CrystalChem超灵敏小鼠胰岛素ELISA试剂盒

小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin)，再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)含量。

试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T30pg/ml-800pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin)，再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)浓度。

试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

小鼠胰岛素(Insulin)Elisa试剂盒使用说明货号：BC1710保存：试剂盒保存：2-8℃，有效期6个月。

产品内容：序号名称96孔配置1酶标包被板96孔*1可拆卸板2酶标试剂6ml*1瓶3标准品(浓度16mIU/L)0.6ml*1瓶4标准品稀释液2ml*1瓶5生物素标记的抗Insulin抗体 1.5ml*1瓶6显色剂A液6ml*1瓶7显色剂B液6ml*1瓶8终止液6ml*1瓶9浓缩洗涤液（*30）20ml*1瓶10封板膜1张11使用说明书1份产品说明：小鼠胰岛素(Insulin)Elisa试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中小鼠胰岛素(Insulin)的含量。

采用双抗体夹心法测定小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板，制成固相载体，实验时依次在微孔板中加入样本及标准品，并加入HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，反复洗涤后加底物TMB显色。

TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再用硫酸终止反应，转变成黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)含量呈正相关。

采用酶标仪在450nm波长测定吸光度（OD值），根据标准曲线，计算测试样品中胰岛素(Insulin)浓度。

实验材料与试剂配制：1.仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。

2.洗液的配制：按1:30的比例配制洗液备用。

样品收集、处理及保存：1.细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。

用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

2.细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。

3.血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

产品信息和操作指南Mouse TGF-β1预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-2710-048 / DKW12-2710-096本试剂盒专用于科研，而非用于诊断Mouse TGF-β1DKW12-2710目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (6)操作过程 (8)结果分析 (10)试剂盒的保存 (10)操作步骤一览表 (11)参考文献 (12)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (13)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (16)1、产品简介：达优®小鼠TGF-β1 ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术，体外定量检测小鼠血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的TGF-β1，可同时检测天然的和重组的TGF-β1。

本试剂盒为预包被板，整个过程孵育时间不超过4小时，洗涤12次。

本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系，E-mail：*************.检测范围：1000-15.6 pg/mL灵敏度：5 pg/mL重复性：板内、板间变异系数均＜10％。

2、知识背景：转化生长因子-β1（TGF-β1）能使正常的成纤维细胞的表型发生转化,具有细胞抑制和促进生长双重作用。

TGF-β1分子量25kDa，非糖基化同型二聚体蛋白，由二硫键连接。

TGF-β1基因结构具有高度保守性，人和小鼠TGF-β1的同源性高达99%（1-4）。

TGF-β1在治疗伤口愈合，促进软骨和骨修复以及通过免疫抑制治疗自身免疫性疾病和移植排斥等方面发挥重要作用（5）。

3、试剂盒提供的试剂：试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状，按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释Dilution buffer R（1×） 3/2瓶* 即用型Washing buffer（50×）1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*：96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器：1．酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2．微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P1000 3．蒸馏水或去离子水4．全新滤纸5．旋涡振荡器和磁力搅拌器6．37℃温箱5、注意事项：1.试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡20-30分钟。

小鼠胰岛素自身抗体(IAA）(PCT）ELISA试剂盒产品简介小鼠胰岛素自身抗体(IAA）(PCT）ELISA试剂盒产品简介小鼠胰岛素自身抗体(IAA）(PCT）ELISA试剂盒实验原理小鼠胰岛素自身抗体(IAA）(PCT）ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被小鼠胰岛素自身抗体(IAA）(PCT）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的小鼠胰岛素自身抗体(IAA）(PCT）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。

