电位滴定法测定五味子提取物中总有机酸含量分析

临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical2018 年 第 5 卷第 43 期2018 Vol.5 No.43169五味子有效成分的提取与分离沈建华（苏州市吴江区第四人民医院，江苏 苏州 215200）【关键词】五味子；敛肺滋肾；生津敛汗【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8242.2018.43.169.02北五味子为木兰科植物五味子（schizandra chinensisbaill ）的果实。

具有敛肺滋肾、生津敛汗、涩精止泻、宁心安神等功效，主要用于久嗽虚喘、梦遗滑精、内热消渴、久泻不止、自汗盗汗、心悸失眠等证[1]。

现代研究表明五味子含有多种化学成分，其中主要含有木脂素、有机酸、挥发油、多糖、氨基酸、鞣质等化学活性成分[2]，这些化学成分能保护消化系统、心血管系统、神经中枢系统，调节免疫功能、抑制肿瘤等多种功效。

其中，木脂素类具有护肝作用。

此外，五味子木脂素还具有抗氧化作用；挥发油具有镇咳作用[3]。

有机酸有明显的祛痰镇咳作用；粗多糖具有抗衰老，提高机体免疫力作用[4]。

五味子乙素能增强肝脏的解毒功能，降低CCl4引起的ALT 升高，促进肝脏中的合成蛋白质的形成，对糖原的异生与分解也有促进作用，提高肝细胞微粒体细胞色素P450的含量，对血清白蛋白指数也具有提高作用，对肝脏的保护作用最终落实到显著提高肝脏的解毒功能[5]。

五味子乙素改善血浆中的ROM 水平、提高抗氧化酶活性，可能是通过增强肝细胞线粒体抗氧化损伤的能力来发挥保肝作用的[6]。

五味子乙素还可以抑制血管内皮生长因子（VEGF ）的表达，从而发挥其抗肿瘤作用[7]。

1 实验部分1.1 试剂、仪器及药材95%乙醇（AR ），石油醚（AR ），乙酸乙酯（AR ）均由上海凌峰化学试剂有限公司生产；硅胶（AR ）由青岛海洋化工厂生产；HPLC 级的甲醇和乙腈均由Merck Co.Ltd 生产。

自动电位滴定法测定酱油中总酸和氨基酸态氮目前,国家卫生标准(GB/T5009.39-2003)中,规定测定酱油中总酸和氨基酸态氮的方法是人工电位滴定法,但人工电位滴定法操作比较繁琐,费时、费工,试验条件不容易控制,误差比较大。

利用自动电位滴定仪可以连续自动测定酱油中总酸和氨基酸态氮含量,省时、省力,操作简便、快速。

现用自动电位滴定仪法和人工电位滴定法分别测定酱油中总酸和氨基酸态氮含量作了比较试验,其结果具有一致性,现将结果报告如下。

1 材料与方法111 仪器与试剂***** 798MPTTitrion型自动电位滴定仪;730型自动样品转换器;***-*****0复合pH电极。

***** 氢氧化钠标准溶液C(NaOH)=0*****mol/L(标准物质中心购买,证书号BW3196);36%甲醛溶液(应不含聚合物)。

112 实验部分***** 仪器设定***** 实验方法***-***** 原理利用氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,用氢氧化钠标准溶液滴定后定量,以酸度计测定终点。

***-***** 分析步骤吸取510ml试样,置于100ml容量瓶中,加水至刻度,混匀后吸取2010ml,置于200ml烧杯中,加60ml水后,放置于730型自动样品转换器上,调出总酸、氨基酸态氮组合方法,输入样品编号,按开始键,仪器自动用氢氧化钠标准溶液滴定样品溶液pH至8120,仪器自动记录氢氧化钠标准溶液消耗量。

总酸测定完成后,仪器自动加入36%甲醛溶液10ml,继续用氢氧化钠标准溶液滴定样品溶液pH至9120,仪器自动记录氢氧化钠标准溶液消耗量并计算出总酸、氨基酸态氮的含量,自动打印出结果(或将数据自动传输到电脑上)。

