高中生物 专题2 微生物的培养与应用 阶段质量检测A卷 学业水平达标 新人教版选修1

2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计20小题每题3分共计60分）1.下列有关用平板划线法纯化微生物的叙述正确的是（）A. 平板划线法可用于微生物的分离、纯化和计数B. 划线过程中对接种环用\ 75%的酒精进行消毒处理C. 接种微生物前要对接种环灭菌划线过程中无须再灭菌D. 划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连【答案】D【解析】解 A.平板划线法不能用于微生物的计数 A错误B.划线过程中需要对接种环进行灼烧灭菌 B错误C.接种微生物前要对接种环灭菌划线过程中仍须再灭菌 C错误D.划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连 D正确故选 D2.为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）下列叙述正确的是（）A. 培养基甲可对纤维素分解菌进行分离和鉴别B. 纤维素分解菌可以在培养基甲中大量繁殖C. 培养基乙可用于分离鉴别纤维素分解菌因为该培养基中有琼脂和CR溶液D. 用甲、乙培养基培养纤维素分解菌一段时间后甲中可得到周围有透明圈的菌落【答案】B【解析】解 A.培养基甲中无琼脂所以该培养基属于液体培养基液体培养基不适合用于分离和鉴别微生物 A错误B.培养基甲可以用于对纤维素分解菌的扩大培养 B正确CD.培养基甲不含琼脂为液体培养基不会得到有透明圈的菌落培养基乙中虽然有琼脂和CR溶液但该培养基缺乏纤维素所以不适合培养纤维素分解菌 C、D错误故选 B3.新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯提高公共卫生安全意识下列相关叙述错误的是（）A. 戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播B. 病毒能够在餐具上增殖用食盐溶液浸泡餐具可以阻止病毒增殖C. 高温可破坏病原体蛋白质的空间结构煮沸处理餐具可杀死病原体D. 生活中接触的物体表面可能存在病原微生物勤洗手可降低感染风险【答案】B【解析】A、戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播 A正确B、病毒无细胞结构只能寄生于活细胞才能生存不能在餐具上增殖 B错误C、蛋白质在高温下容易变性使得蛋白质的空间结构受到破坏煮沸处理餐具可杀死病原体 C正确D、生活中接触的物体表面可能存在病原微生物勤洗手可将病原微生物冲走降低感染风险 D正确4.纤维素酶可以将哪种物质分解（）A. 牛肉片B. 鱼片C. 滤纸条D. 塑料条【答案】C【解析】解 AB.牛肉片、鱼片的主要成分是蛋白质纤维素酶不可以将其分解 AB错误C.滤纸条的主要成分是纤维素纤维素酶可以将其分解 C正确D.塑料条的主要成分为聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯树脂根据酶的专一性纤维素酶不能将其分解 D错误故选 C5.培养基可为微生物的生长、繁殖提供必需的营养物质根据某些微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理设计培养基可使其具有只允许特定的微生物生长同时抑制或阻止其他微生物生长的功能下列关于选择培养基的说法不正确的是（）A. 培养基中添加伊红美蓝统计饮用水中大肠杆菌的数量B. 以尿素为唯一氮源的培养基可将土壤中的尿素分解菌筛选出来C. 培养基中添加青霉素从而将真菌从混有细菌的培养基上选择出来D. 用以纤维素为唯一碳源的培养基分离出分解纤维素的微生物【答案】A【解析】解 A.大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝发生特定的颜色反应使菌落呈黑色接种后培养的结果伊红美蓝培养基上的黑色菌落是大肠杆菌但该方法不能统计大肠杆菌数目只能鉴别大肠杆菌的有无 A错误B.将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上并在适宜的条件下培养分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖而不能利用尿素的微生物则不能生长繁殖故可将土壤中的尿素分解菌筛选出来 B正确C.青霉素能抑制细菌的繁殖所以要将真菌从其他细菌中分离出来常采用向培养基中添加青霉素配制成选择培养基的方法 C正确D.筛选分解纤维素的微生物需要制备以纤维素为唯一碳源的选择培养基在该培养基上只有能分解纤维素的微生物能够繁殖 D正确故选 A6.为纯化菌种在鉴别培养基上划线接种尿素分解菌培养结果如图所示下列叙述正确的是（）A. 倒平板后需要间歇晃动培养皿以保证培养基表面平整B. 培养皿中Ⅰ区的细菌数量较多一般从Ⅱ区挑取单菌落C. 该实验结果因单菌落太多没有达到菌种纯化的目的D. 培养基的pH可调至近中性其中尿素为唯一的氮源物质【答案】D【解析】A、倒平板后无需间歇晃动培养皿 A错误B、培养皿中I、II区的细菌数量较多一般从IⅢ区挑取单菌落 B错误C、该实验区有单菌落挑取培养后可达到菌种纯化的目的 C错误D、细菌培养基的pH可调至近中性其中尿素为唯一的氮源物质 D正确故选D.7.下列与分解尿素的细菌的分离与计数、分解纤维素的微生物的分离实验有关的叙述不正确的是（）A. 尿素是一种重要的农业氮肥农作物不能直接吸收利用B. 分解尿素的细菌能合成脲酶将尿素分解为氨和\ CO_2C. 纤维素酶包括\ C_1酶、\ C_x酶和葡萄糖苷酶均能催化纤维素分解成葡萄糖D. 采用稀释涂布平板法进行活菌计数其结果可能会偏小【答案】C【解析】解 A.尿素是一种重要的氮肥农作物不能将其直接吸收利用而是通过土壤中的细菌将其分解为氨和 CO_2后才能被农作物利用 A正确B.分解尿素的细菌能合成脲酶将尿素分解为氨和 CO_2 被农作物利用 B正确C.纤维素酶包括 C_1酶、 C_x酶和葡萄糖苷酶其中 C_1酶和 C_x酶能使纤维素分解成纤维二糖葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖 C错误D.采用稀释涂布平板法进行活菌计数有的菌落有可能是由多个细菌形成的所以其结果可能会偏小 D正确故选 C8.金黄色葡萄球菌是导致人类患病的一种主要病原菌能引起许多严重感染金黄色葡萄球菌能被革兰氏染液染成蓝紫色（染色需要制作临时装片并借助显微镜观察）属于革兰氏阳性菌研究小组在感染者体内采集样本并制成菌液后进行分离培养实验基本步骤如下图所示图中X表示（）A. 调节pHB. 接种C. 加入革兰氏染液D. 将培养基倒置【答案】B【解析】解 A.灭菌前先调pH A错误B.步骤Ⅹ表示接种在无菌条件下操作时先将菌液稀释然后将菌液涂布到培养基平面上B正确C.革兰氏染液不能直接加入培养基对细菌染色 C错误D.培养时将培养基倒置 D错误故选 B9.下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（）A. 利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌B. 可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C. 菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据D. 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌【答案】C【解析】解 A.在培养基中加入刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物当纤维素被分解后红色复合物不能形成培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈从而可筛选纤维素分解菌 A正确B.可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型 B正确C.菌落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据但是有无荚膜通过肉眼无法观察 C错误D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 D正确故选 C10.醋酸杆菌能生成细菌纤维该细菌纤维与棉花纤维类似主要成分是纤维素因此能被制成服装下列有关该细菌的说法正确的是（）A. 醋酸杆菌的遗传物质为RNAB. 纤维素水解的最终产物是\ CO_2和水C. 醋酸杆菌所含元素中O是数量最多的元素D. 醋酸杆菌属于生命系统中最简单的生命层次【答案】D【解析】A.醋酸杆菌是原核生物其遗传物质为DNA A错误B.纤维素水解的最终产物是葡萄糖代谢的最终产物是 CO_2和水 B错误C.醋酸杆菌所含元素中 H是数量最多的元素 O是含量最多的元素 C错误D.醋酸杆菌为单细胞生物细胞属于生命系统中最简单的生命层次 D正确故选D11.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是（）A. \ CO_2和\ N_2B. 葡萄糖和\ NH_3C. \ CO_2和尿素D. 葡萄糖和尿素【答案】D【解析】解能合成脲酶的微生物是尿素分解菌该细菌是异养微生物不能直接以二氧化碳或氮气、氨作为碳源和氮源只能以葡萄糖和尿素等有机物作为碳源和氮源故选 D12.下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤正确的是（）①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至 10^1、 10^2、 10^3、 10^4、 10^5、 10^6、 10^7稀释度A. ①→②→③→④B. ①→③→②→④C. ①→②→④→③D. ①→④→②→③【答案】C【解析】解从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是: 土壤取样→选择培养（此步是否需要应根据样品中的菌株数量的多少来确定）→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的选择培养基上→挑选菌落故C项正确故选 C13.防止杂菌入侵获得纯净的培养物是研究和应用微生物的前提下列操作与之无关的是（）A. 对培养基进行高压蒸汽灭菌处理B. 接种操作必须在火焰旁进行C. 第二次及以后每次划线接种前都必须灼烧接种环D. 培养的整个过程都必须保持无菌环境【答案】C【解析】解 A.对培养基进行高压蒸汽灭菌处理可以防止杂菌污染 A不符合题意B.为了防止杂菌的入侵划线操作要在酒精灯火焰旁进行 B不符合题意C.每次划线前都需要灼烧接种环以防止杂菌污染第二次及以后的划线要从上一次划线的末端划线 C不符合题意D.培养的整个过程都必须保持无菌环境 D不符合题意故选 C14.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述错误的是（）A. 因为土壤中各类微生物的数量不同所以为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B. 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量选用的稀释范围不同C. 如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板则说明稀释操作比较成功并能够进行菌落的计数D. 牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落【答案】D【解析】A．土壤是微生物的天然培养基土壤中各类微生物的数量不同获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离 A正确B．土壤中细菌总量高于土壤中能分解尿素的细菌的数量所以选用的稀释范围不同 B 正确C．稀释涂布平板法进行计数时得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板则说明稀释操作比较成功并能够进行菌落的计数 C正确D．选择培养基的菌落数目明显小于牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落 D错误故选D15.下列实验流程或操作中错误的是（）A. 挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵（果酒）→醋酸发酵（果醋）B. 土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落C. 石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油D. 胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→浓缩→过滤→胡萝卜素【答案】D【解析】下列实验流程或操作中错误的是 - 高中生物解 A.果酒和果醋制作过程挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵（果酒）→醋酸发酵（果醋） A正确B.土壤中纤维素分解菌的分离与筛选步骤土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落 B正确C.橘皮精油的提取流程石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤（静置→再次过滤）→橘皮油 C 正确D.胡萝卜素提取和鉴定过程胡萝卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→过滤→浓缩→胡萝卜素→鉴定（纸层析法） D错误故选 D16.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图．据图分析正确的是（）A. 3号试管中的菌落稀释倍数为10^3倍B. 4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号的10倍C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7times 10^9个D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高【答案】B【解析】解 A、3号试管是稀释10^4倍 A错误B、4号中稀释液进行平板培养稀释倍数比5号的低10倍如果稀释倍数适当得到的菌落平均数可能是5号的10倍 B正确C 、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+ 175+ 167)\div 3\times 10^5\times 10= 1.7\times 10^8个 C错误D、稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低 D错误．故选 B．17.有关纤维素分解菌选择培养基正确的叙述是（）A. 可以增加纤维素分解菌的浓度B. 可以减少纤维素分解菌的浓度C. 所用培养基是固体培养基D. 所用培养基是平板培养基【答案】A【解析】解 A、使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基可以增加纤维素分解菌的浓度 A 正确B、使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基可以增加纤维素分解菌的浓度 B错误C 、所用培养基是液体培养基鉴定时需要使用固体培养基 C错误D、所用培养基是液体培养基鉴定时需要使用固体培养基 D错误．故选 A．18.某些土壤细菌可将尿素 (\, CH_4N_2O) 分解为 CO_2和 NH_3供植物吸收和利用但分解产物 CO_2不能为该菌提供营养下列关于配制分离这一菌种的选择培养基的成分符合要求的是（）A. 仅尿素B. 尿素+葡萄糖C. 仅葡萄糖D. 牛肉膏蛋白胨【答案】B【解析】解根据题意“某些土壤细菌可将尿素 (\, CH_4N_2O) 分解为 CO_2和 NH_3供植物吸收和利用但分解产物 CO_2不能为该菌提供营养”说明该土壤细菌是异养型需要含碳有机物作为碳源以尿素作为氮源故选 B19.在用刚果红染色法分离分解纤维素的微生物实验时先进行选择培养的目的是（）A. 杀灭不需要的微生物B. 除去杂菌获得能分解纤维素的纯种菌C. 浓缩目标菌种D. 在微生物的菌落上获得纤维素分解菌种【答案】C【解析】解分解纤维素的微生物的基本过程如下土壤取样\rightarrow 选择培养\rightarrow 梯度稀释\rightarrow 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上\rightarrow 挑选产生透明圈的菌落其中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度 C正确 ABD错误．故选 C．20.关于土壤取样的叙述错误的是（）A. 土壤取样应选取肥沃、湿润的土壤B. 先铲去表层土3cm左右再取样C. 取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D. 应在火焰旁称取土壤【答案】C【解析】解 A.土壤小动物具有趋暗、避高温、趋湿的习性所以在肥沃、湿润的土壤中较多因此土壤取样时应选取肥沃、湿润的土壤 A正确B.由于表层土壤相对干燥小动物分布较少所以土壤取样时应先铲去表层土3~8cm左右再取样 B正确C.取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理 C错误D.应在火焰旁称取土壤以防空气中杂菌污染 D正确故选 C二、解答题（本大题共计4小题每题10分共计40分）21.（1）在微生物培养操作过程中为防止杂菌污染需对培养基和培养器皿进行________ 操作者的双手需要进行清洗和________ 静止空气中的细菌可用紫外线杀灭其原因是紫外线能使蛋白质变性还能___________________21.（2）在大肠杆菌培养过程中除考虑营养条件外还要考虑渗透压、________ （写出两种）等条件21.（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数要想使所得估计值更接近实际值除应严格操作、多次重复外还应保证待测样品稀释的________ 通常对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________21.（4）培养大肠杆菌时在接种前需要检测培养基是否被污染对于固体培养基应采用的检测方法是______________________________________________________________________________________________________________________________________________21.（5）若用大肠杆菌进行实验使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃以防止培养物的扩散【答案】（1）灭菌, 消毒, 损伤DNA的结构【解析】解（1）灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物所以对培养基和培养皿进行灭菌消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物操作者的双手需要进行清洗和消毒紫外线能使蛋白质变性还能损伤DNA的结构【答案】（2）温度和酸碱度【解析】（2）大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点培养过程中除考虑营养条件外还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件【答案】（3）比例合适, 鉴别（或分类）【解析】（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养应保证样品稀释的比例适合对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴别【答案】（4）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间观察培养基上是否有菌落产生【解析】（4）培养大肠杆菌时在接种前需要检测培养基是否被污染对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间观察培养基上是否有菌落产生【答案】（5）灭菌【解析】（5）因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素并可能导致肠道出现严重症状使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃以防止培养物的扩散22.（1）若根据用途划分该培养基属于________（填选择或鉴别）培养基若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌培养基的营养成分必需怎样更改？________ 并且用________作为指示剂22.（2）图1和图2是培养大肠杆菌的结果图则获得图2效果的接种方法是________运用图1所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目少其原因是________22.（3）接种后培养温度控制在35℃左右研究人员通常可根据菌落的________（特征）来初步区分不同种的微生物22.（4）甲同学用稀释涂布平板法测定大肠杆菌的数量每个平板取1mL稀释液涂布将接种后的培养基放入37℃恒温培养箱中培养36h 取出后统计各平板的菌落数结果如下表所示应该选择其中稀释倍数为________的平板进行计数每毫升细菌数大约【答案】（1）鉴别, 将蛋白胨改成尿素, 酚红【解析】解（1）分析表格可知该培养基加入了指示剂属于鉴别培养基若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌该培养基应以尿素为唯一氮源并用酚红作为指示剂【答案】（2）平板划线法, 当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落【解析】（2）根据图2划线区域可知获得图2效果的接种方法是平板划线法图1菌落均匀分布所示接种方法为稀释涂布平板法由于当两个或多个细胞连在一起时平板上显示的只是一个菌落故统计的菌落常常比活菌的实际数目少【答案】（3）形状、大小、颜色等【解析】（3）大肠杆菌属于细菌生长繁殖的最适温度大约为35℃左右将培养温度设置到35℃左右是为大肠杆菌的生长、繁殖提供适宜的温度接种后培养温度控制在35℃左右研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等来初步区分不同种的微生物【答案】（4） \ 10^2, 8500【解析】（4）统计各平板的菌落数时应选择菌落数在30~300的平板进行计数细菌数大约是每毫升 (87+ 83+ 85)\div 3\times 10^2= 8500 个23.（1）图1所示操作称为________ 待平板冷凝后倒置防止皿盖上的冷凝水落入培养基又可以避免________23.（2）图2所示在同一稀释倍数下涂3个平板目的是________ 在3个平板上分别接入0.1mL稀释液经适当培养后 3个平板上菌落数分别是38、42、40 则1g土壤中的活菌数约为________个23.（3）如图是某同学利用不同于图2方法分离菌株Q的示意图从1区域开始划线下列对其操作及结果的叙述错误的有________（多选）a．操作前需用体积分数70%的酒精对双手进行消毒处理b．挑取菌种前接种环和贮藏菌种试管的试管口都必须灼烧灭菌c．划线必须和前一划线区域首尾相接因为划线区域尾部细菌密度更高d．为防止温度高导致培养基熔化从第2区域划线开始接种环不可再灼烧灭菌23.（4）筛选分解尿素细菌的选择培养基应以________作为唯一氮源该菌种分离纯化后常用________法进行长期保存【答案】倒平板, 培养基中水分过快地挥发保持培养基的湿度【解析】图1所示操作称为倒平板待平板冷凝后倒置防止皿盖上的冷凝水落入培养基又可以避免培养基中水分过快地挥发保持培养基的湿度【答案】减少实验误差确保结果更准确, 4×10^8【解析】图2所示在同一稀释倍数下涂3个平板目的是减少实验误差确保结果更准确由图可知该菌液稀释了10^6倍在3个平板上分别接入0.1mL稀释液经适当培养后 3个平板上菌落数分别是38、42、40 则1g土壤中的活菌数约为（38+42+40）÷3÷0.1×10^6＝4×10^8个【答案】cd【解析】a．操作前需用体积分数70%的酒精对双手进行消毒处理 a正确b．挑取菌种前接种环和贮藏菌种试管的试管口都必须灼烧灭菌 b正确c．划线区域尾部细菌密度更低从第一区域划线的末端开始往第二区内划线重复以上操作在第三四五区内划线注意不要将最后一区的划线与第一区相连 c错误d．为防止温度高导致培养基熔化每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌再等接种环冷却后使用 d错误故选 cd【答案】尿素, 甘油管藏【解析】配制以尿素为唯一氮源的培养基能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌该菌种分离纯化后常用甘油管藏法进行长期保存24.（1）该厂的产品是食用________ 过程③④属于________发酵⑤过程有利于________菌的生长从代谢类型看该菌是________型的微生物24.（2）此工艺中纤维素酶作为工具酶将纤维素分解形成葡萄糖为了生产纤维素酶需进行以下操作①首先分离出具有纤维素酶的微生物最好从下列（）处采集土壤样品【答案】醋, 酒精, 醋酸, 异养需氧【解析】由分析可知该厂经过纤维素的分解、酒精发酵和醋酸发酵最终得到的是食用醋过程③④属于酒精发酵⑤过程搅拌有利于通氧有利于醋酸菌生长其代谢类型为异养需氧型【答案】B【解析】①土壤是微生物的天然大本营要分离出具有纤维素酶的微生物最好从森林腐质层处采集土壤样品②要进一步分离菌种要使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基该过程中为了对培养液中的细菌进行计数根据题干数据要舍弃30-300之间的平板故原培养液中的细菌数目大约为31\div 0.1\times 10^6= 3.1\times 10^8个。

