浙江预防医学２０１０堡第２２鲞筮兰 圣ｈｅｊ 强 ！ ！ ： ：
应用高效液相色谱法测定保健食品中
大豆异黄酮的含量
蒋明哲汤鎏王惠华
中图分类号：Ｒ１１５ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００７－０９３１（２０１０）０３—００９１－０２
大豆异黄酮是一种从大豆中分离提取的植物雌
性激素，具有抗氧化、改善心血管功能等功效ｕ Ｊ。
目前发现的大豆异黄酮分为游离型的苷元和结合型
的糖苷２类，其中以染料木素和大豆苷元为主要活
性成分。本实验通过研究用８０％乙醇超声提取后，
用水定容，采用高效色谱法测定大豆制品类保健食
品中大豆异黄酮含量，方法回收率高，易于操作，
满足检测要求。
材料与方法
１ 材料实验所用试剂均为分析纯，所用玻璃器
皿均于１４０ｃ【＝烘烤４ｈ。染料木素和大豆苷元
（Ｓｉｇｍａ公司）；甲醇（ＨＰＬＣ级）；超纯水由ＭｉＨｉ
—Ｑ超纯水机制得（美国Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）。
２ 标准溶液的配制
２．１ 染料木素标准溶液准确称取染料木素标准
品，先加入少量甲醇溶解后再用４０％甲醇定容并
配制成１．０ｍｇ／ｍＬ标准储备液，于冰箱（４￣Ｃ）中
保存，使用时用４０％甲醇稀释成２５．０￣ｇ／ｍＬ的标
准使用液。
２．２ 大豆苷元标准溶液准确称取大豆苷元标准
品，先加人少量甲醇溶解后再用４０％甲醇定容并
配制成１．０ｍｇ／ｍＬ标准储备液，于冰箱（４℃）中
保存，使用时用４０％甲醇稀释成２５．０ｐ，ｇ／ｍＬ的标
准使用液 。
２．３ 染料木素、大豆苷元混合标准溶液分别吸
取１．０ｍｇ／ｍＬ染料木素、大豆苷元标准溶液
１．０ｍＬ，用４０％甲醇稀释至２５．０￣ｇ／ｍＬ的混合标
准使用液。
３ 检测仪器Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪，配紫外检
作者单位：浙江省疾病预防控制中心，浙江 杭州
３１００５１ ・９ｌ－
・实验技术与质控・
测器。
４ 方法
４．１ 样品制备称取含大豆异黄酮类的保健食品
０．５ｇ于１００ｍＬ容量瓶中，加８０％乙醇溶液溶解，
一４０８一 江苏农业科学２０１１年第３９卷第５期
王 磊，赵 伟．用高效液相色谱法测定大豆发酵制品中的异黄酮［Ｊ］．江苏农业科学，２０１１，３９（５）：４０８—４１０
用高效液相色谱法测定大豆发酵制品中的异黄酮
王磊 ，赵伟
（１．江苏省农产品质量检验测试中心，江苏南京２１００３６；２．江苏仁信化工有限公司，江苏南京２１００２９）
摘要：采用高效液相色谱法检测大豆发酵制品中的异黄酮含量。发酵液经终浓度为８０％的乙醇溶液超声波提取
３０ ｍｉｎ，以ＳＢ—Ｃ， 色谱柱（４．６ ｍｍ×１５０ ｍｍ，５ ｔｘｍ）、甲醇和水为流动相进行梯度洗脱（流速为０．８ ｍＬ／ｍｉｎ）、波长
２５４／ｌｍ处进行检测，该方法的平均回收率为９８．５％，变异系数小于４％，是一种灵敏、准确、重现性好的异黄酮检测方
法。同时试验结果表明，大豆经发酵后，其中的异黄酮主要以苷元形式存在。
关键词：高效液相色谱；发酵制品；大豆异黄酮
中图分类号：ＴＳ２０７．３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—１３０２（２０１１）Ｏ５一ｏ４Ｏ８一ｏ２
大豆异黄酮是一类植物雌激素，主要以与糖苷配基结合
的形式存在，另有２％～３％以游离形式的苷元存在，具有重
要的生理功能 。近年，通过研究大豆异黄酮在人体内的吸
收、代谢及对多种疾病的作用发现：异黄酮苷元比异黄酮葡萄
糖苷更容易被吸收进入人体的血液中，并在血液中较长时间
内保持稳定的浓度；同时，异黄酮苷元具有较强的抗氧化活性
和对癌细胞增殖的特异性抑制作用，因此异黄酮苷元被认为
是大豆异黄酮中具有预防和治疗癌症最有效的形式 。大
多数大豆异黄酮的检测方法主要是检测异黄酮糖苷，并不能 完全反映其生理活性和作用。
发酵大豆制品是我国传统食品，由于发酵大豆制品中部
分异黄酮糖苷在微生物和酶的作用下转化为苷元，可提高产 品的生理活性 。 ，因而受到国内外的广泛关注。但目前大
豆发酵制品中异黄酮的检测往往存在着耗时长、稳定性差、分
ｌＯ０ ２００２， ２３． ．２ 曩嗣曩学 ※分析检验
