毒素的分离及鉴定方法

河南畜牧兽医　２００６年（第２７卷）第１２期　体流出。猪肺疫、猪弓形虫病、猪附红细胞体病、猪繁殖和呼　吸障碍综合症引发肺水肿和问质性水肿。猪传染性胸膜肺　炎、猪副嗜血杆菌病、猪大肠杆菌病、溶血性链球菌病常引　发肺脏与胸壁发生粘连，肺表现出现纤维素样物质渗出等。　３，５・　脏病变　口蹄疫、猪脑心肌炎病毒感染易引起病毒性心肌炎，　出现“虎斑”心。猪丹毒、猪链球菌病常引起心内膜炎，出现　“菜花样”增生。出现心外膜及心冠脂肪出血的常见于败血　型疾病如猪瘟、猪肺疫、猪丹毒、猪链球菌病。引起心包炎、　心包积液的疾病有猪链球菌病、大肠杆菌病、猪丹毒等，表　现“绒毛”心和心包液｝昆浊等。　３．６肾脏病变　猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖和呼吸障碍综合症、中毒、　弓形体病的。埒脏常有出血点。猪丹毒常形成大红肾。断奶　仔猪多系统功能衰竭综合症常出现肾脏萎缩形成“花斑”　肾。磺胺类药物中毒常出现肾脏的急剧肿大形成“结晶”　肾，出现肾脏变白、变硬等。　３．７肝脏病变　猪副伤寒病在肝脏易形成黄白色副伤寒结节，猪痘出　现肝脏的“痘”状结节。急性中毒常出现急性肝肿大、质脆。　猪蛔虫病出现肝脏的“蛔虫”结节。弓形体病常出现质地变　硬，表现“槟榔”肝。　３．８淋巴结痛变　淋巴结呈大理石样变外观常见于猪瘟。出现淋巴结肿　大和出血的常见于猪瘟、猪丹毒、猪肺疫、猪链球菌病。出　现淋巴结急剧肿大，是正常情况的几倍，常见于弓形体病　和链球菌病。出现淋巴结脓肿可见于链球菌病。淋巴结出　现髓样变性的常见于圆环病毒病等。　３．９脾脏病变　脾脏边缘出现出血性梗死病变可见于猪瘟。脾脏中央　出现出血现象可见于猪附红细胞体病。脾脏肿大是正常几　倍、出现细胞自溶常见于弓形体病。脾脏表现肿胀旱颗粒　状，可见于猪伪狂犬病。脾脏出现萎缩、变硬、组织机化可　见免疫抑制性疾病。　３．１０明显败血症　猪瘟、猪伪狂犬病、弓形体病、附红细胞体感染、猪丹　毒、猪肺疫、链球菌病、大肠杆菌病、李氏杆菌病等。　４小结　近年来，由于集约化养猪在我国的迅速发展，饲养管　理水平不同，不合理的动物保健计划（大量处方药用于动　物保健），不科学的动物免疫方案（单纯免疫而没有对免疫　的方案和效果进行评价，免疫抑制因素等造成免疫的结果　不理想），大量药物的滥用混用（药物原粉的混用滥用、药　物混合不均匀、多种药物特别是多种抗生素的混用，大量　解热镇痛药物的混用，抗病毒药物如吗啉胍、利巴韦林、金　刚烷胺等的乱用，超大剂量使用药物等），猪群的大量交　易、流动，以及从国外引种引进来许多疾病，使我国疾病的　发病特点发生丁一些系列新的变化，表现出多种疾病的混　合感染或继发感染，示病症状、特征性症状和固有症状ｌ及　特征性的病理变化越来越少、越来越不典型、疾病趋于复　杂化，这为诊断疾病带来很大的负面影响，很难单纯凭流　行性病学调查、临床症状观察和病理剖检变化正确地诊断　出疾病，确诊还需借助实验室诊断的结果进行综合评价。　（收稿日期：２００６－１０－０２）　鸡　常见佃萄住瘊痴的病原分禹、鉴定厦糖利方法探讨　韩立。，李新　，韩庆彬　，李凌’。鲁利萍　（１．商丘市畜产品质量监测检验中心，河南商丘４７６０００；２．河南省兽药监察所，３．商丘市畜禽防治站）　中图分类号：￥８５８．３１５．１　文献标识码：Ｂ　养鸡业是我国的传统产业，在农业和农村经济中占有　重要的地位，我国目前已成为世界上养鸡生产和消费大国，　鸡存栏总量具世界前列，养鸡业正在向规模化、集约化、机　械化方向发展。然而由于现在禽病流行原因复杂且并发病　较多，使禽病的诊断、治疗和控制难度加大，给养鸡业造成　了很大的经济损失。２０ｏ５年６月，夏邑县某养鸡场鸡群发　病，不能确诊是禽副伤寒、禽霍乱还是禽大肠杆菌病，造成　了一定的经济损失，下面就从这三种禽病的病原体、临床症　状、病理变化，实验室诊断及控制方法方面加以论述。　ｌ病原体　Ｌ１　禽副伤寒　是由菌体两端钝圆、中等大小、无荚膜、带鞭毛、能运动　的沙门氏菌引起的，为革兰氏阴性杆菌。鸡易感性较高，常　于孵出后２周内发病，主要是经卵直接传播，也可通过被病　菌污染的环境、饲料、饮水传播，鼠类也可以传播该病。　１．２禽霍乱　－２９・　文章编号：１００４—５０９０（２００６）１２—００２９—０３　又称禽巴氏杆菌病，是　ｊ多杀性巴氏杆菌引起的，该　菌为两端钝圆、中央微　的革兰氏阴性短杆菌。鸡易感性　很强，主要通过呼吸道、消化道黏膜或皮肤外伤感染。自然　感染潜伏期２－９天，人工感染时１２～４８小时。该病多发生　于高温、高湿、多雨季节。　１．３禽大肠杆菌病　是由致病性大肠杆菌引起的细菌性传染病，包括急性　败血症、气囊炎、输卵管炎、眼炎、关节炎、肉芽肿及肺炎等，　在临床上町以单独发生或与其他疫病混杂在・起，造成非　常复杂的局面。该菌为革　氏阴性、中等大小、无明显的荚　膜、不形成芽孢、带鞭毛、能运动的杆菌，也有尤鞭毛、不运　动的变异株　该病主要是通过消化道、呼Ⅱ发道传播也可经卵　传播，该病一年叫季均町发牛。以冬末春初发病最多。　２临床症状　２．１禽副伤寒　２．１．１

