TRAIL联合顺铂诱导卵巢癌耐药细胞株COC1／DDP凋亡机制的研究

四川大学学报（医学版）Ｊ　Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖ（Ｍｅｄ　Ｓｃｉ　Ｅｄｉ）　２０１２；４３（３）：３３５－３３９ 姜黄素促卵巢癌耐药细胞株ＣＯＣ１／ＤＤＰ凋亡机制探索＊林　琳，王　平△，赵晓兰四川大学华西第二医院妇产科（成都６１００４１） 【摘要】　目的　研究姜黄素对耐药卵巢癌细胞的促凋亡作用及其可能的机理。

方法　用ＭＴＴ法检测不同浓度姜黄素、化疗药物〔顺铂（ＤＤＰ），紫杉醇〕及姜黄素联合化疗药物（姜黄素＋顺铂，姜黄素＋紫杉醇）作用于卵巢癌耐药细胞株ＣＯＣ１／ＤＤＰ细胞４８ｈ后各组的细胞抑制率，并用流式细胞仪检测上述各组细胞的凋亡率。

ＲＴ－ＰＣＲ技术检测姜黄素、顺铂、姜黄素＋顺铂作用于ＣＯＣ１／ＤＤＰ细胞４８ｈ后各组的磷脂酰肌醇３－激酶催化亚基（ＰＩ３ＫＣＡ）ｍＲＮＡ的表达。

结果　不同浓度姜黄素作用ＣＯＣ１／ＤＤＰ　４８ｈ后，细胞的抑制率和凋亡率随着姜黄素浓度的升高相应增高，姜黄素联合化疗药物作用组比单用化疗药物组的细胞抑制率及细胞凋亡率高（Ｐ＜０．０５）。

顺铂与姜黄素联合用药与顺铂单独作用相比ＰＩ３　ＫＣＡｍＲＮＡ的表达降低（Ｐ＜０．０５）。

结论　姜黄素能够促进卵巢癌耐药细胞株ＣＯＣ１／ＤＤＰ的凋亡，这一作用可能与姜黄素和化疗药物协同诱导该细胞系的凋亡有关，其机制可能为降低ＰＩ３　ＫＣＡ基因的表达。

【关键词】　卵巢癌　ＣＯＣ１／ＤＤＰ　姜黄素　顺铂　细胞凋亡　磷脂酰肌醇３－激酶催化亚基Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｃｕｒｃｕｍｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ　Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　Ｏｖａｒｉａｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｃｅｌｌ　Ｌｉｎｅｓ　ＣＯＣ１／ＤＤＰ　ＬＩＮ　Ｌｉｎ，ＷＡＮＧ　Ｐｉｎｇ△，ＺＨＡＯ　Ｘｉａｏ－ｌａｎ．　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ　ａｎｄ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ，Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１００４１，Ｃｈｉｎａ△Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｐｉｎｇ＿８８６＠１２６．ｃｏｍ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ　ＣＯＣ１／ＤＤＰ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＣＯＣ１／ＤＤＰ　ｃｅｌｌｓ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ，ｗｉｔｈ　ｏｒ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｔｈｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　ｄｒｕｇｓ　ｃｉｓｐｌａｔｉｎ（ＤＤＰ）ａｎｄ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ（ＰＩＸ）ｆｏｒ　４８ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ＣＯＣ１／ＤＤＰ　ｃｅｌｌｓ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｒａｔｉｏｓ　ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｉｄｅ　３－ｋｉｎａｓｅ　ｃａｔａｌｙｔｉｃ　ｓｕｂｕｎｉｔ（ＰＩ３ＫＣＡ）ｍＲＮＡ　ｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ　ｂｙ　ＲＴ－ＰＣＲ　ｉｎ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｃｅｌｌｓ，ＤＤＰ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ａｆｔｅｒｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｆｏｒ　４８ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｒａｔｅｏｆ　ＣＯＣ１／ＤＤＰ　ｃｅｌｌｓ　ｗｅｒｅ　ｇｒａｄｕａｌｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇｌｙ　ｗｉｔｈ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｆｕｒｔｈｕｒｍｏｒｅ，ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｉｎ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　ｄｒｕｇ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｈｉｇｈｅｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｒａｔｅ　ｔｈａｎ　ｓｉｎｇｌｅｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　ｄｒｕｇ　ｄｉｄ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＰＩ３　ＫＣＡｍＲＮＡ　ｏｆ　ＣＯＣ１／ＤＤＰ　ｃｅｌｌｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｕｒｃｕｍｉｎｃｏｍｂｉｎｅｄ　ＤＤＰ　ｗａｓ　ｍｕｃｈ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｏｎｌｙ　ｗｉｔｈ　ＤＤＰ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｃａｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅａｐｏｐｔｏｔｉｃ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＣＯＣ１／ＤＤＰ　ｃｅｌｌｓ，ｓｏ　ｈａｓ　ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｗｉｔｈ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　ｄｒｕｇｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｉｔｓ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｍａｙ　ｂｅ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＰＩ３ＫＣＡ．【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】 Ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ ＣＯＣ１／ＤＤＰ Ｃｕｒｃｕｍｉｎ Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ Ｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｉｄｅ　３－ｋｉｎａｓｅ　ｃａｔａｌｙｔｉｃ　ｓｕｂｕｎｉｔ 姜黄素（ｃｕｒｃｕｍｉｎ，Ｃｕｒ）是从姜黄根茎中提取的一种植物多酚，为橙黄色结晶粉末，易于提取，毒性小（小鼠灌胃的半数致死剂量＞２ｇ／ｋｇ）、来源广、价格低。

