帕金森病大鼠模型的以方测证研究
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帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种慢性进行性神经系统变性疾病,主要特征是运动功能障碍、肌肉僵硬和震颤。
大多数病例原因未明,但有些病例是由基因突变或环境因素引起,科学家一直在努力寻找有效的治疗方法。
为了更好地了解帕金森病的发病机制和寻找有效的治疗方法,研究人员利用动物模型进行相关实验研究。
大鼠是大多数实验室研究中使用的一种常见动物模型。
通过使用帕金森病大鼠模型,研究人员可以更好地了解帕金森病的病理生理过程和其它一些重要的生物学问题。
行为学实验是研究模型动物行为特征的重要手段,也是判断药物治疗效果的重要指标。
本文将从行为学实验角度,总结帕金森病大鼠模型在研究中的应用和进展。
一、运动行为实验1. 步态分析步态分析是评估大鼠运动功能障碍的重要方法。
通过观察大鼠在运动轨迹仪或其他步态分析系统中的步态特征,可以了解大鼠的步态变化情况。
研究发现,帕金森病大鼠在步态上呈现出明显的异常,包括步态不稳、速度减慢、踏步困难等。
这些异常特征与人类帕金森病患者的步态异常相似,说明帕金森病大鼠模型对帕金森病的研究具有较高的可比性。
2. 旋转行为分析旋转行为是帕金森病大鼠的典型表现之一,通常表现为大鼠围绕垂直轴自发性旋转的行为。
研究人员通常使用旋转测试箱或旋转实验系统进行观测和记录。
实验结果表明,帕金森病大鼠的旋转行为较正常大鼠明显增加,而且旋转速度也明显加快。
这一结果为研究人员提供了一个直观的指标,用于判断大鼠运动功能障碍的严重程度。
1. 强制游泳实验强制游泳实验是评估大鼠抗抑郁能力的一种常用方法。
研究人员发现,帕金森病大鼠在强制游泳实验中的表现明显低于正常大鼠,表现出抑郁行为。
这一现象提示帕金森病大鼠可能存在抑郁症状,这也与临床帕金森病患者中常见的非运动症状一致。
2. 超声波实验超声波实验通常用于评估大鼠的社交行为能力。
研究发现,帕金森病大鼠的社交行为能力明显下降,社交时间减少、探索行为减少等。
这些结果表明,帕金森病大鼠模型在了解帕金森病非运动症状和社会行为障碍方面具有一定的应用价值。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病,严重影响患者的生活质量。
为了进一步研究帕金森病的病理生理机制和寻找有效的治疗方法,科学家们常常使用大鼠作为疾病模型进行研究,并通过行为学实验来评估大鼠的神经功能状态。
本文将重点介绍帕金森病大鼠模型常用的行为学实验及其研究进展。
1. 旋转实验旋转实验是最早应用于帕金森病大鼠模型评估的行为学实验之一。
该实验通过观察大鼠自发性旋转的方向和角度来评估其行为异常程度。
通常情况下,正常大鼠的旋转方向是随机的,而帕金森病大鼠则会向一侧旋转。
旋转实验可以直观地反映出帕金森病大鼠运动障碍的程度,但其缺点是对于程度较轻的帕金森病大鼠不敏感。
2. 面部表情评估面部表情评估是一种新近发展的评估方法,它利用计算机视觉技术分析大鼠的面部表情。
研究显示,帕金森病大鼠的面部表情和正常大鼠有显著差异,表现为眼球揉搓、嘴巴扭曲等异常表情。
这种评估方法不需要对大鼠进行暴力或受压力的测试,且能够有效提高评估的准确性和客观性。
3. 行动能力评估行动能力评估是通过测试大鼠的运动灵敏度、协调性、平衡性等方面的能力来评估其神经功能状态。
其中,常用的测试方法包括平衡木测试、楼梯测试、水池测试等。
这些测试方法具有高质量的评估效果,可以为大鼠模型的帕金森病研究提供宝贵的信息。
4. 运动行为表现评估运动行为表现评估是通过观察大鼠的运动表现来评估其运动功能状况。
