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健脾益肾方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子β1mRNA表达的影响摘要】目的研究健脾益肾方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织中TGF-β1mRNA表达的影响。
方法将大鼠随机分为4组，正常组、假手术组、模型组和健脾益肾方治疗组。
术后第14天处死大鼠，取梗阻侧肾组织行RT-PCR 检测。
结果各组肾组织均有TGF﹣β1mRNA表达，模型组大鼠表达较正常组及假手术组显著增加(P<0.01)，治疗组表达较正常组及假手术组增加，但差异无显著性(P>0.05)，治疗组表达较模型组明显减少(P<0.01)。
结论健脾益肾方可能通过抑制大鼠肾组织TGF﹣β1mRNA的表达，延缓肾纤维化的进展，达到保护肾功能的目的。
【关键词】慢性肾衰竭肾纤维化 TGF﹣β1 健脾益肾方【中图分类号】R289 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）21-0020-02梗阻性肾病(Obstructive nephropathy)是由于泌尿道结构和/或功能改变，阻碍了尿液的排出，最终导致肾功能衰竭的一种疾病[1]。
泌尿系结石是我国南方地区常见、多发疾病，不少患者因为结石导致尿路梗阻时间过长，最终引起梗阻性肾病。
手术治疗虽是解除梗阻的首选方法，但部分患者因种种原因不能及时手术治疗或术后肾脏间质继续纤维变性导致肾萎缩，最终导致慢性肾功能衰竭（CRF）。
健脾益肾方是我院李顺民教授根据多年临床治疗慢性肾功能衰竭总结的经验方，根据已完成的动物实验和临床观察表明，健脾益肾方能改善肾功能和脂质代谢，延缓肾纤维化的形成，从而延缓CRF病进程[2-6]。
因此，基于前期的研究，我们进一步探讨健脾益肾方治疗梗阻性肾病的机制，为临床泌尿结石围手术期运用保护肾功能提供依据。
1 材料与方法1.1 实验动物及分组清洁级Wistar雄性大鼠24只（体重180～220g，购自广东省医学实验动物中心），适应性喂养1周，随机分为4组：Ⅰ组对照组，Ⅱ组假手术组，Ⅲ组模型组，Ⅳ组健脾益肾方组，各6只，供给清洁大鼠饲料，自由饮水、进食，保持笼内清洁。
益肾通络方对多囊卵巢综合征大鼠IRS-2蛋白表达及IL-18、IL-10水平的影响吴线玲【期刊名称】《山东中医药大学学报》【年(卷),期】2015(0)1【摘要】目的:观察益肾通络方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠黄素化颗粒细胞IRS-2蛋白表达及IL-18、IL-10水平的影响。
方法:将30只雌性SPF大鼠随机分为3组,即正常组、PCOS模型组、中药组,每组10只,建立PCOS大鼠模型。
模型组及正常组灌服生理盐水,中药组灌服益肾通络方,造模后3组大鼠均取出卵巢,进行心脏采血,通过免疫印迹法检测大鼠卵巢黄素化颗粒细胞IRS-2的蛋白表达,酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清IL-18、IL-10水平的变化。
结果:PCOS组的IRS-2蛋白表达增强,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);中药组的IRS-2蛋白表达较PCOS组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。
PCOS组的IL-18水平升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);中药组IL-18水平显著下降,与PCOS组比较差异有统计学意义(P<0.01)。
PCOS组的IL-10水平降低,与正常组比较有统计学意义(P<0.05);中药组的IL-10水平上升,与PCOS组比较有统计学意义(P<0.05)。
结论:益肾通络方可以调节PCOS大鼠黄素化颗粒细胞IRS-2蛋白表达。
PCOS大鼠黄素化颗粒细胞IRS-2参与PCOS的发病,但是产生这种变化的原因尚不清楚。
同时亦证明了益肾通络方对PCOS的发病可能起到双向调节作用。
【总页数】3页(P76-78)【关键词】益肾通络方;多囊卵巢综合征;IRS-2;IL-18;IL-10;IRS-2;IL-18、IL-10【作者】吴线玲【作者单位】浙江省龙泉市人民医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织中乙酰肝素酶、转化生长因子β1表达的影响[J], 张倩;范华平;张秀侠;白中山;秦聪;杨晨;檀金川2.益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织Nephrin、Podocin mRNA表达的影响 [J], 靳晓华;任美芳;郭晓玲;康丽霞;司钰媚;杨凤文;袁国栋;崔领秀;檀金川3.通络益肾方对单侧输尿管结扎大鼠肾纤维化及肾上腺髓质素表达的影响 [J], 李冰;韩琳;韩佳丽;高誉珊;沈一凡;秦建国4.益肾通络方对雄性苯并(a)芘染毒大鼠DFI、XRCC1、OGG1蛋白表达的影响 [J], 王祖龙;张宸铭;孙自学;马中华;赵文;马慧杰;王诗琦5.益肾通络方对精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡、caspase-3蛋白表达的影响[J], 王祖龙;赵盼盼;孙自学;王诗琦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
