免疫学实验设计
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医学免疫学实验教学设计免疫学是医学中非常重要的科目之一,它研究人体与生物体之间的相互作用和免疫机制。
为了更好地教授免疫学,实验教学也是必不可少的一部分。
本文将介绍医学免疫学实验教学的设计思路和具体实施方案。
实验教学的目的和意义1.帮助学生更好地理解课堂上学习的免疫学理论知识;2.培养学生的实验操作能力和科学研究精神;3.培养学生的团队合作意识和学术交流能力;4.提高学生的综合素质。
实验教学的设计和实施医学免疫学实验教学应该是以课程中学过的相关免疫学理论知识为基础,加以实际操作进行的。
实验教学的设计1.实验主题的确定。
根据免疫学课程的安排和教学目标,确定合理的实验主题;2.实验方案的制定。
在确定好实验主题后,需要考虑实验的各种操作流程、试剂和仪器的选择等方面的问题;3.实验材料和设备的准备。
根据实验方案需要准备好所需要的各类材料和设备;4.分组和分工。
对参加实验的学生进行分组和分工,分工明确,任务清晰;5.实验流程的讲解。
在实验开始前,对整个实验流程进行讲解,学生了解实验目的、流程和要求;6.操作的讲解。
对每个步骤进行具体的操作讲解,学生了解每个步骤的操作方法、注意事项和安全措施;7.实验数据的采集和分析。
在实验完成后,及时对实验数据进行收集和分析,对实验结果进行统计;8.报告书写和演讲。
学生完成实验后,需要按照规定撰写实验报告,并进行实验成果的汇报和演讲。
实验教学的实施1.分步骤一步一步进行。
实验教学的实施需要从简单易操作的步骤开始引导学生进行实验,逐步加大难度,以便让学生更好地理解和掌握每一个操作步骤;2.加强安全教育。
在实验教学的过程中要时刻注意学生的安全,加强安全教育,学生需要遵守实验室的规章制度,正确佩戴实验室个人防护用品和操作设备,保证实验的顺利进行;3.培养实验操作能力。
实验教学要注重学生实验操作的独立性和能力的培养,让学生在实践中更好地锻炼自己的操作技能,同时也加深对免疫学理论知识的印象和理解;4.督促学生完成实验报告。
免疫学实验教学备课教案免疫实验的设计与操作免疫学实验教学备课教案一、实验目的本实验旨在通过设计与操作免疫学实验,让学生了解免疫学的基本理论知识与实验操作技巧,培养学生的实验思维能力和科学实验的技能。
二、实验原理免疫学实验是通过模拟真实的免疫反应过程来研究机体对抗疾病的机制。
实验中常用的技术包括免疫沉淀、免疫印迹、酶联免疫吸附试验等。
通过这些技术,可以检测抗原和抗体的相互作用,研究疫苗效果以及诊断免疫相关疾病等。
三、实验仪器与材料1. 电泳仪2. 分析天平3. 电源供应器4. 显微镜5. 细胞培养装置6. 活体小鼠7. 抗原和抗体标记试剂盒四、实验操作步骤1. 实验前准备a. 准备所需材料,并确认实验仪器的正常工作状态。
b. 为实验室提供良好的实验环境,确保安全与卫生。
c. 细心阅读实验操作步骤,了解实验的整体流程。
2. 抗原与抗体的制备a. 根据实验要求,选择合适的抗原并进行提取与纯化。
b. 制备抗体,可以通过免疫小鼠获得,或选择商业试剂盒。
3. 免疫沉淀实验a. 准备测试样品和控制样品。
b. 将抗原与抗体混合,反应一定时间。
c. 加入免疫沉淀试剂,沉淀免疫复合物。
d. 用电泳将复合物分离,观察结果。