卵巢癌顺铂耐药细胞系的建⽴及耐药机制的研究
卵巢癌顺铂耐药细胞系的建⽴及耐药机制的研究
李宏;赵丽嫣;张松平
【期刊名称】《中国实⽤妇科与产科杂志》
【年(卷),期】2001(017)008
【摘要】@@ 顺铂(cisplatin,DDP)是⼀种有效的抗肿瘤药物,耐药的产⽣极⼤地影响卵巢癌患者对化疗的敏感程度,限制了其临床疗效[1].本研究采⽤中等浓度、间歇作⽤[2]的⽅法,于1998年12⽉到1999年5⽉建⽴了⼈卵巢癌细胞株SKOV3对顺铂耐药细胞系SKOV3/DDP,对耐药指数、细胞周期分布、细胞内⾕胱⽢肽(GSH)含量、拓扑异构酶Ⅱ(TOPⅡ)含量及活性进⾏检测,从细胞⽔平、分⼦⽣物学⽔平对其基本特征及耐药机制进⾏研究.
【总页数】2页(497-498)
【关键词】卵巢癌;顺铂;耐药细胞系;耐药机制
【作者】李宏;赵丽嫣;张松平
【作者单位】⼤连市妇产医院,;⼤连医科⼤学附属第⼀医院妇产科,;⼤连市妇产医院,
【正⽂语种】中⽂
【中图分类】R71
【相关⽂献】
1.依达拉奉对卵巢癌顺铂耐药细胞系A2780 CP耐药性的影响[J], 韩黎; 汪宏波; 李艳辉; 朱燕
2.反义LRP寡核苷酸对卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3顺铂耐药性的影响[J], 王薇; 邬素芳; 许先容; 陈刚; 徐茜; 李辅军; 廖国宁; 王世宣; 周剑峰; 卢运萍;。

姜黄素联合顺铂对卵巢癌细胞COC1的体外抗肿瘤作用关松磊;胡秀丽;刘忠英;宋凤瑞;刘志强【期刊名称】《应用化学》【年(卷),期】2011(28)9【摘要】Inhibiting effect of the curcumin(Cur) in combination with cw-diamminedichloroplatinum ( DDP) on proliferation of COC1 cells was analyzed with MTT colorimetric assay. The morphological changes of COC1 cells were observed by inverted microscope. The result indicated that DDP of 2. 5 -10 mg/L dose combined with curcumin(Cur) of 5 mg/L dose could enhance the inhibiting effect and induce apoptosis compared with the case when only DDP was used. Meanwhile, curcumin of 5 mg/L dose could improve the sensitization of COC1 cells to DDP with 2. 66 times. Optical microscopy results showed that COC1 cells had a marked decreased proliferation and a great amount of cells necrosis in DDP + Cur group and DDP group than the control group. COC1 cells had lower diopter, scatter array, serious vacuolization treated with DDP + Cur. The HPLC result indicated that the contents of DDP within tumor cells decreased lightly after dosage of Cur, but it had no statistically significant (P > 0. 05). In summary, curcumin combine with DDP can enhance the inhibiting effect on proliferation of COC1 cells, meanwhile, curcumin can improve the sensitization of COC1 cells to chemotherapeutics. However, the curcumin is unlikely to affect the amount of DDP within cells.%利用MTT比色法研究了姜黄素(Cur)联合顺铂(DDP)对卵巢癌COC1细胞的抑制作用.结果表明,当p(DDP)为2.5～10 mg/L,p(Cur)=5 mg/L时,与DDP相比,二者联合用药对卵巢癌COC1细胞可产生协同抑制作用；p(Cur)=5 mg/L就可明显增强COC1细胞对顺铂的敏感性,增敏倍数为2.66倍；光学显微镜观察发现,药物作用后COC1细胞的形态发生了改变,细胞折光度下降,大小不一、形态各异、排列疏散和胞浆空泡化严重.为探讨姜黄素协同顺铂抑制肿瘤的机制,本研究采用高效液相色谱法测定姜黄素辅助用药前后细胞内DDP含量的变化.结果表明,在加入姜黄素前后,COC1细胞内顺铂含量虽然略有下降,但差异无统计学意义(P＞0.05).由此可见,姜黄素与顺铂联合用药对人卵巢癌COC1细胞增殖具有协同抑制作用,且姜黄素可同时增加COC1细胞对顺铂的敏感性,但姜黄素可能并未明显改变顺铂在细胞内的含量,即姜黄素可能不是通过影响顺铂进入细胞的通路而起协同抑制作用的.【总页数】6页(P1022-1027)【作者】关松磊;胡秀丽;刘忠英;宋凤瑞;刘志强【作者单位】吉林大学药学院长春130021;吉林农业大学生命科学学院长春;吉林大学药学院长春130021;吉林大学药学院长春130021;中国科学院长春应用化学研究所,长春质谱中心长春;中国科学院长春应用化学研究所,长春质谱中心长春【正文语种】中文【中图分类】O629;R737.3【相关文献】1.顺铂诱导人卵巢癌细胞株COC1及COC1/DDP细胞凋亡的观察 [J], 蒋静;唐良萏;阳志宁;曾玉华2.姜黄素单独及联合顺铂对人卵巢癌细胞株3AO,SKOV3增殖及其对Notch1，Hes1信号表达的影响 [J], 相萌;刘棣3.姜黄素联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖的抑制作用 [J], 陈小芬;付能高4.顺铂诱导人卵巢癌细胞株COC1及COC1／DDP细胞凋亡的观察 [J], 蒋静; 唐良萏; 阳志宁; 曾玉华5.雷公藤内酯醇对耐顺铂人卵巢癌细胞株(COC1/DDP)体外活性影响机制的初步探讨 [J], 胡辉;谭布珍;袁铿;杨丽兰;胡银英;黄艳琴;朱四红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

