3种镰刀菌对小扁豆生长的影响

第３３卷第１期V o l．３３,N o．１草㊀业㊀科㊀学P R A T A C U L T U R A LS C I E N C E６７Ｇ７４１/２０１６h t t p:∕∕c y k x．l z u．e d u．c nD O I:１０．１１８２９/j．i s s n．１００１Ｇ０６２９．２０１５Ｇ００３８安欢乐,燕翀,徐娜,宋雨阳,李彦忠．３种镰刀菌对小扁豆生长的影响．草业科学,２０１６,３３(１):６７Ｇ７４．A nH L,Y a nC,X uN,S o n g Y Y,L iYZ．E f f e c t s o f t h r e e F u s a r i u m s p p．o n t h e g r o w t ho f l e n t i l i nH u i n i n g C o u n t y,G a n s uP r o v i n c e．P r a t a c u l t u r a l S c i e n c e,２０１６,３３(１):６７Ｇ７４．３种镰刀菌对小扁豆生长的影响安欢乐１,燕翀１,徐娜１,宋雨阳１,李彦忠１,２(１．草地农业生态系统国家重点实验室,兰州大学草地农业科技学院,甘肃兰州７３００２０;２．中国农业科学院草原研究所,内蒙古呼和浩特０１００１０)摘要:小扁豆(L e n s c u l i n a r i s)是甘肃中部地区普遍栽培的小杂粮之一,既是经济作物,又是轮作倒茬和肥地作物.会宁县种植的小扁豆近年来死亡严重,为查明其死亡原因,开展了田间调查与病原物研究.２０１２年,当地小扁豆根腐病的发病率为５８．４％,死亡率为４３．２％,从发病植株的根部分离出的真菌从形态学上鉴定为尖孢镰刀菌(F u s a r i u mo x y s p oＧr u m)㊁锐顶镰刀菌(F．a c u m i n a t u m)和木贼镰刀菌(F．e q u i s e t i),分离率分别为５５％㊁１８％和９％,以I T S为引物扩展真菌的D N A,测序后构建的系统发育树支持以上形态学鉴定结果.接种试验结果显示,此３种镰刀菌均能显著(P＜０．０５)降低植株的根长和干重,其中尖孢镰刀菌的影响最大,其次为木贼镰刀菌,此２种镰刀菌还显著降低植株的鲜重和株高,但３种镰刀菌均未对出苗率和死亡率产生影响(P＞０．０５).在发病田间采集的土壤中播种小扁豆,与灭菌土壤中栽培的植株相比,未灭菌土壤中植株的根长和根干重显著降低.３种镰刀菌对小扁豆菌有致病性,但致病性均不强,干旱可能是导致镰刀菌在田间危害程度加大的主要原因.关键词:小扁豆;镰刀菌;鉴定;致病性测定中图分类号:S５２０．８;S４３５．２㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀文章编号:１００１Ｇ０６２９(２０１６)１Ｇ００６７Ｇ０８∗E f f e c t s o f t h r e eF u s a r i u m s p p．o n t h e g r o w t ho fl e n t i l i nH u i n i n g C o u n t y,G a n s uP r o v i n c eA nH u a nＧl e１,Y a nC h o n g１,X uN a１,S o n g Y uＧy a n g１,L iY a nＧz h o n g１,２(１．C o l l e g e o fP a s t o r a lA g r i c u l t u r eS c i e n c e a n dT e c h n o l o g y,L a n z h o uU n i v e r s i t y,S t a t eK e y L a b o r a t o r y o fG r a s s l a n dA g r oＧe c o s y s t e m s,L a n z h o u７３００２０,C h i n a;２．I n s t i t u t i o no fG r a s s l a n dR e s e a r c ho fC A A S,H o h h o t０１００１０,C h i n a)A b s t r a c t:L e n t i l i s o n e o f t h ew i d e l yp l a n t e d c r o p s i n t h e c e n t e r a r e a s o fG a n s uP r o v i n c e a s e c o n o m i c,r o t a t i o n a n d s o i lＧf e r t i l i z e d p l a n t．H o w e v e r,d e a t ho f l e n t i l i sv e r y s e r i o u s i n H u i n i n g C o u n t y i nr e c e n t y e a r s．T h e f i e l d i n v e s t i g a t i o n,i s o l a t i o na n di d e n t i f i c a t i o no fc a u s a la g e n tw e r ec o n d u c t e dt od e t e r m i n et h er e a s o n so f p l a n t d e a t h．I n２０１２,i n c i d e n c e o f l e n t i l r o o t r o tw a s５８．４％,a n dm o r t a l i t y w a s４３．２％．F u n g i i s o l a t e d f r o mt h e r o o t s o f d i s e a s e d p l a n t sw e r em o r p h o l o g i c a l l y i d e n t i f i e da s F u s a r i u mo x y s p o r u m,F．a c u m i n a t u m a n d F．