能对底物产生立体影响的 扩散层以及静电的相互作用等引起的变化。
载体与酶的相互作用:
载体与酶的直接作用可能表现为活力丧失、破坏酶结 构、封闭酶活性部位等。
改变之一:构象改变、立体屏蔽
构象改变: 酶分子构象发生某种扭曲,导致
酶与底物结合能力或催化能力下降
4.包埋法
是指将酶或含酶微生物包裹在多孔的载体中。 网格型; 微囊型。
网格法
——将酶分子或微生物包埋在凝胶格子里。 天然凝胶:琼脂凝胶、海藻酸钙凝胶、角叉菜胶、明胶等 合成材料:聚丙烯酰胺、聚乙烯醇和光敏树脂等。
网格型包埋法是固定化微生物中用得最多、最有效的方法。
微囊型
半透膜包埋法(微囊化法): 将酶包埋在有各种高分子聚合物制成的小囊中,
固定化酶的过程中还存在几个亟待解决解决的难题 :
酶的活性中心发生物理化学变化导致酶活力降低 酶固定化后多了空间屏障,增加了传质阻力 酶和载体结合不牢固,容易脱落,酶活力损失大 固定化颗粒成型困难
固定化技术的改进
定点固定化技术 抗体偶联、生物素-亲和素亲和、氨基酸置换(Cys)
质量转移效应:
分配效应(催化剂颗粒内外不同的溶质浓度),外部或内部(微孔)扩散效应;这些给 出了游离酶在合适反应条件下的效率。
稳定性:
操作稳定性(表示为工作条件下的活性降低),贮藏稳定性
效能:
生产力(产品量/单位活性或酶量),酶的消耗(酶单位数/公斤产品)
包括:
酶本身的变化:
主要由于活性中心的氨基酸残基、高级结构和电荷状 态等发生变化;
但是载体和酶的结合力比较弱,容易受缓冲液种 类或pH的影响,在离子强度高的条件下进行反应 时,酶往往会从载体上脱落。
共价结合法