滨州职业学院教案 No______
课程_食品检验技术（微生物）__ 2010/2011学年第_二_学期 教师__吕红梅_
授课日期
班 级
课 题： 普通光学显微镜的使用
教学目标：
技能目标：学会检测空气落菌的方法。
知识目标：了解其方法与原理，掌握其注意事项。
素质目标：培养细心、认真的作风。
重点难点：显微镜油镜使用。
教学方法：教学做一体。
教 具：
教学参考书：刘用成主编《食品检验技术》（中国轻工业出版社）
课后作业：实验报告
教学札记：
编写日期：
滨州职业学院教案附页
项目一 普通光学显微镜的使用
一、器材：显微镜、载玻片、革兰氏染色液、酒精灯、吸水纸
二、显微镜的主要构造：普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。
1.机械部分
（1）镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。
（2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。
（3）镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。
（4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。
（5）物镜转换器(旋转器)：接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3－4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。
（6）镜台(载物台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。
（7）调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。
①粗调节器(粗螺旋)：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。
实验一 光学显微镜的使用与微生物观察
第一节 普通光学显微镜的使用
一、实验目的
1、了解普通光学显微镜的基本构造和工作原理。
2、学习并掌握普通光学显微镜，重点是油镜的使用技术和维护知识。
3、在油镜下观察微生物的几种基本形态。
二、基本原理
（一）普通光学显微镜的构造
普通光学显微镜由机械系统和光学系统两部分组成（图1-1）。
1、机械系统
机械系统包括镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器等。
（1）镜座：它是显微镜的基座，可使显微镜平稳地放置在平台上。
（2）镜臂：用以支持镜筒，也是移动显微镜时手握的部位。
（3）镜筒：它是连接接目镜（简称目镜）和接物镜（简称物镜）的金属圆筒。镜筒上端插入目镜，下端与物镜转换器相接。镜筒长度一般固定，通常是160mm。有些显微镜的镜筒长度可以调节。
（4）物镜转换器：它是一个用于安装物镜的圆盘，位于镜筒下端，其上装有3～5个不同放大倍数的物镜。为了使用方便，物镜一般按由低倍到高倍的顺序安装。转动物镜转换器可以选用合适的物镜。转换物镜时，必须用手旋转圆盘，切勿用手推动物镜，以免松脱物镜而招致损坏。
（5）载物台：载物台又称镜台，是放置标本的地方，呈方形或圆形。载物台上装有压片夹，可以固定被检标本；有标本移动器，转动螺旋可以使标本前后和左右移动。有些标本移动器上刻有标尺，可指示标本的位置，便于重复观察。
（6）调节器：调节器又称调焦装置，由粗调螺旋和细调螺旋组成，用于调节物镜与标本间的距离，使物像更清晰。粗调螺旋转动一圈可使镜筒升降约10mm，细调螺旋转动一圈可使镜筒升降约0.1mm。
图1-1 普通光学显微镜的构造
1. 镜座 2. 镜臂 3. 镜筒 4. 转换器 5. 载物台 6. 压片夹 7. 标本移动器 8. 粗调螺旋 9. 细调螺旋 10. 目镜 11. 物镜 12. 虹彩光阑（光圈） 13.
聚光器 14. 反光镜
实验一 光学显微镜的使用与微生物观察
第一节 普通光学显微镜的使用
一、实验目的
1、 了解普通光学显微镜的基本构造和工作原理。
2、 学习并掌握普通光学显微镜，重点是油镜的使用技术和维护知识。
3、 在油镜下观察微生物的几种基本形态。
二、基本原理
（一）普通光学显微镜的构造
普通光学显微镜由机械系统和光学系统两部分组成（图1-1）。
1、机械系统
机械系统包括镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器等。
（1）镜座：它是显微镜的基座，可使显微镜平稳地放置在平台上。
（2）镜臂：用以支持镜筒，也是移动显微镜时手握的部位。
（3）镜筒：它是连接接目镜（简称目镜）和接物镜（简称物镜）的金属圆筒。镜筒上端插入目镜，下端与物镜转换器相接。镜筒长度一般固定，通常是160mm。有些显微镜的镜筒长度可以调节。
（4）物镜转换器：它是一个用于安装物镜的圆盘，位于镜筒下端，其上装有3～5个不同放大倍数的物镜。为了使用方便，物镜一般按由低倍到高倍的顺序安装。转动物镜转换器可以选用合适的物镜。转换物镜时，必须用手旋转圆盘，切勿用手推动物镜，以免松脱物镜而招致损坏。
（5）载物台：载物台又称镜台，是放置标本的地方，呈方形或圆形。载物台上装有压片夹，可以固定被检标本；有标本移动器，转动螺旋可以使标本前后和左右移动。有些标本移动器上刻有标尺，可指示标本的位置，便于重复观察。
（6）调节器：调节器又称调焦装置，由粗调螺旋和细调螺旋组成，用于调节物镜与标本间的距离，使物像更清晰。粗调螺旋转动一圈可使镜筒升降约10mm，细调螺旋转动一圈可使镜筒升降约0.1mm。
图1-1 普通光学显微镜的构造
1. 镜座 2. 镜臂 3. 镜筒 4. 转换器 5. 载物台 6. 压片夹 7. 标本移动器 8. 粗调螺旋 9. 细调螺旋 10. 目镜 11. 物镜 12. 虹彩光阑（光圈） 13. 聚光器 14. 反光镜
实验一 普通光学显微镜及其使用
一、实验目的
了解光学显微镜的构造及其工作原理，并熟练掌握其操作方法。
二、实验用品
普通复式光学显微镜、载玻片、盖玻片、香柏油、生物制片标本、滤纸及擦镜纸等。
三、实验原理
普通光学显微镜是我们观察细胞形态最常用的工具，从构造上可分光学、机械和电子三大系统。其所用光源为可见光(或紫外光)，故其分辨率(Resolution)存在有一个无法突破的限制。分辨率是指显微镜能将近邻的两个质点分辨清楚的能力，通常是用相邻两点间的距离(D)来表示。其公式如下： D=0.612λ/ N.A.
分辨率的数值越小，显微镜的分辨能力就越大，反之越小。由上述公式可以看出，分辨率的数值与波长成正比，与镜口率(N.A.)成反比。因此，要想得到高分辨率必须要缩短波长和加大镜口率。镜口率的大小决定于镜口角的大小和物镜与标本间介质折射率(refraction coefficient)的大小。其计算公式如下：
N.A.=n•sinα/2
其中，n为物镜与标本之间介质的折射率；α为镜口角（聚光器交点对物镜镜口的张角）。对于干燥物镜来说，介质为空气，镜口率一般为0.05~0.95；而油镜用香柏油为介质, 镜口率可接近1.5。限制光镜分辨率的关键因素是光的波长(光的衍射效应)，光镜无论制作得如何精密都无法突破这一极限，因此一般光镜设计的最大放大倍数为1,000~1,500。即将0.2μm的质点放大到0.2~0.3mm(人肉眼的分辨率)就可辨认清楚。
四、作业
1、写出使用普通光镜进行显微装片观察的正确方法和步骤。
2、利用光镜和装片进行生物显微绘图。
（注：本实验为验证性试验。）
特别注意：
1、为保护镜头和装片的清洁，本次试验不使用100倍物镜和香柏油进行观察。如有必须使用的情况，请与实验老师联系后再进行。并且在观察完毕后必须及时用擦镜纸蘸取有机溶剂（二甲苯）彻底清洗物镜镜头和装片。
