基因工程试题

基因工程试题

一、选择题（每题1分，共15分）

1、下列有关基因的叙述，错误的是【 A 】

A蛋白质是基因表达的唯一产物

B 基因是 DNA 链上具有编码功能的片段

C 基因也可以是 RNA

D 基因突变不一定导致其表达产物改变结构

2、基因工程的单元操作顺序是【 B 】

A 增，转，检，切，接 B 切，接，转，增，检

C 接，转，增，检，切 D 切，接，增，转，检

3、生物工程的上游技术是【 A 】

A 基因工程及分离工程 B 基因工程及发酵工程

C 基因工程及酶工程 D 基因工程及细胞工程

4、下列各组专业术语中，含义最为接近的是 【 C 】

A 终止子与终止密码子 B 基因表达与基因转译

C DNA 退火与 DNA 复性 D 重组子与转化子

5、根据酶切活性对盐浓度的要求，限制性核酸内切酶可分成【 B 】

A 2 大类 B 3 大类 C 4 大类 D 5 大类

6、T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是【 D 】

A 2' -OH 和 5' –P B 2' -OH 和 3' -P

C 3' -OH 和 2' –P D 5' -OH 和 3' -P

7、下列有关连接反应的叙述，错误的是【 A 】

A 连接反应的最佳温度为 37 ℃

B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%

C 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM

D 连接酶通常应过量 2-5 倍

8、原生质体转化方法不大适用于 【 A 】

A 大肠杆菌 B 枯草杆菌 C 酵母菌 D 链霉菌

9、下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是 【 A 】

1. 基因工程的四大要素是 、 、

和

。目的基因，工具酶，载体，受体细胞

2．乙醇沉淀DNA的原理是 。乙醇使DNA分子脱水

3．在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的因素主要有 、

和 。核酸酶降解，化学降解，物理剪切

4.基因工程是在上世纪 年代发展起来的遗传学的一个分支学科。Cohen等在

年构建了第一个有功能的重组DNA分子。

碱法分离质粒DNA时，溶液Ⅰ的作用是 ，溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的作用分别是使DNA 。悬浮菌体，变性和复性。

5．通常可在三种温度下保存DNA：4~5℃、-20℃、-70℃，其中以

最好。-70℃

1．关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确？（ d ）

（a） 溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体

（b） 溶液Ⅱ的作用是使DNA变性

（c） 溶液Ⅲ的作用是使DNA复性

（d） 质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性

2．同一种质粒DNA，电泳时，三种不同形式的迁移速度是（ a ）

（a） SC DNA＞L DNA＞OC DNA （b） SC DNA＞OC DNA＞L DNA

（c） OC DNA＞SC DNA＞L DNA （d） L DNA＞SC DNA＞OC DNA

3．用碱法分离质粒DNA时，因为（ c ）所以可以被除去

（a） 染色体DNA断成了碎片

（b） 染色体DNA分子量大，而不能释放

（c） 染色体DNA变性后来不及复性

（d） 染色体末同蛋白质分开而沉淀

1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程？

答：①基因组DNA的提取；②PCR扩增目的基因；③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接；④重组质粒的转化及转化子的筛选；⑤重组质粒的抽提；⑥重组质粒的酶切鉴定。

2.如何正确使用微量移液器？

答：①选取合适量程的移液器；②根据取液量设定量程；③安装（吸液）枪头；④按至第一档，将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液；⑤按至第二档将液体打入容器；⑥弃掉枪头；⑦将量程调至最大，放回原处。

3.在琼脂糖凝胶电泳点样时，DNA通常和什么试剂混匀，其主要成分和作用是什么？

答：loading Buffer。主要成分为溴酚蓝，二甲苯青和甘油。

溴酚蓝和二甲苯青起指示作用；甘油加大样品密度，从而沉降于点样孔中，以免浮出。

4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。

答：①取0.5g琼脂糖置于锥形瓶，量取50ml 1×TBE溶液于瓶中，微波炉加热至琼脂糖溶解；②将移胶板放入胶室中，选取合适梳子垂直安插在移胶板上方，待琼脂降温至55℃下后，缓慢导入该胶室里；③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽，并正确插好电泳线；④等凝胶凝固后，将梳子垂直拔出；⑤点样；⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置；⑦打开电泳仪的开关，调好参数，开始电泳；⑧一定时间后，停止电泳，取出凝胶板，然后经BE染色放入成像系统显色、观察。

5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响？（实验书P75）

答：①样品DNA的大小和构象；②琼脂糖浓度；③电泳电场；④温度；⑤缓冲液；⑥嵌入染料的存在与否；

6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么？（实验书P31）

答：注意不要吸取中间的变性蛋白质层。

7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？

答：酚——是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿——除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇——降低表面张力，从而减少气泡的产生。

1 一、 名词解释 1、基因组DNA文库：将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后，与载体DNA重组，再全部转化宿主细胞，得到含全部基因组DNA的种群，称为基因组DNA文库。 2、DNA的复性：将变性DNA经退火（低于变性温度约25～30℃的条件下保温一段时间）处理，使其重新形成双螺旋结构的过程，称为DNA的复性。

3、 克隆化：获取同一拷贝的过程，即无性繁殖。 4、 Tm：加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的变性温度（融解温度，Tm）。

5、 选择标记基因：是指该基因的表达产物对选择剂产生抗性，致使转化细胞不受选择剂影响，能正常生长、发育、分化，从而把转化体选择出来的一类基因。 6、 基因和基因组 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。一个生物体的全部DNA序列称为基因组（genome） 7、分子杂交 不同来源的单链核酸（DNA或RNA），只要它们具有大致相同的碱基序列，经过退火处理，就能重新形成杂种双螺旋，这一现象称为分子杂交。

8、生物技术：也称生物工程，是人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理，按照预先的设计，改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。

9、载体：把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具称为载体。 10、cDNA文库：即由mRNA经过反转录成cDNA,然后来构建文库，构建的文库不包含内含子。

11、转化:外源DNA导入宿主细胞的过程称之为转化。

12、黏性末端：指DNA分子在限制性内切酶的作用下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结构，它们能够通过互补碱基间的配对而重新连接起来。

13、重叠基因：一个基因序列中，含有另一基因的部分或全部序列。

14、基因组文库：把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中，这个群体即为这种生物的基因组文库。