e q u i s e t i, w h i c hw e r e c o n s i s t e n tw i t h t h e p h y l o g e n e t i c t r e e b a s e d o n I T S s e q u e n c e．I s o l a t i o n f r e q u e n c y o f t h e s e f u n g i w a s ５５％,１８％a n d９％,r e s p e c t i v e l y．I n t h e i n o c u l a t i o n e x p e r i m e n t,t h e r o o t l e n g t h a n d r o o t d r y w e i g h t o f h o s t i nＧo c u l a t e dw i t ha l l３f u n g i s i g n i f i c a n t l y(P＜０．０５)d e c r e a s e d i n w h i c ht h eh o s tw i t h F．o x y s p o r u m d e c r e a s e d m o s t a n d t h eh o s tw i t h F．e q u i s e t i d e c r e a s e dm o r e．T h e f r e s hw e i g h t a n d p l a n th e i g h t o f h o s t i n o c u l a t e dw i t h F．o x y s p o r u m a n d F．e q u i s e t i a l s od e c r e a s e d．H o w e v e r,t h ee m e r g e n c ea n ds u r v i v a l r a t e so fh o s t i n o c u l a t e d w i t ha l l３f u n g iw e r en o t a f f e c t(P＞０．０５)．T h es o i l sw e r ec o l l e c t e df r o ml e n t i l s f i e l d s i n H u i n i n g a s p l a n t s∗收稿日期:２０１５Ｇ０１Ｇ１６㊀㊀接受日期:２０１５Ｇ１１Ｇ０３基金项目:国家自然科学基金(３１２７２４９６);公益性行业(农业)科研专项经费项目(２０１３０３０５７);国家牧草产业技术体系(C A R SＧ３５)第一作者:安欢乐(１９８９Ｇ),女,陕西永寿人,在读硕士生,主要从事植物病理学研究.EＧm a i l:a n h l１３＠l z u．e d u．c n通信作者:李彦忠(１９６９Ｇ),男,甘肃会宁人,教授,博士,主要从事植物病理学研究.EＧm a i l:l i y z h＠l z u．e d u．c n草㊀业㊀科㊀学第３３卷h t t p ://c yk x ．l z u ．e d u ．c n g r o w t hm e d i u m．C o m p a r e d w i t h p l a n t s g r o w ni na u t o c l a v e ds o i l ,r o o t l e n g t ha n dr o o td r y w e i gh to f p l a n t g r o w n i nn o Ｇa u t o c l a v e d s o i l s i g n i f i c a n t l y (P ＜０．０５)d e c r e a s e d ．I nc o n c l u s i o n ,３F u s a r i u m s p e c i e sw e r ew e a k p a t h o g e n i c t o l e n t i l s ．D r o u g h t p o s s i b l ew a s t h em a i n r e a s o n f o r t h e s e F u s a r i u m s p e c i e s c a u s i n g s e r i o u s d e a t h o n l e n t i l s ．K e y wo r d s :L e n s c u l i n a r i s ;F u s a r i u m s p p ．;i d e n t i f i c a t i o n ;p a t h o g e n i c i t y C o r r e s p o n d i n g a u t h o r :L iY a n Ｇz h o n g ㊀E Ｇm a i l :l i y z h ＠l z u ．e d u ．c n ㊀㊀小扁豆(L e n s c u l i n a r i s )又名滨豆㊁鸡眼豆㊁眉豆等,富含蛋白质㊁矿物质㊁纤维素㊁维生素和抗氧化物化合物,栽培历史已有８０００~１２０００年,是许多发展中国家主要的蛋白质来源[１Ｇ２].在我国,小扁豆是小杂粮作物的一种,主要栽培于陕西㊁甘肃㊁宁夏㊁山西㊁内蒙古㊁云南和西藏等省(区)[３].甘肃省会宁县有悠久的种植杂粮作物历史,享有 中国小杂粮之乡 的美称.世界上小扁豆的主要叶部病害有壳二孢叶枯病(A s c o c h yt al e n t i l s )㊁炭疽病(C o l l e t o t r i c u m l i n d e Ｇm u t h i a n u m )㊁葡萄孢灰霉病(B o t r y t i s c i n e r e a )㊁链格孢枯萎病(A l t e r n a r i aa l t e r n a t a )等,小扁豆根腐病也是影响产量的重要病害,其病原菌有立枯丝核菌(R h i z o c t o n i a s o l a n i )㊁齐整小核菌(S c l e r o t i u m r o l fs i i )㊁镰刀菌(F u s a r i u m s p p ．)