将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。

推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。

为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。

最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

RayBio® Mouse Insulin ELISA KitCatalog #: ELM-InsulinUser ManualLast revised June 14, 2021Caution:Extraordinarily useful information enclosedISO 13485 Certified3607 Parkway Lane, Suite 100Norcross, GA 30092 Tel: 1-888-494-8555 (Toll Free) or 770-729-2992, Fax:770-206-2393Web: , Email: *******************RayBiotech, Inc.________________________________________RayBio® Mouse Insulin ELISA Kit ProtocolTable of ContentsSection Page # I.Introduction3II.Storage4III.Reagents4IV.Additional Materials Required4V.Reagent Preparation5VI.Assay Procedure6VII.Assay Procedure Summary7VIII.Calculation of ResultsA. Typical DataB. SensitivityC. Spiking & RecoveryD. LinearityE. Reproducibility 8 8 8 9 9 10IX.Specificity10X.Troubleshooting Guide11Please read the entire manual carefully before starting your experimentI. INTRODUCTIONThe RayBio® Mouse Insulin ELISA kit is an in vitro enzyme-linked immunosorbent assay for the quantitative measurement of Mouse Insulin in serum, plasma (Collect plasma using EDTA and Citrate as an anticoagulant. Heparin is not recommended as anticoagulants for use in this assay) and cell culture supernatants. This assay employs an antibody specific for Insulin coated on a 96-well plate. Standards and samples are pipetted into the wells and Insulin present in a sample is bound to the wells by the immobilized antibody. The wells are washed and biotinylated anti-Mouse Insulin antibody is added. After washing away unbound biotinylated antibody, HRP-conjugated streptavidin is pipetted to the wells. The wells are again washed, a TMB substrate solution is added to the wells and color develops in proportion to the amount of Insulin bound. The Stop Solution changes the color from blue to yellow, and the intensity of the color is measured at 450 nm.Need your results faster? Try RayBiotech's SpeedE LISA platform for quantitative detection in just three hours.https:///speedelisa-kits/Short on sample, or need higher sensitivity? Check out the IQELISA™ Immuno-PCR platform. https:///immuno-pcr/II. STORAGEThe entire kit may be stored at -20°C for up to 1 year from the date of shipment. Avoid repeated freeze-thaw cycles. The kit may be stored at 4°C for up to 6 months. For extended storage, it is recommended to store at -80°C. For prepared reagent storage, see table below. III. REAGENTSIV. ADDITIONAL MATERIALS REQUIRED1.Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm.2.Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes.3.Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation.4.100 ml and 1 liter graduated cylinders.5.Absorbent paper.6.Distilled or deionized water.7.Log-log graph paper or computer and software for ELISA data analysis.8.Tubes to prepare standard or sample dilutions.V. REAGENT PREPARATION1.Bring all reagents and samples to room temperature (18 - 25ºC) before use.2.Assay Diluent B (Item E) should be diluted 5-fold with deionized or distilled water before use.3.Sample dilution: Assay Diluent C (Item L) should be used for dilution of serum, plasma, and cell culture supernatant samples. The suggested dilution for normal serum/plasma is 2 fold. Collect plasma using EDTA and/or Citrate as anticoagulants. Heparin is not recommended as an anticoagulant for use in this assay. Note: Levels of Insulin may vary between different samples. Optimal dilution factors for each sample must be determined by the investigator.4.Preparation of standard: Briefly spin a vial of Item C. Add 400 µl Assay Diluent C (Item L) into Item C vial to prepare a 1,400 µIU/ml standard solution. Dissolve the powder thoroughly by a gentle mix. Add 180 µl Insulin standard (1,400 µIU/ml) from the vial of Item C, into a tube with 450 µl Assay Diluent C to prepare a 400 µIU/ml standard solution. Pipette 250µl Assay Diluent C into each tube. Use the 400 µIU/ml standard solution to produce a dilution series (shown below). Mix each tube thoroughly before the next transfer. Assay Diluent C serves as the zero standard (0 µIU/ml).180 µl250 µl 250 µl 250 µl 250 µl 250 µl250 µlStd1Std2Std3Std4Std5Std6Std7Zero Standard Diluent volume Item C + 400 µl450 µl250 µl250 µl250 µl250 µl250 µl250 µl250 µlConc.1,400 µIU/ml 400 µIU/ml 200 µIU/ml 100 µIU/ml 50 µIU/ml 25 µIU/ml 12.5 µIU/ml 6.25 µIU/ml0 µIU/ml5.If the Wash Concentrate (20X) (Item B) contains visible crystals, warm to roomtemperature and mix gently until dissolved. Dilute 20 ml of Wash Buffer Concentrate into deionized or distilled water to yield 400 ml of 1X Wash Buffer.6.Briefly spin the Detection Antibody vial (Item F) before use. Add 100 µl of 1X AssayDiluent B (Item E) into the vial to prepare a detection antibody concentrate. Pipette up and down to mix gently (the concentrate