曲霉菌的鉴定与应用

曲霉检测标准
曲霉菌是一种真菌，腐生真菌，常见于霉变谷物、霉变谷物或其他霉变有机物中。

关于曲霉的检测标准，侵袭性曲霉病的临床诊断需符合1项宿主因素、1项临床标准和1项微生物学标准。

其中微生物学标准包括无菌标本微生物分析、无菌标本培养以及组织核酸检测等。

具体标准如下：
1. 无菌标本微生物分析：通过针吸或活检获得标本，进行组织病理学、细胞病理学或直接显微镜检，示菌丝或黑酵母样形态，同时伴随组织损伤证据。

2. 无菌标本培养：从临床或影像学显示的病灶部位（正常无菌部位），通过无菌操作位获取标本，示透明或着色的霉菌。

3. 血：同时存在感染的过程中，血培养示霉菌（注：血培养发现曲霉，多提示污染，此处霉菌不代表曲霉）。

4. 组织核酸诊断：福尔马林固定石蜡包埋组织中发现霉菌时，PCR和DNA 测序检测到真菌DNA。

此外，曲霉菌抗原检测的正常值通常在1到之间。

抗原在气道中的持续存在会诱发局部炎症并形成黏液栓塞，从而导致中心性支气管扩张、嗜酸性粒细胞浸润等。

以上信息仅供参考，如需获取更多详细信息，建议查阅相关文献或咨询专业医生。

一、实验目的1. 了解曲霉菌的基本特征及其生长条件。

2. 掌握曲霉菌的分离、纯化和培养方法。

3. 分析曲霉菌在不同环境条件下的生长情况。

二、实验原理曲霉菌（Aspergillus）是一种广泛分布于自然界中的丝状真菌，属于子囊菌亚门。

曲霉菌具有丰富的种类，其中许多种类在食品、制药和生物技术等领域具有重要作用。

本实验旨在通过观察曲霉菌的形态特征和生长情况，了解其生长条件，为后续研究提供基础。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 曲霉菌菌种- 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基- 水浴锅- 灭菌锅- 显微镜- 纱布- 烧杯- 量筒- 移液管- 灭菌器2. 实验仪器：- 灭菌操作台- 高压蒸汽灭菌器- 紫外线消毒灯- 电子天平四、实验方法1. 曲霉菌的分离与纯化（1）取一小块曲霉菌菌种，用无菌镊子将其接种于PDA培养基平板中央。

