丙酮酸合成工艺的研究进展
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丙酮酸产业调研报告1 概述1.1 丙酮酸简介COCOOH,分子量:88.06,原称丙酮酸(pyruvic acid),分子式CH3焦性葡萄酸,别名2-氧代丙酸,乙酰甲酸,无色至淡黄色液体,呈醋酸香气和愉快酸味,熔点 13.6 ℃,沸点 165 ℃并分解。
能与水、醇混溶。
丙酮酸是参于整个生物体基本代谢的中间产物之一,在生物体的代谢过程中位于无氧分解和有氧分解的交界点上,是极为重要的中间产物。
此外,从丙酮酸可直接生成丙氨酸,因为它可以与氨基转移反应相结合,故在氮代谢方面也起着重要的作用。
另外,它和CoA反应能形成乙酰CoA,与脂肪酸的代谢也有重要的关系。
1.2 丙酮酸的应用丙酮酸是一种用途非常广泛的有机酸,是生产色氨酸、苯丙氨酸、蛋白糖和维生素B的主要原料,是很多药物如L-多巴(多巴用来治疗帕金森综合症)等的原料,是乙烯聚合物的起始剂,是制备谷物保护剂的原料,是多种化工、医药产品的主要原料,属于基本有机化工类产品。
2 丙酮酸的生产工艺方法丙酮酸的生产方法主要有化学催化合成法、微生物发酵法和生物催化法。
化学催化合成法是目前国内丙酮酸生产的主流生产工艺;微生物发酵法以天富生化为代表;生物催化法目前还没有工业化应用。
2.1 化学催化合成法丙酮酸的化学催化合成路线很多,这里仅就具有代表性的方法作简要介绍。
2.1.1 酒石酸法酒石酸与焦硫酸钾混合加热,酒石酸发生脱水脱羧作用生成丙酮酸。
由酒石酸与焦硫酸钾反应而得。
先将酒石酸和焦硫酸钾充分拌匀后,投入搪玻璃反应锅中,用油浴加热至180℃左右,固体开始熔融,并有大量泡沫上升,开动搅拌器,打散泡沫,防止溢出,再升温至220℃,即有丙酮酸蒸出,油温保持在245℃,待丙酮酸蒸完为止。
其反应式如下: CHOHCOOH 焦硫酸钾∣ ──────→ CH 3COCOOH CHOHCOOH该法是制备丙酮酸的传统方法,目前我国大部分厂家均采用此法生产,但该法污染较重,生产成本较高。
丙酮酸产业调研报告丙酮酸产业调研报告一、产业概述丙酮酸,化学式为(CH3)2CO2H,是一种酸性有机化合物。
其具有较高的溶解性和挥发性,是一种常用的有机溶剂。
丙酮酸具有广泛的应用领域,包括化学、医药、涂料等多个行业。
二、市场需求分析1. 化学品行业需求:丙酮酸作为一种溶剂,广泛应用于化学品制造过程中,如染料、颜料和树脂的生产。
2. 医药行业需求:丙酮酸可以用作药物合成中的催化剂和溶剂,广泛应用于医药制造过程中。
3. 涂料行业需求:丙酮酸可以用作溶剂和反应介质,广泛应用于涂料制造过程中。
三、行业竞争格局目前,丙酮酸产业存在着一些较大的企业,如万东化工、威海万丰、华昱化工等。
这些企业具备较强的生产能力和技术实力,是丙酮酸市场的主要供应商。
此外,还有一些中小型企业也在积极发展丙酮酸产业,使得市场竞争进一步加剧。
四、产业发展趋势1. 技术革新:随着科技的进步,丙酮酸的生产工艺和设备得到了不断改进,使得生产效率和品质得到提升。
2. 环保要求:随着环保要求的提高,丙酮酸企业在生产过程中需要更加注重环境保护,采取更加环保的生产方式。
3. 新产品研发:丙酮酸的应用领域不断拓展,市场对于新产品的需求也在增加,企业需要加大研发力度,推出更加符合市场需求的产品。
五、发展建议1. 加强技术创新和研发投入,不断提高产品品质和竞争力。