2 结果211 两种方法测定结果的比较取18份样品,分别用自动电位滴定仪法和按照国标方法(GB/T***-*****-2003)中人工操作滴定法测定酱油中总酸、氨基酸态氮的含量,对所测得的结果作比较,经统计学处理,两种方法测定样品中总酸(t=*****,t0105(17)=*****;P0105)和氨基酸态氮(t=01549,t0105(17)=*****;P0105)含量均无显著性差异,结果见表1。

HPLC测定五味子不同炮制品及不同部位有机酸含量作者：徐月高慧贾天柱来源：《中国中医药信息》2014年第07期摘要：目的测定五味子不同炮制品及不同部位有机酸含量,探讨炮制对有机酸含量的影响。

方法采用Ecosil C18-AQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.5%冰醋酸(15∶85)为流动相、流速0.8 mL/min、检测波长260 nm测定原儿茶酸的含量,以乙腈∶15 mmol/L磷酸二氢钾缓冲盐溶液＝3∶97(磷酸调pH＝3)为流动相、流速1.0 mL/min、检测波长210 nm测定柠檬酸的含量。

结果生五味子、酒五味子、醋五味子中原儿茶酸和柠檬酸含量分别为0.009 8%、0.012 4%、0.012 1%和14.829 3%、14.169 4%、14.365 0%；果肉、种仁中原儿茶酸和柠檬酸含量分别为0.012 3%、0.009 0%和22.881 0%、3.899 0%。

结论五味子炮制后原儿茶酸含量明显增加,柠檬酸含量变化不大,有下降趋势。

果肉中2种有机酸含量均高于种仁。

关键词：五味子；高效液相色谱法；炮制；原儿茶酸；柠檬酸DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.07.025中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号：1005-5304(2014)07-0085-04Determination of Organic Acids in Different Processed Products and Different Parts of Schisandra Chinensis Fruits by HPLCXU Yue, GAO Hui, JIA Tian-zhu (College of Pharmacy, Liaoning University of TCM, Key Laboratory of Processing Theory Analysis of State Administration of TCM, Engineering Technology Research Center of TCM Processing of Liaoning Province, Dalian 116600, China)Abstract：Objective To determine the contents of organic acids in different processed products and different parts of Schisandra Chinensis Fruits by HPLC；To discuss the influence of different processing methods on contents of organic acids. Methods Ecosil C18-AQ Column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) was used with mobile phase of methanol-0.5% acetic acid (15∶85), at a flow rate of 0.8mL/min, and the detection wavelength was 260 nm for protocatechuic acid；mobile phase of acetonitrile∶15 mmol/L potassium dihydrogen phosphate buffered saline solution＝3∶97 (phosphoric acid adjusting pH＝3), at a flow rate of 1.0 mL/min, and the detection wavelength was 210 nm for citric acid. Results The contents of protocatechuic acid and citric acid in Schisandra Chinensis Fruits, wine steaming and vinegar steaming Schisandra Chinensis Fruits were 0.0098%, 0.0124%, 0.0121% and 14.8293%, 14.1694%, 14.3650%, respectively. The contents of protocatechuic acid and citric acid in pulp, seeds were 0.0123%, 0.0090%, and 22.8810%, 3.8990%, respectively. Conclusion The protocatechuic acid was increased significantly after being processed, but citric acidshowed a small change and had a slight downward trend. The two organic acids in pulp were higher than the two in seeds.Key words：Schisandra Chinensis Fruits；HPLC；processing；protocatechuic acid；citric acid五味子是木兰科植物五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill.的干燥成熟果实,习称“北五味子”。

实验5 电位滴定法测定醋酸的含量一、实验目的1、熟悉电位滴定的基本原理和操作技术；2、学习运用二级微商法确定滴定的终点。

二、实验原理醋酸为有机酸（5108.1-⨯=a K ），与NaOH 的反应为：O H NaAc NaOH HAc 2+→+。

用与已知浓度的NaOH 滴定未知浓度的HAc 溶液在终点时产生pH （或mV ）值的突跃，因此根据滴定过程中pH （或mV ）值的变化情况来确定滴定的终点，进而求得各组份的含量。