补肾健脾方对去卵巢大鼠骨质疏松症细胞因子水平的影响王明乐【摘要】目的:通过复制去卵巢大鼠所致的骨质疏松模型,研究补肾健脾方对去卵巢大鼠骨质疏松症细胞因子水平的影响.方法:选取6月龄雌性SD大鼠60只,按体质量随机分为4组,即假手术组、去卵巢组、阳性对照组及补肾健脾方组,每组15只.除假手术组外,其余各组按文献方法切除大鼠双侧卵巢,造成雌激素缺乏而致的实验性骨质疏松症,假手术组手术过程与卵巢切除组相同,但不切除卵巢而只切除小块脂肪组织.术后1周开始灌胃给药,灌胃12周后所有大鼠股动脉取血,收集血清,采用ELISA法检测血清IL-6、IL-4、TNF-a、IGF-1水平.结果:去卵巢组大鼠IL-6和TNF-a水平升高,IL-4和IGF-1水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与去卵巢组比较,补肾健脾方组能降低IL-6和TNF-a水平,提高IL-4和IGF-1水平,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:补肾健脾方通过降低IL-6和TNF-a水平,提高IL-4和IGF-1水平,防治去卵巢所致大鼠的骨质疏松.%To study the effect of Bu Shen Jian Pi decoction on cytokine through the osteoporosis models of therats.Methods:Sixty 6-month-old female Sprague-Dawley rats were used and divided into following groups by body weight randomly:sham control group,ovx control group,ovx with nylestriol,ovx with Bu Shen Jian Pi decoction.Bilateral ovariectomies were conducted under pentobarbital anesthesia on the OVX,Bu Shen Jian Pi decoction and NE groups.A sham operation,during which the ovaries were touched with forceps,was performed on the sham group.The treatment began 1 week after the surgery and lasted for 12 weeks.12 weeks later,serum was separated.The level of IL-6,IL-4,TNF-a and IGF-1 were measured via the method ofELISA.Results:Ovx control group showed the lower level of IL-4 and IGF-1,IL-6 and TNF-a increased levels,there was a significant difference (P ＜0.05).Nylestriol and Bu Shen Jian Pi decoction groups reduced IL-6 and TNF-a,increased IL-4 and IGF-1,compared with ovx control group have significant difference (P ＜ 0.05).Conclusion:Bu Shen Jian Pi decoction is effective for treating osteoporosis of ovariectomized rats.It can lower IL-6 and TNF-a levels and raise IL-4 and IGF-1 levels.【期刊名称】《中国中医基础医学杂志》【年(卷),期】2013(019)007【总页数】3页(P761-762,766)【关键词】补肾健脾方;去卵巢;骨质疏松症;细胞因子【作者】王明乐【作者单位】河南科技大学第一附属医院,洛阳 471003【正文语种】中文【中图分类】R285.5骨质疏松症(ostoeporosis，简称OP)是以骨量减少、骨组织微细结构退行性改变为特征，骨脆性增加，易发生骨折的一种全身代谢性骨病。
益肾Ⅰ方对多囊卵巢综合征-代谢综合征大鼠拮抗胰岛素抵抗抑制氧化应激及调血脂作用冯瑞儿;潘竞锵;刘广南;邝少松;黄小琼;饶子亮【期刊名称】《中国药物与临床》【年(卷),期】2009(009)011【摘要】目的观察益肾Ⅰ方对多囊卵巢综合征-代谢综合征(PCOS-MetS)大鼠胰岛素抵抗(IR)、血脂异常及氧化应激-自由基损伤的作用.方法采用十一酸睾酮加绒毛膜促性腺激素(nCG)建立PCOS-MetS大鼠模型,连续口服给予二甲双胍或不同剂量的益.肾Ⅰ方4周,观察大鼠体质量、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、睾酮(T)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FBG)和口服葡萄糖后2 h血糖(OGTT-2hBG)和胰岛素含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-一氧化氮合酶(NOS)活性,并计算胰岛素敏感指数(ISI)的变化.结果 PCOS-MetS大鼠体质量明显增加,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);血清TNF-α、T、MDA、NO、TG、TC、LDL-C、FBG、OGTT-2hBG和胰岛素水平以及iNOS-NOS活性,均明显升高,而HDL-C含量、SOD活性和ISI则显著降低,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);二甲双胍和益肾Ⅰ方高和中2个剂量均能不同程度地改善PCOS-MetS大鼠体质量增加、高雄激素血症、高血糖血症、高脂血症、高胰岛素血症和IR等病理生理改变(P<0.01或P<0.05),以及增强抗氧化酶SOD活性,抑制NOS和iNOS活性,降低MDA和NO水平(P<0.01或P<0.05).