4. 酶联免疫吸附试验(ELISA)a. 准备ELISA板,涂覆抗原。
b. 加入标准品和待测样品,与包被的抗体反应。
c. 加入辣根过氧化物酶结合的二抗,形成抗原-抗体-酶复合物。
d. 加入底物,观察颜色变化,并使用酶标仪测定吸光度。
五、实验结果与分析根据实验所得数据和观察结果,进行免疫实验的定量与定性分析。
通过对比实验组与对照组的结果,判断实验的有效性以及所研究问题的回答。
六、实验注意事项1. 在实验过程中,保持实验台面整洁,避免交叉污染。
2. 操作实验仪器时,注意安全操作规范,避免发生事故。
3. 确保实验操作符合伦理要求,保护动物的福利。
4. 结果分析时,要考虑实验可能存在的误差与不确定性。
七、实验拓展在完成基本免疫实验的学习后,可以进一步拓展实验内容,比如进行免疫细胞活性检测、蛋白质互作研究等。
免疫反应实验设计免疫反应实验是一种重要的实验方法,用于研究生物体对外源抗原的免疫应答过程。
本文将介绍一种免疫反应实验的设计。
实验目的:本实验旨在研究小鼠对特定抗原的免疫反应及其效果。
实验材料和仪器:1. 小鼠(实验组和对照组各10只);2. 特定抗原(抗原A);3. 细胞培养培养基(RPMI 1640);4. 透明化学药品及试剂;5. 免疫检测设备:ELISA板读取器、流式细胞仪等。
实验步骤:1. 小鼠实验组和对照组的处理:- 实验组:将实验组小鼠每天注射一定剂量的抗原A,连续注射10天;- 对照组:对照组小鼠注射生理盐水,与实验组一样的注射时间和剂量。
2. 血样收集:- 在注射结束后的第11天,分别从实验组和对照组的小鼠尾静脉采集血液样本;- 血样收集后,离心血液,收集上清液即血清。
3. 血清处理:- 将血清分装到离心管中,加入透明化学药品与试剂,如洗涤缓冲液和抗体及底物;- 根据实验需要,进行酶联免疫吸附试验(ELISA)或其他相关实验。
4. 数据分析:- 通过ELISA板读取器等设备,测量和记录实验组和对照组小鼠血清中特定抗原相关指标的光密度或浓度;- 使用统计软件(如SPSS)进行数据处理和相关统计分析,比较实验组和对照组的实验结果。
实验控制:1. 保证实验组和对照组的小鼠来源、年龄、性别和饲养环境等条件的统一;2. 控制实验组小鼠注射抗原A的剂量和时间,确保每只小鼠注射剂量的准确性和一致性;3. 相同的操作程序和处理方法,以减少实验误差和结果的差异。
结果分析:通过实验得到的数据可以对比实验组和对照组小鼠的免疫反应情况。
如果实验组小鼠的免疫反应明显高于对照组,可以说明该抗原在小鼠体内诱导了特异性的免疫反应。
实验数据的统计学分析将进一步验证实验结果的可靠性和显著性。
实验应用:免疫反应实验设计可以应用于各种研究领域,如疫苗研发、自身免疫疾病研究、药物免疫学评价等。
通过实验设计,可以深入了解生物体对特定抗原的免疫应答机制,为疾病预防和治疗提供理论基础和实验依据。
实验一免疫学实验一、免疫细胞检测:1、淋巴细胞转化试验2、E花环形成试验3、大吞噬试验4、小吞噬试验二、凝集试验(玻片法)凝集+ 不凝集-细菌鉴定结果:三、酶联免疫吸附试验(ELISA)示教原理:结果:实验二细菌形态观察及革兰染色一、观察细菌的基本形态:1、球菌2、杆菌3、螺形菌葡萄球菌大肠杆菌霍乱弧菌(革兰染色)(革兰染色)(革兰染色)二、观察细菌的特殊结构:1、芽胞2、荚膜3、鞭毛破伤风杆菌肺炎链球菌伤寒杆菌(革兰染色)(荚膜染色)(镀银染色)三、革兰染色1、步骤:2、结果:葡萄球菌呈色,为革兰性菌;大肠杆菌呈色,为革兰性菌。
