葡萄糖及葡萄糖注射液的质量分析

葡萄糖注射液含量的测定一．实验目的：1.利用旋光法、折光法、快速分析法考查一批葡萄糖注射液的质量。

2.掌握旋光法、折光法、快速分析法测定葡萄糖注射液的基本原理和操作方法。

二、实验原理：1.旋光法：旋光度：平面偏振光通过含有某些化学活性的化合物或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，旋转的度数称为旋光度。

使偏振光向右旋转以“+”号表示；使偏振光向左旋转以“–”号表示。

比旋度：当偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长和温度下测得的旋光度称为比旋度。

比旋度（或旋光度）可以用于区别或检查某些手性药物的纯杂程度，也可以用于测定其含量。

2.折光法：光线自一种透明介质进入另一透明介质时，由于两种介质的密度不同，光的进行速度发生变化，即发生折射现象。

折光率n=sini/sinr,其中i为入射角；r为折射角n的影响因素：温度和光线波长,T越高，n越小;λ越小，n越大测定折光率可以区别不同的油类或检查某些药品的纯杂程度3.快速分析法：葡萄糖为多羟基醛，具有还原性。

在酸性介质中，过量的标准碘溶液将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，剩余的碘在酸性介质中用硫代硫酸钠返滴定。

三、实验步骤：1.旋光法：测定管（葡萄糖注射液冲洗数次）中缓缓注入供试品没过测定管内径，无气泡生成，放入旋光以内，测旋光度，三次取平均值，蒸馏水为空白校正。

其中L 为测定管长度（单位为分米）。

2.折光法：调节零点：将折光计棱镜面用擦镜纸擦净，棱镜中央滴蒸馏水1-2滴，合闭棱镜，旋转分界调节旋钮，使标尺读数为1.3330（20℃时蒸馏水的折光率），调节补偿棱镜螺旋，使明暗分界线清晰（用小钥匙插入观察镜的筒旁小孔内的螺钉上，轻轻转动），直到明暗线恰好移到十字交叉的交叉点上，零点校正结束。

测折光率：分开两面棱镜，用擦镜纸擦净折光计棱镜面，棱镜中央滴葡萄糖注射液1-2滴，合闭棱镜，调节补偿棱镜螺旋，使明暗分界线清晰，旋转分界调节旋钮，使明暗线对准在十字交叉的交叉点上，读数到小数点后四位。

葡萄糖杂质检查及葡萄糖注射液分析实验报告2014实验任务1. 了解葡萄糖的生产工艺和用途；2. 掌握葡萄糖杂质检查方法和原理；3. 掌握葡萄糖注射液分析方法和原理；4. 能够进行葡萄糖杂质检查和葡萄糖注射液分析。

实验原理1. 葡萄糖杂质检查方法葡萄糖杂质检查方法主要包括聚丙烯酰胺凝胶电泳法、高效液相色谱法等方法。

（1）聚丙烯酰胺凝胶电泳法聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种分离和鉴定生物大分子的方法。

具体步骤如下：①提取样品中的蛋白质；②将蛋白质和载体混合；③电泳分离：将混合溶液经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离；④染色：用银染或阿姆氏染色法进行染色；⑤识别：根据蛋白质的分子量和数量进行识别。

（2）高效液相色谱法高效液相色谱是一种快速、高效、灵敏的分离和分析技术。

其原理是将样品中的化合物与流动相相互作用，从而在色谱柱中分离出不同的化合物。

其步骤如下：①样品装柱：将样品装入流动相中并注入柱子中；②分离：样品在柱子的填充剂中发生相互作用，从而被分离；③检测：检测出某种化合物的存在与否。

2. 葡萄糖注射液分析方法葡萄糖注射液分析方法主要包括表观比旋法、电化学测定法、高效液相色谱法等方法。

（1）表观比旋法表观比旋法是将样品溶液通过旋光仪测定其旋光度，从而确定其旋光值并计算出其对应的浓度的一种分析方法。

其步骤如下：①加装葡萄糖样品溶液；②测量旋光度。

（2）电化学测定法电化学测定法是利用电化学反应所产生的电位和电流等物理量对样品中含量进行测定的方法。

其步骤如下：①选用合适的电极；②测定工作电极的电位变化；③计算出样品的含量。

实验步骤1. 葡萄糖杂质检查方法2. 葡萄糖注射液分析方法（1）表观比旋法步骤：①取适量的葡萄糖注射液样品；②测量旋光度。

（3）高效液相色谱法步骤：①取适量的葡萄糖注射液样品；②上样：将葡萄糖注射液样品通过进样口注入色谱柱子；③保留时间：使葡萄糖在色谱柱子中停留一段时间，与填充剂相互作用，从而发生分离；④检测：用检测器检测出某种化合物的存在与否。