结论益肾Ⅰ方能改善PCOS-MetS大鼠胰岛素敏感性,对抗高雄激素血症和脂质代谢异常以及氧化应激-自由基损伤,并提高抗氧化能力.【总页数】5页(P1047-1051)【作者】冯瑞儿;潘竞锵;刘广南;邝少松;黄小琼;饶子亮【作者单位】510260,广州医学院第二附属医院高级医疗服务中心;510260,广州市中医中药研究所药理研究室;510260,广州市中医中药研究所药理研究室;510260,广东省医学实验动物中心实验科;510260,广东省医学实验动物中心实验科;510260,广东省医学实验动物中心实验科【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.益肾Ⅰ方及其拆方对PCOS大鼠调节性激素及抑制氧化应激作用的比较研究 [J], 郑琳颖;刘广南;潘竞锵;邝少松;黄小琼;饶子亮2.益肾I方对PCOS大鼠胰岛素抵抗及氧化应激抑制作用 [J], 刘广南;潘竞锵;邝少松;黄小琼;饶子亮3.益肾I方对PCOS大鼠胰岛素抵抗及氧化应激抑制作用 [J], 刘广南;潘竞锵;邝少松;黄小琼;饶子亮4.益肾祛浊方对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗模型大鼠激素受体表达的干预作用 [J], 尹谦; 王明星; 许昕5.溴隐停、罗格列酮和二甲双胍对改善多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗和下调促炎细胞因子及调血脂作用研究 [J], 林佳;刘广南;潘竞锵;邝少松;黄小琼;饶子亮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
补肾健脾方对肾病综合征模型大鼠性腺功能及病理结构的影响王静;王娟【摘要】目的：探讨补肾健脾方对肾病大鼠性激素和性腺功能及病理结构的影响。
方法采用盐酸阿霉素大鼠尾静脉注射建立实验性肾病综合征大鼠，分别观察环磷酰胺（CTX）单用及与补肾健脾方联合使用对肾病大鼠性激素的影响，观察肾组织和睾丸切片病理学改变。
结果补肾健脾方和 CTX 联合使用与单独使用 CTX 相比，二者联合使用可使大鼠的血清睾酮（Ts）含量明显高于 CTX 致性腺损伤大鼠的 Ts含量，同时具有降低卵泡刺激素（FSH），促黄体生成素（LH）含量，两组比较差异均有统计学意义（p ＜0.05），调节性激素水平趋向正常。
且二者联合使用组大鼠睾丸组织切片无明显病理学变化。
结论补肾健脾方可保护和促进生殖机能，并可能通过促进下丘脑—垂体—性腺轴的组织形态学改变和调节其内分泌、以及清除自由基，发挥对抗或减轻 CTX 的性腺毒性的作用。
%Objective:To explorethe effective mechanism of kidney - spleen reinforcing formula(Bu Shen Jian Pi Fang)on the sexual glands and hormones as well as related pathological structures of rats with nephrotic syndrome.Methods:Experimental rats with nephrotic syndrome were created by tail vein injection of Doxorubicin hydrochloride. The effects on the sexual hormones of these rats exerted by single application of Cyclophosphamide(CTX)and combined application of CTX and kidney - spleen reinforcing formula were observed respective-ly. Pathological changes of the kidney tissue slice and testicle slice were observed. Results:Compared to the group treated by using CTX a-lone,the group treated by the combined therapy had obviously higher level of serumtestosterone(Ts). In addition,the combined therapy was able to bring down follicle - stimulating hormone(FSH)and LH. The two groups had significant differences(P < 0. 05)in all the a-bove indexes. Both of the two groups were able to regulate the sexual hormone level to normal and there was no significant pathological change of the testicle tissue slice. Conclusions:Kidney - spleen reinforcing formula can protect and promote the reproductive function and relieve or counteract the CTX toxicity on sexual glands by regulating endocrines and obliterating free radicals possibly through the histomor-phological changes of hypothalamus - pituitary - gonad axis.