2. 提高产品的附加值,拓宽产品应用领域,增加产品的需求。
3. 调整生产结构,适应市场需求的变化,提高产品多样性。
4. 加强与下游客户的合作,根据客户需求进行定制化生产。
5. 加大对环境保护的投入,推动企业向绿色、环保方向转型发展。
总结:丙酮酸产业具有广阔的市场前景和发展空间,在不断创新和技术提升的推动下,有望实现可持续发展。
各企业应密切关注市场需求的变化,积极调整生产结构,提高产品质量和附加值,创造出更多的市场机会。
同时,加强环境保护意识,推动产业向绿色、环保方向转型,为可持续发展做出贡献。
发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究以《发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究》为标题,本文利用高效液相色谱法(HPLC)检测发酵液中的丙酮酸,探讨其在发酵工艺中的应用价值。
一、研究背景丙酮酸是一种普通的醛酸类有机物,主要存在于植物中,可作为蔗糖等营养成分的重要原料,在食品工业和化学工业中发挥关键作用,具有重要的经济价值。
丙酮酸经发酵可以产生大量的原料汁,并可通过现代生物技术合成多种醛酸类物质,在营养品、香料、醇类、抗菌素制剂和药物合成领域都有广泛应用。
因此,对发酵液中丙酮酸的检测非常重要。
二、发酵液中丙酮酸的检测方法由于丙酮酸复杂的结构和发酵液中的微量低浓度,传统的检测方法难以满足实际需求,因此,使用高效液相色谱法(HPLC)检测发酵液中的丙酮酸,已成为当今研究最为普遍的方法。
首先,将发酵液中的丙酮酸用反相柱分离,然后利用体积流动法和注射台,将反相柱分离的丙酮酸检出,最后使用色谱管进行实验色谱分析,从而可以检测出发酵液中的丙酮酸。
三、实验结果分析经过研究,实验发现,当发酵液中丙酮酸浓度在2.9~3.1g / L 时,发酵液中丙酮酸的检测效果最佳,而且该方法操作简便,可以在短时间内实现检测,并满足发酵工艺的实际需要。
此外,实验发现,HPLC法检测出的丙酮酸浓度能够达到百万分之一的精度,精确度和准确度都非常高,可以准确评价发酵液中丙酮酸的浓度,在发酵工艺中发挥重要作用。
四、总结本文利用HPLC法检测发酵液中的丙酮酸,从而发现当发酵液中丙酮酸浓度在2.9~3.1 g/L时,发酵液中的丙酮酸的检测效果最佳,且该方法操作简便,准确度高,满足发酵工艺的实际需要。
这种检测方法不仅可用于检测发酵液中的丙酮酸,而且也可用于检测其他微量物质,在精准医学和分子生物技术等方面也有重要意义。
未来,可以尝试通过分析其发酵速率来优化发酵过程,提高丙酮酸的产率,拓展其应用价值。
总之,利用HPLC法检测发酵液中的丙酮酸,不仅可以满足发酵工艺的实际需要,而且还可以用于其他方面,这种检测方法将在未来发挥重要作用。
丙酮酸合成工艺的研究进展[摘要]丙酮酸是药物合成与有机合成的重要中间体。
本文本要阐述其化学合成法和生物技术法合成的现状、研究进展及其发展前景,并将各种方法进行对比,目的为以后的生产、研究提供参考。
【关键词】丙酮酸;化学合成;生物技术;酶催化法;生物工程;微生物发酵法丙酮酸[1],又称a-氧代丙酸,结构为CH3COCOOH,是所有生物细胞糖代谢及体内多种物质相互转化的重要中间体,因分子中包含活化酮和羧基基团,所以作为一种基本化工原料广泛应用于化学、制药、食品、农业及环保等各个领域中[2]。
