酸成分分析［Ｊ］．中国油脂，２０１５，４０（６）：１２－１４．［６］龙正莉，杨立新，杨蓉，等．牡丹组植物的药用民族植物学研究与考证［Ｊ］．广西植物，２０２１，４１（２）：３０８－３１７．［７］刘勇．我国苗木培育理论与技术进展［Ｊ］．世界林业研究，２０００，１３（５）：４３－４９．［８］侯元兆．现代林业育苗的理念与技术［Ｊ］．世界林业研究，２００７，２０（４）：２４－２９．［９］姚文静，王茹，王星，等．３个竹种实生竹苗质量评价研究［Ｊ］．西北林学院学报，２０２０，３５（５）：１１６－１２１，１５０．［１０］余远焜．苗木分级指标的提取及聚类分级法［Ｊ］．热带林业科技，１９８４（３）：１６－２６．［１１］赵云青，陈菁瑛，黄瑞平，等．金线兰种苗质量分级标准研究［Ｊ］．福建农业学报，２０１７，３２（１１）：１２３９－１２４３．［１２］楚秀丽，吴利荣，汪和木，等．马尾松和木荷不同类型苗木造林后幼林生长建成差异［Ｊ］．东北林业大学学报，２０１５，４３（６）：２５－２９．［１３］李梦焕，袁王俊，王书辉，等．连翘种苗质量标准研究［Ｊ］．河南农业科学，２０１９，４８（３）：５５－６０．［１４］陈文普，刘正俭，程乾斗．安康市油用牡丹标准化栽培技术［Ｊ］．陕西农业科学，２０１７，６３（１１）：１０１－１０３．［１５］潘超美，黄崇才，郑芳昊，等．药用植物土沉香种苗分级标准的研究［Ｊ］．广州中医药大学学报，２０１２，２９（２）：１８０－１８４．［１６］杨斌，周凤林，史富强，等．铁力木苗木分级研究［Ｊ］．西北林学院学报，２００６，２１（１）：８５－８９．［１７］黎明，黄柏华，韦叶桥，等．降香黄檀轻基质容器苗分级标准研究［Ｊ］．南方农业学报，２０１６，４７（１２）：２１０３－２１０７．［１８］罗明道，洪舟，李科，等．交趾黄檀１年生容器苗分级标准研究［Ｊ］．华南农业大学学报，２０１９，４０（２）：７６－８２．［１９］赵建华，叶力勤，安巍，等．宁夏枸杞苗木分级及不同质量苗木定植初期生长特征［Ｊ］．浙江农林大学学报，２０１１，２８（３）：４５０－４５４．［２０］夏善智．不同种源水曲柳苗木生长的差异分析［Ｊ］．中国林副特产，２０１９（１）：１１－１３．［２１］肖桂英，常恩福，孟广涛，等．铁橡栎不同家系苗期生长差异及其早期选择［Ｊ］．西部林业科学，２０２０，４９（４）：１０５－１１０，１１７．［２２］苏泽春，薛润光，和桂青，等．滇牡丹不同采种区种苗质量评价［Ｊ］．西南农业学报，２０２０，３３（２）：３８９－３９４．［２３］苏泽春，李兆光，薛润光，等．同质环境条件下滇牡丹表型变异研究初报［Ｊ］．中国农学通报，２０２０，３６（４）：６１－６６．２０１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀２０２２年。

孙　燕，冯筱涵，仝伯强，等．６７份牡丹种质资源表型多样性分析及综合评价［Ｊ］．江苏农业科学，２０２３，５１（１５）：１３０－１４０．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２３．１５．０１９６７份牡丹种质资源表型多样性分析及综合评价孙　燕１，冯筱涵１，仝伯强２，关凌珊２，３，刘金石２，４，穆艳娟２，孙　涛２，鲁仪增２，刘　涛２，刘 ２，刘瑞杰５，程丹丹６，于春凤７，高德民１［１．山东中医药大学药学院，山东济南２５０３５５；２．山东省林草种质资源中心，山东济南２５０１０２；３．山东农业大学林学院，山东泰安２７１０１８；４．北京农学院园林学院，北京１０２２０６；５．山东农业工程学院农业科技学院，山东济南２５０１００；６．齐鲁工业大学（山东省科学院菏泽分院），山东菏泽２７４０００；７．甘肃济临牡丹科技产业有限公司，甘肃临夏７３１１００］ 摘要：以６７份代表性牡丹种质资源为研究对象，选取表型的２４个质量性状和２６个数量性状进行描述和测定，采用变异分析、聚类分析、相关性分析、主成分分析和表型性状综合评价方法，结合多样性指数，对牡丹表型性状进行多样性分析及综合评价。

