香菇多糖质量标准
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香菇中糖类物质离与测定————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:香菇中糖类物质的分离与测定摘要:本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖(Lentinan,LNT),利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案,得到的粗多糖回收率为14.05﹪,再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。
用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%;经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成,其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖;用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。
气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等,其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。
关键字:香菇多糖回收率含量组成相对分子量Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodesAbstract:This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them.Key words: Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight0 引言:糖类化合物是中药的重要成分,随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步,人们对糖的了解越来越多。
正式名:香菇多糖汉语拼音:Xianggu标准号:WS-291(X-256)-97 拉丁文或英文:Lentinan主要活性成分:香菇[Lentinus edodes(Berk)sing]子实体提取、精制的多糖。
按干燥品计算,含香菇多糖应不得少于92.0%。
性状:类白色或浅黄色粉末;无味,有引湿性。
在水、甲醇、乙醇或丙酮中几乎不溶;在0.5mol/L氢氧化钠中溶解。
比旋度取本品,置五氧化二磷干燥器中,减压干燥至恒重,精密称取适量,加0.5mol/L 氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含10mg的溶液,依法测定(中国药典),范围在+2~+15之间。
鉴别:(1)取含量测定项下的溶液2ml,加蒽酮溶液(取蒽酮35mg置100ml量瓶中加硫酸溶解,并用硫酸稀释至刻度,即得,临用配制)5ml,振摇混匀,置水浴中加热,应显蓝绿色。
(2)取本品约10mg,滴加水少许研磨,再加水制成每1ml中含0.5mg的溶液,置匀浆器中制成匀浆液,取10ml,加高碘酸钠溶液[取高碘酸钠(NaIO4)4.28g,加0.005mol/L 硫酸溶液。
溶解并稀释至1000ml]1ml,摇匀,立即取反应液4ml,以水为空白对照,照分光光度法(中国药典1995年版二部附录ⅣA),在295nm的波长处测定吸收度(A1),剩余的反应液置避光容器中。
于3O℃连续搅拌6小时后,取出,测定吸收度(A2)。
两次吸收度之差(A1-A2)应为0.15~0.25。
(3)红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致,在89Ocm-1上附近有弱吸收峰。
检查:酸碱度取本品,加水制成0.05%的匀浆液,依法测定(中国药典1995年版二部附录ⅥH),pH值应为6.0~8.0。