can be stored at 4ºC for 5 days). The detection antibody concentrate should be diluted 80-fold with 1X Assay Diluent B (Item E) andused in step 5 of Part VI Assay Procedure.7.Briefly spin the HRP-Streptavidin concentrate vial (Item G) and pipette up and down tomix gently before use, as precipitates may form during storage. HRP-Streptavidinconcentrate should be diluted 400-fold with 1X Assay Diluent B (Item E).For example: Briefly spin the vial (Item G) and pipette up and down to mix gently. Add30 µl of HRP-Streptavidin concentrate into a tube with 12 ml 1X Assay Diluent B toprepare a 400-fold diluted HRP-Streptavidin solution (don't store the diluted solution for next day use). Mix well.VI. ASSAY PROCEDURE1.Bring all reagents and samples to room temperature (18 - 25ºC) before use. It isrecommended that all standards and samples be run at least in duplicate.bel removable 8-well strips as appropriate for your experiment.3.Add 100 µl of each standard (see Reagent Preparation step 3) and sample intoappropriate wells. Cover wells and incubate for 2.5 hours at room temperature withgentle shaking.4.Discard the solution and wash 4 times with 1X Wash Solution. Wash by filling each wellwith Wash Buffer (300 µl) using a multi-channel Pipette or autowasher. Completeremoval of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash,remove any remaining Wash Buffer by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.5.Add 100 µl of 1X prepared biotinylated antibody (Reagent Preparation step 6) to eachwell. Incubate for 1 hour at room temperature with gentle shaking.6.Discard the solution. Repeat the wash as in step 4.7.Add 100 µl of prepared Streptavidin solution (see Reagent Preparation step 7) to eachwell. Incubate for 45 minutes at room temperature with gentle shaking.8.Discard the solution. Repeat the wash as in step 4.9.Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent (Item H) to each well. Incubate for 30minutes at room temperature in the dark with gentle shaking.10.Add 50 µl of Stop Solution (Item I) to each well. Read at 450 nm immediately.VII. ASSAY PROCEDURE SUMMARY1.Prepare all reagents, samples and standards as instructed.2.Add 100 µl standard or sample to each well. Incubate 2.5 hours at room temperature.3.Add 100 µl prepared biotin antibody to each well. Incubate 1 hour at room temperature.4.Add 100 µl prepared Streptavidin solution. Incubate 45 minutes at room temperature.5.Add 100 µl TMB One-Step Substrate Reagent to each well. Incubate 30 minutes atroom temperature.6.Add 50 µl Stop Solution to each well. Read at 450 nm immediately.VIII. CALCULATION OF RESULTSCalculate the mean absorbance for each set of duplicate standards, controls and samples, and subtract the average zero standard optical density. Plot the standard curve on log-log graph paper or using Sigma plot software, with standard concentration on the x-axis and absorbance on the y-axis. Draw the best-fit straight line through the standard points.A. TYPICAL DATAThese standard curves are for demonstration only. A standard curve must be run with each assay.B. SENSITIVITYThe minimum detectable dose of Mouse Insulin was determined to be 5 µIU/ml.Minimum detectable dose is defined as the analyte concentration resulting in an absorbance that is 2 standard deviations higher than that of the blank (diluent buffer).C. SPIKING & RECOVERYRecovery was determined by spiking various levels of Mouse Insulin into the sample types listed below. Mean recoveries are as follows:D. LINEARITYE. REPRODUCIBILITYIntra-Assay CV%: <10%Inter-Assay CV%: <12%IX. SPECIFICITYThis ELISA antibody pair detects mouse, human, rat, porcine and bovine Insulin.X. TROUBLESHOOTING GUIDEProblem Cause SolutionPoor standard curve Inaccurate pipettingImproper standarddilutionCheck pipettesBriefly centrifuge Item C and dissolvethe powder thoroughly by gently mixingLow signal Improper preparation ofstandard and/orbiotinylated antibodyToo brief incubationtimesInadequate reagentvolumes or improperdilutionBriefly spin down vials before opening.Dissolve the powder thoroughly.Ensure sufficient incubation time. Assayprocedure step 3 may be doneovernight at 4°C with gentle shaking(note: may increase overall signalsincluding background).Check pipettes and ensure correctpreparationLarge CV Inaccurate pipettingAir bubbles in wellsCheck pipettesRemove bubbles in wellsHigh background Plate is insufficientlywashedContaminated washbufferReview the manual for proper wash. Ifusing a plate washer, ensure that allports are unobstructed.Make fresh wash bufferLow sensitivity Improper storage of theELISA kitStop solutionStore your standard at <-70ºC afterreconstitution, others at 4ºC. Keepsubstrate solution protected from light.Add stop solution to each well beforereading plateRayBio® ELISA KitsOver 4,000 ELISA kits available, visit /ELISA-Kits for details.This product is for research use only.©2020 RayBiotech, Inc。