㊁核盘菌(S c l e r o t i n i a s c l e r o t i o r u m )㊁豌豆根腐丝囊菌霉(A p h a n o m y c e s e u Ｇt e i c h e s )㊁瓜果腐霉(P y t h i u m a ph a n i d e r m a t u m )㊁根串珠霉(T h i e l a v i o ps i sb a s i c o l a )㊁甘薯丝核菌(R h i Ｇz o c t o n i ab a t a t i c o l a )[４Ｇ６].小扁豆生长期间植株死亡,造成较大损失.但对其死亡原因研究较少,其中张彦梅和李敏权[７]于２００７年报道甘肃省定西地区小扁豆死亡的原因为镰刀菌根腐病(F u s a r i u m s p p．),优势种为尖孢镰刀菌(F ．o x y s po r u m ).在甘肃中部地区,豌豆(P i s u ms a Ｇt i v u m )在开花前后大量死亡的情况最早始于２０００前,后来由于病害的发生,各地陆续减少了种植面积,目前已极少种植.近年来,在会宁等甘肃中部地区扁豆死亡的情况逐年加剧,已有不少农民放弃了种植.对于甘肃豌豆死亡的原因,前人分析主要是由腐皮镰孢(F ．s o l a n i )㊁链孢粘帚霉(G l i o c l a d i u m c a t e n u l a t u m )㊁豌豆根腐丝囊菌霉(A ．e u t e i c h e s )㊁根串珠霉㊁立枯丝核菌㊁尖孢镰刀菌(F ．o x y s p o r u m )㊁腐霉(P y t h i u m s p p ．)㊁壳二孢(A s c o c h y t a s p p ．)等病原菌引起的[８Ｇ９].由于我国记录的小扁豆根腐病的病原种类较少,除镰刀菌根腐病之外,其他均未报道.为确定小扁豆死亡的原因是否为病原菌所致,如果是病原菌,是何种病原菌,因此在甘肃会宁开展田间调查与病原菌的研究.１　材料和方法１．１㊀研究地点病害调查与标本采集在甘肃省会宁县翟所乡观音村杨岔社进行,该地属典型黄土高原地区.１．２㊀供试土壤和植物材料用两种土壤培养小扁豆幼苗供接种所用,其一取自甘肃省会宁县小扁豆发病样地,采用五点取样,每点取０―１０c m 的土约５００g ,带回实验室后用２mm 孔径的筛子剔除植物秸秆和大块土石,将细碎的土粒置于冷藏箱４ħ保存备用,其二为购自花市的土壤,按黑壤土㊁腐熟牛粪和植株腐殖质７ʒ２ʒ１的比例混合而成.小扁豆种子为２０１２年在会宁当地采收所得,品种不详.１．３㊀田间调查与标本采集于２０１２年６月于小扁豆结荚中期在研究地按如下方法开展病害调查:选取３块扁豆地,采用 Z 型调查,每块地共调查５个点,每地选１m ２,统计植株总数和死亡植株数,按如下公式计算死亡率:死亡率＝死亡株数调查总株数ˑ１００％.同时在各样点上随机挖取带根的植株１０株,将植株带回室内供分离病原.１．４㊀根腐植株统计与病原分离１．４．１㊀根腐植株统计㊀将带回的小扁豆根部剪下,将根部在自来水下冲洗干净,观察根部是否变色腐烂,有变色者记为发生根腐病的植株,并计算根腐病的发病率:发病率＝发病株数调查总株数ˑ１００％.１．４．２㊀病原分离㊀将洗净的根部,用７０％酒精消毒１m i n ,然后用１％的次氯酸钠消毒３m i n ,再用无菌水洗３次,用灭菌的滤纸吸干表面水分,将其切成０．５c m 长的小段,均匀摆放在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(P D A )上,在２２ħ培养箱中培养４d 后统计组织小块上长出各种真菌的种类及数量,纯化所有分离菌,于第７天再次统计一次,校正首次统计的结果,根据每种菌在组织小块上出现的次数计算其分离率.P D A 培养８６第１期安欢乐㊀等:３种镰刀菌对小扁豆生长的影响h t t p ://c yk x ．l z u ．e d u ．c n 基的制作方法为:称２００g 去皮的土豆,加入１０００m L 蒸馏水,煮沸３０m i n,双层纱布过滤,滤液清液中加入１７g 琼脂粉和２０g 葡萄糖,缓缓加入蒸馏水然后定容１０００m L ,１２１ħ下灭菌３０m i n ,再将培养皿倒入培养皿(９c m )中,每个培养皿中２５m L ,制成平板[１０].１．５㊀菌株鉴定１．５．１㊀形态学鉴定㊀根据菌落和孢子及其产孢结构的形状㊁颜色和大小鉴定菌种[１１].１．５．２㊀分子方法鉴定㊀用真菌D N A 提取试剂盒(型号为D ３１９５Ｇ１)提取３种菌的D N A ,用引物I T S １(A G ＧG A G A G T C G T A A C A A G G T )和I T S ４(T C C T C ＧC G C T T A T T G A T A T G C )进行P C R 扩增,将P C R 产物委托上海生工生物有限公司测序.将测得的序列进行B L A S T 比对并用M E G A ５．１软件系统发育树,确定其与所选的菌种的亲缘关系[１２].１．６㊀分离出真菌的致病性测定１．６．１㊀接种幼苗的准备㊀挑选颗粒饱满的小扁豆种子,经常规表面消毒后摆放在铺有两层灭菌滤纸的培养皿中,每皿摆放１００粒,加无菌水３~５m L ,放置在２５ħ下使之发芽,发芽后用于接种.１．６．２㊀孢子悬浮液的配制㊀将培养２周的分离物每皿加灭菌蒸馏水５m L ,用灭菌的载玻片轻轻刮下孢子,用双层灭菌纱布过滤,将滤液摇匀制成孢子悬浮液,用血球计数板测量孢子的浓度,将孢子浓度调节为１０６m L －１后用于接种之用.１．６．３㊀接种及接种后测定指标㊀采用植物幼苗蘸真菌孢子悬浮液的接种方法,即将小扁豆的幼苗在真菌孢子悬浮液中浸泡３０m i n 后移栽到装有灭菌土壤的纸杯中.共接种３种真菌,每种真菌设５个重复(杯),以幼苗蘸无菌水作为空白对照,对照５个重复(杯).接种后移栽于装有２００g 灭菌土壤的纸杯中,每杯３株,纸杯口径７c m ,底部开孔.接种后将幼苗放置在２２ħ的光照植物培养箱中.６周后观察发病情况,并收获植株,清洗每株植株的根部,测量株高和根长,挑选部分植株用于接种菌的再分离,分离方法同１．４．２.称鲜重后在６５ħ烘箱中烘２４h ,称干重.１．７㊀田间土壤带菌试验将采集于小扁豆死亡田间土壤分成两部分,一部分在１６７ħ的烘箱中灭菌４h 后播种小扁豆,另一部分土壤不经灭菌直接播种小扁豆.设５个重复(纸杯),每重复(纸杯)播种５粒小扁豆种子,播种后管理和测定指标同１．６．３.１．８㊀数据分析采用S P S S１９．