应用DAD检测器判别液相色谱峰纯度

dad检测器工作原理
DAD检测器是一种高效的液相层析色谱峰检测器，被广泛应用于化学、医药和环境科学等领域中。

在DAD检测器中，一个样品在经过色谱柱分离后，流经一个光学单元，通过波长扫描获得各个波长的吸光度信息，再进一步得到由某种化合物所形成的色谱峰。

DAD检测器的工作原理主要是基于波长分离和分光技术。

当分离某种化合物时，其分子吸收特定波长的光，称为吸收峰。

DAD检测器的光源通常采用低压氙灯（150-400 nm）或氘灯（190-400 nm），以产生广谱的光线。

当化合物经过流动相时，吸收峰会产生吸收光谱，这
些光谱可以被分光仪检测。

DAD检测器的分光仪将流经样品的光束分解成其组成的不同波长。

由于吸收峰在不同波长下的大小不同，可以通过在吸收光谱上进行波长
扫描，来确定样品中的各个化合物的存在与否。

在扫描时，该仪器以
一定的速率在整个波长范围内进行扫描，并检测到每个波长处的吸收峰。

DAD检测器还能提供色谱峰的UV吸收光谱，这对于确定复合化合物中不同成分的比例十分重要。

另外，当出现表面积重叠时，利用吸收
光谱也可协助解决这些问题。

总而言之，DAD检测器利用吸收光谱和波长扫描的方法，能够实现在液相色谱中对化合物进行快速和准确的检测。

它不仅能够定量地检测化合物，同时也可以提供化合物的结构信息，是现代分析化学中不可或缺的工具之一。

异常峰分析异常的色谱峰指的是色谱图中的无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。

异常峰是色谱实验工作中最棘手的问题。

这些峰严重影响色谱分析的结果。

色谱图中不可能有纯正的高斯对称峰 , 轻微的拖尾是正常的 , 这是由分离系统所决定的。

在此仅对几种异常峰进行分析。

1.峰前或峰后有小峰的分析产生原因大致分为以下几种情形(1) 样品不纯。

可改变不同的流动相和色谱柱 ,对样品进行分离比较 , 选择合适的分离条件。

(2) 分析柱或保护柱柱头塌陷。

此情况较常见 ,可更换分析柱或保护柱后对峰形进行比较。

柱头塌陷时往往所有的峰都会出现峰分裂。

对色谱柱再生和清洗可以改善分离效果。

(3) 色谱柱柱容量下降。

当长时间使用后 , 有一些强保留组分吸附在柱子中 , 不大的进样量往往就会出现峰分裂。

用强洗脱能力的溶剂清洗色谱柱 , 或更换色谱柱可使问题得到改善。

(4) 样品溶剂与流动相不匹配或进样体积过大。

当样品溶剂比流动相极性大时 , 有时即使进样体积很小 , 也容易出现峰变形和裂分现象。

建议用流动相溶解样品。

(5) 流动相不恰当。

此情况较罕见 , 有些样品在特定的色谱条件下可能存在结构的动态平衡 , 而出双峰 , 这种双峰是无法分离完全的 , 改变色谱条件尤其是p H 值会使峰形正常。

(6) 样品分解。

不稳定的样品在色谱分离过程中变成其他物质而出现双峰。

这时需改变样品处理方法或色谱分离条件。

2.负峰分析在色谱分析中有时会出现负峰或倒峰 , 如图 3 中的大峰的左下就有一负峰。

出现这种现象可能是由以下几种原因引起的 , 可针对不同情况进行排除 , 进而使问题得到解决。

(1) 流动相吸收本底值过高。

此时可适当改变检测波长。

(2) 进样过程中进入空气。

进行排气处理 , 直到基线平稳再进样。

(3) 样品组分的吸收低于流动相。

可改变流动相或改变检测波长。

(4) 配制样品的溶液与流动相不一样。

重新配制样品 , 用与流动相一样的溶剂配制或稀释样品。

配置PDA或DAD检测器液相色谱峰纯度检测及其应用(一)原创2016-12-17Bruce Lee药渡1PDA或者DAD检测器作为液相色谱的一种通用型检测器，能够在全波长下同时采集并记录存储数据。

经数据处理系统对数据进行处理的时候，可对不同波长下的色谱图分别处理，并分别保存相应通道的积分结果。

在方法开发的过程中，我们可以利用PDA或DAD同时监视多个波长下的色谱图的特点，运用方法开发策略，使得我们关注的目标峰在任意波长下，均不被其他的相关杂质所干扰；而且在开发的过程中，我们也可以直接提取样品的光谱图，然后根据样品的光谱图的特点，以及方法的目的，选择相应的波长作为检测波长。