葡萄糖氯化钠注射液的质量分析本品为葡萄糖或无水葡萄糖与氯化钠的灭菌水溶液。

(45g:4.5g:500ml)［实验操作流程］-:查资料，设计方案本容在《中国药典》2010版二部正文929页、《药物检验技术》、Baidu中查找到二:性状及鉴别性状：本品为无色的澄明液体。

鉴别：(1)葡萄糖葡萄糖是还原性糖操作步骤取本品2ml,缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉(2)氯化物本品显氯化物的鉴别反应。

操作步骤取供试品溶液lml ,加稀硝酸使成酸性后,滴加硝酸银试液,即生成白色凝孚撚沉淀,分离沉淀加氨试液即溶解,再加稀硝酸酸化后,沉淀复生成。

(3 )钠盐本品显钠盐的鉴别反应。

操作步骤取钳丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即成鲜黄色。

三：制剂常规检查（-）pH 值原理酸度采用PH计法测定（PH值为3.5 ~ 5.5 ）步骤1•标准缓冲液的配制精密称取在115±5°C干燥2-3小时的邻苯二甲酸氢钾0.506g,加水使溶解并稀释至50ml;精密称取在115°C±5°C干燥2-3个小时的无水磷酸氢二钠0.355g与磷酸二氢钾0.340g, 加水使溶解并稀释至100ml。

2•依准确PH值对仪器进行校正采用标准缓冲液校正仪器3. 用纯化水冲洗电极,用滤纸吸干,j各电极插入被测溶液中,待电极反应平衡,即为供试液的pH值，反复测两次,取均值。

（二）5•羟甲基糠醒原理葡萄糖在高温加热灭菌时,易分解产生5-疑甲基糠醛,属于葡萄糖的杂质。

5-疑甲基糠醛分子具共梔双烯结构，在284nm波长处有紫外吸收。

操作步骤精密臺取本品适星〈约相当于葡萄糖O.lg）,置50ml量瓶中加水稀释至刻虧摇匀照紫夕卜可见分光光度法，在284nm的波长处测定，吸光度不得大于0.25。

（三）细菌毒素原理本品利用鳌试痢检测或呈化革兰阴性菌产生的细菌毒素，以判断供试品中细菌毒素的限呈是否符合规走。

实验二葡萄糖注射液分析实验目的：1、掌握pH值测定原理和pH计的正确操作。

2、掌握比旋度的概念、求算方法和旋光法测定旋光性物质含量的原理与计算。

3、掌握剩余碘量法测定葡萄糖注射液的操作要点。

4、了解注射液杂质检查的一般项目实验原理：[鉴别] 取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中即生成红色沉淀。

[杂质检查]葡萄糖注射液在高温加热灭菌时，易分解产生5-羟甲基糠醛：利用5-羟甲基糠醛在284nm的波长处有吸收，而葡萄糖无吸收，将样品配制成一定浓度的溶液，在284nm的波长处测定，规定吸收度不得大于0.32来控制5-羟甲基糠醛的量[含量测定]1、采用旋光法测定葡萄糖含量。

根据测得供试品的旋光度与2.0852相乘，计算出葡萄糖在供试品中的百分比浓度和标示量的百分比.2、采用剩余碘量法测定葡萄糖含量。

根据糖有还原性，与有氧化性的碘发生反应，剩余的碘用硫代硫酸钠回滴，从而计算糖的含量。

实验器材：试药：氨试液、碳酸钠、碘化钾、碘滴定液（0.05 mol/L）、2 mol/L盐酸、硫代硫酸钠滴定液（0.1 mol/L）、淀粉指示剂、葡萄糖注射液。

仪器：旋光度测定仪、小锥型瓶（100ml）、试剂瓶、酸式滴定管、烧杯、洗耳球、量筒。

实验内容与方法：本品为葡萄糖或无水葡萄糖的灭菌水溶液。

含葡萄糖（C6H12O6·H2O）应为标示量的95.0%~105.0%。

[鉴别] 取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

[检查]pH值应为3.2—5.5（附录A）。

5-羟甲基糠醛精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1.0g），置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，在284nm的波长处测定，吸收度不得大于0.32。

重金属取本品适量（约相当于葡萄糖3g），必要时，蒸发至约20mL，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL与水适量使成25mL，置25mL纳氏比色管中。

另取标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释成25mL，置另一25mL纳氏比色管中。

实验一：葡萄糖的性状、鉴别和检查一、实验目的：1、了解药品鉴别、检查的目的和意义；2、掌握药品性状测定方法和性状的正确描述；3、掌握药物的常用鉴别方法和原理；4、掌握药品中一般杂质检查的方法原理和限量计算方法。