小鼠胰岛素定量分析酶联免疫检测试剂盒本试剂盒仅供科研使用。

用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的胰岛素浓度。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整, 如有疑问请与上海巧伊生物科技有限公司联系，我们将提供力所能及的帮助。

如您有其它需求，请登录上海巧伊生物科技有限公司网站或致电本公司。

胰岛素简介：胰岛素是糖代谢中最主要的激素之一。

胰腺的ß细胞岛细胞产生胰岛素前体蛋白，前体蛋白被加工成C肽和胰岛素。

它们以等摩尔浓度进入血循环中。

成熟的胰岛素由A、B两条链组成。

这两条链是通过两个二硫键桥接形成有功能的胰岛素分子。

血浆葡萄糖浓度的变化是胰岛素产生并分泌的最主要刺激因素，产生的胰岛素具有一些代谢调节作用。

其最主要的作用是，将外周血中糖转运到肝脏中贮存起来。

一些诸如肝糖生成障碍或在促进血糖升高的激素诸如胰高血糖素、肾上腺素、生长激素和皮质醇等作用下促进肝糖分解都可拮抗胰岛素的作用。

检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中胰岛素的浓度。

胰岛素捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的胰岛素会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

当加入与HRP耦连的抗胰岛素抗体后，抗小鼠胰岛素抗体与胰岛素接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

最后加入显色剂，若样本中存在胰岛素将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。

通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，胰岛素浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中胰岛素浓度。

小鼠胰岛素定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:组分 规格（96T/48T）小鼠胰岛素预包被板 12条/6条标准品稀释液 10ml/5ml小鼠胰岛素标准品 2支/1支(冻干)小鼠胰岛素抗体HRP结合物 10ml/5ml浓缩洗涤液 20× 30ml/15mlTMB底物 10ml/5ml终止液 5ml/3ml封板胶纸 3/2张说明书 1份标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作；A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测，D.标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。

如何检测小鼠总胆汁酸？升级款小鼠总胆汁酸检测试剂盒来了
总胆汁酸（total bile acid，TBA）是胆固醇在肝脏分解及肠-肝循环中的一组代谢产物，是胆固醇在肝脏分解代谢的最终产物，与胆固醇的吸收、代谢及调节关系密切。

人体的总胆汁酸分为初级胆汁酸和次级胆汁酸两大类。

正常人肝脏合成的胆汁酸有胆酸（CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)和代谢中产生的脱氧胆酸（DCA)还有少量石胆酸（LCA）和微量熊脱氧胆酸(UDCA)，合称总胆汁酸(TBA)。

总胆汁酸能较为特异地反映肝脏的排泄功能。

肝细胞病变和肝内外胆管阻塞时，可引起总胆汁酸升高，多见于急、慢性病毒性肝炎，肝硬化、肝内胆汁淤积等。

血清总胆汁酸是肝实质性损伤及消化系统疾病的一个较为灵敏的诊断指标。

除此之外，TBA还与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP) 和早产（PTB）相关。

在健康怀孕期间，总胆汁酸水平几乎没有增加，尽管在妊娠晚期可能会略有增加。

ICP患者中的总胆汁酸水平可高达正常妊娠上限的100倍。

据报道，母体血清胆汁酸增加一倍，导致死产风险增加200%，总胆汁酸被认为会引发早产。

那么，如何检测小鼠总胆汁酸呢？艾美捷Crystal Chem 小鼠总胆汁酸检测试剂盒--升级款：15 ul样本，即测小鼠总胆汁酸！众多高分文章引用。

小鼠总胆汁酸检测试剂盒--升级款亮点：
1.试剂盒仅需15ul样本即可检测
2.极速检测：10分钟完成实验
3.即用型液体试剂组分，简单易用
4.针对小鼠样本进行优化
升级说明：老款试剂盒80470已被淘汰，建议使用最新款的80471，更少的样本需求，更稳定的试剂保存，更稳定的实验结果。