０软件对所测数据统计分析,用平均值和标准误表示测定结果,分别对株高和根长,烘干后测定单株干重进行单因素方差分析,并用新复极差法对各测定数据进行多重比较,采用E x c e l ２００３制图.２　结果与分析２．１㊀田间发病症状、发病率与死亡率在田间,小扁豆植株底部的叶片开始退绿变黄,并向上延伸至整个植株(图１A ),发病植株的根部呈红褐色至黑色,根瘤极少(图１B ).大量植株死亡,死亡植株多发生于地块边缘(图１C ,D ).田间根腐病的平均发病率为５８．４％,平均死亡率为４３．２％.２．２㊀病原分离从田间采集的小扁豆的根部主要分离出３种真菌,菌株编号分别为y a n c h １㊁y a n c h ３和y a n c h ２,分离率分别为５５％㊁１８％和９％(图２).２．２．１㊀形态学鉴定㊀根据形态特征初步鉴定分离出的３种真菌均为镰刀菌.y a n c h １在P D A 上生长迅速,菌落灰白,绒状且菌丝中间致密周围稀疏,小型分生孢子数量较多,卵形或肾形,没有隔膜,有厚垣孢子产生.y a n c h ２在P D A 上生长迅速,气生菌丝茂密,初生菌丝白色,随着培养时间的不断延长菌丝颜色逐渐由白色变化为粉红色,大型分生孢子为镰刀形,没有小型分生孢子.y a n c h ３在P D A 上生长迅速,菌丝白色絮状,不形成小型分生孢子;大型分生孢子较为弯曲,顶胞钩状,厚垣孢子团状或链状.根据形态学鉴定,y a n c h １为尖孢镰刀菌,ya n c h ２为锐顶镰刀菌(F ．a c u Ｇm i n a t u m ),y a n c h ３为木贼镰刀菌(F ．e q u i s e t i ).２．２．２㊀分子鉴定㊀将３种镰刀菌的序列与其它已有的镰刀菌的序列用M E G A ５．１进行分析,做系统发育树.系统发育树结果(图３)显示,y a n c h ２与F ．a c u Ｇm i n a t u m 聚在一个枝上,其自展值为８４;ya n c h ３与F ．e qu i s e t i 聚在一个枝上,自展值为９９;y a n c h １与F ．o x y s po r u m 聚在一个枝上,自展值为８２.故根据分子方法鉴定出３种镰刀菌与形态学鉴定的结果相吻合.２．３㊀致病性测定２．３．１㊀３种镰刀菌致病性测定㊀接种３种镰刀菌６周后,与对照相比较,接种的３种镰刀菌的小扁豆植株无退绿变黄,根部并未出现明显的变黑或者变褐等田间症状,但是其植株的高度和根系的形状有所不同.从接种小扁豆植株的根部分离出接种菌,尖孢镰刀菌㊁锐顶镰刀菌㊁木贼镰刀菌的再分离率分别为８３．２％㊁８．４％和６．９％.９６草㊀业㊀科㊀学第３３卷h t t p ://c yk x ．l z u ．e d u ．cn 图１㊀小扁豆田间发病症状和根部观察F i g ．１㊀L e n t i l f i e l d s y m pt o m s a n d r o o t o b s e r v a t i on 图２㊀小扁豆根部分离出真菌F i g ．２㊀F u n gi i s o l a t e d f r o ml e n t i l r o o t s ２．３．２㊀对植株生长的影响㊀尖孢镰刀菌显著降低植株鲜重(P ＜０．０５),其次为木贼镰刀菌,而接种锐顶镰刀菌的植株的鲜重与对照之间差异不显著(P ＞０．０５)(图５).接种３种镰刀菌后,植株的干重显著低于对照.木贼镰刀菌和尖孢镰刀菌均使植株的株高显著降低,而接种锐顶镰刀菌对株高无显著影响.接种３种镰刀菌均显著降低植株的根长,其中尖孢镰刀菌影响最大,其次为木贼镰刀菌,最后为锐顶镰刀菌(图４).２．４㊀病土栽培与灭菌土壤相比,未灭菌土壤植株的根长(图５)㊁根鲜重和根干重(表１)显著(P ＜０．０５)降低,但株高㊁地上鲜重和地上干重未灭菌和灭菌土壤差异不显著.３　讨论与结论国内外已有研究的小扁豆上的镰刀菌有尖孢镰刀菌㊁锐顶镰刀菌㊁木贼镰刀菌㊁燕麦镰刀菌(F ．a v e n a Ｇc e u m )㊁黄色镰刀菌(F ．c u l m o r u m )㊁腐皮镰刀菌㊁串珠镰刀菌７种[７,１３].张彦梅和李敏权[７]曾对甘肃省定西的小扁豆根腐病进行研究,结果显示,其病原菌为尖孢镰刀菌㊁茄镰刀菌㊁串珠镰刀菌和木贼镰刀菌,其中尖孢镰刀菌为优势种,本试验分离的镰刀菌为尖孢镰刀菌㊁锐顶镰刀菌㊁木贼镰刀菌.镰刀菌为土壤习居菌,普遍存在于土壤中,所分离到的镰刀菌与国内外有所不同,故当地是否存在其他镰刀菌尚有待进一步研究.㊀㊀本研究分离出的３种镰刀菌在室内接种试验中均未造成小扁豆死亡,但对小扁豆的株高㊁根长㊁单株鲜重及单株干重都有一定影响.病土栽培试验中,土壤０７第１期安欢乐㊀等:３种镰刀菌对小扁豆生长的影响h t t p ://c yk x ．l z u ．e d u ．c n 中的镰刀菌对小扁豆的根系生长有影响.在根腐病发病率统计时,观察到小扁豆根系较小,几乎观察不到根瘤.试验结果说明当地土壤中的镰刀菌对小扁豆具有侵染力,但致病性较弱,影响了植株的生长却未造成植图３㊀基于小扁豆根部分离出镰刀菌构建的系统发育树F i g ．３㊀P h y l o g e n e t i c t r e e b a s e do n F u s a r i u m s p p．i s o l a t e d f r o ml e n t i l r o o t 注:采用邻接法(n j ),分支处数字为大于５０％B o o t s t r a p 值(１０００次重复).N o t e :N e i g h b o r Ｇj o i n i n g m e t h o dw a s u s e da n d t h eb r a n c hn u m b e rw a s l a r g e r t h a n５０％B o o t s t r a p v a l u e (１０００r e pe a t s )．图４㊀分离出的３种镰刀菌对小扁豆生长的影响F i g．４㊀E f f e c t s o f ３f u s a r i u m s i s o l a t e d t o l e n t i l s g r o w t h 注:不同小写字母表示同一指标不同菌株处理之间差异显著(P ＜０．