专题质量评估检测卷(二)(时间：60分钟满分：100分)一、选择题(共15小题，每小题3分，共45分)1．(2019·城中区期中)下列关于微生物营养的说法，正确的是( )A．牛肉膏不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量C．就是指碳源、氮源、水、无机盐D．无机氮源也能提供能量解析：选D 对异养微生物来说，牛肉膏含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，A错误；无机物碳源不提供能量，B错误；微生物的营养主要包括碳源、氮源、水、无机盐等物质，C错误；自然界中一些微生物如硝化细菌，可以以无机氮源合成细胞物质，同时通过氧化外界无机物获得生长所需能量，叫做化能合成作用，D正确。

2．(2019·长沙模拟)右图是微生物平板划线示意图。

划线的顺序为1→2→3→4→5。

下列操作方法正确的是( )A．将接种环放在酒精灯火焰边灼烧灭菌B．划线操作要在酒精灯火焰上进行C．只有在5区域中才可以得到所需菌落D．在2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灼烧灭菌解析：选D 操作时要把接种环放在酒精灯火焰上而不是火焰边灼烧灭菌，A错误；划线操作要在酒精灯火焰旁而不是火焰上进行，B错误；5区域是最后一个区域，既可能在5区域中得到所需菌落，也可能在其他区域中得到所需菌落，C错误；在2、3、4、5区域划线前后都要对接种环灼烧灭菌，D正确。

3．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。

原因是( )A．平板上的一个菌落就是一个细菌B．菌落中的细菌数是固定的C．此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D．此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数目相同解析：选C 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

