第二节 (1)显微镜

光学显微镜技术第一章概述第一节显微镜的作用人眼对微观世界观察的局限性光学显微镜是人类探索微观世界的光学精密仪器光学显微镜的发展在很大程度上决定了人们对生命现象的认识第二节显微镜的类型根据照明源的性质一、光学显微镜：利用可见光（或紫外光）为照明源，一般有单式及复式显微镜两类。

复式显微镜可分为：1.普通型：常规使用。

2.特种型：如荧光、相衬显微镜等；供专门观察和研究。

3.高级型：万能显微镜。

4.共焦激光扫描显微镜（Confocal）。

第三节光学显微镜的发展简史1625年法布尔提出显微镜的概念1610年伽利略制造出具有物镜、目镜及镜筒的复式显微镜1611年开普勒说明了显微镜的原理1665年虎克制造出放大140倍的显微镜，提出“Cell”的概念1684年惠更斯制造出双透镜目镜：惠更斯目镜19世纪阿贝提出显微镜的完整理论1902年艾夫斯建立了双目镜系统1935年泽尼克发现了相衬原理，并因此获得诺贝尔奖20世纪60年代微分干涉衬显微镜问世20世纪80年代共焦激光扫描显微镜开始应用第四节显微镜的基本光学原理一、折射与折射率光线的折射现象物质的折射率二、透镜的性能凸透镜可以会聚光线凹透镜可以发散光线三、透镜的成像质量象差：是指透镜所形成的象与理想象在形状、颜色等方面存在差异。

色差：由于不同的颜色光线折射率差异而形成的象差。

色差的校正（1）采用单色光为光源。

（2）利用透镜的性质。

四、显微镜的成象（几何成象）原理利用凸透镜成象原理物镜成象：利用物体在凸透镜一倍焦距以外二倍焦距以内，成倒立的放大的实象。

目镜成象：是利用物体在凸透镜一倍焦距以内，成正立的放大的虚象。

显微镜成象原理：第二章、显微镜的主要光学技术参数第一节数值孔径（Numerical Aperture，NA）数值孔径（NA）是物镜前透镜与被检物体间介质的折射率（η）和孔径角（u）半数正弦的乘积。

用公式表示：NA= ηsin u/2数值孔径代表了物镜或聚光镜光通量的大小，是衡量物镜或聚光镜性能高低的重要指标。

第一章走近细胞实验一用显微镜观察多种多样的细胞【实验目的】知识目标：认识显微镜的结构，初步掌握使用显微镜的方法。

能力目标：能独立使用显微镜，观察到清晰的图像。

情感目标：认同显微镜的规范操作方法，爱护显微镜。

【重点、难点】显微镜的使用方法；规范使用显微镜。

【知识链接】通过本节课的学习，我们认识了显微镜的结构和使用方法，这将为第三章第二节学习《用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体》的实验打下基础。

【学习过程】一、光学显微镜的结构和显微镜的使用●基础知识： 1．结构：光学部分：目镜、镜筒、物镜、和（有平面镜和凹面镜）机械部分：镜座、镜柱、镜臂、（上有通光孔、压片夹）、镜头转换器、、。

注：目镜无旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越小；物镜有旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越大。

2．显微镜的使用（视频播放）（1）一般的使用程序：取镜安放→放置玻片标本→观察→高倍镜观察。

（2）低倍镜的使用方法①把所要观察的玻片标本放在上，用压住，标本要正对通光孔的。

②转动，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止。

③眼看目镜内，同时反向缓缓转动粗准焦螺旋，使镜筒，直到看到物像为止，再稍稍转动，使看到的物像更加清晰。

（3）高倍镜的使用方法选好目标：在下将需要观察的目标移到视野中央。

↓换用高倍镜：转动移走低倍物镜，换上↓调节亮度：调节，使视野亮度适宜↓调焦：缓慢调节，使物像清晰。

●典型例题1. 在使用显微镜的过程中，调光和观察时操作者的两眼应（）A.左眼注视目镜，右眼闭着B.右眼注视目镜，左眼闭着C.左眼注视目镜，右眼睁着D.右眼注视目镜，左眼睁着2. 关于“显微镜的结构和使用”的实验，用显微镜观察标本时，正确的操作顺序应是（）①把装片放在载物台上，使标本位于低倍镜的正下方②眼睛从侧面注视物镜，转动粗准焦螺旋使镜筒下降至离标本0.5 cm 处③转动转换器，使低倍物镜对准通光孔④调节反光镜，左眼注视目镜，使视野明亮⑤用左眼注视目镜，同时转动粗准焦螺旋使镜筒上升，直到看见物像；再用细准焦螺旋调节，使视野中的物像清晰⑥转动转换器使高倍物镜对准通光孔⑦转动细准焦螺旋，直到物像清晰 ⑧将要观察的物像移动到视野中央A.①③②④⑤⑦⑧⑥B.③④①②⑤⑧⑥⑦C.④③①⑦②⑥⑤⑧D.①②③④⑦⑥⑤⑧二、呈像原理、放大倍数计算方法●基础知识：3.4．显微镜成像特点：与实物相比是倒置的，即显微镜成像。