０５).N o t e :D i f f e r e n t l o w e r c a s e l e t t e r s s h o ws i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e o f t h e s a m e p a r a m e t e r a m o n g d i f f e r e n t f u n gi t r e a t m e n t s a t ０．０５l e v e l ．１７草㊀业㊀科㊀学第３３卷h t t p ://c yk x ．l z u ．e d u ．cn 图５㊀采集田间病土栽培结果F i g ．５㊀T h e r e s u l t o f c u l t i v a t i o n i n f i e l d s o i l w i t h p a t h o ge n 注:不同小写字母表示同一指标不同土壤处理之间差异显著(P ＜０．０５).N o t e :D i f f e r e n tl o w e rc a s el e t t e r ss h o w s i gn i f i c a n td i f f e r e n c eo ft h e s a m e p a r a m e t e r a m o n g di f f e r e n t s o i l t r e a t m e n t s a t ０．０５l e v e l ．株死亡,故田间小扁豆死亡不是镰刀菌单因素引起的,可能还有其他因素的影响.㊀㊀研究[１４]表明,低温㊁干旱㊁高温㊁营养物质缺乏㊁营养物质毒性等都是小扁豆非生物胁迫的主要因素,其中水分和温度被认为是最主要的胁迫因素,包括是过度干旱㊁土壤水分过多㊁温度过低㊁温度过高等[１５].小扁豆适宜于年降水量１５５~４８３mm 的地区[１６Ｇ１７],而会宁县的四季分明,昼夜温差大,夏季炎热高温,日照较强,年平均气温１２．１５ħ,７月份平均气温２４ħ,年降水量仅在３４０mm 左右,且分布不均匀,主要集中在７－９月,年蒸发量却高达１８００mm [１８].据此,增加根部深度可以作为减少干旱胁迫的一种方式[１４].会宁当地６－７月小扁豆处于开花结荚期,消耗水分多,但此时降雨少㊁气温高㊁光照强,可引起小扁豆代谢水分的机能下降.就镰刀菌而言,干旱反而有利于其生长,因为土壤中的镰刀菌属好氧型的,在干燥的土壤环境表１㊀病土对小扁豆生长影响T a b l e １㊀E f f e c t s o f f i l e d s o i l w i t h p a t h o g e n t o l e n t i l s g r o w t h 指标P a r a m e t e r处理T r e a t m e n t对照C K病土S o i lw i t h p a t h o ge n 单株地上鲜重F r e s hw e i g h t of a b o v eg r o u n do f s i n g l e p l a n t /g ０．７２ʃ０．０６０．５９ʃ０．０６n s 单株地上干重D r y w e i gh t o f a b o v e g r o u n do f si n g l e p l a n t /g ０．１８ʃ０．０４０．１７ʃ０．０１n s 单株根系鲜重R o o t f r e s hw e i g h t o f s i n g l e p l a n t /g １．３９ʃ０．１００．５９ʃ０．０６∗单株根系干重R o o t d r y w e i g h t o f s i n g l e p l a n t /g０．１４ʃ０．０１０．１０ʃ０．０１∗注:∗表示处理间差异显著(P ＜０．０５),n s 表示处理间差异不显著.N o t e :V a l u e sw i t h s y m b o l∗i n t a b l e s h o ws i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e a t ０．０５l e v e l a n dn s i s n o t s i gn i f i c a n t d i f f e r e n c e ．中生长比较活跃,土壤干燥比土壤湿润更有利于该菌生存[１９].S t o v e r [２０]研究６种镰刀菌最适合生长的土壤条件为土壤水分饱和度的１５％.在会宁小扁豆根部的镰刀菌中,尖孢镰刀菌为优势种,该菌是世界范围内小扁豆萎蔫病的主要菌种,可发生于小扁豆的整个生长时期.据报道,２０~２５ħ的土壤温度有利于该菌生长,但较强光照和较高温度增强了植株的蒸腾作用,故夏季高温是决定症状的关键因素[２１].㊀㊀镰刀菌不仅影响小扁豆植株的生长,而且影响根瘤菌的形成,使病株根部的根瘤数量下降,从而影响植株的生长和产量[２２Ｇ２３].研究表明,根瘤菌通过其固氮作用㊁根瘤菌和苜蓿共生免疫作用㊁对植物自身组成变换或其生理应答机制进行改变从而提高苜蓿的抗旱㊁耐盐㊁抗高温及非机械损伤等非生物胁迫能力[２４].本试验观察到小扁豆根系上根瘤菌的数量很少,故根瘤菌的不正常生长影响小扁豆抗逆性和氮素的固定.根瘤菌可以提供小扁豆生长的３/４的氮素,也通过共生作用能增强植物抗逆性[２５],根瘤菌结瘤受到阻碍,小扁豆的氮素供应不足并且抗逆性减弱,影响小扁豆有机物的积累及根系的生长,进而影响其在干旱条件下吸收深层土壤的水分,同时利于病原菌的侵入.本研究对甘肃省会宁县小扁豆的死亡进行调查研究结果显示,所分离到的３种镰刀菌对小扁豆致病性弱,对小扁豆生长有影响,病土栽培试验及小扁豆根部根瘤菌的生长状况进一步印证镰刀菌对小扁豆根部有影响,但是镰刀菌并未造成小扁豆死亡.会宁当地气候条件适宜土壤中镰刀菌的生长,对小扁豆的生长存在胁迫因素,同时镰刀菌的生长抑制根瘤菌的生长,从而减弱了植株的抗逆性.病原菌和干旱共同作用下小扁豆遇到高温天气可能是导致当地小扁豆根腐病发生的原因,这还需要进一步的研究验证.２７第１期安欢乐㊀等:３种镰刀菌对小扁豆生长的影响h t t p ://c yk x ．l z u ．e d u ．c n 参考文献(R e f e r e n c e s)[１]㊀T a y l o rP ,L i n d b e c kK ,C h e n W ,F o r dR．L e n t i lD i s e a s e s ．