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中药材及饮片掺伪染色 检测技术湖北省食品药品监督检验研究院 省食 药 监督检验研究院 中药检验所肖凌 2012. 4主要内容¾ 中药材掺伪染色现状 ¾ 染色剂的类别与结构特点 ¾ 中药材掺伪染色检测的技术方法 ¾ 掺伪染色研究实例 ¾ 通用检测方法中药材掺伪染色现状掺伪染色的主要目的 改善外观、增加重量、以次充好等等。
中药材掺伪染色现状• 国家食品药品监督管理局已批复的掺伪染色补充检验方法和检验项目品种 蒲黄 黄芩(饮片) 红花 胆南星 海金沙 细辛 穿山甲 五味子 朱砂(水飞) 血竭 沉香 乌梅 桔梗（饮片） 批准件编号 2007007 2007008 2007009 2007010 2007011 200712 2007013 2007014 2008003 2008004 2008017 2009001 2009002 检测指标 总灰分、金胺O 金胺O 金橙II 总灰分 总灰分 杂质 总灰分 胭脂红、赤藓红、酸性红73 808猩红 苏丹红 苏丹红IV、808猩红、松香酸 猩红 松香酸 松香酸 苋菜红、亮蓝、日落黄 总灰分中药材掺伪染色现状• 国家食品药品监督管理局批复的掺伪染色补充检验方法和检验项目品种 大黄药材 白鲜皮（饮片）黄柏（饮片） 黄连（饮片） 桔梗（饮片） 延胡索 猪苓（饮片）批准件编号 2010001 20100022010003 2010004 2010005 2010006 201000 2010007主要染色物或掺伪物 土大黄苷 镁盐和铝盐、总灰分金胺O 金胺O、总灰分 镁盐和铝盐、总灰分 金胺O 镁盐和铝盐 总灰分 镁盐和铝盐、总灰分西红花 青黛 人工牛黄 冬虫夏草 乳香 没药2011001 2011002 2011003 2011004 2011005 2011006金胺O、新品红、柠檬黄、 孔雀石绿胭脂红胭脂红、金胺O、金橙Ⅱ、炽灼残渣 苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、808猩红 松香酸 松香酸中药材掺伪染色现状染色成分 胭脂红 柠檬黄 酸性红73 金橙Ⅱ 金胺O 新品红 苋菜红 赤藓红 808猩红 苏丹红I 苏丹红IV 孔雀石绿 亮蓝 日落黄 诱 诱惑红 碱性橙 检出品种 西红花、红花、山茱萸 西红花、红花、乌梅、全蝎 红花、茜草、朱砂 红花 人工牛黄 红花、人工牛黄 蒲黄、黄芩、黄连、黄柏、延胡索、西红花、人工牛黄 西红花 乌梅、枸杞子、酸枣仁、冬虫夏草 酸枣仁、乌梅 血竭、朱砂、中成药 血竭 血竭、中成药 青黛 冬虫夏草、水蛭、乌梅 冬虫夏草、水蛭、乌梅、枸杞子 乌梅 枸 乌梅、枸杞子、酸枣仁 松花粉中药材掺伪染色现状品种 海金沙 地龙、水蛭、全蝎、土鳖虫、海马 猪苓 穿山甲 沉香 檀香 紫河车 龙血竭 青黛 哈蟆油 菟丝子 大黄 五味子 西洋参 冰片 茜草 山茱萸 可能掺伪物 黄泥粉 掺入泥沙矿物、金属等增重 硫酸镁 硫酸镁、明矾 其它木材＋树脂 其它木材＋香精 动物胎盘+淀粉增重 松香＋铁红粉 矿物＋色素 牛蛙混充较多 其他植物的种子或沙粒混充 非正品大黄 南五味子染色混充 人参 樟脑、明矾、蔗糖、芒硝 检查方法 浸泡、总灰分 切开观察性状、浸泡 浸泡、无机盐鉴别反应 浸泡、无机盐鉴别反应 显微（木间韧皮部） TLC鉴别 组织切片 TLC检查 TLC鉴别 性状 浸泡 性状、浸泡 性状、浸泡 土大黄苷检验 性状 TLC鉴别 气味、GC或TLC鉴别 性状 TLC鉴别其它品种混充 胭脂红、赤藓红、酸性红73染色染色剂的类别与结构特点¾ 食用色素（水溶性色素） ¾ 化工染料 ¾ 有机颜料 纺织品着色 非纺织品着色 色物结合 ¾ 无机或矿物颜料 被纤维吸附、固着 靠树脂 胶黏剂于着 靠树脂、胶黏剂于着染色剂的类别——食用色素• 天然食用色素：焦糖色素、红曲红、高梁红、栀子黄、 萝卜红 叶绿素铜钠盐 胡萝卜素 可可壳色 姜黄等 萝卜红、叶绿素铜钠盐、胡萝卜素、可可壳色、姜黄等 • 合成色素：我国食品添加剂准许使用的合成色素有胭脂 红、苋菜红、日落黄、赤藓红、柠檬黄、新红、靛蓝、 亮蓝、二氧化钛（白色素）等。
内容：1. 蒲黄—金胺O1.1 薄层色谱法1.1.1 仪器：硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、分液漏斗、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。
1.1.2 试剂：水、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、氨水。
1.1.3 供试品的制备：取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
1.1.4 对照品的制备：取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
