下载文档原格式
10微生物检验员工作职责微生物检验员是一种专业技术工种，负责对样本中的微生物进行检验和分析。
他们在医疗、农业、食品安全等领域发挥着重要作用，确保产品的质量和公众的健康安全。
在这篇文章中，我将介绍微生物检验员的工作职责，并探讨他们在工作中的重要性。
首先，微生物检验员的主要职责是收集样本并进行分析。
他们会接收来自不同来源的样本，包括食品、水、土壤、空气和生物体等。
他们需要根据样本的特点选择合适的培养基和检测方法，并进行培养和分离微生物。
通过观察细菌、真菌和病毒的生长情况，他们能够确认样本中是否存在病原体或污染物。
其次，微生物检验员还需要对检验结果进行分析和解释。
他们会进行不同的实验，包括菌落计数、菌群分析和抗菌药物敏感性测试等。
通过这些测试，他们能够确定微生物的种类和数量，并评估其对人类健康的潜在威胁。
此外，他们还需要将分析结果与相关标准和法规进行比对，以确保产品的合格性和安全性。
另外，微生物检验员还负责维护实验室的设备和试剂。
他们需要定期检查和校准实验室仪器，确保其正常工作和准确的测试结果。
如果出现故障或需要更换试剂，他们需要及时报告并采取适当的措施。
此外，他们还需要妥善处理和存储有毒或有害物质，以防止事故和污染的发生。
此外，微生物检验员还需要记录和报告检验结果。
他们通常会编写详细的实验记录，并将结果录入电子数据库中。
这些数据对于未来的追踪和分析非常重要。
此外，他们还需要与其他相关人员进行沟通，并向上级主管、客户或监管机构提供详细的检验报告。
微生物检验员的工作要求他们具备广泛的知识和技能。
首先，他们需要了解微生物学的基本原理和技术。
他们需要知道如何分离和鉴定不同的微生物，并能够解释其功能和特性。
此外，他们还需要熟悉各种常见微生物的培养技术和检测方法。
此外，微生物检验员还需要具备良好的实验室技巧和操作经验。
他们需要准确测量和配制试剂，掌握灭菌和无菌技术。
他们还需要熟悉实验室设备的使用和维护，以确保实验结果的准确性和可靠性。
实验九水中大肠菌群数的测定一、目的要求学习大肠菌群数的检测原理和方法。
二、实验材料1.样品：水样2. 培养基：乳糖胆盐发酵管(单料及双料)，伊红美兰琼脂(EMB)平板，乳糖发酵管。
3. 其他：显微镜，酒精灯，无菌吸管(10m1、1m1)，接种环，载玻片等三、基本原理水中的病原菌多数来源于病人和病畜的粪便。
由于病原菌的数量少，检测过程复杂，因此，直接测它们的存在是非常困难的专业化工作。
由于大肠菌群在粪便中数量大，在体外存活时间与肠道致病菌相近，且检验方法比较简便，因此一般采用测定大肠菌群或大肠杆菌的数量来作为水被粪便污染的标志。
如果水中大肠菌群的菌数超过一定的数量，则说明此水已被粪便污染，并有可能含有病原菌。
大肠菌群的定义是指一群好氧和兼性厌氧、革染氏阴性、无芽孢的杆状细菌，并能在乳糖培养基中，经37℃24~48h培养能产酸产气。
我国规定每升自来水中大肠菌群不得超过3个。
检测大肠菌群的方法有稀释培养法和膜滤法两种，其中稀释培养法是标准分析法，为我国大多数卫生单位和水厂所使用。
它包括初发酵试验、平板分离和复发酵试验三个部分。
四、方法与步骤1.采样：取100ml磨口带塞玻璃瓶，包扎后，干热灭菌备用。
取自来水样时，至少应先放水5min，以冲去龙头口所带的微生物，获得主流管中有代表性的水样。
取样时，用右手握瓶，左手启开瓶塞，用覆盖瓶口的纸托住瓶塞，收集样品后，连同覆盖纸一起将瓶口塞好，并用线绳在原处扎好。
注意手指不得触及瓶口内部。
在静水中取样时，先用右手揭去塞子，瓶口朝下浸入水下约30cm处，然后将瓶子反转过来，待水注满后，取出塞好瓶口。
如果水在流动，瓶口必须迎着水流，以免手上的细菌被水冲进瓶子。
2.水样放置过程中，内含的细菌数目和类型会发生变化，所以要求水样品应于6~10℃贮存，并不超过6h。
3.初发酵试验：吸取待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，10ml接种量采用双料发酵管，而lml及lml以下接种量采用单料管。
