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2,6-二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C目的和要求掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。
原理维生素C (Vc)又称抗坏血酸(ascorbic acid)。
最初于1928年从牛的肾上腺皮质中提取出结晶物，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效。
氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色，还原型2,6-二氯酚靛酚无色。
当用此染料滴定含有Vc的酸性溶液时，在Vc 未全部氧化前，滴下的染料立即被还原成无色；一旦溶淀中的Vc全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液显示粉红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的Vc刚刚被氧化完全，从滴定时2,6一二氯酚靛酚标准液的消耗量，可以计算出被检物质中Vc的含量。
操作步骤1. 样液制备称取苹果和青椒各5g，分别加少量2%草酸(1%草酸因浓度太低而不能抑制抗坏血酸氧化酶作用)用研钵磨成浆，漏斗(+脱脂药棉)过滤，滤液转入25ml容量瓶后用2%草酸定容。
2. 标准液滴定准确吸取0.1mg/ml的标准抗坏血酸溶液各1.0ml，分置两个100ml锥形瓶中，加入1%草酸9.0ml，用微量滴定管以0.1%的2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s即为终点。
由所用染料的体积计算出T值(平均值)，即1ml染料相当于多少mg的Vc。
3. 样液滴定准确吸取已制备的样品滤液各两份，每份10.0ml分别放入两个100ml锥形瓶内，滴定方法同前注意：1. 滴定过程宜迅速，一般不超过2min，因为样品中某些杂质亦能还原二氯酚靛酚，尽管其还原能力较弱且还原速度较Vc更慢2. 滴定所用染料宜控制于1~4ml，如果样品含Vc含量过高/低，可酌量增/减样液3. 样品提取液应避免日光直射，否则会加速Vc氧化计算m = VT /m0 × 100式中m：100g样品中含Vc的质量(mg)V：滴定时所用去染料体积(ml)T：每毫升染料能氧化Vc质量数(mg/ml)m0：10ml样液含样品之质量数(g)试剂和器材试剂1. 2%草酸溶液：草酸2g溶于100ml蒸馏水中。
至刻度，摇匀过滤。
3.2标准液滴定吸取l0mL滤液放人50mL锥形瓶中，用已标定过的2,6一
二氧靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。
取浸提液10mL作空白对
照，结果计算。
3.3 维生素C按以下公式计算:
（V-V0）×T×A
维生素 C ( mg/100 g)= ----------------------------×100%
W
式中:
V—滴定样液时消耗染料溶液的体积，mL。
V0—滴定空白时消耗染料溶液的体积，mL。
T—2, 6一二氯靛酚染料滴定度，mg/mL。
A—稀释倍数。
W—样品重量。
3.4平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后
两位数字。
3,5平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于20mg/l00g时，不得超过2%，
小于20mg /100g时，不得超过5%。
三、实验数据：
第一组第二组第三组组别
体积（ml）
V（滴定样液时消耗染料溶液的体积）ml
V0（滴定空白时消耗染料溶液的体积）ml
V-V0
(体积改变量)ml
100g橙子中Vc含量mg。
维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)一、目的要求:(1)学习并掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
(2)了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
(3)熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理:维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C又称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶(抗坏血酸氧化酶)可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2,6-二氯酚靛酚(DCPIP)是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。
抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图:当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色;当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂:1(实验材料:多种蔬果(西红柿、尖椒、绿豆芽等)2(主要仪器:(1)天平 (2)研钵1(3)容量瓶(50mL) (7)漏斗(4)刻度吸管(5mL，10mL) (8)脱脂纱布(9)滤纸 (5)锥形瓶(100mL)(6)微量滴定管(3mL)3(试剂:(1)2, HCl)标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黄色则不能用)(2 25mg，溶于25ml 4,HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，。
实验八果蔬中维生素C的提取和定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）【原理】1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。
2.了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorb ic acid）。
它对物质代谢的调节具有重要的作用。
近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。
维生素C是不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。
它分布很广，许多水果、蔬菜中的含量更为丰富。
