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中药含药血清药理研究办法一、实验目的了解中药在人体内的代谢过程、药效和药物动力学参数，为中药药学和临床应用提供科学依据。
二、实验步骤1.药物制备和质量控制选取质量可靠且稳定的中药材，通过研磨、浸提、浓缩等方法制备中药提取物。
制备的中药提取物应符合药典规定的质量标准，并通过质量控制方法验证。
2.动物试验设计选择适当的动物模型和实验动物，如小鼠、大鼠、猪等。
将实验动物随机分为实验组和对照组，其中实验组接受中药提取物的给药，对照组接受对照物的给药。
3.中药给药和采血根据实验设计，将中药提取物按照合适的剂量给予实验动物。
给药途径可以选择静脉注射、口服、皮下注射等。
给药后，根据预定的时间点采集动物的血液样本，可以选择尾静脉、眼眶窝静脉或颈静脉作为采血点，使用适当的采血管和采血方法。
4.血清分离和保存采集的血液样本需要离心分离，将血清分离出来并保存。
可以使用离心机进行血液离心，选择适当的离心转数和时间。
分离好的血清样品可以保存在低温冰箱中，以防止酶的降解和样品的氧化。
5.药物代谢分析对血清样品进行药物代谢分析，可以通过以下方法进行：（1）高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）分析中药中的有效成分，确定其在血液中的含量。
（2）液相色谱法（HPLC）分析血液中药物代谢产物，了解中药在体内代谢的产物和代谢途径。
6.药物药效研究通过实验数据和药物代谢分析结果，可以评价中药的药效。
可以使用动物模型进行药理学实验，了解中药的药效和药理学特性。
7.药物动力学参数计算通过实验数据进行计算，得到中药的药物动力学参数，如药物的半衰期、体内清除率（Cl）、生物利用度（bioavailability）等。
可以使用计算软件进行统计分析和计算。
8.结果分析和报告撰写根据实验结果进行数据分析和统计，撰写实验结果的报告，并提出实验结论和进一步研究方向。
三、实验注意事项1.中药提取物的制备过程中应注意保证中药提取物的稳定性和质量。
中药含药血清药理研究方法Pharmacological method of the drug-contained serum for Chinese Materia Medica in vitro概述中药血清药理研究方法：是指动物灌胃给予中药及制剂，经吸收进入机体血液循环，在一定时间内采取血液，分离所得血清，必定含有一定量的该药物成分，此时的血药浓度反映了机体的真实血药浓度，以此血清加入到体外细胞培养体系，观察其药理作用的体外实验方法。
中药血清药理学研究方法的意义：1、采取的含药物血清与机体内环境相一致且排除了中药制剂的各种影响因素（如pH，渗透压等），将其加入到体外细胞培养体系，观察其药理作用，具有更好的科学性，可行性；同时，使中药的研究易于深入到细胞分子水平，对于创建中药细胞分子药理学研究具有重要的促进作用。
2、于灌胃给药后不同时间采取的血清，其体外药理实验的效应及其变化，可以反映机体真实的血药浓度及其变化，无疑开创了对于许多成分不明或复方中药制剂药动学研究的一种新方法。
3、如采用中药血清药理学方法进行中药药效学研究时，同时分析测定血清中药物成分的含量，具有极强的针对性，可避免盲目地筛选药物有效成分的繁重工作，使中药药效与中药成分的研究更能协调一致。
从1988年日本学者田代真一正式提出了“血清药理学”这一新概念，至今已有十余年时间。
其研究主要经历了三个阶段：1、可行性探索研究2、方法学研究3、应用研究阶段。
可行性探索研究以含药血清进行体外的药效学试验，早在上世纪五十年代国内即有所探索，自田代真一提出“血清药理学”的概念以后，重新引起了学术界的广泛关注。
