环氧乙烷残留量检测(行业文书)

环氧乙烷灭菌残留量的测定方法——比色分析法一、环氧乙烷（EO）为一种最简单的环醚。

低温时为无色易流动液体，沸点10.4℃，在该温度以上为无色气体。

EO液体在室温下易挥发，有醚味。

EO具有顽强的扩散和穿透能力，对细菌芽孢、真菌和病毒等各种微生物均有灭杀作用，属于广谱灭菌剂。

环氧乙烷是一种可刺橄身体表面并引起强烈反应的可燃气体。

在很多情况下，环氧乙烷是可致突变的，对胎儿可产生毒性并可致畸，对肇丸的功能具有副作用，并能损害体内的许多器官系统。

在动物致癌研究中，吸人EO可产生几种赘生性变化，包括白血病、脑肿瘤和乳房肿瘤。

而当食人或皮下注射EO时，则只在接触部位形成肿瘤。

一位调查者曾报道过，与EO接触的工作人员，致癌率和死亡率较高，但对工人的几项近期研究结果则表明与该发现不相符。

二、2-氯乙醇（ECH）2-氯乙醇是一种刺激身体表面、具有急性毒性、可以通过皮肤快速被吸收的可燃液体。

ECH还具有微弱的致突变性，有潜在的致胎儿毒性和致畸性的可能，并对体内的几种器官系统:包括肺、肾、中枢神经系统和心血管系统造成担伤。

ECH在动物的痛肿瘤生物评价中，呈阴性。

三、医疗器械环氧乙烷的接触量限度四、环氧乙烷残留量分析方法——比色分析法（一）、检测依据GB/T 14233.1-2008 医用输液、输血、注射器具检验方法第1部分：化学分析方法（二）、原理环氧乙烷在酸性条件下水解成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛与品红-亚硫酸试液反应产生紫红色化合物，通过比色分析可求得环氧乙烷含量。

（三）、溶液配制·0.1mol/L盐酸:取9mL盐酸稀释至1000mL。

·高碘酸溶液（5g/L）:称取高碘酸0.5g，溶于水，稀释至100mL。

·硫代硫酸钠溶液（10g/L）：称取硫代硫酸钠1.0g，溶于水，稀释至100mL。

·亚硫酸钠溶液（100g/L）：称取10.0g无水亚硫酸钠，溶于水，稀释至100mL。

目录一、目的二、背景三、范围四、组织与职责五、内容六、一、目的用气相色谱GC-2010A型气相色谱仪（含顶空器）进行环氧乙烷残留量的检测方法学的研究，证明其适用于塑料瓶环氧乙烷残留量的检测。

二、背景环氧乙烷在医疗器械及卫生用品的消毒方面应用广泛。

在药品包装材料生产领域，口服药用塑料瓶在内包装后也进行环氧乙烷灭菌。

环氧乙烷穿透性强，消毒后因被消毒材料对其吸附能力不同，其完全消散时间也不同。

残留的环氧乙烷对人体有一定的毒性，因此需要对灭菌后的塑料瓶进行环氧乙烷残留的检测。

物质经气现采用），环氧浙江（1（2柱温：70℃检测器温度：250℃三、范围本验证方案适用于GC-2010A型气相色谱仪（含顶空器）检测药用滴眼剂塑料瓶（免洗）环氧乙烷残留量的方法学验证。

四、组织及职责五、内容1 系统适应性试验色谱系统的适应性试验包括理论板数（n）和拖尾因子（T）。

1）、色谱柱的理论板数（n）：用于评价色谱柱的分离效果。

在检测中的测定物质为环氧乙烷，其理论板数不得小于4000。

2）、拖尾系数（T）：用于评价色谱峰的对称性。

为保证分离效果和测量精度，环氧乙烷峰的拖尾系数应不得大于1.5。

对照品溶液的制备取100ml容量瓶，加入约20ml的纯化水，后取环氧乙烷标准品1ml加入到20ml的纯化水中溶、2专属性化水+3检测限4线性、1.25ug/ml5 准确度5ml回回收率（%）= 通过峰面积计算环氧乙烷标准品溶液实际浓度（以3次的平均值计）×100% 环氧乙烷标准品溶液的理论浓度6 精密度1）重复性取5ml环氧乙烷标准品溶液2.5ug/ml置于顶空瓶中，重复进样6个，计算RSD，RSD应小于3%。