通过该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计15小题每题3分共计45分）1.草甘膦是一种低毒性的广谱除草剂其除草原理是抑制植物体内EPSPS合成酶的合成最终导致植物死亡科学家将从抗草甘膦的微生物中分离出EPSPS基因（控制EPSPS合成酶合成的基因）转入小麦以提高其对草甘膦的耐受性为达成其目的需要从土壤中筛选和分离出抗草甘膦的菌种下面有关叙述正确的是（）A. 分离土壤中的抗草甘膦菌株实验中采集的土样经高温灭菌后可以用于制取土壤稀释液B. 在培养基中加入EPSPS酶可以筛选出土壤中含EPSPS合成酶基因的抗草甘膦菌株C. 筛选获得的菌株进行扩大培养时需采用液体培养基进行振荡培养D. 稀释涂布平板法和平板划线法均可用于统计待测菌液中的活菌数目且前者的估计值往往比实际值偏小【答案】C【解析】解 A.分离土壤中的抗草甘膦菌株实验中采集的土样不能经高温灭菌高温灭菌会杀死土壤中的微生物 A错误B.在培养基中加入草甘膦可以筛选出土壤中含EPSPS合成酶基因的抗草甘膦菌株 B错误C.筛选获得的菌株进行扩大培养时需采用液体培养基进行振荡培养以获得更多的目的菌株 C正确D.稀释涂布平板法和显微镜直接计数法均可用于统计待测菌液中的活菌数目且前者的估计值往往比实际值偏小后者计数的结果会比实际值偏大 D错误故选 C2.下列说法正确的是（）A. 绿萝的呼吸作用将有机物分解为无机物实现了物质循环B. 实验“落叶是在土壤微生物作用下腐烂的吗？”中对照组要放在60℃下恒温灭菌1h尽可能排除土壤微生物的作用C. 预测种群数量的变化的主要依据是年龄组成D. 稻田里杀灭害虫大大地提高了能量的利用率【答案】C【解析】解 A.物质循环指的是构成生物的元素在无机环境和生物之间进行循环 A错误B.实验组要放在60℃下恒温灭菌1h 尽可能排除土壤微生物的作用 B错误C.预测种群数量的变化的主要依据是年龄组成 C正确D.稻田里杀灭害虫不能明显提高能量的利用率 D错误故选 C3.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌后指示剂的颜色是（）A. 蓝色B. 红色C. 黑色D. 棕色【答案】B【解析】解分解尿素的细菌能合成脲酶将尿素分解形成碱性物质氨在碱性环境下酚红指示剂变红．故选 B．4.下列平板划线操作正确的是（）A. 最后将平板倒置放入培养箱中培养B. 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌取出菌种后需马上塞上棉塞C. 将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内划三至五条平行线即可D. 使用已灭菌的接种环、培养皿操作过程中不再灭菌【答案】A【解析】解 A.最后将平板倒置防止盖子水滴落引起污染有利培养基水蒸发 A正确B.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌接种后还需要通过火焰灭菌再塞上棉塞 B错误C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内划三至五条平行线还需盖上培养皿盖防止空气中杂菌混入 C错误D.接种环在使用过程中需要多次灭菌第一次灭菌是为了杀死其它微生物每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种 D错误故选 A5.最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法下列关于二者的比较正确的是（）A. ①④B. ②④C. ②③D. ③④【答案】D【解析】解平板划线法和稀释涂布平板法都需要进行无菌操作以避免杂菌污染平板划线法和稀释涂布平板法都使用固体培养基培养基中都加有琼脂稀释涂布平板法可计算菌液中的活菌数平板划线法不能计算菌液中的活菌数平板划线法采用接种环或接种针进行接种而稀释涂布平板法采用涂布器进行接种故选 D6.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是临床上常见的毒性较强的“超级细菌” 为研究从人乳汁中分离得到的一种蛋白质H与青霉素对MRSA生长的影响实验人员进行了实验探究并获得如表所示的结果下列有关叙述正确的是（）A. 此实验设计能揭示蛋白质H的作用机理B. 第1、2组实验结果表明单独使用青霉素或蛋白质H对MRSA生长无影响C. 第3组实验结果表明该组合添加物能杀死MRSAD. 可以通过光学显微镜观察三组MRSA的细胞核来确定其生长状况【答案】C【解析】7.分离土壤中分解尿素的细菌的实验中对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（）A. 制备浸出液的土壤取自土壤的表层B. 牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源C. 涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌D. 接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒【答案】B【解析】8.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌下列实验操作错误的是（）A. 将土壤用无菌水稀释制备10^-3sim10^-7稀释倍数的土壤稀释液B. 将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上C. 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌D. 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株【答案】C【解析】从土壤中分离以尿素为氮源的细菌时将土壤用无菌水稀释制备土壤稀释液将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上用加入酚红指示剂的鉴别培养基可以筛选分解尿素的细菌从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株故选C9.据报道在某餐馆就餐的多位客人均在餐后半小时出现恶心、呕吐、腹泻等症状食品卫生监督管理局的工作人员接到群众举报后立即出动在该餐馆采集样本并进行培养检测鉴定最终发现该餐馆使用的筷子未经严格消毒大肠杆菌等多种细菌数量严重超标据此判断工作人员选用的培养基按功能分应属于（）A. 选择培养基B. 液体培养基C. 固体培养基D. 鉴别培养基【答案】D【解析】解培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基本题所用培养基主要用于判定被污染程度属于鉴别培养基故选 D10.“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中以土壤中的细菌为研究对象要达到的目的是（）①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②从土壤中分离出能够分解氨的细菌③统计每克土壤样品中究竟含有多少分解尿素的细菌④统计所取土壤样品中究竟有多少分解尿素的细菌A. ①③B. ②④C. ①②D. ③④【答案】A【解析】从土壤中分离出分解尿素的细菌并对其计数统计的是每克土壤样品中含多少分解尿素的细菌用公式“每克样品中菌株数=（C/V）×M”进行推测其中 C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL） M代表稀释倍数故选A11.金黄色葡萄球菌是导致人类患病的一种主要病原菌能引起许多严重感染金黄色葡萄球菌能被革兰氏染液染成蓝紫色（染色需要制作临时装片并借助显微镜观察）属于革兰氏阳性菌研究小组在感染者体内采集样本并制成菌液后进行分离培养实验基本步骤如下图所示图中X表示（）A. 调节pHB. 接种C. 加入革兰氏染液D. 将培养基倒置【答案】B【解析】解 A.灭菌前先调pH A错误B.步骤Ⅹ表示接种在无菌条件下操作时先将菌液稀释然后将菌液涂布到培养基平面上B正确C.革兰氏染液不能直接加入培养基对细菌染色 C错误D.培养时将培养基倒置 D错误故选 B12.如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程下列有关叙述错误的是（）A. ①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源B. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C. ①﹣③过程是梯度稀释稀释溶剂是无菌水D. 可用酚红染料鉴定菌落周围是否出现红色圈【答案】C【解析】A、尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解从而能利用尿素其它微生物不能因此要分离纯化尿素分解菌培养基都应以尿素为唯一氮源 A正确B、对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法 B正确C、①﹣③过程是梯度稀释该过程用来选择培养尿素分解菌因此稀释溶剂应该是含有尿素为唯一氮源的培养基而不是无菌水 C错误D、分解尿素的菌能将尿素转化成氨气使培养基碱性增强 PH升高酚红指示剂会变红因此可用酚红染料鉴定菌落周围是否出现红色圈来鉴定 D正确13.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述错误的是（）A. 因为土壤中各类微生物的数量不同所以为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离B. 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量选用的稀释范围不同C. 如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板则说明稀释操作比较成功并能够进行菌落的计数D. 牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落【答案】D【解析】A．土壤是微生物的天然培养基土壤中各类微生物的数量不同获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离 A正确B．土壤中细菌总量高于土壤中能分解尿素的细菌的数量所以选用的稀释范围不同 B 正确C．稀释涂布平板法进行计数时得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板则说明稀释操作比较成功并能够进行菌落的计数 C正确D．选择培养基的菌落数目明显小于牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落 D错误故选D14.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）A. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、琼脂、水C. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、尿素、琼脂、水D. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水【答案】A【解析】解 A、该配方中尿素是唯一氮源 A正确B、该配方缺少尿素为唯一氮源 B错误C 、该配方缺少碳源 C错误D、该配方不是选择培养基不能筛选尿素分解菌 D错误．故选 A．15.下列有关分解纤维素的微生物的分离实验正确的是（）A. 纤维素酶是一种将纤维素直接分解为葡萄糖的酶B. 选择培养时使用液体培养基可以增加纤维素分解菌的浓度C. 使用伊红美蓝染色剂可以对纤维素分解菌菌落进行鉴定D. 对纤维素分解菌进行了初步筛选后无需再进行其他实验【答案】B【解析】解 A.纤维素酶是一种复合酶包括 C_1酶、 C_X酶和葡萄糖苷酶三种其中 C_1酶和 C_X酶能将纤维素分解成纤维二糖葡萄糖苷酶将纤维二糖分解为葡萄糖 A错误B.固体培养基的容量有限而使用液体培养基空间大同时振荡培养可以保证充分供氧利于纤维素分解菌的生长因此可以增加纤维素分解菌的浓度 B正确C.伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂可以用来鉴别和计数大肠杆菌 C错误D.如果在鉴别培养基观察到产生透明圈的菌落说明可能获得了纤维素分解菌为了确定是纤维素分解菌还需要进行发酵产纤维素酶的实验 D错误故选 B二、多选题（本大题共计5小题每题3分共计15分）16.硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐释放的能量可用于将二氧化碳和水转化成有机物下图为从土壤中分离硝化细菌菌株的过程示意图有关说法正确的是（）A. Ⅰ号培养基在功能上属于选择培养基B. 制作该固体培养基时应先灭菌再调pHC. 要筛选硝化细菌Ⅰ号培养基的成分应不含C源、N源D. 接种后的Ⅱ号培养基在恒温箱中通常需要倒置培养【答案】A, D【解析】解 A.Ⅰ号培养基在功能上属于选择培养基可通过选择培养基增加硝化细菌的浓度 A正确B.为了防止杂菌污染配置培养基时应该先调节pH 然后灭菌 B错误C.硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐所以要筛选硝化细菌Ⅰ号培养基中应含N源使硝化细菌利用氧化N盐获得化学能合成有机物 C错误D.接种后的Ⅱ号培养基在恒温箱中通常需要倒置培养平板倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基对其造成污染而且可以使培养基表面的水分更好的挥发 D正确故选 AD17.高通量筛选是获得高性能微生物菌种的重要途径其生产流程简图如下下列说法错误的是（）A. 对出发菌株的选育也可以借助于基因工程等技术实现B. 将配置好的培养基倒人锥形瓶中宜采用干热灭菌法进行灭菌C. 图中的单菌落一定是微生物繁殖形成的纯培养物D. 多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测【答案】B, C【解析】解 A.对出发菌株的选育可以借助于基因工程等技术实现 A正确B.将配置好的培养基倒人锥形瓶中宜采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 B错误C.涂平板时可能不同种的细菌会重合在一起形成的单菌落不属于纯培养物 C错误D.多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测 D正确故选 BC18.将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱是很多人日常储藏西瓜的方法有这样一种说法盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多某生物研究小组针对上述说法进行探究他们用保鲜膜保存了三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液研究细菌的种类和数量下列说法正确的是（）A. 瓜瓤浸出液是液体因此培养时平板不用倒置B. 除空白对照还需设置在同样条件下保存的不盖保鲜膜的瓜瓤浸出液接种的平板做对照C. 应该采用稀释除布平板法进行接种待菌落数目稳定时进行记录D. 可通过平板上菌落的特征（如形态、大小、颜色等）初步判断细菌的种类【答案】B, C, D【解析】解 A.接种时需要将菌液接种在固体培养基上培养时平板需要倒置这样可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染还可防止培养基表面的水分挥发 A错误B.该实验是比较两种不同处理方式下西瓜上菌体的种类和数量所以除需要设置盛有培养基的空白平板作对照还需要设置不盖保鲜膜同样条件保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液后接种的平板做对照 B正确C.稀释涂布平板法可以进行计数应该采用稀释涂布平板法进行接种待菌落数目稳定时进行记录 C正确D.不同菌体的菌落特征不同所以可通过平板上菌落的特征初步判断细菌的种类 D正确故选 BCD19.屠宰场废弃血污不经过处理直接排放会对环境造成污染传统的处理方法有填埋法和焚烧法等填埋法易造成地表环境、地下水资源污染焚烧法处理也会造成大气污染且废弃物中所含的蛋白资源不能得到有效利用研究人员以屠宰场血污堆积土壤为分离基质利用血平板培养基（添加了动物血液）分离出了高效降血红蛋白的菌株并初步用于降解废弃血液、生产氨基酸液态肥料下列叙述正确的是（）A. 上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平板划线法B. 对分离纯化得到的菌株培养后进行计数只能采用稀释涂布平板法C. 血平板培养基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高D. 利用该菌株降解废弃血液可在保护环境的同时实现资源的可持续利用【答案】A, C, D【解析】解 A.分析题图可知上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平板划线法 A正确B.对分离纯化得到的菌株培养后进行计数可以采用稀释涂布平板法和显微计数法等 B 错误C.血平板培养基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高 C正确D.废弃血液被菌种降解可以制作化肥实现资源的可持续利用 D正确故选 ACD20.某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解会对环境造成污染只有某些细菌能降解X 研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株实验过程中需要甲、乙两种培养基甲的组分为无机盐、水和X 乙的组分为无机盐、水、X和Y 下列相关叙述中正确的是（）A. 甲、乙培养基均属于选择培养基乙培养基组分中的Y物质是琼脂B. 若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源C. 步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液的浓度不同D. 步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高某菌株对X的降解量可能下降【答案】A, B, D【解析】解 A.甲、乙培养基均以X为唯一碳源和氮源属于选择培养基其中乙培养基为固体培养基因此其组分中的Y物质是琼脂 A正确B.若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源和氮源 B正确C.步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液的浓度要相同 C错误D.步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高时可能会导致细菌细胞失水过多而失活因此对X的降解量可能下降 D正确故选 ABD三、解答题（本大题共计5小题每题10分共计50分）21.（2）在培养细菌时培养基中能同时提供碳源和氮源的成分是________（填“蛋白胨”“葡萄糖”“ NaNO_3”）如果想用培养基筛选出分解尿素的细菌培养基中应以________为氮源并用________作指示剂21.（2）用平板划线法分离细菌时在第二次及以后划线时总是从上一次的末端开始划线其目的是____________________________21.（3）酵母菌是微生物发酵中常用的菌种在分离和纯化酵母菌时培养基要进行________灭菌用液体培养基扩大培养酵母菌时需要不断振荡和搅拌其目的是_______________________21.（4）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源若要设计实验确定某种细菌能否利用空气中的氮气.请简要写出实验思路、预期结果和结论实验思路_____________________________________________________________________实验结果和结论___________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ 【答案】（1）蛋白胨, 尿素, 酚红【解析】解（1）葡萄糖只能为细菌提供碳源 NaNO_3为细菌提供无机盐而蛋白胨既可以为细菌提供碳源也可以为细菌提供氮源尿素分解菌可以分解尿素而其他微生物不能因此可将培养基中的蛋白胨改为尿素用于筛选土壤中的尿素分解菌并用酚红作为指示剂【答案】（2）将聚集的菌体逐步分散开以获得单细胞菌落【解析】（2）将接种环灼烧灭菌后在第二次及以后划线时总是从上一次的末端开始划线目的是将聚集的菌体逐步分散开以便获得单细胞菌落【答案】（3）高压蒸汽, 增加培养液中的氧气浓度促进酵母菌的繁殖【解析】（3）培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法酵母菌进行有氧呼吸时繁殖速度较快故在用液体培养基扩大培养酵母菌时常通过振荡和搅拌的方法增加培养基中的氧气浓度以促进酵母菌的繁殖【答案】（4）将该种细菌接种在无氮源的培养基上观察其能否生长, 若细菌能生长则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源若不能生长则说明该细菌不能利用氮气作为氮源【解析】（4）若某细菌能利用空气中的氮气作为氮源则在无氮培养基中该细菌能存活若不能利用氮气作为氮源则在无氮培养基中该细菌不能存活因此实验设计思路是用无氮培养基培养该细菌观察其能否生长22.（1）研究人员从长期受有机磷农药污染的地区获取土壤样品理由是___________________________________________________________________________ ________________________22.（2）将土壤样品与液体选择培养基按质量比1:100进行混合在30℃、200转· \min^-1恒温培养箱中避光培养7天取培养液1mL涂布于固体选择培养基于30℃恒温箱中避光倒置培养实验结果如图所示①避光培养的目的是_________________________________________________________②固体选择培养基倒置培养的目的是__________________________________________________③选择菌落________和________作为有机磷农药降解菌理由是___________________________________________22.（3）将上述两个菌落分别制成菌液（菌的密度相同）各取1mL菌悬液分别接种于99mL液体选择培养基中在30℃、200转· \min^-1恒温培养箱中避光培养3天检测其中有机磷农药残留量为了提高降解菌筛选和检测有机磷农药残留量的可靠性研究人员还需要进行的操作步骤是①________________________________________________ ②________________________________________________________________【答案】（1）长期受有机磷农药污染的地区土壤中含较多的有机磷农药降解菌【解析】解（1）在寻找目的菌时要根据它对生存环境的要求到相应的环境中去寻找故寻找有机磷农药降解菌到长期受有机磷农药污染的地区获取土壤样品【答案】（2）①排除光照对实验结果的影响避免有机磷农药的光降解, 防止冷凝水流入培养基防止水分过快挥发, C, D, 有机磷降解菌可以降解培养基中的有效成分产生透明圈且透明圈越大降解有机磷的能力越强 C和D透明圈较大【解析】（2）①避光培养可以排除光照对实验结果的影响避免有机磷农药的光降解②固体选择培养基倒置培养可以防止冷凝水流入培养基污染培养基在培养后期有利于保持水分③有机磷降解菌可以降解培养基中的有效成分产生透明圈且透明圈越大降解有机磷的能力越强 C和D透明圈较大故选C菌落和D菌落【答案】（3）①将该液体培养基分梯度稀释多组培养, ②将培养后的分解菌置于单位面积的被有机磷农药污染的土壤中检测【解析】（3）为了提高降解菌筛选和检测有机磷农药残留量的可靠性研究人员还需要进行的操作步骤①将该液体培养基分梯度稀释多组培养进一步验证降解菌分解有机磷的能力并筛选②将培养后的分解菌置于单位面积的被有机磷农药污染的土壤中检测23.（1）配制培养基时按照培养基配方准确称量各组分将其溶解、定容后调节培养基的________ 及时对培养基进行分装并进行________灭菌23.（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中在步骤③中将温度约________（在25℃、50℃或80℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀冷凝后倒置培养23.（3）挑取分离平板中长出的单菌落按步骤④所示进行划线下列叙述合理的有________a.为保证无菌操作接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应避免划破培养基表面以免不能形成正常菌落23.（4）步骤⑤中为使酵母数量迅速增加培养过程中需保证充足的营养和________供应【答案】（1）pH, 高压蒸汽【解析】解（1）配制培养基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→分装→包扎→灭菌→倒平板因此微生物的培养基配制好后应先调pH 再分装常见的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌培养基适宜用高压蒸汽灭菌法灭菌【答案】（2）50℃【解析】（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中在步骤③中将培养基温度冷却到50℃倒入培养皿混匀冷凝后倒置培养【答案】（3）a、b【解析】（3）平板划线时接种针、接种环使用前和每次划线后都需要进行灼烧灭菌以免造成杂菌污染划线时不能划破培养基表面否则不能形成正常菌落挑取菌落时应挑取多个不同的菌落分别测定酵母细胞中蛋白质含量逐步提高培养基中甲醇的浓度能筛选出其中耐受高甲醇的菌株【答案】（4）氧气【解析】（4）步骤⑤中为使酵母数量迅速增加培养过程中需保证充足的营养和氧气供应促进有氧呼吸进而大量繁殖24.（1）如表是富集培养基的配方从物理性质判断上述培养基为________培养基富集培养的作用是 ________24.（2）研究人员要想获得某种微生物优先考虑从相应的土壤中获取其原因是________ 在菌落的分离纯化培养过程中采用________法进行菌落的分离计数并根据菌落的特征进行初步的分类24.（3）将分离出的菌株点到油脂培养基上油脂水解产生的脂肪酸使培养基的pH降低培养基中的中性指示剂从淡红色变为深红色在菌落周围形成深红色的水解圈水解圈越大则红色斑点越多可依据________初步判断菌株降解油脂的能力24.（4）在无菌操作台上使用经灭菌的牙签挑取少量菌体分别涂抹在滴有1滴3%H_2O_2的载玻片上可根据肉眼观察________ 简单判断该菌种分解H_2O_2的能力。