【期刊名称】《泰山医学院学报》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P384-387)【关键词】肾病综合征;补肾健脾中药;环磷酰胺;性腺;大鼠【作者】王静;王娟【作者单位】青岛市海慈医疗集团青岛市中医医院儿一科，山东青岛 266033;青岛市海慈医疗集团检验科，山东青岛 266033【正文语种】中文【中图分类】R692肾病综合征(Nephrotic Syndrome，NS)是由多种病因和多种病理类型引起肾小球疾病中的一组临床综合征，典型临床表现为大量蛋白尿(每日≥3.0～3.5 g)、低蛋白血症(血浆白蛋白<30 g/l)、高脂血症和水肿。
补肾活血方对多囊卵巢综合征伴不孕症患者卵巢颗粒细胞IGF-IRmRNA的影响摘要：目的观察补肾活血方治疗组和对照组的多囊卵巢综合征伴不孕症患者卵巢颗粒细胞中IGF-IRmRNA表达差异，探讨补肾活血方改善卵巢内分泌功能可能的分子机制。
方法参照相关筛查方法选择某医院临床确诊的多囊卵巢综合征伴不孕症患者64人，依据年龄和性别配对分为实验和对照两组，分别予补肾活血方和炔雌醇环丙孕酮片（达英-35）治疗一段时间，取卵日收集空腹静脉血和患者的卵泡液及卵丘颗粒细胞，检验其血清及卵泡液中IGF-I的水平，并进行比较。
结果比较，两组对象血清中IGF-I含量差异不明显，而IGFBP-I含量差异明显；实验组小卵泡IGF-I和IGFBP-I含量差异均有统计学意义（P<0.05）结论.补肾活血方能提高颗粒细胞IGF-1RmRNA的表达，改善颗粒细胞分泌功能，促进卵母细胞成熟，提高卵细胞质量，进而提高胚胎质量及临床妊娠率。
这可能是补肾中药改善PCOS 不孕患者结局的分子机制之一。
关键词：补肾活血方；多囊卵巢综合征伴不孕症；IGF-1RmRNAPCOS性不孕卵泡发育异常病本在卵巢，以卵泡发育时空异常为显著标志。
胰岛素样生长因子（IGF）系统属于卵巢生长因子系统之一，与PCOS的花生发展模切相关。
实验认为，肾虚血瘀痰浊是PCOS的基本病机[1]，其治疗的重点在卵泡期[2-5]。
研究人员发现，卵泡液中IGF-I对颗粒细胞IGF-IR mRNA的表达有促进作用，因此血清中IGF-I水平/获卵数可能对非PCOS患者卵母细胞成熟有预测作用【5】。
本研究通过补肾活血法对多囊卵巢综合征伴不孕症患者卵巢颗粒细胞IGF-IRmRNA的表达，来进一步探究补肾活血法对PCOS不孕症的治疗机制，为相关研究积累原始资料。
1 对象与方法1.1 研究对象选择长沙市某三甲医院临床确诊多囊卵巢综合症伴不孕的患者64人1.2 调查方法1.2.1 分组和处理将64名对象按照年龄和性别配对，均分到实验和对照两组，对照组给予炔雌醇环丙孕酮片（达英-35），实验组给予补肾活血方治疗。
第39卷第2期第165页2010年4月 华中科技大学学报(医学版)Acta Med Univ Sci Technol Huazhong Vol.39 No.2 P.165Apr. 20103国家自然科学基金资助项目(No 130600838)谢 阳,女,1982年生,医学硕士,E 2mail :xieyang 1xy @gmail 1com △通讯作者,Corresponding author ,E 2mail :hdm6221@yahoo 1com 1cn补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠IRS 21表达的影响3谢 阳 黄冬梅△ 李 琼 陆付耳 徐丽君邹 欣 龚 菂 邬 姗华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉 430030摘要 目的 观察补肾通脉方对伴胰岛素抵抗(insulin resistance ,IR )多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syn 2drome ,PCOS )大鼠胰岛素靶器官中胰岛素受体底物21(insulin receptor substrate 21,IRS 21)表达的影响,探讨补肾通脉方改善伴IR 的PCOS 的机制。
方法 23日龄雌性SD 大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9mg/(100g ・d )共20d ,联合高脂饮食喂养80d 建立IR 的PCOS 大鼠模型。
成模大鼠随机分为模型组(27只)和中药组(23只),另设13只正常组。
中药组以补肾通脉方干预。
各组大鼠动情后期于门静脉推注胰岛素前后各处死一部分。
逆转录聚合酶链式反应(R T 2PCR )检测各组大鼠肝脏、脂肪组织IRS 21mRNA 表达,免疫印迹法(Western blot )检测各组大鼠肝脏、脂肪组织中IRS 21蛋白表达,免疫组化检测卵巢组织IRS 21蛋白表达。
结果 模型组IRS 21在肝脏、脂肪组织中mRNA 及蛋白表达,以及卵巢中蛋白表达,均明显低于正常组(均P <0105),中药组均显著高于模型组(均P <0105)。
益肾健脾养血通利方对多囊卵巢综合征大鼠模型胰岛素样生长因子-1 mRNA表达的影响【摘要】目的观察益肾健脾养血通利方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型胰岛素样生长因子-1(IGF-1) mRNA表达的影响,从而在分子水平初步探讨该方治疗PCOS的可能机制。
方法 SD雌性大鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、克罗米芬组及中药小、中、大剂量组,除正常对照组外,其余各组皮下埋植左旋炔诺孕酮硅胶棒,建立PCOS大鼠模型,应用原位杂交法观察IGF-1 mRNA在大鼠多囊卵巢中的表达。
