亚甲基蓝标准曲线

亚甲基蓝的标准曲线亚甲基蓝是一种常用的生化试剂，用于测定蛋白质含量和核酸电泳。

在实验室中，我们经常需要用到亚甲基蓝的标准曲线来定量分析样品中的蛋白质含量。

本文将介绍亚甲基蓝的标准曲线的建立方法和应用技巧。

首先，我们需要准备一定浓度的亚甲基蓝溶液作为标准溶液。

通常情况下，我们会选择一系列浓度递增的蛋白标准品，然后将其与亚甲基蓝混合，制备出一系列浓度递增的标准溶液。

接下来，我们需要利用分光光度计或比色皿对这些标准溶液进行测量，得到它们的吸光度数值。

在测量吸光度之后，我们将吸光度数值作为纵坐标，标准溶液的浓度作为横坐标，绘制出标准曲线。

通常情况下，我们会选择线性回归分析的方法来拟合标准曲线，得到一个线性方程。

通过这个线性方程，我们可以根据待测样品的吸光度值，反推出其蛋白质含量。

在实际操作中，建立亚甲基蓝的标准曲线需要注意一些技巧。

首先，我们需要确保制备标准溶液时，各个浓度的标准品都能够完全溶解，并且不受外界因素影响。

其次，我们在测量吸光度时，需要保证光程相同，避免吸光度数值的误差。

最后，在绘制标准曲线时，要选择合适的比例尺和坐标轴范围，确保曲线能够清晰地展现出标准溶液浓度与吸光度之间的关系。

亚甲基蓝的标准曲线在生化实验中有着广泛的应用。

通过建立标准曲线，我们可以准确地测定样品中蛋白质的含量，为进一步的实验分析提供重要数据支持。

因此，掌握好建立标准曲线的方法和技巧，对于进行生化实验的科研人员来说至关重要。

总之，亚甲基蓝的标准曲线是生化实验中常用的定量分析方法之一。

通过本文的介绍，相信读者对于建立标准曲线的方法和应用技巧有了更深入的理解。

在今后的实验操作中，希望大家能够灵活运用这些知识，提高实验数据的准确性和可靠性。

硫化氢——亚甲基蓝分光光度法1。

原理硫化氢倍氢氧化镉-聚乙烯醇磷酸铵溶液吸收,生成硫化镉胶状沉淀。

聚乙烯醇磷酸铵能保护硫化镉胶体,使其隔绝空气和阳光，以减少硫化物的氧化和光分解作用。

在硫酸溶液中，硫离子与对氨基二甲基苯胺溶液和三氯化铁溶液作用，生成亚甲基蓝，根据颜色深浅，用分光光度法测定。

方法检出限为0。

07μg/10ml(按与吸光度0。

01相对应的硫化氢浓度计），当采样体积为60L时,最低检出浓度为0.001mg/m3。

2.仪器①大型气泡吸收管：10ml.②具塞比色管：10ml③空气采样器：0~1L/min④分光光度计3.试剂吸收液：4.3g硫酸镉（3CdSO4·8H2O）、0。

30g氢氧化钠和10.0g聚乙烯醇磷酸铵，分别溶于少量水后，并混合，强烈振摇混合均匀，用水稀释至1000ml.此溶液为乳白色悬浮液。

在冰箱中可保存一周.三氯化铁溶液：50g三氯化铁（FeCl3·6H2O），溶解于水中，稀释至50ml。

磷酸氢二铵溶液：20g磷酸氢二铵[（NH4）2HPO4]，溶解于水，稀释至50ml。

硫代硫酸钠溶液C(Na2S2O3）=0。

1mol/L：25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O），溶于1000ml新煮沸并已冷却的水中，加0.20g无水碳酸钠，贮于棕色细口瓶中，放置一周后标定其浓度，若溶液呈现浑浊时，应该过滤。

