rhNRG-1β通过ErbB2-ERK-SIRT1信号通路保护心肌免受放射损伤

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神经调节蛋白1通过erk1-2通路减轻心肌细胞缺氧复氧损伤

conditions, H/R group treated with DMEM without drugs under H/R conditions, NRG-1 group treated with DMEM contai
ning NRG-1 under H/R conditions, and NRG-l+PD group treated with PD98059 containing NRG-1 and ERK1/2 inhibitors
levels of cleav源自d caspase-8, cleaved caspase-9, cleaved caspase-3, nuclear factor kappa B ( NF-kB ) , ERK1/2 in cells
and the contents of tumor necrosis factor alpha ( TNF-a) , interleukin 1 beta ( IL-1P) , interferon gamma ( IFN-7) in
达水平及培养基中TNF-aJL-ipjFN-7的含量明显高于NRG-1组。结论 NRG-1通过激活ERK1/2通路减轻心
肌细胞H/R损伤。
［中图分类号］R5；R363
［文献标识码］A
Neuregulin-1 alleviates hypoxia/reoxygenation injury of cardiomyocytes through
介素13(IL-ip)、丫干扰素(IFN-7)的含量明显高于对照组；NRG-1组细胞的OD490水平及细胞中ERK1/2的表达水
平明显高于 H/R 组，细胞凋亡率、细胞中 cleaved Caspase-8、cleaved Caspase-9 s cleaved Caspase-3 ^NF-kB 的表达水平

NRG-1通过SIRT1-NOX2通路减轻血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大

NRG-1通过SIRT1-NOX2通路减轻血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大王有恒;王学惠【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2024(53)3【摘要】目的探究神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRG-1)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)诱导的心肌肥大的保护作用及其潜在机制。

方法体外培养大鼠心肌细胞系(H9C2),使用Ang-Ⅱ处理H9C2细胞,构建Ang-Ⅱ诱导的心肌肥大细胞模型。

给予NRG-1干预H9C2细胞,通过测量心肌细胞表面积和活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,检测线粒体膜电位,通过Western blot法检测心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)及NADPH氧化酶2(NADPH oxidase isoform 2,NOX2)蛋白表达,观察NRG-1的保护作用。

结果与模型组比较,NRG-1能够明显降低心肌细胞表面积(P<0.05),减少肥大标志物ANP、BNP表达(P<0.05),降低ROS水平(P<0.05),升高线粒体膜电位(P<0.05),增加SOD1、SIRT1表达(P<0.05),降低NOX2蛋白水平(P<0.05)。

SIRT1抑制剂EX527可以阻断NRG-1的保护作用。

结论NRG-1可改善Ang-Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,其潜在机制可能与SIRT1-NOX2氧化应激通路有关。

【总页数】7页(P120-126)【作者】王有恒;王学惠【作者单位】新乡医学院第一附属医院心血管内科、心脏病诊疗中心;新乡医学院【正文语种】中文【中图分类】R54【相关文献】1.参麦注射液对大鼠心肌肥大模型血管紧张素Ⅱ介导的钙调神经磷酸酶通路的干预效应2.塞来昔布对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大及MAPK/ERK通路的影响3.林西替尼(OSI-906)通过AMPK/SIRT3信号通路抑制血管紧张素II诱导的小鼠心肌肥大4.姜黄素通过激活ATRAP信号通路抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大5.川芎嗪通过抑制环氧化酶2/前列腺素E2途径减轻血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人参皂苷Rg1保护心肌细胞免于缺氧-复养损伤涉及PKCε-activatedERK1／2径路

人参皂苷Rg1保护心肌细胞免于缺氧-复养损伤涉及PKCε-activatedERK1／2径路朱丹;黄秀兰【期刊名称】《中国药理通讯》【年(卷),期】2009(026)002【摘要】目的：人参皂苷Rg1是人参、三七等人参属药材的主要活性成分。