3、简述革兰染色的技术关键及医学意义。
实验三细菌人工培养及其代谢产物的观察一、常用培养基的制备:1、怎样配制100ml普通肉汤培基?2、含有%琼脂的培基为固体培基,制成平板用于;制成斜面用于。
3、含有%琼脂的培基为半固体培基,主要用于。
二、细菌在培养基中的生长情况1、平板划线分离培养结果(记录菌落形态)2、在液体培基中的生长情况:葡萄球菌:枯草杆菌:链球菌:3、在半固体培基中穿刺接种培养结果伤寒杆菌呈生长,运动;痢疾杆菌呈 生长, 运动。
三、细菌代谢产物的观察 1、糖发酵试验:产酸产气产酸不产气+ 不分解-2、蛋白质分解试验:阳性+阴性-3、细菌的色素:4、简述细菌代谢产物检查的意义。
实验四消毒灭菌与细菌分布试验一、记录并分析细菌分布检查的结果:根据上述检查结果,简述其在医学、药学工作中的实际意义。
二、高压蒸汽灭菌常用压力、温度及时间为:高压蒸汽灭菌器的使用要注意的是:三、紫外线杀菌试验1、培养后菌苔生长情况(绘图):2、简述紫外线杀菌的特点及适用范围。
实验五药物的抗菌试验一、琼脂扩散法1、纸片法2、打孔法二、液体培养基连续稀释法(试管法)药物:浓度:菌种:结果:报告MIC:实验六病原性细菌一、观察下列细菌形态并绘图链球菌淋杆菌结核杆菌(革兰染色)(革兰染色)(抗酸染色)二、化脓性球菌1、葡萄球菌:阳性+阴性-2、链球菌:3、抗链球菌溶血素“O”试验(简称抗“O”或ASO试验):抗体效价为:简述其原理及临床意义:三、肠道杆菌:1、观察大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌在SS平板和双糖铁培养基中的菌落特点、生化反应、动力等。
狂犬疫苗的注射时间与死亡率之间的关系1、立题依据(1)狂犬病(传染科)又名恐水病,是由狂犬病毒所致的人畜共患的急性传染病。
多见于犬、猫、狼等肉食动物,人多因被病兽咬伤而感染,亦可由染毒垂液污染各种伤口粘膜甚至结膜而引起感染。
此外偶可通过剥病兽皮、进食染毒肉类、吸入蝙蝠群聚洞穴中的含毒气溶胶而发病。
人对狂犬病毒普遍易感,被病犬咬伤而未预防接种者,其发病率平均为15 ̄20%(可高达70%);为病狼咬伤后的发病率较高,平均为50%。
发病与否与咬伤部位、创伤程度、局部处理情况、衣着厚薄以及疫苗注射情况等因素有关,国内报告全程疫苗注射后的发病率为0.15%,未注完全程者为13.93%。
本病主要由野生动物如狐狸、食血蝙蝠、臭鼬、浣熊等传播。
近年来注意到流行区一些外观“正常”的犬、猫也可引起狂犬病。
狂犬病临床表现的特征为恐水怕风、咽肌痉挛、进行性瘫痪等。
本病重点在于预防,一旦发病,病死率几乎100%。
(2)据中国卫生部报告:2000-2005年间,我国狂犬病死亡人数持续上升,死亡人数居人类各种疫病之首位或次席;病死率在97.2%-100%之间。
2004年,全国报告发病数最多的广西、湖南、广东、湖北和贵州5省区报告发病数占全国总发病数的67.86%。
目前,狂犬病疫区由南向北扩展据对我国南方地区犬类抽检,狂犬病隐性带毒率为10%-30%。
(3)正常人被疯动物或可疑疯动物咬伤后,注射狂犬病疫苗是最重要的预防措施。
注射时间越早越好,并按说明书规定的程序进行全程免疫。
2、实验目的通过对照实验观察感染狂犬病毒后注射疫苗的的时间与死亡率之间的关系。