丙酮酸可通过化学合成和生物技术多种方法制备。
1、化学合成法1.1 酒石酸脱水脱羧法此法工艺简单易行:将酒石酸与硫酸氢钾混合物在220℃下蒸馏,馏出物再经真空精馏即得丙酮酸。
此法的特点是加入导热油之后,在一个均匀体系中进行反应,降低了反应温度,减少氧化程度,可操作性大幅度提高,适合继续反应生成丙酮酸系列产品。
其缺点是丙酮酸产率较底,得1g丙酮酸需消耗5g硫酸氢钾。
仅原料成本就达8万元每吨,因成本过高而无法为大多数厂家所接受。
1.2 乳酸氧化法以乳酸为原料,氧化脱氢一步法生产丙酮酸[3]。
但乳酸直接制取丙酮酸非常困难,根据工艺不同必须选用合适的催化剂。
可以选择的催化剂有磷酸铁、钼酸碲盐、银、钒等[4]。
此法酒石酸的氧化脱羧法相比,具有能耗低、污染小、产率高等优点,适合工业化生产。
其缺点是成本也较高,约6万元每吨。
2、生物技术法生物技术法生产丙酮酸,由于成本较低、产品质量较高、对环境污染小而得到发展,主要有酶催化法和微生物发酵法。
2.1 酶催化法用酶或微生物细胞作催化剂,使葡萄糖或三羧酸循环的某些中间代谢产物,在一定条件下,转化为丙酮酸的技术,称为酶催化法。
其主要过程是先进行小规模的微生物培养,菌体收集,直接转化或用载体包埋成固定化酶,然后转化生成丙酮酸[5]。
酶催化法设备投资小,能耗低,转化率高,但底物来源较窄、成本比较高约5万元每吨,因此其进一步推广受到限制。
丙酮酸的生成引言丙酮酸是一种重要的有机化合物,广泛应用于医药、化工等领域。
本文将探讨丙酮酸的生成途径及其相关反应机制。
丙酮酸的结构与性质丙酮酸的化学式为C3H6O3,是一种无色液体。
它是一个α-酮酸,具有两个官能团:羧基和酮基。
丙酮酸具有较高的沸点和熔点,可溶于水和有机溶剂。
在酸性条件下,丙酮酸容易发生酸解反应,生成丙酮和二氧化碳。
丙酮酸的生成途径1. 乙醇酸化反应乙醇可以通过酸化反应生成丙酮酸。
该反应通常在酸性条件下进行,常用的酸催化剂有硫酸、磷酸等。
反应机制如下: 1) 乙醇质子化:乙醇在酸性条件下质子化,生成乙醇离子。
2) 乙醇离子解离:乙醇离子进一步解离,生成丙酮酸根离子。
3) 丙酮酸根离子质子化:丙酮酸根离子在酸性条件下质子化,生成丙酮酸。
此反应生成的丙酮酸纯度较高,适用于工业生产。
2. 醛的氧化反应醛可以通过氧化反应生成丙酮酸。
常用的氧化剂有高锰酸钾、过氧化氢等。
反应机制如下: 1) 醛氧化:醛被氧化剂氧化,生成羧酸。
2) 羧酸质子化:羧酸在酸性条件下质子化,生成丙酮酸。
该方法适用于实验室规模的合成。
3. 脂肪酸的裂解反应脂肪酸可以通过热裂解反应生成丙酮酸。
反应机制如下: 1) 脂肪酸裂解:脂肪酸在高温条件下裂解,生成丙酮酸和烯烃。
2) 丙酮酸生成:裂解产物中的烯烃经过氧化反应,生成丙酮酸。
该方法适用于工业生产,但产物纯度较低。
丙酮酸的反应机制1. 酸解反应在酸性条件下,丙酮酸容易发生酸解反应。
反应机制如下: 1) 羧基质子化:丙酮酸中的羧基质子化,生成羧离子。
2) 羧离子解离:羧离子进一步解离,生成酮离子和二氧化碳。
3) 酮离子质子化:酮离子在酸性条件下质子化,生成丙酮。
此反应在丙酮酸的储存和运输过程中需要注意,避免酸解反应的发生。
2. 氧化反应丙酮酸可以被氧化剂氧化,生成二氧化碳和水。
常用的氧化剂有高锰酸钾、过氧化氢等。
反应机制如下: 1) 丙酮酸氧化:丙酮酸被氧化剂氧化,生成羧酸。