专题2 水平测试时间：90分钟满分：100分一、选择题(每小题2分，共40分)1．关于微生物培养基的说法正确的是( )A．牛肉膏不能提供碳源B．培养硝化细菌可以不加有机碳C．刚果红使纤维二糖染色D．酵母菌酿酒时需持续供氧答案 B解析牛肉膏能给微生物提供碳源，A错误；硝化细菌属于自养型微生物，故培养硝化细菌可以不加有机碳，B正确；刚果红可以与纤维素反应呈红色，不与纤维二糖反应，C错误；酵母菌酿酒时前期需要供氧，后期应该是严格的无氧发酵，D错误。

2．下列有关微生物培养的说法，正确的是( )A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板B．分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一的碳源C．配制培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性D．在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌答案 B解析制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；分离能分解纤维素的细菌，要以纤维素作为培养基中唯一碳源，B正确；配制培养不同微生物的培养基时都要将pH调至能够满足该种微生物需要的pH，如培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，C错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌，D错误。

3．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。

下列叙述正确的是( )A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次答案 B解析在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板，A错误；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线，B正确；接种后放置在恒温培养箱中进行培养，C错误；培养过程中一般隔12 h或24 h观察一次，D错误。

4．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是( )A．对接种环进行灼烧处理B．带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C．带菌培养基必须经加热后才能倒掉D．接种后双手必须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭答案 C解析对接种环进行灼烧可以杀灭细菌防止污染环境，A正确；带菌培养基经高压蒸汽灭菌后才能倒掉，以防止污染环境，B正确，C错误；金黄色葡萄球菌有很强的致病力，所以在操作时一定要做到安全防X，接种后双手用肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭杀菌，D正确。

微生物的培养与应用（时间：45分钟满分：100分）一、选择题(每小题4分，共48分)1．下列关于配制培养基的叙述，正确的是( )A．配制固体培养基必须加入琼脂B．pH调至6.5～7.5的培养基可培养放线菌C．培养自生固氮菌的培养基中不需添加氮源D．发酵工程一般用半固体培养基或液体培养基解析：选C 在配制固体培养基时，可加入琼脂作为凝固剂，但琼脂并不是唯一的凝固剂；放线菌生长适宜的pH为7.5～8.5，细菌生长适宜的pH为6.5～7.5；发酵工程应用于生产实践一般用液体发酵，可以连续培养，提高产量；自生固氮菌能够将空气中的N2还原为NH3，因此培养基中不需加氮源。

2．某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养，下列说法错误的是( )A．蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供氮源和维生素等营养B．牛肉膏蛋白胨培养基需经高压蒸汽灭菌后调节pHC．倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置D．大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法解析：选B 培养基应先调节pH后灭菌，若先灭菌后调节pH，调节pH时会污染培养基。

3．微生物培养是微生物工程中的基础技术，下列相关叙述正确的是( )A．病毒和细菌的培养基成分相同B．平板划线法中的“线”是连续的、不分区域的C．微生物培养基中并不是都必须添加碳源或氮源D．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒解析：选C 病毒必须寄生在活细胞内才能进行生命活动，如可用活鸡胚培养病毒；平板划线法每次划线前都要灼烧接种环，划线是分区域的；微生物种类不同，对营养物质的需求不同，应根据所培养微生物的需要确定培养基的成分；对培养基和培养皿要进行灭菌，而不是消毒。

4．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。

下列相关叙述错误的是( )A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B．需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D．对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理解析：选C 只有菌液稀释到一定程度后，在固体培养基表面才能形成单个的菌落，否则可能会出现两个或两个以上的细菌共同形成一个菌落，或菌落出现重叠。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校：__________ 班级：__________ 姓名：__________ 考号：__________注意事项：1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计20小题，每题3分，共计60分）1.微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是（）①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌④培养基要进行高压蒸汽灭菌⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A. ①③B. ②④C. ③⑤D. ④⑥【答案】C【解析】解：家庭制作葡萄酒时，是利用附着于葡萄皮表面的野生酵母菌进行酒精发酵，制作葡萄酒时不需要将葡萄进行灭菌，以免杀死酵母菌，③错误；指示剂和染料中可能混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑤错误。

故选：C。

2.以下关于分离纤维素分解菌等的实验操作错误的是（）A. 要确定筛选的纤维素分解菌，还要进行发酵产纤维素酶的实验B. 在含伊红和美蓝试剂的固体培养基上可鉴别牛奶中的大肠杆菌C. 筛选纤维素分解菌的选择和鉴定培养基都是以纤维素作唯一碳源D. 倒平板时加刚果红不会出现菌落混杂，但会出现模糊透明圈的假阳性反应【答案】C【解析】解：A.为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，A正确；B.伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂，可以用来鉴别和计数大肠杆菌，B正确；C.纤维素分解菌的选择和鉴定培养基不一定选择纤维素粉作为唯一碳源，可以选择那些富含纤维素的物质，如滤纸等，C错误；D.倒平板时加刚果红不会出现菌落混杂，但会出现模糊透明圈的假阳性反应，D正确。