主要包括强迫步态测试、独立步态测试、反射测试等。
这些测试方法能够检验大鼠的运动协调性、前足异常挠掘等能力,从而确定其神经功能状态。
总之,帕金森病大鼠模型常用的行为学实验可以提供宝贵的信息用于疾病的研究和治疗。
随着技术的不断发展和研究的深入,我们相信未来会出现更多可靠且敏感的评估方法来提高帕金森病大鼠模型的评估能力。
帕金森病模型大鼠神经干细胞移植基础研究的开题报告一、研究背景和意义帕金森病(Parkinson's disease, PD)是一种晚发性神经退行性疾病,主要表现为静止性震颤、肌张力增高、运动迟缓等症状。
该疾病不仅对患者的身体和生活造成了严重影响,也给家庭和社会带来了巨大的负担。
目前,针对帕金森病的治疗方法主要是药物治疗和手术治疗,但这些方法仅能缓解症状,无法治愈疾病。
近年来,神经干细胞移植治疗正在受到越来越多的关注。
在动物模型和有限的临床试验中,将胚胎干细胞或成人神经干细胞移植到患者的脑中,可以促进受损的神经细胞再生和修复,从而改善病情。
但是,神经干细胞移植治疗仍然面临着种种挑战和难题,如移植细胞的存活率和分化能力、免疫排斥反应等。
针对这些问题,本研究拟使用帕金森病模型大鼠,通过神经干细胞移植治疗,探索移植细胞对帕金森病患者的治疗效果和安全性,为进一步开展临床试验提供一定的基础研究支持。
二、研究内容和方法1. 动物模型建立选取10只雄性Sprague-Dawley大鼠,平均体重350g,随机分为两组:实验组和对照组。
实验组以6-羟多巴胺(6-OHDA)卤水溶液(8μg,Sigma-Aldrich)注射腹腔建立帕金森病模型;对照组注射同等体积的生理盐水。
2. 神经干细胞移植选取6只建模后的大鼠,将其分为两组:实验组和对照组。
实验组在模型建立后第四周,将成年Sprague-Dawley大鼠来源的神经干细胞移植到患者脑部。
对照组不进行移植操作。
3. 灵敏度和行为检测在神经干细胞移植后的1、2、3个月,用Vernier测试灵敏度,记录身体骨架姿势和静止姿态的变化。
用旋转测试和步态测试来判断其行为学特征和肢体运动功能。
4. 免疫组化在每个时间点,分别从实验组和对照组中选取1只大鼠进行免疫组化检测。
检测部分标记6-OHDA、非标记6-OHDA和植入脑部的神经干细胞。
5. 神经干细胞分化和增殖分析将从患者中分离出的神经干细胞分化成可分泌多巴胺的神经元,并分析其增殖和存活情况。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种慢性神经系统退行性疾病,主要表现为肌肉僵硬、震颤和运动协调障碍等症状。
目前,针对帕金森病的研究主要集中在动物模型上,其中大鼠模型是最为常用的模型之一。
大鼠模型在帕金森病研究中具有独特的优势,因此对其行为学实验研究的进展备受关注。
帕金森病大鼠模型的建立在帕金森病大鼠模型的建立中,最常用的方法是通过给予动物神经毒性物质或者基因突变来模拟帕金森病的特征。
目前被广泛应用的神经毒性物质包括6-羟多巴胺、四氯哌嗪和α-甲基对苯二酚等,这些物质能够诱导多巴胺能神经元的损伤和死亡,从而导致运动障碍的表现。
基因突变模型也是近年来备受关注的研究方向。
研究人员通过基因编辑技术或者基因转染技术,将与帕金森病相关的突变基因导入大鼠体内,使其表现出与帕金森病类似的症状。
这些方法的建立为帕金森病的研究提供了可靠的动物模型,为后续的行为学实验研究奠定了基础。
帕金森病大鼠模型的行为学实验主要通过观察动物在特定情境下的行为表现来评估其运动功能、认知功能和情绪状态等。
这些实验能够反映大鼠在帕金森病病理过程中不同方面的功能障碍,为深入理解疾病机制和评估治疗方法提供重要信息。
1. 运动功能评估实验在帕金森病大鼠模型中,运动功能的评估是最为重要的一项实验。