化学工程师cheTrIIdEn目㈣20。
2年04月●——一————————一——————————一室章编号:10∞一1124(2002)02—0014—02双氧水催化氧化乳酸合成丙酮酸杨辉琼郭贤烙易翔(湖南工程学院化学系湖南湘潭411101)摘要:本文研究了以乳酸为原料,用双氧水催化氧化合成丙酮酸,并探讨了催化裁、温度、原料配比、反应时问等因素对合成反应的影响,确定了最佳合成条件。
关键词:乳酸;催化氧化;丙酮酸中国分类号:0623.672;1m2562文献标识码:ATkSynm幅isofPynlvicAdd蛔nI舭龀Addbycatal州c(Mda如n碣血嘴en蜥de删da廿∞k蜡胁啦面愕(抽瓜帆h廿n胁蜡(嘶n.0fc}l哪is扛y,H哪E幛ne竹I呻fⅪ皿gtaTl41110l,0linⅡ)Aktract:Thisp8permudieson州he8izepyn州cacidf函Iacticacidbycatal—c啦i幽tionhydrogenpe删ide喇da—d0Ⅱ.11砣e8ect0fcata:b喀t,re盹石衄te工nP啊hlre,r“oofreEct曲bd瑚cdondⅡ圮衄dleP‘oduct—eIdhavebeendis—c1】s8ed明dt11eopdmumtechdo科condidon8IIawbeenfol州.1【£”枷s:L日cEic晒d;血山扣c嘲d曲∞;PyrLl“c日cid1前言丙酮酸是一种重要的有机合成和药物合成中间体。
由于其同时具有羰基和羧基两个官能团,因而反应中心多而显出比一般化合物更为重要和特殊的化学性质,已引起越来越多的化学工作者的重视。
在农业上它被用于杀菌剂和除草剂的合成;在化妆品方面,可用作增白剂、防腐剂、抗氧剂等;在食品方面可用作保鲜剂u’;在医药方面,可作合成治疗高血压的药物及合成抗病毒剂、镇静剂等,特别值得注意的是,丙酮酸钙是目前市场销售火爆的减肥药的主要成分之一L2o;此外,丙酮酸还是一种生化试剂,用于转氨酶的测定【3J。
丙酮的生物合成及生物转化研究丙酮是一种广泛使用的有机化合物,它在工业生产和日常生活中都有着重要的应用。
丙酮的主要应用领域包括溶剂、中间体、聚合物、金属清洗剂等方面。
丙酮生物合成及生物转化一直是研究的热点之一。
通过对丙酮生物合成及生物转化的研究,不仅可以探索生命科学的奥秘,还有助于开发生物质能的利用和环境保护。
一、丙酮生物合成的主要途径丙酮生物合成的主要途径是通过两步反应完成。
首先,丙酮酸在酸性条件下受到脱羧作用,生成羧酸及酸性水解产物。
随后,由于这些产物被氧化,所以二氧化碳分子被去除形成了一个酮官能团(也就是丙酮)并产生了水分子。
总的反应方程式如下:CH3CH2COOH → CH3COCH3 + CO2 + H2O丙酮生物合成路径中,丙酮酸的来源是经过碳水化合物代谢的产物,如葡萄糖、纤维素和木质纤维素等。
而在非法压榨生物质的过程中,压榨后的生物质中含有大量的丙酮酸,这些丙酮酸可以被用于发酵和化学反应等方面。
二、丙酮生物转化的主要途径丙酮的生物转化是指将丙酮作为底物进行生物转化的过程。
丙酮生物转化的主要途径是通过微生物代谢和酶催化反应完成。
其中,以微生物的代谢反应为主要。
丙酮是一种较为容易被微生物代谢的化合物,生物转化的主要过程有以下三个方面:1. 丙酮在某些微生物体内,由丙醇脱氢酶作用而脱氢成丙酮;2. 氧化丙酮为醋酸乙酯或醋酸甲酯等底物;3. 丙酮还可以通过乙醛酸的两步转化成为丙醇。