国内学者对其进行了广泛的可行性探索研究。
一.抗菌、抗病毒的实验研究杨奎等应用中药血清药理方法进行了中药体外抗菌实验，发现黄芩、藿香正气水、藿香正气液的血清分别具有明显的抑菌作用，抑制率高达70％以上。
该研究发现一些含中药血清相对于正常血清表现为促进细菌繁殖作用，表明一些中药可以降低机体抗御外邪的能力。
中药血清药理学实验方法摘要：本文通过从中药血清药理方法学中实验动物、给药剂量、给药方案、采血方案、血清灭活与保存、血清添加量等实验条件的确立进行了阐述，从而建立最佳的实验方案进行研究。
并对血清药理学的不足做了简单的介绍，以及对其以后的发展进行了展望。
关键字：中药；血清药理学；给药方案；采血方案；血清处理血清药理学是日本学者Hiroko Iwama[1]在1948年第一届和汉医药学会上首次提出的。
中药血清药理学是指将中药或中药复方经口给动物灌服一定时间后采集动物血液、分离血清，以含药血清代替中药粗提物作为药物源加入离体反应系统中从而研究其药理作用的一种半体内实验方法。
近年来，我国越来越多的中药专家应用此法来研究中药药理作用。
主要针对中药及其复方复杂多样的化学成分特点，用含药血清代替煎剂或粗提物进行体外实验，它克服了中药粗制剂直接进行体外实验的缺点，其结果的可信度明显优于中药粗制剂直接用于体外实验。
血清药理学中医药研究中所表现出的优势[2]：①从方法学上解决了中药复方直接应用于离体实验的难点，使中医药研究能在离体实验中直接与分子生物学技术相结合，从而推动中医药现代化的进程；②从中药复方本身来讲，可克服体外实验不能直接观察到的复方经体内胃肠吸收、生物转化后的综合整体药理效应；③对含药血清的成分进行药效、药动学研究，可以发现中药复方发挥药效作用的物质基础，为探讨中药复方作用规律提供新思路；④可以用来验证一些中医学基础理论。
血清药理学实验方法可以避免了中药直接进行体外用药所产生的影响，直接反映中药及其代谢产物的药理作用，从而相对有效地阐释中医药治病的科学机理，可以为中医药现代化研究研究提供依据。
1、实验动物的选择在目前中药血清药理学研究中，常用大鼠、家兔、豚鼠等动物来制备含药血清。
但动物的种属不同，其血清成分也有所不同，所以要尽量选择和人类生物学特征相近的物种[3]，从而缩小动物血清和人类血清在生理、生化等状态下的差异，减少因种属差异而造成的免疫反应，提高实验结果的可靠性[4]，否则其研究结果不会有太大的意义。
一种用于体外细胞培养的中药含药血清制备及鉴定方法在当今的医学研究中，体外细胞培养是一个非常重要的研究领域，它为疾病的治疗和理解提供了基础。
而在体外细胞培养中，血清是不可或缺的一部分。
传统上，常用的是胎牛血清或新生牛血清。
但是，由于这些血清来源的限制和质量的不稳定性，人们开始寻找其他替代品。
中药含药血清便是其中之一。
中药含药血清制备及鉴定方法对于保证体外细胞培养的质量和稳定性至关重要。
本文将从深度和广度两个方面来探讨这一主题。
1. 中药含药血清制备方法中药含药血清的制备方法多种多样，但其中最常见的是将中药提取物与动物血清混合，然后通过一系列的处理方法将其制备成符合体外细胞培养要求的含药血清。
其中的关键步骤包括中药提取物的获取、血清的制备、混合和稳定剂的添加等。
这一过程需要严格控制，以确保最终的中药含药血清符合质量要求。
2. 中药含药血清的鉴定方法为了确保中药含药血清的质量和稳定性，需要对其进行全面的鉴定。
这包括对其中药提取物的成分分析、血清的纯度和稳定性测试、混合和稳定剂的含量测定等。
这些鉴定方法需要依托先进的分析仪器和技术，以确保测试结果的准确性和可靠性。
从个人的角度来看，中药含药血清的制备及鉴定方法的研究对于中医药的现代化和国际化具有重要意义。