·2019 第十章细菌的生物化学试验一、 A11、在链球菌中，可作为 B 群链球菌特异性鉴定的试验是A、胆汁溶菌试验B、 CAMP试验C、凝固酶试验D、 O/129 抑制试验E、 DNA酶试验2、下列关于触酶试验的说法中，错误的是A、葡萄球菌触酶试验阳性B、微球菌触酶试验阳性C、链球菌触酶试验阳性D、触酶试验常用于革兰阳性球菌的初步分群E、有大量气泡产生的为触酶试验阳性3、下列说法中错误的是A、肠杆菌科细菌氧化酶试验阴性B、假单胞菌的氧化酶试验阳性C、奈瑟菌属氧化酶试验阳性D、莫拉菌属氧化酶试验阴性E、氧化酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶4、主要用于肠杆菌科细菌属及种的鉴别的试验是A、明胶液化试验B、吲哚试验C、 ONPG试验D、糖类发酵试验E、硫化氢试验5、下列试验中，可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别的试验是A、糖类发酵试验B、 O/F 试验C、 ONPG试验D、甲基红试验E、七叶苷水解试验6、下列试验中，可区分细菌的代谢类型的试验为A、糖类发酵试验B、 O/F 试验C、 ONPG试验D、甲基红试验E、七叶苷水解试验第 1 页共 6 页·7、鉴定细菌最主要和最基本的试验是A、糖类发酵试验B、 O/F 试验C、 ONPG试验D、甲基红试验E、七叶苷水解试验8、 O/129 抑菌试验的培养基为A、普通琼脂培养基B、血琼脂培养基C、碱性琼脂培养基D、 SS 琼脂培养基E、 MH培养基9、 ONPG试验主要鉴定的细菌是A、发酵葡萄糖菌株B、发酵乳糖菌株C、迟缓发酵葡萄糖菌株D、迟缓发酵乳糖菌株E、迟缓发酵七叶苷菌株10、不属于碳水化合物代谢试验的是A、甲基红试验B、明胶液化试验C、 V-P 试验D、七叶苷水解试验E、 ONPG试验11、下列不属于糖类代谢试验的是A、菊糖分解试验B、甘露醇分解试验C、 O/F 试验D、吲哚试验E、甲基红试验12、不属于蛋白质和氨基酸代谢试验的是A、赖氨酸脱羧酶试验B、七叶苷水解试验C、硫化氢试验D、苯丙氨酸脱氨酶试验E、尿素分解试验13、关于甲基红试验原理不正确的是A、细菌分解葡萄糖产生丙酮酸B、丙酮酸进一步分解产生甲酸等C、使培养基pH 下降至 4.5 以下第 2 页共 6 页D、甲基红变色范围为pH4.4～ 6.2E、阳性时呈黄色14、关于吲哚试验，不正确的是A、培养基为蛋白胨水B、培养基中不含葡萄糖C、阳性的细菌含有色氨酸酶D、加入的吲哚试剂为四甲基对苯二胺E、有红色的玫瑰吲哚形成为阳性15、甲基红试验阳性结果为A、绿色B、黄色C、红色D、蓝色E、紫色16、吲哚试验阳性的细菌是因为它能分解A、葡萄糖B、胱氨酸C、靛基质D、色氨酸E、枸橼酸盐17、靛基质试验又称A、甲基红试验B、尿素酶试验C、糖发酵试验D、枸橼酸盐利用试验E、吲哚试验18、 CAMP试验阳性结果的溶血特点为A、箭头状B、线状C、月牙状D、环状E、 S 状19、链球菌与葡萄球菌的属间鉴别，可作初步确定的是A、 DNA酶试验B、触酶试验C、氧化酶试验D、葡萄糖发酵试验E、过氧化氢酶抑制试验20、可以区分大肠埃希菌和变形杆菌的试验是A、动力试验第 3 页共 6 页B、吲哚试验C、葡萄糖发酵试验D、尿素分解试验E、甲基红试验21、下列不属于蛋白质和氨基酸代谢试验的是A、 CAMP试验B、吲哚试验C、硫化氢试验D、明胶液化试验E、尿素分解试验答案部分一、 A11、【正确答案】 B【答案解析】在链球菌中，只有 B 群链球菌CAMP试验阳性，故可作为特异性鉴定。
微生物检验师试题及答案一、单项选择题（每题2分，共10题）1. 微生物检验中，用于检测细菌生长的培养基是：A. 营养琼脂B. 选择性培养基C. 鉴别培养基D. 厌氧培养基答案：A2. 在微生物检验中，以下哪种微生物属于革兰氏阴性菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 链球菌D. 酵母菌答案：A3. 微生物检验中，用于检测细菌运动性的培养基是：A. 营养琼脂B. 半固体培养基C. 鉴别培养基D. 厌氧培养基答案：B4. 微生物检验中，以下哪种微生物属于厌氧菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 产气荚膜梭菌D. 酵母菌答案：C5. 在微生物检验中，用于检测细菌的氧化酶活性的试剂是：A. 甲基红试剂B. 氧化酶试剂C. 糖发酵试剂D. 革兰氏染色液答案：B6. 微生物检验中，以下哪种微生物属于真菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 曲霉D. 酵母菌答案：C7. 在微生物检验中，用于检测细菌的发酵能力的培养基是：A. 营养琼脂B. 半固体培养基C. 糖发酵培养基D. 厌氧培养基答案：C8. 微生物检验中，以下哪种微生物属于革兰氏阳性菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 链球菌D. 酵母菌答案：B9. 在微生物检验中，用于检测细菌的耐药性的方法是：A. 