标定方法见空气和废气监测分析方法（第四版）P171。

硫代硫酸钠标准溶液C（Na2S2O3）=0。

0100mol/L:取50.00ml标定过的0.1mol/L硫代硫酸钠溶液，置于500ml容量瓶中，用新煮沸并已冷却的水稀释至标线。

碘贮备液C(1/2 I2）=0。

10mol/L:称取12。

7g碘、40g碘化钾、25ml水溶解稀释至1000ml。

碘溶液C(1/2 I2）=0。

010mol/L：0。

5%淀粉溶液：称取0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状倒入100ml沸水中，煮沸至溶液澄清，冷却后贮于细口瓶中。

实验四溶液吸附法测定固体比表面一、实验目的1、了解溶液吸附法测定固体比表面的原理和方法。

2、用溶液吸附法测定活性炭（硅藻土、碱性层析氧化铝）的比表面。

3、掌握分光光度计工作原理及操作方法。

二、实验原理1、朗伯-比尔定律（光吸收原理）根据光吸收定律，当入射光为一定波长的单色光时，某溶液的吸光度与溶液中有色物质的浓度及溶液层的厚度成正比：A = lg（l0/I） =abc式中：A :吸光度；Io:入射光强度；I:透射光强度；a：摩尔吸收系数，与吸收物质的性质及入射光的波长入有关；b：液层厚度；c：溶液浓度。

一般来说光的吸收定律可适用于任何波长的单色光，但同一种溶液在不同波长所测得的吸光度不同，如果把吸光度A对波长入作图可得到溶液的吸收曲线，为了提高测量的灵敏度，工作波长一般选在A值最大处。

亚甲基蓝溶液在可见区有二个吸收峰：445nm和665nm，但在445nm处活性炭吸附对吸收峰有很大的干扰，固本实验选用的工作波长为665nm。

2、亚甲基蓝结构及吸附特征亚甲基蓝具有以下矩形平面结构：阳离子大小为17.0 >7.6 >3.25 X0-3O m3o亚甲基蓝的吸附有三种取向：平面吸附投影面积为135X10-20m2，侧面吸附投影面积为75X10-20m2,端基吸附投影面积为39X0-20m2。

对于非石墨型的活性炭，亚甲基蓝是以端基吸附取向，吸附在活性炭表面。

3、朗格缪尔（Langmuir）单吸附理论朗格缪尔吸附理论的基本假设是：固体表面是均匀的，吸附时单分子层吸附，吸附剂一旦被吸附质覆盖就不能再吸附，在吸附平衡时，吸附和脱附建立动态平衡；吸附平衡前，吸附速率与空白表面积成正比，解吸速率与覆盖度成正比。

水溶性染料的吸附已经应用于测定固体表面积比表面，在所有的染料中亚甲基蓝具有最大的吸附倾向。

研究表明，在一定浓度范围内，大多数固体对亚甲基蓝的吸附是单分子层吸附，符合朗格缪尔吸附理论。

但当原始溶液的浓度过高时，会出现多分子层吸附，而如果平衡浓度过低，吸附又不能达到饱和，因此原始溶液的浓度以及平衡后的浓度应选择在适当的范围。

高效液相色谱法测定养殖水体中的亚甲基蓝龙举;李子孟;喻亮;李佩佩;严忠雍;张小军【摘要】[目的]探讨一种高效液相色谱法测定水产养殖水体环境中亚甲基蓝含量的分析方法,为亚甲基蓝测定方法的建立提供参考.[方法]将水样经预处理后利用二氯甲烷萃取,经旋转蒸发仪抽真空浓缩净化后高效液相色谱-紫外检测器检测,采用外标法定量分析.[结果]亚甲基蓝在0.05～1.00 mg/L质量浓度范围内线性相关系数均大于0.999;在0.06 ～0.80 mg/L添加范围内的平均回收率为75.2％～ 86.0％,相对标准偏差均小于12.0％;方法定量限为0.05 mg/L.[结论]该方法的重现性较好,操作方便,定性准确且回收率较高,能够用于快速分析水产养殖水体环境中亚甲基蓝含量.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)024【总页数】3页(P5-6,16)【关键词】高效液相色谱;养殖水体;环境;亚甲基蓝【作者】龙举;李子孟;喻亮;李佩佩;严忠雍;张小军【作者单位】浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021【正文语种】中文【中图分类】S949亚甲基蓝(methylene blue，MB)是一种人工合成的噻嗪类染料，被广泛应用于化学指示剂、染料、生物染色剂和药物等方面［1］。