常用的评估方法包括旋转实验、步态分析和运动协调实验等。
旋转实验通过记录大鼠在特定刺激下的旋转行为来评估其运动功能的损伤程度,步态分析则通过观察大鼠行走时的步态特征来评估其步态的协调性,而运动协调实验则可以通过观察大鼠在倒立杆测试或者平衡实验中的表现来评估其运动协调功能。
这些实验可以客观地反映大鼠在帕金森病进展过程中运动功能的改变,为疾病的诊断和治疗提供重要参考。
除了运动功能,帕金森病还会伴随着认知功能的损害。
评估大鼠在认知功能方面的表现对于帕金森病的研究同样至关重要。
目前,常用的认知功能评估实验主要包括水迷宫实验、Barnes迷宫实验和双臂迷宫实验等。
帕金森病大鼠模型制作方法研究进展陈子方,吴海妹,沈凡艺,谭慧,郭沛鑫,解宇环云南中医药大学,昆明650500摘要:帕金森病(PD)是以多巴胺神经元变性、坏死导致多巴胺缺乏为病因,以运动障碍为典型症状的神经退行性病变。
PD动物模型对于疾病发病机制、新型治疗方案及药物研究具有重要意义。
目前常用PD大鼠模型主要有有神经毒素诱导模型、脂多糖诱导模型、转基因模型、基因敲除模型、蛋白酶体抑制剂诱导模型、乙型脑炎病毒所致模型等。
然而以上PD模型均存在一定局限性,并不能完全契合临床的实际状况。
在实际研究过程中,可采用多种模型结合、共同评价的方式进行。
关键词:帕金森病;帕金森病模型;大鼠模型doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2021.08.024中图分类号:R745.1文献标志码:A文章编号:1002-266X(2021)08-0093-04帕金森病(PD)是一种多发于中老年的、最常见的神经退行性病变之一。
PD病因及机制极其复杂,目前多巴胺(DA)神经元变性坏死所导致的多巴胺分泌严重不足被认为是主要发病原因。
PD患者常可见神经元内α-突触核蛋白(α-SYN)及路易小体的积聚。
PD的发病机制、新型治疗方案及药物等一直是该领域研究热点,上述研究也推动了契合临床的PD模型研究。
PD的灵长类动物模型能较好模拟临床症状,但花费较多,不利于前期的药物筛选和实验研究;而某些啮齿类小动物如小鼠等由于其脑部体积较小,不易区分相关脑区,手术操作难度较大,针对特定脑区的研究存在局限性。
PD大鼠模型制作经济实惠且能较好模拟临床病变。
本课题组前期研究也发现,在某些PD模型如6-羟基多巴胺(6-OH⁃DA)所致的PD模型复制过程中,大鼠的存活率和造模成功率明显高于小鼠,且操作更为简便。
目前常用PD大鼠模型主要有有神经毒素诱导模型、脂多糖诱导模型、转基因模型、基因敲除模型、蛋白酶体抑制剂诱导模型、乙型脑炎病毒所致模型等[1]。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种常见的神经退行性疾病,主要特征是多巴胺神经元的损失和运动障碍。
为了研究帕金森病的发病机制以及寻找有效的治疗方法,科学家们经过不断努力,发展了许多帕金森病大鼠模型,并利用行为学实验对这些模型进行研究。
本文将介绍帕金森病大鼠模型常用的行为学实验及其研究进展。
一、旋转行为实验(Rotational behavior test)旋转行为实验是帕金森病大鼠模型中最常用的行为学实验之一。
该实验通过观察大鼠的旋转行为来评估其运动障碍程度。
实验方法一般是给予大鼠多巴胺受体激动剂(如阿片类药物apomorphine)或多巴胺受体拮抗剂(如多巴胺受体拮抗剂haloperidol)后观察其旋转行为。
正常情况下,大鼠在注射多巴胺受体激动剂后会出现顺时针或逆时针旋转行为,而注射多巴胺受体拮抗剂后会抑制旋转行为。
而帕金森病大鼠在多巴胺神经元损失后,注射多巴胺受体激动剂后旋转行为会减少或消失。
旋转行为实验可以用来评估药物对帕金森病大鼠的疗效,以及揭示帕金森病的病理机制。