此外，PDA或DAD检测器的全波长同时采集数据的特点，也赋予了其光谱比对的功能。

不同的化合物具有不同的紫外吸收光谱形状以及不同的吸光特性，因此，二极管阵列检测器可以通过比对色谱峰的整个峰宽范围内的每一时刻记录的吸收光谱形状以及吸光特性，从而实现对色谱峰纯度的检测，如下图1所示。

Fig.1Spectrum comparison between different time point在上图1中，我们明显地可以看出，16.500min到17.200min内的各时间点的吸收光谱形状以及吸光特点存在较大差异，说明该时间段内的流出物不是单一的，也即意味着色谱图上的该色谱峰不纯，有其他的杂质共洗脱。

PDA或DAD配合数据处理系统，给出的色谱峰的纯度结果，理论上讲，只是参考值。

如对于对映异构体来说，同一对对映异构体之间互为手性杂质，但他们却具有完全一致的光谱形状以及吸光特点，而且在非手性分离条件下，出峰的位置完全一致，此时检测器的色谱峰纯度检测功能不能够检测到该手性杂质。

甚至在手性环境下，对映异构体之间已经实现了部分分离的时候，理论上讲，色谱峰纯度检测功能依然无法将其分别判定为杂质。

再如，分离度完全为0的两个色谱峰进行色谱峰纯度检测的时候，由于两个色谱峰完全重叠，任意一个时刻的光谱图均是两个洗脱组分的吸收光谱图叠加之后的结果，在这种情况下，色谱峰纯度检测功能也无法判断出该色谱峰是不纯的。

高效液相色谱法测定空气清新剂中的壬基酚聚氧乙烯醚杨丽峰;张利萍【摘要】运用二极管阵列检测器(DAD)结合光谱扫描以及峰纯度检测建立了空气清新剂中壬基酚聚氧乙烯醚(NP-10)的高效液相色谱检测方法.样品经无水乙醇超声提取后,经ODS C18色谱柱(5μm,4.6 mm ×250 mm)分离,柱温为30℃,.以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,以DAD检测,检测波长为280 nm.在此条件下,NP-10的最低检出限为3.0 ×10-4 g·L-1;方法的精密度良好,相对标准偏差为0.19％;样品加标回收率为98％～ 101％;空气清新剂样品中NP-10的测定结果与实际添加值非常接近,说明方法准确可靠.【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2013(043)005【总页数】3页(P386-388)【关键词】壬基酚聚氧乙烯醚;高效液相色谱法;空气清新剂【作者】杨丽峰;张利萍【作者单位】广州立白企业集团有限公司,广东广州 510170;广州立白企业集团有限公司,广东广州 510170【正文语种】中文【中图分类】TQ423.2随着生活水平的提高，人们对空气质量的要求也越来越高。

环境异味对人体健康、情绪、工作效率等可造成一定的影响，因此使用空气清新剂的人越来越多。

近几年来，人们在使用空气清新剂的过程中，也愈来愈重视它在室内环境中给人体健康带来的影响[1]。

空气清新剂中，由于水基型配方体系使用安全，备受消费者喜爱。

然而，所用香精大部分成分为油溶性，强烈的搅拌下虽然能分散于水中，但静置后，由于分子间作用力及其本身的表面张力而使小油滴又从水中分离出来，集结成油相[2]，因此在水基型空气清新剂配方中需要添加增溶剂使香精乳化到水基中。