维生素C具有很强的还原性。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCIP），本身则氧化为脱氢型。
在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。
因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。
一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。
所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。
如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。
【试剂和器材】一、试剂2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸馏水中。
1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸馏水中。
标准抗坏血酸溶液（1mg/mL）: 准确称取100mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至100mL，贮于棕色瓶中，冷藏。
最好临用前配制。
0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg2,6-二氯酚靛酚溶于150m L含有52mg NaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至250mL，贮于棕色瓶中冷藏（4℃）约可保存一周。
每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。
维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求：（1）学习并掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C又称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2,6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。
抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图：当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色；当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂：1．实验材料：多种蔬果（西红柿、尖椒、绿豆芽等）2．主要仪器：（1）天平（2）研钵（3）容量瓶（50mL）（4）刻度吸管（5mL，10mL）（5）锥形瓶（100mL）（6）微量滴定管（3mL）（7）漏斗（8）脱脂纱布（9）滤纸3．试剂：（1）2％ HCl（2）标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）25mg，溶于25ml 4％HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，。
维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求：（1）学习并掌握用2, 6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C乂称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2, 6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈 红色。
抗坏血酸具有强还原性, 能使2, 6-二氯酚靛酚还原褪 色，其反应如图：当用2, 6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时， 滴下的2, 6-二氯酚靛酚被还原 成无色；当溶液中的抗坏血酸 全部被氧化成脱氢抗坏血酸 时，滴入的2, 6-一.氯酚靛酚立抗坏血酸 （蓝色） Cl o HO —CH CH 2O H CF 2.6•二氮（•红色）HO —CHO 一CIH —C脫氢抗坏血酸 还原型2,&二氨酚靛蜀（无色）即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂：1(实验材料：多种蔬果(西红柿、尖椒、绿豆芽等)2(主要仪器：(1)天平(2)研钵1(3)容量瓶(50mL) (7)漏斗(4)刻度吸管(5mL, 10mL) (8)脱脂纱布(9)滤纸(5)锥形瓶(lOOmL)(6)微量滴定管(3mL)3(试剂:(1)2, HC1)标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黃色则不能用)(225mg,溶于25ml 4,HC1中，移入50ml容量瓶中，用蒸憎水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml中含抗坏血酸O.omg, o(3)0. 01M 2, 6,二氯酚靛酚准确称0. 25g氧化型2, 6,二氯酚靛酚、0. 21g碳酸氢钠溶于250ml热蒸镭水中，稀释至1000ml,充分振摇，装入棕色瓶内，置冰箱内过夜，临用前过滤，用标准Vc标定其浓度。
2,6-二氯酚靛酚钠法测定维生素C含量一、实验目的维生素C是生物体内抗氧化体系成员之一。
因此，维生素C含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。
通过本实验掌握用2,6-二氯酚靛酚钠法测定植物组织维生素C含量的方法。
二、实验原理2，6-二氯酚靛酚钠是氧化性染料，可将还原态的维生素C氧化成脱氢维生素C，而染料本身从深蓝色被还原成无色的衍生物。
2，6-二氯酚靛酚钠在酸性条件下呈红色。
在滴定终点之前，滴下的2，6-二氯酚靛酚钠立即被还原成无色。
当溶液从无色转变成微红色时，即为滴定终点。
三、实验材料新鲜生菜四、设备与试剂滴定管、三角瓶、研钵、量筒、移液管1％草酸，0.1%2，6-二氯酚靛酚钠溶液五、实验步骤（一）维生素C的提取称取1.0 g新鲜样品（已称好），置研钵中，分次加20ml 1％草酸，研成匀浆（用1%的草酸定容20ml）。
通过纱布过滤后取10ml放于离心机中3000r/min离心10min,吸取上清使用。
（二）维生素C的测定吸取滤液10 ml，放入50 ml三角瓶中，立即用0.1% 2，6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的粉红色在15 s内不消失为止。
