洁净区甲醛消毒消毒效果验证方案及报告

编码：R-STP3.08S.002-A甲醛消毒效果验证报告药业有限公司1. 概述：甲醛是常用的消毒剂，其3～5%的水溶液或乙醇溶液能破坏细菌繁殖体及许多芽孢、真菌和病毒，使其蛋白质、酶类变性。

甲醛熏蒸消毒法是洁净厂房消毒灭菌的常用方法，当相对湿度在65%以上、温度在24~40℃时，甲醛的消毒效果最好。

每立方米空间用34～40%甲醛液10ml，加热熏蒸，密闭一定时间后，通风，置换室内空气中的甲醛。

2. 验证目的：为确认甲醛熏蒸消毒法能够对洁净厂房进行有效的消毒，选择最安全合理的熏蒸时间和换气时间组合，特制订验证方案，进行验证并报告。

验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证领导小组批准。

3. 适用范围：本方案适用于小容量注射剂车间洁净区甲醛熏蒸效果的验证。

4. 各部门职责：4.1. 验证领导小组：4.1.1. 负责验证方案的审批。

4.1.2. 负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。

4.1.3. 负责验证数据及结果的审核。

4.1.4. 负责验证报告的审批。

4.1.5. 负责再验证周期的确认。

4.2. 设备部：4.2.1. 负责组织试验所需仪器、设备的验证。

4.2.2. 负责仪器、仪表、量具等的校正。

4.3. 质量部：4.3.1. 负责验证所需的标准品、样品、试剂、试液等的准备。

4.3.2. 负责取样及对样品的检验。

4.3.3. 负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进行分析后，起草验证报告，报验证领导小组。

4.4. 生产技术部：4.4.1. 负责起草验证方案及报告。

4.4.2. 负责按照标准操作规程对洁净区进行清洁消毒。

4.4.3. 负责根据验证试验结果，修改操作规程。

5. 本方案参考了以下标准和指南：中国GMP（1998年修订版）GB50073-2001 洁净厂房设计规范药品生产验证指南（2003版）6. 通用方法：下面说明了一些进行记录测试数据工作的通用标准：保证每一文件是可追溯的，它应有标题，系统参考（例如项目号）。

甲醛气体熏蒸消毒残留验证报告
1、概述：
我公司洁净环境消毒采用甲醛气体熏蒸、臭氧灭菌、紫外照射等方式。

消毒室去除微生物污染的有效手段之一，各种消毒方法的效果可以通过验证来证明。

由于消毒剂在抑制微生物的同时，也对环境造成了一定的污染。

在验证的过程中，同时检测消毒剂的残留是必要的。

2、验证目的：验证甲醛消毒后残留量的限度。

3、验证小组成员及职责。

4、测试结果
4.1 甲醛熏蒸消毒方法效果确认：
计算体积（包括房间及风管体积），按10ml/m3的比例准备浓度为36%的甲醛溶液（甲醛密度约为1.1g/ml），把数据填入下表。

4.3、甲醛残留标准曲线的绘制：
2011年8月12日
4.5洁净厂房按照现有规程进行环境消毒，经过24 h排风后，使用标准面积洁净方框及棉签，按照方法对洁净厂房彩钢板表面及设备表面进行擦拭，之后密封送化验室进行检测，结果见下表。

浓度（×106）；折算浓度（×106）（考虑回收率）
6、结果评价。

甲醛消毒剂对洁净区消毒效果的验证方案1 目的检查并确认甲醛消毒剂对洁净区的消毒效果，使洁净区符合GMP、产品的生产工艺规程、检验规程的要求。

2 范围本方案适用于XXXXXXXXX股份有限公司(以下简称公司)甲醛消毒剂对洁净区的消毒效果的验证。

3 责任人验证成员由生产一部技术人员和操作人员、质检部技术人员和操作人员、生产计划部人员、总工程师、副总经理组成。

质检部负责组织制定验证方案、验证中取样检验和验证资料的归口管理。

生产一部负责协助配合质检部制定和实施验证方案。

生产计划部负责验证工作的协调。

总工程师负责验证文件的审核。

副总经理负责验证文件的批准。

4验证依据洁净区技术要求SMP07001A0 验证管理程序5概述洁净区是进行最终和非最终灭菌产品生产、口服溶液产品生产、灌装或组装、封盖以及进行产品的微生物培养和检验的工作场地。