结果模型组IGF-1 mRNA表达明显高于对照组,图像半定量分析显示中药治疗组均能减少IGF-1 mRNA的表达。
结论益肾健脾养血通利方具有降低大鼠多囊卵巢中IGF-1 mRNA的表达,改善胰岛素抵抗状况的作用。
【关键词】多囊卵巢综合征；益肾健脾养血通利方；胰岛素样生长因子-1；动物模型Abstract：Objective To investigate the effects of Yishen Jianpi Yangxue Tongli Fang (YSJP) on IGF-1 mRNA expression in the ovary of PCOS rat, and study its mechanism on the molecular level. Methods Seventy two female SD rats were randomly divided into normal control group, model group, clomifene group andlow-, mid-, high-dose Chinese medicine group. The animal model established by capsulae levonorgestreli silasticus was used to observe the IGF-1 mRNA expression in ovary by hybridization in situ. Results IGF-1 mRNA expression of PCOS model group was higher than the normal control group obviously. The semi-quantitative image analysis showed that TCM treatment could decrease IGF-1 mRNA expression. Conclusion Yishen Jianpi Yangxue Tongli Fang could decrease the IGF-1 mRNA expression in ovary and improve the insulin resistance of PCOS rats.Key words：polycystic ovary syndrome；Yishen Jianpi Yangxue Tongli Fang；IGF-1；animal model目前,多数学者认为胰岛素抵抗和高胰岛素血症与多囊卵巢综合征(PCOS)的发病密切相关,是PCOS主要特征之一。
补肾活血方对多囊卵巢大鼠卵巢COX—1mRNA表达的影响尤昭玲【期刊名称】《怀化医专学报》【年(卷),期】2008(007)002【摘要】目的探讨环氧化酶-1（COX-1）的表达在多囊卵巢卵泡破裂中的作用及中药补肾活血方治疗多囊卵巢排卵障碍的机理。
方法选用未成年24日龄SD雌性大鼠60只，体重50±5g，随机分为模型对照组、西药（氯米酚）对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低荆量组、正常对照组5组，每组12只。
用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型，采用原位杂交法检测各组卵巢组织中COX—1基因的表达水平。
结果COX-1mRNA在多囊卵巢模型大鼠卵巢卵泡内膜细胞表达明显增加，高于正常对照组，两者比较有非常显著性差异（P〈0．01）。
补肾活血方能调节多囊卵巢模型大鼠卵巢卵泡内膜细胞COX-1mRNA水平，以高剂量组明显，其表达量与正常组相比，无显著性差异（P〉0．05）。
与中药低剂量组及氯米酚组比较差异非常显著（P〈0．01）。
结论COX-1mRNA在卵巢卵泡内膜细胞水平升高可能是PCOS发病的重要因素或环节。
补肾活血方可能通过影响COX—lmRNA水平，从而发挥治疗多囊卵巢排卵障碍的作用，这可能是其促进卵巢排卵的机制之一。
【总页数】4页(P1-3,F0003)【作者】尤昭玲【作者单位】湖南中医药大学中西结合学院,湖南长沙410007【正文语种】中文【中图分类】R331.2【相关文献】1.电针联合补肾活血方对多囊卵巢大鼠围着床期子宫内膜组织形态学及ER、PR蛋白的影响 [J], 姜朵生;吴献群;吴松;杨会生;陈茜;鲍成2.补肾活血方对多囊卵巢大鼠卵巢MMP-2，9的表达干预 [J], 付灵梅;尤昭玲;罗岚3.补肾活血方对PCO大鼠卵巢COX-1mRNA表达的影响 [J], 竹灵梅;尤昭玲;陈海涛4.补肾活血方对多囊卵巢大鼠卵巢MMP-2、9的表达干预研究 [J], 付灵梅;尤昭玲;罗岚5.补肾活血方对恒河猴PCO模型卵巢COX-1mRNA表达的影响 [J], 尤昭玲;付灵梅;冯光荣;陈海涛;伍娟娟;邹芝香;贺冰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