通过科学的方法和严格的标准，我们可以更好地利用中药资源，为体外细胞培养提供更可靠的血清来源，并且可以把中医药的疗效更好地展现给世界范围内的患者。
中药含药血清制备及鉴定方法是一个重要且复杂的研究领域，其深度和广度需要我们不断地去探索和完善。
只有通过科学严谨的研究和实践，我们才能更好地利用中药资源，推动中医药的现代化进程，为人类健康事业做出更大的贡献。
中药含药血清制备及鉴定方法是一个日益受到重视的研究领域。
在现代医学和生物技术领域，体外细胞培养技术已成为不可或缺的工具，用于疾病模型研究、药物筛选以及组织工程等领域。
而血清作为细胞培养基质中的重要成分，在维持细胞生长和功能方面发挥着关键作用。
中药含药血清药理研究方法Pharmacological method of the drug-contained serum for Chinese Materia Medica in vitro概述中药血清药理研究方法：是指动物灌胃给予中药及制剂，经吸收进入机体血液循环，在一定时间内采取血液，分离所得血清，必定含有一定量的该药物成分，此时的血药浓度反映了机体的真实血药浓度，以此血清加入到体外细胞培养体系，观察其药理作用的体外实验方法。
中药血清药理学研究方法的意义：1、采取的含药物血清与机体内环境相一致且排除了中药制剂的各种影响因素（如pH，渗透压等），将其加入到体外细胞培养体系，观察其药理作用，具有更好的科学性，可行性；同时，使中药的研究易于深入到细胞分子水平，对于创建中药细胞分子药理学研究具有重要的促进作用。
2、于灌胃给药后不同时间采取的血清，其体外药理实验的效应及其变化，可以反映机体真实的血药浓度及其变化，无疑开创了对于许多成分不明或复方中药制剂药动学研究的一种新方法。
3、如采用中药血清药理学方法进行中药药效学研究时，同时分析测定血清中药物成分的含量，具有极强的针对性，可避免盲目地筛选药物有效成分的繁重工作，使中药药效与中药成分的研究更能协调一致。
从1988年日本学者田代真一正式提出了“血清药理学”这一新概念，至今已有十余年时间。
其研究主要经历了三个阶段：1、可行性探索研究2、方法学研究3、应用研究阶段。
可行性探索研究以含药血清进行体外的药效学试验，早在上世纪五十年代国内即有所探索，自田代真一提出“血清药理学”的概念以后，重新引起了学术界的广泛关注。
国内学者对其进行了广泛的可行性探索研究。
一.抗菌、抗病毒的实验研究杨奎等应用中药血清药理方法进行了中药体外抗菌实验，发现黄芩、藿香正气水、藿香正气液的血清分别具有明显的抑菌作用，抑制率高达70％以上。
该研究发现一些含中药血清相对于正常血清表现为促进细菌繁殖作用，表明一些中药可以降低机体抗御外邪的能力。
同时，该研究还发现，不论是中药复方，还是单味中药，均可出现多个抑菌高峰，表明中药抗菌有效成分复杂，其吸收高峰不相一致，可以对细菌给予多次打击，有利于抑制其繁殖。
崔晓兰等应用口饲桂枝汤的含药血清进行研究，发现每日1次连续3天，末次给药后2小时的血清有明显抑制副流感病毒致细胞病变的作用，该研究还发现，桂枝汤煎剂本身并无直接抗副流感病毒作用，而口饲桂枝汤后的中药血清则有明显作用。
因此，血清药理研究可以防止假阴性实验结果的出现。
二.对单核细胞产生内生致热原的研究杨奎等观察了口饲黄芩、香薷、羌活胜湿汤、九味羌活丸的含药血清对家兔单核细胞内生致热原产生过程中单核细胞内DNA、蛋白质合成速度及Ca2+内流的影响。
结果显示，口饲黄芩的含药血清能明显抑制单核细胞内DNA合成，抑制Ca2+内流，并推测出黄芩解热机理之一是通过抑制单核细胞内DNA合成，抑制Ca2+内流而阻断内生致热原的合成。
含香薷血清、含羌活胜湿汤血清、含九味羌活丸血清三者对单核细胞内DNA合成均有明显抑制作用；对单核细胞Ca2+内流的影响，香薷和九味羌活丸均呈量效递增性抑制作用；时效关系表明，九味羌活丸对Ca2+内流的抑制作用在给药后90min达高峰，对DNA合成的抑制作用在给药后30min和90min作用较明显。