故选：C。

3.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养能分解尿素的细菌后，指示剂将变成（）A. 红色B. 蓝色C. 黑色D. 棕色【答案】A【解析】4.下列有关用平板划线法纯化微生物的叙述，正确的是（）A. 平板划线法可用于微生物的分离、纯化和计数B. 划线过程中对接种环用\ 75%的酒精进行消毒处理C. 接种微生物前要对接种环灭菌，划线过程中无须再灭菌D. 划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连【答案】D【解析】解：A.平板划线法不能用于微生物的计数，A错误。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计15小题每题3分共计45分）1.下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述错误的是（）A. 纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B. 对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后无需再进行其他实验C. 纤维素酶的测定方法一般是对所产生的葡萄糖进行定量测定D. 纤维素酶是一种复合酶【答案】B【解析】解 A.纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵 A正确B.如果在鉴别培养基观察到产生透明圈的菌落说明可能获得了纤维素分解菌为了确定是纤维素分解菌还需要进行发酵产纤维素酶的实验 B错误C.纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定 C正确D.纤维素酶是一种复合酶主要包括 C_1酶、 C_X酶和葡萄糖苷酶 D正确故选 B2.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述正确的是（）A. 分离土壤中的尿素分解菌实验中采集的土样经高温灭菌后可以用于制取土壤稀释液B. 测定土壤样品中的活菌数目常用显微镜直接计数法C. 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量选用的稀释度范围不同D. 接种土壤微生物稀释液时平板划线法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布【答案】C【解析】解 A.分离土壤中的尿素分解菌实验中采集的土样经高温灭菌后其中的微生物全部死亡不能得到尿素分解菌 A错误B.测定土壤样品中的活菌数目常用菌落计数法一般不常用显微镜直接计数法 B错误C.土壤中各类微生物的数量不同为了获得不同类型的微生物就需要按不同的稀释度进行分离可见测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量选用的稀释度范围也不同 C正确D.接种土壤微生物稀释液时可借助平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面但并不是使微生物均匀分布 D 错误故选 C3.微生物培养过程中要十分重视无菌操作现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作防止杂菌污染请分析下列操作中错误的是（）①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌④培养基要进行高压蒸汽灭菌⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A. ①③B. ②④C. ③⑤D. ④⑥【答案】C【解析】解家庭制作葡萄酒时是利用附着于葡萄皮表面的野生酵母菌进行酒精发酵制作葡萄酒时不需要将葡萄进行灭菌以免杀死酵母菌③错误指示剂和染料中可能混有微生物故加入培养基前需灭菌⑤错误故选 C4.鱼塘养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸这两种物质可被硝化细菌吸收利用在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中下列说法正确的是（）A. 需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基以筛选硝化细菌B. 应对采集底泥使用的工具进行灭菌全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C. 采用平板划线法进行接种时还需与未接种的空白培养基同时培养D. 若空白对照组上长出了菌落需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数【答案】B【解析】解 A.分离硝化细菌应用以氨和亚硝酸为唯一氮源的培养基牛肉膏蛋白胨本身能提供氮源无法筛选硝化细菌 A错误B.应对采集底泥使用的工具进行灭菌全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行 B正确C.平板划线法可以分离菌种但不能用于计数 C错误D.若空白对照组上长出了菌落则培养基已经被杂菌污染统计结果无效实验失败需重新进行实验 D错误故选 B5.嗜热菌又称高温细菌是一类生活在火山口及其周围区域、温泉、工厂高温废水排放区等高温环境中的微生物研究者从温泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌其筛选过程如图1所示将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养得到若干菌落后用碘液作显色处理结果如图2所示下列说法错误的是（）A. 热泉的高温状态淘汰了绝大多数的微生物保留了嗜热菌B. 甲、乙试管为液体培养基液体培养基能分离获得水生噬热杆菌单菌落C. 丙中噬热菌数量迅速增加培养过程中需保证充足的营养和高温条件D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌【答案】B【解析】A、热泉的高温状态淘汰了绝大多数的微生物保留了嗜热菌B、甲、乙试管为液体培养基 B错误C、丙中噬热菌数量迅速增加 C正确D、图2中周围不显蓝色的菌落所以周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌6.下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述正确的是（）A. 高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方向依次旋紧螺栓B. 选择培养基可以鉴定某种微生物的种类C. 待培养基冷却至室温时倒平板D. 统计样品中活菌数量时接种方法可采用稀释涂布平板法【答案】D【解析】A、高压蒸汽灭菌锅加盖时将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓使螺栓松紧一致勿使漏气 A错误B、鉴别培养基可以鉴定某种微生物的种类 B错误C、待培养基冷却至50℃左右时倒平板 C错误D、统计样品中活菌数量时接种方法可采用稀释涂布平板法 D正确7.下列关于培养基的叙述中正确的是（）A. 微生物在液体培养基表面生长可以形成肉眼可见的菌落B. 培养霉菌与细菌时培养基的pH基本一致C. 一般培养基都必须加入碳源、氮源、无机盐和水D. 蛋白胨只能为微生物提供碳源和维生素【答案】C【解析】A项微生物在固体培养基表面生长可以形成肉眼可见的菌落 A错误B项培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性培养细菌时需将pH调至中性或微碱性 B错误C项培养基一般都需要水、碳源、氮源和无机盐等成分 C正确D项蛋白胨可为微生物提供氮源、碳源和维生素 D错误故选C8.下列关于纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是（）A. 通常采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌B. 当纤维素被纤维素分解菌释放的纤维素酶分解后培养基中会出现透明圈C. 该实验用的培养基为选择培养基D. 在用刚果红染色时只能先培养微生物再加入刚果红不能在倒平板时加入【答案】D【解析】A、刚果红能鉴别纤维素可采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌 A正确B、刚果红只能与纤维素结合呈红色当纤维素被纤维素分解菌释放的纤维素酶分解后菌落周围的纤维素被分解所以培养基中会出现透明圈 B正确C、由于碳源是纤维素所以只有能分解纤维素的菌才能生存所以该培养基属于选择培养基 C正确D、在用刚果红染色时可以先培养微生物再加入刚果红也可以在倒平板时加入 D错误9.下列关于分解纤维素的微生物分离实验的叙述正确的是（）A. 纤维素酶是一种复合酶一般至少包括\ C_1酶、\ C_X酶、葡萄糖异构酶B. 刚果红染色可以在倒平板之前加入刚果红也可以先培养微生物再加入刚果红C. 可通过重复选择培养来增大样品中目的菌的浓度以保证筛选效果也可省略此步D. 刚果红可以与纤维素形成透明复合物可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌【答案】C【解析】解 A.纤维素酶是一种复合酶包括 C_1酶、 C_X酶和葡萄糖苷酶其中 C_1酶和C_X酶能使纤维素分解成纤维二糖葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖 A错误B.刚果红染色法一般有两种一是先培养微生物长出菌落后再加入刚果红进行颜色反应再加入一定浓度NaCl将多余的刚果红带走一种是配制好培养基灭菌后倒平板时加入灭菌处理的刚果红再接种微生物培养直至产生透明圈 B错误C.可通过重复选择培养来增大样品中目的菌的浓度以保证筛选效果也可省略此步 C正确D.刚果红可以与纤维素形成红色复合物当纤维素被分解后形成透明圈这样可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 D错误故选 C10.关于酶活性调节正确的说法是（）A. 只要一种代谢产物积累酶活性就会下降B. 代谢产物与酶结合酶的结构产生不可逆的变化而活性下降C. 细胞膜通透性的增大可解除代谢产物对酶活性的抑制D. 控制生产条件是人们对酶活性调节的唯一手段【答案】C【解析】解 A.一种代谢产物积累酶活性不一定就会下降如黄色短杆菌利用天冬氨酸合成赖氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸只有当苏氨酸和甲硫氨酸同时积累过量时才会抑制天冬氨酸激酶的活性 A错误B.当产物过量时与酶的结合是可逆的所以引起酶分子结构改变而发生的活性改变也是可逆的 B错误C.细胞膜通透性的增大代谢产物可以通过细胞膜进入外界环境可解除代谢产物对酶活性的抑制 C正确D.控制生产条件不是人们对酶活性调节的唯一手段 D错误故选 C11.将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱是很多人日常储藏西瓜的办法有人认为盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多某生物研究小组针对上述说法进行探究他们将盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液再将浸出液接种到培养基平板上进行观察下列说法正确的是（）A. 培养基可不加碳源是因为接种的浸出液中含糖B. 可采用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种C. 只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照D. 培养一段时间后应统计培养基上的菌落种类和数量【答案】D【解析】12.秸秆还田可增加土壤肥力缓解环境污染为分离分解纤维素的微生物菌种实现废物的资源化利用研究人员设计了“土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌株”的实验流程下列叙述错误的是（）A. 配制培养基时应在高压蒸汽灭菌之后调节pHB. 选择培养时应使用纤维素为唯一碳源的培养基C. 进行梯度稀释时应在酒精灯火焰旁完成各种操作D. 挑选菌株后应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃【答案】A【解析】A、配制培养基时这样可以避免灭菌之后调pH时再造成杂菌污染B、为分离分解纤维素的微生物菌种应用以纤维素为唯一碳源的选择培养基C、进行梯度稀释时应在酒精灯火焰旁完成各种操作D、挑选菌株后应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃13.用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验过程是在某病原菌均匀分布的平板上铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养培养的结果如图所示其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域下列分析错误的是（）A. 在图示固体培养基上接种病原菌的方法是稀释涂布平板法B. 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响C. 形成的抑菌圈较大的原因可能是微生物对药物较敏感D. 未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生了抗性变异【答案】D【解析】解 A.根据题干“某病原菌均匀分布的平板上”可知图示固体培养基上采用的接种方法是稀释涂布平板法 A正确B.纸片中的药物接触平板后不断向纸片周围区域扩散不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响 B正确C.微生物对药物较敏感形成的抑菌圈较大 C正确D.未出现抑菌圈可能是病原菌对该抗生素不敏感且变异是在选择（抗生素接触）之前就已发生的 D错误故选 D14.微生物培养过程中要十分重视无菌操作现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作防止杂菌污染下列无菌操作错误的是（）A. 接种时培养皿盖只打开一条缝隙B. 菌种和培养基使用前均需灭菌处理C. 接种前、后都要过火灼烧斜面菌种试管口D. 高压蒸汽灭菌既能杀死微生物的营养体也能杀死芽孢等休眠体【答案】B【解析】解 A.接种时用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于锥形瓶瓶口的缝隙即可 A正确B.培养基在使用前需灭菌处理但是菌种不能灭菌处理否则菌种也会死亡 B错误C.接种前后均要将斜面菌种试管口通过火焰防止杂菌污染 C正确D.高压蒸汽灭菌法不仅能杀死微生物的营养体也能杀死芽孢等休眠体 D正确故选 B15.下列关于分离纤维素分解菌的实验的叙述错误的是（）A. 选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度B. 经选择培养后将样品直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上C. 可先在固体培养基上培养微生物再用刚果红溶液染色D. 纤维素分解后的产物不能和刚果红形成红色复合物【答案】B【解析】解 A、选择培养是在以纤维素为唯一碳源的培养基上进行目的是增加纤维素分解菌的浓度 A正确B、经选择培养后再经梯度稀释才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B错误C、经鉴别培养后纤维素分解菌可以用刚果红染色进行鉴别 C正确D、鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物 D正确二、多选题（本大题共计5小题每题3分共计15分）16.大肠杆菌可以直接利用葡萄糖也可以通过合成β﹣半乳糖苷酶将乳糖分解为葡萄糖和半乳糖加以利用将大肠杆菌培养在同时含葡萄糖和乳糖的培养基中测定其细胞总数及细胞内β﹣半乳糖苷酶的活性变化（如图）据图分析下列叙述不合理的是（）A. 0～50 min 细胞内无β﹣半乳糖苷酶基因B. 50～100 min 细胞内无分解葡萄糖的酶C. 葡萄糖缺乏时β﹣半乳糖苷酶基因开始表达D. 只要有乳糖存在β﹣半乳糖苷酶基因就能表达【答案】A, B, D【解析】17.将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱是很多人日常储藏西瓜的方法有这样一种说法盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多某生物研究小组针对上述说法进行探究他们用保鲜膜保存了三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液研究细菌的种类和数量下列说法正确的是（）A. 瓜瓤浸出液是液体因此培养时平板不用倒置B. 除空白对照还需设置在同样条件下保存的不盖保鲜膜的瓜瓤浸出液接种的平板做对照C. 应该采用稀释除布平板法进行接种待菌落数目稳定时进行记录D. 可通过平板上菌落的特征（如形态、大小、颜色等）初步判断细菌的种类【答案】B, C, D【解析】解 A.接种时需要将菌液接种在固体培养基上培养时平板需要倒置这样可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染还可防止培养基表面的水分挥发 A错误B.该实验是比较两种不同处理方式下西瓜上菌体的种类和数量所以除需要设置盛有培养基的空白平板作对照还需要设置不盖保鲜膜同样条件保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液后接种的平板做对照 B正确C.稀释涂布平板法可以进行计数应该采用稀释涂布平板法进行接种待菌落数目稳定时进行记录 C正确D.不同菌体的菌落特征不同所以可通过平板上菌落的特征初步判断细菌的种类 D正确故选 BCD18.抗生素可由微生物产生具有抑菌作用能在琼脂培养基中扩散在筛选产生抗生素的菌种时先在琼脂培养基平板上划线接种从土壤中获得的甲菌在27℃下培养3天形成菌落然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图a）继续在同样条件下培养3天结果如图b 分析结果得出的结论是（）A. 甲菌产生了抗生素B. 丙菌的生长被乙菌产生的抗生素抑制C. 乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制D. 