针刺对多囊卵巢综合征大鼠卵巢转化生长因子β1及其mRNA表达的影响张维怡;黄光英;刘洁;张明敏;王伟【期刊名称】《江苏中医药》【年(卷),期】2009(041)004【摘要】目的:研究针刺时多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢转化生长因子β1,(TGF-β1)及其mRNA表达的影响,探讨针刺促排卵的作用机制.方法:24日龄雌性大鼠颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)制作PCOS大鼠模型.对照组同期皮下注射油剂.PCOS大鼠随机分为模型组、针刺组.模型组不作任何处理,针刺组于80日龄起进行针刺干预,每日1次,连续6周.治疗结束后各组大鼠处死,检测血清性激素水平,取卵巢称重,用免疫组化和RT-PCR方法检测TGF-β1及其mRNA表达水平.结果:与模型组相比,对照组和针刺组卵巢湿重、卵巢TGF-β1及其mRNA表达水平、血清T、E2水平均显著降低.结论:针刺能显著降低PCOS大鼠卵巢TGF-β1及其mRNA的表达,抑制TGF-β1对卵巢和激素合成的作用,改善PCOS大鼠多囊样变和高雄激素血症,促进排卵.【总页数】3页(P72-74)【作者】张维怡;黄光英;刘洁;张明敏;王伟【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖北武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R711.750.5【相关文献】1.针刺对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞Fas、Bcl-2 mRNA表达的影响 [J], 马晓芃;戴明;吴焕淦;施征;赵粹英;洪娴2.益肾健脾养血通利方对多囊卵巢综合征大鼠模型胰岛素样生长因子-1 mRNA表达的影响 [J], 黄玉华;杨鸿;柴松岩3.针刺对多囊卵巢综合征大鼠卵巢TGF-α、EGFR表达的影响 [J], 张维怡;黄光英;刘洁;张明敏;王伟4.金雀异黄素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中Bcl-2及 Bax mRNA表达的影响[J], 迟晓星;张明玉;张涛;郑丽娜;张丽媛5.葛根素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢转化生长因子-β1表达的影响 [J], 黄丽华;胡平;吕洁玉;段迎春;张东霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胰岛素及胰岛素样生长因子一１在大鼠多囊卵巢综合征中的研究摘要目的：本研究采取Ｂｏｇｏｖｉｃｈ法制成大鼠多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）动物模型，行口服葡萄糖耐量（ＯＧＴＴ）测定及胰岛素（ＩＮＳ）释放试验；观察下丘脑、垂体和卵巢的光镜（ＨＥ染色）及透射电镜改变；用免疫组化（ＩＨ）方法观察胰岛素样生长因子．１（ＩＧＦ．１）在下丘脑、垂体和卵巢的分布和表达。
研究该大鼠ＰＣＯＳ模型是否存在胰岛素抵抗（ＩＲ）及下丘脑、垂体和卵巢在ＰＣＯＳ发病中的作用。
材料与方法；选２４日龄未成年雌性ＳＤ大鼠３６只，随机分成两组，每组１８只。
其中一组建立ＰＣＯＳ模型作为实验组。
另一组为正常对照组。
两组大鼠均于３６曰龄行ＯＧＴＴ实验，测定血清ＩＮＳ及血糖（ＧＣ）。
腹腔注入４％水合氯醛（４００ｍｇ／ｋｇ体重）麻醉，心室灌注，取脑、垂体和卵巢，进行免疫组化处理。
每组各有三只行电镜观察。
根据Ｐａｘｉｎｓ等大鼠脑定位图谱确定弓状核（ＡＲＣ）所在的平面。
血清ＩＮＳ的水平用放免（ＲＩＡ）测定（上海生物制品研究所），１２５Ｉ标记ＩＮＳ，一抗为豚鼠抗ＩＮＳ特异性抗血清抗体，二抗为羊抗豚鼠抗体。
灵敏度及特异性较高。
血糖测定：ＰｒｅｃｉｓｉｏｎＰｌｕｓ血糖试纸，美国雅培制药有限公司生产。
下丘腩、垂体和卵巢中的ＩＧＦ．１的寝达厢ＩＨ方法测定，ＩＧＦ－１免疫缝纯酶一抗是兔抗大鬣ＩＧＦｑ荤竞隆抗体（美黧ＳＡＮＴＡＣＲＵＺ公司生产，Ｏ。
ｌｍｌ，稀释１：２００蜃应用），免疫组化结果判断标准：同一样本至少重复染色一次，蠢至少两位经验丰富的专垃人员独立阕片。
以ＰＢＳ麟代～抗｛乍为阴性对照，以纲胞内出现棕黄色颗粒为阳性结果。
每张切片在４００倍高倍视野下随机取５个视野，计数阳性细胞数占全部细胞数的比例，染色结采按比例分为：一；辩链细憝数占１０％以下；＋：鬻性缨憨数占１０－３３％『；十＋：阳性细胞数占３３－．－６６％；＋＋＋：阳性细胞数占６６％以上。
统计学分析：砥Ａ结果的数据筒ｘ±ｓ表示，组闻差异耀ｔ检验；ＩＨ结果矮ｆ检验。
补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠IRS-1表达的影响谢阳;黄冬梅;李琼;陆付耳;徐丽君;邹欣;龚菂;邬姗【期刊名称】《华中科技大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(039)002【摘要】目的观察补肾通脉方对伴胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠胰岛素靶器官中胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)表达的影响,探讨补肾通脉方改善伴IR的PCOS的机制.方法 23日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9 mg/(100 g·d)共20 d,联合高脂饮食喂养80 d建立IR的PCOS大鼠模型.成模大鼠随机分为模型组(27只)和中药组(23只),另设13只正常组.中药组以补肾通脉方干预.各组大鼠动情后期于门静脉推注胰岛素前后各处死一部分.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠肝脏、脂肪组织IRS-1 mRNA表达,免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝脏、脂肪组织中IRS-1蛋白表达,免疫组化检测卵巢组织IRS-1蛋白表达.结果模型组IRS-1在肝脏、脂肪组织中mRNA及蛋白表达,以及卵巢中蛋白表达,均明显低于正常组(均P<0.05),中药组均显著高于模型组(均P<0.05).各组IRS-1的表达在胰岛素刺激后均较刺激前明显增多(均P<0.05).结论补肾通脉方可提高伴IR的PCOS大鼠肝脏、脂肪和卵巢中IRS-1的表达,这可能是其改善IR和促进排卵的机制之一.