众多研究表明人参总皂苷和三七总皂苷具有心血管方面的活性及治疗作用。

本研究旨在观察人参皂苷Rg1单体心肌保护作用及作用机制。

方法：培养大鼠乳鼠心肌细胞，缺氧3小时复养1小时后检测心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）的渗漏，心肌细胞内总超氧化物歧化酶（T-SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性，还原型谷胱甘肽的含量。

利用DFH为探针检测细胞内活性氧（ROS）水平，Fluo-4探针检测细胞内钙水平。

采用WesternBlot技术检测细胞PKCe在细胞膜和细胞浆的分布，以及ERK1/2、P38和JNK的蛋白磷酸化水平，选择PMA为PKCε的激动剂，PD98059、SP600125、SB203580为ERK1/2、P38和JNK的抑制剂。

结果：人参皂苷Rg1具有缺氧一复氧损伤保护作用，可明显降低乳酸脱氢酶的渗漏。

人参皂苷Rg1可抑制ROS的产生，并可升高细胞内的抗氧化酶活性。

与模型组比较Rg1 120μM处理组T-SOD、CAT、GSH分别升高85．8％、73．1％和36．9％，细胞内ROS水平下降了63．8％。

【总页数】2页(P46-47)【作者】朱丹;黄秀兰【作者单位】中央民族大学中国少数民族传统医学研究院,北京100081【正文语种】中文【中图分类】R286.0【相关文献】1.人参皂苷Rg1对原代培养心肌细胞缺氧复氧损伤的作用 [J], 韩翠宁;李玉红2.人参皂苷Rg1对氧糖剥夺/复氧复糖损伤PC12细胞的保护机制 [J], 叶劲涛;李锋涛;宋焕瑾;薛建利;林磊;程斌;3.人参皂苷Rg1对氧糖剥夺/复氧复糖损伤PC12细胞的保护机制 [J], 叶劲涛;李锋涛;宋焕瑾;薛建利;林磊;程斌4.人参皂苷Rg1下调NOX2-NLRP1减轻PC12细胞缺氧再复氧损伤的作用 [J], 黄茸茸;陆松侠;孙玲玲;张晗;丁世欣;李维祖5.人参皂苷Rb1预适应对肥厚乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用 [J], 郭佳;刘小康;武文;张晓文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

RhoA-ROCK1-Erk1-2-Bax信号通路在亚硒酸钠诱导白血病细胞凋亡中的调节作用共3篇

RhoA-ROCK1-Erk1-2-Bax信号通路在亚硒酸钠诱导白血病细胞凋亡中的调节作用共3篇RhoA-ROCK1-Erk1/2-Bax信号通路在亚硒酸钠诱导白血病细胞凋亡中的调节作用1RhoA-ROCK1-Erk1/2-Bax信号通路在亚硒酸钠诱导白血病细胞凋亡中的调节作用白血病是一种由恶性白细胞在骨髓或外周血中异常增生所引起的疾病，是临床上很常见的一种血液系统肿瘤。

尽管白血病患者可以通过化疗、放疗等手段得到部分治疗，但由于副作用较大和药物抗性的发生，这些手段已经不能完全解决白血病的治疗。

近年来，通过对各种物质的作用及其机理研究，发现亚硒酸钠可以诱导白血病细胞凋亡，为白血病治疗提供了一种新途径。

亚硒酸钠是一种含硒化合物，具有广泛的生物学功能，诱导细胞凋亡是其重要的生理效应之一。

研究发现，在亚硒酸钠诱导继发性T细胞淋巴瘤细胞凋亡中，RhoA-ROCK1-Erk1/2-Bax信号通路发挥着重要的作用。

这个信号通路中的几个蛋白质都是细胞中的信号传输分子，它们共同协作，对亚硒酸钠的作用做出了反应。

首先，亚硒酸钠可以激活RhoA蛋白，RhoA的激活可导致ROCK1的激活。

ROCK1被激活后可以使Erk1/2的活性上调，从而增强了Bax的表达。

Bax是Bcl-2家族中的一种成员，它直接参与到细胞凋亡的过程中。

大量的实验研究表明，Bax蛋白能够使线粒体膜通透性增加，从而引发细胞内钙离子的紊乱，进一步诱导细胞机能的逆转。

在这个信号通路中，Bax的表达受到Erk1/2的调节，而Erk1/2的活性又受到RhoA和ROCK1的调节，它们协同作用共同调节Bax的表达来响应亚硒酸钠的作用。