2）中间精密度取5ml环氧乙烷标准品溶液2.5ug/ml，置于顶空专用瓶中，按上述方法测定环氧乙烷浓度，由不同人员，不同时间共计完成3次检测，每次检测制备3个样品作为平行，并计算RSD。

7 耐用性考察关键参数随机变动因素对结果的影响，如，顶空条件中炉温±3℃，气相色谱条件中柱温±3℃。

环氧乙烷残留量检验原始记录
产品名称乙二醇标准溶液浓度
生产批号取样数量
灭菌批号检验日期
取样地点报告日期
液别对照液
项目管号123456
标准溶液加入量
（ML ）
吸光度
回归方程：
X （A ）Y （V ）X×X X×Y Y× Y
求和
检验：复核：
无菌检验培养观察记录
（需、厌气菌°30-35 °，真菌23° -28°）
培养天数
菌别管号
1234567891011121314
1
2
需
3
、
厌4
气
5
菌
6
7
8
9
10
阳性对照
阴性对照
1
2
3
4
5
真
菌6
7
8
9
10
结论：
无菌检查原始记录
检验名称规格检验数量生产批号灭菌批号
检验日期完成日期
检查方法浸提法□投入法□检验依据根据2010 版《中华人民共和国药典》二部中《无菌检查法》
培养基供液：
硫乙醇酸盐（流体）培养基供液
生产批号
有效期限
生产厂家
培养基量ml/管接种管数管接种量ml/管
改良马丁培养基供液
生产批号有效期限
生产厂家
培养基量ml/管阳性对照：金黄色葡萄菌【稀释倍数：
接种均数：
检验：接种管数管
CMCC(B)26003 】
接种量：
接种代数：
复核：
接种量ml/管
ml。

1.试验目的检测一次性医疗器材经环氧乙烷消毒后环氧乙烷的残留量，判定是否符合国家标准规定。

2.试验原理环氧乙烷在酸性条件下水解成乙二醇，乙二醇经高碘酸氧化生成甲醛，甲醛与品红-亚硫酸试液反应产生紫红色化合物，通过比色分析可求得环氧乙烷的含量。

3.试验仪器及试剂移液管，容量瓶（50ml，100ml，1000ml），量筒，烧杯，分析天平，滴管，分光光度计，纳氏比色管0.1mol/L盐酸溶液，5g/L高碘酸溶液，10g/L硫代硫酸钠，100g/L亚硫酸钠溶液，品红-亚硫酸试液，乙二醇标准储备液，蒸馏水4.试剂的配制0.1mol/L盐酸溶液：取9ml盐酸稀释至1000ml5g/L高碘酸溶液：称取高碘酸0.5g，加水稀释至100ml10g/L硫代硫酸钠：称取1.0g硫代硫酸钠，加水稀释成100ml100g/L亚硫酸钠溶液：称取10.0g亚硫酸钠，加水稀释成100ml品红-亚硫酸试液：称取0.1g碱性品红，加入120ml 80℃热蒸馏水溶解，冷却后加入100g/mL亚硫酸钠溶液20ml、盐酸2ml，置于暗处1h以上。