纸片扩散法B. 稀释法C. 琼脂扩散法D. 以上都是答案：D10. 微生物检验中，以下哪种微生物属于病毒？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 流感病毒D. 酵母菌答案：C二、多项选择题（每题3分，共5题）1. 微生物检验中，以下哪些微生物属于细菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 曲霉D. 流感病毒答案：A、B2. 在微生物检验中，以下哪些微生物属于革兰氏阳性菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 链球菌D. 酵母菌答案：B、C3. 微生物检验中，以下哪些微生物属于厌氧菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 产气荚膜梭菌D. 酵母菌答案：C4. 在微生物检验中，以下哪些微生物属于真菌？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 曲霉D. 酵母菌答案：C、D5. 微生物检验中，以下哪些微生物属于病毒？A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 流感病毒D. 酵母菌答案：C三、判断题（每题1分，共5题）1. 微生物检验中，所有细菌都能在营养琼脂上生长。
南昌大学实验报告学生姓名：学号：专业班级：实验类型：√验证□综合□设计□创新实验日期：实验成绩：实验十细菌菌落总数（CFU）的测定一、实验目的：1．学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。
2．了解培养基平板菌落计数原则二、实验基本原理：细菌菌落总数（CFU）是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃培养24h后所生长的腐生性细菌菌落总数。
它是有机污染程度的指标，也是卫生指标。
在饮用水中所测得的细菌菌落总数除说明水有机污染的程度外，还指示该饮用水能否饮用。
但还应当指出的是，水源水中的细菌菌落总数不能说明污染的来源。
因此，结合大肠菌群数以判断水的污染的安全程度就更全面。
我国现行生活饮用水的卫生标准（GB5749－2006）规定：细菌菌落总数在1ml自来水中不得超过80个。
细菌种类很多，有各自的生理特性，必须用适合它们的培养基才能将它们培养出来。
然而在实验工作中不易做到，通常用一种适合大多数细菌生长的培养基培养腐生性细菌，以它的菌落总数表明有机污染程度。
三、主要仪器设备及耗材：电热干燥箱，高压蒸汽灭菌锅，电热培养箱，恒温水浴，冰箱，菌落计数器，放大镜，肉膏蛋白胨脂培养基，灭菌水，灭菌三角烧瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管等。
四、实验步骤：1．水样的采取供细菌学检验用的水样，必须按无菌操作的基本要求进行采样，并保证在运送，贮存过程中不受污染。
为了要正确反映水质在采样时的真实情况，水样在采取后应立即送检，一般从取样到检验不应超过4小时。
条件不允许立即检验时，应存于冰箱，但也不应超过24小时，并应在检验报告单上注明。
（1）生活饮用水（自来水）先将自来水龙头用火焰烧灼3分钟灭菌，再开放水龙头使水流5分钟后，用灭菌三角烧瓶接取水样，以待分析。
（2）池水、河水或湖水应取距水面10—15㎝的深层水样，先将灭菌的带玻璃塞瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，立即返回实验室检查，否则需放入冰箱中保存。
实验10 细菌计数返回目录一、显微镜直接计数法【原理】显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌板)，于显微镜下直接计数细菌的一种简便、快速、直观的方法。
该法适用于各种单细胞菌体的纯培养悬浮液，目前国内外常用的计菌板有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌板以及Hawksley计菌板等，血球计数板适用于菌体较大的酵母菌或霉菌孢子的计数，后两种计菌板适用于一般细菌的计数。
这几种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，盖玻片和载玻片之间的距离只有0.02mm，可以使用油镜观察。
而血球计数板较厚，不能使用油镜。