丁菌产生的抗生素抑制了丙菌的生长【答案】A, C【解析】解分析培养结果（图b）可知乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长进一步由b图可知乙菌的生长被抑制最可能的原因是甲菌产生了抗生素此种抗生素只能抑制乙菌的生长而对丙、丁两种菌没有影响因此A、C正确故选 AC19.微生物为了研究防治微生物传染病的有效方法生物课外课题研究小组的同学要研究板蓝根（一种药用植物）的汁液是否具有抑制大肠杆菌的作用指导老师为他们提供材料、仪器和试剂有大肠杆菌菌种接种环无菌滴管无菌玻璃刮铲无菌圆纸片镊子记号笔直尺酒精灯牛肉膏蛋白胨琼脂板蓝根汁等实验步骤（1）他们应当配制的培养基是（）A. 通用液体培养基B. 通用固体培养基C. 选择液体培养基D. 选择固体培养基（2）制备培养基的操作步骤是bedca（用下列字母排序）a．倒置培养基b．计算和称量c．灭菌d．调pHe．溶解和熔化（3）如果他们要观察单个的大肠菌菌落应该用划线法接种在如图圆内（表示培养皿）画出接种环的运行路线（带箭头）（4）通常培养基采用121℃灭菌原因是杀灭培养基中的细菌芽孢接种后必须将培养皿倒置倒置的原因是防止冷凝水滴落影响细菌生长（5）如果要探究板蓝根汁液是否具有抑菌作用可以有以下的实验方案第一步接种用无菌滴管吸取菌液滴在培养基表面第二步实验过程若干圆纸片浸泡板蓝根汁放入与无菌水圆纸片做对照（各放入几张）第三步现象观察看圆纸片周围是否出现抑菌圈测试并记录第四步结果预测及分析若浸入板蓝根汁的圆纸片周围有抑菌圈浸有无菌水的圆纸片无清晰区说明板蓝根汁液有抑制大肠杆菌的作用 2.如浸有板蓝根汁液圆纸片和无菌水一样无清晰区说明板蓝根汁液没有抑制大肠杆菌的作用【答案】（1）B（2）bedca（3）划线（4）杀灭培养基中的细菌芽孢防止冷凝水滴落（5）用无菌滴管吸取菌液滴在培养基表面若干圆纸片浸泡板蓝根汁放入与无菌水圆纸片做对照看圆纸片周围是否出现抑菌圈测试并记录若浸入板蓝根汁的圆纸片周围有抑菌圈浸有无菌水的圆纸片无清晰区2.如浸有板蓝根汁液圆纸片和无菌水一样无清晰区【解析】20.硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐释放的能量可用于将二氧化碳和水转化成有机物下图为从土壤中分离硝化细菌菌株的过程示意图有关说法正确的是（）A. Ⅰ号培养基在功能上属于选择培养基B. 制作该固体培养基时应先灭菌再调pHC. 要筛选硝化细菌Ⅰ号培养基的成分应不含C源、N源D. 接种后的Ⅱ号培养基在恒温箱中通常需要倒置培养【答案】A, D【解析】解 A.Ⅰ号培养基在功能上属于选择培养基可通过选择培养基增加硝化细菌的浓度 A正确B.为了防止杂菌污染配置培养基时应该先调节pH 然后灭菌 B错误C.硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐所以要筛选硝化细菌Ⅰ号培养基中应含N源使硝化细菌利用氧化N盐获得化学能合成有机物 C错误D.接种后的Ⅱ号培养基在恒温箱中通常需要倒置培养平板倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基对其造成污染而且可以使培养基表面的水分更好的挥发 D正确故选 AD三、解答题（本大题共计5小题每题10分共计50分）21.（1）A酶是________ 上述培养基中的KH_2PO_4和Na_2HPO_4的作用是________ 21.（2）根据培养基的成分分析能分离出土壤中尿素分解菌的是________ 理由是________21.（3）要统计每克土壤样品中活菌数日最好采用________法接种某同学取稀释倍数为10^8倍的菌液0.2mL接种后测得平板上菌落数为156、178和191 则每毫升样品中的菌落数为________ 对尿素分解菌进行鉴定时需要在选择培养基中加入________ 21.（4）该小组中有人设想由活性A酶和尿素混合制成“加酶尿素” 尿素肥效肯定更高为了提高“加酶尿素”中脲酶的利用率应当采用________技术【答案】脲酶, 提供无机盐和维持培养基的pH稳定【解析】尿素分解菌能分泌脲酶将尿素分解为二氧化碳和氨培养基中的KH_2PO_4和Na_2HPO_4的作用是提供无机盐和维持培养液的pH稳定【答案】乙, 分解尿素分解菌的选择培养基应以尿素为唯一氮源甲培养基的氮源除了尿素外还有蛋白胨而乙培养基是以尿素为唯一氮源【解析】筛选尿素分解菌的培养基应以尿素为唯一氮原甲培养基除了尿素外还有蛋白胨能够作为氮源因此乙能分离出土壤中尿素分解菌而甲不能【答案】稀释涂布平板, 8.75×10^8, 酚红指示剂【解析】接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法其中稀释涂布平板法可进行微生物的计数统计平板上的菌落数目可以推测出样品中的活菌数因此要统计每克土壤样品中活菌数目最好采用稀释涂布平板法接种其中稀释涂布平板法可进行微生物的计数统计平板上的菌落数目可以推测出样品中的活菌数每毫升样品中的菌落数为（156+178+191）÷3÷0.2×10^6＝8.75×10^8个对尿素分解菌进行鉴定时分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨氨会使培养基的碱性增强 pH升高指示剂变红故故需要在选择培养基中加入酚红指示剂【答案】固定化酶【解析】利用固定化酶技术可以使脲酶反复使用提高了酶的利用率22.（1）配制培养基时按照培养基配方准确称量各组分将其溶解、定容后调节培养基的________ 及时对培养基进行分装并进行________灭菌22.（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中在步骤③中将温度约________（在25℃、50℃或80℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀冷凝后倒置培养22.（3）挑取分离平板中长出的单菌落按步骤④所示进行划线下列叙述合理的有________a.为保证无菌操作接种针、接种环使用前都必须灭菌b.划线时应避免划破培养基表面以免不能形成正常菌落22.（4）步骤⑤中为使酵母数量迅速增加培养过程中需保证充足的营养和________供应【答案】（1）pH, 高压蒸汽【解析】解（1）配制培养基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→分装→包扎→灭菌→倒平板因此微生物的培养基配制好后应先调pH 再分装常见的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌培养基适宜用高压蒸汽灭菌法灭菌【答案】（2）50℃【解析】（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中在步骤③中将培养基温度冷却到50℃倒入培养皿混匀冷凝后倒置培养【答案】（3）a、b【解析】（3）平板划线时接种针、接种环使用前和每次划线后都需要进行灼烧灭菌以。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计15小题每题3分共计45分）1.用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验过程是在某病原菌均匀分布的平板上铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养培养的结果如图所示其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域下列分析错误的是（）A. 在图示固体培养基上接种病原菌的方法是稀释涂布平板法B. 不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响C. 形成的抑菌圈较大的原因可能是微生物对药物较敏感D. 未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生了抗性变异【答案】D【解析】解 A.根据题干“某病原菌均匀分布的平板上”可知图示固体培养基上采用的接种方法是稀释涂布平板法 A正确B.纸片中的药物接触平板后不断向纸片周围区域扩散不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响 B正确C.微生物对药物较敏感形成的抑菌圈较大 C正确D.未出现抑菌圈可能是病原菌对该抗生素不敏感且变异是在选择（抗生素接触）之前就已发生的 D错误故选 D2.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是（）A. 对分离的菌种做进一步的鉴定B. 筛选出能分解尿素的细菌C. 培养基中还缺乏酚红指示剂作细菌的营养D. 如指示剂变蓝我们就能准确地认定该种细菌能分解尿素【答案】A【解析】解 A.加入酚红指示剂的目的是对分离的菌种作进一步的鉴定 A正确B.应用以尿素为唯一氮源的培养基筛选出能分解尿素的细菌加入酚红指示剂不能进行筛选 B错误C.酚红指示剂不能作为细菌的营养 C错误D.尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解分解为氨使pH升高酚红指示剂呈现红色 D错误故选 A3.下列实验操作正确的是（）A. 倒平板时应将打开的皿盖放到一边以免培养基溅到皿盖上B. 为了防止污染接种环经火焰灼烧灭菌后趁热快速挑取菌落C. 为了防止冷凝水落入培养基培养液倒入培养基后应立即将平板倒过来放置D. 高压灭菌完成后待压力表的压力降到零时打开排气阀以免灭菌容器内液体冲出【答案】D【解析】解 A.倒平板过程中用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿左手立即盖上培养皿的皿盖不能打开皿盖 A错误B.接种环在火焰上灼烧后待冷却后才可以快速挑取菌落 B错误C.倒好培养基的培养皿等培养基冷凝后要将平板倒过来放置 C错误D.高压灭菌完成后待压力表的压力降到零时打开排气阀以免灭菌容器内液体冲出 D正确故选 D4.利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌下列叙述错误的是（）A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透明圈则说明已筛选出了纤维素分解菌【答案】B【解析】解 A.刚果红能与纤维素形成红色复合物 A正确BC.刚果红是一种染料它可以与多糖物质形成红色复合物但不能和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应 BC错误D.在培养基中加入刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物当纤维素被分解后红色复合物不能形成培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈从而可筛选纤维素分解菌 D正确故选 B5.关于酶活性调节正确的说法是（）A. 只要一种代谢产物积累酶活性就会下降B. 代谢产物与酶结合酶的结构产生不可逆的变化而活性下降C. 细胞膜通透性的增大可解除代谢产物对酶活性的抑制D. 控制生产条件是人们对酶活性调节的唯一手段【答案】C【解析】解 A.一种代谢产物积累酶活性不一定就会下降如黄色短杆菌利用天冬氨酸合成赖氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸只有当苏氨酸和甲硫氨酸同时积累过量时才会抑制天冬氨酸激酶的活性 A错误B.当产物过量时与酶的结合是可逆的所以引起酶分子结构改变而发生的活性改变也是可逆的 B错误C.细胞膜通透性的增大代谢产物可以通过细胞膜进入外界环境可解除代谢产物对酶活性的抑制 C正确D.控制生产条件不是人们对酶活性调节的唯一手段 D错误故选 C6.科学家利用营养缺陷型菌株甲、乙在缺乏甲、乙所需营养物质的培养基上培养结果如下图所示下列叙述错误的是（）A. 各组实验所用的培养基均需灭菌处理B. 菌株甲、乙混合后能在上述培养基上生长C. 推测菌株甲、乙通过接触发生了遗传物质重新组合D. U型管实验证明菌株甲、乙释放的代谢产物形成了互补【答案】D【解析】解 A.微生物培养需要给培养基灭菌 A正确B.如图菌株甲、乙混合后能在上述培养基上长成菌落 B正确C.混合培养长成了菌落但在U型管不能生长说明可能是菌株甲、乙通过接触发生了遗传物质重新组合 C正确D.在U型管不能生长但代谢产物可以通过滤板说明菌株甲、乙释放的代谢产物没有形成互补 D错误故选 D7.鱼塘养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸这两种物质可被硝化细菌吸收利用在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中下列说法正确的是（）A. 需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基以筛选硝化细菌B. 应对采集底泥使用的工具进行灭菌全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C. 采用平板划线法进行接种时还需与未接种的空白培养基同时培养D. 若空白对照组上长出了菌落需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数【答案】B【解析】解 A.分离硝化细菌应用以氨和亚硝酸为唯一氮源的培养基牛肉膏蛋白胨本身能提供氮源无法筛选硝化细菌 A错误B.应对采集底泥使用的工具进行灭菌全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行 B正确C.平板划线法可以分离菌种但不能用于计数 C错误D.若空白对照组上长出了菌落则培养基已经被杂菌污染统计结果无效实验失败需重新进行实验 D错误故选 B8.配制的培养基成分是纤维素粉、NaNO_3、Na_2HPO_4、KH_2PO_4、MgSO_4、KCl、酵母膏、水解酪素该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖（）A. 酵母菌B. 自生固氮菌C. 各种细菌D. 纤维素分解菌【答案】D【解析】解根据该培养基的配方可知碳源为纤维素粉氮源为NaN0_3 无机盐为Na_2HP0_4、KH_2P0_4、MgS0_4、KCl等酵母膏、水解酪素主要提高生长因子所以只有能够利用纤维素粉作为碳源的微生物才能够在该培养基生存故能够分解纤维素的菌类才能大量繁殖．故选 D．9.为了筛选出能产生脲酶的微生物应当从下列哪一种环境中选择（）A. 施用尿素较多的农田B. 施用氨肥较多的农田C. 施用磷肥较多的农田D. 落叶较多的地方【答案】A【解析】解脲酶可以将尿素分解为二氧化碳和氨气其底物为尿素应当从尿素较多的农田中获得故选 A10.某研究小组为从土壤中分离出能降解纤维素的微生物按照下图所示的实验步骤进行了相关的实验下列有关叙述错误的是（）土壤取样→梯度稀释→接种到含纤维素、刚果红的培养基上→培养、筛选A. 对土壤溶液进行梯度稀释再接种培养利于获得单细胞菌落B. 含有纤维素和刚果红的培养基对微生物具有选择和鉴别作用C. 应采用平板划线法进行接种转换划线角度后需灼烧接种环再划线D. 培养后可根据菌落周围透明圈的有无来判断其能否降解纤维素【答案】C【解析】解 A.从土壤中分离能降解纤维素的微生物时对土壤溶液进行梯度稀释其目的是防治接种培养后的菌落相互叠加在一起即做梯度稀释后利于获得单细胞菌落 A正确BD.含有纤维素的培养基是一种选择培养基纤维素作为唯一碳源为微生物提供有机物纤维素与刚果红结合呈现红色纤维素被微生物分解利用后会在菌落周围出现透明圈因此含有刚果红的培养基具有鉴别指示作用 BD正确C.在本实验中为能获得降解纤维素的微生物应采用稀释涂布平板法进行接种 C错误故选 C11.将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱是很多人日常储藏西瓜的办法有人认为盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多某生物研究小组针对上述说法进行探究他们将盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液再将浸出液接种到培养基平板上进行观察下列说法正确的是（）A. 培养基可不加碳源是因为接种的浸出液中含糖B. 可采用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种C. 只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照D. 培养一段时间后应统计培养基上的菌落种类和数量【答案】D【解析】12.下列有关用平板划线法纯化微生物的叙述正确的是（）A. 平板划线法可用于微生物的分离、纯化和计数B. 划线过程可将接种针插入培养基内部进行连续划线C. 接种微生物前要对接种环灭菌划线过程中无须再灭菌D. 划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连【答案】D【解析】解 A.平板划线法不能用于微生物的计数 A错误B.划线过程不可将接种针插入培养基内部进行连续划线 B错误C.每次划线前接种环都需要灼烧灭菌 C错误D.划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连否则可能会无法得到单菌落 D正确故选 D13.金黄色葡萄球菌是导致人类患病的一种主要病原菌能引起许多严重感染金黄色葡萄球菌能被革兰氏染液染成蓝紫色（染色需要制作临时装片并借助显微镜观察）属于革兰氏阳性菌研究小组在感染者体内采集样本并制成菌液后进行分离培养实验基本步骤如下图所示图中X表示（）A. 调节pHB. 接种C. 加入革兰氏染液D. 将培养基倒置【答案】B【解析】解 A.灭菌前先调pH A错误B.步骤Ⅹ表示接种在无菌条件下操作时先将菌液稀释然后将菌液涂布到培养基平面上B正确C.革兰氏染液不能直接加入培养基对细菌染色 C错误D.培养时将培养基倒置 D错误故选 B14.下图为纤维单胞菌（能产生纤维素酶）的获取过程下列有关叙述错误的是（）A. 图中培养基都应以纤维素为唯一碳源B. 进行稀释的目的是在培养基表面获得单菌落C. 进行图中④过程时需要对接种环进行6次灼烧D. ④所用的接种方法可对培养的微生物进行计数【答案】D【解析】解 A.要筛选纤维素酶高产菌株平板内的固体培养基和锥形瓶中的液体培养基应以纤维素作为唯一碳源 A正确B.稀释是为了在培养基表面获得单菌落 B正确C.在每次划线前后都要对接种环进行灭菌因此按照图中划线顺序（1→2→3→4→5）整个划线过程中需要对接种环进行灼烧的次数为6次 C正确D.图④采用的接种方法是平板划线法而对培养的微生物进行计数采用稀释涂布平板法D错误故选 D。