６７份牡丹种质资源的表型呈现出变异类型多、变异程度高等特点，质量性状Ｓｈａｎｎｏｎ－ｗｅａｖｅｒ指数为０．１８３～１．８６０，数量性状变异系数为６．０２％～３７．４１％，单果种子数变异系数（３７．４１％）最大。

当欧氏距离为１７．５时，６７份种质资源可分为７个类群，其中类群Ⅱ的种质数量最多（３７个），初步明确了各类群的主要特征性状，表明牡丹品种在表型性状上具明显差异，而各数量性状间大部分存在显著相关性。

前８个主成分累积贡献率达到８０．９７３％，可综合代表牡丹表型数据的大部分信息。

针对油用、观赏、综合利用等不同用途进行评价，共筛选出１０份最优种质。

牡丹种质资源表型多样性高、变异类型丰富，为牡丹品种选育奠定了物质基础，期待筛选出的不同用途牡丹种质可为牡丹的开发利用及新品种选育提供参考。

4个滇牡丹天然居群遗传多样性的ISSＲ分析*刘通1，冯丹2，陈少瑜2，赵一鹤2（1.西南林业大学环境科学与工程学院，云南昆明650224； 2.云南省林业科学院，云南昆明650201）摘要：以云南省香格里拉县4个滇牡丹天然居群为研究对象，采用ISSＲ分子标记技术，对98份材料进行遗传多样性分析，用多态性高、稳定性强的10条引物进行扩增，共获得96条扩增产物，其中多态性条带有82条，多态性百分比为85.42%；滇牡丹总体基因多样性为0.3438，Shannon 指数为0.5009；通过Nei ’s 和聚类分析，居群间的遗传分化系数为0.7973，居群间的遗传变异占总遗传变异的79.73%，而居群内的遗传变异只有20.27%，表明滇牡丹居群间的遗传分化较大，遗传变异主要存在于居群间。

因此，滇牡丹虽然为分布区狭窄的特有种，但是与一些典型稀有和濒危的物种相比，遗传多样性并不低，滇牡丹的分布区域和种群数量呈现狭窄化、缩小化的趋势，主要原因是受人为过度采挖，生境受到破坏所致。

关键词：滇牡丹；居群；遗传多样性；ISSＲ分子标记中图分类号：S 685.11文献标识码：A文章编号：1672－8246（2014）03－0031－06ISSＲAnalysis of Genetic Diversity among 4NaturalPopulations of Paeonia delavayiLIU Tong 1，FENG Dan 2，CHEN Shao-yu 2，ZHAO Yi-he 2（1.Environmental Science and Engineering College of Southwest Forestry University ，Kunming Yunnan 650224，P.Ｒ.China ；2.Yannan Academy of Forestry ，Kunming Yunnan 650201，P.Ｒ.China ）Abstract ：ISSＲmolecular marker technology was used to analyze genetic diversity of 4natural populations of 98Paeonia delavayi individuals from shangri-la in Yunnan．10primers with high polymorphism and steady expansion were selected and 96bands were identified ，of which 82bands were polymorphic ，the polymorphism percentage was 85.42%.The total genetic diversity of 98Paeonia delavayi was 0.3438，and the Shannon index was 0.5009．Through the Nei ’s and Cluster analysis ，the gene differentiation coefficient among populations was 0.7973，the genetic variation among populations was 79.73%，the genetic variation within populations was only 20.27%．All of these indicates that the different populations of Paeonia delavayi had a larger genetic differentia-tion ，and the main genetic variation was existed among populations．The study also showed that although Paeonia delavayi was an endemic species ，compared with some typical rare and endangered species ，its genetic diversity was not low．The reason of its narrowing distribution tendency was mainly caused by over collection and habitat dis-turbance from human activities．Key words ：Paeonia delavayi ；population ；genetic diversity ；ISSＲmolecular marker第43卷第3期2014年6月西部林业科学Journal of West China Forestry ScienceVol.43No.3Jun .2014*收稿日期：2014－02－15基金项目：云南省社会事业发展专项（2010CA010），国家林业局公益性专项（201204110）。