这里介绍血球计数板方法计数酵母菌数量。
血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽所构成的3个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区，计数区的刻度有两种：一种是一个大方格分为16个中方格(四角的四个大方格)，每个中方格又分25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格(中央的一个大方格)，而每个中方格又分成16个小方格，即计数区都由400个小方格组成(图1-3-12)。
图1-3-12 血细胞计数板构造计数区（一个大方格）边长为1mm，则计数区的面积为l mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为l/4000mm3。
使用血球计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每mL菌液(或每g样品)中微生物细胞的数量。
已知：1ml体积＝10mm×10mm×10mm＝1000mm3所以：1ml体积应含有小方格数为1000mm3／(1／4000mm3)＝4×106个小方格。
因此：每ml菌悬液中含有细胞数＝4×106×每个小格中细胞平均数×菌液稀释倍数。
微生物检验技术初级（士）相关专业知识模拟试卷10(题后含答案及解析)题型有：1. A1/A2型题1．化学结构与毒效应之间的关系A．化合物的化学活性决定理化性质B．理化性质决定化合物的生物活性C．化合物的生物活性决定该化合物的化学活性D．化合物的化学结构决定其化学活性及理化性质E．化学活性和理化性质影响化学结构正确答案：D2．危险度评定的核心内容是A．定性评定B．定量评定C．剂量反应关系确定D．毒性评定E．危害性评定正确答案：C解析：危险度评定的内容包括四个部分：明确外来化合物对机体损害作用的存在与否、定量评定接触剂量与损害程度关系、确定人类实际接触量和接触情况及在此种接触情况下对人群危险度的估计。
其中剂量反应关系是评定的核心内容。
3．研究化学结构与毒性效应之间关系的目的是A．寻找毒作用规律，有助于通过比较，预测新化合物的生物活性B．预测毒性大小C．推测毒作用机制D．预测新化合物的安全限量标准范围E．以上都是正确答案：E4．致畸作用的毒理学特点是A．有致畸敏感期，剂量反应关系曲线陡峭，物种差异明显B．无致畸敏感期，剂量反应关系曲线陡峭，物种差异明显C．有致畸敏感期，剂量反应关系曲线平缓，物种差异明显D．无致畸敏感期，剂量反应关系曲线平缓，物种差异明显E．以上都不是正确答案：A5．协同致癌作用机制包括A．抑制DNA修复B．选择性增强DNA受损细胞的增殖C．活化作用酶系统活力发生改变D．上述AB正确E．上述AC正确正确答案：D6．毒物排泄的主要途径是A．胃肠道B．唾液C．汗液D．母乳E．肾脏正确答案：E解析：肾脏是人体最重要的排泄组织。
7．下列致癌物为非遗传毒性致癌物的是A．免疫抑制剂，无机致癌物，促癌剂B．免疫抑制剂，过氧化物酶体增生剂，促癌剂C．直接致癌物，过氧化物酶体增生剂，细胞毒物D．激素，固态物质，无机致癌物E．直接致癌物、促癌剂，前致癌物，细胞毒物正确答案：B解析：除免疫抑制剂、过氧化物酶、促癌剂以外，无机致癌物，直接致癌物均为遗传毒性致癌物质。
微生物检验报告内容10项引言微生物检验是一种重要的实验室检验方法，用于检测环境中的微生物种类和数量。
微生物检验报告是根据实验室检测结果生成的，记录了样品的微生物种类、数量以及可能对健康和环境产生的影响。
本文将介绍微生物检验报告的常见内容，包括检验目的、样品信息、微生物种类和数量等。
1. 检验目的检验目的是指进行微生物检验的原因和目标。
根据实验目的的不同，检验报告可能会包含以下几个方面：- 确定样品中的微生物种类和数量，以监测环境的微生物污染水平。
- 检测食品、饮用水和药品等样品是否符合卫生标准。
- 评估医院或实验室中的卫生状况，以保障患者和工作人员的安全。
- 检验土壤或水样品中的微生物，以评估环境污染程度和生态系统健康情况。
2. 样品信息样品信息包括样品的标识、来源、采样日期、采样地点等。
这些信息可以帮助检验人员对样品进行识别和分析，并确保结果的准确性。
在微生物检验报告中，样品信息应当清晰明确，并与样品的标签相对应。
3. 检验方法检验方法是指实验室进行微生物检验时所采用的技术和流程。
不同的检验方法适用于不同类型的微生物，其中常见的方法包括：- 培养法：将样品接种在培养基上，以培养和筛选出不同的微生物种类。