壬基酚聚氧乙烯醚具有良好的乳化性能，成本也相对较低，作为水基型空气清新剂的一种重要的香精增溶剂而被广泛使用。

但是，壬基酚聚氧乙烯醚的降解产物，不仅会对人体健康造成影响[3-6]，还会对环境安全性产生影响[7-8]。

异常峰分析异常的色谱峰指的是色谱图中的无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况;异常峰是色谱实验工作中最棘手的问题;这些峰严重影响色谱分析的结果;色谱图中不可能有纯正的高斯对称峰 , 轻微的拖尾是正常的 , 这是由分离系统所决定的;在此仅对几种异常峰进行分析;1.峰前或峰后有小峰的分析产生原因大致分为以下几种情形1 样品不纯;可改变不同的流动相和色谱柱 ,对样品进行分离比较 , 选择合适的分离条件;2 分析柱或保护柱柱头塌陷;此情况较常见 ,可更换分析柱或保护柱后对峰形进行比较;柱头塌陷时往往所有的峰都会出现峰分裂 ;对色谱柱再生和清洗可以改善分离效果;3 色谱柱柱容量下降;当长时间使用后 , 有一些强保留组分吸附在柱子中 , 不大的进样量往往就会出现峰分裂;用强洗脱能力的溶剂清洗色谱柱 , 或更换色谱柱可使问题得到改善;4 样品溶剂与流动相不匹配或进样体积过大;当样品溶剂比流动相极性大时 , 有时即使进样体积很小 , 也容易出现峰变形和裂分现象;建议用流动相溶解样品;5 流动相不恰当;此情况较罕见 , 有些样品在特定的色谱条件下可能存在结构的动态平衡 , 而出双峰 , 这种双峰是无法分离完全的 , 改变色谱条件尤其是p H 值会使峰形正常;6 样品分解;不稳定的样品在色谱分离过程中变成其他物质而出现双峰;这时需改变样品处理方法或色谱分离条件;2.负峰分析在色谱分析中有时会出现负峰或倒峰 , 如图 3 中的大峰的左下就有一负峰;出现这种现象可能是由以下几种原因引起的 , 可针对不同情况进行排除 , 进而使问题得到解决;1 流动相吸收本底值过高;此时可适当改变检测波长;2 进样过程中进入空气;进行排气处理 , 直到基线平稳再进样;3 样品组分的吸收低于流动相;可改变流动相或改变检测波长;4 配制样品的溶液与流动相不一样;重新配制样品 , 用与流动相一样的溶剂配制或稀释样品;3.前沿、拖尾峰分析拖尾：1 干扰峰,优化条件分离；2 色谱柱塌陷,更换色谱柱； 3 流动相pH不合适,调节pH值；4 管路没有接好,存在较大的死体积,可以重新接一下;前沿：1 溶剂选择不合适,选择合适的溶剂；2 样品过载,降低进样量； 3 柱温太低,升高柱温；4 色谱柱损坏,更换色谱柱；图谱前沿和拖尾的原因主要是流动相选择不合适,可以相应调整流动相的极性,或者适当加入酸来调整,可以得到较好的改善;一般来讲,酸碱在流动相中对于前沿和拖尾影响较大; 柱前沿是可能因为柱超载,拖尾是可能因为样品被污染,选择合适的流动相,调节好PH能够改善这以情况;前辈们总是会告诉我们,拖尾峰与柱子有关,可能是过载,稀释样品再做,或换新柱做; 有时候托尾峰往往是有机性相近杂质没有分开,此时,可以优化分析方法,或更换柱子试一试；也可能由于柱子使用时间太久柱效下降出现塌陷等原因；再有也会根样品本身性质有关,基团需要流动相中添加能与之结合优化峰形的化学物质,要根据具体情况而定;4.色谱双峰产生的可能及判断和处理液相上有一句经典的话说得好“出两个峰肯定不是一种物质,出一个峰不一定是一种物质”;而色谱双峰指的是明是一种物质,但在色谱图中出现双峰,而表明含二种物质;我将这种情况分为四种原因;1色谱柱如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现出峰越快,双峰的可能性会减少,尤其采用单一纯物质时,可以肯定色谱柱出问题－柱头受损或柱头固定相变脏或流失;如果进样量少,原来色谱柱正常,色谱峰的形状多为一大峰带一小峰,不一定拖尾,这一般应是柱头受堵,将色谱柱反过来接,用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂,将堵在柱头的残留物冲掉,再反过来,一般情况下就行了;当然不反冲,正冲有时也会正常的;如果峰拖尾,双峰强弱相差不大,柱头固定相变脏或流失可能性更大,高频红外碳硫分析仪这是可以将进样那头拧开,将微孔滤片超声,柱头刮去一部分填料,重新填上新填料拧紧,不过这种活,需要一定技术,同时不能老干那种事,否则用不了几次,色谱柱就会应柱效很低而报废;2溶剂极性及进样量许多HPLC分析者对此可能不以为然,一般的HPLC的书籍和文献都不会提到这方面的内容,而这确是双峰产生的一个很重要的原因;目前HPLC分析多为反相色谱,流动相多为甲醇、乙腈、水,加各种添加剂以改善分离性能;样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解;最佳的溶解方法是用流动相溶解,但是很多情况是不一致的;当用溶剂极性强度大的试剂,如纯甲醇、纯乙腈,纯乙醇,而分析体系中以水为主,样品进样量大,如定量管为20ul,此条件下完全可以肯定,单一的纯物质出双峰,第二峰比第一峰小每次都不太一样,且拖尾,保留时间会提前相对进样量少而言,将进样量减少一半以上,峰型将变为正常;这是样品的溶剂与流动相极性相差太大,而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的;上面提到进样量造成双峰的一个原因,另一个原因是,进样量不一定大,但绝对量很大,色谱图上的双峰紧靠在一起,基本上齐高,不拖尾如果出峰很快,也可能是色谱柱问题;将样品稀释再进样就可以了,这是由于进样量过大,色谱柱过载造成的;3样品的特性有些样品由于其化学结构的特点,存在互变异构现象,而这种互变异构体无法分开,而是以一个动态平衡存在;在色谱分析时,在一个特定的条件下,一种物质将出现双峰,双峰靠的很近,基本齐高,不拖尾,条件稍一变化,尤其pH,双峰现象将消失,如红霉素等;有的样品紫外的色谱图上看不到双峰,但在LC－MS下,用质谱检测器,其质谱的总离子流图上较明显,例如我分析过的农药啶虫眯吡虫清;4参数记录的参数一般都内定的,不必修改,但GC和HPLC的参数是不完全一致的,例如C －R3A数据记录仪上的一般记录时间间隔GC为2ms,HPLC 为5ms,如果记录间隔时间缩短,一个峰将变为二个峰或更多;5.鬼峰、倒峰、未出峰6.峰裂分裂峰产生原因的确定样品基质复杂或分析多种样品——柱污染或部分阻塞滤片流动相 pH>=7——由于硅胶溶解导致柱塌陷除非使用专门的柱子溶剂比流动相的强度大——可能产生裂峰或宽峰,由样品量决定溶剂化效应7.峰拖尾、峰展宽、峰前伸峰拖尾原因的确定评价柱选择——使用高纯度硅胶柱或不同键合技术柱评价流动相效果——改变流动相pH和添加剂消除次级效应流动相中组份与柱子相互作用减小进样量消除柱外效应冲洗柱子——检查柱子老化/塌陷易记小卡片来了：其它常见峰异常问题汇总Q&A峰问答进行HPLC分析时,怎样才能知道某一个色谱峰是否是单一峰呢特别是分析中药成分的时候标准品加入法、DAD、还有改变流动相的组成是否能说明呢1、多种不同原理的方法比较是首选;2、其次采用DAD检测器进行光谱分析,如果提示不纯,估计有问题;纯度阈值受仪器、流动相等影响,所以只能作为参考;对于分子结构中差异有紫外吸收官能团的,dad检测器一般还是可以准确判断峰纯度的,但对于结构中无紫外吸收的那些差异,DAD检测器就无能为力了,比如某肽链中的氨基酸差异、或者一些对应异构体,dad也是无能为力的;3、如果DAD不行,那么就需要采用质谱鉴别了,优选液质联用,如果是含盐流动相,可以采用收集不同时段的色谱流出物的方式,脱盐,进行质谱检测;4、如果怀疑有异构体,这个就比较头疼了,非对应异构体需要二级主要是对CID的能量有要求,可以打断侧链的质谱才能判断侧链的区别;对应异构体的辨别目前好像只有waters的离子淌度质谱没做过有一定的分辨能力,但也不是万能的;所以峰纯度判定需要结合化合物及可能杂质的结构特点,来合理选择;。