（2）将平板置于28℃恒温培养箱中培养3-5天，待菌落长成后，用无菌接种环挑取单菌落，接种于新的PDA培养基平板上。

（3）重复步骤（2）2-3次，直至获得纯化的曲霉菌菌种。

2. 曲霉菌的培养与观察（1）将纯化的曲霉菌菌种接种于PDA培养基平板中央，置于28℃恒温培养箱中培养。

（2）定期观察曲霉菌的生长情况，记录菌落形态、颜色、质地等特征。

（3）利用显微镜观察曲霉菌的菌丝、分生孢子梗、分生孢子等形态特征。

3. 曲霉菌在不同环境条件下的生长情况（1）将纯化的曲霉菌菌种分别接种于不同温度（10℃、20℃、30℃、40℃）的PDA培养基平板中央。

（2）将平板置于恒温培养箱中培养，观察并记录曲霉菌在不同温度下的生长情况。

（3）重复步骤（1）和（2），分别改变培养基的湿度、pH值等条件，观察曲霉菌的生长情况。

五、实验结果与分析1. 曲霉菌的形态特征曲霉菌菌落呈放射状扩展，表面光滑，质地紧密，初期白色，后期逐渐变为灰白色或棕色。

菌丝细长，有隔膜，分生孢子梗直立，顶端产生分生孢子。

2. 曲霉菌在不同温度下的生长情况在28℃恒温条件下，曲霉菌生长旺盛，菌落直径可达5-7cm。

曲霉的应用及原理简介曲霉（Aspergillus）是一种真菌，广泛分布于自然界的土壤、空气和植物中。

它是一种重要的微生物资源，具有多种应用价值，并在许多生物工程领域得到广泛应用。

本文将介绍曲霉的应用以及其工作原理。

曲霉的应用1. 食品工业•曲霉被广泛应用于食品工业中的面食、糖果和酱油等产品的发酵过程中，以增加食品的口感和香味。

•曲霉还被用作某些乳制品的生产过程中的发酵剂，如酸奶和奶酪。

2. 饲料添加剂•曲霉中的一些菌株可以分解脱氧雪腐镰刀菌素（Deoxynivalenol），这是一种常见的饲料中的真菌毒素。

•饲料添加曲霉可以降低饲料中真菌毒素的含量，提高动物的饲料利用率，并改善动物的生产性能。

3. 制药工业•曲霉菌株中含有丰富的代谢产物，其中一些具有重要的药用价值。

•比如，曲霉菌株可以产生抗生素青霉素，这是一种广泛用于医疗领域的重要药物。

曲霉也可以产生抗癌化合物，如曲霉菌素。

4. 生物燃料生产•曲霉在生物燃料生产中起着重要作用，可以将废弃物转化为能源。

•曲霉菌株分解废弃物中的纤维素和半纤维素，利用其产生的酶和发酵代谢产物生产生物燃料，如乙醇。

5. 环境修复•曲霉具有一定的分解能力，可以降解一些有机污染物。

•曲霉菌株可应用于土壤修复工程，利用其降解有机污染物的能力来恢复受污染的土壤环境。

曲霉的工作原理曲霉的应用基于其特殊的生物学特性和代谢产物。

曲霉具有以下几个主要的工作原理：1. 发酵能力•曲霉菌株具有较强的发酵能力，可以将底物中的碳源转化为有机酸、酶和其他代谢产物。

•利用曲霉的发酵能力，可以加速食品的发酵过程，提高产品的品质。

2. 产生酶类•曲霉能够产生多种酶类，如淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶等。

•这些酶类可以在工业生产中被利用，辅助植物原料的分解和转化，提高生物工程过程的效率。

3. 生产代谢产物•曲霉菌株具有广泛的代谢能力，可以产生多种化合物。

•例如，曲霉可以产生抗生素、抗癌化合物和生物燃料等，为相关行业提供了重要的原料。

02
组织病理学诊断是确诊曲霉菌病 的可靠方法，尤其适用于肺部曲 霉菌球的鉴别诊断。
血清学诊断
血清学诊断是通过检测患者血清中的曲霉菌抗原和抗体，间 接诊断曲霉菌病。
血清学诊断操作简便，但敏感性和特异性较低，一般用于流 行病学调查和疗效评估。
曲霉菌病的影像学
03
诊断
X线检查
X线检查是曲霉菌病影像学诊断的基础手段，可以观察肺 部的基本病变，如炎症、浸润、空洞等。
曲霉菌病临床表现多样，包括 肺炎、过敏反应、脑膜炎等， 严重时可致死。
曲霉菌病的流行病学
曲霉菌病在全球范围内均有分布，但发病率因地区和人群差异而异。 高危人群包括免疫功能低下者、长期使用抗生素或糖皮质激素者、糖尿病患者等。
曲霉菌病在免疫功能低下的人群中发病率较高，如艾滋病患者、器官移植受者等。
曲霉菌病的临床表现
01
药物治疗
使用抗真菌药物是治疗曲霉菌病的主要方法。常见的抗真菌药物包括两
性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑等，医生会根据患者的病情和药物的副
作用选择合适的药物进行治疗。
02
手术治疗
对于某些严重的曲霉菌病，如曲霉菌球、曲霉菌引起的脓胸等，可能需
要手术治疗。手术治疗的方法包括肺切除、脓胸引流等，以清除病灶，
避免接触污染源
及时就医
避免接触被曲霉菌污染的环境、物品和食 物，特别是对于免疫系统较弱的人来说更 要注意。
如有疑似曲霉菌病的症状，如咳嗽、咳痰 、发热等，应及时就医，以便早期诊断和 治疗。
THANKS.
腔积液等症状。
曲霉菌病患者通常在免疫功能低 下的人群中发病，而细菌性肺炎
则常见于健康人群。
与病毒性肺炎的鉴别诊断
曲霉菌病通常表现为慢性病程，而病 毒性肺炎则多为急性病程。