专题2 微生物的培养与应用综合测评(时间：45分钟，分值：100分)一、选择题(每题6分，共72分)1．微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质，并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。

下列有关微生物营养的说法，正确的是( )A．纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B．在纤维素分解菌生长的培养基中只需碳源、氮源、水、无机盐即可正常生长C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的生长越有利D．生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往不足【解析】纤维素分解菌是异养型微生物，其碳源为有机物，如纤维素等。

硝化细菌是自养型微生物，其碳源物质为CO2，因此A错误；纤维素分解菌的培养基中需加入维生素做生长因子，才能正常生长，因此B错误；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水，将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，因此C错误。

【答案】 D2．有关培养基配制原则表述正确的是( )A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B．碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到温度、pH、氧、渗透压等的影响D．营养物质的浓度越高越好【解析】培养基中碳源和氮源必须具有一定比例，但含量最多的元素不应是碳元素，应是氧元素。

营养物质的浓度并不是越高越好，浓度过高会导致培养物细胞失水。

【答案】 C3．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 ℃恒温箱的目的是( ) 【导学号：05520019】A．对比观察培养基有没有被微生物利用B．对比分析培养基是否被杂菌污染C．没必要放入未接种的培养基D．为了下次接种时再使用【解析】对未接种的培养基进行培养，起到对照作用，可确定培养基是否被杂菌污染。