通过这些研究可以发现，亚硒酸钠可以诱导白血病细胞凋亡，并且这个过程中的信号通路非常复杂，涉及到多种蛋白质的共同调控。

通过这些研究成果，我们可以更加深入的了解亚硒酸钠的作用机理，以此为基础，可以开发更好的治疗手段，在白血病治疗方面取得更好的疗效。

NRG-1及其受体ErbB在心血管系统中的研究进展

NRG-1及其受体ErbB在心血管系统中的研究进展
祝雪莹
【期刊名称】《中国心血管病研究》
【年(卷),期】2018(016)006
【摘要】作为表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）家族中的一员，NRG-1可以诱导人体乳腺上皮细胞、神经胶质细胞、神经元细胞及肌细胞等多种细胞的增殖和分化过程。

迄今为止，关于NRG-1及其受体ErbB（human epidermal growth factor receptor）在心血管系统中作用的各项研究尚处于初级阶段，但已证明NRG-1／ErbB信号通路在心脏的发育、心肌增殖分化及心脏传导系统的形成过程中起到了重要作用，在心血管急慢性疾病中对心肌细胞亦有着一定的保护功能。

【总页数】5页(P481-485)
【作者】祝雪莹
【作者单位】430060湖北省武汉市,武汉大学人民医院心内科,武汉大学心血管病研究所,心血管病湖北省重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R54
【相关文献】
1.基于NRG-1及其受体ErbB4探讨醒脑开窍针法在缺血性中风中的作用 [J], 张丽丽;刘宝山;褚芹
2.β3-肾上腺素能受体在心血管系统中的研究进展 [J], 孔一慧;李为民
3.G蛋白偶联的雌激素受体在心血管系统中的研究进展 [J], 罗鹏;邢方凯
4.Apelin-Apelin受体信号系统在心血管系统中的作用研究进展 [J], 于兴隆;葛志明
5.NRG-1/ERBB信号通路在心血管系统中的研究进展 [J], 刘欢(综述);李艳(审校)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

NRG1-ErbB2信号通路对骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞及IL-1β的影响

NRG1-ErbB2信号通路对骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞及IL-1β的影响蒋晶晶;姚鹏;田悦;吴秀英;张锦【摘要】目的探讨NRG1-ErbB2信号通路对骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞和IL-1β的影响.方法雌性SD大鼠,随机分为3组,每组12只.Sham组(假手术组);CIBP组:大鼠胫骨内注射Walker256乳腺癌细胞构建骨癌痛模型;CIBP+ PD168393组:构建CIBP模型后6d,鞘内注入PD168393 10 μg,每日1次,连续9d,其余组鞘内注入生理盐水.接种瘤细胞后14 d,检测大鼠脊髓背角GFAP、OX42和IL-1β的变化.结果接种瘤细胞后14d,CIBP组大鼠GFAP、OX42积分光密度值明显高于Sham组,差异有统计学意义(P＜0.01),肿瘤细胞的植入能诱导大鼠同侧脊髓背角GFAP和OX42的表达显著增加,并使星形胶质细胞和小胶质细胞的胞体肥大.而给予ErbB2受体抑制剂PD168393可明显抑制脊髓背角神经化学物质的改变,GFAP和OX42的表达均明显降低(P＜0.01).CIBP组IL-1β于接种瘤细胞后14d表达增加,明显高于Sham组(P＜0.01),给予PD168393能显著抑制IL-1β表达增加(P＜0.01).结论大鼠胫骨接种瘤细胞后,脊髓背角内星形胶质细胞和小胶质细胞被广泛激活,IL-1β释放增加,阻断NRG1-ErbB2受体信号通路能有效抑制脊髓胶质细胞的表达和活化及炎症介质IL-1β的释放,从而产生镇痛作用.【期刊名称】《实用药物与临床》【年(卷),期】2016(019)006【总页数】4页(P657-660)【关键词】骨癌痛;NRG1;ErbB2;脊髓;胶质细胞;鞘内注射;痛觉过敏【作者】蒋晶晶;姚鹏;田悦;吴秀英;张锦【作者单位】中国医科大学附属盛京医院麻醉科,沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院疼痛科,沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院麻醉科,沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院麻醉科,沈阳110004;中国医科大学附属盛京医院麻醉科,沈阳110004【正文语种】中文神经调节因子(Neuregulin1,NRG1)属于表皮生长因子类蛋白，在多种组织中都有表达。