1.1.5操作：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷—乙酸乙酯—甲醇—氨水（4:5:1:1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可见光下检视。
1.1.6 结果判断：供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
1.2 高效液相色谱法1.2.1 色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调PH值3.0）（35:65）为流动相；检测波长为432nm。
理论塔板数按金胺O对照试剂色谱中的主峰计算，应不低于2000。
1.2.2 对照试剂溶液的制备：取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含50μg的溶液，即得。
1.2.3 供试品溶液的制备：取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，即得。
1.2.4 测定法取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
1.2.5 结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在320~450nm波长范围的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。
1.2.6 备注：必要时，可采用高效液相色谱—质谱联用方法验证。
建议采用乙腈—0.05mol/L醋酸铵（35:65）流动相系统。
中药染发剂的配方和熬制过程
1.配方：
（1）黑色中药染发剂：何首乌、川木通、生地黄、车前子、苍耳子、远志、蓝莓果实、相思木、金银花、决明子等。
（2）棕色中药染发剂：核桃壳、茶叶、芦荟、远志、金银花、夏枯草、石斛、苦参、决明子等。
2.熬制过程：
（1）将以上所列的中药材分别放入清水中泡发备用。
（2）将泡发的中药材放入砂锅中，加入适量的清水，用文火慢炖，
熬制6-8小时，使中药材充分煎煮出中药液。
（3）将煎好的中药液倒入干净的容器中，放在通风干燥的地方，晾
凉后备用。
（4）用洗发水清洗头发，将湿发梳理整齐，准备染发。
（5）将中药液倒入碗中，用染发刷将中药液均匀地涂抹在头发上，
保证每根头发都被染到。
（6）涂抹完毕后，用塑料薄膜包裹头发，以保持中药液的温度，然
后用毛巾包裹头部，使中药液渗透更加充分。
（7）将头发静置2-3小时，让中药液渗透到头发中。
（8）时间到后，用清水将头发冲洗干净，直到水变清为止。
（9）用干毛巾将头发拧干，然后用吹风机将头发吹干即可。
需要注意的是，中药染发剂的颜色会因为每个人的发质和发色的不同
而有所不同，建议先在一小部分头发上试染，确认效果后再进行全头染发。
此外，中药染发剂是一种天然染发方式，颜色会逐渐褪去，可以根据需要
定时进行染发。
中药染发剂的配方和熬制过程
配方：
1.青黛：具有染发效果，可增加发色的深度和饱和度。
2.赤芍：能够柔顺发质，增加光泽度。
3.赤根：具有滋养头发、促进生发的作用。
4.龙胆草：具有滋养头发、增加发色亮度的功效。
5.石斛：能够滋养头发，增加发质的弹性和柔软度。
6.熟地：具有滋养头发、改善发质的作用。
7.当归：能够促进头发生长，增强发质。
熬制过程：
1.将以上配方的草药材料按照比例准备好，然后将其清洗干净。
2.将清洗后的草药材料放入一个大锅中，加入足够的水，使其浸泡30分钟至1小时。
3.将大锅放在火上，加热至沸腾，然后改为小火煮熬2-3小时，期间不断搅拌，以防止煮焦。
4.待草药材料煮熬后，将其捞出，用纱布过滤出草药液，将草药渣丢弃。
5.将过滤得到的草药液放置至室温，待其冷却后，可以用作染发剂。
使用方法：
1.将熬制好的中药染发剂倒入一个容器中。
2.将头发洗净后，用干毛巾擦干，不需要吹干。
3.将染发剂均匀地涂抹在头发上，可以使用梳子将其梳理均匀。
4.待染发剂均匀涂抹在头发上后，用塑料薄膜包裹头部，然后用毛巾包裹头部，以保持温度。
5.等待30分钟至1小时，然后用温水将染发剂冲洗干净，直到水清透明。
6.最后，用洗发水洗发，然后用护发素护发，以保持发质的柔软和光泽。
需要注意的是，中药染发剂的染发效果会因个人的发质和颜色而有所差异，所以在使用前最好先进行皮肤敏感测试，以避免过敏。
另外，中药染发剂的染色效果相对较轻，如果想要达到较深的颜色效果，可以多次使用或者延长染发剂停留的时间。
中药染发配方
中药染发配方
中药染发配方，是如今现在发生白发的人群越来越多了。
产生白发因素很多，这白发长期影响着患者身心问题。
现在患者对中药染发配方很关注，那么让专家来介绍一下中药染发配方。
中药染发配方
1.用中药当归、干松、石膏、滑石、酸石榴皮、母丁香、白檀香、没石子、白及等药，研末，用米醋调成膏状，涂于头发上，用荷叶包紧，次日早晨洗去黑色。
用此方可以染发。
2.枸杞子，性甘、平、无毒。
补益肝肾，对肝肾亏损致头目昏花、头发早白有治疗效果。
3.黑芝麻，又名胡麻，性甘、平、无毒。
补益肝肾，滋润五脏。
由于肝肾不足所引起的身体虚弱、津枯便结、须发早白、未老先衰等均宜，具有美容乌发等效果。