TRAIL联合顺铂诱导骨肉瘤HOS-8603细胞凋亡研究【摘要】目的研究TRAIL联合顺铂诱导HOS-8603细胞的凋亡及其机制。

方法MTT法分别测定TRAIL，顺铂，和TRAIL+顺铂对HOS-8603细胞的抑制率，流式细胞法测定亚G1期细胞百分率及PI和Rh123双染色后细胞的ΔΨm。

结果三组分别由TRAIL、顺铂、TRAIL+顺铂处理过的HOS-8603细胞用MTT 法测抑制率分别为29%、33.6%、58.5%。

随着药物作用时间增加, HOS-8603细胞凋亡数增加和ΔΨm 降低(P＜0.01), 两者呈直线相关。

结论TRAIL和顺铂能协同诱导HOS-8603细胞凋亡，其机制可能是通过使线粒体膜通透性转运孔开放, ΔΨm降低来实现的。

【关键词】TRAIL；顺铂；细胞凋亡骨肉瘤是一种相对耐药的肿瘤,单药化疗的效果一直不很理想。

联合化疗多以铂类药物为主。

TRAIL是INF超家族成员，能选择性杀伤肿瘤细胞。

本实验旨在探讨TRAIL与铂类药物联合化疗方案的可行性，为骨肉瘤的临床治疗提供参考。

1 资料与方法1.1 实验材料HOS-8603细胞株购自中国医学科学院药物研究所; TRAIL、顺铂、CsA均购自Sigma公司(化学纯标准品)。

主要器材：流式细胞仪型号:EPICS ALTRAⅡ. American Beckman; 荧光酶标仪型号:GENIOS V A200,AUSTRIA TECAN。

1.2 药物配制将TRAIL用生理盐水溶解并分别配制成10ug/ml和50ug/ml 两种浓度的储藏液。

将顺铂、CsA分别用生理盐配制成10ug/ml的储藏液,备用。

1.3 凋亡细胞荧光染色HOS-8603 细胞以1×106接种于六孔板培养, 加入不同浓度的TRAIL+顺铂, 培养24 h后, 经DHanks液洗涤及荧光染料Hoechst33258和PI，37℃避光染色10 min，洗涤后在荧光显微镜下观察细胞形态及颜色改变。

P5增强卵巢癌细胞顺铂敏感性的体外研究胡晓明;范永娟;瞿全新【摘要】目的:探讨凋亡诱导核苷P5增强卵巢癌细胞顺铂(DDP)敏感性的作用,为临床改善卵巢癌患者的预后提供新方法.方法:选择卵巢癌细胞株COC1,以MTT法、Hoechst染色法,观察P5对卵巢癌细胞的生长抑制作用及其对DDP化疗的增敏作用.结果:小剂量P5(25 μg/mL)和大剂量P5(200 μg/mL)分别联合DDP共同作用于COC1细胞,DDP IC50值由2.51 μg/mL降至1.56～1.52μg/mL.Hoechst染色法观察,小剂量P5和大剂量P5联合DDP作用于COC1细胞株,细胞凋亡明显增加.结论:小剂量P5与大剂量P5均能增加COC1细胞对DDP的敏感性,P5 DDP化疗增敏作用与其增加肿瘤细胞凋亡有关.【期刊名称】《天津医科大学学报》【年(卷),期】2013(019)003【总页数】3页(P189-191)【关键词】卵巢癌;顺铂;P5;细胞凋亡【作者】胡晓明;范永娟;瞿全新【作者单位】天津医科大学第一中心临床学院妇产科,天津300192;天津医科大学第一中心临床学院妇产科,天津300192;天津医科大学第一中心临床学院妇产科,天津300192【正文语种】中文【中图分类】R737.31卵巢癌在女性生殖器恶性肿瘤中的发病率占第三位，但死亡率却居第一位。