最近的研究表明,旋转行为实验可以用来评估帕金森病大鼠对脑电刺激的反应,这为脑电刺激治疗帕金森病提供了基础。
步态分析是评估动物步态功能的重要方法,也是帕金森病大鼠模型中常用的行为学实验之一。
该实验通过评估大鼠行走时的步态参数,如步幅、步频、支撑时间等,来评估其运动障碍程度。
正常情况下,大鼠的步态参数是稳定的,而帕金森病大鼠步态参数会表现出异常。
近年来,步态分析在帕金森病研究中的应用越来越广泛。
科学家们发现帕金森病大鼠的步态分析可以用来评估不同治疗方法的效果,如药物治疗、基因治疗和深部脑刺激治疗等。
步态分析还可以用来研究帕金森病的病理机制,如多巴胺神经元损失对步态的影响等。
三、旋转杆测试(Pole test)旋转杆测试是一种评估大鼠运动协调和平衡能力的行为学实验。
该实验通过观察大鼠在竖直杆上爬升和下降的表现来评估其运动能力。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种慢性神经系统退行性疾病,主要特征是运动障碍、异常肌肉僵硬和震颤。
目前,全球有数百万人患有帕金森病,尤其是老年人口中的比例逐年增加。
由于帕金森病的病因尚不明确,目前临床上仍缺乏有效的治疗手段。
科研工作者们一直在努力寻求更好的治疗方法和药物途径。
为了更好地了解帕金森病的发病机制和寻找有效的治疗手段,大鼠模型是帕金森病研究领域的重要工具之一。
大鼠模型是一种典型的帕金森病模型,主要通过对大鼠进行特定处理,如药物处理、手术切除等,使其出现类似帕金森病患者的行为和病理特征。
行为学实验是研究帕金森病大鼠模型常用的研究手段之一,通过观察大鼠的运动、认知、情绪等行为特征,可以更直观地了解帕金森病模型的变化和进展。
下面将就帕金森病大鼠模型常用的行为学实验研究进展进行详细介绍。
一、旋转行为实验旋转行为实验是一种常用的帕金森病大鼠模型行为学实验,该实验通过测量大鼠在圆柱体内旋转的次数和方向,来评估其运动功能的变化。
正常情况下,大鼠在旋转行为实验中不会表现出明显的旋转行为。
而帕金森病大鼠模型则会出现异常的旋转行为,表现为频繁、持续的旋转。
这种行为变化与帕金森病患者在运动障碍方面的症状是一致的,因此旋转行为实验被广泛应用于帕金森病模型的行为学研究中。
二、步态分析三、电动势行为实验帕金森病大鼠模型的行为学实验研究进展为研究帕金森病的发病机制、寻找有效的治疗手段提供了重要依据。
通过行为学实验的观察和评估,科研工作者们可以更直观、客观地了解帕金森病大鼠模型的行为特征和变化,从而为进一步的研究提供了有力的支持。
相信随着行为学实验技术的不断进步和完善,帕金森病大鼠模型的行为学实验研究将会取得更多的进展,为帕金森病的临床治疗和药物研发提供更多的参考和支持。
帕金森病大鼠模型常用行为学实验研究进展帕金森病是一种慢性神经系统退行性疾病,其主要症状包括肌肉僵硬、静止位置的震颤和运动迟缓。
针对这种疾病,医学研究人员已经发展出了一些实验模型,以便通过行为学实验研究其病理生理学机制。
本文将会介绍其中一些常用的实验模型及其对帕金森病的研究进展。
第一类模型:化学性帕金森病大鼠模型化学性帕金森病大鼠模型是目前在帕金森病研究领域中最为常用的模型之一。
这种模型通常是通过注射氯丙嗪和环丙嗪这两种药物来制造的。
这两种药物的作用方式是,通过抑制多巴胺神经元的释放,从而减少多巴胺的水平,使得大鼠出现运动障碍和其他帕金森病相关的症状。
在这种模型中,大鼠通常会卷曲成球状,出现颤抖、跑步不稳和行动缓慢等症状。
研究人员可以测量它们的步态、步幅和动作快慢度等因素,以评估其帕金森病状态的程度和进展情况。
此外,还可以通过对其行为的直接观察和记录,来研究神经肌肉系统的变化和神经元的退化程度。