- PCR法：通过扩增目标DNA片段，快速检测和鉴定微生物。
- 红外光谱法：利用红外线光谱技术，分析微生物的化学组成。
在微生物检验报告中，检验方法的描述应当详细准确，以便读者了解实验室的操作步骤和分析流程。
4. 微生物种类与数量微生物种类和数量是微生物检验报告的核心内容。
检验人员根据样品的特点和实验室检测结果，对微生物进行鉴定和计数。
报告中会列出检测到的微生物种类、数量以及相应的参考值。
一般来说，高于参考值的微生物数量可能表示样品存在微生物污染。
5. 判断与结论根据微生物种类和数量的检测结果，报告中会进行判断和结论。
判断与结论根据检验目的和参考标准进行，一般包括以下几个方面：- 对环境的污染程度进行评估和分类。
南京大学生物技术系实验报告题目放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察姓名年05 月24 日【一、实验目的】1、通过菌落及细胞形态的观察和比较，掌握区分细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的要点。
2、掌握观察放线菌孢子的方法。
3、掌握观察霉菌孢子及根霉假根的方法。
4、了解酵母菌子囊孢子形成的方法。
【二、实验原理】1、三类微生物菌落形态特征：霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌营养体的基本形态单位是菌丝，包括有隔菌丝和无隔菌丝。
营养菌丝分布在营养基质的内部，气生菌丝伸展到空气中。
营养菌丝体除基本结构以外，有的霉菌还有一些特化形态，例如假根、匍匐菌丝、吸器等。
霉菌的繁殖体不仅包括无性繁殖体，例如分生孢子，孢子囊等，包裹其内或附着其上的有各类无性孢子；还包括有性繁殖结构，例如子囊果，其内形成有性孢子。
在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。
放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
酵母菌是单细胞的真核微生物，细胞核和细胞质有明且分化，个体比细菌大得多。
酵母菌的形态通常有球状、卵园状、椭圆状、柱状或香肠状等多种。
酵母菌的无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子；酵母菌的有性繁殖形成子囊和子囊孢子。
酵母菌母细胞在一系列的芽殖后，如果长大的子细胞与母细胞并不分离，就会形成藕节状的假菌丝。
2、三点接种法与霉菌菌落形态的观察霉菌的菌落形态是分类鉴定的重要依据。
为便于观察，通常用接种针挑取极少量霉菌孢子点接于平板中央，使其形成单个菌落；或在平板上接三点，即在等边三角形的三个顶点上接种，经培养后同一菌种可形成三个重复的单菌落。
预防疾控微生物检验技术-案例分析题1、大肠埃希菌是人和动物肠道的正常菌群，婴儿出生后数小时就进入肠道，并终生伴随。
可随粪便排出，在自然界中广泛存在，当宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织或器官时，可引起肠外感染。
大肠埃希菌中的致病菌株能引起轻微腹泻至霍乱样严重腹泻，并能引起致死性并发症。
大肠埃希菌的致病机制不包括（）A.大肠埃希菌的K抗原B.大肠埃希菌的菌毛C.内毒素D.大肠埃希菌的Vi抗原E.肠毒素2、大肠埃希菌是人和动物肠道的正常菌群，婴儿出生后数小时就进入肠道，并终生伴随。
可随粪便排出，在自然界中广泛存在，当宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织或器官时，可引起肠外感染。
大肠埃希菌中的致病菌株能引起轻微腹泻至霍乱样严重腹泻，并能引起致死性并发症。
大肠埃希菌对三代头孢菌素耐药的主要机制是（）A.产生超广谱β-内酰胺酶B.产生拓扑异构酶C.产生了一种青霉素结合蛋白（PBPs）D.产生诱导酶E.产生氨基糖苷修饰酶3、人类是奈瑟菌属细菌的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。
除淋病奈瑟菌寄居于泌尿生殖道黏膜外，其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。
脑膜炎奈瑟菌的主要致病因素是（）A.肠毒素B.内毒素C.肾毒素D.神经毒素E.细胞毒素4、人类是奈瑟菌属细菌的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。