三.抗肿瘤作用的实验研究王力倩等采用中药血清药理研究方法进行离体试验，观察了含苦参、仙鹤草的血清及其煎剂对肿瘤细胞体外生长的影响。
结果发现苦参、仙鹤草煎剂及含苦参血清均有明显的抗肿瘤活性，而含仙鹤草血清则无效。
初步证明苦参对肿瘤细胞体外生长确实有一定的细胞毒性作用，而含仙鹤草血清及其煎剂出现了不同实验结果的原因，可能与中药粗制剂因素有关，也可能受药物在体内代谢过程及血清等因素的影响。
该研究提示，含药血清药理研究对中药抗肿瘤作用的评价有一定的意义。
四.对造血系统的实验研究张英华等用血清药理方法研究了当归补血汤对造血祖细胞的影响，发现含当归补血汤的血清对小鼠粒系一巨系造血祖细胞（CFU－GM）、红系造血祖细胞（CFU－E）的增殖有明显的促进作用，随着含药血清量的增加，CFU－GM、CFU－E的增殖数越高。
提示当归补血汤能刺激骨髓造血祖细胞，从而有可能增强粒系一巨系、红系细胞的生长、成熟而达生血补血的作用。
拆方研究表明当归补血汤刺激粒系、巨系造血祖细胞增殖的作用主要源于当归，而对红系造血祖细胞的作用以黄芪为主。
表明当归、黄芪对不同的造血祖细胞的作用各有侧重，又互相合作，共同调节机体的造血补血机能。
而当归补血汤煎液对CFU－GM的生长有抑制作用，剂量越大，抑制作用越强；同时，当归补血汤水煎液不能刺激CFU－E的增殖。
这与当归补气补血的作用不相符。
由此可见，血清药理体外实验方法克服了中药粗提物进行体外实验的弊端，是一种更为科学有效的中药复方体外实验方法。
五.对呼吸系统的实验研究董自波等以金荞麦片为供试药物，观察了含药血清对离体豚鼠回肠的松弛作用。
结果发现，口服临床等剂量的金荞麦片的含药血清能明显抑制组胺引起的离体豚鼠回肠的收缩，表明金荞麦片具有H1受体阻断剂的作用，能改善气管炎过敏的临床症状，时效关系表明等效剂量的金荞麦片给予豚鼠40分钟出现效应，80分钟到达峰值，160分钟效应开始衰减，效应至少可以维持160分钟。
量效关系表明：3倍与9倍临床等效剂量效应呈比例的增加。
黄坚等发现小青龙汤药物血清具有显着抗组织胺引起的离体豚鼠气管平滑肌收缩作用，且呈良好的量效关系，与直接煎剂进行离体药理实验具有相似的药理效应。
该实验提示小青龙汤中的抗组织胺的有效成分可通过胃肠道吸收，进入血液而起作用，其有效成分的达峰时间约为2小时，表明血清药效实验的可靠性及可信度在某些方面优于通常的药理实验。
六.对心血管系统的实验研究张群豪等采用血清药理方法观察到口饲血府逐瘀浓缩丸的含药血清对实验性动脉粥样硬化家兔主动脉平滑肌细胞（SMC）增殖有明显抑制作用，并呈剂量依赖性。
血府逐瘀汤煎剂直接加入培养基中也呈现出对SME繁殖的抑制作用，且煎剂浓缩液作用强于含药血清。
表明血府逐瘀浓缩丸在体内外确均有抑制SMC增殖的作用，血府逐瘀浓缩丸确含抗SMC增殖的有效成分，并且此成分口服有效。
血府逐瘀煎剂浓缩液的抑制作用比含药血清强，可能与某些有效成分未能从消化道吸收或经体内代谢失活有关。
王伟等用血清药理研究方法观察到血府逐瘀胶囊、精制血府胶囊、硫氮酮三组药物的含药血清可显着降低缺氧缺糖心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH－L）、肌酸激酶（CK）、谷草转氨酶（GOT）的释放，且精制血府胶囊组、硫氮酮组更为显着。
提示精制血府胶囊组对心肌细胞的保护作用强于血府逐瘀胶囊。
刘强等观察了清心饮对大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3病毒的影响，发现清心饮的含药血清可明显减轻实验性病毒心肌炎的细胞病变，改善细胞搏动，降低细胞上清液中的病毒滴度，减少感染心肌细胞乳酸脱氢酶、天冬氨酸氨基转移酶的释放，显着抑制柯萨奇B1病毒核糖的复制。