3、实验方法和技术路线选用两月龄的健康昆明鼠40只(20雄20雌),实验前观察72小时。
确保所有小鼠健康状况良好。
(所有实验动物的实验处理方法与程序都符合疾病防控与控制中信关于动物管理的指导方法。
)新提取的狂犬病毒制剂(狂犬唾液腺提取物)(稀释至啮齿动物最低效价2.5IU/ml),与狂犬病毒疫苗适量。
微生物学与免疫学实验课程设计课程背景随着科技的不断发展,微生物学和免疫学在现代医学中扮演着越来越重要的角色。
微生物学是研究微生物的分类、结构、生理和代谢等方面的科学,而免疫学则是研究生物体对外来物质和病原体的免疫反应机制的学科。
这两个学科的实验教学对于学生的综合素质提高及其进一步发展能力的培养有着重要的意义。
课程目的本课程旨在通过实践操作,让学生深入了解微生物和免疫学的基础概念、技术方法及其在医学中的应用,并提高学生的实验技能和科学思维能力。
实验设计实验1: 细菌染色实验目的:学习电子显微镜观察菌类细胞结构。
学会革兰染色和酸碱染色方法。
掌握细菌的染色方法。
实验步骤: * 用牛津载玻片分别刮取革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌制作涂片。
* 对涂片分别进行革兰染色和酸碱染色。
* 在显微镜下观察样品,并记录观察结果。
实验2: 病原体的分离鉴定实验目的:学习病原体的分离纯化和鉴定技术。
掌握菌落特征、生长特性等基本鉴定方法。
实验步骤: * 用含有富营养成分的琼脂培养基将样品进行扩散、切斜或点状接种。
* 观察菌落形态、颜色、边缘、透明度、质地等特征,用肉眼对菌落进行初步鉴定。
* 利用生物学技术手段对鉴定初步结果进行验证,并记录观察结果。
实验3: 病原体的药敏实验实验目的:学习微生物对不同抗生素的敏感性测试方法。
了解不同抗生素的作用机制。
实验步骤: * 将多种抗生素涂在琼脂平板上。
* 用红色J型平板法或K孔法对细菌进行敏感性实验。
* 在J型菌落平板上观察防护圈直径,并计算药敏圈的直径。
* 在K孔实验中通过观察产物浑浊度变化来计算细菌的生长与抑制情况。
结束语本课程实验设计旨在让学生能够深入了解微生物学和免疫学方面的知识,并提高他们的实验技能和科学思维能力。
通过实践操作,使得学生更好地理解课堂上所学知识,并对以后的工作打下坚实的基础。
同时,借此机会,也提高了学生的创新意识和团队协作能力。
医学免疫学实验四第三小组:刘茹,徐天宇,李嘉琪,邓诗凡【实验任务】市场上有一广告产品,据说有免疫增强作用,请设计一个方案证实之(从影响淋巴细胞功能、T淋巴细胞增殖的角度考虑)。
【目的要求】一、学会设计实验,从淋巴细胞功能、T淋巴细胞增殖的角度证实某产品有免疫增强作用。
二、掌握淋巴细胞转化试验的原理及临床实用价值。
三、了解E花环形成的原理,学会用E玫瑰花试验鉴定和计数T淋巴细胞的方法。
【实验材料】一. 肝素(每毫升含100单位),PHA(每毫升含1000微克)二. 199或1640培养液(内含20%灭火小牛血清,青霉素100单位/毫升链霉素100微克/毫升)。
三. 0.5%绵羊红细胞悬液(用Hanks液配制):吸收过的胎牛血清。
取经56度30分钟加热灭火后的胎牛血清加半量压积绵羊红细胞混合后,37度水浴20分钟,2000转/分离心10分钟,取上清液即成。
四. Hanks液,人抗凝血,淋巴细胞分层液,离心机等。