毒性帕金森病大鼠模型是一种较新的实验模型,通过注射毒素物质如6-氨基嘌呤(6-OHDA)或甲基苯丙胺(MPTP)等,来损伤大鼠的多巴胺神经元,从而制造出类似于帕金森病的症状。
在这种模型中,大鼠通常会出现运动障碍、肌肉僵硬和震颤等症状。
研究人员可以利用这些症状,进行定量测量和观察。
此外,通过对神经元逝去的数量和位置进行研究,可以进一步了解神经元死亡的原因和机制。
遗传性帕金森病大鼠模型是通过基因工程技术,使得大鼠产生与人类帕金森病类似的遗传变异,从而制造出模拟人类帕金森病的模型。
研究人员可以通过对遗传突变基因的研究,发现与帕金森病相关的基因,并研究它们的作用方式和机制。
总结通过使用这些实验模型,研究人员可以更好地理解帕金森病的病理生理学机制,并开发出更有效的治疗方法。
未来,研究人员还可以使用新兴的技术,如光遗传学、单细胞转录组学和蛋白质组学等,深入探究帕金森病的神经科学机理。
帕金森病大鼠模型的以方测证研究指导老师: 何建成(上海中医药大学05中西医& 05中医专业&05康复,上海201203)1 研究意义帕金森病,又称震颤麻痹,多发于中老年,临床上以主要以锥体外系运动障碍为特征,表现为运动迟缓,静止震颤和强直,自主神经功能的障碍和痴呆等。
原发性帕金森病最主要的化学病理为黑质神经元死亡,其致密部不能合成多巴胺,而致纹状体乙酰胆碱与多巴胺的功能失去平衡而发病,不仅影响患者的运动功能,而且对感觉、认知也有严重影响。
2 研究进展目前帕金森病的治疗仍然是针对其症状的控制,左旋多巴迄今是帕金森病的金标准治疗药物,但因其长期使用副作用明显。
尤其是运动并发症已成为晚期PD 病人的主要生活障碍[1],临床使用局限性大;而手术治疗又存在严重的破坏性,寻找能够预防和延缓疾病进程的治疗方法成为迫切需要。
大量的临床和实验资料显示:中医药治疗帕金森病效果明确、良好。
中药在保护神经细胞、抑制氧化应激反应、抗兴奋性毒性等方面有其独特的疗效[2]。
帕金森病属于中医学”颤证”、”颤振”、”振掉”以及“肝风”等范畴,在许多中医古医籍中都有记载。
然而,通过对大量的中医临床文献的整理,发现中医药将帕金森病的病因病机主要归纳为“虚”、“瘀”、“痰”三个方面;治法也集中在滋补肝肾、平肝熄风,活血化瘀,蠲痰散结三种治法的应用上;应用较多的中药方剂主要有天麻钩藤汤、定振丸、桃红四物汤、涤痰汤、温胆汤等。
本实验在经典的西医帕金森病动物模型基础上,进行以方测证(中医证型属性)研究,旨在探讨帕金森病动物模型的中医属性,以期为中医药治疗帕金森病的研究提供动物模型,为药效学研究等提供理论依据。
3 研究目的利用“以方测证”的经典研究方法,对帕金森病的中医证型进行研究。
4 实验材料4.1 实验用药:4.1.1天麻钩藤饮:天麻9g、钩藤12g、石决明18g、山栀9g、黄芩9g、川牛膝12g、杜仲9g、桑寄生9g、夜交藤9g、砂茯神9g、益母草9g。
帕金森病大鼠模型的以方测证研究指导老师: 何建成(上海中医药大学05中西医& 05中医专业&05康复,上海201203)1 研究意义帕金森病,又称震颤麻痹,多发于中老年,临床上以主要以锥体外系运动障碍为特征,表现为运动迟缓,静止震颤和强直,自主神经功能的障碍和痴呆等。
原发性帕金森病最主要的化学病理为黑质神经元死亡,其致密部不能合成多巴胺,而致纹状体乙酰胆碱与多巴胺的功能失去平衡而发病,不仅影响患者的运动功能,而且对感觉、认知也有严重影响。
2 研究进展目前帕金森病的治疗仍然是针对其症状的控制,左旋多巴迄今是帕金森病的金标准治疗药物,但因其长期使用副作用明显。
尤其是运动并发症已成为晚期PD 病人的主要生活障碍[1],临床使用局限性大;而手术治疗又存在严重的破坏性,寻找能够预防和延缓疾病进程的治疗方法成为迫切需要。
大量的临床和实验资料显示:中医药治疗帕金森病效果明确、良好。