取黑芝麻25可捣碎，加适量大米煮成粥，每天一次食用，对“少白头”的白发变黑有良好作用。
也可与海带放在一起煮食。
黑芝麻30克，粳米60克。
先将黑芝麻淘洗干净，晒干后炒熟研碎，用时与粳米兑水煮粥即可。
此粥有补肝肾、润五脏之功，适用于身体虚弱、头发早白。
以上是对中药染发配方，进行了一下详细的介绍。
相信广大患者对中医染发的配方有了一定的了解了，白发也是一种疾病不及时制止会导致不可磨灭的伤害。
现在为白发所困扰的人群，按着上述的介绍来染发会有一定的帮助。
中药染发配方现在是二十一世纪，是一个时尚的时期，现在染发是体现时尚的元素之一，虽然现在不缺乏理发店，但是很多的理发店在染发上都用不合理的染发剂，不好的染发剂对人体的健康还是有伤害的，如果你想健康的进行染发的话，可以采取中药的配方，中药的配方不仅能够在染发上有很好的效果，同时对人们的身体没有任何的危害。
杭白菊染发方法Diy中药染发剂是天然染发剂的最佳选择。
杭白菊是一种常用的重要，但它的成分之一氨基酸具有强烈的褪色功效，这是对于将头发变浅不可或缺的成分。
同时杭白菊内含有的菊甙、黄酮类及多种维生素还能起到保养头发的作用。
染发颜色米黄色方法：1、将杭白菊50g，用沸水浸泡20分钟;2、用泡好的水将头发浸湿后，用热毛巾包裹一小时，然后用水洗净;3、坚持用3-5天即可见效。
2、咖啡染发方法咖啡也是制成中药染发剂的好材料，咖啡本身就带有很强的色素，如果不小心将咖啡洒到衣服上很难洗净就是因为咖啡所含的色素很强，利用其原理染发，效果很不错。
染发颜色咖啡色方法：1、将5人份咖啡用开水沏泡;2、将浓浓的咖啡涂抹到头发上，干后再涂抹一层次;3、用热毛巾包裹45分钟后洗净头发，头发变色成咖啡色。
以上就是对中药染发配方的相关介绍，相信很多的人都有了一定的了解，你还在为理发店染发剂的健康问题担忧吗，现在正规的药物配方，能够及时的帮助你解脱染发剂伤害的问题，还能够让你的发质变的更加的自然。
咖啡染发法将5人份的咖啡用开水泡开，冷却后将咖啡液涂抹到头发上，自然风干一小时，然后再涂抹一次。
最后用热毛巾包裹45分钟，再用温水洗净头发，不要放洗发水。
咖啡带有很强的色素，不小心洒到衣服上也很难洗净，利用这个特性，咖啡很容易染发，如果头发天生比较黑，可能不容易上色。
柠檬染发法将8个柠檬榨汁，然后用柠檬汁涂抹在头发上，用热风吹干后再涂抹，反复几次，直到你对头发的颜色比较满意。
最后再用热毛巾裹住头发15分钟。
柠檬含有大量的果酸，具有腐蚀和漂白的作用，但对头发和头皮的刺激性却不明显，能够温和的将头发色素降低。
国家食品药品监督管理局稽查局食药监稽函【2012】200号中药材及中药饮片药品检验补充检验方法和检验项目批准件蒲黄POLLEN TYPHAE[检查]总灰分不得过15.0%（中国药典2005年版一部附录IX K总灰分测定法）。
金胺O (1) 取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含0.1 mg的溶液，即得。
照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，取供试品溶液和对照品溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷—乙酸乙酯—甲醇—氨水（4：5：5：1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可见光下检视。
供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
（2）照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VI D）测定。
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.025mol/L 磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）（40：60）为流动相；检测波长为484nm。
理论板数按金橙Ⅱ峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml约含60µg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取上述（1）项下的供试品溶液，即得。
测定法取供试品溶液和对照品溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果判断供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210~550nm 波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。
备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。
建议采用乙腈-0.05mol/L 醋酸铵（35：65）流动相系统。
红花HonghuaFLOS CARTHAMI[检查]金橙Ⅱ（1）取本品粗粉2g，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