基于亚甲基蓝的氧化还原性，它作为药物使用时主要用作解毒剂，可用于亚硝酸盐、氰化物、硝基苯、乙酰苯胺等药物中毒以及氨基比啉、磺胺类等药物引起的高铁血红蛋白症。

硫化氢——亚甲基蓝分光光度法1.原理硫化氢倍氢氧化镉-聚乙烯醇磷酸铵溶液吸收，生成硫化镉胶状沉淀。

聚乙烯醇磷酸铵能保护硫化镉胶体，使其隔绝空气和阳光，以减少硫化物的氧化和光分解作用。

在硫酸溶液中，硫离子与对氨基二甲基苯胺溶液和三氯化铁溶液作用，生成亚甲基蓝，根据颜色深浅，用分光光度法测定。

方法检出限为0.07μg/10ml(按与吸光度0.01相对应的硫化氢浓度计)，当采样体积为60L 时，最低检出浓度为0.001mg/m3。

2.仪器①大型气泡吸收管：10ml。

②具塞比色管：10ml③空气采样器：0~1L/min④分光光度计3.试剂吸收液：4.3g硫酸镉（3CdSO4·8H2O）、0.30g氢氧化钠和10.0g聚乙烯醇磷酸铵，分别溶于少量水后，并混合，强烈振摇混合均匀，用水稀释至1000ml。

此溶液为乳白色悬浮液。

在冰箱中可保存一周。

三氯化铁溶液：50g三氯化铁（FeCl3·6H2O）,溶解于水中，稀释至50ml。

磷酸氢二铵溶液：20g磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4],溶解于水，稀释至50ml。

硫代硫酸钠溶液C（Na2S2O3）=0.1mol/L:25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O），溶于1000ml 新煮沸并已冷却的水中，加0.20g无水碳酸钠，贮于棕色细口瓶中，放置一周后标定其浓度，若溶液呈现浑浊时，应该过滤。

标定方法见空气和废气监测分析方法（第四版）P171。

硫代硫酸钠标准溶液C（Na2S2O3）=0.0100mol/L:取50.00ml标定过的0.1mol/L硫代硫酸钠溶液，置于500ml容量瓶中，用新煮沸并已冷却的水稀释至标线。

碘贮备液C（1/2 I2）=0.10mol/L:称取12.7g碘、40g碘化钾、25ml水溶解稀释至1000ml。

碘溶液C（1/2 I2）=0.010mol/L：0.5%淀粉溶液：称取0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状倒入100ml沸水中，煮沸至溶液澄清，冷却后贮于细口瓶中。

一、实验原理1、活性炭处理工艺是运用吸附的方法来去除异味、某些离子以及难以进行生物降解的有机污染物。

在吸附过程中，活性炭比表面积起着主要作用。

同时，被吸附物质在溶剂中的溶解度也直接影响吸附的速度。

此外，pH 的高低、温度的变化和被吸附物质的分散程度也对吸附速度有一定影响。

活性炭对水中所含杂质的吸附既有物理吸附现象，也有化学吸着作用。

有一些被吸附物质先在活性炭表面上积聚浓缩，继而进入固体晶格原子或分子之间被吸附，还有一些特殊物质则与活性炭分子结合而被吸着。

当活性炭对水中所含杂质吸附时，水中的溶解性杂质在活性炭表面积聚而被吸附，同时也有一些被吸附物质由于分子的运动而离开活性炭表面，重新进入水中即同时发生解吸现象。

当吸附和解吸处于动态平衡状态时，称为吸附平衡。

这时活性炭和水(即固相和液相)之间的溶质浓度，具有一定的分布比值。

如果在一定压力和温度条件下，用 m 克活性炭吸附溶液中的溶质，被吸附的溶质为 x 毫克，则单位重量的活性炭吸附溶质的数量qe，即吸附容量可按下式计算:q e=x/m (1) q e的大小除了决定于活性炭的品种之外，还与被吸附物质的性质、浓度、水的温度及pH 值有关。