中药在保护神经细胞、抑制氧化应激反应、抗兴奋性毒性等方面有其独特的疗效[2]。
帕金森病属于中医学”颤证”、”颤振”、”振掉”以及“肝风”等范畴,在许多中医古医籍中都有记载。
然而,通过对大量的中医临床文献的整理,发现中医药将帕金森病的病因病机主要归纳为“虚”、“瘀”、“痰”三个方面;治法也集中在滋补肝肾、平肝熄风,活血化瘀,蠲痰散结三种治法的应用上;应用较多的中药方剂主要有天麻钩藤汤、定振丸、桃红四物汤、涤痰汤、温胆汤等。
本实验在经典的西医帕金森病动物模型基础上,进行以方测证(中医证型属性)研究,旨在探讨帕金森病动物模型的中医属性,以期为中医药治疗帕金森病的研究提供动物模型,为药效学研究等提供理论依据。
3 研究目的利用“以方测证”的经典研究方法,对帕金森病的中医证型进行研究。
4 实验材料4.1 实验用药:4.1.1天麻钩藤饮:天麻9g、钩藤12g、石决明18g、山栀9g、黄芩9g、川牛膝12g、杜仲9g、桑寄生9g、夜交藤9g、砂茯神9g、益母草9g。
浓度为3.08g/ml。
4.1.2桃红四物汤:桃仁6g、红花4g、当归12g、川芎8g、熟地黄15g、白芍10g。
浓度为1.49g/ml。
4.1.3涤痰汤:姜半夏8g、胆南星8g、橘红6g、枳实6g、茯苓6g、人参3g、菖蒲3g、竹茹2g、甘草2g。
浓度为1.12g/ml。
以上中药均购自上海雷允上中药有限公司。
4.2 实验试剂6-hydroxydopamine(6-OHDA):美国Sigma公司产品;apomorphine(APO):美国Sigma公司产品;抗坏血酸:美国Sigma公司产品。
4.3 实验仪器大鼠脑立体定位仪:TOW-3A型,广东汕头市教育医学仪器厂;微量进样器(5μl):上海第三分析仪器厂。
4.4 实验动物:SD大鼠,雄性,约60只,体重150-170g,清洁级,由上海中医药大学实验动物中心提供。
5 实验方法5.1 模型制备方法模型制备方法采用经典、公认的Ungerstedt等所创立的方法[3]。
所有实验动物术前按常规进行行为测试,确认无异常旋转行为者进行正式实验。
用氯胺酮80 mg/kg腹腔注射麻醉。
然后将大鼠固定于脑立体定位仪上,头部去毛,新洁尔灭常规消毒。
无菌条件下,沿正中线切开大鼠颅顶皮肤,剥离骨膜,暴露前囟。
以前囟为准,根据包新民等[4]著大鼠脑立体定位图谱,确定右侧黑质两处坐标:(1)前囟后5.2mm,正中线右侧1.0 mm,硬膜下9.0 mm;(2)前囟后5.2 mm,正中线右2.5 mm,硬膜下8.5 mm。
用颅骨钻于手术部位小心钻开颅骨,用5μl微量进样器将6-OHDA(溶于含0.02%抗坏血酸的生理盐水中,浓度为2μg /μ1)注入右侧黑质部(以1.0 mm/min速度进针),每孔3μl,注射速度为1μl/min,注射完毕后留针5 min,然后以1.0 mm/min速度缓慢退针。
手术完成后,用医用明胶海绵填塞颅骨孔,缝合切口皮肤,肌肉注射庆大霉素,待动物清醒后放回饲养笼中饲养。
10天后用阿朴吗啡(APO)经腹腔注射诱发动物向健侧旋转,以2-6圈/min者为成功模型。
5.2 分组及给药:采用区层随机法分组。
5.2.1分组:将造模成功的SD大鼠随机分为4组:模型组、滋肾平肝组(天麻钩藤饮)、活血组(桃红四物汤)、化痰组(涤痰汤),每组6只。
再另取不造模大鼠为正常对照组,每组6只。
共5组。
5.2.2给药:滋肾平肝组、活血组、化痰组分别给予天麻钩藤饮(浓度为3.08g/ml)、桃红四物汤(浓度为1.49g/ml)、涤痰汤(浓度为1.12g/ml)2ml灌胃、正常对照组给予等量生理盐水2ml灌胃[5],持续3周。
5.3 检测指标及方法神经行为学:旋转圈数[6]5.4 统计方法采用SPSS软件进行数据分析。
6 实验结果S,旋转圈数P<0.05结果显示:治疗前各组间的旋转圈数差异无显著性意义(P>0.05)。
