• 2)孵育反应仪器 反应温度的要求(37 ± 1 ℃ )
• 3、鲎试剂标示灵敏度的复核试验 1)实验目的 A、验证实验的条件是否满足BET实验的要求; B、验证实验人员的操作技能是否满足BET实验的
要求; C、验证实验所用试剂是否满足BET实验的要求; D、验证实验所用器具是否满足BET实验的要求;
• 1)国际
– 1956年,美国科学家Frederic Bang发表论文《鲎的一种 细菌性疾病》,阐述了细菌内毒素使鲎血凝固的现象、随后 ,Bang 和Levin发明了鲎试剂。 – 1980年,FDA发表使用鲎试剂检查人用和兽用注射药终成 品内毒素的准则;美国药典20版(USPXX)收载BET法。 – 1989年英国药典收载BET法 – 1991年日本药局方收载 BET法。
– 凝胶法 恒温设备方面,干式恒温仪器逐步取代水浴恒温 箱 – 定量BET 试管式定量检测仪 酶标板式定量检测仪 全自 动的BET系统 专用的数据软件
• 3)BET试剂的发展 – 鲎试剂的灵敏度越来越高
凝胶法最高达0、0075EU/ml,商品试剂0、015EU/ml 定 量法高达0、001EU/ml
(2)走向统一的BET法 - WHO实现了内毒素的国际标准品(IS)的效价
(IU)与各国内毒素标准品的效价(EU)的统一,即 1IU=1EU。
• 2)BET技术及应用发展的特点 (1)BET方法呈多样化
–凝胶法 –比浊法 - 动态比浊法 - 终点比浊法 –比色法 - 动态比色法 - 终点比色法
(2)BET趋向自动化
• 1、细菌内毒素 1)化学成分及特性 – 革兰氏阴性细菌细胞壁的产物 – 是高分子量脂多糖复合物(LPS)
单体分子量介于10,000至20,000道尔顿 典型地以 100,000至50特性 - 致热性:内毒素作用于人体细胞,使之释放内原性热原,