记录所用滴定液体积（另取10ml 1%草酸作空白对照）。
（三）标准液的标定取1mg/ml抗坏血酸溶液1ml置于锥形瓶中，加9ml 1%草酸，用0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色15s不消失。
计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10ml 1%草酸作空白对照）。
1.2ml 染料相当于1mg抗坏血酸（四）含量计算维生素C（mg/g样品）=（样品消耗染料体积-空白消耗染料体积）╳提取定容后的体积╳1ml染料能氧化抗坏血酸的毫克数/滴定用的样品体积╳水果质量六、注意事项1. 操作要尽可能快，并防止与铁、铜器具接触，以减少维生素C的氧化。
2. 草酸及样品的提取液避免日光直射。
实验十：果蔬中维生素C的测定（2，6—二氯靛酚滴定法）教学目的要求基本知识点1、了解从果蔬中提取VC的方法。
2、掌握2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理、基本过程和操作关键。
3、熟练采样、样品处理、称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
4、掌数据处理和结果计算技术。
重点2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。
难点2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理课时教学方案：复习与提问：1、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理。
2、2，6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的基本过程和操作关键。
3、检查学生实验准备情况。
【引入新课】VC在人体内的主要功能是：参加体内的氧化还原过程，促进人体的生长发育，增强人体对疾病的抵抗能力，促进细胞间质中胶原的形成，维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能，增强肝脏的解毒能力。
当人体中缺少VC时，就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。
近年来，科学家们还发现，VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质—亚脱胺，从而减低癌的发病率。
据测定，成年男子每天约需VC 65 mg，成年女子每天约需VC60 mg。
VC广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是猕猴桃、鲜枣、草莓、枇杷、橙、橘、柿子等含有丰富的VC 。
以100g水果的VC的含量来计算，猕猴桃含420mg，鲜枣含380mg，草莓含80mg，橙含49mg，枇杷含36mg，橘含30mg，柿子含30mg。
但葡萄、无花果、苹果各自只有5mg，香蕉、桃子各含10mg，梨子仅含4mg。
实验十：果蔬中维生素C的测定—2，6—二氯靛酚滴定法维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。
化学名称为：L-3-氧代苏己糖醛酸内酯【英文名：Ascorbic Acid(INN)】，分子式为 C6H8O6，相对分子质量：176.13。
果蔬维生素C含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量，试验中，通过2,6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量，我们测得橘子的维C 的含量是20.46mg/100g，相对较低。
经查阅资料，讨论后发现维生素C在空气中易氧化，而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响。
一、前言实验目的：测定橘子中的维生素c含量，从而进行分析。
实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。
它对物质代谢的调节具有重要的作用。
近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。
维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。
水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C王”之称。
维生素C为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。
故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时，不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。
在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。
因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。
一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。
所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。
如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。
水果及蔬菜中维生素C含量的定量测定范开祥金文党承兰徐娇（河西学院生命科学与工程系08级（2）班甘肃张掖734000）摘要本文以橙子，猕猴桃，青椒为材料，用实验室通用的2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C的含量。
还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。
在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚呈红色，被还原后变为无色。
因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。
如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。
关键词抗坏血酸2，6—二氯酚靛酚2%草酸引言橙子（学名：Citrus sinensis）是芸香科柑橘属植物橙树的果实，常绿小乔木，高达4～6米。
枝细长，有长棘针。
花期春季，果期秋季。
橙子又称黄果。
原产中国南部，南方各省均有分布，而以四川、广东、台湾等省栽培较为集中。
