总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒说明书 可见分光光度法

总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)产品编号产品名称包装S0116 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) 100次产品简介：总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP)方法，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。

活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。

在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。

活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。

机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。

一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。

因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。

植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。

FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine (Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。

总抗氧化能力（T-AOC ）检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC1310规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体35mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体5mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、提取液：使用前置于4℃冰箱或冰上预冷；2、标准品：10mg FeSO 4·7H 2O 。

临用前加入0.9mL 蒸馏水，20μL 浓硫酸，配制成40µmol/mL FeSO 4标准溶液备用；3、混合液：将试剂一、试剂二、试剂三按7:1:1的比例混合，现配现用，用多少配多少。

使用前置于37℃水浴锅或37℃恒温培养箱中预热10min 。

产品说明：测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。

在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

在酸性环境下，还原Fe 3+-三吡啶三吖嗪（Fe 3+-TPTZ）产生蓝色的Fe 2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。

Fe 3+-Tripyridyltriazine Fe 2+-Tripyridyltriazine (593nm)技术指标：最低检出限：0.00056μmol/mL 线性范围：0.00078125-0.05μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅、低温离心机、细胞超声破碎仪、研钵/匀浆器、浓硫酸、冰和蒸馏水。

Antioxidant H +Beijing Solarbio Science &Technology Co.,LtdTel:400-968-6088Fax:************操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、血清、血浆、唾液或尿液样本血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝）5000r/min离心10min，取上清待测。

用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。

检测范围及灵敏度检测范围：0.047-1.50 mmol/L灵敏度：0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统，一类是酶抗氧化系统，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）；另一类是非酶抗氧化系统，包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。

抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。

检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+，在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制，在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。

Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。

例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。

本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。

提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。

Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。

仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。

所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。

试剂盒中部分试剂含有危险性物质。

禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。

使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。

安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。

实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。

大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒名称】大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中总抗氧化能力(T-AOC)的含量。

【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。

将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠总抗氧化能力(T-AOC)单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)含量。

【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒组成】备注：标准品(1号→6号)浓度依次为：1600、800、400、200、100、50 U/L.【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂是一种旨在通过使用荧光素探针，受到有机氮自由基AAPH的破坏，但在抗氧化剂的存在下，得到抑制，由此通过荧光分光光度仪，观察其峰值下降程度的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即消除自由基等值浓度的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

适用于适用于各种新鲜细胞样品总抗氧化能力检测。

产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。

技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。

在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。

用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。

检测范围及灵敏度检测范围：0.047-1.50 mmol/L灵敏度：0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统，一类是酶抗氧化系统，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）；另一类是非酶抗氧化系统，包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。

抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。

检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+，在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制，在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。

Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。

例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。

本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。

提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。

Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。

仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。

所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。

试剂盒中部分试剂含有危险性物质。

禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。

使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。

安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。

实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。

总抗氧化能力总抗氧化能力（（T －AOC ）测定试剂盒说明书修改日期说明书修改日期：：2015.11.06 Cat number ：KGT009 Store at 4 for for one year ℃ For Research Use Only一、测定意义机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系，该防御体系有酶促与非酶促两个体系，许多酶是以微量元素为活性中心，例如：超氧化物岐化酶（SOD ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX ）、过氧化氢酶（CAT ）、谷胱甘肽S-转移酶（GST ）等，非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。

例如：VE 、胡萝卜素、VC 、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。

这个体系的防护氧化作用主要通过三条途径：（1）消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化：（2）分解过氧化物，阻断过氧化链；（3）除去起催化作用的金属离子。

防御体系各成分之间相互起到了协同作用，以及代偿作用与依赖作用。

二、测定原理机体中有许多抗氧化物质，能使+3Fe 还原成+2Fe，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低。

三、所需仪器设备721或722分光光度计、水浴箱。

四、试剂盒组份组份 KGT009（25 assays ）保存条件 Buffer A 60.0 mL 4℃ 试剂 B 粉剂1支 RT 20×Buffer C 3.0 mL 4℃避光 Buffer C 稀释液30.0 mL 4℃ Buffer D 12.0 mL RT Buffer E 12.0 mLRT注意事项1． Buffer B ：试剂B 用时每支加双蒸水至120mL ，RT 保存。

2．1×Buffer C ：用前用Buffer C 稀释液按1︰19稀释至1×Buffer C （现配现用）。

五、操作（一、）、血清血清血清（（浆）中总抗氧化能力的测定中总抗氧化能力的测定：（：（样本前处理见附录样本前处理见附录样本前处理见附录（（一）中的第一点中的第一点）） 1、操作表操作表：：对照管 测定管 Buffer A （mL ） 1.0 1.0 待测样本（mL ） a Buffer B （mL ） 2.0 2.0 1×Buffer C （mL ）0.50.5漩涡混匀器充分混匀，37℃水浴30分钟Buffer D （mL ） 0.10.1 待测样本（mL ）*a漩涡混匀器充分混匀，放置10分钟，蒸馏水调零，1cm 光径，520nm 处测各管吸光度。

昆虫总抗氧化能力（T-AOC）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定昆虫血清、血浆、组织等样本中总抗氧化能力（T-AOC）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫总抗氧化能力（T-AOC）水平。

用纯化的昆虫总抗氧化能力（T-AOC）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入昆虫总抗氧化能力（T-AOC），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的昆虫总抗氧化能力（T-AOC）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中昆虫总抗氧化能力（T-AOC）含量。

注：标准品浓度依次为：24、12、6、3、1.5、0 U/mL.样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

总抗氧化能力总抗氧化能力（（T－AOC ）测定试剂盒 说明书修改日期说明书修改日期：：2015.11.06 Cat number ：KGT009 Store at 4 for for one year ℃ For Research Use Only一、测定意义机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系，该防御体系有酶促与非酶促两个体系，许多酶是以微量元素为活性中心，例如：超氧化物岐化酶（SOD ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX ）、过氧化氢酶（CAT ）、谷胱甘肽S-转移酶（GST ）等，非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。

例如：VE 、胡萝卜素、VC 、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。

这个体系的防护氧化作用主要通过三条途径：（1）消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化：（2）分解过氧化物，阻断过氧化链；（3）除去起催化作用的金属离子。

防御体系各成分之间相互起到了协同作用，以及代偿作用与依赖作用。

二、测定原理机体中有许多抗氧化物质，能使+3Fe 还原成+2Fe ，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低。

三、所需仪器设备721或722分光光度计、水浴箱。

四、试剂盒组份组份 KGT009（25 assays）保存条件 Buffer A 60.0 mL 4℃ 试剂 B 粉剂1支 RT 20×Buffer C 3.0 mL 4℃避光 Buffer C 稀释液30.0 mL 4℃ Buffer D 12.0 mL RT Buffer E 12.0 mLRT注意事项1． Buffer B ：试剂B 用时每支加双蒸水至120mL ，RT 保存。

2．1×Buffer C ：用前用Buffer C稀释液按1︰19稀释至1×Buffer C （现配现用）。

五、操作（一、）、血清血清血清（（浆）中总抗氧化能力的测定中总抗氧化能力的测定：（：（样本前处理见附录样本前处理见附录样本前处理见附录（（一）中的第一点中的第一点）） 1、操作表操作表：：对照管 测定管 Buffer A （mL ） 1.0 1.0 待测样本（mL ） a Buffer B （mL ） 2.0 2.0 1×Buffer C （mL ）0.50.5漩涡混匀器充分混匀，37℃水浴30分钟Buffer D （mL ） 0.10.1 待测样本（mL ）*a漩涡混匀器充分混匀，放置10分钟，蒸馏水调零，1cm 光径，520nm 处测各管吸光度。

总抗氧化能力（TAC）终点比色法定量检测试剂盒使用说明货号：BC130保存：保存在－20℃冰箱里，染色液A（Reagent B1）和氧化液（Reagent C），严格避免光照和室温空气中久置；有效保证3月。

产品内容：缓冲液（Reagent A）10ml染色液A（Reagent B1）1管染色液B（Reagent B2）1ml氧化液（Reagent C）500μL标准液（Reagent D）50μL产品说明：总抗氧化能力（TAC）终点比色法定量检测试剂是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。

通过过硫酸钾氧化2,2’-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）产生的ABTS自由基，衡量体系中抗氧化剂捕获自由基、消耗抗氧化剂的能力，在分光光度仪（730nm波长）的帮助下，观察其峰值下降的变化，并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。

适用于各种细胞、组织、血液、体液等样品的总抗氧化能力检测。

产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。

用户自备：1. 1.5毫升离心管：用于标准样品配制的容器2.96孔板：用于比色的容器3.分光光度仪或酶标仪：用于比色分析实验步骤：一、标准液准备1．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管2．分别加入20μL缓冲液（Reagent A）到2至5号管3．移取40μL标准液（Reagent D）到1号管，混匀4．小心移取20μL1号管的标准液（Reagent D）到2号管，混匀5．小心移取20μL2号管稀释的标准液（Reagent D）到3号管，混匀6．小心移取20μL3号管稀释的标准液（Reagent D）到4号管，混匀7．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表管号缓冲液（Reagent A）标准液（Reagent D）测定体系标准Trolox浓度1040μL25μmol/L220μL20μL1号管12.5μmol/L320μL20μL2号管 6.25μmol/L420μL20μL3号管 3.125μmol/L520μL00二、样品测读实验开始前，将－20冰箱里的试剂置于室温下融化，移取1ml染色液B（Reagent B2）到1管染色液A（Reagent B1）里，混匀，置于暗室里室温下孵育过夜（16小时）后，标记为染色工作液，避免光照。

总抗氧化能力（T-AOC）检测
总抗氧化能力（Total antioxidant capacity, T-AOC）是指各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成的总抗氧化水平，如抗氧化物酶、维生素C、维生素E和胡萝卜素等，为保护细胞和机体免于活性氧自由基造成的氧化应激损伤，因此可用总抗氧化能力来评价生物活性物质的抗氧化能力。

通过检测血浆、唾液、尿液等体液、细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力，对全面科学地评价抗氧化物质的抗氧化能力具有重要意义。

迪信泰检测平台采用生化法，可高效、精准的检测总抗氧化能力。

此外，我们还提供其他氧化应激类检测服务，以满足您的不同需求。

生化法测定总抗氧化能力样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关参数（中英文）
3. 图片
4. 原始数据
5. 总抗氧化能力信息。