二、实验原理和内容药用葡萄糖或无水葡萄糖为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜。

在水中易溶、在乙醇中微溶，利用葡萄糖具有的还原性或其它特性以及存在杂质的特性可对葡萄糖进行鉴别和杂质检查。

三、实验材料、药品和仪器清单红外光谱仪；纳氏比色管；小烧杯；电子天平；台秤。

碱性酒石酸铜试液；酚酞指示液；氢氧化钠滴定液(0.02mol/L，学生用备好的0.1 mol/L稀释即得)；95％乙醇；标准氯化钠溶液(0.01％)；稀硝酸；硝酸银试液；标准硫酸铁铵溶液()标准硫酸钾溶液(0.01％)；碘试液；磺基水杨酸溶液；硫氰酸铵溶液；标准铁溶液(0.001％)；25%氯化钡溶液；葡萄糖-水合物。

四、实验内容（或实验步骤）1、鉴别：(1) 取本品约0.2g于小试管中，加水5m1溶解后，缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀（稍微加热后可加速沉淀的生成）。

(2) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集464图)一致。

2、检查：酸度取本品 2.0g于小烧杯中，加水20m1溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)0.20m1（约1D），应显粉红色。

溶液的澄清度与颜色取本品5.0g于小烧杯中，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10m1，溶液应澄清无色。

乙醇溶液的澄清度取本品1.0g于小烧杯中，加95％乙醇30m1溶解，溶液应澄清。

氯化物取本品0.6g于50mL纳氏比色管中，加水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸(10.5→100学生自配）10ml；溶液如不澄清，应滤过,加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。

另取该品种项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，即得对照溶液。

葡萄糖氯化钠注射液的质量分析本品为葡萄糖或无水葡萄糖与氯化钠的灭菌水溶液。

(45g:4.5g:500ml)[实验操作流程]一：查资料，设计方案本内容在《中国药典》2010版二部正文929页、《药物检验技术》、Baidu中查找到二：性状及鉴别性状：本品为无色的澄明液体。

鉴别：（1）葡萄糖葡萄糖是还原性糖操作步骤取本品2ml,缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉（2）氯化物本品显氯化物的鉴别反应。

操作步骤取供试品溶液1ml，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀，分离沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。

（3）钠盐本品显钠盐的鉴别反应。

操作步骤取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即成鲜黄色。

三：制剂常规检查（一）pH值原理酸度采用PH计法测定（PH值为3.5～5.5）步骤 1.标准缓冲液的配制精密称取在115±5℃干燥2-3小时的邻苯二甲酸氢钾0.506g, 加水使溶解并稀释至50ml;精密称取在115℃±5℃干燥2-3个小时的无水磷酸氢二钠0.355g与磷酸二氢钾0.340g,加水使溶解并稀释至100ml。

2.依准确PH值对仪器进行校正采用标准缓冲液校正仪器3. 用纯化水冲洗电极，用滤纸吸干，将电极插入被测溶液中，待电极反应平衡，即为供试液的pH值，反复测两次，取均值。

（二）5-羟甲基糠醛原理葡萄糖在高温加热灭菌时，易分解产生5-羟甲基糠醛，属于葡萄糖的杂质。

5-羟甲基糠醛分子具共轭双烯结构，在284nm波长处有紫外吸收。

操作步骤精密量取本品适量〈约相当于葡萄糖0.1g),置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法,在284nm的波长处测定,吸光度不得大于0.25。

（三）细菌内毒素原理本品利用鳌试剂检测或量化革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定。

操作步骤1、根据鰲试剂灵敏度的标示值（λ），将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在漩涡混合器上混匀15分钟，然后制成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在漩涡混合器上混匀30分钟。

葡萄糖注射液生产中应注意的几个问题作者：黄国锋来源：《科学与财富》2015年第28期摘要：葡萄糖注射液是一种常用的静脉注射液，其在医学药学领域有着广泛的应用，尤其是在外科手术中，发挥着重要的治疗效果。

在对葡萄糖注射液进行生产时，需要优化生产工艺流程，还要做好原材料的选择，防止葡萄糖溶液出现变色情况，及时清除溶液中的雾状物。

葡萄糖通过静脉注射进入人体后，会释放出人体所需的热量，可以治疗低血糖等疾病。

如果葡萄糖注射液中存在微生物，会威胁人体的健康，严重时还会造成医疗事故。

关键词：葡萄糖；注射液；生产；原料；变色；清除人体在出现低血糖症状后，需要及时补充糖类以及热量，在医院治疗时，医生会为病人注射葡萄糖，在与糖原结合后，可以合成血钾离子，降低血钾浓度，所以，葡萄糖注射液还具有质量高钾血症的作用。