尽管已广泛开展肿瘤细胞减灭术及以铂类为基础的联合化疗，但卵巢癌患者5年存活率仍徘徊于20%～30%[1]，10年生存率约4%～20%。

由于缺乏特异的临床症状和相应的早期诊断手段，大部分卵巢恶性肿瘤患者就诊时已属晚期，其中约有15%～25%的卵巢上皮癌患者对以铂类为基础的联合化疗方案原发耐药，而所有化疗病人至少80%会出现继发性顺铂（DDP）耐药，直接影响化疗效果及患者预后[2]。

近年来，越来越多的研究探讨凋亡机制与肿瘤化疗敏感性的关系。

P5是一种由人自然抑制细胞HNK-1（CD57）产生的凋亡诱导核苷（apoptosis inducing nucleosides,AINs），对正常细胞没有毒性，却能够诱导人白血病细胞凋亡，而且对胃癌、结肠癌、食管癌、前列腺癌、乳腺癌也起作用，而在卵巢癌中的作用却知之甚少。

顺铂诱导的人卵巢癌多药耐药细胞系基因表达谱分析曹漫明;张积仁;汪森明;胡喜钢;周媛【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2006(27)2【摘要】目的卵巢癌多药耐药性的产生是导致其化疗失败的主要原因,为研究卵巢癌耐药机制,本研究建立了人卵巢癌细胞多药耐药模型COC1/DDP,并进行了基因表达谱分析.方法以顺铂为诱导剂,采用中等剂量、间歇作用法建立多药耐药细胞系COC1/DDP,然后以其亲本细胞COC1为对照,应用cDNA微阵列检测COC1/DDP 细胞的基因表达.结果与COC1细胞相比,COC1/DDP细胞对顺铂有6.2倍耐药性,细胞倍增时间延长了8.9 h,S期细胞减少了(27.4±2.13)%,而G1和G2期细胞则分别增加了(19.6±3.71)%和(8.3±1.95)%,对阿霉素、5-氟脲嘧啶和长春新碱也有明显的交叉耐药性.较之COC1亲本细胞,COC1/DDP细胞有143个基因的表达水平发生改变,表达上调的有71个基因,表达下调的有72个基因,包括大量的凋亡和抗凋亡基因、信号转导和细胞周期调节基因、DNA转录与修复基因以及蛋白激酶和磷酸酶基因.结论COC1/DDP细胞具有多药耐药的特性,耐药性的产生与其特异的基因表达谱有关.【总页数】3页(P184-186)【作者】曹漫明;张积仁;汪森明;胡喜钢;周媛【作者单位】南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广州,510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广州,510282【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.反义LRP寡核苷酸对卵巢癌多药耐药细胞系OVCAR-3顺铂耐药性的影响 [J], 王薇;邬素芳;许先容;陈刚;徐茜;李辅军;廖国宁;王世宣;周剑峰;卢运萍;马丁2.顺铂诱导人小细胞肺癌多药耐药细胞系NCI-H446/CDDP的建立及其生物学特征分析 [J], 钱频;戢福云;钱桂生;黄桂君;陈琰;郭芮琳3.PINK1在人卵巢癌细胞系SKOV3增殖及顺铂诱导细胞死亡中的作用 [J], 高雁艳;纪军;吴园园;潘艳艳;张利4.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合低剂量顺铂诱导多药耐药人卵巢癌细胞凋亡的实验研究 [J], 张薏;王英红;潘晓琳;赵霞;李洪安;张祖娟;陈继明5.雌激素影响卵巢癌细胞系COC1/DDP顺铂耐药的蛋白质双向凝胶电泳图谱分析[J], 刘晓英;符淳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

丙戊酸增强人卵巢癌耐药细胞株COC1DDP对顺铂敏感性的研究的开题报告【研究背景】卵巢癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，也是妇科恶性肿瘤中死亡率最高的一种。

目前，常用的临床治疗方式为手术切除结节合并辅助化疗，化疗的常用药物为顺铂（cisplatin）。

然而，长期使用顺铂会导致细胞耐药性的发生，从而影响其治疗效果。

因此，寻找有效的药物增强顺铂的治疗效果，对卵巢癌的治疗有着重要的意义。

丙戊酸是一种局部麻醉药，也可以用于角膜表面麻醉。

近年来，研究发现丙戊酸可以通过一些不同的机制增强某些细胞对化疗药物的敏感性，从而提高化疗的疗效。

因此，本研究旨在探讨丙戊酸是否可以增强人卵巢癌耐药细胞株COC1DDP对顺铂的敏感性。

【研究内容】本研究将采用人卵巢癌耐药细胞株COC1DDP作为实验模型，通过比较对顺铂和丙戊酸联合使用以及单独应用的药物敏感性，探讨丙戊酸对COC1DDP的耐药性的逆转作用，并评估其对顺铂的增强疗效。