试液应为无色，若发现有微红色，应重新配制。

乙二醇标准储备液：取一个外部干燥、清洁的50ml容量瓶，加水约30ml，精确称重。

精确量取0.5ml乙二醇，迅速加入瓶中，摇匀后，精确称重。

两次称重之差即为溶液中所含乙二醇的重量，加水稀释至刻度，混匀。

乙二醇的浓度为：c=(m/50)×103式中：C：乙二醇标准储备液浓度，单位为克每升(g/L)m：溶液中乙二醇的重量，单位为克（g）乙二醇标准溶液（c1=c×10-3）：精确量取1.0ml标准储备液，用水稀释至1000ml5.供试液制备供试液的制备采用极限浸提法，取整个样品或样品上有代表性的部位，截为5mm长的碎块，称取2.0g置于烧杯中，加入0.1mol/L盐酸溶液10ml，室温放置1h，作为供试液。

6.试验步骤6.1取5支纳氏比色管，分别加入0.1mol/L盐酸2ml，再精确加入0.5ml、1.0ml、1.5,ml、2.0ml、2.5ml乙二醇标准溶液，再另取一支纳氏比色管，精确加入0.1ml盐酸溶液2ml作为空白对照。

环氧乙烷灭菌残留量检测操作规程(气相色谱法)编号：版本：编制：日期：审定：日期：批准：日期：生效日期：管理部门：发放部门：生产部 质管部 工程部 研发部 PMC 采购部 仓库 营销中心 人事行政中心 财务部一、试验目的规范环氧乙烷灭菌残留量检测操作流程。

二、适用范围适合经环氧乙烷灭菌的产品经解析后的环氧乙烷残留量检测三、职责实验室所有人员对此规程负责。

四、检测依据1.依据GB/T 16886.7-2015/ISO 10993-7:2008检测一次性医疗器材经环氧乙烷灭菌后环氧乙烷的残留量，判定结果是否符合标准规定。

五、内容1. 试验原理样品在进样口处气化通过色谱柱，由于不同的物质在色谱柱内保留时间不同而且每种物质在相同条件下在色谱柱内保留时间是相同的，所以汽化后的样品在通过色谱柱后会发生分离，之后，样品通过检测器收集信号。

2.试验仪器及试剂文件环氧乙烷灭菌残留量检测操作规程(气相色谱法)版本页码3/6分析天平FA1004 精度0.1mg容量瓶50ml，100ml，1000ml移液枪1ml、 200ul3.标样的配制及标准曲线所有用于配制标准溶液的仪器需提前在烘箱内100℃下烘1小时。

目前常见的标准品有纯环氧乙烷和已知浓度的环氧乙烷溶液两种，配制方法如下（有时需要对标准品浓度进行调整，结合验证的结果来调整）：（1）纯环氧乙烷标准品配制方法:A.标准储备液制备：取外部干燥的50毫升容量瓶，入20~30ml蒸馏水称重（精确至0.1mg），用注射器注入约1ml标准品后，不加瓶塞，轻轻摇匀，盖好瓶塞，再次称重，前后两次称重之差即为标准品的重量，定容，计算出储备液的浓度，4℃以下保存备用。

浓度： W1=50-加入标准品前的质量加入标准品后的质量精密量取1ml标准储备液于100ml容量瓶中，定容，此时溶液浓度为W2=B.标准工作液制备：分别取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml的W2溶液至100毫升容量瓶中，定容。

目录一、目的二、背景三、范围四、组织与职责五、内容六、一、目的用气相色谱GC-2010A型气相色谱仪（含顶空器）进行环氧乙烷残留量的检测方法学的研究，证明其适用于塑料瓶环氧乙烷残留量的检测。

二、背景环氧乙烷在医疗器械及卫生用品的消毒方面应用广泛。

在药品包装材料生产领域，口服药用塑料瓶在内包装后也进行环氧乙烷灭菌。

环氧乙烷穿透性强，消毒后因被消毒材料对其吸附能力不同，其完全消散时间也不同。

残留的环氧乙烷对人体有一定的毒性，因此需要对灭菌后的塑料瓶进行环氧乙烷残留的检测。

物质经气现采用），环氧浙江（1（2柱温：70℃检测器温度：250℃三、范围本验证方案适用于GC-2010A型气相色谱仪（含顶空器）检测药用滴眼剂塑料瓶（免洗）环氧乙烷残留量的方法学验证。