15世纪初从中国传入欧洲，15世纪末传入美洲，我国江苏、浙江、安徽、江西、湖北、湖南、四川、云南、贵州等地均有栽培。
果圆形至长圆形，橙黄色，油胞凸起，果皮不易剥离。
无苦味。
中心柱充实；汁味甜而香。
含有大量的糖和一定量的柠檬酸以及丰富的维生素C，营养价值较高。
果实还含维生素P，具极高的医药价值。
橙子味甘、酸，性凉。
具有生津止渴、开胃下气的功效。
正常人饭后食橙子或饮橙汁，有解油腻、消积食、止渴、醒酒的作用。
橙子营养极为丰富而全面，事实上，它的维生素C含量丰富，能增强人体抵抗力，亦能将脂溶性有害物质排出体外，是名实相符的保安康抗氧化剂。
橙皮又叫黄果皮，除含果肉中的成分外，胡萝卜素含量较多，可作为健胃剂、芳香调味剂。
橙皮还含一定时的橙皮油，对慢性支气管炎有效。
猕猴桃（学名：Actinidia chinensis Planch）是猕猴桃科植物，落叶藤本；枝褐色，有柔毛，髓白色，层片状。
猕猴桃的适应性强，喜温、喜湿，常在阴湿的林边、荒坡或灌木丛中生长，不耐旱，也不很抗冻；猕猴桃的根系发达，生长旺盛。
维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求：（1）学习并掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C又称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2,6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。
抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图：当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色；当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂：1．实验材料：多种蔬果（西红柿、尖椒、绿豆芽等）2．主要仪器：（1）天平（2）研钵（3）容量瓶（50mL）（4）刻度吸管（5mL，10mL）（5）锥形瓶（100mL）（6）微量滴定管（3mL）（7）漏斗（8）脱脂纱布（9）滤纸3．试剂：（1）2％ HCl（2）标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）25mg，溶于25ml 4％HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，。
果蔬维生素C含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量，试验中，通过2,6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量，我们测得橘子的维C 的含量是20.46mg/100g，相对较低。
经查阅资料，讨论后发现维生素C在空气中易氧化，而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响。
一、前言实验目的：测定橘子中的维生素c含量，从而进行分析。
实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。
它对物质代谢的调节具有重要的作用。
近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。
维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。
水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C王”之称。
维生素C为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。
故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时，不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。
在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。
因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。
一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。
所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。
如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。
果蔬维生素C 含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c 含量，试验中，通过2,6-二氯酚靛酚对维生素C 的滴定从而测定了橘子所含的维生素C 含量，我们测得橘子的维C 的含量是20.46mg/100g ，相对较低。
经查阅资料，讨论后发现维生素C 在空气中易氧化，而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响。
一、前言实验目的：测定橘子中的维生素c 含量，从而进行分析。
实验原理：维生素C 是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid ）。
它对物质代谢的调节具有重要的作用。
近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。
维生素C 主要存在于新鲜水果及蔬菜中。
水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C 王”之称。
维生素C 为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。
故维生素C 制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时，不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器。
CCC C CCHO H HO HOO H OH O2NOHClClO+C CC C C CO H O HOO H OH O 2N OHClClO+O H(蓝色）还原型抗坏血酸氧化型脱氢抗坏血酸2，6－二氯酚靛酚还原型2，6－二氯酚靛酚(红色）HOH+(无色）N ClClOH H 维生素C 具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。