本公司洁净区消毒方法是用注射用水进行清洁卫生后，用适当浓度的消毒剂对洁净区的墙面、顶棚、地面、门窗及工作台等进行擦拭，并向空间喷洒适量的消毒剂或进行熏蒸、用紫外灯照射，以达到消毒灭菌的目的，使洁净区能满足该洁净区的要求以及使洁净区符合GMP、产品的生产工艺规程、检验规程的要求。

甲醛消毒剂对洁净区消毒效果的验证主要由消毒剂、消毒剂浓度、注射用水等的确认和消毒后效果及有效期的确认等组成，以证明所用的甲醛消毒剂对洁净区的消毒是可行的。

6验证方法通过用甲醛消毒剂对洁净区消毒后，用生物指示剂进行细菌挑战性试验、表面污染试验，确认洁净区能达到该洁净区的要求、符合GMP和本公司产品生产工艺、检验规程的要求。

7验证程序7.1 甲醛消毒剂、注射用水的确认7.3甲醛对洁净区消毒效果的验证7.3.1 甲醛溶液对洁净区消毒效果的挑战性试验甲醛溶液对洁净区消毒效果的挑战性试验方法是：用纯化水或注射用水对洁净区进行清洁后，将装有枯草芽孢杆菌的生物指示剂(使用前测定其初期数，应不少于10个)表皿置于被测洁净区的中央地面，打开表皿，然后将甲醛溶液倒入一干净烧杯中并置于电炉上，加热使其蒸发，直至蒸发近干，熏蒸量按8—9ml/m3计算，关闭洁净区的门窗至少8小时，消毒结束后，开启空调净化系统，并将枯草芽孢杆菌生物指示剂放入大豆酪素消化液体培养基中，在37℃下培养3天，观察测枯草芽孢杆菌是否被杀灭，若没有枯草芽孢杆菌生长，则为合甲醛溶液对洁净区消毒效果的表面污染试验方法是：用纯化水或注射用水对洁净区进行清洁后，将甲醛溶液倒入一干净烧杯中并置于电炉上，加热使其蒸发，直至蒸发近干，熏蒸量按8—9ml/m3计算，关闭洁净区的门窗至少8小时，消毒结束后，开启空调净化系统，洁净区内的墙壁、地面、工作台等表面用事先经过灭菌的生理盐水、注射用水或缓冲液(磷酸缓冲生理盐水)浸润的适当大小的灭菌纱布或灭菌脱脂棉充分擦拭约10Cm2的面积，然后放入经灭菌处理的广口瓶中，加入一定量的注射用水振摇，对其进行浸取，将浸取液倒入装有牛肉汤培养液的培养皿中，进行细菌培养，至少培养3天，若无细菌生长，则为合格。

甲醛熏蒸消毒效果验证报告验证编号：目录1、验证范围2、验证目的3、验证小组名单4、职责5、文件6、检测仪器仪表及其校验7. 验证内容、方法及步骤7.1甲醛熏蒸后消毒效果的检测7.1.1检测标准7.1.2沉降菌的测试7.1.3浮游菌的测试7.2甲醛熏蒸消毒后残余物的测试7.2.1空间残余物检测7.2.2厂房设备表面甲醛残余物测试8、验证结论9、再验证1、验证范围本公司小容量注射剂车间和口服固体车间空气洁净区（室）的空间甲醛熏蒸的消毒效果。