牡丹的市场现状和趋势
牡丹市场的现状和趋势如下：
现状：
1.牡丹是一种古老而重要的花卉，在世界范围内享有盛誉。

中国被认为是牡丹的发源地和主要产区，世界上许多国家和地区都有种植和研究牡丹。

2.中国的牡丹市场规模庞大，牡丹种植面积和产量居世界首位。

国内消费者对牡丹的需求日益增长，市场潜力巨大。

3.牡丹种类丰富多样，颜色鲜艳，花形独特，具有高度观赏价值。

牡丹花期长，花朵大而富丽，被誉为国花。

4.牡丹不仅作为花卉观赏品受到喜爱，还有药用价值和文化意义。

牡丹被广泛用于中药制剂和保健品，同时与中国传统文化和艺术密切相关。

趋势：
1.随着人们生活水平的提高和对生活品质的追求，花卉市场需求逐渐增长。

牡丹作为一种高雅而珍贵的花卉，其市场前景广阔。

2.牡丹观赏品种的繁育和培育研究得到了广泛关注，新品种的推出使得牡丹具有更多选择和创新的可能性，进一步提升了市场竞争力。

3.随着中国传统文化的复兴和国际交流的增加，牡丹作为中国的象征之一，在国内外市场的知名度和认可度将进一步提高。

4.牡丹产业链的成熟和完善，包括种植、收购、研究、加工和销售等环节，将进一步带动牡丹市场的发展和壮大。

综上所述，牡丹市场在现状良好的基础上有着较为乐观的发展趋势。

随着人们对高品质花卉的需求增长和中国传统文化的复兴，牡丹作为一种具有独特魅力和文化内涵的花卉，将在市场上有更广阔的发展空间。

滇牡丹分类处理的细胞学与分子生物学证据孔红;成仿云【摘要】滇牡丹Paeonia delavayi是中国西南地区特有种,其分类一直存在争议.回顾了滇牡丹的分类历史和分类处理,综述了滇牡丹在细胞学及分子生物学的研究现状及进展,着重介绍了滇牡丹的染色体核型、Giemsa C-带、同工酶生化标记、分子标记及基因序列测定等研究成果,认为染色体核型、Giemsa C-带、同工酶生化标记、分子标记等结果支持将滇牡丹复合群归并为滇牡丹一个种的分类处理,基因序列分析只涉及滇牡丹的2个居群,认为二者亲缘关系很近.【期刊名称】《浙江农林大学学报》【年(卷),期】2010(027)004【总页数】5页(P601-605)【关键词】植物学;滇牡丹;分类处理;细胞学;分子生物学;综述【作者】孔红;成仿云【作者单位】廊坊师范学院,生命科学学院,河北,廊坊,065000;北京林业大学,园林学院,北京100083【正文语种】中文【中图分类】S718.3;Q949滇牡丹Paeonia delavayi属于芍药科Paeoniaceae芍药属Paeonia牡丹组（Sect.Moutan）肉质花盘亚组（Subsect.Delavayanae）［1］，为中国西南地区特有种。

主要分布于云南中部至西北部、四川西南部和西藏东南部，是芍药属分布最南的一个牡丹类群，在芍药属的起源、演化和地理分布研究上有重要的学术价值，且滇牡丹拥有黄色花基因，在杂交育种上具有重要应用价值［2］。

有关滇牡丹的研究非常广泛，而且滇牡丹的分类一直存在争议，始终是研究的热点问题。

笔者主要就近年来国内外开展的有关滇牡丹分类的细胞学及分子生物学方面的研究进行了总结，目的是指出问题，供今后研究参考。

1 分类简史和分类处理滇牡丹叶裂片数目、叶裂片宽度、花色、苞片数量具丰富的多样性［2］，这些性状是滇牡丹形态分类的主要依据。

1886年，Franchet根据Delavay采自云南丽江的紫色花标本和洱源的黄色花标本发表了滇牡丹和黄牡丹P.lutea Delavay ex Franch.［3］。