曲霉菌的应用及原理1. 引言曲霉菌是一种常见的真菌，广泛存在于自然界中。

曲霉菌具有许多应用价值，不仅可以用于食品加工、饲料发酵等领域，还可以作为生物农药和生物能源的生产菌种。

本文将重点介绍曲霉菌的应用及其原理。

2. 曲霉菌的应用2.1 食品加工•曲霉菌是许多传统食品加工过程中不可或缺的一种微生物。

例如，豆豉的发酵过程中，曲霉菌可以利用豆类中的营养物质进行发酵，产生特有的风味和香气。

•曲霉菌也常用于咸鱼、干酪等食品的发酵过程，可以改善口感和延长保质期。

2.2 饲料发酵•曲霉菌在饲料发酵中具有重要作用。

曲霉菌可以分解饲料中的碳水化合物、蛋白质等营养物质，提高饲料的可利用性和营养价值。

•曲霉菌还可以分泌酶类，一些特定的酶类有助于消化饲料中的纤维素等不易消化的成分，提高饲料的营养效益。

2.3 生物农药•曲霉菌中的一些菌株具有生物防治害虫和病原菌的能力。

这些曲霉菌菌株可以分泌杀虫分子或抑菌分子，对作物害虫和植物病原菌起到防治作用。

•生物农药的应用具有环境友好、对人体无害、不会产生抗药性等优点，被视为可替代化学农药的重要手段。

2.4 生物能源的生产•曲霉菌是主要的真菌发酵生产菌株之一，常用于生物能源的生产中。

•曲霉菌可以分解废弃物、农作物秸秆等难以降解的有机物，产生乙醇、生物柴油等可再生能源。

利用曲霉菌进行生物发酵，不仅可以减少环境污染，还可以替代传统石油能源，具有重要的经济和环境效益。

3. 曲霉菌的原理曲霉菌的应用原理主要包括以下几个方面：3.1 发酵原理曲霉菌具有强大的代谢能力，能够分解多种有机物质。

在食品加工和饲料发酵过程中，曲霉菌分泌酶类可以分解食物中的蛋白质和碳水化合物，产生乳酸、醋酸等有益化合物。

这些化合物不仅能够改善食品口感，还能提高饲料的营养价值。

3.2 杀虫原理一些曲霉菌菌株能够分泌杀虫分子，对作物害虫起到防治作用。

这些杀虫分子可以致死害虫、抑制其生长发育，从而控制害虫数量。

而这些杀虫分子对于人体和环境则相对安全，不会对人体和其他非目标生物造成危害。

曲霉菌感染的临床表现和诊断完整版曲霉菌(aspergillus)是广泛存在于自然界的真菌，属于真菌的一个亚型，为典型的丝状菌，属于常见的条件致病性真菌，广泛分布于自然界，水、土壤、空气、发霉的食物、衣服等均是曲霉菌易生存的场所。

它们对生长环境的要求不高，能在6~55℃以及相对低湿度的环境中生长，曲霉能产生大量的孢子，并可通过空气传播进行大范围的扩散。

曲霉孢子约2～5μm大小，在空气中可呈现悬浮状态，孢子由呼吸道进入人体后可引起曲霉菌感染，人的呼吸系统如鼻窦、咽部、气管支气管及肺部最易受累，可在呼吸系统内寄生、定植进而播散至全身，可累及支气管、肺、胃肠道、神经系统、骨骼、皮肤、黏膜、眼和鼻等多器官系统，患者免疫系统受损严重则可能引发侵袭性曲霉病。

流行病学和危险因素目前，曲霉菌感染的病例正逐年增加，据保守估计，目前全球约有20多万例慢性肺曲霉病患者，480多万例过敏性支气管肺曲霉病患者，其中我国约有4万多例慢性肺曲霉病患者，49万例过敏性支气管肺曲霉病患者，16万例侵袭性肺曲霉病患者。

病例逐年增加的原因之一便是免疫抑制人群的增长，如恶性肿瘤患者、或其他长期接受放、化疗治疗以及骨髓造血干细胞移植患者中，会出现粒细胞缺乏，而中性粒细胞作为体内抗曲霉菌的主要免疫细胞，主要通过黏附菌体、脱颗粒和释放活性氧等非吞噬方式杀灭菌丝或孢子，粒细胞的缺乏是发生曲霉菌感染的最常见危险因素。

近期研究发现，肺曲霉菌病在没有明显免疫缺陷的人群中也可能会有所增加，比如ICU患者、有创机械通气患者、患肺纤维化、COPD、支气管扩张或呼吸窘迫综合征等肺部疾病或基础病的患者。

另外，严重的呼吸道病毒感染，包括流感病毒、呼吸道合胞病毒、SARS-CoV-2等也会损害肺上皮细胞，为曲霉菌定植提供了入口。

在治疗时使用的糖皮质激素或其他免疫调节药物也可能会加剧肺曲霉菌感染。

某些药物的使用，包括酪氨酸激酶抑制剂、CAR-T疗法也会增加曲霉菌感染风险。

曲霉菌感染检测经典方法-GM试验半乳甘露聚糖（Galactomannan，GM）抗原检测曲霉菌感染的经典血清学方法之一，简称GM试验。

半乳甘露聚糖是曲霉菌特有的细胞壁多糖成份，当机体感染曲霉菌后，随着菌丝生长，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放出来，是最早释放的抗原，被认为是一种可靠的侵袭性曲霉菌感染早期诊断的生物标记物。

半乳甘露聚糖抗原具有热稳定性和可溶性，通常可在血清，脑脊液和肺泡灌洗液中检测。

GM的释放量通常与感染的菌量成正相关，可反映机体感染的程度。

每周两次使用GM试验对高危患者的病情和治疗效果进行监测和评估。

临床中的高危人群是免疫功能缺陷和高剂量服用激素患者，如：恶性血液肿瘤，实体器官移植，移植物抗宿主疾病患者等，所以GM的应用科室通常分布在血液科，移植科（中心），肿瘤科，呼吸科，ICU，皮肤科和儿科。

