肉制品中亚硝酸盐标准曲线

实验二肉制品中亚硝酸盐含量的测定——格里斯试剂比色法一、实验目的掌握肉制品中亚硝酸盐含量的测定方法和卫生评定。

二、实验原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮化合物后，再与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色燃料。

其颜色深浅与亚硝酸含量成正比，与标准比较定量。

三、器材与试剂1器材：分光光度计、小型粉碎机；天平，PH仪（或碱性PH试纸），水浴锅，温度计，200ml 容量瓶（20个），滤纸（30~40片），三角漏斗（20左右），200ml烧杯（20个），30个25ml 带塞离心管，1ml吸管若干，暗室。

双汇鸡肉肠，玉米肠，火腿肠60g各三根，午餐肉罐头一盒，熏火腿一根2试剂：（1）氯化铵缓冲液：1L容量瓶中加入水500ml水，准确加入20ml盐酸，振荡混匀，准确加入50ml氢氧化铵，用水稀释至刻度。

必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6-9.7。

（2）0.42mol/L硫酸锌溶液：称取120g硫酸锌【ZnSO4.7H2O】，用水溶解，并稀释至1000mL。

（3）20g/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1L。

（4）对氨基苯磺酸溶液：称取10g对氨基苯磺酸，溶于700ml水和300ml冰乙酸中，至棕色瓶中混匀，室温保存。

（5）1g/L N-1-萘基乙二胺溶液：称取0.1gN-1-萘基乙二胺，加60%乙酸溶液并稀释至100ml，混匀后，至棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。

（6）显色剂：临用前（4）（5）等体积混合。

（7）亚硝酸钠标准贮存液：准确称取于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠（NaNO2）0.2500g，用水溶解移入500ml容量瓶中，加100ml氯化铵缓冲液，加水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存，此溶液每毫升相当于500μg亚硝酸钠。

（8）亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液1.0ml，置于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度。

食品中亚硝酸钠含量的测定-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1食品中亚硝酸盐含量的测定专业：xxxx班级：xxx姓名：xxx学号：2010037102时间：2013/7/5指导教师：xxx摘要：亚硝酸盐是一种毒性很强的物质，一般情况下，当人体一次性摄取300-500 mg亚硝酸盐时就会引起中毒，称为亚硝酸盐中毒或紫绀症、肠原性青紫病等。

亚硝酸盐能使血液血红蛋白中的亚铁离子氧化成高铁离子，从而使其失去结合氧的能力，阻碍体内氧的运输，使人体发生急性中毒，严重时引起生命危险。

亚硝酸盐可导致维生素A的氧化破坏并阻碍胡萝卜素转化为维生素A，致使人体维生素A不足。

同时进入肠胃中的亚硝酸盐遇到胺极易转化成致癌物质亚硝胺，从已经进行的实验已证实亚硝胺具有强烈的致癌性。

由于亚硝酸盐的毒性严重危害健康，而亚硝酸盐广泛存在于自然环境中，特别是食物中。

粮食、豆类、蔬菜、肉类、蛋类等都可以测出一定量的亚硝酸盐，比如蔬菜中约有 4 mg/kg，肉类中约有3 mg/kg，蛋类中约有5 mg/kg。

在我国居民的膳食结构中咸菜是不可缺少的，在农村尤为突出。

而咸菜中一般都会含有亚硝酸盐，所以检测咸菜中亚硝酸盐的含量势在必行。

本次试验，我们小组测定了10种不同的咸菜中亚硝酸盐的含量，目的在于通过比较不同品牌的亚硝酸盐的含量来了解目前咸菜行业的亚硝酸实际加入量，给广大消费者一个购买的导向。

关键词：亚硝酸盐；咸菜、肉脯、泡椒鸡爪、香肠；分光光度法目的：1.熟悉食品中亚硝酸盐的卫生标准。

2.掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法。

3.为了探究市场中销售的一些咸菜类、香肠类以及肉脯泡椒鸡爪等中的亚硝酸盐含量，探究其含量是否符合要求。

仪器与试剂：紫外分光光度计、电子分析天平、水浴锅、研钵；亚铁氰化钾溶液、乙酸锌溶液、饱和硼砂溶液、对氨基苯磺酸溶液、盐酸萘乙二胺溶液、亚硝酸钠标准贮备液测定方法：1.样品制备：称取5g左右的试样置于研钵中，研磨充分，加12.5ml硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约150ml将试样洗入250ml容量瓶中，于沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温，然后一面转动，一面加入5ml亚铁氰化钾，摇匀，再加入0.5ml 乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