2、验证目的检测甲醛熏蒸后对生产车间洁净区（室）的空间消毒效果，确认该消毒方法符合药品GMP 要求。

3、验证小组名单小组职务姓名工作部门职务组长组员组员组员质量管理部门组员小容量注射剂车间组员口服固体车间组员中心化验室组员质量管理部门4、职责4.1. 验证管理小组：4.1.1. 负责验证方案的审批。

4.1.2. 负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。

4.1.3. 负责验证数据及结果的审核。

4.1.4. 负责验证报告的审批。

4.1.5. 负责发放验证证书。

4.1.6. 负责甲醛消毒效果验证周期的确认。

4.2. 生产部：4.2.1负责做好洁净车间的卫生清洁工作。

4.2.2负责按照相关的标准操作规程操作、清洁和维护。

4.2.3负责指定甲醛熏蒸操作人员。

4.2.4负责对洁净厂房进行甲醛熏蒸。

4.3工程科：4.3.1 负责验证方案的起草。

4.3.2负责仪器、仪表的校正。

4.3.3负责收集各项验证、试验记录，报验证管理小组。

4.4. 质量管理部门：4.4.1. QC负责验证中的测试工作。

4.4.2. QA负责协调组识各项验证试验。

4.5质量受权人：参与并检查督促指导本方案的实施。

5、文件本验证工作依据下列文件文件名称编号存放处化学试剂空间消毒规程现行版本生产部30万洁净区清洁规程现行版本生产部10万级洁净区清洁规程现行版本生产部1万洁净区清洁规程现行版本生产部人员进入小容量注射剂车间万级区规程现行版本生产部人员进入小容量注射剂车间10万级区规程现行版本生产部人员进入口服固体制剂车间30万级区规程现行版本生产部空调机组操作规程现行版本生产部洁净室沉降菌检查规程现行版本中心化验室洁净室浮游菌检查规程现行版本中心化验室菌检室、效价室的操作规则现行版本中心化验室检查人日期6.检测仪器仪表名称数量（台）保管单位存放处JYQ-II型浮游菌采样器 1 中心化验室中心化验室检查人日期7、验证内容、方法及步骤7.1甲醛熏蒸后消毒效果的检测7.1.1检测标准生产洁净室（区）经过甲醛熏蒸消毒灭菌后，室内的微生物检测项目应该达到不同洁净级别洁净区要求。

YZJS000300消毒方法及效果验证方案1引言1.1 概述：医药工业洁净室与其他工业洁净室不同，不仅要控制空气中一般的悬浮粒子，还要控制活微生物数。

另一方面，不能认为进入洁净室的空气无菌了，室内各种表面就不沾污细菌了。

如果这些地方有营养源，细菌繁殖的可能性就存在。

在洁净室中人体是主要菌源之一，不仅皮肤带有细菌，人体通过呼吸、讲话也会散布细菌，所以在洁净室中除戴口罩外，对洁净室表面消毒仍是一个重要措施。

药品生产时由于在洁净室的地面、墙面、顶棚、机器、人体及衣服表面可能有活的微生物存在，当温度合适时，细菌即在这些表面繁殖，并不时被气流吹散到室内，因此洁净室一般只安排两班生产，使每天有足够的时间用于清洁、消毒。

1.2 消毒方法及其特点使用的消毒方法有紫外线消毒、消毒剂消毒、臭氧消毒等。

1.2.1 紫外线消毒紫外线消毒主要用层流罩、传递窗、风淋室乃至整个洁净房间的消毒。

1.2.1.1 紫外灯的特点a、紫外线波长为136-390nm，以253.7 nm的杀菌力最强，但其穿透力很弱，只适用于环境消毒及表面消毒。

b、紫外灯的杀菌力随使用时间增加而减弱。

国产紫外灯平均寿命一般为2000h，超过平均寿命时就达不到预期的灭菌效果，因此必须到期更换。

c、紫外灯杀菌力随菌种不同而不同，杀霉菌的照射量要比杀杆菌大40-50倍。

d、紫外灯通常按相对湿度为60％的基准设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加。

e、紫外线强度要求在操作面上达40μw/cm2以上。

1.2.1.2 紫外灯的安装方法紫外灯一般安装在顶棚上，其杀菌效果最好。

如图：吊顶1.2.2 消毒剂消毒洁净区墙表面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、车、桌、椅等及手表面都应定期清洁，并用消毒剂消毒。