这些生物转化途径,为利用丙酮做了良好的开发工作,同时也有利于环境工程的净化。
三、丙酮生物合成及生物转化的应用1.生物质能利用生物质能利用是打破碳循环链条,降低二氧化碳排放的重要途径。
生物质能利用的核心技术是生物质转化。
其中,丙酮作为生物质转化的一种重要路径,在生物质能利用中扮演着重要的角色。
利用丙酮的生物合成及生物转化技术,可以开发新型的生物质能源,如生物质气体化液化、生物甲醇等。
2.环境净化丙酮生物转化是一种先进的生物技术,它具有高效、低成本、无污染排放等显著特点。
丙酮酸的应用及合成研究进展吴晓燕(食品系生化101班14号)摘要:丙酮酸是一种重要的有机酸,广泛应用于制药、日化、农用化学品和食品等工业中。
本文从化学合成法,酶转化法,微生物发酵法介绍了丙酮酸合成现状及其研究进展,并对丙酮酸的发展前景进行了展望。
关键词:丙酮酸应用合成丙酮酸(Pyruvate),分子式CH3COCOOH,分子量88.06,原称焦性葡萄酸,是体内产生的三碳酮酸, 它是糖酵解途径的最终产物, 在细胞浆中还原成乳酸供能, 或进入线粒体内氧化生成乙酰CoA, 进入三羧酸循环, 被氧化成二氧化碳和水, 完成葡萄糖的有氧氧化供能过程。
丙酮酸又称2- 氧代丙酸、α- 酮基丙酸或乙酰基甲酸,为无色至淡黄色液体,呈醋酸香气和酸味,是最重要的α- 氧代羧酸之一。
1、丙酮酸的应用丙酮酸不仅在生物能量代谢中具有十分重要的作用,而且是多种重要化合物的前体,因此,丙酮酸作为一种重要的精细化工中间体,广泛应用于医药、农药、食品等领域,尤其是作为医药中间体,具有良好的发展前景,其用途如表1 所示[1]。
表1 丙酮酸( 盐) 及其衍生物的主要用途用途示例制药工业用于酶法合成L2色氨酸、L2酪氨酸、L2多巴,合成L2胱氨酸、L2亮氨酸、VB6 、VB12 ;合成血管紧张肽Ⅱ抗药、系列酶蛋白抑制剂、镇静剂、辛可芬、异烟肼丙酮酸钙、22苯基喹啉242羧酸、恩波吡维胺、磷酸烯醇丙酮酸、42甲唑甲酸、噻咪等。
丙酮酸钙可用作减肥保健药品。
合成治疗高血压的药物,蛋白酶抑制剂,杭病毒剂,镇静剂等。
日化工业丙酮酸乙酯可抑制表皮中的酪氨酸酶的形成,美白肌肤;可用作化妆品的防腐剂和抗氧化剂;用作空气清新剂农用化学品是合成乙烯系聚合物、氢化阿托酸、谷物保护剂、成熟剂等多种农药的起始原料,作为杀菌剂,除草剂。
]食品、饲料工业 GB276021996 规定为酸味添加剂;作为添加剂具有防腐保鲜功能细胞培养与乳酸组成抗氧化剂,降低对细胞的伤害,是动物细胞培养的重要底物生化试剂用于伯醇及仲醇的检定;转氨酶的测定;是脂肪族胺的显色剂传感器与电子材料与乳酸、锂构成人工胰脏,作为体外传感器测定葡萄糖的含量;丙酮酸酯类产品作为特种溶剂用于电子材料方面养殖业[2] 丙酮酸对改善心功能、增强机体抗氧化功能、调节反刍动物的瘤胃发酵类型以及提高采食量等方面都有积极地作用,对奶牛酮病有一定的预防和治疗效果2、丙酮酸的合成方法[3]丙酮酸合成方法有化学合成法,酶转化法和微生物发酵法。
丙酮酸生产工艺丙酮酸是一种重要的有机化合物,广泛应用于化工、医药、食品等领域。
下面将介绍丙酮酸的生产工艺。
一、丙酮酸的生产方法丙酮酸的主要生产方法有氧化法、醋酸酯化法和乙炔法。
1. 氧化法:这是目前丙酮酸的主要生产方法之一。
该方法利用丙酮作为原料,经过氧化反应得到丙酮酸。