Erk信号传导通路与细胞周期调控

Erk信号传导通路与细胞周期调控马洪德;蒋明德;曾维政【期刊名称】《西南国防医药》【年(卷),期】2003(013)005【摘要】@@ 近年来,丝裂原激活蛋白激酶(Mitogen activated protein kinase,MAPK)信号传导通路的研究引人注目,细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular regulated protein, ERk)为MAPK家族重要成员,围绕肿瘤、血液等细胞领域的研究表明:ERK信号通路是多数生长因子、细胞因子调控细胞增殖的重要途径.进一步研究证实,ERK信号传导通路参与了细胞周期调控.本文对近期ERK 信号传导通路调控细胞周期的研究扼要综述如下:【总页数】3页(P556-558)【作者】马洪德;蒋明德;曾维政【作者单位】成都军区总医院消化内科,成都,610083;成都军区总医院消化内科,成都,610083;成都军区总医院消化内科,成都,610083【正文语种】中文【中图分类】R392【相关文献】1.MicroRNA-490-5p靶向CDK1通过ERK信号通路参与胃癌细胞周期调控 [J], 侯东泽;代劲松;邓志波;颜登高2.Erk信号传导通路调控乙醛刺激的肝星状细胞Ⅰ型胶原分泌及TGF-β1 mRNA的表达 [J], 蒋明德;解方为;欧阳学农;曾维政;甘新宇;马洪德3.Erk信号传导通路调控乙醛刺激的肝星状细胞Ⅰ型胶原分泌的研究 [J], 解方为;蒋明德;曾维政;甘新宇;马洪德;秦建平4.ERK信号传导通路调控乙醛刺激的肝星状细胞Na+/Ca2+泵mRNA表达的研究[J], 蒋明德;解方为;曾维政;甘新宇;马洪德;欧阳学农5.ERK信号传导通路与肝星状细胞周期调控 [J], 蒋明德;马洪德;解方为因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

神经调节蛋白-1对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

神经调节蛋白-1对心肌缺血再灌注损伤的保护作用王富华;刘雪静;王欢;左波;宋祝;黄薇;王贵松【期刊名称】《生理科学进展》【年(卷),期】2016(047)003【摘要】神经调节蛋白-1（neuregulin-1，NRG-1）最早被发现在神经系统发育中起着重要的调节作用。

目前研究发现 NRG-1及其受体 ErbB （erythroblastic leukemia viral oncogene homolog，ErbB）在心肌及血管细胞中高表达，在慢性心衰，扩张性心肌病及心肌梗死中均起到明显的保护作用。