GM试验的开展除了在公立医院实验室辅助临床医生诊断侵袭性曲霉菌病外，还可在大型私立实验室和一些制药公司做新抗真菌药物的药效评估。

GM抗原检测是欧洲癌症研究和治疗组织（European Organization for Research and Treatment Cancer, EORTC）和真菌病研究组（Mycoses Study Group, MSG）推荐的侵袭性曲霉菌病的真菌学检测标准之一，美国Bio-Rad公司研发的用于检测血清中GM抗原的曲霉菌抗原检测试剂盒（PlateliaTM Aspergillus Ag），在2014年初获得CFDA批准。

Bio-Rad公司的曲霉菌抗原检测试剂盒（PlateliaTM Aspergillus Ag）（见下图）采用酶联免疫双抗体夹心分析法检测血清中半乳甘露聚糖抗原。

经典的ELISA检测流程，灵敏度性和特异性分别达到了92.1% 和97.5%，[1] 最低检出限为0.4ng/ml，可在临床症状出现前6天和诊断前10 天即可检出GM抗原，[2] 真正实现侵袭性曲霉菌病的早期诊断。

12
2008年IDSA曲霉病治疗指南推荐曲霉病治疗 建议
感染类型
首选药物
替代药物
备注
侵袭性肺曲霉病
伏立康唑
两性霉素B脂质体，两 性霉素B脂质复合物， 卡泊芬净，米卡芬净， 泊沙康唑，伊曲康唑
基于相关临床资料缺乏，联 合用药不推荐作为初始治疗
气管支气管曲霉病 同侵袭性肺曲霉病 同侵袭性肺曲霉病
同侵袭性肺曲霉病
2019/11/12
11
侵袭性肺部真菌感染的诊断要点
级别 宿主因素 临床特征 微生物学 组织病理学
确诊
＋
＋
＋
＋
临床诊断 ＋
＋
＋
－
拟诊
＋
＋
－
－
注：原发感染者可无宿主因素；确诊者微生物学检查是指肺组织、胸液、血液 真菌培养阳性（除外肺孢子菌）
2019/11/12
中华内科杂志,2006,45(8):697-700
可建立明确的曲霉病诊断
细胞学检查、病 理检查

常需要侵入性手段获取标本，常难以获得适当标本
全身使用抗真菌治疗或其它原因易导致假阴性
CT检测
晕轮征、空气-新月征等有助于早期诊断
其它某些真菌感染、某些细菌感染也有可能出现相似征象；在 免疫正常宿主研究较少
GM试验 PCR检测 2019G/1试1/1验2
同侵袭性肺曲霉病
*其他包括：侵袭性窦曲霉病、心脏曲霉菌感染(心内膜炎、心包炎和心肌炎)、曲霉菌骨髓炎和脓毒性关节炎、 皮肤曲霉病、曲霉菌性腹膜炎等
3.Walsh TJ et al. Clinical Infectious Diseases. 2008;46:327–60.
13
2008年IDSA曲霉病治疗指南推荐的经验性及 抢先抗曲霉治疗建议

米曲霉菌种种曲杂菌的鉴定方法
米曲霉菌属是一种常见的真菌，包括多种曲杂菌。

鉴定米曲霉菌种类和曲杂菌的方法主要包括以下几种：
1. 外部形态观察：观察菌落的形态特征，包括颜色、形状、大小和表面纹理等。

不同菌种的菌落形态差异较大，可以帮助鉴定种类。

2. 微观形态观察：通过显微镜观察菌丝的形态特征，包括菌丝的直径、分枝情况、孢子形态和孢子产生的结构等。

不同菌种的孢子形态和产生结构有所不同，是鉴定的重要依据。

3. 生理和生化特性：通过菌落的生长特性、产生的酶活性、代谢产物和化合物分析等，来判断菌株的代谢类型和产物特征。

例如，一些曲杂菌能够产生青霉素，可以通过鉴定其生理特性来确定菌种。

4. 分子生物学方法：使用分子生物学技术，如PCR、DNA测
序和分子标记等，对米曲霉菌的特异基因序列进行分析和比对，从而精确鉴定种类和亲缘关系。

以上是常用的米曲霉菌种种曲杂菌的鉴定方法，不同的方法可以结合使用，以提高准确性。

曲霉菌显微实验报告1. 实验目的掌握曲霉菌的形态特征和主要培养方法，观察曲霉菌在显微镜下的结构，并对其生长过程进行观察和分析。

2. 实验器材- 显微镜- 玻璃制皿- 曲霉菌培养基- 微量注射器- 显微镜玻片和盖玻片- 目镜和物镜3. 实验步骤3.1 曲霉菌的培养和取材1. 准备好曲霉菌培养基，并按照说明进行培养器具的消毒。