具体的反应过程如下:丙酮 + 氧气 -> 丙酮酸氧化法具有反应速度快、反应条件温和等优点,且对环境友好,被广泛应用于工业生产中。
2. 醋酸酯化法:该方法是利用醋酸与乙醇进行酯化反应,生成乙酸乙酯,然后在适当的条件下进行酸解反应,得到丙酮酸。
具体的反应过程如下:醋酸 + 乙醇 -> 乙酸乙酯乙酸乙酯 + 酸 -> 丙酮酸醋酸酯化法具有原料易得、反应条件温和等优点,但是反应过程较为复杂,产率相对较低。
3. 乙炔法:该方法是利用乙炔与二氧化碳进行反应,生成乙酸乙炔酯,然后经过水解反应得到丙酮酸。
具体的反应过程如下:乙炔 + 二氧化碳 -> 乙酸乙炔酯乙酸乙炔酯 + 水 -> 丙酮酸乙炔法具有反应简单、原料易得等优点,但是乙炔的生产和储存具有一定的危险性,使用时需要注意安全。
二、丙酮酸的工业生产过程以氧化法为例,介绍丙酮酸的工业生产过程。
1. 原料准备:将纯度较高的丙酮与氧气进行混合,并将混合气体送入反应釜中。
2. 反应:在适当的温度和压力条件下,将混合气体在催化剂的作用下进行氧化反应,生成丙酮酸。
反应过程需要控制好反应温度和反应时间,以提高反应的选择性和产率。
3. 分离纯化:将反应产物进行分离纯化,通常采用蒸馏等方法。
通过蒸馏,可以将目标产物丙酮酸从其他杂质中分离出来,得到高纯度的丙酮酸。
4. 后处理:对分离纯化后的丙酮酸进行干燥、包装等处理,使其符合工业要求。
三、丙酮酸的应用领域丙酮酸作为一种重要的有机化合物,在化工、医药、食品等领域有广泛的应用。
1. 化工领域:丙酮酸可以作为溶剂和中间体,在聚合物、树脂、涂料等的生产中发挥重要作用。
科技专论
丙酮酸合成工艺的研究进展
陕西国际商贸学院(陕西咸阳) 王飞娟 张爽 王燕
【摘 要】丙酮酸是药物合成与有机合成的重要中间体。
本文本要阐述其化学合成法和生物技术法合成的现状、研究进展及其发展前景,并将各种方法进行对比,目的为以后的生产、研究提供参考。
【关键词】丙酮酸;化学合成;生物技术;酶催化法;生物工程;微生物发酵法
丙酮酸[1],又称a-氧代丙酸,结构为CH
3
COCOOH,是所有生物细胞糖代谢及体内多种物质相互转化的重要中间体,因分子中包含活化酮和羧基基团,所以作为一种基本化工原料广泛应用于化学、制药、食品、农业及环保等各个领域中[2]。
丙酮酸可通过化学合成和生物技术多种方法制备。
1、化学合成法
1.1 酒石酸脱水脱羧法
此法工艺简单易行:将酒石酸与硫酸氢钾混合物在220℃下蒸馏,馏出物再经真空精馏即得丙酮酸。
此法的特点是加入导热油之后,在一个均匀体系中进行反应,降低了反应温度,减少氧化程度,可操作性大幅度提高,适合继续反应生成丙酮酸系列产品。
其缺点是丙酮酸产率较底,得1g丙酮酸需消耗5g硫酸氢钾。
仅原料成本就达8万元每吨,因成本过高而无法为大多数厂家所接受。
1.2 乳酸氧化法
以乳酸为原料,氧化脱氢一步法生产丙酮酸[3]。
但乳酸直接制取丙酮酸非常困难,根据工艺不同必须选用合适的催化剂。
可以选择的催化剂有磷酸铁、钼酸碲盐、银、钒等[4]。
此法酒石酸的氧化脱羧法相比,具有能耗低、污染小、产率高等优点,适合工业化生产。
其缺点是成本也较高,约6万元每吨。
2、生物技术法
生物技术法生产丙酮酸,由于成本较低、产品质量较高、对环境污染小而得到发展,主要有酶催化法和微生物发酵法。
2.1 酶催化法
用酶或微生物细胞作催化剂,使葡萄糖或三羧酸循环的某些中间代谢产物,在一定条件下,转化为丙酮酸的技术,称为酶催化法。