一般说来，当被吸附的物质能够与活性炭发生结合反应、被吸附物质又不容易溶解于水而受到水的排斥作用，且活性炭对被吸附物质的亲和作用力强、被吸附物质的浓度又较大时，q e值就比较大。

描述吸附容量q e与吸附平衡时溶液浓度 C 的关系有Langmuir、BET 和 Fruendlieh 吸附等温式。

在水和污水处理常用 Fruendlich 表达式来比较不同温度和不同溶液浓度时的活性炭的吸附容量，即q e=KC1/n （2）式中：q e——吸附容量(mg/g)；K——与吸附比表面积、温度有关的系数；n——与温度有关的常数，n>1；C——吸附平衡时的溶液浓度(mg/L)。

这是一个经验公式，通常用图解方法求出 K，n 的值．为了方便易解，往往将式(2)变换成线性对数关系式Lgq e=lg(C0-C/m)=lgK+lgC/n (3)式中：C0——水中被吸附物质原始浓度(mg/L)；C——被吸附物质的平衡浓度(mg/L)；m——活性炭投加量(g/L)。

水质-硫化物的测定-亚甲基蓝分光光度法1 适用范围本标准规定了测定水中氨氮的纳氏试剂分光光度法。

本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。

2 引用标准GB/T 16489-1996《水质硫化物的测定亚甲基蓝分光光度法》3 方法原理样品经酸化，硫化物转化成硫化氢气体，通入氮将其吹出，转移到盛乙酸锌-乙酸钠溶液的吸收显色管中，与N,N-二甲基对苯二胺和硫酸亚铁反应生成蓝色的络合亚甲基蓝，在665nm波长处测定。

4 试剂和材料4.1 去离子除氧水：将蒸馏水通过离子交换柱制得去离子水，通入氮气至饱和（以200～300ml/min的速度通氮气约20min），以除去水中的溶解氧。

制得的去离子除氧水应立即盖严，并存放于玻璃瓶内。

4.2 氮气：纯度＞99.99%。

4.3 硫酸：ρ=1.84g/ml。

4.4磷酸：ρ=1.69g/ml。

4.5 N,N-二甲基对苯二胺（对氨基二甲基苯胺）溶液：称取2g N,N-二甲基对苯二胺盐酸盐溶于200ml水中，缓缓加入200ml浓硫酸，冷却后用水稀释至1000ml,入10ml沸水中，继续煮沸至溶液澄清，冷却后储存于试剂瓶中，临用现配。

4.13 碘标准溶液(0.10mol/L):准确称取6.345g碘于烧杯中，加入20g碘化钾和10ml水，搅拌至完全溶解，用水稀释至500ml，摇匀并储存于棕色瓶中。

4.14 重铬酸钾溶液c(1/6K2CrO7)=0.10mol/L:准确称取4.9030g重铬酸钾（优级纯，经110℃干燥2h）溶于水，移入1000ml容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。

4.15 硫代硫酸钠标准溶液，c（Na2S2O3）=0.1mol/L:称取24.8g硫代硫酸钠溶于水，加1g无水碳酸钠，移入1000ml棕色容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。