近来研究发现 NRG-1／ErbB 通路在心肌缺血再灌注损伤中也起到保护作用，有望成为治疗心肌缺血再灌注损伤的新药物靶点。

多种机制可能参与其中，例如：减少心肌细胞凋亡；减轻心脏氧化应激损伤；抑制炎症反应等。

本文将对 NRG-1在心肌缺血再灌注损伤中的治疗作用及可能机制进行综述。

【总页数】4页(P223-226)【作者】王富华;刘雪静;王欢;左波;宋祝;黄薇;王贵松【作者单位】北京大学第三医院心内科，北京 100083;北京大学医学部心血管研究所，北京 100191;北京大学医学部心血管研究所，北京 100191;北京大学第三医院心内科，北京 100083;北京大学第三医院心内科，北京 100083;北京大学医学部心血管研究所，北京 100191;北京大学第三医院心内科，北京 100083【正文语种】中文【中图分类】R541;R977【相关文献】1.神经调节蛋白-1对大鼠心肌缺血/再灌注损伤保护作用的研究 [J], 方珊娟;吴学思;王春梅;聂绍平2.神经调节蛋白对心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究进展 [J], 周芹(综述);王龙(审校)3.胸交感神经阻滞对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 樊腾;李晓芳;张红伟;靳广丽;马闻苛;秦鹏宇;岳修勤4.重组人可溶性血栓调节蛋白对小鼠脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及机制研究 [J], 黄山鉴;韦贵宁;姚人银;邓小玲;黄祖贵5.AKT/mTOR信号通路介导神经病理性疼痛对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 李玉为;张巧云;曹亚红;王家友;李锐因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

神经调节蛋白1β与卡托普利对慢性心衰大鼠r心肌纤维化及转化生长因子β1的影响

神经调节蛋白1β与卡托普利对慢性心衰大鼠r心肌纤维化及转化生长因子β1的影响王学惠;朱秀英;贵英英;赵国安【摘要】目的:探讨神经调节蛋白1β(neuregulin-1β,NRG-1β)与卡托普利联合应用对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化及转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响.方法:将青年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、心衰组、NRG组、卡托普利组和联合用药组,采用腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘法制备心衰模型.通过超声心动图评价大鼠心功能;Masson染色检测心肌纤维化程度,并计算胶原容积分数(colla-gen volume fraction,CVF);放射免疫法检测血浆中血管紧张素II(Ang II)的浓度;Western blot检测各组大鼠左心室心肌组织中TGF-β1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平;透射电镜观察左室心肌的超微结构.结果:与心衰组比较,NRG组、卡托普利组及联合用药组左心室舒张末直径和心肌纤维化程度明显降低,射血分数明显升高(P<0.05);TGF-β1和α-SMA 蛋白表达明显降低(P<0.05);电镜下显示,NRG组、卡托普利组及联合用药组心肌纤维化程度较心衰组明显减轻,而与NRG组和卡托普利组相比,联合用药组效果更加显著(P<0.05).结论:神经调节蛋白1β与卡托普利单用及联合应用均可有效改善心功能、抑制心肌纤维化,且联合用药的疗效优于单独用药.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2018(034)008【总页数】6页(P1501-1506)【关键词】神经调节蛋白1β;卡托普利;心力衰竭;心肌纤维化;转化生长因子β1【作者】王学惠;朱秀英;贵英英;赵国安【作者单位】新乡医学院第一附属医院心血管内科,新乡医学院心血管病诊疗中心,河南卫辉453100;新乡医学院第一附属医院急诊科,河南卫辉453100;新乡医学院第一附属医院心血管内科,新乡医学院心血管病诊疗中心,河南卫辉453100;新乡医学院第一附属医院心血管内科,新乡医学院心血管病诊疗中心,河南卫辉453100【正文语种】中文【中图分类】R541.5;R363.2心脏重构伴随慢性心力衰竭的发生发展，是心力衰竭(简称心衰；heart failure,HF)发生发展的核心机制，包括心肌细胞的肥大和间质的纤维化[1]。