具体研究内容如下：1. 采用MTT法检测COC1DDP对顺铂和丙戊酸联合应用的敏感性。

2. 确定药物联合应用的最佳配比和处理时间。

3. 借助流式细胞术和荧光显微镜技术，探究丙戊酸对COC1DDP细胞的逆转作用。

4. 检测联合应用的药物对COC1DDP细胞周期的影响。

5. 通过Western blot分析，探究联合应用的药物对COC1DDP细胞凋亡通路等蛋白表达的影响。

【研究意义】卵巢癌是一种难治疾病，疗效较差，患者生存率相对较低。

寻找新的药物增强化疗的疗效，对提高卵巢癌患者的生存率具有非常重要的意义。

本研究旨在探讨丙戊酸对COC1DDP耐药细胞株的逆转作用，从而增强其对顺铂的敏感性，为卵巢癌的治疗提供新的思路和策略。

卵巢癌顺铂耐药转录组学分析和拮抗剂筛选的研究王晓晓;杜佳慧;李莉蓉;郭伟强;刘松柏【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2024(53)4【摘要】目的探讨卵巢癌细胞顺铂(DDP)耐药后的转录组差异,并基于此筛选找寻潜在的拮抗剂。

方法以A2780细胞为研究对象,构建DDP耐药细胞A2780-DDP;通过转录组学测序分析,找寻DDP耐药的关键因素,并以实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot实验进行验证;通过小分子抑制剂筛选,采用CCK-8细胞活力检测的方法找寻潜在拮抗剂。

结果成功构建了A2780-DDP细胞株,发现耐药后细胞增殖无差异,但细胞侵袭和迁移能力增强;通过转录组学测序分析,发现ITGB7、Akt等可能是DDP耐药的关键基因,且qPCR和Western blot验证发现两者在A2780-DDP细胞株中存在高表达。

CCK-8结果显示,雷公藤内酯醇(TPL)、奥拉帕尼等在A2780-DDP细胞株中具有较好的抑制效果。

结论ITGB7/Akt通路在DDP耐药中发挥重要作用,TPL、奥拉帕尼等潜在的DDP耐药拮抗剂可为卵巢癌治疗提供新思路。

【总页数】6页(P481-486)【作者】王晓晓;杜佳慧;李莉蓉;郭伟强;刘松柏【作者单位】苏州卫生职业技术学院苏州检验医学生物技术重点实验室;苏州科技大学【正文语种】中文【中图分类】R737.31【相关文献】1.卵巢癌细胞顺铂耐药相关的转录因子表达分析2.蛋白质组学技术筛选新的卵巢癌多药耐药靶向蛋白的研究进展3.基于转录组学探讨右旋龙脑对顺铂耐药非小细胞肺癌的增敏作用及机制4.基于代谢组学和转录组学筛选丙泊酚致神经毒性关键基因的研究5.基于转录组测序的卵巢癌铁死亡差异基因筛选及生物信息学分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

卵巢癌顺铂耐药机制的研究进展李海燕综述王常玉审校・２９７・【关键词】顺铂；卵巢癌；耐药机制【中图分类号］Ｒ７３７．３１【文献标识ｔｉｂｉＡ【文章编号】１１３０４－５５１１（２００９）０５－０２９７４）５卵巢癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一，近几年卵巢癌的发病率有增高的趋势，据报道，美国２００７年有２２４３０例卵巢癌新发病例…。

由于卵巢癌发病隐匿和缺乏完善的早期诊断方法，约７０％患者确诊时已为晚期（ＦＩＧＯ分期，Ⅲ期和Ⅳ期），其死亡率居妇科恶性肿瘤的首位。

在细胞减灭术的基础上施以以顺铂为主的联合化疗方案已成为卵巢癌的常规治疗方案。

但由于卵巢癌患者对顺铂的原发性（ｐｒｉｍａｒｙｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）和（或）获得性（ａｃｑｕｉｒｅｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）多药耐药（ｍｕｌｔｉｐｌｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）的存在，导致晚期患者的５年生存率仅为２０％一３０％。