滴定终点可由电位滴定曲线（指示电极电位或该原电池的电动势对滴定剂体积作图）来确定，也可以用二次微商曲线法求得。

二次微商曲线法是一种不需绘图，而通过简单计算即可求得滴定的终点，结果比较准确。

这种方法是基于在滴定终点时，电位对体积的二次微商值等于零。

例：用下表的一组终点附近的数据，求出滴定终点 滴定剂 的体积 V/mL 电动势VE△E △V VE∆∆22V E∆∆24.10 24.20 24.30 24.40 24.50 24.600.183 0.194 0.233 0.316 0.340 0.3510.011 0.039 0.083 0.024 0.0110.10 0.10 0.10 0.10 0.100.11 0.39 0.83 0.24 0.11+2.8 +4.4 -5.9 -1.3表中VV E V E V E ∆⎪⎭⎫ ⎝⎛∆∆-⎪⎭⎫ ⎝⎛∆∆=∆∆1222 加入△V 为等体积，在接近滴定终点时。

从表中22VE∆∆的数据可知，滴定终点在24.30mL 与24.40mL 之间。

设： （24.30+X ）mL 时为滴定的终点022=∆∆VE即为滴定终点。

则有：02212=∆∆=∆⎪⎭⎫ ⎝⎛∆∆-⎪⎭⎫ ⎝⎛∆∆V EV V E V E +++-+⎪⎪⎭⎫ ⎝⎛∆∆⨯⎪⎪⎭⎫ ⎝⎛∆∆-⎪⎪⎭⎫ ⎝⎛∆∆-+=22-2222V E V E V E V V V V 终 即： ()[]4.49.54.430.2440.24+24.3=V 终⨯---所以在滴定终点时滴定剂的体积应为： )(34.24mL V =终三、仪器和试剂1、仪器 酸度计（含复合电极） 电磁搅拌器（含搅拌子） 滴定管100µL 进样器铁架台（含滴定管夹） 2、试剂 邻苯二甲酸氢钾NaOH 溶液0.1mol/L ：称取4g 固体NaOH ，加入新鲜的或煮沸的除去二氧化碳的蒸馏水，完全溶解后，定容至1L ，充分摇匀(待标定)。

好,且保留时间恰当;在甲醇2乙腈21%磷酸(70∶10∶15)为流动相系统下,蒽醌类分离效果良好,且保留时间恰当。

References:[1]　Sh i G B1Study on the influence of concocti on over active in2gredients in P oly g onum m u ltif lorum[J]1Ch in H osp P ha r mJ(中国医院药学杂志),2003,23(2):952971[2]　X ie W J,L i I,W ei H F,et a l1Effect of2,3,4,4′2tetrahy2droxystilbene222O2Β2D2gluco side on h i ppocampal genes ex2p ressi on in m i m etic2dem entia m ice induced by D2galacto se[J]1Ch in J P ha r m acol T ox icol(中国药理学与毒理学杂志), 2005,19(1):242281[3]　Song Y,T ang Y,Zhang Z Y,et a l1A nti2inflamm ato ry andbacteria inh ibiti on effects of Cau lis P oly g on i M u tif lori[J]1 W est Ch ina J P ha r m S ci(华西药学杂志),2003,18(2): 11421161[4]　L i X D,H uang L Q1Influence of p rocessing rhubara on it′santh raquinone contents[J]1Ch ina J Ch in M a ter M ed(中国中药杂志),2005,30(12):90429431[5]　J in B,L i W,Cai W1Study on extracti on and purificati onp rocess of to tal anth raquinone in R heum[J]1L ish iz hen M ed M a ter M ed R es(时珍国医国药),2005,16(8):75627581电位滴定法测定五味子中总游离有机酸吴建兵,王誉洁,赵　铁,赵爱华,贾　伟,邱明丰3Ξ(上海交通大学药学院,上海　200240) 五味子为木兰科植物五味子S ch isand ra ch inen2sis(T u rcz1)B aill1的干燥成熟果实,习称北五味子。