清心饮的水煎剂液体体外实验也有上述药理作用，由此提示清心饮中含抗病毒、保护心肌细胞的有效成分，口服有效。
针对以往附子强心作用的研究均采用体外实验或静脉直接给药的方法，而无口服给药的结论。
陈长勋等采用中药血清药理方法观察了附子对离体豚鼠左心房收缩力的影响。
结果发现，与未服药动物血清比较，口服附子粗制剂后动物血清有明显增强心肌收缩力和加快心肌收缩速度的作用，给药后2小时血清作用达高峰。
证明附子血清与附子制剂直接给药两者对心肌的正性肌力作用基本相似，说明其强心有效成分确能经胃肠吸收入血，且不会经吸收立即被代谢失活。
七.对神经系统的实验研究刘国卿等采用具有典型神经内分泌细胞特征的PC12细胞株为实验模型，用血清药理方法观察了口饲“李氏5号方”的含药血清对神经元的影响。
结果发现含药血清作用24小时、48小时、72小时时均能剂量依赖性地促进PC12细胞的增殖，对NaCN加缺糖致PC12细胞缺血样损伤模型表现出明显的抑制和保护作用，并呈现一定的量效关系。
江雪华等采用新生小鼠大脑皮层进行体外神经细胞培养，建立离体的神经细胞谷氨酸损伤模型，运用血清方法，进一步观察了含“李氏5号方”的血清对原代培养皮层神经细胞谷氨酸损伤的影响。
结果表明“李氏5号方”水煎剂（含挥发油成分）虽能抑制原代培养皮层神经细胞损伤，但作用不如其含药血清强，同时，含药血清抑制神经损伤的药理作用呈剂量依赖性，提示“李氏5号方”可拮抗兴奋性氨基酸神经毒性。
八.对肝细胞的实验研究刘成海等观察了扶正化瘀方对培养大鼠贮脂细胞功能的影响，结果表明，该复方血清能明显抑制贮脂细胞增殖，且抑制程度与药物剂量及其血清浓度有关，而且对贮肝细胞内外胶原生成也有一定的抑制作用。
季光等研究发现，扶正化瘀方血清能显着促进正常及损伤肝细胞培养上清液中ALT、AST活性，抑制正常及损伤肝细胞的胶原生成率。
刘成海等采用扶正化瘀方的血清直接添加于培养的肝纤维化病理形成的重要细胞—大鼠肝细胞及星状细胞。
结果表明：含药血清能抑制星状细胞增殖、促进肝细胞增殖。
提示扶正化瘀方有利于损伤肝细胞的修复、有助于抑制舌状细胞活化及其细胞基质生成，显示该方的抗纤维化作用机理之一。
王晓玲等采用血清药理方法进一步研究了扶正化瘀方抗肝纤维的配伍作用，结果表明，扶正化瘀方及其拆方含药血清均可抑制星状细胞的活化、增殖，抑制其胶原、TGFβ1的基因表达与蛋白生成。
其中化瘀组抑制增殖和活化的作用最为突出，扶正组抑制胶原的作用最显着，虫草菌丝的抑制TGFβ1作用最强。
证实了“药有个性之特长，方有合群妙用”。
九.对免疫功能调节的研究曾南等[23]观察了含虫草的血清对IL－2活性的影响，发现1.25g/kg剂量组能增强IL－2活性，但7.5g/kg、3.5g/kg剂量组作用不明显，相反3.5g/kg剂量组却出现抑制作用，这可能与血清的稀释度及其内容物有关。
阴赪宏等应用血清药理方法观察了当归补血汤对小鼠白细胞的活化作用。
时效关系研究表明，当归补血汤13.2g饮片／kg体重灌胃小鼠后6~60min等不同时相的含药血清对小鼠白细胞均具有活化作用，量效关系表明，当归补血汤6.60~33.0g饮片／kg体重分别灌胃小鼠后的含药血清对小鼠白细胞均具有活化作用。
十.对泌尿系统的实验研究赵宗江等用血清药理方法，观察了含温阳降浊汤药物成分的大鼠血清对体外培养的肾小球系膜细胞（MsC）增殖有明显的抑制作用，且与血清中的药物含量成正比例关系，提示温阳降浊汤抑制MsC增殖可能是该药防治肾小球硬化、延缓慢性肾功能衰竭进展的重要机理之一。
由此可见，中药血清药理研究方法开辟了中药研究的新思路，拓宽了研究领域，提高了中药（尤其是中药复方）体外实验的可信度。