治疗后天麻钩藤组、涤痰汤组与模型组间的旋转圈数差异有显著性意义(P< 0.05)。
天麻钩藤饮组与桃红四物汤组间的旋转圈数差异有显著性意义(P< 0.05)。
涤痰汤组与桃红四物汤组间的旋转圈数差异有显著性意义(P< 0.05)。
7 讨论7.1 旋转机理旋转行为发生的主要机理是由于6-OHDA选择性损毁注射区内的多巴胺能神经元,使注射同侧的多巴胺能神经元末梢溃变,多巴胺含量下降,多巴胺受体超敏所致。
多巴胺是控制运动和旋转行为的关键性神经递质,由于大脑两侧纹状体之间多巴胺活动的不对称性,致使右侧残存的黑质多巴胺能神经元处于超敏状态,由于暂时的代偿,可以使受损侧多巴胺含量的减少得到弥补。
当黑质纹状体多巴胺能神经元损伤超过80%,纹状体多巴胺含量下降5O%以上时,多巴胺D2受体就会代偿性大量增加,且敏感性增高,出现超敏现象。
此时若应用多巴胺受体直接增效剂APO与黑质纹状体多巴胺能神经元释放的神经递质多巴胺相结合,可使实验动物向健侧产生旋转行为。
7.2 观察指标的选择由于迄今尚无有效的非侵袭性生理学方法检测该模型DA能神经系统的损伤程度,因此,检测造模大鼠的旋转行为已成为衡量单侧6-OHDA损伤后果的最常用手段[7]。
7.3 以方测证的意义以方测证是中医认识病证的常用方法,是方证相应研究的主要内容。
最早提出“方证相应”的是张仲景的《伤寒论》,《伤寒论》第317条曰:“病皆与方相应者,乃服之。
”唐·孙思邈在《千金翼方》中对《伤寒论》病脉证并治体系进行了整理,采用“方证同条,比类相附”的方法,建立了方证对应的“方证”体系。
近现代,以方测证仍是诸多医家临床实践的指导思想,应用以方探证等方法探寻方证相应的内在机理,进行诸多的临床研究,是以“证”为中心,“方”与“证”相应的模式成为中医学辨证的基本模式之一。
中医辨证论治落实在临床诊疗中则是辨证、立法、选方、遣药四个环节,“证-法-方-药”有机统一,即据证立法、依法选方或遣药组方。
由于方以药成,方药的集合功用体现具体治法,治法与病证相应,因此方药与病证则呈现直接的对应关系,人们将这种方与证的对应关系称之为“方证相应”。
经典的以方测证是包括二个方面的意思:一是根据药物作用推测疾病的脉症,如桂枝二麻黄一汤的组成有一味石膏,故推测该方所治疗的病证当有烦躁一症;另一个方面是根据方药作用推测病变,如用桂枝甘草汤治愈的病证便是心阳虚弱证,用炙甘草汤治愈的病证便是心脏阴阳两虚证[8]。
本实验即取以方测证的第二个方面作为研究依据。
7.4 实验结果分析实验结果显示,天麻钩藤饮的治疗效果最为显著,涤痰汤次之,桃红四物汤的治疗效果不佳。
天麻钩藤饮功效补益肝肾,平肝熄风,主治由肝肾不足,肝阳偏亢,生风化热所致的病症。
本研究的对象帕全森病,临床上以震颤和强直为主,《黄帝内经素问·至真要大论》曰:“诸暴强直,皆属于风”,“诸风掉眩,皆属于肝”,《医宗必读》曰:“然木即无虚,言补肝者,肝气不可犯,肝血自养,血不足者濡之,水之属也,壮水之源,木赖以荣”。
为“肝肾同源”之论。
清代高鼓峰在《医宗已任编》谓:“大抵气血俱虚,不能荣养筋骨,故为之振摇,而不能主持也”。
根据以方测证方证相应的原则,可以推测帕金森病的病理基础是肝肾阴虚。
本研究还表明,涤痰汤在疗效上仅次于天麻钩藤饮。
涤痰汤涤痰开窍,主治风痰。
因此提示了帕金森病也有因痰致病的可能性。
可能因为中老年以后,肝肾脾渐衰,精气血渐亏,筋脉失于濡养,虚风内动,虚火内生,兼加痰湿内蕴,五志化火,形成风、火、痰、瘀进一步加重病情[9],有待进一步的研究。
结论: 6-OHDA帕金森病大鼠模型应属于中医肝肾阴虚,痰浊内蕴证型。
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