中药中有机酸的提取分离与测定摘要：综述了中药中有机酸类成分的提取分离及测定方法研究进展。

随着天然产物的化学和药理学研究不断深入及分析手段突飞猛进的发展,中药有机酸类成分的研究引起了国内外许多学者极大的兴趣。

我国天然有机酸资源丰富,在中药中已经发现了较多种类和数量的有机酸类成分,越来越多的研究证明,中药中的有机酸类成分具有广泛的生物活性[1]。

传统的和现代的提取分离和测定方法各有优劣，采用合适的提取分离和测定方法，不仅可以提高提取及检测效率，还可以为后续有机酸的提取分离及测定带来方便。

关键词:有机酸;提取分离;测定1 中药有机酸类成分的提取分离中药中有机酸提取分离方法的选择主要是根据其结构性质的不同来确定最佳方法。

1.1 碱提酸沉法有机酸在植物中成盐或者呈游离态时,可用水或者稀碱水(如1%碳酸氢钠)直接提取,提取液酸化后滤出沉淀,提取液加无机酸酸化后,析出总游离有机酸,以过滤法或非极性有机溶剂萃取法得总有机酸。

陈琦等[2]通过比较别采用超声提取法、碱提酸沉法、酸沉后有机溶剂萃取法、有机溶剂加酸水直接提取法等多种方法提取鹅不食草总有机酸，并用分光光度法测定总有机酸含量。

结果发现碱提酸沉法为鹅不食草总有机酸最佳提取方法，总有机酸含量为67.3%。

1.2 有机溶剂提取法溶剂提取法一般指从中草药中提取有效部位的方法，根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性，选用对活性成分溶解度大、对不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。

由于游离的有机酸(分子量小的除外)易溶于有机溶剂而难溶于水,有机酸盐则易溶于水而难溶于有机溶剂,所以一般可先酸化使有机酸游离,然后选用合适的有机溶剂提取。

张毅等[3]利用正交试验优选宣木瓜总有机酸，采用不同乙醇浓度对宣木瓜进行提取，最佳提取工艺为乙醇浓度80%，料液比为1:25，提取温度为90℃，提取时间为3h，宣木瓜总有机酸的得率为10.46%，表明该工艺稳定、可行，适用于工业化生产。

-984 -宁夏医学杂志 2019 年 11 月第 41 卷第 11 期 Ningxia Med J,Nov.2019 ,Vol41 ,No.llDoi ： 10.13621/j. 1001 -5949.2019.11.0984 •论 著.电位滴定法测定消食化滞液中总有机酸的含量王惠敏S 王 英*2,樊艳茹3［基金项目］宁夏自然科学基金（NZ17081）［作者单位］1.宁夏中医医院暨中医研究院，宁夏银丿II 7500212. 宁夏医科大学总医院，宁夏银丿II 7500043. 宁夏医科大学，宁夏银丿II 750004［作者简介］王惠敏（1973 -），女,河北籍，副主任医师，大学本科，从事新生儿科工作。

［通讯作者］樊艳茹，Email : risefyr@ 163. com［网络出版地址］http ：//kns. cnki. net/kcms/detail/64. 1008. R. 20191119.1009.004. html［摘要］目的建立自动电位滴定法测定消食化滞液中总有机酸含量，研究自动电位滴定法代替指示剂法进行消食化滞液中总有机酸含量质量控制的可行性。

方法对新建立质控方法进行方法学验证，结果与指示剂法结 果进行统计学比对。

结果 自动电位滴定法精密度、重复性、稳定性良好，平均加标回收率为101.2%，相对标准偏差为0.84%，三批消食化滞液中总有机酸含量为7. 893 - 8. 981 mg/mL 。