2. 取出一小段曲霉菌丝，用微量注射器将其接种到培养基上。

3. 将培养皿放置在适宜的环境中（温度、湿度等）进行培养，待曲霉菌生长到一定程度后进行下一步。

3.2 曲霉菌的显微观察1. 将曲霉菌培养皿移至显微镜下，调整物镜和目镜的倍数，使观察到的曲霉菌清晰可见。

2. 找到曲霉菌的子实体部分，通常为菌丝团的顶端，这是曲霉菌的繁殖结构。

3. 使用显微镜的物镜或目镜调节焦距，以获得清晰的图像。

4. 观察曲霉菌的菌丝形态、颜色和结构，记录下观察到的特征和现象。

3.3 曲霉菌的生长观察1. 每隔一段时间，观察曲霉菌在培养基上的生长情况。

2. 观察曲霉菌菌丝的扩展和分枝情况，分析其生长速度和方式。

3. 注意观察曲霉菌的颜色变化和菌丝的密度变化，记录下观察到的每个生长阶段的特征。

4. 实验结果与分析4.1 曲霉菌的形态特征在显微镜下观察到的曲霉菌具有以下形态特征：- 菌丝呈现细长丝状，分枝较多。

- 菌丝通常呈白色或淡黄色，部分菌株会呈现不同色泽。

- 菌丝末端呈现子实体状的结构，通过分枝繁殖。

4.2 曲霉菌的生长过程随着时间的推移，观察到了曲霉菌在培养基上的生长过程：1. 初始阶段：在接种后的一段时间，观察到培养基表面出现了白色的菌丝。

2. 生长阶段：菌丝逐渐扩展，呈现出较密集的菌丝网状结构。

开始出现分枝现象，子实体不断形成。

3. 成熟阶段：菌丝蔓延至整个培养基表面，形成均匀的细长菌丝层。

5. 结论通过此次实验，我们成功观察了曲霉菌在显微镜下的形态特征和生长过程。

曲霉菌呈现出细长的菌丝和分枝的特征，在培养基上形成细密的菌丝网状结构。

成熟的子实器官或子实体的颜色、 大小和形状。
头放射形， 顶囊球形或瓶形， 小梗一般单层。 后变绿色， 最后变为褐 F 号 在 =>? 培 养 基 上 菌 落 初 为 白 色 ， 绿色， 菌落表面呈粉粒状， 有皱褶， 反面为绿色， 靠近中心处有时有 小梗顶端生分 裂纹。 菌丝有隔， 顶囊膨大不明显， 顶囊 5 H @ 生小梗， 生孢子串。 生化试验 （结果见表 9 ） 5;9;5 分离所得菌株生理、
黑色， 球形或近球形； 假根短小、 手指状、 不发达； 厚垣孢子较多， 为 球形、 椭圆形。 菌丝稠密 ， 起初白色， 老后灰 5 号在 =>? 培养基上呈棉絮状， 褐色至黑色。孢囊梗较细长、 淡褐至黄褐色， 多数单生， 较 少 5<@ 株成束， 有时在孢囊梗上有囊状膨大。孢子囊球形或近球形， 初为 白色， 后变黑色； 假根极不发 达 ， 短指状或没有假根； 厚垣孢子多， 多为近球形。 先白色后变灰黄至褐 @ 号在 =>? 培养基上呈稠密的棉絮状 ， 灰色。 孢囊梗灰褐至暗褐色， 光滑， 孢子囊球形或椭圆 5<C 株成束。 形， 浅褐色； 囊托楔形， 大而明显 ； 假根发达， 呈根状， 褐色； 一般无 厚垣孢子， 有时有少量。 先白色后变黄白 7 号在 =>? 培养基上呈疏松至稠密的 絮 状 ， 较少单生， 有时膨大成 色至灰色。孢囊梗褐色、 光滑， 5<7 株成束， 分枝。孢子囊球形或近球形， 初为白色， 老后为褐色； 囊托楔形； 假 根有或无， 若有假根， 假根发达， 根状， 褐色， 厚垣孢子极多， 形状大 小不一致。 黄色， 菌丛矮。孢囊梗呈短的稀 C 号在 =>? 培养基上呈絮状， 疏的假轴状分枝， 产生 5<@ 个孢子囊。孢子囊黄色至黄褐色， 球形 或长圆形。孢囊孢子椭圆形、 拟椭圆形。厚垣孢子数量甚多， 大小 不一， 黄色至褐色。 平坦 ， 后中心微隆、 变黄 8 号在 =>? 培养基上菌落初为白色、 色， 再变为棕黑色， 菌落表面呈颗粒状， 有放射性凹沟、 有同心环 形， 反面为黄至秸黄色、 有放射性裂纹， 表面的凹沟与反面裂纹相 对应。菌丝有隔， 足细胞膨大不明显， 顶囊明显膨大、 多呈球形， 表 面生辐射状小梗， 小梗顶端分生孢子串生。 后变 青 黄 色 、 黄色， 接着 G 号在 =>? 培养基上菌落初为白色， 逐渐变为黄绿色、 褐绿色， 中心微隆， 表面呈颗粒状， 靠近中心处有 放射性凹沟， 有同心环形， 反面为黄色。菌丝有隔， 表面较粗糙， 足 细胞膨胀不明显， 顶囊膨大明显， 呈烧瓶形， 顶囊上长双层小梗， 孢 子囊、 梗均为褐色。 后变黄褐色， 分生孢子 B 号 在 =>? 培 养 基 上 菌 落 初 为 黄 色 ，