试剂的相关说明肝素: 一种抗凝剂,是由二种多糖交替连接而成的多聚体,在体内外都有抗凝血作用。
PBS:磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。
它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。
PBA:苯硼酸Hanks液:生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液(Balanced Salt Solution,BSS ),简称H。
主要用于配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞组织培养液。
瑞氏姬姆萨染液:为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物,本染色液最适于血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色。
染前用蛋白酶等进行处理,然后再用姬姆萨染液染色,在染色体上,可以出现不同浓淡的横纹样着色。
免疫组化实验设计主要包括以下几个步骤:
1. 实验目的:明确实验的目的和意义,确定要检测的蛋白类型、样本类型、实验参数等。
2. 样本准备:选取合适的样本类型,如组织切片、细胞涂片、细胞培养等,并进行预处理,包括固定、脱水、包埋等步骤。
3. 抗原修复:由于组织在固定过程中会发生蛋白之间交联及醛基的封闭作用,因此需要进行抗原修复,以便更好地暴露抗原。
4. 血清封闭:为了防止一抗与组织非特异性结合,需要进行血清封闭。
5. 一抗和二抗的选择:根据实验目的和样本类型,选择合适的一抗和二抗,并进行稀释比和孵育条件的优化。
6. 显色反应:通过化学反应使酶标记的抗体与显色剂进行显色反应,生成有色产物,以便后续观察和检测。
7. 观察和检测:采用显微镜观察样本,并记录实验结果。
根据需要,可以采用定量或半定量方法进行结果分析。
8. 实验结果的解释与结论:根据实验结果,解释实验结果的意义,并得出结论。
在免疫组化实验设计中,需要注意以下几点:
1. 保证实验的特异性:选择针对目标蛋白的一抗,并排除非特异性结合的干扰。
2. 控制实验条件的一致性:保证实验中各步骤的条件一致,以便准确比较不同样本的结果。
3. 注意实验的重复性:为了保证实验结果的可靠性和准确性,需要进行重复实验,并对结果进行统计分析和检验。
免疫学实验设计范文免疫学实验设计课题有些免疫学实验设计课题1.试述参与Th细胞与B细胞相互激活的分子及各自的功能。
2.何谓黏附分子?简述黏附分子的分类及其在免疫中的作用。
3.简述II型超敏反应的发生机制。
4.在正常情况下,免疫系统对自身抗原不产生免疫应答的机制是什么?5.比较CTL和NK杀伤靶细胞时识别和杀伤机制的特点。
6.简述移植排斥反应中受者T细胞对同种异体抗原的识别机制。
通过直接识别激活的受者Th细胞和Tc细胞分别在辅助受者B细胞和杀伤移植物方面与间接识别激活的Th和Tc有何差异?为什么?7.结合你的专业试述细胞因子在疾病发生发展中的作用,你将采取哪些策略针对这些靶点治疗疾病?8.何为基因工程抗体?目前国内外在基因工程抗体研究中有哪些主要进展?免疫学实验设计课题1.试述参与Th细胞与B细胞相互激活的分子及各自的功能。
2.何谓黏附分子?简述黏附分子的分类及其在免疫中的作用。