本法与指示剂法测定结果的精密度及含量 均值均无显著性差异。

结论自动电位滴定法可替代指示剂法进行消食化滞液中总有机酸含量的质量控制。

［关键词］自动电位滴定；消食化滞液;制剂；总有机酸［中图分类号］R284.1［文献标识码］ADetermination of the total organic acids content in Xiaoshihuazhi Ye by automatic potentiometric titrationWANG Huimin ，WANG Ying 2，FAN Yanru . 1. Ningxia Hospital of Traditional Chinese Medicine and, Academy of Traditional ChineseMedicine ，Y inchuan 750021, C hina ；. General Hospital of Ningxia Medical University ，Y inchuan 750004 , C hina ； 3. Ningxia Medical Uni ­versity ，Y inchuan 750004，C hinaCorresponding author : FAN Yanru ，Email : risefyr@ 163. com[Abstract ] Objective To study on foundation of a new analytical method for the determination of the total organic acids contentin Xiaoshihuazhi Ye by using automatic potentiometric titration ( APT ) and study on the feasibility by using APT instead of indicatormethod for the total organic acids content quality control. Methods The APT was adopted to detect the total organic acids content in Xi ­aoshihuazhi Ye. The proposed method was verified. The results by APT and results by the indicator method were compared. Results The titration jump was obvious at the end point and the proposed method owned high precision , repeatability and stability. Theaverage adding standard recovery was 101.2% with high RSD (0. 84% ). The total organic acids content ranged from 7. 893 to 8. 981mg/mL in three batches samples. The statistical comparison showed there was no significant difference between the precision and the av ­erage results of the two methods. Conclusion It is feasible to use the APT instead of the indicator method for the quality control of total organic acids content in Xiaoshihuazhi Ye.[Key words ] Automatic potentiometric titration ； X iaoshihuazhi Ye ； P reparation ； T otal organic acids消食化滞液合剂是宁夏中医医院生产的特色医 院制剂，内容物主要为焦山楂的棕褐色澄清水提液,依据《宁夏回族自治区食品药品监督管理局医疗机 构制剂标准》中规定含量测定方法测定总有机酸的 含量,具体以酚駄为指示剂，用氢氧化钠滴定液滴定焦山楂水提取液中的有机酸，以枸椽酸计算总有机 酸含量⑴。