【转帖】常见曲霉菌鉴定真菌2006-11-25 17:13:51 阅读798 评论2 字号：大中小订阅作者：龙太郎鉴定依据：①菌落：菌落生长速度，表面质地、颜色、形态和气味等。

其中颜色是曲霉菌分类的依据之一②分生孢子头：分生孢子头的形状、颜色和大小。

分生孢子头由顶囊、瓶梗、梗基和分生孢子链组成，为曲霉的特征性结构③分生孢子梗或分生孢子柄：注意分生孢子梗的长短、颜色、表面粗糙或光滑、是否有隔等④具有性生殖的曲霉能产生闭囊壳：为封闭式的薄壁子囊果，含子囊和子囊孢子；⑤足细胞，也为曲霉的特征性结构。

曲霉菌的结构：1、烟曲霉菌在SDA培养基上菌落生长快，棉花样，开始为白色，2~3天后转为绿色，数日后变为深绿色，呈粉末状。

分生孢子头的顶囊烧瓶状，小梗单层，排列成木栅状，布满顶囊表面3/4，顶端有链形分生孢子，分生孢子球形，有小棘，绿色：烟曲霉菌菌落：下列图片为烟曲霉分生孢子头：2、黄曲霉菌：在SDA培养基上菌落生长快，黄色，表面粉末状。

分生孢子头顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层长，布满顶囊表面，呈放射状排列，黄色，顶端有链形孢子。

黄曲霉菌菌落：黄曲霉菌分生孢子头：3、土曲霉菌在SDA培养基上菌落生长快，小，圆形，淡褐色或褐色。

分生孢子头的顶囊半球形，小梗双层，第一层短，第二层长，呈放射状排列，分布顶囊表面2/3，顶端有链形孢子。

土曲霉菌落：土曲霉分生孢子头：4、黑曲霉菌在SDA培养基上菌落生长快，表面黑色，粉末状。

分生孢子头的顶囊球形或近球形，小梗双层，第一层粗大，第二层短小，呈放射状排列，布满整个顶囊，黑色，顶端有链形孢子。

黑曲霉菌落：黑曲霉分生孢子头：5、杂色曲霉菌在SDA培养基上菌落生长慢，菌落圆形紧密，绒毛状，羊毛状，颜色有数环，从青绿到红绿。

分生孢子头的顶囊近球形，小梗双层，第一层长，第二层短，呈放射状排列，布满顶囊4/5，顶端有链形孢子。

杂色曲霉菌菌落：杂色曲霉菌分生孢子头：杂色曲霉菌分生孢子头电镜下图片：6、构巢曲霉菌在SDA培养基上菌落暗绿色，中央呈粉末状，边缘绒毛状。

曲霉的鉴定方法
曲霉的鉴定主要包括培养和镜检两个步骤。

在培养方面，曲霉菌落生长快，黑色或黑褐色，1-4天即可进行鉴定。

顶囊球形或近球形，小梗双层、密生于顶囊全部表面。

在镜检方面，应注意与亮白曲霉进行区分，后者菌落颜色为白色，生长慢。

幼龄时黄色菌落注意与黄曲霉相区分：前者菌落表面黄色颗粒稀疏、为淡黄色，后者黄色颗粒较粗、密，为金黄色，两者镜下差异显著。

此外，曲霉菌广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中，是重要的发酵工业菌种，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等。

有的菌株还可将羟基孕甾酮转化为雄烯。

总的来说，曲霉的鉴定需要综合考虑其培养和镜检特征，以及其在不同环境中的分布和生长情况。

曲霉菌检测的新方法——GM试验半乳甘露聚糖（glactomannan，GM）是曲霉和青霉细胞壁多糖，当菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的真菌抗原。

检测血清、肺泡灌洗液、胸腹水等标本中GM含量（即GM试验）可以早期诊断侵袭性曲霉菌感染。

血清GM试验的临床价值1.鉴别侵袭与定植：曲菌感染时持续释放入血，定植时仅间断、极少释放入血；2.早期诊断曲霉菌感染：可早于临床症状和影像学异常1周；3.反映感染程度：GM释放量与菌量成正比，可以反映炎症反应严重性；4.指导临床治疗：血液等标本GM试验连续2次阳性，常提示需抗曲霉菌治疗；5.疗效监测：如检测值连续2次低于诊断界值，可认为病情缓解。