DAD检测法的原理和应用1. 简介DAD（Diode Array Detector，二极管阵列检测器）是一种常用于色谱和液相色谱分析中的检测器。

它使用一个由很多个二极管组成的阵列，来检测样品在不同波长下的吸收能力，从而得到样品的吸收谱。

DAD检测法具有高灵敏度、高选择性和宽波长范围等优点，广泛应用于化学、环境、制药等领域。

2. 原理DAD检测法的基本原理是通过样品溶液对不同波长的光进行吸收，并测量吸收光的强度。

下面是DAD检测法的基本原理：2.1 光源DAD检测法通常使用紫外-可见光源，如汞灯或者氘灯，以产生从紫外到可见光范围的连续光谱。

2.2 光路光源发出的光经过一个分光装置，如光栅或者棱镜，被分解成不同波长的光线。

然后，经过样品池内的样品溶液，样品溶液对不同波长的光吸收不同。

2.3 阵列探测器DAD检测法中使用的探测器是由一排二极管组成的阵列。

每个二极管都能测量一段波长范围内的光强度。

探测器将被样品溶液吸收的光信号转化为电信号。

2.4 数据处理通过不同二极管获得的电信号经过放大和转换后，转化为数字信号并被记录下来。

然后，可以通过计算机软件对数据进行处理和分析，得到样品在各个波长下的吸收谱。

3. 应用领域DAD检测法在许多领域中都有广泛的应用，主要体现在以下几个方面：3.1 色谱分析DAD检测法在气相色谱和液相色谱分析中被广泛使用。

色谱技术结合DAD检测法可以实现物质的分离和定量分析。

例如，可以用DAD检测法追踪某种特定溶质在样品中的存在量，以及其在不同波长下的吸收谱。

3.2 生物医药DAD检测法在生物医药领域被广泛运用。

它可以用于药物的纯化、定性和定量分析。

此外，DAD检测法还可以用于分析血液、体液中的成分，以及蛋白质、核酸等生物大分子的测定。

3.3 环境分析DAD检测法也适用于环境污染分析。

它可以检测环境中微量有机物的存在与浓度，并通过分析吸收谱来鉴定污染物种类。

这对于环境监测和环境保护具有重要意义。

配置PDA或DAD检测器液相色谱峰纯度检测及其应用(二) 2016-12-29作者：Bruce Lee来源：药渡头条本文接上篇：配置PDA或DAD检测器液相色谱峰纯度检测及其应用(一)1、概述利用PDA或者DAD检测器的全波长数据采集存储能力，通过光谱的比对可以实现对色谱峰纯度的检测，以此达到判断是否有其他相关杂质共洗脱现象。

前文介绍了通过比较光谱数据组向量之间夹角与噪音的cosine或者sine值的大小关系，进而实现色谱峰纯度的检测，其中就包括有Shimadzu LCsolution以及Waters Empower两类CDS，分别如下图1-1与1-2。

Fig.1-1Peak purity determination by cosine with Shimadzu LCsolutionFig.1-2Peak purity determination by sine with Waters EmpowerPDA或者DAD检测器实现色谱峰纯度检测的根本基础在于，对采集到的任一时刻的吸收光谱与参比吸收光谱进行对比。

除了数据组向量的方式之外也有其他的实现方式，如相关系数法。

对于一个色谱峰而言，其任一时刻的吸收度均是样品浓度的线性函数，假设取色谱峰上的任意2个时间点的光谱，其中一条光谱在光谱范围内的吸光度作为纵坐标，另外一条光谱在光谱范围内的吸光度作为横坐标，分别进行线性回归分析。

如果该色谱峰是纯的，在XOY坐标平面内的线性回归曲线的相关系数就会比较大，线性关系较好，反之，在XOY坐标平面内的线性回归曲线的相关系数就会比较小，如下图2所示。

Fig.2Peak purity determination by relevant coefficient在线性回归的时候，其相关系数r的计算可按照下图3中公式进行，而图2中的Similarity 则是相关系数r的平方乘以1000而来，最大为1000，最小为0，值越大色谱峰纯度也就越高，计算如下图4所示。

二极管阵列检测器对色谱峰纯度的分析刘飞;刘宁;程光【摘要】二极管阵列检测器（DAD）是药物分析实验室常用的高效液相色谱检测器。

该型监测器除了具备紫外可见光检测器所有的功能之外，还可以在线获取色谱峰的紫外可见光吸收谱图，并据此提供峰纯度分析功能。

本文从评估峰纯度的原理入手，结合安捷伦色谱工作站和实际色谱实验，详细说明峰纯度分析的2种方法和显示形式，讨论应用峰纯度分析注意事项。

%Diode array detector (DAD) is a common part of high performance liquid chromatography in the pharmaceutical analysis labs. In addition to being a fully functional ultraviolet-visible (UV-Vis) detec-tor ,DAD is also capable of recording the UV-Vis spectrum simultaneously analyzing peak purity. In this paper ,we detailedly elucidated two methods and display modes of peak purity analysis based on the evalua-tion of the principle of peak purity analysis. Besides ,the precautions of applying peak purity analysis were discussed combining with practical experiences of using Agilent HPLC workstation.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2013(000)006【总页数】4页(P141-144)【关键词】二极管阵列检测器;峰纯度【作者】刘飞;刘宁;程光【作者单位】南京大学生命分析化学国家重点实验室，南京 210093;南京绿叶思科药业有限公司研发部，南京 210061;南京绿叶思科药业有限公司研发部，南京210061【正文语种】中文在药物分析方法开发初步完成后，需要对分析方法进行验证，验证的内容包括定量限、精密度和专属性等内容。