我国牡丹产业发展状况思考牡丹，被誉为国花，是我国的传统名花，也是世界上最受欢迎的花卉之一。

牡丹产业不仅对于提升花卉产业的品质和效益具有重要意义，也对于促进农业结构调整和提高农民收入有着积极的作用。

近年来，我国的牡丹产业发展取得了长足的进步，但也面临着一些问题和挑战。

本文将从产业发展状况、面临的问题以及未来的发展方向等方面进行思考和分析。

一、牡丹产业发展状况1.产地分布广泛我国的牡丹产地分布非常广泛，主要集中在江苏、山东、河南、陕西、北京等地。

山东省的牡丹产业发达，尤其是济南市的章丘区被誉为“中国牡丹之乡”，种植面积达到上万亩，年产牡丹花枝数千万支，成为当地的支柱产业之一。

2.品种丰富多样我国牡丹种植品种繁多，包括珍稀牡丹、牡丹标准花、庭园牡丹等。

传统牡丹品种有着浓厚的文化底蕴，如白牡丹、红牡丹等，而现代牡丹品种的育种也取得了长足的进步，不断推出新的抗逆品种和观赏品种，丰富了花卉市场。

3.市场需求持续增加牡丹作为传统名花，在我国有着广泛的市场需求。

随着人们对花卉观赏和园林造景的需求不断增加，牡丹的市场前景十分广阔，尤其是在各种节日庆祝和景观建设中，牡丹都占有重要地位。

二、面临的问题1.品质不稳定目前，我国牡丹产业虽然发展迅速，但在品质上存在一定的不稳定性。

一方面是因为种植技术水平不断提高，新品种不断推出，但后果就是品质参差不齐，有些品种虽然外形美观，但在花朵的质地、颜色和香气等方面并不尽如人意。

2.产业链缺乏完善牡丹产业链相对薄弱，从种植、加工到销售环节缺乏统一规划和配套政策。

种植企业和花农生产链条上下游缺少有效的沟通和协作，导致成本高、效益低，市场竞争力不足。

3.市场推广不足虽然牡丹在我国有着悠久的历史和文化积淀，但其对外市场推广不足，尤其是在国际市场上的知名度和影响力远不如红玫瑰等其它花卉，这一方面制约了牡丹产业的发展，同时也影响了我国花卉行业的整体竞争力。

三、未来的发展方向1.提高品质要解决牡丹产业品质不稳定的问题，首先要加强产业技术研发和标准化管理，引进新的种植技术和育种技术，推广优质品种，提高牡丹的外观质量和观赏价值。

中国西南地区特有野生花卉——滇牡丹潘温文【期刊名称】《园林》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】3页(P56-58)【作者】潘温文【作者单位】浙江丽水职业技术学院【正文语种】中文中国西南地区分布着一种极具观赏价值的野生花卉，名为滇牡丹（Paeonia delavayi），又名“滇丹皮”“白药”等，被列为珍稀濒危物种。

滇牡丹属芍药科芍药属（Paeonia）牡丹组（Paeonia sect.Moutan DC），是分布最南的一个牡丹类群。

亚灌木，全株无毛，两回三出复叶，花盘肉质，花色为白、红、黄、紫等，蓇葖果2～5，花期4～6月，果期6～9月。

主要分布于云南中部至西北部、四川西南部和西藏东南部。

生长习性：生态环境复杂多样（图1～4），适应性强；喜光，但不耐直射光照，适生于路边、林地边缘和荫蔽度小的石山、草坡和林下；土壤为黄棕壤或棕壤。

观赏价值：滇牡丹叶形、苞片、萼片、花色等均丰富的多样性，花色多彩艳丽（图5），从白色到紫色的颜色系列，具多种不同颜色的植株（图6）。

花期长达2个月，观赏价值较高；其中黄色、紫色更是牡丹栽培品种中所少有，可作为栽培牡丹选育新品种的重要亲本。

药用价值：滇牡丹根含有芍药苷和牡丹酚，性寒、味酸辛，根皮用于清热凉血，治吐血、尿血、血痢、痛经等；种皮中富含黄酮，是改善血液循环、降低胆固醇的良药，而种皮中的花青素有清除自由基和抗氧化的功效；果荚中的牡丹多糖可以增强吞噬细胞的吞噬功能增强免疫力。

食用价值：滇牡丹种籽含油量可达22%，是具有开发食用油的潜在木本油料植物资源之一；花蕊亦可以做花茶，具有较强的滋阴补肾的功能；其花提取的精油是非常珍贵的化妆品。

繁殖特性及方法：野生状态下，以营养繁殖为主，种子繁殖为辅；植株根颈部具根状茎，其上的不定芽可萌发形成新枝；种子结实率高（图7），但80%易遭虫蛀，且存在严格的上胚轴休眠特性，自然状态下种子出苗率极低（图8）。

人工栽培可采用分株繁殖，成活率较高，繁殖系数小；种子繁殖需用赤霉素（500 ppm）浸泡处理，打破其上胚轴休眠，60天后可发芽；扦插繁殖困难，成活率极低。

滇西北野生花卉
方震东
【期刊名称】《人与自然》
【年(卷),期】2001(000)003
【摘要】马先蒿玄参科马先蒿属植物．为一至多年生草本．主要分布于北半球，
中国有350种，欧洲54种，仅1种生长在安第斯山脉。

仅仅在滇西北迪庆藏族
自治州23870平方公里的土地上．就已经发现有110种．占云南的2／3．中国
的1／3。

研究表明．我国西南部横断山区是马先蒿属植物的现代分布和分化中心。

与昆虫传粉机制相适应．马先蒿属植物在花冠的形态上表现出高度的特化和多样性。

【总页数】2页(P52-53)
【作者】方震东
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】G633
【相关文献】
1.滇西北野生花卉 [J], 方正东
2.滇西北野生观赏花卉调查 [J], 李晓贤;陈文允;管开云;周浙昆
3.川西北野生花卉资源开发利用价值评价体系建立及应用 [J], 唐霄铧;高兰阳;孙婷;尚迪;卓明;王辉
4.中国西南地区特有野生花卉——滇牡丹 [J], 潘温文
5.川西北高原野生花卉种质资源调查初报 [J], 高兰阳;卓明;李达旭;周纯兵;李洪泉;刘洪科;许震寰;游明鸿
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