分光光度法测食品中亚硝酸盐含量中标准曲线的制作及影响因素摘要：标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线，是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。

在分光光度法测食品中亚硝酸盐含量分析中，被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系，试样测定的结果可以从标准曲线上查出。

因此标准曲线制作的好坏，将会影响测定结果的准确度。

关键词：分光光度法食品亚硝酸盐制作标准曲线影响因素标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线，是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。

在用分光光度法分析食品中亚硝酸盐含量时，被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系，试样测定的结果可以从标准曲线上查出。

因此标准曲线制作的好坏，将会影响测定结果的准确度。

1、标准曲线的表达式标准曲线应是一条通过原点的直线，如果坐标上各浓度点基本在一条直线上可不进行回归处理，但在实验中不可避免地存在测定误差，往往会有一、二点偏离直线，此时可用最小二乘法进行回归分析，然后绘制曲线，通常称为回归直线，而代表回归直线方程叫回归方程，表达式为：y=bx+a(式中：b为直线斜率，a为Y轴上的截距，x为被测溶液的浓度，y为吸光度，是多次测定结果的平均值)。

在实际工作中，制作亚硝酸盐标准曲线的目的，是要借助它来查出试样中亚硝酸盐的浓度，而不是由x值通过回归方程去求得最可靠的y值，为了便于将观察到仪器响应信号值代人回归方程中直接计算试样的浓度或含量，勿需去绘制标准曲线再从曲线上查出被测物的浓度，改用下式计算：x=by+a(式中：a为X轴线上的截距，其它解释同前)。

2、标准曲线的参数标准曲线有3个参数，即相关系数r，斜率b和截距a。

(1)相关系数(r)：相关系数是表示变量x与y之间的线性关系的密切程度。

如果r=1则所有点都落在一条直线上。

y与x完全呈现线性关系，但在分析中总存在随机误差，所以，一般r≥0．999即可。

分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量的分析目的：探讨肉制品中亚硝酸盐的测试方法。

方法：采用分光光度法，对肉制品中亚硝酸盐进行测试。

结果：检出限其检测限为 3.68x10-3g/ml。

结论：测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一，分光光度法是其测定的行之有效的方法。

标签：分光光度法；亚硝酸盐；肉制品；分析亚硝酸盐(N023作为食品防腐剂和发色剂，能改善食品的色泽和口感，有发色、防腐双重功效，是国家列入允许使用的食品添加剂之一。

但亚硝酸盐能与胺类化合物作用生成致癌性很强的N-亚硝基化合物，长期摄入可导致消化道癌症，影响人体健康。

还可使血红蛋白变性，使其失去携氧功能。

尽管亚硝酸盐对人体不利，但目前无更好的物质所替代，所以仍在使用。

作为防范亚硝酸盐危害，向消费者提供安全食品的最后屏障，测定亚硝酸根含量是肉制食品中重要的分析项目之一。

目前关于亚硝酸盐测量较好的方法有导数紫外光度法，离子色谱紫外光度法，气体分子吸收光度法等。

利用重氮化反应测定NO，由于测定时多使用如Ot-萘胺和N-(1一萘基)乙二胺等毒性很大的试剂，且线性范围窄(0-0.2 mg／L)，所用试剂较复杂，不宜用于肉制品的测定；氧化还原光度法也因干扰因素较多不常被使用。

为此，尝试探索一种既不会对测定人员身体造成伤害，又保证较高灵敏度且适用于此样品的简易快速测定的方法，十分必要。

本法采用分光光度法来测定肉制品中亚硝酸盐含量，收到良好效果，现将结果报道如下：1材料与方法1.1材料试验仪器为WFZ800-D分光光度计，分析天平、组织捣碎机。

试验药剂为亚硝酸钠标准溶液(0.5g／L)、依文思蓝但vansBlue，Fluka试剂，进口分装)溶液0.1 mol／L、磷酸1.0mol／L、氯化钠溶液l mol／L、蒸馏水(二蒸液)。

试验药品均为分析纯。

1.2方法1.2.1样品制备①亚硝酸钠标准溶液(0.5g/L)：准确称取亚硝酸钠粉末0500 0 g于烧杯中，加少量水溶解后，转入1000 ml容量瓶中，用水稀释至刻度定容，瓶身用黑纸包裹。