小鼠胰岛素(INS)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测小鼠血清，血浆及相关液体样本中胰岛素(INS)的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(INS)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(INS)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(INS)，再与HRP标记的胰岛素(INS)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(INS)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(INS)浓度。

试剂盒组成：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

仅供科研使用，不得用于临床检验。

人胰岛素（INS）定量检测试剂盒（ELISA）说明书【产品名称】通用名称：人胰岛素（INS）定量检测试剂盒（ELISA）英文名称：Human Insulin （INS） ELISA KIT【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人胰岛素（INS）的浓度。

【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。

在预包被抗人胰岛素（INS）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人胰岛素（INS）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗人人胰岛素（INS）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。

加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人人胰岛素（INS）的浓度正相关。

拟合校准品曲线，可以计算出样本中人人胰岛素（INS）的浓度。

主要成分mU/mL明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套8、质控品（可从蓝图生物科技产品研发系统中选择）【储存条件及有效期】1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。

2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。

3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和HRP标记抗体，有效期为14天，其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。

【适用仪器】半自动的酶标仪，如Thermo MK3，或者国产酶标仪。

Rat Insulin Like Growth Factor 1ELISA Kit(IGF1)Catalog NO.:RK03737version:2.0*使用产品前，请务必阅读产品包装内说明书产品简介本试剂盒产品使用夹心法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它生物体液中IGF1的含量。

产品检测原理本实验采用双抗夹心ELISA法。

将抗IGF1抗体预先包被在酶标板上，向微孔中分别加入标准品和样品，样本中IGF1与固相载体上的抗体结合。

孵育后，未结合的样品在洗涤过程中会被洗去，加入抗IGF1的检测抗体，形成双抗体夹心。

洗去未结合的检测抗体，然后向微孔中加入酶结合物。

孵育和洗涤后，加入底物TMB。

样品中IGF1的含量与TMB 反应的颜色深浅呈正相关，加入酸终止反应并测量吸光值。

根据梯度稀释的IGF1标准品的吸光值绘制标准曲线并求出样品的浓度。

试剂盒组分及保存条件未拆封的试剂盒可在2-8°C保存1年，已拆封的产品须在1个月内使用完。

组分规格货号拆封后保存条件抗体预包被酶标板Antibody Coated Plate 8×12RM16017将未使用的板条放回装有干燥剂的铝箔袋中，并重新密封，可在2-8°C存储1个月。

冻干标准品Standard Lyophilized 2支RM16018复溶后不建议再次使用。

浓缩生物素化抗体（100×）Concentrated Biotin Conjugate Antibody(100×)1×120ul RM16019可在2-8°C存储1个月。

浓缩链霉亲和素-HRP（100x）Streptavidin-HRP Concentrated(100×)1×120ul RM16020可在2-8°C存储1个月。

标准品/样本稀释液（R1）Standard/Sample Diluent (R1)1×20mLRM00023可在2-8°C 存储1个月。

小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin)，再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)含量。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：18mIU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