常用的消毒剂有：75％的乙醇、2％甲酚皂溶液、0.2％新洁尔灭溶液等。

1.2.2.1 75％乙醇乙醇属中效消毒剂，具有中效、速效、无毒、对皮肤粘膜有刺激性、对金属无腐蚀性，受有机物影响很大，易挥发、不稳定等特点。

洁净区甲醛熏蒸效果验证1.概述：将需要量的40%甲醛倒入加热装置内，打开送回风系统，关闭系统新风和排风，让气体扩散30min后，停止送回风系统。

甲醛熏蒸消毒12小时后，25%氨水加入组合风柜中效箱内，打开送回风系统循环6小时，再打开新风及排风循环4小时，至洁净风将蒸汽置换干净。

2. 验证目的检测甲醛熏蒸后对生产区域的空气灭菌效果，判断环境空气是否具备药品的生产条件，并确认甲醛熏蒸消毒周期及表面微生物的监测周期，特制定本方案进行验证。

3. 验证范围验证我公司洁净厂房甲醛熏蒸的消毒效果及甲醛熏蒸灭菌后室内环境中的残留量。

6.验证内容：6.1 验证所需文件的准备洁净区空气消毒规程人员进出万级洁净Ⅰ区的更衣规程人员进出万级洁净Ⅱ区的更衣规程洁净区沉降菌监测规程洁净区表面微生物监测规程药品生产验证指南2003版6.2生物指示剂挑战性试验6.2.1生物指示剂：黑色枯草变种芽孢杆菌6.2.2检测方法：取出塑料管内菌片，移至灭菌玻璃平皿内，在各车间选择洁净级别较高或根据工艺条件最易污染的房间将平皿分别置于远离送风处的地（台）面上进行甲醛熏蒸消毒，消毒完毕后按指示剂使用规程进行操作。

6.2.3评价标准：经48小时培养后，若培养液变浑浊，颜色由红变黄判为阳性，若培养液澄清，颜色不变为阳性，继续培养至七天，若仍无菌生长判为灭菌合格。

6.2.4检测结果记录见附表1。

6.3残留量测定6.3.1取样方法：甲醛熏蒸消毒完毕后，在更衣室、灌装间及洁净走道，用约30L的塑料袋收集室内空气，将袋内空气用由吸收瓶、泵、气流计等组成的装置捕集至瓶内吸收液中（样本数应≥3）。

6.3.2监测方法：甲醛残留量检测操作规程。

6.3.3测试标准:残留物限度＜10-66.3.4测试结果见附表2。

6.4甲醛消毒周期及微生物监测周期的确认6.4.1目的：确认洁净区空气甲醛熏蒸消毒的周期及微生物监测周期6.4.2检测项目：6.4.2.1沉降菌a)检测方法：对间进行甲醛熏蒸消毒后，测试人员按洁净区沉降菌监测规程每天进入洁净区对洁净区洁净级别相对高或易污染的房间布培养皿进行监测。

目录1. 验证目的 (2)2. 验证小组名单 (2)3. 设备概述 (2)4. 验证范围 (2)5. 职责 (2)6. 验证前培训文件的准备 (2)7．验证前培训 (3)8．确认验证所用检测仪器、仪表已经过计量检定 (4)9. 检测标准 (4)10. 验证方法 (4)10.1.沉降菌测试 (4)10.2.棉签采样测试方法 (6)11. 生物指示剂挑战性试验 (7)12. 验证次数 (7)13. 验证结果评定与结论 (7)14. 验证周期 (7)15. 进度安排 (7)16. 附表 (7)1. 验证目的我公司一车间洁净厂房采用的消毒剂为甲醛和臭氧，甲醛每15天用一次，臭氧消毒每日班后进行一次。