放置一周后标定其准确浓度。

溶液如呈现浑浊，必须过滤。

标定方法：在250ml碘量瓶中，加入1g碘化钾和50ml水，加15.00ml重铬酸钾标准溶液，震荡至完全溶解后，加5ml硫酸溶液（4.10），立即密塞摇匀。

亚甲基蓝吸光度系数介绍亚甲基蓝是一种常用的生化试剂，常用于测定DNA的浓度。

而亚甲基蓝吸光度系数是指亚甲基蓝溶液在特定波长下的吸光度与溶液中亚甲基蓝的浓度之间的关系。

本文将深入探讨亚甲基蓝吸光度系数的原理、测定方法以及在生化实验中的应用。

亚甲基蓝吸光度系数的原理亚甲基蓝是一种有机染料，它可以与DNA分子中的负电荷部分结合形成复合物，从而改变其吸光度。

亚甲基蓝在260纳米波长下吸收最强，因此常用于测定DNA的浓度。

亚甲基蓝吸光度系数是指亚甲基蓝在特定波长下单位浓度的溶液所吸收的光的强度。

通常使用分光光度计来测定亚甲基蓝溶液的吸光度，并根据已知浓度的标准品绘制标准曲线，通过比较待测样品的吸光度与标准曲线上对应浓度的吸光度，可以计算出待测样品中亚甲基蓝的浓度。

测定方法测定亚甲基蓝吸光度系数的方法主要包括以下几个步骤：步骤1：制备标准曲线1.准备一系列已知浓度的亚甲基蓝溶液，可以使用已知浓度的标准品或自行配置。

2.使用分光光度计，在260纳米波长下测定各个标准溶液的吸光度。

3.绘制吸光度与浓度之间的标准曲线，通常是以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标。

步骤2：测定待测样品的吸光度1.取待测样品，将其稀释到适当的浓度范围内。

2.使用分光光度计，在260纳米波长下测定待测样品的吸光度。

步骤3：计算待测样品中亚甲基蓝的浓度1.根据标准曲线，找到待测样品吸光度对应的浓度。

2.根据稀释倍数和取样体积，计算出待测样品中亚甲基蓝的浓度。

生化实验中的应用亚甲基蓝吸光度系数在生化实验中有广泛的应用，主要包括以下几个方面：DNA浓度测定亚甲基蓝吸光度法是一种常用的DNA浓度测定方法。

通过测定DNA样品的吸光度，并结合亚甲基蓝吸光度系数，可以计算出DNA的浓度。

这对于基因工程、分子生物学等领域的研究非常重要。

蛋白质定量亚甲基蓝吸光度法也可以用于蛋白质的定量。

蛋白质在酸性条件下与亚甲基蓝形成复合物，从而改变其吸光度。

通过测定溶液的吸光度，并结合亚甲基蓝吸光度系数，可以计算出蛋白质的浓度。

空气中硫化氢的测定亚甲基蓝分光光度法实验报告一、实验目的1.熟练掌握空气中硫化氢的采集及分析的方法步骤、数据处理。

2.理解空气中硫化氢的测定亚甲蓝分光光度法的实验原理，能够解决实际过程中遇到的相关问题。

二、实验原理空气中硫化氢被碱性氢氧化镉悬浮液吸收，形成硫化镉沉淀。

吸收液中加入聚乙烯醇磷酸铵可以减低硫化镉的光分解作用。

然后，在硫酸溶液中，硫化氢与对氨基二甲基苯胺溶液和三氯化铁溶液作用，生成亚甲基蓝，比色定量。

三、仪器设备1大气综合采样器 KC-61202电子分析天平3紫外分光光度计（ TU-1810）4 10ml具塞比色管5 10ml多空玻板吸收瓶四、药品试剂(1)吸收液：称量 4.3g 硫酸镉 (3CdSO4·8H2O)和 0.3g 氢氧化钠以及 10g 聚乙烯醇磷酸铵分别溶于水中。