两种自发性2型糖尿病小鼠生物学特性比较李娜;张周【摘要】目的分别以C57BL/6JSlac和C57BL/KsJ-db/+表型正常小鼠为对照组,比较自发性2型糖尿病KK-Ay/Ta和C57BL/KsJ-db/db小鼠的体生长曲线、糖代谢曲线、血清胰岛素水平、主要脏器重量、脏器系数等生物学特性的差异,并探讨其肾脏、肝脏和胰腺等组织病理学变化.方法在各自实验周期内,每2周测定实验组和对照组小鼠的体重、血糖以及血清胰岛素水平,实验结束后处死,脏器、脂肪称重,部分组织制作病理切片.结果 (1)KK小鼠体重远高于db/db小鼠,且同品系间雄性小鼠重于雌性小鼠(P＜0.05);(2)同品系问雄性小鼠的血糖值明显大于雌性小鼠(P＜O.05),db/db小鼠出现血糖异常症状比KK小鼠早,且血糖值大于KK小鼠(P＜0.05),而KK小鼠血糖异常持续时间则较db/db小鼠长;(3)KK小鼠的血清胰岛素水平明显高于db/db小鼠(JP＜O.05),同品系雌雄小鼠间没有明显差异(P＞O.05);(4)雄性KK小鼠脂肪系数及部分脏器萎缩程度大于雌性,而db/db小鼠雌雄间则无明显差异(P＞O.05),同时db/db小鼠脾脏和胰腺的萎缩程度及脂肪系数大于KK小鼠(P＜O.05),而KK小鼠肝脏的萎缩程度则大于db/db小鼠;(5)糖尿病模型小鼠肾脏、肝脏以及胰腺组织均出现明显病变.结论 KK-Ay/Ta和C57BL/KsJ-db/db小鼠均是肥胖的,伴有高血糖、高度胰岛素抵抗,肝脏、肾脏病变和胰岛功能不足的适用性2型糖尿病动物模型,且db/dh小鼠血糖出现异常比KK小鼠早、脂肪系数大,而KK小鼠血糖异常持续时间较db/db小鼠长,同时血清胰岛素水平远大于db/db 小鼠.%Objective To investigate biological parameters and morphology in spontaneous type 2 diabetic KK-Ay/ Ta and C57BL/KsJ-db/dbmice.Methods In experiment the body weight, glucose and serum insulin were measured every two weeks.At the end of experiment, the mice weresacrificed fo r organ, fat weight and morphological study.Results ① The weight of KK mice were higher than that of db/db mice, and the male's were higher than the female's in the same strain(P ＜0.05).② The glucose of male mice were higher than the female, the abnormal glucose levels of db/db mice were detected earlier and higher than those of KK mice( P ＜0.05 ).But duration of KK mice' abnormal glucose was longer than db/db mice.③ The serum insulin of KK mice were higher over db/db mice significantly( P ＜ 0.05 ) , and they did not have obvious difference in the same strain(P ＞0.05).④ The fat to body weight ratios and atrophy of some viscera in male KK mice were more serious than the female, but there was no obvious difference in db/db mice.Atrophy of spleen and pancreas of db/db mice became more serious than that of KK, however, so did in liver of KK mice.The fat to body weight ratios of db/db mice was elevated than those of KK mice ( P ＜0.05 ).⑤ The spleen, liver and pancreas of diabetic mice model had serious pathological deterioration.Conclusions The KK and db/db mice could be used as appropriate disease models of type 2 diabetes mellitus with hyperglycemia, hyperinsulinemia, obesity.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2011(021)001【总页数】8页(P16-22,封2)【关键词】小鼠;2型糖尿病;血糖;血清胰岛素;组织损伤【作者】李娜;张周【作者单位】中国科学院上海药物研究所,上海,201203;中国科学院上海药物研究所,上海,201203【正文语种】中文【中图分类】R332合适的糖尿病动物模型在糖尿病的发病机制研究及其并发症的治疗、药物的开发过程中都发挥着极其重要的作用。

糖尿病大鼠肠道甜味受体表达及肠促胰素分泌的变化钱程;冯日露;吴斌;麻静【摘要】目的观察糖尿病大鼠回肠甜味受体(STRs)表达及胃肠激素分泌的变化.方法选取健康对照组(CON组)SD大鼠、Zucker肥胖糖尿病大鼠(ZDF组)和链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠(STZ组),每组各7只.三组大鼠均行胃内葡萄糖耐量实验,期间采集血样测量血糖,分离血浆检测胰岛素和胰高血糖素样肽-1(GLP-1)浓度.1周后,处死大鼠取回肠组织采用RT-PCR检测STRs的表达.结果与CON组和STZ组比较,ZDF组回肠T1R3及α-味转导素表达均下调(P＜0.05).在0、15、30、60、120 min时,STZ组血糖水平高于CON组及ZDF组(P＜0.01).在0、15、30、60、120 min时,ZDF组血清胰岛素和GLP-1水平高于CON组及STZ组大鼠(P＜0.05,P＜0.01).结论 ZDF大鼠回肠T1R3及其下游信号分子表达失调,肠道STRs表达可能与葡萄糖代谢有关,其机制仍需要进一步研究.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2018(015)017【总页数】5页(P7-11)【关键词】糖尿病;回肠;甜味受体;胰高血糖素样肽-1【作者】钱程;冯日露;吴斌;麻静【作者单位】上海交通大学医学院附属仁济医院内分泌科,上海200127;上海交通大学医学院附属仁济医院内分泌科,上海200127;上海交通大学医学院附属仁济医院南院药剂科,上海200112;上海交通大学医学院附属仁济医院内分泌科,上海200127【正文语种】中文【中图分类】R587.1胰高血糖素样肽-1（glucagon-likepeptide-1，GLP-1）由肠道L细胞分泌，L 细胞密集分布于回肠。