ＤＤＰ－ＤＮＡ加合物的形成而阻断ＤＮＡ的转录和复制是顺铂杀伤肿瘤细胞的主要机理。

虽然大多数卵巢癌患者最初对顺铂的反应性很高，但在治疗中产生的ＭＤＲ已成为临床治疗的主要障碍。

Ｙａｋｉｒｅｖｉｃｈ等口。

的研究发现约７５％～８０％的卵巢上皮癌开始对化疗有反应，其余则表现为原发耐药，最终所有化疗患者至少８０％出现耐药。

导致卵巢癌对顺铂产生耐药的具体分子机理并不十分清楚，因此研究卵巢癌对顺铂耐药的机制对于防止或逆转耐药产生，改善化疗效果，提高病人生存率有着很重要的意义。

１ＢＲＣＡ２的二次突变ＢＲＣＡ２基因结构较为复杂，编码３４１８个氨基酸残基，定位于人类染色体１３ｑ１２—１３，由２７个外显子组成。

其编码的氨基酸序列与已知的蛋白质无明显的同源性。

ＢＲＣＡ２基因的第３个外显子和转录因子ｃ－ｊｕｎ具有微弱的相似性，ＢＲＣＡ２基因产物与Ｒａｄ５１共同作用，参与ＤＮＡ双链断裂的修复过程ｐＪ，发挥抑癌作用。

Ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｉ【４１与Ｒｕｄｋｉｎ＂ｏ的研究显示：家族性乳腺癌和卵巢癌通常有ＢＲＣＡ２基因突变，其蛋白产物与ＤＮＡ的重组及修复和转录调控有关。

甲磺酸伊马替尼增加顺铂对耐药卵巢癌细胞作用的研究张阔;陈燕【期刊名称】《实用药物与临床》【年(卷),期】2014(017)009【摘要】目的探讨靶向治疗药物甲磺酸伊马替尼(Imatinib mesylate)对耐顺铂人卵巢腺癌细胞株SK-OV3/DDP的增殖抑制和诱导凋亡作用以及与顺铂合用的效果.方法 MTT法检测不同浓度甲磺酸伊马替尼、DDP以及联合用药对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP的增殖抑制情况,采用双染色流式细胞术检测甲磺酸伊马替尼对SKOV3/DDP的诱导凋亡作用.结果 MTT法检测出不同药物浓度的甲磺酸伊马替尼作用于SK-OV3/DDP细胞呈现细胞生长抑制作用,甲磺酸伊马替尼与不同浓度顺铂联合用药对细胞生长抑制率分别为38.63％、51.55％、66.54％,明显高于DDP单用药组的8.30％、16.68％、30.83％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).两药合用后的IC50为9.57,是单用顺铂组的4.13倍.甲磺酸伊马替尼与顺铂合用后,早期凋亡率由1.25％增加到12.31％(P＜0.05).结论甲磺酸伊马替尼可以抑制卵巢癌耐DDP细胞株SKOV3/DDP的增殖和诱导细胞凋亡,并显著增强其对DDP的敏感性.【总页数】4页(P1096-1099)【作者】张阔;陈燕【作者单位】河北联合大学附属医院妇科,河北唐山063000;河北联合大学附属医院妇科,河北唐山063000【正文语种】中文【相关文献】1.甲磺酸伊马替尼对顺铂耐药卵巢癌细胞COC1增殖与诱导凋亡的作用 [J], 郑毅;孙宇辉;郑建华;王蕾;赵宏敏2.蛋白酶体抑制剂Oprozomib对顺铂耐药卵巢癌细胞的作用及机制研究 [J], 任方芳; 赵太强3.淫羊藿素对不同p53分型顺铂耐药卵巢癌细胞株周期阻滞作用的研究 [J], 郑少烈;李若玢;高绿芬;高雪松;李囡;王晓玉4.白介素-28A增加顺铂对卵巢癌细胞毒性的作用及机制研究 [J], 朱琳;潘孝华;孙磊;何静;肖兰;颜士杰5.CTHRC1对卵巢癌细胞顺铂耐药的作用及机制研究 [J], 郭碧莹;李露莹;张殊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

顺铂引起卵巢癌细胞周期变化及凋亡的观察廖美焱;水华;周秀芳;陈惠祯【期刊名称】《武汉大学学报：医学版》【年(卷),期】2001(22)4【摘要】目的 :了解顺铂 (DDP)引起卵巢癌细胞COC1、COC1/DDP细胞周期变化及凋亡规律。

方法 :用光镜、电镜及流式细胞术等方法观察细胞凋亡规律及进行细胞周期分析。

结果 :DDP引起COC1、COC1/DDP细胞周期变化主要表现为S期阻滞 ,P <0 .0 1;细胞死亡方式主要是凋亡 ,凋亡细胞发生在S期 ,P <0 .01;COC1、COC1/DDP细胞凋亡率不同 ,COC1凋亡率高 ,两组相比差异有显著性(P <0 .0 1)。