在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。
因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。
学院
XXX 专业 XXXX
果蔬中维生素含量的测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）实验设计题目
年级 XXXX 组员 XXXX
一、实验背景及目的:
维生素C 又称为抗坏血酸，常存在于新鲜的蔬菜和某些水果中，尤其是在 橙子、枣、
辣椒、苦瓜中含量丰富。
是维持机体正常生理功能的重要维生素
之一。
维生素C 抗坏血酸在食品工业中常用做抗氧化剂，维生素 C 可促进胶原
蛋白抗体，具有抗癌的作用；它能参与神经介质、激素的生物合成；能将胆
固醇转化为胆汁酸，使高胆固醇血症患者的胆固醇下降；能将 Fe 抖还原为Fe, 使其易于吸收，有利于血红蛋白的形成；还具有解毒的作用。
橙子中防治坏 血病的主要物质为维生素C ,本文以橙子为检测对象，对其营养成分——维生素
C 的含量进行测定，正确了解营养价值。
目前国内测定维生素C 的常见方法有：DPPH 法、碘滴定法、紫外分光光
度计法、高效液相色谱法、苯肼比色法等。
这些方法各有特点，但操作过程 复杂，较
慢，仪器昂贵。
Vc 易被热、碱、氧和光破坏，根据实验室的条件,
本次实验采用2，6—二氯靛酚滴定法进行实验研究及分析测定。
参考国标法GB6195-1986直接测定橙子中维生素c 的含量，其方法简便、
快速、结果准确。
、实验部分
1、实验原理
染料2 ,6 一二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原 状态，
氧化态为深蓝色，还原态变为无色，二是受其介质的酸度影响，在碱
性溶液中呈深蓝色，在酸性介质中呈浅红色。
用蓝色的碱性染料标准溶液， 对含维生素C 的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达滴
定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量计算样品中
还原型抗坏血酸的含量。
2、实验设备及试剂 2.1仪器设备
高速组织捣碎机：8000—12000 r/min 。
分析天平。
滴定管:25 mL 、lOmL 。
容量瓶:100mL 。
锥形瓶:100 mL 、50 mL 。
吸管:10mL 、5mL 、2mL 、1mL 。
烧杯:250 mL 、50mL 。
漏斗。
2.2试剂及材料
偏磷酸:2%溶液(W/V) 草酸:2%溶液(W/V) 白陶土 (或称高岭土 ):对维生素C 无吸附性。
抗坏血酸标准溶液(1 mg/mL):称取100m g(准确至0.lmg)抗坏血酸, 溶于浸提剂中并稀至100 mL,现配现用。
3、滴定度T 测定
2，6—二氯靛酚(2,6一二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠52mg 溶解 在200ml 热蒸馏水中，然后称取2,6 —二氯靛酚50 mg 溶解在上述碳酸氢钠溶液
中。
冷却定容至250mL ,过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。
每次使用前，用标 准抗坏血酸标定其滴定度。
即吸取1 mL 抗坏血酸标准溶液于50 mL 锥形瓶中,
加入l0mL 浸提剂，摇匀。
同时，另取10mL 浸提剂做空白试验，用2,6 —二氯靛 酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s 不褪色为止。
滴定度按下式计算:
T 滴定度(mg/mL ) =C x V/(V1-V2)
式中:T —每毫升2,6 —二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数,
C —抗坏血酸的浓度，mg/mL;
V —吸取抗坏血酸的体积，mL;
V1 —滴定抗坏血酸溶液所用2,6一二氯靛酚溶液的体积，mL;
V2 —滴定空白所用2,6 —二氯靛酚溶液的体积，mL
2.2.1
柑橘、圣女果、红枣、胡萝卜。
浸提剂 2.2.3
2.2.4 2.2.5
3.测定步骤
3.1提取用水洗干净新鲜蔬菜或整个新鲜水果 （橙子），放人组织捣碎机中,
加20mL 浸提剂，迅速捣成匀浆。
称取10 — 40g 浆状样品，加入10ml 二甲苯进行
萃取，用分液漏斗分离出下层溶液，吸取下层溶液
10mL,移入100 ml 容量瓶中。
并稀释至刻度，摇匀过滤。
3.2标准液滴定 吸取l0mL 滤液放人50mL 锥形瓶中，用已标定过的2,6— 氧靛酚溶液滴
定，直至溶液呈粉红色15s 不褪色为止。
取浸提液10mL 作空白
对照，结果计算。
3.3维生素C 按以下公式计算：
(V-V0) X T X A
维生素 C ( mg/100 g)= ----------------- 2, 6—二氯靛酚染料滴定度，mg/mL 。
稀释倍数。
W —样品重量。
3.4平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小 数点后两位数字。
3,5平行测定结果的相对相差，在维生素 C 含量大于20mg/l00g 时，不得超过 2%,小于20mg /100g 时，不得超过5%。
X 100%
式中：
V — 滴定样液时消耗染料溶液的体积,
mL 。
V0 — 滴定空白时消耗染料溶液的体积, mL 。
V0 (滴定空白时消
耗染料溶液的体
积)ml
V-V0
(体积改变量)ml
100g橙子中Vc含量
mg
四、注意事项
(1)某些水果、蔬菜(如橘子、西红柿等)浆状物定容时泡沫太多，可加
数滴丁醇或辛醇消泡。
(2)样品的提取液制备和滴定过程，要避免阳光照射和与铜、铁器具接触,
以免抗坏血酸被破坏。
(3)整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。
滴定过程一般不超过2min。
滴定所用的染料不应小于1ml或多于4ml，如果样品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。
(4))干扰滴定因素有:
Fe可还原二氯酚靛酚。
对含有大量Fe的样品可用8%乙酸溶液代替草酸溶液提取，此时Fe 不会很快与染料起作用。
样品中可能有其它杂质还原二氯酚靛酚，但反应速度均较抗坏血酸慢，因而滴定开始时，染料要迅速加入，而后尽可能一点一点地加入，并要不断地摇动三角瓶直至呈粉红色，于15s内不消退为终点。
(5)若样品绿叶颜色较深，影响滴定结果观察，可加入白陶土在过滤。
白陶土使用前应测定回收率。
五、思考题
1.该法测定抗坏血酸有何不足?
2 .用2%盐酸提取样品的目的是什么?
3.为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤? 为什么？。