四、组织及职责五、内容1 系统适应性试验色谱系统的适应性试验包括理论板数（n）和拖尾因子（T）。

1）、色谱柱的理论板数（n）：用于评价色谱柱的分离效果。

在检测中的测定物质为环氧乙烷，其理论板数不得小于4000。

2）、拖尾系数（T）：用于评价色谱峰的对称性。

为保证分离效果和测量精度，环氧乙烷峰的拖尾系数应不得大于1.5。

对照品溶液的制备取100ml容量瓶，加入约20ml的纯化水，后取环氧乙烷标准品1ml加入到20ml的纯化水中溶、2专属性化水+3检测限4线性、1.25ug/ml5 准确度5ml回回收率（%）= 通过峰面积计算环氧乙烷标准品溶液实际浓度（以3次的平均值计）×100% 环氧乙烷标准品溶液的理论浓度6 精密度1）重复性取5ml环氧乙烷标准品溶液2.5ug/ml置于顶空瓶中，重复进样6个，计算RSD，RSD应小于3%。

2）中间精密度取5ml环氧乙烷标准品溶液2.5ug/ml，置于顶空专用瓶中，按上述方法测定环氧乙烷浓度，由不同人员，不同时间共计完成3次检测，每次检测制备3个样品作为平行，并计算RSD。

7 耐用性考察关键参数随机变动因素对结果的影响，如，顶空条件中炉温±3℃，气相色谱条件中柱温±3℃。

一次性使用卫生用品环氧乙烷残留量检测方法1 检测目的通过检测确定产品消毒后启用时间。

当新产品或原材料、消毒工艺改变可能影响产品理化性能时应予测试。

2 样品采集于环氧乙烷消毒后，立即从同一消毒批号的3个运输包装中随机抽取一定量最小销售包装样品，采样量至少应满足试验所需（平行测试2次）规定的量，并留一定量样品在需要复测时备用。

分别于环氧乙烷消毒后24 h及以后每隔数天进行残留量测定，直至残留量降至标准值以下。

3 仪器与试剂3.1 仪器3.1.1 气相色谱仪，配有火焰离子化检测器（FID）。

3.1.2 分析天平，精确到0.1 mg。

3.1.3 机械振荡器。

3.1.4 冰箱：能使样品保存在2 ℃～8 ℃之间。

3.1.5 气体调节器：用于开、关环氧乙烷气瓶。

3.1.6 气密性注射器：容量为1.0 mL、10.0 mL、50 mL、100 mL，用于标准气体配制及把标准气体注入液相色谱。

3.1.7 微量注射器：容量为10 μL，用于向气相色谱仪中注入浸提溶液。

3.1.8 平底螺盖瓶：体积能够容纳样品及浸提溶液，具有聚四氟乙烯（PTFE）衬垫的硅橡胶塞，用于样品浸提。

3.2 试剂3.2.1 环氧乙烷：装在适当的气瓶中的有证标准气体。

3.2.2 水：纯度适合于气相色谱。

3.2.3 载气和辅助气体。

3.2.4 载气：高纯氮气（99.999％）。

3.2.5 辅助气体：氢气、空气。

4 操作步骤4.1 标准气体配制用100 mL 气密性注射器抽取环氧乙烷饱和气（重复放空2次，以排除原有空气），塞上橡皮头，用10 mL 气密性注射器抽取上述100 mL 气密性注射器中纯环氧乙烷标准气10 mL ，用空气稀释到100 mL （可将10mL 标准气注入到已有90 mL 氮气的带橡皮塞头的气密性注射器中来完成）。

用同样的方法根据需要再逐级稀释，配制4～5个浓度的标准气体。

根据环氧乙烷的纯度、稀释倍数和室温，计算出环氧乙烷标准气体的配制浓度。