亚硝酸盐标准曲线亚硝酸盐是一种重要的化学物质，在环境监测和食品安全检测中具有重要的意义。

建立亚硝酸盐的标准曲线是进行亚硝酸盐含量测定的重要步骤，下面将介绍亚硝酸盐标准曲线的建立方法及其意义。

首先，准备一定浓度的亚硝酸盐标准溶液，可以通过称取一定质量的亚硝酸钠固体，溶解于一定体积的水中来制备。

然后，分别取一系列不同浓度的亚硝酸盐标准溶液，用分光光度计或其他适用的仪器进行测定，得到吸光度与浓度的对应关系。

接着，利用所得数据绘制标准曲线，通常采用线性回归分析得到吸光度与浓度的线性关系方程，从而建立亚硝酸盐的标准曲线。

亚硝酸盐标准曲线的建立具有重要的意义。

一方面，它可以用于实际样品中亚硝酸盐含量的测定。

在实际分析中，将待测样品的吸光度测定值代入标准曲线方程中，通过测定值与标准曲线的对应关系，计算出样品中亚硝酸盐的含量。

另一方面，标准曲线还可以用于评价分析方法的准确性和灵敏度。

通过比较实际样品的测定值与标准曲线的预测值，可以评价分析方法的准确性和灵敏度，为分析结果的可靠性提供保障。

在建立亚硝酸盐标准曲线时，需要注意一些关键问题。

首先，选择合适的浓度范围。

标准曲线的浓度范围应覆盖实际样品中亚硝酸盐含量的预期范围，以确保测定结果的准确性。

其次，应重复测定每个浓度点，以确定吸光度与浓度的准确对应关系。

最后，应选择合适的拟合方法，通常采用线性拟合，但在一些情况下可能需要采用非线性拟合或其他拟合方法。

总之，亚硝酸盐标准曲线的建立是进行亚硝酸盐含量测定的关键步骤，具有重要的意义。

建立合适的标准曲线，不仅可以用于实际样品中亚硝酸盐含量的测定，还可以评价分析方法的准确性和灵敏度，为环境监测和食品安全检测提供可靠的数据支持。

因此，在进行亚硝酸盐含量测定时，务必严格按照标准曲线的建立方法进行操作，以确保分析结果的准确性和可靠性。

亚硝酸盐标准曲线亚硝酸盐是一种重要的化学物质，在环境监测和食品安全等领域具有广泛的应用。

而建立亚硝酸盐的标准曲线，则是进行定量分析的重要步骤之一。

本文将介绍亚硝酸盐标准曲线的建立方法及其在实验中的应用。

首先，建立亚硝酸盐标准曲线需要准备一系列不同浓度的亚硝酸盐标准溶液。

可以通过逐步稀释已知浓度的亚硝酸盐溶液来得到一系列浓度不同的标准溶液。

在实验中，可以选择常用的浓度梯度，如0.1 mg/L、0.5 mg/L、1 mg/L、5 mg/L等，以覆盖常见的亚硝酸盐浓度范围。

其次，使用已经准备好的标准溶液进行实验。

通常可以选择 Griess 试剂法来测定亚硝酸盐的浓度。

在实验中，将标准溶液与 Griess 试剂按照一定比例混合，经过一定时间的反应后，测定产生的偶氮化合物的吸光度。

通过测定吸光度与标准溶液浓度的关系，就可以得到亚硝酸盐的标准曲线。

得到标准曲线后，就可以利用这条曲线来测定未知样品中亚硝酸盐的浓度。

将未知样品处理成与标准溶液类似的条件，进行Griess 试剂法实验，测定其吸光度，然后通过标准曲线反推出未知样品中亚硝酸盐的浓度。

这种方法简单、快速、准确，是常用的亚硝酸盐测定方法之一。

在实际应用中，亚硝酸盐标准曲线可以用于环境水样、食品样品等中亚硝酸盐的测定。

例如，在环境监测中，可以通过建立标准曲线来监测水体中亚硝酸盐的浓度，从而评估水质的安全性。

在食品安全领域，也可以利用标准曲线来测定食品中亚硝酸盐残留的情况，保障食品的质量和安全。

总之，亚硝酸盐标准曲线的建立是亚硝酸盐定量分析的重要步骤，通过合理的实验设计和准确的数据处理，可以得到可靠的标准曲线，为实验和应用提供可靠的数据支持。

希望本文的介绍能够对亚硝酸盐分析感兴趣的读者有所帮助，谢谢阅读！。

2011-2012仪器分析综合设计性实验报告熏肉制品中亚硝酸盐的含量测定熏肉制品中亚硝酸盐的含量测定【摘要】亚硝酸和硝酸的钠盐和钾盐常被加入用于腌肉的混合物中，用来产生和保持色泽、抑制微生物和产生特殊的风味。