转化生长因子β1和细胞外信号调节激酶1／2在冠心病猝死早期心肌缺血中的表达及意义

转化生长因子β1和细胞外信号调节激酶1／2在冠心病猝死早期心肌缺血中的表达及意义章丽霞;王宇;张丽华;牛彩琴【期刊名称】《川北医学院学报》【年(卷),期】2016(031)006【摘要】Objective:To observe the expressions of transforming growth factor-β1 (TGF-β1 )and extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2)in the myocardium of patients of sudden coronary death and to explore the significance of SCD diagnosis.Meth-ods:The heart samples of thirty cases of sudden coronary death were chosen as experiment group while the heart samples of fifteen cases of non sudden coronary death were chosen as control group.Immunohistochemical staining was employed to examine the expressions of TGF-β1 and ERK1/2 in the myocardium.Results:The expressions of TGF-β1 and ERK1/2 in experiment group was significantly high-er than those in control group,the t value of TGF-β1 was19.807,ERK1/2 was 15.478,two indicators between two groups were com-pared,the differences were statistically significant (P <0.01 ).The expressions of TGF-β1 positively related to ERK1/2 in SCD(r=0.64,P<0.01).Conclusion:TGF-β1/ERK1/2 signaling pathway could participate in the process of apoptosis,the detection of the positive expressions of two indicators in the myocardium may provide an objective index for the early pathological diagnosis of SCD.%目的：了解冠心病猝死（sudden coronary death，SCD）者心肌中 TGF-β1和 ERK1／2中的表达情况，探讨其对 SCD诊断的意义。