国家药监局药审中心关于发布《中药新药用药材质量控制研究技术指导原则（试行）》等3个指导原则的通告文章属性•【制定机关】国家药品监督管理局•【公布日期】2020.10.10•【文号】国家药品监督管理局通告2020年第31号•【施行日期】2020.10.10•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】药政管理正文国家药品监督管理局通告2020年第31号国家药监局药审中心关于发布《中药新药用药材质量控制研究技术指导原则（试行）》等3个指导原则的通告在国家药品监督管理局的部署下，药审中心组织制定了《中药新药用药材质量控制研究技术指导原则（试行）》（附件1）、《中药新药用饮片炮制研究技术指导原则（试行）》（附件2）、《中药新药质量标准研究技术指导原则（试行）》（附件3）。
根据《国家药监局综合司关于印发药品技术指导原则发布程序的通知》（药监综药管〔2020〕9号）要求，经国家药品监督管理局审核同意，现予发布，自发布之日起施行。
特此通告。
国家药品监督管理局药品审评中心2020年10月10日附件1中药新药用药材质量控制研究技术指导原则（试行）一、概述药材是中药新药研发和生产的源头，其质量是影响中药新药安全、有效和质量可控的关键因素。
为完善中药制剂质量控制体系，加强药品质量的可追溯性，为中药制剂提供安全有效、质量稳定的药材，基于全过程质量控制和风险管控的理念，针对药材生产的关键环节和关键质控点，制定本技术指导原则。
本指导原则主要包括药材基原与药用部位、产地、种植养殖、采收与产地加工、包装与贮藏及质量标准等内容,旨在为中药新药用药材的质量控制研究提供参考。
二、基本原则（一）尊重中医药传统和特色药材质量控制研究应遵循中医药理论，尊重中医药传统经验和特色。
药材的适宜产地、生产方式、生长年限、采收时间、产地加工方法及药材的质量评价等应尊重传统经验。
鼓励传承传统经验和技术，鼓励应用现代科学技术表征传统质量评价经验和指标。
内容：1. 蒲黄—金胺O1.1 薄层色谱法1.1.1 仪器：硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、分液漏斗、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。
1.1.2 试剂：水、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、氨水。
1.1.3 供试品的制备：取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
1.1.4 对照品的制备：取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
1.1.5操作：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷—乙酸乙酯—甲醇—氨水（4:5:1:1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可见光下检视。
1.1.6 结果判断：供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法验证。
1.2 高效液相色谱法1.2.1 色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调PH值3.0）（35:65）为流动相；检测波长为432nm。
理论塔板数按金胺O对照试剂色谱中的主峰计算，应不低于2000。
1.2.2 对照试剂溶液的制备：取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中含50μg的溶液，即得。
1.2.3 供试品溶液的制备：取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，即得。
1.2.4 测定法取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
1.2.5 结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在320~450nm波长范围的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。
1.2.6 备注：必要时，可采用高效液相色谱—质谱联用方法验证。
建议采用乙腈—0.05mol/L醋酸铵（35:65）流动相系统。
2. 红花—金橙Ⅱ2.1 薄层色谱法2.1.1仪器：硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。
2.1.2试剂：水、乙醇、氯仿、甲醇、冰乙酸。
2.1.3 供试品的制备：取药材粗粉2g，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