特性粘数取本品,置五氧化二磷干燥器中,减压干燥至恒重,精密称取适量,加0.5mol/L氢氧化钠溶液数滴,使充分溶胀,研磨均匀,在25~30℃放置6~8小时,使完全溶解,制成每1ml中含0.5mg的溶液,摇匀,依法测定(中国药典1995年版二部附录ⅥG第三法),特性粘数应为60~130。
香菇多糖提取,香菇多糖的作用功效有哪些简介香菇多糖是以优质香菇为原料,通过工艺发酵从中提取有效的活性成分,内含30%-50%多糖。
香菇多糖粉主要为淡黄色粉末,易溶于热水,水溶液为透明粘稠状。
香菇多糖临床与药理上主要有抗病毒、抗肿瘤、增强免疫力等作用。
具体可参考文章末尾的香菇多糖文献。
我们一起了解下香菇多糖。
规格别名:香菇多糖/香菇提取物英文名:Lentinula edodes (Berk.)Pegler纯度:30%、50%水溶性:易溶于热水,且为粘稠状形状:香菇多糖粉末、香菇多糖片、香菇多糖胶囊、香菇多糖注射剂提取来源:优质花蕈、香信、椎茸、冬菰、厚菇、花菇保质期:24个月(2年)功效与作用01、提高病人的免疫功能。
一些不能进行手术,或者是复发性胃癌,肝癌,膀胱癌的患者,那么使用香菇多糖能够缓解症状,提高病人的免疫功能;02、抗病毒,学者发现硫酸化香菇多糖具有抗艾滋病病毒(HIV)的活性,可干扰反转录病毒及其他病毒的吸附和侵入。
日本学者报道,从香菇子实体中获得的一种具有良好抗肿瘤作用的葡聚糖的硫酸化衍生物可抑制HIV的活性;03、抗肿瘤,同时还可以调节患者体内的微量元素。
虽然香菇多糖对正常机体并无免疫促进作用,但能够使肿瘤和感染后的机体免疫应答提高,从而增强抗肿瘤的作用;副作用与禁忌正常人无需服用香菇多糖,因为香菇多糖对正常人体并不会产生免疫作用。
应用范围香菇多糖医药领域应用,文章中又说能有些提高病人的免疫力,同时也能抑制肿瘤的发生,这些在临床医学都得到了证明;香菇多糖可抵抗病毒入侵,因此在保健食品领域,香菇多糖是一种有待开发的抗病毒保健食品。
干香菇柄和香菇盖中多糖含量的测定摘要:本文采用水提醇沉的方法提取干香菇柄和香菇盖中的香菇多糖,并用苯酚-硫酸法在490nm波长处检测其含糖量。
实验结果:干香菇柄的含糖量为37.75%,干香菇盖的含糖量为48.99%。
结论:干香菇能延长储存期,易保存,且不同部位香菇多糖含量不同,为干香菇的有效利用提供更多依据。
关键词:香菇柄香菇盖多糖含量中图分类号:TQ28 文献标识码:A 文章编号:1672-5336(2014)22-0035-01香菇是一种药食兼用的大型真菌体。
近年来随着科学的进步,香菇的药效正逐步得到科学的证实,并受到极大重视与推广。
许多香菇成品的加工,生产者均将香菇柄剪去,从而产生过量的菇柄,被生产者废弃,造成了极大的浪费。
为了方便运输及保藏,市面上有很多干香菇,有很多人担心干香菇的有效成分香菇多糖会损失。
因此,本文将进行对干香菇柄和香菇盖的香菇多糖含量进行测定,对干香菇及菇柄的开发利用提供有利依据。
1 材料与方法1.1 材料干香菇柄、干香菇盖:由吉林省珲春神怡菌业提供。
1.2 试剂与仪器主要试剂:浓硫酸,分析纯,95.5%;5%苯酚;葡萄糖,分析纯,99.9%。
主要仪器:Sorvall Evolotion RC型高速冷冻离心机,美国Thermo公司;Cary 300型紫外可见分光光度计,美国Varian公司。
1.3 香菇多糖提取的工艺流程干香菇柄(香菇盖)粉碎→过筛→煮沸1h(料:水质量比1:10)→过滤→滤液、滤渣→煮沸0.5h(料水比1:5)→过滤→滤液合并浓缩、滤渣舍弃→离心取上清液→上清液:无水乙醇体积比1:3→离心后沉淀冷冻干燥并保存。
1.4 多糖含量检测:苯酚-硫酸法[1]1.4.1 标准曲线的制备准确称取葡萄糖100.00mg于50ml容量瓶,加蒸馏水定容至刻度,摇匀后精确称取5.0ml于50ml容量瓶,加蒸馏水定容至刻度,摇匀后得200μg/ml葡萄糖标准溶液。
分别吸取0、0.20、0.30、0.40、0.5、0.6ml,加水补至1.0ml,然后加入5%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,充分振荡后,冷却至室温,以蒸馏水为空白对照,于490nm波长处测吸光度值。