监测人群：血液系统恶性肿瘤、中性粒细胞减少、同种异体干细胞移植、COPD、不明原因发热尤其伴肺部不规则浸润影等。

监测频率：建议连续动态监测（≥2次/周）。

试验结果判断：连续两次检测≥0.5，或单次≥1.0考虑阳性，可提示或诊断曲霉菌感染。

标本采集：静脉采血2-4ml（专用无热原采血管）。

标本送检：蚌埠医学院第一附属医院安徽呼吸系病临床基础省级实验室（）检测及报告时间：每周二、五上午检测，下午报告检测及结果解读：徐亮（）；张永（、3086405）附件1：GM试验联合G试验种属G试验GM试验念珠菌属＋－镰刀菌属＋－隐球菌属－＋曲霉菌属＋＋青霉/拟青霉＋＋接合菌纲－－附件2：《侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则》专家共识之微生物学标准a)合格痰液经直接镜检发现菌丝，真菌培养2次阳性（包括曲霉属、镰刀霉属、接合菌）；b)支气管肺泡灌洗液经直接镜检发现菌丝，真菌培养阳性；c)合格痰液或支气管肺泡灌洗液直接镜检或培养新生隐球菌阳性；d)支气管肺泡灌洗液或痰液中发现肺孢子菌包囊、滋养体或囊内小体；e)血液等标本曲霉菌半乳甘露聚糖抗原（简称GM）检测连续2次阳性；f)血液标本真菌细胞壁成分1,3-β-D葡聚糖（G试验）连续2次阳性；g)血液、胸液标本隐球菌抗原阳性。

曲霉菌属检验技术♦曲霉菌是丝孢目丛梗孢科的真菌。

♦广泛分布于自然界，达900余种，分为18个群，对工业和医药的用途很大。

酿酒造酱，生产有机酸及酶制剂，抗生素等。

♦曲霉菌是实验室经常污染的真菌之一。

可感染动物，也可在寄生的饲料、粮食中产生毒素，动物食后引致中毒。

♦人体对曲霉有极强免疫力，只有在免疫功能降低时才能致病，如使用免疫抑制剂、肾上腺皮质激素，放疗化疗，各种恶性肿瘤、糖尿病、AIDS等可诱发曲霉病。

♦曲霉可侵犯许多部位，呼吸系统曲霉病主要有三种：过敏型、曲霉球和肺炎。

全身性曲霉病多发生败血症，危及生命。

♦曲霉产生黄曲霉毒素、杂色曲霉毒素与原发性肝癌有关。

♦黄曲霉、寄生曲霉、棕曲霉、杂色曲霉等主要以所产毒素而致病。

微生物特性菌丝：有隔，多细胞性，有分枝足细胞（接触培养基的部分，厚壁而膨大）分生孢子梗：从足细胞直立顶囊：孢子梗顶端膨大，半球形或椭圆形小梗：顶囊上，辐射状，一层或二层杆状分生孢子：小梗顶端，成串，球形或柱状，黄、蓝、棕黑分生孢子头：菊花样的头状结构（顶囊，小梗，分生孢子）菌落：绒毛状或絮状开始为白色，后菌种不同颜色不同繁殖：多数：无性少数：有性1、烟曲霉（A. fumigatus）烟曲霉广泛分布于自然界，在禽舍的地面、垫草、用具及空气中经常可分离出其孢子。