G e r m a n y :S p r i n ge rN e t h e r l a n d s ,２００７:２９１Ｇ３１３．[２]㊀陈喜明,高克昌,韩云丽,赵随堂,赵壮芳,赵力．小扁豆特征特性及高产栽培技术．中国农业信息,２０１１(４):３１Ｇ３１．C h e nX M ,G a oKC ,H a nYL ,Z h a oST ,Z h a oZF ,Z h a oL ．L e n t i l s c h a r a c t e r i s t i c s a n dh i g h y i e l dc u l t i v a t i o n t e c h n i qu e s ．C h i n a A gr i c u l t u r a l I n f o r m a t i o n ,２０１１(４):３１Ｇ３１．(i nC h i n e s e )[３]㊀叶静渊．«马首农言»中的＂扁豆＂考辨．中国农史,１９９５,１４(１):１３Ｇ１８．Y e JY．S t u d y L e n t i l s i n «M aS h o u n o n g w o r d s »．A g r i c u l t u r eH i s t o r y ofC h i n a ,１９９５,１４(１):１３Ｇ１８．(i nC h i n e s e )[４]㊀B e n i w a l S ,B a y a aB ,W e i g a n dS ,M a k k o u kK ,S a x e n a M．F i e l dG u i d e t oL e n t i lD i s e a s e sa n dI n s e c tP e s t s ．A l e p p o :I n t e r n a t i o n a l C e n t e r f o rA g r i c u l t u r a lR e s e a r c h i n t h eD r y Ar e a s ,１９９３:５Ｇ１０６．[５]㊀D a t t aS ,C h o u d h a r y R ,S h a m i m M ,S i n g hR ,D h a rV．M o l e c u l a rd i v e r s i t y i n i n d i a n i s o l a t e so f F u s a r i u mo x y s p o r u m f ．s p ．l e n t i s i n c i t i n g w i l t d i s e a s e i n l e n t i l (L e n s c u l i n a r i s M e d i k )．A f r i c a n J o u r n a l o fB i o t e c h n o l o g y ,２０１１,１０(３８):７３１４Ｇ７３２３．[６]㊀J e r m y n W A．G u i d e l i n e s f o rG r o w i n g L e n t i l s ．L i n c o l n :C r o p Re s e a r c hD i v i s i o n ,１９８２．[７]㊀张彦梅,李敏权．甘肃定西小扁豆镰刀菌根腐病病原鉴定及致病性测定．杂粮作物,２００７,２７(３):２３５Ｇ２３７．Z h a n g Y M ,L iM Q．I d e n t i f i c a t i o na n d p a t h o g e n i c i t y t e s t o f p a t h o g e n i co f l e n t i l r o o t d i e a s e i nD i n gx i o fG a n s uP r o v i n c e ．R a i n F e dC r o ps ,２００７,２７(３):２３５Ｇ２３７．(i nC h i n e s e )[８]㊀王华．定西豌豆根腐病的发生流行与综防意见．甘肃农业科技,１９９５(６):３２Ｇ３３．W a n g H．E p i d e m i c a n d i n t e g r a t e d c o n t r o l o p i n i o n o f p e a r o o t r o t i nD i n g x i ．G a n s uA g r i c u l t u r e S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y,１９９５(６):３２Ｇ３３．(i nC h i n e s e)[９]㊀伍克俊,谢正团,李秀君．甘肃中部地区豌豆根腐病病原研究．甘肃农业大学学报,１９９２,２７(３):２２５Ｇ２３１．W uKJ ,X i e ZT ,L i XJ ．S t u d y o n t h e p a t h o g e n s o f r o o t r o t o f p e a i n t h e c e n t r a l r e g i o n o fG a n s uP r o v i n c e ．J o u r n a l o fG a n s uA gＧr i c u l t u r a lU n i v e r s i t y,１９９２,２７(３):２２５Ｇ２３１．(i nC h i n e s e )[１０]㊀方中达．植病研究方法．北京:中国农业出版,１９９８:４６．F a n g ZD．M e t h o d o l o g y f o rP l a n tP a t h o l o g y ．B e i j i n g :C h i n aA gr i c u l t u r a l P r e s s ,１９９８:４６．(i nC h i n e s e )[１１]㊀J o h nFL ,S u mm e r e l l BA．T h e F u s a r i u m L a b o r a t o r y M a n u a l ．E n g l a n d :B l a c k w e l l P u b l i s h i n g P r o f e s s i o n a l ,２００６:２７４Ｇ２７５．[１２]㊀龚弘强．西藏地区青稞籽粒镰孢属真菌及其致病性研究．