学 术 论 坛230科技创业家 TECHNOLOGICAL PIONEERS香菇别名:花蕈、香信、椎茸、厚菇、花菇。
拉丁学名Lentinus edodes (Berk.)sing 伞菌目口蘑科香菇属味甘性平,食药兼用。
香菇的主要成分是多糖类和不饱和脂肪酸,经热水提取的香菇多糖可调节人休内有免疫功能的T 细胞活性,可降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力。
香菇对癌细胞有强烈的抑制作用。
香菇还含有双链核糖核酸,能诱导产生干扰素,具有抗病能力。
目前许多企业已将鲜香菇作为生产原料,投入到相关药品的生产和研发中。
但目前现行鲜香菇药用标准为江苏省药材标准1996年版,该标准规定较为简单,仅有性状与理化鉴别,而香菇多糖的生理活性与其特性和含量直接相关[3]。
因此,准确检测鲜香菇中香菇多糖的含量,具有非常重要的意义。
为此,我们采用了紫外分光光度法对鲜香菇中香菇多糖的含量测定进行实验研究,现将实验结果总结如下。
1 实验1.1实验原理多糖在乙醇中沉淀,与水溶性单糖和低聚糖分离,在浓硫酸作用下水解为单糖分子,并迅速脱水生成糠醛或羟甲基糠醛,然后蒽酮与糠醛或羟甲基糠醛经脱水缩合,产生蓝绿色的糠醛衍生物,颜色的深浅与粗聚糖的含量成正比,可以用比色法测定多糖的含量。
1.2实验仪器、试剂与材料1.2.1实验仪器L ambda35型紫外-可见分光光度计(PerkinElmer);电子天平(Sartorius CPA225D);KQ-250B 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);LD4-2低速离心机(北京医用离心机厂);DHG-9075A 型电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司);HH-2型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司);电子万用炉(天津市泰斯特仪器有限公司)。
1.2.2实验材料鲜香菇(购于超市及农贸市场);1.2.3实验试剂D-无水葡萄糖(中国药品生物制品检定所,批号:110833-200503);浓硫酸(南京化学试剂有限公司,批号:11011030030);蒽酮(国药集团化学试剂有限公司,批号:20100720);乙醇(95% 分析醇 南京化学试剂有限公司,批号:11010310002);实验用水均为纯化水。
香菇多糖的生产一、简介多糖(polysaccharide)是由糖苷键结合的糖链,至少要超过10个以上的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物,可用通式(C6H10O5)n表示。
由相同的单糖组成的多糖称为多糖,如淀粉、纤维素和糖原;以没的单糖组成的多糖称为杂多糖,如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。
多糖不是一种纯粹的化学物质,而是聚合程度不同的物质的混合物。
多糖类一般不溶于水,无甜味,不能形成结晶,无还原性和变旋现象。
多糖也是糖苷,所以可以水解,在水解过程中,往往产生一系列的中间产物,最终完全水解得到单糖。
多糖(polysaccharide)是由多个单糖分子缩合、失水而成,是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。
凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。
目前,多糖的临床作用有免疫调节、抗病毒及抗癌、降血糖、治疗肝肾疾病及消炎镇痛、美容、乳化等,除此之外,Sakata Shigenobu等通过对多种单糖、多糖及其衍生化糖类(如醛糖、黏多糖、多糖酵解后的糖)进行发酵或提取,得到一类稳定、安全的试剂,它可减少典型的有害物(如二氧芑、氰基化合物、多氯联苯等)对环境和人体的侵害,是极有意义的环保试剂。
Watanabe Sa J用一种以吸附多糖(如淀粉)的羟磷灰石作载体的培养基质培养造骨细胞。