【总页数】6页(P165-170)【作者】谢阳;黄冬梅;李琼;陆付耳;徐丽君;邹欣;龚菂;邬姗【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所,武汉,430030【正文语种】中文【中图分类】R711.75【相关文献】1.补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠肝脏和脂肪组织磷脂酰肌醇-3激酶蛋白表达的影响 [J], 李琼;黄冬梅;陆付耳;谢阳;徐丽君;邹欣;龚菂2.补肾通脉方对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响 [J], 陆付耳;杨明炜;邹欣;徐丽君3.补肾健脾促卵方对多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗患者糖代谢及miRNA93表达的影响 [J], 罗岚4.补肾通脉方对胰岛素抵抗大鼠胰岛素信号转导的影响 [J], 黄冬梅;陆付耳;黄光英5.补肾通脉方对伴胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗及排卵障碍的影响[J], 李琼;黄冬梅;陆付耳;谢阳;徐丽君;邹欣;龚菂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
益肾健脾养血通利方对多囊卵巢综合征大鼠模型胰岛素样生长因子-1 mRNA表达的影响(作者：___________ 单位： _________ 邮编：____________ )【摘要】目的观察益肾健脾养血通利方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型胰岛素样生长因子-1(IGF-1) mRNA表达的影响, 从而在分子水平初步探讨该方治疗PCOS的可能机制。
方法SD雌性大鼠72只，随机分为正常对照组、模型组、克罗米芬组及中药小、中、大剂量组，除正常对照组外，其余各组皮下埋植左旋炔诺孕酮硅胶棒，建立PCOS大鼠模型,应用原位杂交法观察IGF-1 mRNA在大鼠多囊卵巢中的表达。
结果模型组IGF-1 mRNA表达明显高于对照组，图像半定量分析显示中药治疗组均能减少IGF-1 mRNA的表达。
结论益肾健脾养血通利方具有降低大鼠多囊卵巢中IGF-1 mRNA的表达，改善胰岛素抵抗状况的作用。
【关键词】多囊卵巢综合征；益肾健脾养血通利方；胰岛素样生长因子-1 ;动物模型Abstract : Objective To investigate the effects of Yishen Jianpi Yangxue Tongli Fang (YSJP) on IGF-1 mRNA expression in the ovary of PCOS rat, and study its mechanism on the molecular level. Methods Seve nty two female SD rats were ran domly divided into no rmal con trol group, model group, clom ifene group and low-, mid-, high-dose Chin ese medic ine group. The ani mal model established by capsulae levonorgestreli silasticus was used to observe the IGF-1 mRNA expression in ovary by hybridization in situ. Results IGF-1 mRNA expression of PCOS model group was higher than the normal control group obviously. The semi-quantitative image an alysis showed that TCM treatme nt could decrease IGF-1 mRNA expressi on. Con clusi on Yishe n Jia npi Yan gxue Ton gli Fang could decrease the IGF-1 mRNA expression in ovary and improve the in suli n resista nee of PCOS rats. Key words : polycystic ovary syndrome ; Yishen Jianpi Yangxue Tongli Fang ; IGF-1 ; animal model目前，多数学者认为胰岛素抵抗和高胰岛素血症与多囊卵巢综合征(PCOS)的发病密切相关,是PCOS主要特征之一。
大量研究表明, 胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在PCOS胰岛素抵抗、高胰岛素血症及高雄激素血症中起着重要作用。
全国名老中医柴松岩根据多年临床经验认为，本病多因脾肾不足、痰湿阻遏而发病，其经验方益肾健脾养血通利方具有明显改善PCOS患者月经状况、促进排卵及妊娠的作用［1］。
本研究应用原位杂交法观察IGF-1 mRNA在大鼠多囊卵巢中的表达，从而在原有基础上从分子水平探讨该方治疗PCOS时，对其病理生理过程的可能作用。
1实验材料1.1动物雌性SD大鼠,24日龄，中国科学院遗传与发育生物学研究所动物中心提供，许可证编号：SCXK(京)2002-0006。
1.2药物与试剂健脾益肾养血通利方浸膏，单味药均购自同仁堂药店，经鉴定为正品；中国中医科学院医学实验中心制剂室精制；临床人用量为120 g 原药材/d,批号041002。