检测甲醛熏蒸后对无菌生产区域的空气灭菌效果，判断环境空气是否具备药品的生产条件，该消毒周期是否合理，特制定本方案进行验证。

2. 验证小组名单3.概述当装有甲醛的蒸发皿经电炉加热后，甲醛气体扩散1～1.5小时后，房间开始熏蒸消毒12小时以上，熏蒸完毕后启动空调系统使甲醛气体循环约1小时，关闭空调系统，打开送风装置，排除甲醛气味，铺普通琼脂培养基，检测细菌总数；用棉签擦拭法采样，测试洁净区顶棚、墙壁、工作台面。

4. 验证范围验证我公司一车间洁净厂房甲醛熏蒸的消毒效果。

5. 职责5.1. 验证管理小组：5.1.1. 负责验证方案的审批。

5.1.2. 负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。

5.1.3. 负责验证数据及结果的审核。

5.1.4. 负责验证报告的审批。

5.1.5. 负责发放验证证书。

5.1.6. 负责臭氧消毒效果验证周期的确认。

5.2. 生产部：5.2.1.负责做好洁净车间的卫生清洁工作。

5.2.2.负责指定臭氧发生器管理员及操作人员。

5.2.3.负责按照相关的标准操作规程操作、清洁和维护保养臭氧发生器。

5.2.4.负责指定甲醛熏蒸操作人员。

5.2.5.负责对洁净厂房进行甲醛熏蒸。

5.3.工程设备科：5.3.1. 负责验证方案的起草。

部门：验证机构编号：V-D-001起草： 日期：类别：验证方案审核： 日期：颁次：洁净区熏蒸消毒效果验证方案批准：日期：替代：生效日期：页码：第1页，共15页颁发部门：分发部门：目 录1. 概述......................................................................................................................................................................12. 验证目的..............................................................................................................................................................23. 职责......................................................................................................................................................................23.1 验证委员会..................................................................................................................................................23.2 工程部...........................................................................................................................................................23.3 生产部..........................................................................................................................................................23.4 质量部...........................................................................................................................................................34. 验证内容..............................................................................................................................................................34.1 验证条件......................................................................................................................................................34.1.1 验证所需文件资料..............................................................................................................................34.1.2 验证所需的试验条件..........................................................................................................................34.2 验证步骤......................................................................................................................................................44.2.1 熏蒸消毒前的准备..............................................................................................................................44.2.2 熏蒸消毒..............................................................................................................................................54.2.3 消毒效果确认......................................................................................................................................64.2.4 换气后室内环境中消毒剂残留量的测试..........................................................................................64.3 拟订再验证周期，起草洁净厂房熏蒸消毒程序........................................................................................74.4 验证结果评定与结论..................................................................................................................................75. 附件......................................................................................................................................................................81.概述洁净厂房操作室的消毒通常用化学试剂的蒸气熏蒸，常用的化学试剂有甲醛、乳酸、丙二醇、过氧乙酸等。

洁净区甲醛消毒效果验证方案（文件编号：）一、验证组织与职责1、验证小组成员、工作职责1、概述XX洁净区拟产用甲醛熏蒸和臭氧消毒两种方式交替，甲醛消毒拟定为每月一次，臭氧消毒拟定为每三天一次。

2、目的确认已选定的消毒剂甲醛对XX 洁净区进行熏蒸方式的消毒效果，保证洁净区达到洁净级别要求。

3、验证范围：本验证方案适用于XX洁净区净化空调系统甲醛消毒。

4、验证要求：验证过程应严格按照本方案规定执行，整个验证过程应在验证小组人员的监督下进行，检查过程中任何与文件或规范的偏差或遇到任何例外的情况都要记录下来，以供文件偏差报告表的审查。