光度法（ＡＡＳ）进行结果对比，如表３所示，表明：本
法与用原子吸收法结果吻合。进行统计学上成对比
较法显著性检验，由于算得ｔ值《ｈ＊值，说明两法
之间无实质性差异。
参考文献
１ 鲁长蠢．食品理化检验学北京：人民卫生出版社，１９９５，
７０ ２王叔淳．食品卫生检验技术手册．北京：化学工业出版社，
１９９６，１８５． ３ 王桂芹，王赦萍。黄权．分析仪器在饲料微量元素分析中
采用 的应用．中国饲料，１９９８．（２０）：１８—１９． ４ Ｓｅ￣ｄｄｌＥ．Ｂ微遘金属比色测定．北京：地质出版杜，１９５６．
５４２—５４５． ５ 司文会．食品分析中铁、锰、锌、铜快速分光光度法测定的 研究．广东微量元素科学，１９９８，５（８）：５６—６０． ６ 潘教麦．显色剂及其在冶金分析中的应用．上海：上海科 学技术出鬣社，ｌ９８ｌ，３５４． ７ 印天寿．铜的Ｃｕ（ＤＤＴＣ） 一次萃取分光光度法测定．土 壤肥料，１９９６，３８～４２． ８ 杨勇，杨秀利，罗川南微孔滤膜富集测定食品中徽量铁的 研究．食品工业科技 ２０００，２１（１）：７０～７Ｉ＿
殷丽君李里特李再贵 中国农业大学食品学院北京 １０００８３
辰已英三 日本国际农林水产业研究中心
摘要本文介绍了利用高教液相色谱（ｔＬｏＬＣ）技术快速检测发酵大豆镧品中异黄酮吉量的方法。在Ｌｉｃｈｎ￣ｐｅｒ １００ＲＰ—ｌ８（４．６ｍｍ×２５ｃｍ×５ｌ吼）色谱柱上，以古有０．１％（ｖ／ｖ）冰醋酸的乙腈和水藩液为流动相进行梯度洗脱，检测 波长为２５４ｎｍ，平均回收宰达到９９％以上。分析结果表明此分析方法灵敏、准确、重现性好。在上述条件下检测发酵大 豆制品中异黄酮古量．鳍果表明发酵大豆制品中异黄酮主要以甙元形式存在。
关键词大豆异黄酮高教液相色谱 Ａｌａｍａｃｔ Ｔｈｅ ｈｉｇｈ呷ｔｂｒⅡＩａｎｅｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ ｉｓ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ．Ｉｓｏｔｌａｖｏｎｅ ｗａｓ
大豆异黄酮研究进展
作者：陈彦杞
来源：《河南农业·综合版》 2017年第11期
大豆异黄酮是大豆中的一类具有广泛营养学价值和健康保护作用的多酚化合物，自然界中的异黄酮资源十分有限，大豆是含有异黄酮，且在营养学上有意义的食物资源，这就赋予了大豆及大豆食品特别的重要性。许多研究证实：大豆异黄酮有弱雌性激素活性，作为一种植物性雌激素，具有类雌激素和抗雌激素双重作用。而且具有较好的天然抗氧化活性、抗溶血活性和抗真菌活性的生物效能，长期食用能有效预防和抑制白血病、多种癌症、妇女更年期综合症等多种疾病的发生。在大豆种子中提取和开发高异黄酮的食品或者保健品，已然成为食品保健品和医药等行业的热点之一。因此，培育高异黄酮含量的大豆品种成为大豆品质育种的主要目标之一。
一、大豆异黄酮概述
（一）大豆异黄酮的组成
大豆异黄酮是属于黄酮类化合物中的异黄酮类。现知的12种大豆异黄酮，可以分为2类：自由基和共轭类。游离型苷元共有3种，仅占大豆异黄酮总量的2%~3%，包括金雀异黄素（又称染料木黄酮）、大豆黄素（又称大豆素）和发现较晚且含量较少研究不多的黄豆黄素。结合型糖苷约占大豆异黄酮总量的97%~98%，主要以葡萄糖苷、乙酰基葡萄糖苷和丙二酰基葡萄糖苷形式存在，共有9种，分别为金雀异黄苷、大豆苷、黄豆苷、6”-O-乙酰基大豆苷、6”-O-乙酰基金雀异黄苷、6”-O-乙酰基黄豆苷、6”-O-丙二酰基大豆苷、6”-O-丙二酰基黄豆苷、6”-O-丙二酰基金雀异黄苷。结合型糖苷大部分以金雀异黄苷、大豆苷、丙二酰基金雀异黄苷、丙二酰基大豆苷4种形式存在。这4种结合性糖苷占异黄酮总量的95%。
（二）大豆异黄酮的理化性质
纯的大豆异黄酮为无色晶体状物质，是大豆带有苦涩味的因子之一。染料木素呈无色片状结晶，大豆苷元呈无色针状结晶，工业上生产的大豆异黄酮产品多为白色或淡黄色粉末，食用时兼具苦味、收敛性和干涩感。大豆异黄酮苷元比糖苷拥有更加突出的味道，其中金雀异黄素和大豆黄素最甚。豆制品中的口味与大豆异黄酮最为相关，除此之外加工条件是另一大重要影响因素。大豆异黄酮在常温下的性质稳定，易溶于醇类、酯类、酮类溶剂和稀碱中。不溶于水，难溶于石油、乙醚、苯等非极性有机溶剂。大豆异黄酮作为异黄酮类化合物，具有异黄酮类化合物所共有的理化性质。