2.1.4 对照品的制备：取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
2.1.5操作：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照试剂溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿—甲醇—冰乙酸（7:1:2）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。
2.1.6 结果判断：供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱法验证。
2.2 高效液相色谱法2.2.1 色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调PH值3.0）（40:60）为流动相；检测波长为484nm。
理论塔板数按金橙Ⅱ峰计算，应不低于2000。
2.2.2 对照试剂溶液的制备：取金橙Ⅱ对照试剂适量，加70%乙醇制成每1ml中约含60μg的溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液的制备：取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，即得。
2.2.4 测定法取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
2.2.5 结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在210~550nm波长范围的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。
2.2.6 备注：必要时，可采用高效液相色谱—质谱联用方法验证。
建议采用乙腈—0.05mol/L醋酸铵（35:65）流动相系统。
3. 五味子—胭脂红、赤藓红、酸性红3.1 薄层色谱法3.1.1仪器：硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、锥形瓶、打粉机、天平、离心机。
3.1.2试剂：水、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、氨水。
3.1.3 供试品的制备：取本品2g（不粉碎），加70%乙醇10ml，超声提取20分钟，离心（3000转/分钟），取上清液作为供试品溶液。
3.1.4 对照品的制备：取胭脂红、赤藓红、酸性红73对照试剂适量，分别加70%乙醇溶解并制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
3.1.5 操作：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照试剂溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯—正丁醇—乙醇—氨水—水（1:3:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，在可见光下检视。
3.1.6 结果判断：供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱法验证。
3.2 高效液相色谱法3.2.1 色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A、以0.05mol/L 醋酸铵为流动相B，按下表进行梯度洗脱：检测波长为508nm。
理论塔板数按胭脂红峰计算，应不低于2000。
时间（min）流动相A(%) 流动相B（%）0~12 20→45 80→5512~25 45→80 55→2025~30 80 203.2.2 对照试剂溶液的制备：上述薄层色谱法项下的对照试剂溶液，即得。
3.2.3 供试品溶液的制备：取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，即得。
3.2.4 测定法：取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
3.2.5 结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。
4. 朱砂（水飞）—808猩红4.1 薄层色谱法4.1.1仪器：硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。
4.1.2试剂：水、乙醇、环己烷、乙酸乙酯。
4.1.3 供试品的制备：取本品粉末0.2g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
4.1.4 对照品的制备：取808猩红对照试剂适量，加乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