枸橼酸氯米芬胶囊，上海衡山药业有限公司生产，批号040501 ;注射用人绒毛膜促性腺激素(HCG),上海第一生化药业有限公司生产，批号030610 ;左旋炔诺孕酮硅胶棒，黑龙江省丹东市鸭绿江制药厂生产，批号20010101 ;焦碳酸二乙酯(DEPC),Sigma公司产品。
2实验方法2.1分组72只SD雌性大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、克罗米芬组(25 mg/kg)及中药小(5 g/kg)、中(10 g/kg)、大(20 g/kg)剂量组(分别相当于人用量的2.5、5、10倍)，每组12只。
2.2造模及给药参照文献［2］方法，常规饲养3 d后,除正常对照组外，其余5组皮下埋植左旋炔诺孕酮硅胶棒（3 mm,内含左旋甲基炔诺酮3.6 mg）,于27日龄时每只动物皮下注射HCG 1.5 U,每日2次,共9 d,正常对照组每日注射等容积生理盐水。
克罗米芬组及中药各剂量组分别按照上述剂量灌胃给予克罗米芬及健脾益肾养血通利方浸膏，连续6周；正常对照组及模型组灌胃给予常水。
提前12 h禁食不禁水，戊巴比妥钠麻醉,冰盘上快速游离卵巢,4%多聚甲醛（0.1 mol/L PBS配制，内含0.1%DEPC）固定组织，进行石蜡切片。
采用原位杂交方法，按照试剂盒说明书要求进行IGF-1 mRNA检测。
3统计学方法实验数据以x ±＞表示。
采用Motic6.0软件和原位杂交病理图像分析系统对结果进行图像分析。
根据图像分析系统采集的数据，对每个统计场的目标平均光密度和面密度进行统计。
4结果原位杂交结果显示，IGF-1 mRNA阳性表达信号为棕黄色位于细胞胞浆；模型组表达明显高于对照组。
图像半定量分析显示中药治疗组均能减少IGF-1 mRNA的表达。
见表1。
表1益肾健脾养血通利方对PCOS大鼠卵巢IGF-1 mRNA表达的影响（略）注：与正常对照组比较，##P V 0.01 ;与模型组比较,*P v 0.05,**P v 0.015讨论IGF-1是一种能促进合成代谢的多肽，其结构类似胰岛素,IGF-1的作用是由IGF受体介导的,该受体在结构和功能上类似胰岛素受体,提示胰岛素和IGF-1可能存在交叉反应，即重叠的生物效应［3］。
有研究表明,IGF-1和胰岛素可协同调节卵巢性激素的合成［4］,表现在IGF-1能直接刺激卵泡膜细胞合成雄激素，也能协同促黄体生成素（LH）促进雄激素的合成；过高的胰岛素能抑制肝脏胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）的合成，提高卵巢组织IGF-1的生物活性，在胰岛素和IGF-1共同作用下产生一个雄激素化的卵巢微环境。
PCOS 患者离体培养的卵巢间质加入高于正常血浆浓度的胰岛素后，间质合成IGF-1和雄激素增加；高胰岛素可能和与其结构同源的IGF-1受体及其杂交受体结合，诱导并增强IGF-I基因及受体基因的表达［5］。
PCOS患者因胰岛素和IGF-1的过度作用，卵巢对LH的敏感性增加，使卵泡募集数增加，正常卵泡闭锁不断发生或减少丄H的作用扩大，局部产生的雄激素使发育到一定阶段的卵泡延缓或停止发育，而高胰岛素和IGF-1对原始卵泡不断启动，从而促进多囊卵巢形成［6］。
西药治疗大体从促排卵（如克罗米酚等）、抗雄激素（如口服避孕药妈富隆、赛普龙等）和降低胰岛素（如二甲双胍、甲福明等）等着手。
为探讨该方治疗PCOS的可能机理，前期工作选用Poresky PCOS动物模型来观察益肾健脾养血通利方对大鼠体重、动情周期、血清胰岛素和IGF-1水平、性激素及病理组织学的变化，实验结果显示，本方具有降低血清胰岛素和IGF-1水平、改善多囊卵巢征象、恢复排卵的作用［7］。
在左旋炔诺孕酮PCOS大鼠实验中冲药治疗组大鼠的妊娠率显著高于病理模型组，而电镜结果显示，中药对PCOS实验动物模型受损卵巢细胞有较理想的修复作用[8]。
本研究结果表明，中药治疗组多囊卵巢中IGF-1 mRNA水平降低，这与临床及前期实验结果是一致的。
由此可见，本方可改善胰岛素抵抗及高胰岛素血症，使局部雄激素生成减少，各种激素和因子相互促进和制约，使下丘脑-垂体-卵巢轴的功能得以恢复，加上卵巢内环境的改变，使卵巢恢复正常局部调控，最终使PCOS临床症状及相关生化指标得以改善。
以上系列研究表明，本方治疗PCOS是具有多靶效应的。
【参考文献】[1]华苓,吴育宁，张巨明，等•益肾健脾养血通利法治疗多囊卵巢综合征的临床观察[J].中国中西医结合杂志，2003,23(11) : 819 —822.[2] 朱辉，倪江,姚兰春,等.大鼠多囊卵巢动物模型的实验研究[J].哈尔滨医科大学学报，1999,33(3) : 187 —188.[3] 郑建淮,曹缵孙，陈晓燕•胰岛素抵抗在多囊卵巢综合征中的作用[J].国外医学•妇幼保健分册,2001,12(2) : 70.[4] Hotle J. Polycystic ovary syndrome and insulin resista nee : thirty genes struggli ng with overfeed ing and sede ntarylife style [J]. J Endoerinol Invest,1998,21(9) : 589 —601.[5] 梁晓燕，庄广伦，方群,等.多囊卵巢综合征患者卵巢间质胰岛素样生长因子受体的表达[J].中华妇产科杂志，1997,32(10):582 —585.[6] 徐雯,王元佩，赵采，等•多囊卵巢综合征患者血清、卵泡液中胰岛素样生长因子-1水平研究[J].福建医药杂志,2004,26(4):113 —114.[7] 黄玉华,赵子厚,柴松岩，等.益肾健脾养血通利方对Poresky PCOS大鼠模型的影响[J].中国中医基础医学杂志,2004,10(1) : 38 —41.[8] 黄玉华，赵子厚,柴松岩，等.益肾健脾养血通利方对左旋炔诺孕酮PCOS大鼠模型的影响[J].中国中医药信息杂志,2006,13(10) : 38 —39.。