葡萄糖注射液在临床治疗中发挥着重要的作用，本文对葡萄糖注射液生产中存在的问题进行了分析，还对提高葡萄糖注射液生产质量的方法进行了介绍，希望对药厂提供一定帮助，认识到药品质量控制的重要意义，减少医疗事故出现的概率，保证病人尽快恢复健康。

1、控制原料的质量葡萄糖也叫做右旋糖，其是由淀粉糖化形成的，主要构成成分包括糊精、麦芽糖以及葡萄糖等。

在葡萄糖中还可能有未完全糖化的糊精。

在对葡萄糖注射液进行生产时，一定要控制好原料的质量，还要对生产设备进行灭菌消毒，避免器械中存在大量的杂质，比如氯化物、水解蛋白等。

如果原料中存在蛋白质，在经过加热灭菌这最后一道工序后，葡萄糖注射液中就会产生絮状沉淀物，这会影响溶液的澄明度，导致药液出现浑浊，不符合相关质量、安全要求。

葡萄糖中还含有结晶水，在结晶的状态下会产生白色的结晶体，有时还会出现颗粒粉末状物质，如果改变生产流程，采用无水甲醇重新结晶，则可以生产出无水葡萄糖。

葡萄糖注射液的生产工艺很多，在选择的过程中，需要结合葡萄糖原料。

确定葡萄糖注射液生产流程时，要保证其不存在杂质，否则会影响葡萄糖药液的质量，使其呈现出浑浊的状态。

葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定一、实验目的1、掌握间接碘量法测定葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定原理和方法。

2、掌握间接碘量法的操作。

二、实验原理氧化还原滴定法就是以氧化还原反应为基础的滴定分析方法。

它的应用范围非常广泛，但由于氧化还原反应比较复杂，有些反应的反应速率较慢，有些反应副反应较多，因此应用时应严格控制反应条件。

根据滴定剂的不同，氧化还原滴定法可分为高锰酸钾法、重铬酸钾法、碘量法、铈量法和溴酸钾法等。

其中碘量法又可分为直接碘量法和间接碘量法两种，常用淀粉作为指示剂。

本实验采用间接碘量法和Na2S2O3溶液滴定析出的I2从而实现对葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定。

I2在水中的溶解度很小，且易挥发，见光易分解，I-很容易被空气中的O2氧化，因此应在反应完全后立即滴定，且勿剧烈摇动。

葡萄糖分子中所含有的醛基，能在碱性条件下用过量的I2氧化成羧基，发生的反应为：I2 + 2OH- = I- + IO- + H2OCH2OH(CHOH)4CHO + IO- + OH- = CH2OH(CHOH)4COO- + I- + H2O过量的IO-在碱性溶液中歧化为IO3-和I-：3 IO-= IO3- +2 I-此溶液经酸化后又析出I2：IO 3-+5I - + 6H + = 3I 2 + 3H 2O 然后以硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的I 2： 2S 2O 32-+I 2=S 4O 6+2I - 由上述反应关系式可知：n(I 2)=n(C 6H 12O 6)+ 12 n(Na 2S 2O 3)即：n(C 6H 12O 6) = n(I 2) –122S 2O 3)葡萄糖注射液中葡萄糖的含量的计算公式为：222366126126(CHO )()1[cV -(cV )]M 2=V N a S O CH O I 式样（）式中：ρ（C 6H 12O 6）为葡萄糖的质量浓度；V （试样）为滴定过程中所消耗的葡萄糖注射液试样的体积；M(C 6H 12O 6)的摩尔质量；(CV)(I2)为I 2消耗的物质量；(CV)(Na 2S 2O 3) 为Na 2S 2O 3消耗的物质量 三、实验用品仪器：容量瓶（250mL ） 移液管（25mL ） 碱式滴定管（50mL ） 锥形瓶（250mL ） 碘量瓶（250mL ） 小烧杯 小量筒 洗瓶药品：K 2Cr 2O 7(A.R) Na 2S 2O 3·5H 2O(固) I 2（固） KI(固) 葡萄糖注射液(50g/L) HCl(6mol/L) NaOH(1mol/L) H 2SO 4(1mol/L) 淀粉指示剂（5g/L ） 四、实验步骤1、 0.1mol ·l -1Na 2S 2O 3溶液的配制与标定（1）K 2Cr 2O 7标准溶液的配制 准确称取1.0～1.2gK 2Cr 2O 7分析纯于小烧杯中，加少量水溶解并转入250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，计算其准确浓度。