GLP-1受体激动剂如艾塞那肽和利拉鲁肽已经用于临床治疗[1-2]，但是在糖尿病状态下GLP-1分泌的变化，特别是1型糖尿病仍无定论。

明确口腔的甜味感受系统至今已数十年[3]，由T1R家族的G蛋白偶联受体（G-protein-coupled receptors，GPCR）感知，其中 T1R2 和T1R3受体异二聚体为主要的STRs。

有没有可以检测小鼠胰岛素含量的试剂盒呢？
什么是胰岛素（Insulin）？
胰岛素，是一种蛋白质激素，由胰脏内的胰岛β细胞分泌。

胰岛素参与调节糖代谢，控制血糖平衡，可用于治疗糖尿病。

人胰岛素蛋白由51 个氨基酸，分子量为 5808道尔顿。

它是二硫键连接A链和B链的二聚体。

动物种类之间的胰岛素结构略有不同。

由于这些变化，来自动物来源的胰岛素在人胰岛素的有效性（碳水化合物代谢效应）方面有所不同。

猪胰岛素与人类的胰岛素特别接近，在人胰岛素可以通过重组DNA大量产生之前被广泛用于治疗1型糖尿病技术。

有没有可以检测小鼠胰岛素含量的试剂盒呢？
当然有了！享誉全球市场的小鼠胰岛素ELISA定量分析试剂盒KA3812你们忘了吗？
原理：小鼠胰岛素ELISA试剂盒利用双抗夹心法，在96孔板中预包被了小鼠胰岛素蛋白的单克隆抗体，将标准品，质控品，以及样品加入到96孔板中孵育结合，经过洗涤，再加入HRP-偶联的胰岛素
多克隆抗体进行孵育，在加入TMB底物，HRP与底物反应产生有色产物。

吸光值越高，对应样品中胰岛素含量越多。

胰岛素ELISA试剂盒Tips：
适用样品：体液，细胞培养上清液，血清，血浆（EDTA），组织裂解液
检测范围：0 - 140 uIU/mL
《小鼠胰岛素ELISA试剂盒标准曲线》。

Crystal Chem超灵敏小鼠胰岛素ELISA试剂盒
Crystal Chem艾美捷小鼠胰岛素ELISA（超灵敏）用于仅使用5µL样本量来量化血清、血浆、细胞培养物和液体中的小鼠胰岛素水平。

Crystal Chem试剂盒包括：胰岛素、胰高血糖素、C肽、肠抑胃肽、瘦素、脂联素、LDL/HDL （低/高密度脂蛋白）、皮质固醇/激素、胰岛素样生长因子、谷蛋白、豆类过敏原、卵清蛋白、宿主细胞蛋白、KIM-1（肾损伤分子）、肌酐、血清白蛋白、卵清蛋白、血纤维蛋白溶酶原、以及各类抗原酶联免疫检测试剂盒和免疫层析诊断（Lateral Flow）等等。

Crystal Chem超灵敏小鼠胰岛素ELISA试剂盒参数：
样本类型：血清、血浆、细胞培养或液体
规格：96 wells (12 x 8 well strips)
液态试剂（标准试剂除外）
灵敏度：0.05纳克/毫升
分析范围：低范围分析：0.1-6.4 ng/mL
宽范围分析：0.1-12.8纳克/毫升
高量程分析：1-64纳克/毫升
精密批内精密变异系数≤10.0%
批间精密度≤10.0%
储存温度2-8°C
Crystal Chem 艾美捷试剂盒特色：
小样本量：只需要5µL样品，非常适合小批量的小鼠样品。

高度灵敏和精确：使用5µL的样品和CV，该分析的灵敏度为0.05 ng/mL≤10.0%.
动态范围：范围为0.1-64.0 ng/mL，仅使用5µL样品。

使用同一试剂盒进行低胰岛素和高胰岛素分析。

高特异性：这是一个易于使用的试剂盒，对小鼠胰岛素具有高度特异性，结果不到3.5小时。

标准曲线：。