3.简述II型超敏反应的发生机制。
4.在正常情况下,免疫系统对自身抗原不产生免疫应答的机制是什么?5.比较CTL和NK杀伤靶细胞时识别和杀伤机制的特点。
6.简述移植排斥反应中受者T细胞对同种异体抗原的识别机制。
通过直接识别激活的受者Th细胞和Tc细胞分别在辅助受者B细胞和杀伤移植物方面与间接识别激活的Th和Tc有何差异?为什么?7.结合你的专业试述细胞因子在疾病发生发展中的作用,你将采取哪些策略针对这些靶点治疗疾病?8.何为基因工程抗体?目前国内外在基因工程抗体研究中有哪些主要进展?体外细胞培养,在有产品加入或无的条件下,检测T\B\NK细胞变化,及免疫相关细胞因子如IFN -γ、IL- 4等,最好加做细胞毒性试验有条件动物实验体外细胞培养,在有产品加入或无的条件下,检测T\B\NK细胞变化,及免疫相关细胞因子如IFN -γ、IL- 4等,最好加做细胞毒性试验有条件动物实验在医学免疫学的实验设计这一方面赛恩斯做的可以说是非常的专业的,以往的客户对赛恩斯都是清一色的好评。
IL-35对小鼠的Ⅰ型糖尿病的治疗效果评定及免
疫机制的研究
138201李麒麟
一.立题依据
自身免疫性疾病(Autoimmune diseases)是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。
Ⅰ型糖尿病(T1DM 自身免疫性胰腺炎)就是其中的一员,其机制是体内除了抗原提呈细胞(APC)和活化的T 淋巴细胞外正常细胞几乎不表达MHC-Ⅱ类分子,研究表明IFN-γ转基因小鼠的胰岛β细胞分泌IFN-γ,由于IFN-γ刺激MHC-Ⅱ分子的表达这种小鼠的胰岛β细胞高表达MHC-Ⅱ类分子,这样以来免疫细胞就会结合并识别胰岛β细胞然后对其进行攻击,使其丧失胰岛素分泌活性,最终导致体内胰岛素缺乏。
临床发现人体发病机制与鼠基本相同,患者往往需要终生注射外源性胰岛素来控制体内的血糖水平。
白细胞介素-35(IL-35)是07年新发现的一种独特的免疫抑制性细胞因子,属于IL—12细胞因子家族,IL-35为异源二聚,主要由活化的调节性T细胞(Treg)分泌,对多种免疫细胞和细胞因子均有明显的抑制作用,参与介导机体免疫耐受的形成。
二.实验目的
通过提高NOD系小鼠(Ⅰ型糖尿病患鼠)体内的IL-35水平,观测小鼠各期的血糖尿糖等水平及后期的Ⅰ型糖尿病发病率、胰岛炎评分等,评定IL-35对Ⅰ型糖尿病的预防及治疗效果,并与其它一些免疫抑制性的药物(环孢菌素A)等,进行药敏对比;体外测定小鼠体内IL-4及干扰素-γ(IFN-γ)的等含量及T淋巴细胞的亚群分化情况及调节性T淋巴细胞的含量等,对小鼠的免疫体质及IL-35对Ⅰ型糖尿病作用的免疫学机制有大体认识及方向把握,为以后的研究打下基础。
三.实验对象
NOD系和NON系(正常不患病个体)小鼠
四.实验材料
IL-35试剂,磷酸盐缓冲液(PBS), 酶联免疫吸附试验(ElISA)试剂盒,流式细胞仪,CD8及CD4单克隆抗体,注射器等基础实验器械。
五.实验方法及步骤
1. 小鼠的分组与处理实验组,10只NOD系小鼠注射IL-35注射液,每三
天注射一次,注射量根据生物试剂公司提供的IL-35试剂说明书为准,连续注射7周.实验对照组,10只NOD系小鼠注射等量的磷酸盐缓冲液(PBS),注射方式同实验组.正常对照组10只NON系小鼠注射等量的磷酸盐缓冲液(PBS),注射方式同实验组.