电位滴定法测定槟榔中总酸的不确定度评定电位滴定法是一种常用的分析方法，用于测定溶液中酸或碱的浓度。

测定槟榔中总酸含量时，也可以使用电位滴定法进行测定。

但是为了保证分析结果的准确性和可靠性，必须评定所得结果的不确定度。

不确定度是对测量结果的不确定程度的度量，它表征了测量值与被测量的真实值之间的偏差。

在评估不确定度时，需要考虑到各种误差源，包括系统误差和随机误差。

需要考虑仪器误差。

在使用电位滴定法进行测定时，需要使用电位滴定仪。

电位滴定仪的误差可以通过仪器校准来确定，包括指示误差、滴定管误差和移液管误差等。

通过仪器校准可以得到每个读数的不确定度。

需要考虑试剂误差。

试剂误差包括试剂的纯度和配制误差。

在测定槟榔中总酸时，通常会使用盐酸作为滴定试剂。

试剂的纯度会影响测定结果的准确性，所以需要了解所使用试剂的纯度，并将其考虑在内。

还需要考虑到实验操作误差。

实验操作误差包括仪器使用不当、读数误差和操作技术不熟练等。

这些误差通常是随机的，可以通过多次重复测定来评估其对测定结果的影响。

需要考虑样品制备误差。

样品制备误差包括样品采集方法不准确、样品保存不当和样品制备不完全等。

这些误差可能会导致样品中总酸含量的偏差，因此需要在评估不确定度时加以考虑。

在评估不确定度时，可以使用常见的不确定度评定方法，如不确定度的合成法和统计方法。

不确定度的合成法是将各种误差源的不确定度通过合成计算得到最后的不确定度。

统计方法是通过对多次测定结果的统计分析来评估不确定度。

通过对电位滴定法测定槟榔中总酸的不确定度进行评定，可以确保测定结果的准确性和可靠性。

在实际操作中，需要注意各种误差源，并采取相应的措施进行控制，以提高测定结果的精确度。

电位滴定法测定山楂及其炮制品总有机酸的含量张慧;夏厚林;杨孟妮;邓放【摘要】目的:采用电位滴定法测定山楂及其炮制品总有机酸的含量.方法:采用pH 计进行电位滴定,记录V值及对应的pH值,绘制△pH/△V～V曲线,确定滴定终点.结果:滴定终点突跃明显,精密度、重复性及稳定性良好;山楂回收率为97.8％、RSD 为0.68％,炒山楂回收率为97.93％、RSD为0.95％,焦山楂回收率为96.56％、RSD为1.45％,山楂炭回收率为95.93％、RSD为1.65％.5批样品及其对应炮制品的总有机酸含量为山楂6.95%7.04％,炒山楂7.01％～7.17％,焦山楂5.27％～5.31％,山楂炭3.16％～3.24％.结论:电位滴定法能较好的表达山楂及其炮制品总有机酸的含量,各样品总有机酸含量高低各异,表明山楂受热程度不同其有机酸含量不同.【期刊名称】《中药与临床》【年(卷),期】2016(007)003【总页数】3页(P27-28,32)【关键词】山楂;总有机酸;电位滴定;含量测定【作者】张慧;夏厚林;杨孟妮;邓放【作者单位】成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地,成都611137;成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地,成都611137;成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地,成都611137;成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地,成都611137【正文语种】中文【中图分类】R284.1山楂为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实，其味酸、甘，微温，具有消食健胃，行气散瘀之功效［1］，临床上山楂除生用外还有炮制品炒山楂、焦山楂和山楂炭等［2］。

1.萍乡市食品药品检验所…江西……萍乡……337055；2.江采用自动市售与自制的两种半夏曲总有机酸含量在简便、快捷、准确、重现性好，可作为半夏曲药典并未收载半夏曲，无法对半夏曲进行统一质量评价。

本研究选取《中药成方制剂第十册》和《北京市中药饮片炮制规范》2008版收载的两种半夏曲进行总有机酸含量测定研究。

两种半夏曲的发酵处方、工艺以及炮制方法大不相同，前者以清半夏为主，佐以姜汁、面粉，是市售半夏曲的主要代表品种，后者以法半夏为主，佐以赤小豆、苦杏仁、青蒿、辣蓼、苍耳秧等，是地方品种的代表。

希望通过研究以期更好的评价不同半夏曲的药材质量。

1…材料与仪器1.1…材料…市售《中药成方制剂第十册》制法半夏曲：内江良辉药业有限公司2批（批号：161101、170201），四川千方中药饮片有限公司1批（批号：Z51021596），四川百胜药业有限公司1批（批号：20160809），依次编号为1~4号；《北京市中药饮片炮制规范》2008版制法半夏曲3批，均由江西古汉精制饮片有限公司制作提供，依次编号为5~7号，方法学考察采用7号样品。

琥珀酸对照品（美国Stanford Chemicals，批号：TC190213-16，纯度：99.78%），其余试剂均为分析纯。

1.2…仪器…电子天平（ME204型，梅特勒）；电位滴定仪（G20型，梅特勒）；超声仪（KQ-300DE型，昆山市超声仪器有限公司）。

2…方法与结果2.1…琥珀酸对照品溶液的配制…精密称取琥珀酸对照品适量，精密加入氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）10mL，超声处理30min，转移至50mL容量瓶中，加新沸的冷水定容，摇匀，制成含琥珀酸为0.8mg/L 的对照品溶液。

2.2…供试品溶液的制备…取本品粉末（过四号筛）约2.5g，精密称定，置锥形瓶中，加入乙醇50ml，回流提取1h，再重复提取2次，放冷，滤过，合并滤液，蒸干，精密加入氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）10mL，超声处理（功率500W，频率40kHz）30min，转移至50mL的容量瓶中，加新沸的冷水至刻度，摇匀，即得。