VWD战DAD二种检测器的辨别之阳早格格创做战DAD二种检测器皆属于下效液相色谱仪器的组成部分，不过二者安排有辨别，使用有好别而已；只可举止某一特定波少的检测，即预先设定佳某一波少，而后正在此波少下对于流经色谱柱的样品举止检测；DAD检测器不妨举止齐波少检测，普遍是从190nm到400nm的范畴扫描，扫描中断后得到一弛三维图谱，坐标分别是运止时间、吸支值战波少值，天然您也不妨从中调出所有一弛波少范畴正在190nm到400nm的色谱图，此三维图对于有闭物量查看时的波少采用比较有助闲； 3.闭于峰杂度的问题，正在DAD检测器上，查看某一色谱峰（A）的峰杂度，最先要对于A举止妥当的积分，而后采用符合的参比（分自动战脚动，普遍选自动，特殊情况下选脚动），再采用波少范畴（210nm-400nm较符合吧，再矮会有基量的终端吸支搞扰，会做用峰杂度查看的可疑度，天然那要瞅简直的震动相及等梯度情况啦），之后采用牢固阈值（国家局央供正在990及以上），终尾面一下要测的主峰便不妨了.尔简朴的道一下峰杂度查看的本理吧，是那样的，当要查看某一色谱峰的峰杂度（A）时，硬件会正在A的起初面、前半中面、顶面、后半中面战中断面（同5面）分别与紫中齐扫描图去举止拟合度查看，当拟合度大于阈值（即上述的990）时，硬件默认为A的五个面皆是一种物量，即A是一种物量的紫中吸支峰，杂的，好异，当拟合度矮于阈值时，硬件默认A的五个面没有是一种物量，即A是二种或者二种以上的物量的紫中吸支峰，没有杂，便要再举止条件的劣化分启它们了.所以峰杂度查看是采用有闭物量查看色谱条件的要害关节之一，也便是要领的博属性啦.安捷伦普遍是采用光谱归一化法估计峰杂度，简朴的道便是从色谱峰上采用5个面（峰起初面、峰降下一半处的面，峰顶面、峰下落一半处的面及峰的中断面，天然动做DAD也不妨采用更多），提与那5个面的光谱图举止叠搁，瞅其沉合程度去推断色谱峰杂度.与那5个面的杂度果子仄衡值战阈值比较（普遍采与牢固阈值990即可），大于990即为杂峰，反之则为没有杂.欲仔细相识可参阅附件中证明书籍.。

岛津DAD高效液相色谱操作规程1、用途：进行样品纯度和杂质的分析，可以满足全波长采集数据并进行最佳吸收波长的选择。

2、系统组成：本系统由2个LC-20A Tvp溶剂输送泵, 7725i手动进样阀，SPD-M20A紫外-可见检测器、岛津原装色谱数据工作站和电脑等组成，柱温箱、不间断电源等辅助设备。

3、准备3.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤（水相用水膜，有机相用有机膜），超声脱气20min。

3.2根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向，顺序是从进样器流经色谱柱进入检测器方向，色谱柱箭头方向为流速方向）。

3.3倒掉废液瓶中的废液。

3.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4、操作规程4.1启动仪器：4.1.1首先打开柱温箱并设置柱温箱温度为40℃按柱温箱控制界面上的ready键启动柱温箱。

4.1.2 依次开启电脑、按power键开启检测器和泵控开关。

4.1.3 将泵A、泵B吸滤器相应的放入到准备好的流动相中。

4.1.4 逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀4.1.5 按泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，冲洗3-5分钟后，按[purge]键停止；4.1.6将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀4.1.7五分钟后打开电脑桌面上的LCsolution工作站，进行仪器与电脑的连接。

本机没有密码，可直接进入系统。

4.1.8进入主界面后点击通道1进行连接。

4.2参数设置：4.2.1建立新的分析方法（详情见岛津原装色谱工作站操作规程）。

若为已有方法的分析项目，直接调用即可（详情见岛津原装色谱工作站操作规程）。

本机所有操作均在工作站上进行，在操作界面上均为无效操作。

工作站右上角工具栏上有一排图标，在上面控制泵开关和灯开关。

4.2.2点击工作站中的灯开关和泵开关进行仪器的稳定。

4.3仪器稳定的判断4.3.1仪器柱压波动在0.2MPa为色谱柱稳定状态。