结论 :DDP引起COC1、COC1/DDP细胞S期阻滞、S期细胞凋亡。

【总页数】3页(P314-316)【关键词】细胞凋亡;卵巢肿瘤;顺铂;细胞周期;抗药性【作者】廖美焱;水华;周秀芳;陈惠祯【作者单位】武汉大学中南医院CT室;武汉大学中南医院内科;湖北省钟祥市中等专业学校;武汉大学中南医院肿瘤科【正文语种】中文【中图分类】R737.31【相关文献】1.顺铂诱导人卵巢癌细胞株COC1及COC1/DDP细胞凋亡的观察 [J], 蒋静;唐良萏;阳志宁;曾玉华2.APTO-253对紫杉醇或顺铂处理的卵巢癌SKOV3及OVCAR3细胞凋亡及细胞周期的影响 [J], 王宝金;申爱荣;付喜玲;李霞;王新月;任琛琛3.羟基喜树碱脂质体与顺铂联用对耐顺铂的人食管癌 Eca 109细胞周期和凋亡的影响 [J], 戴翠萍;张徐宁;薛彩萍;刘家秀;张玉领;杨学艺;陈文中;季宁东4.放射线照射引起胶质瘤细胞细胞周期和凋亡的动力学变化及其对Chk1/2蛋白表达的影响 [J], 李勇;赖润龙;陈煜;谭殿辉;雷霆5.白藜芦醇对卵巢癌细胞株SKOV-3细胞周期的影响及诱导其凋亡的机制观察研讨 [J], 张颖; 唐锐先因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

罗米地辛对卵巢癌细胞顺铂耐药及PD-L1表达的影响吴绍梅;张立;王晶;马涛【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2022(37)1【摘要】目的探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂罗米地辛调控卵巢癌细胞顺铂耐药及PD-L1表达的作用。

方法体外培养顺铂耐药卵巢癌细胞系COC1/DDP,用CCK-8实验检测细胞活力和顺铂半数抑制质量浓度(IC_(50)),用流式细胞术检测细胞凋亡和PD-L1的表达水平,用实时荧光PCR实验检测细胞PD-L1和STAT3的表达水平,用Western blot检测组蛋白乙酰化水平。

结果与Control组相比,Romidepsin组的卵巢癌细胞活力显著下降(P<0.05),IC_(50)值降低,细胞早期凋亡率和晚期凋亡率显著升高(P=0.004、P=0.003),PD-L1 mRNA的表达水平和蛋白表达水平显著升高(P=0.0127),组蛋白H3乙酰化水平显著升高(P<0.0001),STAT3的表达水平显著降低(P=0.0274)。

结论Romidepsin可能通过调控组蛋白乙酰化水平和STAT3的表达水平逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性,促进顺铂诱导细胞凋亡,提高PD-L1的表达水平。

【总页数】4页(P33-36)【作者】吴绍梅;张立;王晶;马涛【作者单位】无锡市妇幼保健院检验科【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.miR-214-3p对人卵巢癌细胞顺铂耐药及EGR1表达的影响2.LncRNA PVT1及PD-L1表达与顺铂耐药上皮性卵巢癌临床病理特征及预后的相关性分析3.水通道蛋白1的表达对卵巢癌细胞C13K顺铂耐药影响的体外研究4.拓扑替康与顺铂对bcl-2及fas在卵巢癌细胞系3AO及其耐药系3AO/cDDP表达的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

拓扑替康对人卵巢癌顺铂耐药细胞株作用的研究王世安;艾立清;李箫;毛政;卢运萍【期刊名称】《交通医学》【年(卷),期】2006(020)001【摘要】目的:探讨拓扑替康(TPT)在体外诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡的作用及其对凋亡相关蛋白表达的影响.方法:应用TPT诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡,运用MTT法、透射电镜、DNA凝胶电泳检测和观察TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/杀伤效应、凋亡形态、生物特性.采用Westernblot印迹杂交法以检测TPT对凋亡相关蛋白bcl-2和bax表达的影响.结果:TPT可诱导细胞株A2780/DDP凋亡,经TPT作用后A2780/DDP细胞内bax蛋白增加,而bcl-2蛋白不表达,bax/bcl-2比值增加.结论:TPT可诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡,其机制可能与bax蛋白高表达及bax/bcl-2不表达有关.【总页数】3页(P13-14,17)【作者】王世安;艾立清;李箫;毛政;卢运萍【作者单位】武汉长江航运总医院肿瘤科,湖北,430010;武汉长江航运总医院肿瘤科,湖北,430010;华中科技大学同济医学院2001级;华中科技大学同济医学院2001级;附属同济医院肿瘤生物医学中心【正文语种】中文【中图分类】R730.53【相关文献】1.川芎嗪对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的逆转作用研究 [J], 刘明华;任美萍;李蓉;章卓;肖顺汉2.甲基硒酸对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP耐药的逆转作用及机制 [J], 谭影;冯晴;孙信;薛敏;姜宁;邓新粮3.拓扑替康诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP凋亡的研究 [J], 王薇;柯舜安;邬素芳;李静;陈刚;李辅军;王世宣;卢运萍;马丁4.淫羊藿素对不同p53分型顺铂耐药卵巢癌细胞株周期阻滞作用的研究 [J], 郑少烈;李若玢;高绿芬;高雪松;李囡;王晓玉5.盐酸拓扑替康、紫杉醇及顺铂对人卵巢癌细胞株OC_3体外作用的实验研究 [J], 刘冠媛;杨兴升;江森因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