西安:西北农林科技大学硕士学位论文,２００６．G o n g H X．S t u d i e s o n i s o l a t i o n a n d p a t h o g e n i c i t y o f F u s a r i u m s s p ．f r o mh i g h l a n db a r l e y ke r n e l s i nT i b e t ．M a s t e rT h e s i s ．Y a n Ｇg l i n g :N o r t h w e s tA g r i c u l t u r e a n dF o r e s t r y U n i v e r s i t y,２００６．(i nC h i n e s e )[１３]㊀F l e t c h e r J ,B r o a d h u r s tP ,B a n s a lR．F u s a r i u ma v e n a c e u m :A p a t h o g e no f l e n t i l i nN e wZ e a l a n d ．N e wZ e a l a n dJ o u r n a l o fC r o p a n dH o r t i c u l t u r a l S c i e n c e ,１９９１,１９(２):２０７Ｇ２１０．[１４]㊀M u e h l b a u e rF J ,C h o S ,S a r k e rA ,M c P h e eKE ,C o y n eCJ ,R a j e s hP ,F o r dR．A p p l i c a t i o n o f b i o t e c h n o l o g y i n b r e e d i n g l e n t i l f o r r e s i s t a n c e t ob i o t i c a n da b i o t i c s t r e s s ．E u p h y t i c a ,２００６,１４７(１Ｇ２):１４９Ｇ１６５．[１５]㊀W e b bC ,H a w t i nG．L e n t i l s ．F a r n h a m R o y a l :C o mm o n w e a l t hA gr i c u l t u r a l B u r e a u x ,１９８１:２１６．[１６]㊀R a t h o r eR ,K h a n d w eR ,K h a n d w eN ,S i n g hP ．E f f e c t o f i r r i g a t i o ns c h e d u l e s ,p h o s p h o r u s l e v e l sa n d p h o s p h a t es o l u b l i z i n g o r Ｇg a n i s mo n l e n t i l yi e l d ．L e n s ,１９９２,１９:１７Ｇ１９．[１７]㊀S a r a fCS ,B a i t h a ．E f f e c t o f v a r y i n g s o i lm o i s t u r e r e g i m e s a n d p h o s p h o r u s l e v e l s o n g r o w t h ,y i e l d a n d c o n s u m p t i v e u s e o fw a t e r b yl e n t i l s p l a n t e do nd i f f e r e n t d a t e su n d e r l l e l h i c o n d i t i o n ．L E N SN e w s l e t t e r ,１９７９(６):１Ｇ７．[１８]㊀李曼．气候变化对会宁县粮食作物单产的影响研究．兰州:兰州大学硕士学位论文,２０１１．L iM．T h e i m p a c t o f c l i m a t e c h a n g e o n c e r e a l c r o p u n i t y i e l d i nH u i n i n g ．M a s t e rT h e s i s ．L a n z h o u :L a n z h o uU n i v e r s i t y,２０１１．(i n C h i n e s e)[１９]㊀C o o kR ,P a p e n d i c kR．I n f l u e n c e o fw a t e r p o t e n t i a l o f s o i l s a n d p l a n t s o n r o o t d i s e a s e ．A n n u a l R e v i e wo f P h y t o p a t h o l o g y ,１９７２,１０(１):３４９Ｇ３７４．[２０]㊀S t o v e rR．T h e e f f e c t o f s o i lm o i s t u r e o n F u s a r i u m s p e c i e s ．C a n a d i a n J o u r n a l o fB o t a n y,１９５３,３１(５):６９３Ｇ６９７．[２１]㊀S t o i l o v aT ,C h a v d a r o vP ．E v a l u a t i o no f l e n t i l g e r m p l a s mf o r d i s e a s e r e s i s t a n c e t oF u s a r i u m w i l t (F u s a r i u mo x y s p o r u m f ．s p ．l e n t i s )．J o u r n a l o fC e n t r a l E u r o p e a nA g r i c u l t u r e ,２００６,７(１):１２１Ｇ１２６．[２２]㊀H w a n g S ,H o w a r dR ,C h a n g K ,P a r kB ,B u r n e t tP ．