孢子对外界理化因素的作用有较强的抵抗力，煮沸5min，可被杀死；一般消毒液要经1~3h才能杀死孢子。

对一般的抗生素均不敏感，制霉菌素、两性霉素B、灰黄霉素及碘化钾对本菌有抑制作用。

♦烟曲霉菌是曲霉菌属致病性最强的霉菌。

主要引起家禽的曲霉性肺炎及呼吸器官组织炎症，并形成肉芽肿结节。

也可感染哺乳动物和人。

在混合感染病例中，除烟曲霉外，亦可见黄曲霉、黑曲霉、构巢曲霉、青霉菌及毛霉菌。

本菌引起的霉菌病,世界各国均有报道。

本菌在感染组织的过程中，还产生一种蛋白质毒素，可导致动物组织发生痉挛、麻痹，直至死亡。

毒素的提取物对家兔、豚鼠、小鼠和鸡有毒性，兔和犬尤为敏感，但鸽却有抵抗力，而鹤对本菌感染十分敏感。

曲霉菌的鉴定与应用曲霉菌以腐物寄生的形式广泛存在于自然界中，为条件致病菌。

引起人类感染的约20多种，常见的有8种。

烟曲霉菌、黄曲霉菌是引起肺曲霉病最重要的两个菌种。

近几年，由于广谱抗生素的广泛使用及联合使用是造成肺曲霉病的重要原因之一。

特别是2008年以来，肺曲霉病的发病率突然在全国范围内迅速上升。

临床上治疗时机的延误是造成死亡的主要原因。

对于曲霉病的诊断，找到病原体为金标准。

检验科微生物工作者如何配合临床应对这种突如其来的事件，迅速制定和建立实验室的快速检测方法成为当务之急。

多年培养出的应急意识及工作经验，使我们在短时间内迅速制定出了曲霉菌实验室快速鉴定的最有效、最可靠的检测方法。

1 方法1.1标本留取真菌的菌丝分为两种：一种为气中菌丝，另一种叫营养菌丝。

这种营养菌丝与组织结合非常牢固，因此在留取标本时，一定要嘱咐病人要用力咳痰并要咳到带盖的容器中。

1.2培养曲霉菌的培养一般接种在沙保弱培养基中，但实践经验告诉我们，接种在血平板中最好。

因为在血平板中培养18～24小时后生长出的菌落会产生特殊的颜色，它是鉴别曲霉菌的重要特征之一。

如，曲霉菌的菌落为灰绿色，黄曲霉菌的菌落呈棕黄色，菌落的背面还可见到皱褶。

1.3涂片由于营养菌丝与组织粘膜结合牢固，直接留取痰液涂片检查很难查到。

即使找到了也只是一些子囊及壳细胞，而被误认为是酵母菌。

这也是造成临床治疗延误的重要原因，因此涂片检查应在培养后进行，挑取菌落时一定是刮取而不是沾取，染色后应先用低倍镜找视野（即蒲公英花样结构），再换油镜观察。

各种曲霉菌有它特有的形态特点。

正确留取标本是曲霉菌能够检出的前提条件，培养选择血平板是24小时内出现典型曲霉菌菌落的保障，镜下查到完整曲霉菌结构是一步鉴定到种的关键。

掌握了这三个方面，实验室查到病原体就有了可靠的依据。

2 结论为什么肺曲霉菌病比以往以8倍的速度上升，最重要的原因就是抗生素的广泛使用和联合应用后细菌，甚至是正常菌群被抑制或杀死使真菌得以生长繁殖导致菌群失调，造成真菌感染。

曲霉检测方法曲霉是一种条件致病菌，人体对曲霉有极强免疫力，只有在人体免疫功能降低时才能致病，曲霉可侵犯机体许多部位，尤其是呼吸系统为主，除此之外还可感染眼部、外耳道、皮肤等部位。

除直接感染和变态反应引起曲霉病外，曲霉可产生毒素引起食物中毒，有些曲霉毒素还具有致癌作用，如黄曲霉素、杂色曲霉素。

一、曲霉致病性曲霉感染是一种免疫相关性疾病，吸入曲霉孢子导致疾病是常见的感染途径，曲霉感染主要包括3种形式：侵袭性曲霉病、慢性曲霉病、过敏性曲霉病。

侵袭性曲霉病多发生在免疫缺陷患者中，是一种较为严重的深部真菌感染性疾病。

引起侵袭性曲霉病的致病菌主要包括烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉和土曲霉。

近年来，随着免疫抑制剂、广谱抗菌药的广泛使用，器官移植等侵入性诊疗技术的普遍开展，以及恶性肿瘤、获得性免疫缺陷综合征患者人数的不断增加，侵袭性曲霉病的发病率呈逐年上升趋势。

侵袭性曲霉病在常见的医院获得性真菌感染中排名第2位，仅次于侵袭性念珠病，其预后往往较差，死亡率高达50%以上，曲霉感染后是否发病及病情轻重与宿主的基础疾病和免疫功能密切相关。

1/ 9慢性曲霉病一般指慢性肺曲霉病，是一种复杂且无临床特异性病症的肺部疾病，常伴有肺结核感染、非结核分枝杆菌感染、结节或肺癌手术等，因此易造成误诊、漏诊，导致发病率较高。

慢性肺曲霉病主要由烟曲霉引起，是以肺实质缓慢进行性破坏为特征的疾病，其形式表现为单发或多发空洞、结节、浸润或纤维化，伴或不伴曲霉菌球。

过敏性曲霉病以过敏性支气管肺曲霉病为代表，其致病曲霉以烟曲霉最常见，黄曲霉、稻曲霉、土曲霉偶可见到。

过敏性支气管肺曲霉病较常发生于哮喘患者，与其他过敏性疾病常见于儿童不同，其发病率在成年人最高。

由于临床对该病认识不足，常会被漏诊，往往发展至疾病晚期出现不可逆结构改变才被确诊。

二、曲霉检测方法近年来，随着曲霉病诊疗技术的发展，抗真菌药物和辅助药物为临床治疗曲霉病提供了有力的武器。

然而，由于曲霉病患者往往同时患有其他疾病或者不具有特异性病症，因此难以早期得到诊断而延误病情。