2. 糖尿病及体重检测从各组小鼠10周龄开始每周记录体重,每天采取
断尾方式测血糖含量和尿糖含量,血糖连续2天超过16.00mmol/L即诊断为糖尿病,30周后观察期满终止观察,计算各组小鼠发病率
3. 胰腺炎严重程度评分30周后,颈椎脱臼法处死各组小鼠,取各组小鼠胰岛做HE色切片进行病理性胰岛炎评分。
评分标准:
1> 0级:胰岛完整无淋巴细胞浸润,计0分;
2> 1级:有胰岛周围淋巴细胞浸润(即胰岛周围炎)或<25%的胰岛面积受累,计1分;
3> 2级:浸润至胰岛內,25%→50%的面积受累,计2分;
4> 3级:>50%的面积受累,计3分。
记录各组小鼠评分值
4. 细胞因子水平测定取足等量的各组小鼠外周血用ELISA法检测IL-4及干扰素-γ(IFN-γ)的含量,以为IFN-γ指导Th0向Th1方向、分化IL-4指导Th0向Th2方向分化。
5.T淋巴细胞亚群测定取各组小鼠脾脏制成单核细胞悬液,应用细胞流式法进行T淋巴细胞亚群(主要是细胞免疫)计数,结果用百分比表示。
6. 调节性T细胞检测分选提取大鼠脾脏和淋巴结CD4+CD25+调节性T (Treg)并进行纯度和活性检测。
用免疫磁珠两步法既阴性选择和阳性选择分选提取小鼠CD4+CD25+调节性T细胞,流式细胞仪检测细胞纯度,台盼蓝染色法观察计算细胞存活率。
7.统计学处理分析应用实验常用统计学软件(SAS,SPSS等)进行大量数据的后处理,整理待分析。
六.预期结果及结论
实验组小鼠的发病率远低于对照组小鼠发病率,体重较对照组重;
且对照组饮食饮水量远多于实验组和正常对照组;
血糖和尿糖含量比对照组低并接近于正常对照组(可偏高);
IL-4及干扰素-γ(IFN-γ)的含量实验组数据远低于对照组和正常对照组鼠,提示实验组发生了免疫的抑制(免疫的耐受);
实验组T淋巴细胞亚群分化度和活性较对照组和正常对照组明显偏低;调节性T(Treg)细胞实验组计数和活性较对照组和正常对照组高,提示有免疫抑制及耐受。
预期结论
IL-35对Ⅰ型糖尿病有明显的抑制或治疗作用;
由于IL-35使Th0细胞向调节性T(Treg)细胞分化(优势分化方向)从而抑制T淋巴细胞的其他效应性分化(主要有Th1和Th2方向)使IL-2、IL-4及IFN-γ等主要免疫增强因子的分泌减少,有效抑制了荷主的免疫能力,从整体水平上降低自身免疫病的发生;
Treg的活性增值又能分泌IL-35和促进Fas 、Fasl途径激活相关基因致使T淋巴细胞凋亡,以上两项从整体水平上降低自身免疫病的发生;
IFN-γ分泌的减少还能抑制胰岛β细胞产生MHC-Ⅱ类分子使T淋巴细胞不能对其产生杀伤作用,从而不会引起免疫细胞对自体胰岛β细胞识别与破坏,保证了胰岛β细胞的正常胰岛素分泌功能,维持血糖的正常。
七.参考文献
【1】金伯泉·医学免疫学·第五版·北京:人民卫生出版社,2008
【2】宋文刚·免疫学实验教材·北京:北京大学医学出版社,2010
【3】孙黎飞·细胞免疫学实验研究方法·北京:人民军医出版社,2009 【4】王培林,傅松滨·医学遗传学·第三版·北京科学技术出版社2011 【5】哈佛医学院Brigham and Women’s医院,eBioscience公司的科学家·Nature·罕见的抑制性因子·美国·2007
【6】王嘉军·微生物学免疫学新进展·第37卷,第4期·2011
【7】周国庆,唐琴,黄丽,孙保亮·泰山医学院学报,Treg的免疫磁珠提取纯化方法
【8】姜小丽,杨婷等·中国免疫学杂志·2013年第四期·哮喘小鼠中Foxp3+Treg/Th17的失衡及意义
【9】王建华·糖尿病自我管理全书·北京:北京科学出版社·2010。