此载体的特点在于不用加入血清、细胞生长因子等物质就可刺激造骨细胞生长因子受体,而且它可避免在培养某种造骨细胞时,由于血清种类的特异性而必须筛选最适血清所耗费的大量人力、财力,因而此项发明的问世无疑大大地降低了造骨细胞的培养费用,具有极高的经济价值和社会价值。
二、香菇提取物香菇(Lentinus edodes)在日本和中国已有数千年的使用历史。
其同时作为一种食物和药用植物而闻名。
很长时间以来,人们都相信香菇可以增长精力,治疗感冒和去除肠道寄生虫。
香菇含有脂肪,碳水化合物,蛋白质,纤维,维他命和矿物质。
然而,其关键成分则是被称作香菇多糖的多糖。
正式名:香菇多糖汉语拼音:Xianggu
标准号:WS-291(X-256)-97 拉丁文或英文:Lentinan
主要活性成分:香菇[Lentinus edodes(Berk)sing]子实体提取、精制的多糖。
按干燥品计算,含香菇多糖应不得少于%。
性状:类白色或浅黄色粉末;无味,有引湿性。
在水、甲醇、乙醇或丙酮中几乎不溶;在L氢氧化钠中溶解。
比旋度取本品,置五氧化二磷干燥器中,减压干燥至恒重,精密称取适量,加L氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含10mg的溶液,依法测定(中国药典),范围在+2~+15之间。
鉴别:(1)取含量测定项下的溶液2ml,加蒽酮溶液(取蒽酮35mg置100ml量瓶中加硫酸溶解,并用硫酸稀释至刻度,即得,临用配制)5ml,振摇混匀,置水浴中加热,应显蓝绿色。
(2)取本品约10mg,滴加水少许研磨,再加水制成每1ml中含的溶液,置匀浆器中制成匀浆液,取10ml,加高碘酸钠溶液[取高碘酸钠(NaIO4)4.28g,加L硫酸溶液。
溶解并稀释至1000ml]1ml,摇匀,立即取反应液4ml,以水为空白对照,照分光光度法(中国药典1995年版二部附录ⅣA),在295nm的波长处测定吸收度(A1),剩余的反应液置避光容器中。
于3O℃连续搅拌6小时后,取出,测定吸收度(A2)。
两次吸收度之差(A1-A2)应为~。
(3)红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致,在89Ocm-1上附近有弱吸收峰。
检查:酸碱度取本品,加水制成%的匀浆液,依法测定(中国药典1995年版二部附录Ⅵ H),pH值应为~。
特性粘数取本品,置五氧化二磷干燥器中,减压干燥至恒重,精密称取适量,加L 氢氧化钠溶液数滴,使充分溶胀,研磨均匀,在25~30℃放置6~8小时,使完全溶解,制成每1ml中含的溶液,摇匀,依法测定(中国药典1995年版二部附录ⅥG第三法),特
性粘数应为60~130。
干燥失重取本品适量,置五氧化二磷干燥器中,减压干燥至恒重,减失重量不得过3. 5%(中国药典1995年版二部附录Ⅷ L)。
含量测定:
对照品溶液的制备取香菇多糖对照品25mg,精密称定,加L氢氧化钠溶液10ml,研磨,使溶解,加水分次转移至1000ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的制备取本品25mg,精密称定,照对照品溶液的制备项下,自“加L氢氧化钠溶液……”起,依法制备,即得。
测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各,分别沿管壁缓缓加至已精密加入蒽酮溶液5ml的试管中,使分层(以上操作均在冰浴中进行),待剧烈振摇混匀后,立即置沸水浴中加热,自振摇起计时,准确反应6分钟,将试管移至冰浴中冷却后,放至室温。
自振摇起,应在20~40分钟内,以水为空白,照分光光度法(中国药典1995年版二部附录Ⅳ)在625nm的波长处测定吸收度,计算,即得。
蒽酮硫酸溶液的配制取蒽酮(分析纯)35mg置100ml量瓶中加硫酸溶解,并用硫酸稀释至刻度即得,临用配制。
作用与用途:抗癌辅助用药。
剂量:静脉滴注或静脉注射,一次1mg,每周二次。
制剂:静脉滴注或静脉注射,一次1mg,每周二次。
贮藏:密闭,在干燥处保存。
有效期:暂定为二年
注意:1.目前尚无用于婴幼儿的临床经验,婴幼儿慎用。
2.注意过敏反应发生的可能性。
3.加入溶剂后要用力振摇使其完全溶解,即刻使用。
4.应遵医嘱使用。