此外，亚硝酸盐（150-200mg/kg）可抑制罐装碎肉和腌肉中的梭状芽孢杆菌。

本实验就是利用紫外分光光度法对熏肉制品中的亚硝酸盐进行定量测定。

本实验法对亚硝酸盐有很好的选择性，测量的灵敏度高。

【关键词】紫外分光光度法，熏肉制品，亚硝酸盐含量【引言】分光光度法同时测定多组分体系具有不需进行化学分离和引入过多试剂以及操作简便等优点而日益受到关注，用各种化学计量学方法和借助导数输出等方式解析重叠光谱是目前发展最快的领域之一。

用光度法测定肉制品中硝酸根及亚硝酸根，文献报道的有：紫外检测－离子色谱法、标准加入—偏最小二乘导数分光光度法、一阶导数分光光度法、比光谱导数法等。

【实验部分】一、方法原理：（α-萘胺法）自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与α-萘胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。

其颜色的深度与样液中亚硝酸含量成正比，可比色测定。

反应式如下：N H 2SO 3HN+N SO 3HNO 2-H +OH 2+++NSO 3HNNH 2N+NSO 3H+NH 2肉制品中亚硝酸盐含量==50150020100010001⨯⨯⨯⨯m X （mg/kg ）式中：X 为由测得的吸光度什在标准曲线上对应的亚硝酸钠质量浓度（μg/mL ）；m 为样品质量（g ）。

也就是样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，用分光光度计测量含量。

二、主要试剂及仪器（1） 亚铁氰化钾溶液：称取10.6克亚铁氰化钾[K 4Fe(CN)6·3H 2O]溶于水，并稀释至100mL 。

（2） 乙酸锌溶液：称取22.0克乙酸锌[Zn(CH 3COO)2·2H 2O]，加3mL 冰醋酸溶于水，并稀释至100mL 。

实验八肉制品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定一、亚硝酸盐测定（一）原理 : 样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下与对氨基苯磺酸重氮化以后，再与 N-1- 萘基乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。

（二）试剂1. 氯化铵缓冲液：在 1L 玻璃烧杯中，加入 500ml 水，准确加入 20ml 盐酸，混匀，准确加入 50ml 氨水，必要时用稀盐酸和稀氨水调试至 pH9.6-9.7 。

2. 硫酸锌溶液（ 0.42mol/L ）：称取 120g 硫酸锌用水溶解，并稀释至 1000ml 。

3. 氢氧化钠溶液（ 20g/L ） : 称取 20g 氢氧化钠用水溶解，稀释至 1000ml 。

4. 对氨基苯磺酸溶液：称取 1g 对氨基苯磺酸，溶于 70ml 水和 30ml 醋酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。

5. N-1- 萘基乙二胺溶液：称取 0.1gN-1- 萘基乙二胺，加 60% 醋酸溶解，并稀释至100ml ，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。

6. 显色剂：临用前将 N-1- 萘基乙二胺和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。

7. 亚硝酸钠标准溶液：准确称取 0.2500g 于硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠，加水溶解移入 500ml 容量瓶中，加 100ml 氯化铵缓冲液，加水稀释至刻度，混匀，在 4 ℃避光保存，此溶液每亳升相当于 500ug 的亚硝酸钠，作准备液。

8. 亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液 1.0ml 置于 100ml 容量瓶中，加水稀至刻度，此溶液每毫升相当于 5.0ug 亚硝酸钠。

（三）仪器：小型绞肉机，匀浆器，分光光度计。

（四）操作方法1. 样品处理：称取约 10.0g （粮食取 5g ）经绞碎混匀的样品，置于匀浆器中，加 70ml 水和 12ml 的氢氧化钠溶液，混匀，用氢氧化钠溶液调样品 pH=8 ，定量转移至 250ml 容量瓶中，加 10ml 硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加 2-5ml 氢氧化钠，混匀，置 60 ℃水浴中加热 10min ，取出后冷至室温，加水至刻度，混匀。