E t i o l o g y a n ds e v e r i t y o f f u s a r i u mr o o t r o to f l e n t i l i n A l b e r t a ．C a n a d i a n J o u r n a l o fP l a n tP a t h o l o g y ,１９９４,１６(４):２９５Ｇ３０３．[２３]㊀H w a n g S ,G o s s e nB ,T u r n b u l l G ,C h a n g K ,H o w a r dR ,T h o m a sA．E f f e c t o f t e m p e r a t u r e ,s e e d i n g d a t e ,f u n gi c i d e s e e d t r e a t m e n t a n d i n o c u l a t i o nw i t h F u s a r i u ma v e n a c e u m o n s e e d l i n g s u r v i v a l ,r o o t r o t s e v e r i t y an d y i e l do f l e n t i l ．C a n a d i a nJ o u r n a l o fP l a n t ３７草㊀业㊀科㊀学第３３卷h t t p ://c yk x ．l z u ．e d u ．c n S c i e n c e ,２０００,８０(４):８９９Ｇ９０７．[２４]㊀杨培志．紫花苜蓿根瘤菌共生对干旱及盐胁迫的响应机制研究．杨凌:西北农林科技大学博士学位论文,２０１２．Y a n g PZ ．M e c h a n i s mI n v o l v e d i nd r o u g h t /d a l t t o l o r a n c e i m p r o v e m e n t i n a n f a l f a d u e t o s ym b i o t i c i n t e r a c t i o nw i t h r h i z o b i u m．P h DT h e s i s ．Y a n g l i n g :N o r t h w e s tA g r i c u l t u r e a n dF o r e s t r y U n i v e r s i t y,２０１２(i nC h i n e s e )[２５]㊀T i c k o o J ,S h a r m aB ,M i s h r aS ,D i k s h i tH．L e n t i l (L e n s c u l i n a r i s )i n I n d i a :P r e s e n t s t a t u s a n d f u t u r e p e r s pe c t i v e s ．I n d i a n J o u r Ｇn a l o fA gr i c u l t u r a l S c i e n c e ,２００５,７５(９):５３９Ｇ５６２．(责任编辑㊀王芳)２０１５年１２月国内市场主要畜产品与饲料价格分析２０１５年１２月猪肉价格自９月份以来持续下跌后首次小幅度回升,牛肉价格自９月份以来持续上涨,而羊肉价格受到地区旱情和突发的小反刍兽疫影响自４月份以来持续下跌.受美联储加息的影响,大豆价格自８月份以来持续下跌后首次小幅度回升;同时受到阿根廷豆粕出口关税下降的影响,豆粕价格仍持续下降.由于政府通过加大对玉米淀粉加工企业的补贴力度来促进玉米消费,使得玉米价格自９月份以来持续下跌后首次上涨.与２０１４年同期相比,猪肉㊁牛肉价格分别上涨２２．２３％和１．５９％,羊肉㊁鸡肉㊁鸡蛋㊁玉米㊁大豆㊁豆粕和棉粕价格分别下降１３．３０％㊁０．２８％㊁１７．６４％㊁１５．４６％㊁２．４３％㊁２２．３８％和９．２５％.一㊁猪肉㊁牛肉和鸡肉价格小幅度上涨,羊肉价格持续下跌;仅羊肉价格为东部地区最高,其它畜产品价格均为西部地区最高１２月份猪肉㊁牛肉和鸡肉价格分别为２２．７５㊁５５．９９和１６．１１元 k g －１,环比分别上涨０．５９％㊁０．２７％和３．２９％;从区域分析,猪肉㊁牛肉和鸡肉均以西部地区最高,其中,牛肉价格从东向西依次升高,猪肉和鸡肉价格则以中部地区最低,猪肉价格西部地区分别高于东部和中部０．６６％和５．５３％,牛肉价格西部地区分别高于东部和中部３．８５％和０．２２％,鸡肉价格西部地区分别高于东部和中部２１．２１％和３２．９０％.羊肉和鸡蛋价格分别为４６．９８和８．１７元 k g －１,环比分别下降０．６９％和１１．６６％;从区域分析,鸡蛋价格区域差异较小,羊肉价格东部地区分别高于中部和西部１．５５％和９．４３％,鸡蛋价格西部地区分别高于东部和中部３．０９％和１．３０％.二㊁大豆和玉米价格小幅上涨,豆粕和棉粕价格持续下降;大豆㊁玉米和棉粕价格从东向西依次下降,而豆粕价格则相反１２月份玉米和大豆价格分别为２０１０．１２和４０５３．１３元 t －１,环比分别上涨２．３７％和０．８５％;从区域分析,玉米价格３个区域均小幅度上涨且区域差异较小,玉米价格东部地区分别高于中部和西部１．９５％和５．０２％,大豆价格东部地区分别高于中部和西部４．０９％和９．６６％.豆粕和棉粕价格分别为２７５８．７７和２００５．０３元 t－１,环比分别下降４．９４％和４．９０％;从区域分析,两者的价格在３个区域均下降且西部地区下降幅度较大,豆粕价格西部地区分别高于东部和中部８．４６％和１．７９％,棉粕价格东部地区分别高于中部和西部５．１３％和１０．８４％.图１㊀２０１５年１２月国内市场主要畜产品与饲料价格数据来源:猪肉㊁牛肉㊁羊肉㊁鸡肉和鸡蛋h t t p ://p f s c n e w．a g r i ．g o v ．c n /;大豆㊁大豆和豆粕:h t t p ://w w w．z h u w a n g ．c c /,h t t p ://w w w．p i go l ．c n /;棉粕h t Ｇt p ://w w w．f e e d t r a d e ．c o m．c n /,h t t p ://w w w．c h i n a f e e d ．o r g．c n /.(兰州大学草地农业科技学院㊀王春梅整理)４７。