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结果
rhNRG-1β通过ErbB2信号通路挽救放射性心肌损伤
γH2AX被认为是DNA双链断裂的特异性标志，是辐射所致细胞损伤的重要指标，其水平与受损心脏功能密切相关。为探讨rhNRG-1β对照射所致心肌细胞损伤的影响，对照射后6h的γH2AX进行免疫荧光染色。
材料和方法
超声心动图评价心功能
将大鼠在麻醉下固定(3 %异氟醚烷)，用12 MHz超声探头和超声心动图采集各组大鼠心脏超声心动图图像。采用胸骨旁短轴视图对乳头肌水平的心脏进行二维成像。测量左室舒张末期(LVEDV)和收缩末期容积(LVESV),使用公式（LVEDV–LVESV） /LVEDV×100%计算LV射血分数（EF）。用公式(LVIDd-LVIDs)/LVIDd×100%根据左心室收缩内径（LVIDs）和舒张内径（LVIDd）的计算左心室短轴缩短率（FS）。
将细胞核用4‘，6-二咪基-2-苯基吲哚(DAPI；1μg/ml)染色5 min，在荧光显微镜或共聚焦显微镜下对样品进行分析。测定γ-H2AX在每个随机区域中的荧光强度，用Image Pro Plus 6.0软件计算每个心肌细胞中γ-H2AX的平均荧光强度。
材料和方法
ATP测定
用ATP比色/荧光法试剂盒测定培养的成年心肌细胞或大鼠心肌组织中的ATP水平。裂解1×106个细胞或将10mg组织在100μL的ATP测定缓冲液中进行匀浆，再用10 kDa MWCO旋转过滤器去蛋白。为了分析ATP水平，在酶标仪(SpectraMax M2)上测量了适当的反应混合物的荧光(RLU，λ激发=535/λ发射=587 nm)。
数据分析
对所有评估，至少进行了三个独立的实验(详见结果)，并使用Microsoft Excel和 GraphPad Prism 5.0软件进行了统计处理。数据表示为均值±标准偏差(SD)或均值 ±标准误差(SEM)。重复测量的单向或双向方差分析（ANOVA），随后进行 Bonferroni的多次比较事后检验，用于确定统计显著性差异。P值<0.05有统计学意义。所有通过光学或荧光显微镜获取的图像用Image Pro Plus 6.0进行分析，并使用Adobe Photos射与心脏局部照射
将生长在6孔板上的心肌细胞在5Gy(6MeV电子线,6A,4Gy/min)的15×15 cm2方野中照射。局部心脏照射大鼠，用4%水合氯醛麻醉，仰卧于四肢、头部固定板上。对它们接受CT扫描，然后用治疗计划系统(Elekta)评估心脏进行放射治疗计划模拟，以确定 90%等剂量曲线是否包括心脏。
材料和方法
心肌细胞分离和培养
用4%水合氯醛麻醉，颈脱位处死。取新鲜大鼠心脏，在Hank平衡盐溶液中切成 1-3 mm3，然后在37°C下DMEM/F-12中与胶原酶B(1.8 mg/ml)和D( 2.4mg/ml)作用12h。随后重复移取这些样品并通过200目筛网过滤。将上清液离心(每分钟 500转2分钟)，收集离心的心肌细胞。经差速附着消除成纤维细胞后，使用大口径移液管将心肌细胞以 1×105/ml细胞密度的镀在聚-L-赖氨酸/层粘连蛋白涂覆的 6孔板或载玻片上，保存在含10μM胞嘧啶1-β-D-阿糖醛酸苷、10%胎牛血清、 100 mg/ml链霉素、100 IU/ml青霉素和20mM肌酸一水合物的DMEM/F-12中48 小时。
背景
当被NRG-1激活时，ErbB2信号通路促进心肌细胞的存活和增殖，维持心肌肌节结构，维持细胞内Ca2+稳态并增强心脏泵功能，被认为是治疗心脏损伤的前瞻性靶点。
基于这些发现，一种由NRG基因编码的61氨基酸重组人神经调节-1β蛋白 (rhNRG-1β)包含免疫球蛋白结构域和和ErbB2和ErbB4激活所必需的EGF样结构域，已在临床心脏病治疗和临床研究中得到应用。在临床前研究中， rhNRG-1β改善了扩张型心肌病及缺血、病毒性和阿霉素所致心脏损伤模型中的心肌细胞存活率和心功能。最近，rhNRG-1β在一项II期临床试验中被证明能改善慢性心力衰竭患者的心功能。然而，rhNRG-1β对RHID的影响至今尚未见报道。
根据2，6-DPIP还原反应的速率进一步计算SDH活性，如当心肌线粒体蛋白催化底物时，FAD被还原为FADH，与2，6-DPIP还原反应相结合。
材料和方法
蛋白印迹法
在含10 mM Tris(pH 7.4)、100 mM NaCl、1mM EDTA、1mM EGTA、1mM NaF、 20 mM Na4P2O7、2mM Na3VO4、0.1%SDS、0.5%脱氧胆酸钠、1%Triton-X 100、 10%甘油、1mM PMSF、60 mg/mL抑肽酶、10 mg/mL亮肽、1mg/mL肽抑素的缓冲液中裂解。在12000 x g离心10 min后，用二辛可宁酸(BCA)蛋白测定法测定蛋白质浓度，然后将15 mg蛋白质装入SDS-PAGE凝胶中分离。
材料和方法