【答案】 B4．鉴别纤维素分解菌的培养基中碳源为( )A．CMC－Na B．木聚糖C．纤维素D．裂解酶【解析】分离纤维素分解菌的选择培养基中，加入纤维素粉，而鉴别纤维素分解菌的培养基中加入的是纤维素钠(CMC－Na)。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计13小题每题3分共计39分）1.用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌二者的共同点有（）A. 都需要使用接种针进行接种B. 接种后都需要进行湿热灭菌C. 都需要在酒精灯火焰旁进行接种D. 都可以用来计数活菌数【答案】C【解析】解 A.平板划线法采用接种针进行操作而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作A错误B.接种后不能再灭菌 B错误C.接种时要进行无菌操作因此都需要在火焰旁进行接种避免空气中的微生物混入培养基 C正确D.稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数而平板划线法不能 D错误故选 C2.关于土壤取样的叙述错误的是（）A. 土壤取样应选取肥沃、湿润的土壤B. 先铲去表层土3 \cm 左右再取样C. 取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D. 应在火焰旁称取土壤【答案】C【解析】解 A、土壤小动物具有趋暗、避高温、趋湿的习性所以在肥沃、湿润的土壤中较多因此土壤取样时应选取肥沃、湿润的土壤 A正确B、由于表层土壤相对干燥小动物分布较少所以土壤取样时应先铲去表层土3\sim 8 cm 左右再取样 B正确C 、取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理 C错误D、应在火焰旁称取土壤以防空气中杂菌污染 D正确．故选 C．3.欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌下列实验操作中不正确的是（）A. 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B. 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C. 可将未接种的培养基在相同条件下作为对照进行培养D. 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌【答案】D【解析】解 A、为防止土壤浸出液浓度过高不能获得单菌落要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 A正确B、同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板防止偶然因素对实验结果的影响 B正确C 、可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照以判断培养基灭菌是否彻底 C 正确D、可筛选出分解尿素的细菌的培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基 D错误．故选 D．4.下列培养基成分中能用于分离分解尿素的细菌的是（）A. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、牛肉膏、尿素、琼脂、水B. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、琼脂、水C. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、尿素、琼脂、水D. KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4cdot 7H_2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水【答案】C【解析】解根据题意分析可知分解尿素的细菌需要KH_2PO_4、Na_2HPO_4、MgSO_4\cdot 7H_2O等无机盐还要水、碳源和氮源葡萄糖可以为其提供碳源但是其氮源只能是尿素．故选 C．5.下列关于尿素分解菌的叙述正确的是（）A. 该菌以尿素作为唯一的碳源B. 该菌能分解尿素是因为它能合成并分泌蛋白酶C. 环境诱导该细菌产生了分解尿素的特性D. 尿素分解后的产物能使酚红指示剂变红【答案】D【解析】解 A.由于只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素以尿素作为氮源缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素缺乏氮源而不能生长发育繁殖所以分离分解尿素的细菌时以尿素作为唯一氮源 A错误B.分解尿素的细菌能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶 B错误C.该细菌产生脲酶是受基因控制的而不是环境中的尿素诱导的 C错误D.细菌合成的脲酶将尿素分解成的氨会使培养基的碱性增强 pH升高所以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养该细菌后会使酚红指示剂变红 D正确故选 D6.下列关于微生物的分离和培养的叙述中正确的是（）A. 进行微生物培养前需对培养基进行消毒处理B. 对细菌的分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法C. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染D. 用含刚果红的尿素培养基能筛选鉴别出分解尿素的菌株【答案】C【解析】A项进行微生物培养时需要对培养基进行高压燕汽灭菌处理 A错误B项对细菌的分离可用平板划线法或稀释涂布平板法而对细菌的计数只能用稀释涂布平板法 B错误C项获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 C正确D项尿素分解菌可以将尿素分解成氨氨使酚红指示剂呈红色因此用含酚红的尿素培养基能筛选出分解尿素的菌株刚果红是鉴别分解纤维素的微生物的 D错误故选C7.分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是（）A. 经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B. 富集培养这一步可省略但培养分离的纤维素分解菌少C. 经稀释培养后用刚果红染色D. 对照组可用等量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上【答案】A【解析】经选择培养后再经梯度稀释才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上A错误富集培养可省略但培养分离的纤维素分解菌少 B正确经稀释培养后纤维素分解菌可以用刚果红染色进行鉴别 C正确实验组中培养基上含有纤维素对照组中培养基上不含纤维素两组都涂等量的培养液 D 正确故选A8.下列关于灭菌和消毒的说法不正确的是（）A. 灭菌是指杀死环境中的所有微生物包括芽孢和孢子B. 灭菌和消毒实质上是相同的C. 接种环用灼烧法灭菌D. 常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等【答案】B【解析】灭菌与消毒的实质是不同的灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物包括芽孢和孢子使用的是较为强烈的理化因素根据不同的材料选用不同的灭菌方法如接种环的灭菌用灼烧法消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子) 使用的是较为温和的物理或化学方法故选B9.若将某种细菌置于有营养的物体上它会繁殖并形成细胞群以下用来检验两种抗生素的杀菌效果的对照实验最恰当的分组设计是（）A. AB. BC. CD. D【答案】C【解析】解要检验某种抗生素的杀菌效果必须将抗生素与细菌一起培养观察细菌繁殖情况实验的自变量是有无抗生素其他条件应相同且适宜因此应该设计一个有细菌无抗生素的对照组和有细菌有抗生素的实验组 C项正确故选 C10.下列有关分离纤维素分解菌的实验叙述有误的是（）A. 选择培养后先将样品梯度稀释再涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B. 选择培养这一步可省略但培养的纤维素分解菌少C. 菌液经稀释后可先涂布到培养基上后再加刚果红染色D. 透明圈一定是以纤维素分解菌为中心形成的【答案】C【解析】解 A、经选择培养后再经梯度稀释才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 A正确B、选择培养可省略但培养分离的纤维素分解菌少 B正确C 、经稀释培养后将样品涂布于含刚果红的鉴别纤维素分解菌的固体培养基上进行观察 C错误D、刚果红可以与纤维素结合形成红色的复合物而纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖因此在纤维素分解菌的菌落周围由于缺少纤维素而出现透明圈 D 正确．故选 C．11.关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是（）A. 培养基应以尿素为唯一氮源该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B. 若接种菌种的培养基pH降低则说明该菌种能分解尿素C. 对10mL土样稀释\ 10^6倍后取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验测得的菌落数分别为18、234、276 则该10mL土样中分解尿素的细菌数为\ 2.55times 10^8个D. 应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰提高可信度【答案】D【解析】解 A.从土壤中分离分解尿素的细菌培养基应以尿素为唯一氮源尿素分解菌为异养型利用的是有机碳源硝化细菌是自养型以二氧化碳为碳源二氧化碳为无机物 A 错误B.培养基中微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨氨会使培养基的pH升高故pH降低不能说明该菌种能分解尿素 B错误C.对10mL土样稀释 10^6倍后取0.1该溶液进行重复的涂布实验测得的菌落数分别为18、234、276 则该10mL土样中分解尿素的细菌数为 (234+276)/2\div 0.1\times10\times 10^6=2.55\times 10^10个 C错误D.分离微生物时需要设置不接种的培养基与实验组一起培养做空白对照以排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰提高可信度 D正确故选 D12.下列关于分解纤维素的微生物的分离说法中错误的是（）A. 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物纤维素的基本单位是葡萄糖B. 纤维素酶包括\ C_1酶、\ C_X酶和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖C. 分离分解纤维素的微生物的实验过程梯度稀释之前必须进行选择培养D. 为确定得到的是纤维素分解菌还需进行发酵产纤维素酶的实验可通过纤维素酶分解滤纸后产生的葡萄糖进行定量测定【答案】C【解析】解 A.棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物纤维素是一种糖类物质其基本单位是葡萄糖 A正确B.纤维素酶是一种复合酶包括 C_1酶、 C_X酶和葡萄糖苷酶其中 C_1酶和 C_X酶能使纤维素分解成纤维二糖葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖 B正确C.分离分解纤维素的微生物的实验过程梯度稀释之前进行选择培养这一步是非必须步骤 C错误D.进行发酵产纤维素酶的实验过程中可以将富含纤维素的滤纸埋在土壤中30d左右通过纤维素酶分解滤纸后产生的葡萄糖进行定量测定 D正确故选 C13.下列关于微生物培养和利用的叙述 \underset\cdot正\underset\cdot确的是（）A. 接种前要了解固体培养基是否被污染需用完全培养基接种菌液培育检测B. 接种时连续划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释获得单个菌落C. 以尿素为唯一氮源且含刚果红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D. 倒平板前加入刚果红的方法筛选出的菌落中不可能会有其他杂菌的混杂【答案】B【解析】A、检测培养基被污染的方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间观察培养基上是否有菌落产生 A错误B、接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落 B正确C、尿素分解菌的氮源是尿素其他不能利用尿素的菌就不能生长所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌尿素分解菌可以将尿素分解为氨可以使酚红指示剂变红 C错误D、倒平板前加入刚果红培养过程中刚果红有可能被其他微生物分解形成透明圈 D错误故选B二、多选题（本大题共计2小题每题3分共计6分）14.高通量筛选是获得高性能微生物菌种的重要途径其生产流程简图如下下列说法错误的是（）A. 对出发菌株的选育也可以借助于基因工程等技术实现B. 将配置好的培养基倒人锥形瓶中宜采用干热灭菌法进行灭菌C. 图中的单菌落一定是微生物繁殖形成的纯培养物D. 多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测【答案】B, C【解析】解 A.对出发菌株的选育可以借助于基因工程等技术实现 A正确B.将配置好的培养基倒人锥形瓶中宜采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 B错误C.涂平板时可能不同种的细菌会重合在一起形成的单菌落不属于纯培养物 C错误D.多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测 D正确故选 BC15.某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解会对环境造成污染只有某些细菌能降解X 研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的细菌菌株实验过程中需要甲、乙两种培养基甲的组分为无机盐、水和X 乙的组分为无机盐、水、X和Y 下列相关叙述中正确的是（）A. 甲、乙培养基均属于选择培养基乙培养基组分中的Y物质是琼脂B. 若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源C. 步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液的浓度不同D. 步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高某菌株对X的降解量可能下降【答案】A, B, D【解析】解 A.甲、乙培养基均以X为唯一碳源和氮源属于选择培养基其中乙培养基为固体培养基因此其组分中的Y物质是琼脂 A正确B.若要筛选高效降解X的细菌菌株甲、乙培养基中X是唯一的碳源和氮源 B正确C.步骤⑤的筛选过程中各培养瓶中的X溶液的浓度要相同 C错误D.步骤⑤的筛选过程中若培养基中的X浓度过高时可能会导致细菌细胞失水过多而失活因此对X的降解量可能下降 D正确故选 ABD三、解答题（本大题共计5小题每题10分共计50分）16.（1）若根据用途划分该培养基属于________（填选择或鉴别）培养基若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌培养基的营养成分必需怎样更改？________ 并且用________作为指示剂16.（2）图1和图2是培养大肠杆菌的结果图则获得图2效果的接种方法是________运用图1所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目少其原因是________16.（3）接种后培养温度控制在35℃左右研究人员通常可根据菌落的________（特征）来初步区分不同种的微生物16.（4）甲同学用稀释涂布平板法测定大肠杆菌的数量每个平板取1mL稀释液涂布将接种后的培养基放入37℃恒温培养箱中培养36h 取出后统计各平板的菌落数结果如下表所示应该选择其中稀释倍数为________的平板进行计数每毫升细菌数大约【答案】（1）鉴别, 将蛋白胨改成尿素, 酚红【解析】解（1）分析表格可知该培养基加入了指示剂属于鉴别培养基若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌该培养基应以尿素为唯一氮源并用酚红作为指示剂【答案】（2）平板划线法, 当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落【解析】（2）根据图2划线区域可知获得图2效果的接种方法是平板划线法图1菌落均匀分布所示接种方法为稀释涂布平板法由于当两个或多个细胞连在一起时平板上显示的只是一个菌落故统计的菌落常常比活菌的实际数目少【答案】（3）形状、大小、颜色等【解析】（3）大肠杆菌属于细菌生长繁殖的最适温度大约为35℃左右将培养温度设置到35℃左右是为大肠杆菌的生长、繁殖提供适宜的温度接种后培养温度控制在35℃左右研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等来初步区分不同种的微生物【答案】（4） \ 10^2, 8500【解析】（4）统计各平板的菌落数时应选择菌落数在30~300的平板进行计数细菌数大约是每毫升 (87+ 83+ 85)\div 3\times 10^2= 8500 个17.（1）PDA培养基中葡萄糖主要为真菌的生长提供________（答出两点即可）该培养基中添加链霉素的作用是_______17.（2）该培养基经灭菌后需放在37℃温箱培养24h方可使用其目的是________17.（3）作为对照的C组的处理是________17.（4）通过上述实验该小组认为建议使用0.5%苦参碱防治苹果干腐病你认为该小组作出建议的依据有________（答出两点即可）【答案】（1）碳源和能源（能量）, 抑制细菌等杂菌生长【解析】解（1）葡萄糖可以为真菌的生长提供碳源和能量链霉素是一种抗生素可以抑制细菌等杂菌的生长不会影响真菌的生长【答案】（2）检测培养灭菌是否彻底【解析】（2）灭完菌的培养基要放置一段时间是因为需要检测灭菌是否彻底【答案】（3）将组织块放置于等量的无菌水中浸泡2min 后用镊子夹出置于倒好的PDA平板上【解析】（3）A、B是实验组 C组做对照可以将组织块放置于等量的无菌水中浸泡2min 后用镊子夹出置于倒好的PDA平板上【答案】（4）0.5%苦参碱的抑菌效果与40%福美砷相当（或略好）苦参碱是植物源杀虫剂无残留不会污染环境而福美砷是化学农药长期使用会污染环境、影响人体健康等【解析】（4）资料一说明 0.5%苦参碱的抑菌效果与40%福美砷相当（或略好）资料二说明苦参碱是植物源杀虫剂无残留不会污染环境而福美砷是化学农药长期使用会污染环境、影响人体健康等18.（1）稀释菌原液为确定合适的稀释倍数小组成员取1mL菌原液进行如下图所示的操作在统计菌落时发现平板上的平均菌落数为40个则每毫升菌原液中的细菌数大约为________个18.（2）培养基的准备在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后切断热源让灭菌锅内温度自然下降 ________ 打开排气阀旋开固定螺栓开盖才可以取出灭菌的培养基等物品待培养基冷却至50℃左右时倒平板在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红从功能上来看该培养基属于________培养基培养基中碳源主要是________18.（3）接种与观察在无菌条件下用________取0.1mL稀释后的菌悬液进行图1中________所示的操作室温放置2~3分钟后倒置于恒温箱中培养室温放置2~3分钟的目的是________ 培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小图2中D/d的值越________ 表示该菌对纤维素分解能力越强【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】19.（1）微生物培养基的营养成分包含________等为获得特定菌种会用到选择培养基选择培养基是指________ 若要对培养基进行灭菌方法为________19.（2）若要得到纯净的胰岛素前体还需对培养液进行离心、超滤然后纯化进行纯化时可用________法其原理是________19.（3）纯化后为鉴定是否得到胰岛素前体可用________方法鉴定蛋白质的相对分子质量来确定【答案】碳源、氮源、水和无机盐, 允许特定微生物生长同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基, 高压蒸汽灭菌【解析】培养基的营养成分为碳源、氮源、水和无机盐等选择培养基是指允许特定微生物生长同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌【答案】凝胶色谱, 当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶的内部通道路程较长移动速度较慢相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶的内部的通道只能在凝胶的外部移动路程较短移动速度较快【解析】蛋白质的纯化选择的方法为凝胶色谱法其原理是当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶的内部通道路程较长移动速度较慢相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶的内部的通道只能在凝胶的外部移动路程较短移动速度较快【答案】SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳【解析】通过蛋白质相对分子质量鉴定蛋白质应选择SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS 所带电荷的量大大超过了蛋白质的原有电荷故蛋白质迁移率完全取决于其相对分子质量的大小20.（1）实验室培养微生物时获得纯净培养物的关键是________20.（2）微生物的接种方法很多最常用的是平板划线法和________ 步骤甲和步骤乙是平板划线操作中的两个步骤步骤甲的操作是将接种环放在火焰上灼烧直到接种环烧红步骤乙的操作是将已冷却的接种环伸入菌液中沾取一环菌液从步骤甲至步骤乙的操作过程中还需进行的操作步骤是________20.（3）微生物吸收的无机盐的作用是________（答出二点即可）20.（4）步骤②③中若将稀释后且富含多种类型微生物的土样培养液直接涂布于同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上可能导致错过优势纤维素分解菌的发现原因是________20.（5）接种在培养基上初筛分离得到的4个菌株的观察结果如下表表中H/h的大小与纤维素酶的________有关据表分析降解纤维素能力最强的菌株是________（填表中菌株编号的序号）【答案】（1）防止外来杂菌的污染【解析】解（1）实验室培养微生物时获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵【答案】（2）稀释涂布平板法, 在火焰旁冷却接种环并打开盛有菌液的试管的棉塞将试管口通过火焰【解析】（2）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法在采用平板划线操作的从图甲至图乙的操作过程中还需进行的操作步骤是在火焰旁冷却接种环并打开盛有菌液的试管的棉塞接着将试管口通过火焰【答案】（3）维持细胞和生物体的生命活动维持细胞的酸碱平衡（调节渗透压组成化合物）【解析】（3）微生物吸收的无机盐的作用是维持细胞和生物体的生命活动维持细胞的酸碱平衡（调节渗透压组成化合物）【答案】（4）不同种类型的微生物之间的生长会相互影响（或多种类型微生物直接接种在同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上各种微生物之间产生竞争关系生长相互影响不利于优势纤维素分解菌的发现）【解析】（4）多种类型微生物直接接种在同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上各种微生物之间产生竞争关系生长相互影响不利于优势纤维素分解菌的发现【答案】（5）量与活性, 3【解析】（5）酶的含量越多、活性越高纤维素被分解的越多形成的透明圈越大刚果红可以与纤维素形成红色复合物纤维素被分解后产生的二糖或葡萄糖不能与刚果红形成红色复合物形成透明斑据表可知 3号菌株H/h的值较大说明其产生的纤维素酶活性最高或其纤维素酶量最大。