除淋病奈瑟菌寄居于泌尿生殖道黏膜外，其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。
以下不属于奈瑟菌鉴定特征的是（）A.革兰阴性双球菌，呈肾形或豆形，在临床标本中，多位于中性粒细胞内B.专性需氧生长，初次分离培养时须供给5%COC.营养要求高，需用巧克力琼脂培养基。
最适生长温度为35～36℃，培养48h后，形成凸起、圆形、光滑、透明的小菌落D.易产生自溶酶，人工培养物如不及时转种，细菌常自溶死亡。
氧化酶阳性，能分解葡萄糖E.在血平板上，有些细菌可产生溶血环5、人类是奈瑟菌属细菌的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。
微生物检验 (10)临床医学检验考试辅导《微生物检验》细菌的生物化学试验● 考点碳水化合物的代谢试验蛋白质和氨基酸的代谢试验碳源和氮源利用试验各种酶类试验抑菌试验复合生化试验【内容讲解】不同细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力各异，其代谢的产物也不相同。
这些代谢产物又各具有不同的生物化学特性，为此，可利用生物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定细菌。
一.碳水化合物的代谢试验原理：由于细菌各自具有不同的酶系统，对糖的分解能力不同，有的能分解某些糖产生酸和气体，有的虽能分解糖产生酸，但不产生气体，有的则不分解糖。
据此可对分解产物进行检测从而鉴别细菌。
1.糖（醇.苷）类发酵试验原理：由于各种细菌含有发酵不同糖（醇.苷）类的酶，故分解糖类的能力不同，分解糖类后的终末产物亦不一致，有的产酸.产气，有的仅产酸，故可利用此特点以鉴别细菌。
培养基：在培养基中加入0.5%～1%的糖类（单糖.双糖或多糖）.醇类（甘露醇.肌醇等）.苷类（水杨苷等）。
方法：接种，培养。
结果：产酸：培养基中的指示剂呈酸性反应。
产气：可使液体培养基中倒管内或半固体培养基内出现气泡，固体培养基内有裂隙等现象。
不分解：培养基中除有细菌生长外，无任何其他变化。
应用：是鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。
2.氧化-发酵试验（0/F试验）原理：氧化型：仅在有氧环境中分解葡萄糖发酵型：在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖产碱型：在有氧或无氧环境中都不能分解葡萄糖培养基：HL （Hugh-Leifson）培养基方法：将待检菌同时穿刺接种两支HL 培养基，其中一支培养基滴加无菌的液体石蜡（或其他矿物油），高度不少于1cm。
将培养基于35℃培养48h或更长。
结果：开管封闭管产碱型氧化型 +半乳糖苷酶试验（ONPG试验）原理：试剂：0.75M ONPG溶液方法：从克氏双糖铁培养基上取菌，于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液，加入一滴甲苯并充分振摇，使酶释放。
将试管置37℃水浴5min，加入0.25ml ONPG试剂，水浴20min～3h观察结果。
结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30min内显色。
应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。
本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。
4.七叶苷水解试验原理：培养基：七叶苷培养基.胆汁七叶苷培养基。
方法：将待检菌接种于七叶苷培养基中，培养后观察结果。
结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。
应用：主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别。
5.甲基红试验原理：培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基方法：将待检菌接种于上述培养基中，培养2～4d，于培养基内加入甲基红试剂，立即观察结果。
结果：呈现红色为阳性；橘红色为弱阳性；黄色为阴性。
应用：肠杆菌科：沙门菌属.志贺菌属.枸橼酸杆菌属.变形杆菌属（+）肠杆菌属.哈夫尼亚菌属（-）。
6.V-P试验原理：培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基方法：将待检菌接种于上述培养基中，于35℃培养48h后加入甲液（6%α-萘酚酒精溶液）和乙液（40%KOH溶液），振摇。
结果：在数分钟内出现红色为阳性；如无红色出现且于35℃4h后仍如故者即为阴性。
应用：本试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。
二.蛋白质和氨基酸的代谢试验原理：不同种类的细菌分解蛋白质的能力不同。
细菌对蛋白质的分解，一般先由胞外酶将复杂的蛋白质分解为短肽（或氨基酸），渗入菌体内，然后再由胞内酶将肽类分解为氨基酸。
1.明胶液化试验原理：方法：将被检菌穿刺接种于明胶培养基，于22℃培养7d，逐日观察结果。
若用35℃孵育，因明胶在此温度下自行液化，故在观察结果前，先置4℃冰箱内30min，再看结果。
结果：培养基呈液化状态为阳性应用：肠杆菌科细菌的鉴别：沙雷菌.普通变形杆菌.奇异变形杆菌.阴沟杆菌等可液化明胶，而其他细菌很少液化明胶。
厌氧菌如产气荚膜梭菌.脆弱类杆菌等也能液化明胶。
多数假单胞菌也能液化明胶。
2.吲哚（靛基质）试验原理：培养基：蛋白胨水培养基方法：将待检菌接种于上述培养基中，于35℃培养24～48h，沿试管壁慢慢加入吲哚试剂。
结果：于两者液面接触处出现红色为阳性，无色为阴性。
应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。
3.硫化氢试验原理：培养基：醋酸铅培养基方法：将待检菌穿刺接种于醋酸铅培养基，于35℃培养24～48h观察结果。
结果：培养基变黑为阳性，不变为阴性。
应用：主要用于肠杆菌科中属及种的鉴别。
如沙门菌属.爱德华菌属.亚利桑那菌属.枸橼酸杆菌属.变形杆菌属细菌，绝大多数硫化氢阳性，其他菌属阴性。
沙门菌属中也有硫化氢阴性菌种。
4.尿素分解试验原理：培养基：尿素培养基方法：将待检菌接种于尿素培养基，于35℃培养18～24h观察结果。
结果：培养基呈碱性，使酚红指示剂变红为阳性，不变为阴性。
应用：主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。
奇异变形杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性。
另外雷氏普罗威登菌和摩根菌为阳性，而斯氏和产碱普罗威登菌阴性。
5.苯丙氨酸脱氨酶试验原理：培养基：苯丙氨酸琼脂培养基方法：将被检菌浓厚接种于苯丙氨酸琼脂培养基斜面上，于35℃培养18～24h，滴加10%三氯化铁试剂3～4滴，自斜面上方流下。
结果：应立即观察结果，出现绿色为阳性。
应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。
6.氨基酸脱羧酶试验原理：培养基：氨基酸脱羧酶培养基和氨基酸对照培养基方法：将被检菌分别接种于赖氨酸（或鸟氨酸或精氨酸）培养基和氨基酸对照培养基中，并加入无菌液体石蜡或矿物油，于35℃培养1～4d，每日观察结果。
结果：对照管应呈黄色，测定管呈紫色（指示剂为溴甲酚紫）为阳性，若测定管呈黄色为阴性。
若对照管呈现紫色则试验无意义，不能作出判断。
应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。
如沙门菌属中除伤寒和鸡沙门菌外，其余沙门菌的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶均为阳性。
志贺菌属除宋内和鲍氏志贺菌外，其他志贺菌均为阴性。
三.碳源和氮源利用试验细菌对单一来源的碳源利用的鉴定试验。
1.枸橼酸盐利用试验原理：培养基：枸橼酸盐培养基方法：将被检菌接种于枸橼酸盐培养基，于35℃培养1～4d，每日观察结果。
结果：由淡绿色变为深蓝色为阳性；不能利用枸橼酸盐作为碳源的细菌，在此培养基上不能生长，培养基则不变色，为阴性。
应用：用于肠杆菌科中菌属间的鉴定。
在肠杆菌科中埃希菌属.志贺菌属.爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性，沙门菌属.克雷伯菌属通常为阳性。
2.丙二酸盐利用试验原理：培养基：丙二酸盐培养基方法：将被检菌接种于培养基，35℃培养24～48h后观察结果。
结果：培养基由淡绿色变为深蓝色为阳性，颜色无变化为阴性。
应用：肠杆菌科中属间及种的鉴别。
克雷伯菌属为阳性，枸橼酸杆菌属.肠杆菌属和哈夫尼亚菌属中有些菌种也呈阳性，其他菌属均为阴性。
四.各种酶类试验（一）呼吸酶类试验1.氧化酶试验原理：试剂：1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。
方法：1）菌落法：直接滴加试剂于被检菌菌落上。
2）滤纸法：取洁净滤纸一小块，沾取菌少许，然后加试剂。
3）试剂纸片法：将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片，取菌涂于试剂纸上。
结果：细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色，为阳性。
为保证结果的准确性，分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。
2.过氧化氢酶试验（触酶试验）原理：试剂：3%过氧化氢溶液方法：取槽置于洁净的试管内或玻片上，然后加3%过氧化氢数滴；或直接滴加3%过氧化氢于不含血液的细菌培养物中，立即观察结果。
结果：有大量气泡产生者为阳性。
不产生气泡者为阴性。
应用：故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。
3.硝酸盐还原试验原理：培养基：硝酸盐培养基试剂：甲液（对氨基苯磺酸）；乙液（α-萘胺）方法：被检菌接种于硝酸盐培养基中，于35℃培养1～4d。
将甲.乙液等量混合后（约0.1m1）加入培养基内，立即观察结果。
结果：出现红色为阳性。
若加入试剂后无颜色反应，可能是：①硝酸盐没有被还原，试验阴性；②硝酸盐被还原为氨和氮等其他产物而导致假阴性结果，这时应在试管内加入少许锌粉，如出现红色则表明试验确实为阴性。
若仍不产生红色，表示试验为假阴性。
应用：肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌.嗜麦芽窄食单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验也为阳性。
4.脂酶试验原理：培养基：脂酶培养基（含维多利亚蓝）方法：将被检菌接种于上述培养基中，于37℃培养24h。
结果：培养基变为蓝色为阳性，阴性为粉红色或无色。
应用：主要用于厌氧菌的鉴别。
类杆菌属中的中间类杆菌产生脂酶，其他类杆菌则阴性；芽胞梭菌属中产气芽胞梭菌.肉毒梭菌和诺维梭菌为阳性，而其他梭菌阴性。
5.卵磷脂酶试验原理：培养基：1%卵黄琼脂平板方法：将被检菌划线接种于卵黄琼脂平板上，35℃培养3～6h。
结果：若3h后在菌落周围形成乳白色混浊环，即为阳性，6h 后混浊环可扩展至5～6mm。
应用：主要用于厌氧菌的鉴定。
产气荚膜梭菌.诺维梭菌产生此酶，其他梭菌为阴性。
6.DNA酶试验原理：某些细菌产生DNA酶，可使长链DNA水解成寡核苷酸链。
因为长链DNA可被酸沉淀，寡核苷酸链则溶于酸，所以当在菌落平板上加入酸后，会在菌落周围出现透明环。
培养基：0.2%DNA琼脂平板。
方法：将被检菌点种于上述平板上，于35℃培养18～24h，然后用1mol/L盐酸覆盖平板，观察结果。
结果：在菌落周围出现透明环为阳性，无透明环为阴性。
应用：在革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶；在肠杆菌科中沙雷菌和变形杆菌产生此酶。
7.凝固酶试验原理：方法：1）玻片法：取兔血浆和盐水各一滴，分别置于洁净的玻片上，挑取被检菌分别与血浆和盐水混合。
2）试管法：取试管2支，各加0.5ml人或兔血浆，挑取被检菌和阳性对照菌分别加入血浆中并混匀，于37℃水浴3～4h。
结果：玻片法以血浆中有明显的颗粒出现而盐水中无自凝现象判为阳性；试管法以血浆凝固判为阳性。
应用：作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标，也是葡萄球菌鉴别时常用的一个试验。
8.C试验原理：B群链球菌能产生C因子，可促进葡萄球菌的β-溶血素溶解红细胞的活性，因此在两菌（B群链球菌和葡萄球菌）的交界处溶血力增加，出现矢形（半月形）的溶血区。
培养基：血琼脂平板方法：先以产β-溶血素的金黄色葡萄球菌划一横线接种于血琼脂平板上，再将被检菌与前一划线作垂直划线接种，两线不能相交，相距0.5～1cm，于37℃培养18～24h，观察结果。
结果：在两划线交界处出现箭头样的溶血区为阳性。
应用：在链球菌中，只有B群链球菌C试验阳性，故可作为特异性鉴定。
9.胆汁溶菌试验原理：胆汁或胆盐可溶解肺炎链球菌，可能是由于胆汁降低细胞膜表面的张力，使细胞膜破损或使菌体裂解；或者是由于胆汁加速了肺炎链球菌本身自溶过程，促使细菌发生自溶。
