第1 页 WATERS2695液相色谱仪
操作规程
一、液相主机操作：
1、准备流动相，不同的流动相组分放在不同的溶剂瓶中。注意：D瓶为洗泵杆溶液（甲醇-水）20：80，E瓶为洗针头溶液（甲醇-水）80：20。
2、打开液相主机电源开关，机器进行自校，约5分钟。
3、在线脱气（Degasser）：光标移到(Mode)下按Enter选On后按Enter。
4、样品池温度（Sample）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。
5、柱温（Column）：光标移到（Set）下直接输入温度数值按Enter。
6、流动相比例（Composition）：光标移到相应位置直接输入比例数，每输一个数值按Enter确认；比例数之和应为100。
7、更换管路流动相：按直接功能（Direct Function）进入直接功能菜单选（2 Wet Prime）按Enter输入流速（Flow Rate）和时间(Time)按OK开始。
8、更换完成后自动返回主页面，按Next Page回到主菜单。
9、光标移到流速（Flow）下输入流速值，按Enter，液相主机开始工作。
10、打开样品室门，选择要操作的样品盘，按顺序放入样品，记下样品与样品位置号，关上样品室门。
11、实验完毕后，先关检测器电源以延长紫外灯寿命，色谱柱处理完毕后，再关主机电源。
二、紫外检测器操作 ：
打开紫外检测器电源开关，机器进行自校，自检完毕后两个指示灯长亮。
三、软件操作：
1、 打开显示器电源，再打开主机电源，启动Windows XP。
2、 点击桌面上的“Empower 登录”图标启动软件。输入用户名“hplc”按“确定”进入主选单。
3、 点击“运行样品”，“确定”进入运行样品界面。选择一种仪器方法，单击“编辑”进入仪器状态设置界面，选择色谱仪的脱气状态、输入样品室温度、柱温箱温度、流动相比例、积分波长范围、监视波长；设定完成后注意保存。
液相色谱仪操作规程
仪器名称：液相色谱仪Waters2695型（带光电二极管阵列PDA 2998、蒸发光散射ELS 2424检测器）
光电二极管阵列一般可用5mg/L来试条件。
第一步：准备工作
（1） 把水和有机相分别加入各瓶中。(纯水一周一换，换溶剂时需小心，不要用手触摸管道)。有机相必须为进口色谱级纯度。
（2）开机
顺序：电脑→泵→检测器→工作站
1）泵的开启，在2695主机界面上直接操作。待仪器自检完毕，显示Idle后，选择Menu status进行各项操作：
a. 仪器长久不用，管路干了，应使用Dry prime功能。
b. 每次开机，都要用Wet prime功能，将要用的各个通道冲洗一遍（A为甲醇，C为乙腈，D为纯水），排除气泡。此过程流动相不通过柱子。具体操作为：用方向键选择一个通道，比例调成100%，其余通道为0%，在direct function 中选择wet prime，按默认值进行。冲洗完成后，进行下一个通道的冲洗，直到完成。仪器使用过程中，如果哪个通道更换或增加了溶剂，都要用Wet prime将此通道冲洗一遍。
c. 温度设置：直接将柱温设置成所需温度，一般为30℃。
d. Purge injection：在direct function中选择Purge injection，按默认值进行。
e. Equilibrium：将流量从0调至1mL/min，如果长久不用，不能直接调，而应逐渐将流速调至1mL/min。将通道比例调成所需比例，注意此过程流动相通过柱子，所以切记不能出现纯水通道100%的情况，纯水比例最大为95%。在direct function中选择Equilibrium，按默认值进行。
注意：每一步操作都应在仪器显示Idle状态后再进行。
2）检测器的开启
绿灯状态为自检；灯为黄色、不闪并听见提示音，为启动完成。
3）工作站的开启
Empower登陆：用户名为system，密码为manager
Waters e2695下效液相色谱仪支配规程之阳早格格创做
1 手段
指挥战典型Waters e 2695下效液相色谱仪的支配.
2适用范畴
该支配规程适用于Water e 2695下效液相色谱仪的支配.
3工做
考验员应按支配规程举止仪器支配，品量监督员控造监督该支配规程的粗确实止.
4支配
本仪器由Waters e 2695分散单元、Waters 2998两极管阵列检测器、Waters ELSD 2424
挥收光集射检测器、Empower3色谱处事站战挨印机组成.
Waters e2695分散单元包罗四元梯度洗脱的溶剂输支系统，四通道正在线实空脱气，可
容纳120个样品瓶的自动分散单元，柱温箱，内置的柱塞杆稀启垫荡涤系统，溶剂瓶托盘；
隐现器，键盘用户界里.
4.1.2.1依次交通Waters e 2695分散单元、检测器、估计机战挨印机的电源.
4.1.2.2交通Waters e2695分散单元后，约20s仪器开初自检，约3mn内各部件的 初初化完成，待主屏幕上圆题目区出现“Idle”时，仪器加进待命状态.
确认所有溶剂管路皆充谦溶剂，按[Menu／Status】，加进“Status(1)”屏幕，光标选
“Degasser”，按[Enter】.
当色谱仪流路不溶剂大概系统中有气氛时，需举止搞灌注(DryPrime)，注进震动相.
可则，举止干灌注(Wet Prime)以驱除气泡.搞灌注：按主机里板上[Menu／Status】，加进
“Status(1)”隐现，按[Direct Function】，采用“Dry Prime”，选溶剂通道，如Open A，选
“DurationIIi按数字键输进5分钟，按”COntinue”，待规定时间中断后，沉复支配，使所需
的溶剂通道注谦震动相.干灌注：加进“Status(1)”隐现，选溶剂通道，输进100％，按[Direct
Waters HPLC 2695操作规程
一、日常开机步骤
1. 制备新鲜流动相和清洗液
流动相
水 纯净水。
缓冲剂 首先溶解盐，调节pH值，然后过滤除去不溶解的物质，缓冲盐浓度≤100mMol。
四氢呋喃 使用不稳定的THF时，请确保溶剂是新鲜的。先前打开过的THF瓶含有过氧化物杂质，将导致基线漂移。
有机相 原装进口的色谱纯。
清洗液
洗针液
根据样品和流动相的化学性质选用洗针液，确保所有溶液和缓冲剂都是易混合和可溶解的，最好选择与最终梯度条件相似的洗针液。
推荐使用的洗针液：80%甲醇/20%水
色谱条件 洗针液
缓冲水溶液，反相 80%有机相/20%水
非水溶液，反相 100%甲醇
正相 流动相
GPC 流动相
离子交换 水
清洗柱塞密封垫（seal wash）的溶液
含5% ~ 10%甲醇的超纯水（一般放在弱洗溶液中）
注意：所有流动相和清洗液均需盛放于硼硅玻璃制作的高质量实验室玻璃器皿中，混合均匀并在使用前要经过0.45µm的膜式过滤器的过滤，超声脱气1-2min。
2. 开机及系统准备
2.1 开机
先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器的电源。接通2695分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上主标题区出现“Idle”仪器自检通过，表示开机测试正常，之后启动Emperor软件。
A管带黄色标记、B管带蓝色标记号、C管带红色标记、D管带绿色标记，绿色管为冲洗泵头用，白色管为冲洗进样器用，将各泵头放到相应的溶剂瓶中备用。
2.2灌注 (Prime)
当溶剂的管路是干的或存在较多气泡不易排出时，需进行灌注。可向管理员求助。
2.3 平衡色谱柱
在“Status”界面上，按流动相比例设定各通道溶剂比例后，设置流速，平衡色谱柱30-60min。（可在工作站中设置）。
2.4 样品的配制