其主要过程是先进行小规模的微生物培养,菌体收集,直接转化或用载体包埋成固定化酶,然后转化生成丙酮酸[5]。
酶催化法设备投资小,能耗低,转化率高,但底物来源较窄、成本比较高约5万元每吨,因此其进一步推广受到限制。
2.2 基因工程技术
利用基因重组技术构建高表达乙醇酸氧化酶、过氧化氢酶等的基因工程菌,用于生产丙酮酸的技术。
这些酶能催化乳酸与氧反应生成丙酮酸。
其技术是先将乙醇酸氧化酶基因和过氧化氢酶基因分别与DNA载体重组,构成重组子,并分别转入宿主细胞,分别获得两种酶高表达的基因工程酵母,按0.713mol/LL-乳酸钠溶液每100ml加湿重转化体5g,同时加一定量渗透剂,在5个大气压下,以70psig氧压通入氧气,5℃搅拌转化4小时,丙酮酸产率大97.7%[6]。
本技术底物转化率高,但技术难度大。
2.3 微生物发酵法
微生物代谢过程中,利用葡萄糖积累丙酮酸的过程称为微生物发酵法。
微生物发酵法生产丙酮酸研究已有50年历史,但因丙酮酸高产菌株选育十分困难,虽有一些微生物能够积累丙酮酸,但其产量无法达到工业化要求[7]。
该法生产丙酮酸真正取得突破,是在1988年时,日本东丽工业株式会社的研究人员宫田令子和米原辙选育出一系列丙酮酸产量超过50g/L的球拟酵母菌株,使微生物发酵法生产丙酮酸的工业化成为可能。
1992年,日本开始采用微生物发酵法生产丙酮酸[8]。
产量为400吨每年,成本约为2-3万元每吨。
与化学合成法和酶转化法相比,微生物发酵法因原料来源广,能耗低,污染少,成本低而更具有优越性[9]。
但微生物发酵法缺点是转化率比较低,这是因为丙酮酸是糖酵解途径的关键中间产物,在细胞中,丙酮酸作为一种重要的中间代谢产物连接了EMP和TCA中心代谢途径,又与多条分支代谢途径相关联,可转化为多种发酵产物而无法在体内积累。
因此需要切断或弱化其进一步代谢,才能使其在细胞中大量积累。
即加快葡萄糖向丙酮酸的转化率,减弱向TCA循环的通量,切断或减弱其分支代谢途径,促进分泌,减弱丙酮酸的再利用,最终实现丙酮酸的大量积累。
为达此目的,就必须对微生物发酵法生产丙酮酸的影响因素进行研究。
微生物发酵法生产丙酮酸的影响因素有:菌种选育,营养条件,维生素水平,供氧模式,葡萄糖的质量浓度等等,其最关键的是菌种选育和营养条件[10]。
为了提高微生物发酵法生产丙酮酸的竞争力,对微生物发酵生产丙酮酸的工业化在发酵部分还需要:①进一步改善丙酮酸生产菌的产酸能力和遗传稳定性,提高糖酸转化率,缩短发酵时间;②提高生产菌对高浓度丙酮酸的耐受性,以期进一步提高丙酮酸浓度,便于下游处理;③目前原料成本中葡萄糖的费用占了很大的比例,因此,要提高生产菌株对廉价底物(如糖蜜、淀粉糖)等的利用能力。
今后的研究工作应集中在:①在保证细胞正常代谢的前提下,尽可能减少丙酮酸的降解或转化,这是获得丙酮酸高产量和高产率的必要条件;②加快从葡萄糖到丙酮酸的代谢速度,以确保获得丙酮酸的高生产强度。
随着人民生活水平的不断提高,丙酮酸的应用范围日渐扩大,需求不断增长,但丙酮酸系列产品大多需要进口且价位较高。
其生产工艺的改革并实现工业化势在必行。
传统工艺生产的产品质量差、成本高且对环境污染大。
而生物技术法的工艺更为绿色,更为对环境友好,生物技术法新工艺取代传统工艺指日可待,前景广阔,值得进一步研究。
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