内毒素质量标准限度值

内毒素是一种存在于细菌细胞壁或菌体内的脂多糖类物质。内毒素不仅能够引起肝脏、肾脏、心脏等器官的损伤，还能够引起高热、休克、出血等症状。因此，内毒素是食品安全的一个重要指标。为了保证食品质量和安全，各国家和地区都制定了内毒素的质量标准限度值。

一、内毒素的来源和分类

内毒素是一种存在于细菌细胞壁或细菌体内的脂多糖类物质，通常由多糖链和脂肪酸组成。内毒素主要存在于革兰氏阴性菌中，包括大肠杆菌、沙门氏菌、伤寒杆菌等。内毒素主要由荧光素醛原系统（LPS）组成，LPS可以分为三部分：脂多糖部分（Lipid A）、内核多糖部分（Core Polysaccharides）和O抗原多糖部分（O-Antigen Polysaccharides）。LPS是革兰氏阴性菌细胞壁的主要组分，具有强烈的毒性和生物活性。

二、内毒素的检测方法

内毒素的检测方法包括生物学、化学和免疫学等多种方法。常用的内毒素检测方法有以下几种：

1.内毒素限制酶剪切电泳：该方法利用内毒素的限制酶切口，将其分离成不同的分子大小，并通过电泳分离。该方法适用于不同来源的细菌内毒素的检测。

2.洗脱凝胶层析法：该方法利用凝胶层析柱将内毒素与其他物质分离开来。该方法适用于纯净内毒素的检测。

3.乳胶凝聚试验：该方法通过内毒素与抗体的特异性结合来观察乳胶颗粒的凝聚现象。

4.内毒素酶促发光法：该方法利用酶促发光素体系，对内毒素进行高灵敏度和高特异性的检测。

内毒素的质量标准限度值是不同国家和地区根据食品安全法律法规制定的。不同食品对内毒素质量标准的要求也不同。下面列举一些常见的内毒素质量标准限度值：

1.欧洲：欧盟对于畜禽及其副产品的内毒素限度为100 pg/kg。对于人食用的食品，限度值为0.05-25 pg/kg不等。

3.中国：中国对于食品内毒素限度值的规定如下：

乳酸菌的分离鉴定方法和功能研究

摘要:乳酸菌是一类具有多种生理功能的细菌，本文通过阐述乳酸菌不同来源的分离鉴定方式，探讨了乳酸菌的部分主要生理功能。

关键词:乳酸菌 分离鉴定 功能

Abstract: Lactic acid bacteria are a kind of many physiological functions of bacteria, this paper