增免抑瘤方联合顺铂对铂类耐药卵巢癌抑瘤率影响的实验研究齐聪;张勤华;李久现;胡欣欣【期刊名称】《中国中西医结合杂志》【年(卷),期】2012(32)6【摘要】目的观察增免抑瘤方对顺铂耐药卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。

方法采用顺铂耐药人卵巢癌细胞株COC1/DDP构建裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为中药高、中、低剂量组,顺铂组,联合组(顺铂联合中药),对照组(生理盐水),连续给药3周,剥取瘤体计算瘤重及抑瘤率;定量RT-PCR及免疫组化测定Bcl相关X连锁蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)的表达;电镜观察瘤体细胞超微结构。

结果联合组抑瘤率最高,为(59.26±6.86)%,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。

RT-PCR结果显示:促凋亡基因Bax mRNA联合组表达最高,对照组表达最低(P<0.01)。

抑凋亡基因Bcl-2mRNA对照组表达最高,中药高剂量组表达最低,联合组Bcl-2mRNA的表达低于顺铂组(P<0.01)。

免疫组化结果显示:联合组Bax蛋白的表达最高,Bcl-2蛋白的表达最低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。

电镜下中药各剂量组与联合组均可见凋亡中、晚期的表现。

结论增免抑瘤方辅助化疗可逆转耐药卵巢癌裸鼠对顺铂的耐药性,增强其抑瘤作用。

其机制与上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,促进耐药卵巢癌细胞的凋亡有关。

【总页数】5页(P817-821)【关键词】卵巢癌;顺铂耐药;中药;Bax基因;Bcl-2基因【作者】齐聪;张勤华;李久现;胡欣欣【作者单位】上海中医药大学附属曙光医院妇科,上海201203;上海中医药大学附属曙光医院2008级博士研究生,上海201203【正文语种】中文【中图分类】R737.31【相关文献】1.不同铂类联合紫杉类或长春瑞滨对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠抑瘤作用的实验研究[J], 秦叔逵;黄勇;隋东虎;李进;楼丽广2.消癥抑瘤方对人类顺铂耐药卵巢癌细胞凋亡的影响 [J], 高瑞萍;葛秀君;蒋立艳;谢谦;王晓红3.紫杉醇、卡铂和顺铂对裸鼠荷人卵巢癌移植瘤抑瘤效果的实验研究 [J], 李艳;刘长年;谷彦军;岳天孚4.增免抑瘤颗粒剂抗卵巢癌荷瘤小鼠皮下移植瘤血管生成作用的实验研究 [J], 胡欣欣;张勤华;齐聪;李久现5.固本抑瘤Ⅱ号及其拆方对A_(549)抑瘤及与化疗联合用药的实验研究 [J], 张甘霖;李萍;王笑民;唐勇;刘欣;盛巡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

顺铂增强TRAIL蛋白诱导Caski细胞凋亡机理研究李民华;王惠兰;丁霏;高洁凡;刘文利;王振海【期刊名称】《现代妇产科进展》【年(卷),期】2009(18)7【摘要】目的:观察顺铂对TRAIL蛋白诱导子宫颈癌Caski细胞株凋亡的调节作用,并探讨其作用机理。

方法:传代培养宫颈癌Caski细胞,依照所加药物不同,将细胞分为TRAIL组、顺铂组、TRAIL+顺铂组、TRAIL序贯顺铂组、顺铂序贯TRAIL组以及空白对照组,分别于加药后不同时间应用:(1)倒置显微镜观察细胞的生长状态;(2)MTT法检测TRAIL蛋白与顺铂单用、联用以及序贯应用对Caski细胞的生长抑制率;(3)Caspase-8活性检测试剂盒检测不同用药方式对Caski细胞Caspase-8活力的影响;(4)流式细胞术检测Caski细胞TRAIL受体DR4,DR5,DcR1,DcR2的表达,以及1.0mg/L顺铂作用细胞24h后表达量的变化;(5)半定量RT-PCR分析顺铂作用细胞8h后4种受体mRNA水平的变化。

结果:(1)TRAIL蛋白和顺铂对Caski细胞有不同程度的生长抑制作用;(2)100ng/mlTRAIL蛋白和1.0mg/L顺铂单用作用24h细胞生长抑制率分别为35.44%、50.26%,联合应用后增至89.66%,联合用药与单独用药差异有统计学意义(P<0.05);(3)顺铂序贯TRAIL蛋白生长抑制率79.88%,TRAIL蛋白序贯顺铂55.73%,两实验组的差异有统计学意义(P<0.01);(4)Caspase-8活力在顺铂序贯TRAIL组的表达最强,为单用TRAIL组的1.52倍;(5)Caski细胞4种TRAIL受体均有表达,但表达丰度不同,顺铂可以上调死亡受体的表达;(6)顺铂处理细胞8h后DR4,DR5mRNA表达水平明显升高,DR4为对照组的1.40倍,DR5为对照组的1.57倍,差异有统计学意义(P<0.05);(7)用顺铂处理前后DcR1,DcR2表达差异无统计学意义(P>0.05)。