线粒体膜电位的测定
纯化线粒体与罗丹明标记溶液（10μg/ml罗丹明123在PBS中）培育15分钟，并用酶标仪在534 nm波长处测定荧光强度，激发波长为504 nm。(罗丹明123，激发 =504 nm；发射=534 nm)
细胞色素c氧化酶和琥珀酸脱氢酶活性的测定
将CCO活性定量为在分光光度计下550 nm处吸光度的变化，其中心肌线粒体蛋白催化将细胞色素c还原成氧化细胞色素c。
线粒体分离
用冷PBS洗涤心肌细胞，在H-培养基(70mM蔗糖，220mM甘露醇，2.5mM HEPES， pH7.4，含1mM PMSF的2mM EDTA，肽他汀、亮肽素、抑肽酶和抗蛋白酶各 1μg/ml )中用Dounce匀浆玻璃器匀浆。在多晶组织匀浆器中用两个5秒的脉冲将大鼠心脏组织细小的切碎和破坏。然后将粗提物用Dounce玻璃匀浆器匀化。采用差速离心法制备亚细胞组分。在4°C下1000×g离心10 min拉下细胞核和完整细胞，然后在 4℃下用10000×g离心上清液10 min获得线粒体级分。纯化后的线粒体测定线粒体膜电位(MMP)，或悬浮于线粒体贮液(300 mmol/L蔗糖，2 mmol/L ，0.1mmol/L EGTA， pH7.4)中贮存于-80°C。
背景
大量RIHD的研究表明放疗会引起微血管和大血管内皮炎症反应，从而引发血管损伤和心肌变性。心肌微血管内膜和内皮细胞通过多种旁分泌信号通路调节心肌的增值，成熟，损伤和再生。很少有研究关注RIHD的心内膜和心肌的相互作用关系。
NRG-1/ErbB 2信号转导通路是介导心内膜和心肌间相互作用的重要途径之一。 NRG-1是神经调节蛋白家族成员，其在心内膜和心肌微脉管系统的内皮细胞中合成和表达。NRG-1基因编码超过14种可溶性和跨膜蛋白产物。在哺乳动物心肌组织中，从跨膜NRG-1同种型细胞外结构域的蛋白水解释放的可溶性NRG 亚型(主要为NRG-1β)起旁分泌信号分子的作用，其结合酪氨酸激酶受体ErbB4 并激活ErbB4及其受体ErbB2在相邻心肌细胞上共表达。Er虽然不能直接与 RNG-1β等配体结合，但ErbB2作为ErbB4的首选异二聚化配偶体，对于稳定配体结合和配体诱导的信号转导至关重要。
材料和方法
HE染色：在光学显微镜下对切片进行照相绘图后，用Image Pro Plus6.0软件测量平均心肌细胞面积。 Masson三色染色：将切片脱石蜡，然后包埋在Masson复合液和浅绿色丝素溶液中以观察间质纤维化的变化。使用Image Pro Plus6.0软件评估每个切片中的总胶原含量和纤维化区域百分比。
使用Multiphor II电泳系统在200ｍA下进行Western blotting1.5h。在室温下用 TBST中(0.1%TritonX-100)的5%脱脂乳封闭1h后，将印迹与抗γ-h2ax，抗 caspase3，抗裂解caspase 3，抗SIRT 1，抗ERK 1/2，抗p-ERK 1/2，抗-P38，抗-p-P38，抗JNK，抗p-JNK或抗β-肌动蛋白初级抗体在4°C温育过夜。用辣根过氧化物酶结合二次抗体(山羊抗兔IgG；1：5000)培育1h后，用增强的化学发光蛋白质印迹检测试剂在膜上检测免疫反应带。用Image Pro Plus 6.0软件进行密度分析。
⑤M+NRG组：大鼠不仅接受照射和给予与NRG组相同剂量rhNRG-1β，而且在 rhNRG-1β前1小时静脉注射Mubritinib(木利替尼) ⑥F+NRG组：大鼠不仅接受照射和给予与NRG组相同剂量rhNRG-1β，而且在 rhNRG-1β前1小时静脉注射FR180204(50μM)(ERK1/2抑制剂)
组织学评价
大鼠用0.9%生理盐水和4%多聚甲醛在PBS中连续灌流。心脏解剖，4%多聚甲醛固定，70%，80%，90%，95%和100%乙醇脱水，二甲苯玻璃化，石蜡梯度熔点处理，石蜡包埋(60-62°C)，并在切片机上切成4-μm冠状切片，然后进行苏木精和伊红(HE)或Masson‘s三色染色。
照射过程中，一种低熔点的铅合金附着在医用直线加速器治疗系统产生2×2 cm2前-后辐射场，其中大鼠心脏受到21Gy的照射(6MeV电子线,6A,4Gy/min)
各组大鼠照射后进行3天腹膜内注射布洛芬(20 mg/kg)以抑制照射引起的疼痛。
材料和方法
免疫染色
对于成年心肌细胞培养物或大鼠心肌组织的冷冻切片，用冷PBS(pH7.4)洗涤样品，在室温下用PBS中4％多聚甲醛固定10分钟，在0.5% TritonX -100中透化5 min，用含3%牛血清白蛋白(BSA)和0.05%TritonX-100的PBS封闭1 h。随后，这些细胞与抗γ-H2Ax(兔IgG；1：300)的一种初级抗体在1%BSA中4°C温育过夜，然后与Alexa Fluor 594-山羊抗兔IgG(1：1000)在室温下在避光保持1h。
本研究探讨了rhNRG-1β对大鼠受照心肌的影响及其作用机制，为发展一条治疗RHID的新途径。
材料和方法