explains the separated and identified from different sources of lactic acid bacteria, and probes into

the way of its part main physiological function.

Keywords: lactic acid bacteria separated and identified function

乳酸菌是一类广泛分布于自然界、与人类生活密切相关、可发酵碳水化合物、产生乳酸的细菌，然而，乳酸菌的许多特性是由其基因编码决定的【1】，利用这一特性，人们可以用乳酸菌作为载体，在食品及医药领域中构建表达系统。乳酸菌具有控制肠道感染，改善乳糖代谢，增加某些食物的营养价值，诱导体内特异性及非特异性免疫等作用。

乳酸菌为革兰氏阳性菌，细胞形态为杆状或球状，生殖方式为裂殖，消耗葡萄糖50％以上，产生乳酸分解蛋白质，但不产生腐败产物，不形成内生孢子，无运动性或极少运动，目前己发现的乳酸菌在细菌分类学上有18个属【2】。通过对乳酸菌分离鉴定，可测定其生理功能。

一、乳酸菌的分离鉴定

乳酸菌的来源广泛，腌菜、发酵肉制品、腐乳、酱醅、牛乳等食物中乳酸菌的含量极其丰富。

（一） 腌菜盐水中乳酸菌的分离与鉴定

乳酸菌广泛存在于泡菜和腌菜等食品中，此类乳酸菌较耐盐，因此，以腌菜为样品，分离优良乳酸菌株，将其应用到含盐量较大的食品中，可以改善食品的风味，提高食品的质量。通过建立下列几种培养基【3】可以对腌菜盐水中的乳酸菌进行分离、鉴定：

畜牧与饲料科学　Ａ　ｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　ａｎｄ　Ｆｅｅｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　２０１０，３１（３）：１０—１２　

双歧杆菌分离鉴定的方法及其应用　

张　勤，罗　燕，杨尔哈，吴　强，陶　金，钟　燕　

（四川农业大学都江堰校区生物科学系，四川　都江堰６１１８３０）　

摘要：益生菌对人类健康的巨大作用已越来越受到人们的重视。近年来，双歧杆菌的应用也已发展到多个方面，如食品、　

药品、基因工程等。综述了双歧杆菌的生物学特性、分离培养技术、形态与分子生物学鉴定方法及其应用和发展前景。　

关键词：双歧杆菌；分离与鉴定；应用　

中图分类号：Ｑ９３－３３１　文献标识码：Ａ　文章顺序编号：１６７２—５１９０（２０１０）０３—００１０—０３　

Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　Ｂｉｆｕｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　

Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　

ＺＨＡＮＧ　Ｑｉｎ，ＬＵ０　Ｙａｎ，ＹＡＮＧ　Ｅｒ－ｈａ，ＷＵ　Ｑｉａｎｇ，ＴＡ０　Ｊｉｎ，ＺＨＯＮＧ　Ｙａｎ　

（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｄｕｊｉａｎｇｙａｎ　Ｃａｍｐｕｓ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄｕｊｉａｎｇｙａｎ　６１　１８３０，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｈｅａｌｔｈ　ｈａｓ　ａｔｔｒａｃｔｅｄ　ｍｏｒｅ　ａｎｄ　ｍｏｒｅ　ａｔｔｅｎｔｉｏｎ．Ｉｎ　ｒｅｃｅｎｔ　ｙｅａｒｓ，Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｈａｖｅ　ｂｅｅｎ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｉｎ　ｆｏｏｄ，ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｇｅｎｅｔｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｆｉｅｌｄｓ．Ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ　ｓｕｍｍａｒｉｚｅｓ　ｔｈｅ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｉｓｏｌａｔｉｏｎ