构建生物经济体系 造生物经济旗舰
内毒素存在形式
单体
胶束
囊状
构建生物经济体系 打造生物经济旗舰
医药制剂
本身不合格或放置 时间过长
输液器
未消毒彻底
注射器
操作污染
0.5—1 小时
冷颤 发热,头痛 恶心,呕吐,脸色苍白 血液循环障碍
休克
死亡 2ng/kg体重即能引起发热
构建生物经济体系 打造生物经济旗舰
相互作用
本身带负电,可以和带 正电的碱性蛋白结合
通过二价阳离子(如 Ca2+) 的桥接作用和酸
性蛋白形成复合体
类脂A的疏水特性导致 其和疏水性蛋白结合
1.高温烘烤 热原的耐热性能良好,60℃加热1h不被分解破坏,100℃不降解 ,但180℃3~4h、200℃60min或250℃30~45min可使热原彻底 破坏。此法适合玻璃器皿的去内毒
四
亲和层析
构建生物经济体系 打造生物经济旗舰
相分离法Triton X-114
此法用于较大重组蛋白质(rCK-bb、Rck-mb)中LPS的去除 ,经过三次相分离后,LPS从104 EU/ml降到了几个EU/ml, 去除率超过97%,蛋白的回收率大于90%。
适用于亲水性蛋白的内毒去除,会使一些有毒的 Triton X-114 残存在蛋白溶液中
将内毒素底物LAL或多粘菌素 B(PMB)偶联于CNBr-Sepharose 或NHS-Sepharose上,以此介质特 异性吸附内毒素,而让蛋白通过舰
亲和层析
亲和配基 PMB 与内毒素之间的作用主要是疏水与静电作用,而盐浓度即 离子强度的变化会反方向影响这两种作用 : 离子强度增大会增强亲和配基PMB与内毒素之间的疏水作用,同时又会减 小两者之间的静电作用 ; 离子强度减小会减小亲和配基PMB与内毒素之间的疏水作用,同时又会增 大两者之间的静电作用。疏水作用与静电作用的协同作用导致了上述结 果。