记录的偏差要进行调查，而且决定并采取相应的措施。

文件偏差报告表中需记录有调查、纠正性措施及其理由。

5、验证时间：2013年8月27-9 月30日三、消毒方式：按每立方米空间用甲醛10g 计算消毒剂用量，用蒸汽加热发生罐使甲醛蒸汽随空调送风进入洁净区，时间60 分钟，停止送风，焖消3 小时。

开启空调送风、排风，恢复正常运行。

其各洁净区体积及甲醛用量如下表：四、验证方案对以上代表性房间进行分别取样检测，其试验项目如下：1、表面微生物判断标准：1)B级表面微生物标准1/10 即［接触( 55mm)1cfu / 碟］2；2)C级表面微生物标准的1/10 即［接触( 55mm)3cfu / 碟］2；3)D级表面微生物标准的1/10 即［接触( 55mm)5cfu / 碟］2。

检测记录如下：（4）结论：符合要求（是□否□）确认人：日期：审核人：日期：2、沉降菌检测（1）取样方法：执行洁净区沉降菌检测操作规程检测，沉降菌（90mm）cfu/4 小时。

（2）判断标准：B级≤1 CFU/4 小时，C级≤5 CFU/4小时，D级≤10 CFU/4小时。

（3）取样位置：具体取样点及检测标准如下表：（4）结论：符合要求（是□否□）确认人：日期：审核人：日期：3、生物指示剂细菌挑战性试验（1）指示剂：枯草黑色变种芽孢菌片，5×105-6 cfu/ 片（2）方法：甲醛气体消毒前，在阳性菌室将枯草黑色变种芽孢菌片分装于玻璃瓶（每瓶一片）将装有菌片的玻璃瓶置于规定房间的中央地面，并编号。

洁净区消毒剂清洁效果验证1 验证申请表目录1.概述12.验证目的13.验证范围14.人员及分工15.验证的具体内容及可接受标准16.验证周期 27.验证的具体操作及取样方法28.检验方法与结果计算59.再验证周期 510.验证结果及评价 611.验证结论附件洁净区消毒剂清洁效果验证方案1.概述洁净室的清洁和消毒是清除微生物的主要手段，必须保证消毒的有效性、彻底性，因此必须对洁净室的消毒效果进行验证。

洁净室消毒效果的验证是以物理、化学、及微生物方法考察洁净室人员的手部、操作间、设备、器具应用相应的消毒剂消毒后的消毒效果，确保消毒剂使用的有效性，为生产合格产品提供环境保障。

2.验证目的：通过对0.1%、0.2%新洁尔灭和75%医用酒精消毒剂，对人员双手消毒、设备内外表面及容器、生产场地的消毒效果的验证，证明该消毒剂使用效果符合生产工艺要求。

3.验证的范围：微生物室、洁净室人员手、操作间（工作台、设备表面、墙壁、地板）、器具所使用的各种消毒剂的消毒效果验证。

4.人员及分工6.验证周期消毒液更换周期为1个月1次，每月底进行1次采样，一次采样的采样周期为3天，重复1个更换周期，以确定消毒液更换周期的有效性。

7.验证的具体操作及取样方法7.1 试验前准备：7.1.1 环境在进行消毒剂消毒效果验证前，微生物室空调系统应经验证合格并正常运行。

微生物室内设施、仪器及室内卫生等均按规定的清洁操作规程进行清洗。

7.1.2人员操作人员均已经过培训，并能够完成取样及检验方法操作，确保取样样品的安全性及检验数据的准确性。

7.1.3仪器所用的仪器及玻璃器皿应经过计量局的校验，确保使用的仪器运作正常且测量数据准确。

7.1.4器具准备：所有与菌检试验有关的器具置高压蒸汽灭菌器内121℃，灭菌30min备用。

7.1.5试剂及培养基：取试管若干支，每支加入10mL 0.9%氯化钠溶液，置高压蒸汽灭菌器内121℃，灭菌30min备用。