临用时，将三种溶液相混合，强烈振摇至完全混匀，再用水稀释至 1L。

此溶液为白色悬浮液，每次用时要强烈振摇均匀再量取。

贮于冰箱中可保存一周。

(2) 对氨基二甲基苯胺溶液量取50ml硫酸，缓慢加入30ml水中，放冷后，称量12g 对氨基二甲基苯胺盐酸盐( 又称对氨基－N， N－二甲基苯胺二盐酸盐)〔(CH3)2NC6 H4·NH2·2HCl〕，溶于硫酸溶液中。

置于冰箱中，可保存一年。

临用时，量取 2.5ml 此溶液，用 (1 ＋ 1) 硫酸溶液稀释至 100ml。

(3)三氯化铁溶液称量 100g 三氯化铁 (FeCl36H2O)溶于水中，稀释至 100ml。

若有沉淀，需要过滤后使用。

(4)混合显色液临用时，按1ml 对氨基二甲基苯胺稀释溶液和1 滴(0.04ml) 三氯化铁溶液的比例相混合。

此混合液要现用现配，若出现有沉淀物生成，应弃之不用。

(5)磷酸氢二铵溶液称量 40g 磷酸氢二铵〔 (NH4)2HPO4〕溶于水中，并稀释至100ml。

（ 6）硫化氢标准溶液 ( 四)采样用一个内装 10ml 吸收液的普通型气泡吸收管，以0.50L/min 流量，避光采气 30L。

环境化学实验--自制包覆型纳米铁材料吸附还原亚甲基蓝自制包覆型纳米铁材料对水中亚甲基蓝的吸附还原染料已广泛应用于印染业、纺织业、医药业、塑料制品业以及化妆品业等领域，随着其应用的不断扩大，环境中残留的染料也日益增加，引起的环境污染已成为危害生态环境和影响人类健康的一个重要因素，探讨去除环境水体中染料的方法与机理已成为当今环境修复领域的研究热点之一。

亚甲基蓝是染料的一种，有大量的生产和使用量，如何经济、高效地降解废水中的亚甲基蓝，是目前研究领域中的一个热点。

由于纳米铁具有比面积大，粒径小，还原性强等特点，因此纳米铁可作为水环境修复材料，将其用于去除水体中的亚甲基蓝污染物，是近年来环境科学和技术前沿研究中的亮点。

但纳米铁系材料容易发生团聚从而失去反应活性，且在使用的过程中，存在不易回收等缺点。

近年来，有报道提出用多孔性的天然高分子材料海藻酸钙包覆纳米铁材料，且经海藻酸钙包覆后的纳米铁可以克服纳米铁颗粒不易回收的缺陷，能提高纳米铁系材料的稳定性和分散性，，该方法合成工艺简单、成本低廉、环境友好，为绿色合成纳米铁颗粒且开发其实际应用提供了理论研究基础。

包覆型纳米铁材料与污染物的反应过程主要可归纳为以下三个步骤:首先纳米铁先吸附污染物到其表面;然后电子从纳米铁传递到被吸附的污染物上;最后污染物得到电子或加氢还原，从而降低或消除污染物对环境的影响。

一、实验目的1. 了解包覆型纳米铁材料制备方法;2. 了解包覆型纳米铁材料(CA-Fe)吸附还原亚甲基蓝的反应动力学机理。

二、实验原理1. 脱色率分析亚甲基蓝脱色率按照以下方程式计算:CC,0t,100% ……………………(5-1) ,，C0t--反应时间，min;η--亚甲基蓝脱色率，%;C--溶液中亚甲基蓝的初始浓度，mg/L; 0C--反应t min时亚甲基蓝的浓度，mg/L。

t2. 反应动力学分析环境化学实验由于包覆型纳米铁材料与水中亚甲基蓝的反应属于非均相反应，反应过程可用方程式(5-2)-(5-3)来描述:dC ………………(5-2) vkC,,,dt积分得:Cln(),,ktC0 ……………………(5-3)式中:t--反应时间，min;C--t时刻溶液中溶质的浓度，mg/L;C--溶液中溶质的初始浓度，mg/L; 0k--还原反应的准一级速率常数。