4.15操作：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷—乙酸乙酯（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。
5.1.7 结果判断：供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱法验证。
4.2 高效液相色谱法4.2.1 色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.1%的甲酸溶液（85:15）为流动相；检测波长为520nm。
理论塔板数按808猩红峰计算，应不低于2000。
4.2.2 对照试剂溶液的制备：取808猩红对照试剂适量，加乙醇制成每1ml中约含60μg的溶液，即得。
4.2.3 供试品溶液的制备：取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，即得。
4.2.4 测定法取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
4.2.5 结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。
808猩红对照试剂色谱峰在519±1nm显示最大吸收。
4.2.6 备注：必要时，可采用高效液相色谱—质谱联用方法验证。
建议采用乙腈—0.1%的甲酸溶液（80:20）流动相系统。
5. 血竭—苏丹红Ⅳ、808猩红5.1 薄层色谱法5.1.1仪器：硅胶G薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。
5.1.2试剂：水、乙醇、环己烷、乙酸乙酯。
5.1.3 供试品的制备：取本品粉末0.2g，加乙醇25ml，超声处理15分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。
5.1.4 对照品的制备：取苏丹红Ⅳ、808猩红对照试剂适量，分别加乙醇制成每1ml含苏丹红Ⅳ、808猩红0.1mg的溶液，作为对照试剂溶液。
4.1.5操作：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷—乙酸乙酯（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。
5.1.6 结果判断：供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则用下列高效液相色谱法验证。
5.2 高效液相色谱法5.2.1 色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—水（95:5）为流动相；检测波长为520nm。
理论塔板数按苏丹红Ⅳ峰计算，应不低于2000。
5.2.2 对照试剂溶液的制备：取苏丹红Ⅳ、808猩红对照试剂适量，分别加乙醇制成每1ml中约含40μg的溶液，即得。
5.2.3 供试品溶液的制备：取上述薄层色谱法项下的供试品溶液，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。
5.2.4 测定法取上述供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
5.2.5 结果判断：供试品色谱中，应不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。
若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外—可见吸收光谱，吸收光谱应不同。
苏丹红Ⅳ对照试剂色谱峰在350±1nm,517±1nm显示最大吸收；808猩红对照试剂色谱峰在518±1nm显示最大吸收。
6. 乌梅—苋菜红、亮蓝、日落黄6.1 薄层色谱法6.1.1仪器：硅胶GF254薄层板、微升毛细管点样器、平底展开缸、超声仪、离心机、漏斗、锥形瓶、打粉机、天平。
6.1.2试剂：水、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、氨水。
6.1.3 供试品的制备：取本品2粒，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，取上清液离心，作为供试品溶液。
6.1.4 对照品的制备：取苋菜红、亮蓝、日落黄溶液（国家标准物质，标示浓度0.5mg/ml，国家标准物质研究中心）各1ml，分别加70%乙醇稀释至5ml，作为对照品溶液。
6.1.5操作：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯—正丁醇—乙醇—氨水—水（1:3:3:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，日光下检视。
6.1.6 结果判断：供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点；若出现相同颜色的斑点，则采用下列高效液相色谱法进一步检查。
